JP2002338598A - ローヤルゼリーの鮮度の指標物質 - Google Patents
ローヤルゼリーの鮮度の指標物質Info
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- JP2002338598A JP2002338598A JP2001145874A JP2001145874A JP2002338598A JP 2002338598 A JP2002338598 A JP 2002338598A JP 2001145874 A JP2001145874 A JP 2001145874A JP 2001145874 A JP2001145874 A JP 2001145874A JP 2002338598 A JP2002338598 A JP 2002338598A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】本発明は、ローヤルゼリーの鮮度を明らかにす
る指標物質を提供することを課題とする。 【解決手段】健康食品などに配合されるローヤルゼリー
について、ロット毎の有効性の度合いや自身の劣化の基
準となる鮮度の指標物質の策定が望まれており、本発明
によるとローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質を鮮度の指標物質とし、該分子量約３５
０キロダルトンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総蛋白質
量あたりに占める割合が、３５重量％以上であることを
鮮度の指標とする。
る指標物質を提供することを課題とする。 【解決手段】健康食品などに配合されるローヤルゼリー
について、ロット毎の有効性の度合いや自身の劣化の基
準となる鮮度の指標物質の策定が望まれており、本発明
によるとローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質を鮮度の指標物質とし、該分子量約３５
０キロダルトンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総蛋白質
量あたりに占める割合が、３５重量％以上であることを
鮮度の指標とする。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ローヤルゼリーの
鮮度の指標物質に関する。
鮮度の指標物質に関する。
【０００２】
【０００３】ローヤルゼリーは、滋養強壮作用を有する
素材として知られており、これを主成分とした健康食品
などが広く販売されているが、その生理活性の本体全て
が未だ決定されておらず、その為、その生理活性には、
ロット差が大きく、活性値としてコントロールされてい
ないのが現状であった。何故なら、天然物質であるた
め、内容成分の構成にバラツキがある場合があり、その
有効成分が正確に配合されているかどうかが問題となっ
ている。特に、ローヤルゼリーの様に、その有効性が如
実に認められ、それ自身が複数の成分からなるものは、
どの物質が鮮度の指標として、有効性や品質を分析・評
価するかを決めるのが困難である。従って、製剤や品質
の安定性の面で特に、健康食品などに配合されるローヤ
ルゼリーについて、ロット毎の有効性の度合いや自身の
劣化の基準となる鮮度の指標物質の策定が望まれてい
た。
素材として知られており、これを主成分とした健康食品
などが広く販売されているが、その生理活性の本体全て
が未だ決定されておらず、その為、その生理活性には、
ロット差が大きく、活性値としてコントロールされてい
ないのが現状であった。何故なら、天然物質であるた
め、内容成分の構成にバラツキがある場合があり、その
有効成分が正確に配合されているかどうかが問題となっ
ている。特に、ローヤルゼリーの様に、その有効性が如
実に認められ、それ自身が複数の成分からなるものは、
どの物質が鮮度の指標として、有効性や品質を分析・評
価するかを決めるのが困難である。従って、製剤や品質
の安定性の面で特に、健康食品などに配合されるローヤ
ルゼリーについて、ロット毎の有効性の度合いや自身の
劣化の基準となる鮮度の指標物質の策定が望まれてい
た。
【０００４】一方、ローヤルゼリー中に、１）ローヤル
ゼリー中のタンパク質の非変性ポリアクリルアミドゲル
電気泳動において単一バンドを形成する、２）ト−ソー
株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷ（7.5×30ｃｍ）
をカラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリウム、０．
０５％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ
７．０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／ｍｉｎ、カ
ラム温度を３５℃に設定し、２８０ｎｍの吸光度で検出
する高速液体クロマトグラフィーにおいて、保持時間１
９〜２１分にピークを有する蛋白質であり、ゲル濾過法
により測定される分子量が約３５０キロダルトンである
タンパク質は、熱に弱く分解し、それに伴いローヤルゼ
リーの種々の生理活性が低下することも知られていなか
った。更に、その分子量約３５０キロダルトンタンパク
質がローヤルゼリーの鮮度の指標になることも知られて
いなかった。
ゼリー中のタンパク質の非変性ポリアクリルアミドゲル
電気泳動において単一バンドを形成する、２）ト−ソー
株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷ（7.5×30ｃｍ）
をカラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリウム、０．
０５％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ
７．０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／ｍｉｎ、カ
ラム温度を３５℃に設定し、２８０ｎｍの吸光度で検出
する高速液体クロマトグラフィーにおいて、保持時間１
９〜２１分にピークを有する蛋白質であり、ゲル濾過法
により測定される分子量が約３５０キロダルトンである
タンパク質は、熱に弱く分解し、それに伴いローヤルゼ
リーの種々の生理活性が低下することも知られていなか
った。更に、その分子量約３５０キロダルトンタンパク
質がローヤルゼリーの鮮度の指標になることも知られて
いなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような
状況をふまえて為されたものであり、ローヤルゼリーの
鮮度の指標物質を提供することを課題とする。
状況をふまえて為されたものであり、ローヤルゼリーの
鮮度の指標物質を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題の解決手段】この様な状況に鑑みて、本発明者ら
は鋭意研究努力を重ねた結果、ローヤルゼリー中の鮮度
の指標物質が分子量約３５０キロダルトンタンパク質で
あり、且つ該タンパク質が分解することによりローヤル
ゼリーの種々の生理活性が低下することを見出し、発明
を完成させるに至った。該タンパク質について、以後、
単に「３５０キロダルトンのタンパク質」或いは「分子
量３５０キロダルトンタンパク質」と表現することがあ
る。即ち、本発明は、次に示す技術に関するものであ
る。 （１）ローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルトン
のタンパク質を指標とする事を特徴とする、ローヤルゼ
リーの鮮度の指標物質。 （２）分子量約３５０キロダルトンタンパク質が、下記
に示す性質を有するものであることを特徴とする、請求
項１記載のローヤルゼリーの鮮度の指標物質。１）ロー
ヤルゼリー中のタンパク質が非変性ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動において単一バンドを形成する。２）前記
蛋白質が、ト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００Ｓ
Ｗ（7.5×30ｃｍ）をカラムとして用いて、０．３Ｍ塩
化ナトリウム、０．０５％アジ化ナトリウム含有０．１
Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７．０）を展開液とし、流速を０．
３ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度を３５℃に設定し、２８０
ｎｍの吸光度で検出する高速液体クロマトグラフィーに
おいて、保持時間１９〜２１分にピークを有する蛋白質
であり、ゲル濾過法により測定される分子量が約３５０
キロダルトンである。 （３）指標物質が、ローヤルゼリーの鮮度を示すことを
特徴とする、（１）又は（２）に記載のローヤルゼリー
の鮮度の指標物質。 （４）（１）〜（３）の何れか一項に記載のローヤルゼ
リーの鮮度の指標物質である分子量約３５０キロダルト
ンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総蛋白質量あたりに占
める割合が、３５重量％以上であることを特徴とする、
ローヤルゼリーの鮮度の指標物質。 以下、本発明について、実施の形態を中心に説明を加え
る。
は鋭意研究努力を重ねた結果、ローヤルゼリー中の鮮度
の指標物質が分子量約３５０キロダルトンタンパク質で
あり、且つ該タンパク質が分解することによりローヤル
ゼリーの種々の生理活性が低下することを見出し、発明
を完成させるに至った。該タンパク質について、以後、
単に「３５０キロダルトンのタンパク質」或いは「分子
量３５０キロダルトンタンパク質」と表現することがあ
る。即ち、本発明は、次に示す技術に関するものであ
る。 （１）ローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルトン
のタンパク質を指標とする事を特徴とする、ローヤルゼ
リーの鮮度の指標物質。 （２）分子量約３５０キロダルトンタンパク質が、下記
に示す性質を有するものであることを特徴とする、請求
項１記載のローヤルゼリーの鮮度の指標物質。１）ロー
ヤルゼリー中のタンパク質が非変性ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動において単一バンドを形成する。２）前記
蛋白質が、ト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００Ｓ
Ｗ（7.5×30ｃｍ）をカラムとして用いて、０．３Ｍ塩
化ナトリウム、０．０５％アジ化ナトリウム含有０．１
Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７．０）を展開液とし、流速を０．
３ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度を３５℃に設定し、２８０
ｎｍの吸光度で検出する高速液体クロマトグラフィーに
おいて、保持時間１９〜２１分にピークを有する蛋白質
であり、ゲル濾過法により測定される分子量が約３５０
キロダルトンである。 （３）指標物質が、ローヤルゼリーの鮮度を示すことを
特徴とする、（１）又は（２）に記載のローヤルゼリー
の鮮度の指標物質。 （４）（１）〜（３）の何れか一項に記載のローヤルゼ
リーの鮮度の指標物質である分子量約３５０キロダルト
ンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総蛋白質量あたりに占
める割合が、３５重量％以上であることを特徴とする、
ローヤルゼリーの鮮度の指標物質。 以下、本発明について、実施の形態を中心に説明を加え
る。
【０００７】
【発明の実施の形態】（１）本発明の組成物の必須成分
であるローヤルゼリー 本発明の組成物は、ローヤルゼリーを必須成分とするこ
とを特徴とする。ローヤルゼリーの化学的組成は、生産
地により、多少の差異はあるが、水分６５〜７０％、タ
ンパク質１５〜２０％、炭水化物１０〜１５％、脂肪
１．７〜６％、灰分０．７〜２％含むとされている。ロ
ーヤルゼリーの生物学的・薬理学的作用については、老
化予防作用、酵素作用、抗菌作用、抗腫瘍作用、血液・
循環器に対する作用などが知られている。本発明のロー
ヤルゼリーは、分子量約３５０キロダルトンのタンパク
質のローヤルゼリー中総蛋白質量あたりに占める割合
が、３５重量％以上であることを特徴とする。ローヤル
ゼリー中の蛋白質は、熱に対して不安定であり、ほとん
どの蛋白質が分解する。その中でもこの分子量約３５０
キロダルトンのタンパク質は比較的安定に存在するが、
高温に曝されると該蛋白質も分解されてくる。該蛋白質
が分解される時にはローヤルゼリー中の殆どの蛋白質が
分解されており、ローヤルゼリー中の該蛋白質の分解は
ローヤルゼリーの完全な変性や劣化につながる。また、
ローヤルゼリー中での該蛋白質の含有量が減少すると、
ローヤルゼリーの種々の生理活性が低下する。ローヤル
ゼリーの生理活性として、例えば、限界運動量増強作
用、肝細胞増殖促進作用、血中アンモニア濃度抑制作
用、血中乳酸蓄積抑制作用などの活性を発現することを
我々は見出している。ここで、この該タンパク質の含有
量であるが、前記効果を十分に発揮する為には、分子量
約３５０キロダルトンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総
蛋白質量あたりに占める割合が、少なくとも３５重量％
以上含んでいることが好ましい。このタンパク質はＧＰ
Ｃカラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによって
定量する事ができる。即ち、該指標物質の多少により、
ローヤルゼリーの効果の程度がわかる。更に、ローヤル
ゼリーを採取直後より、経時的に保存し、この指標物質
を定量した場合、この指標物質の含有量は、特に５０℃
の高温で単調に減少し、それに伴い、上記したローヤル
ゼリーの種々の生理活性も同様に減少するため、分子量
約３５０キロダルトンのタンパク質はローヤルゼリーの
鮮度の指標物質であることがわかる。
であるローヤルゼリー 本発明の組成物は、ローヤルゼリーを必須成分とするこ
とを特徴とする。ローヤルゼリーの化学的組成は、生産
地により、多少の差異はあるが、水分６５〜７０％、タ
ンパク質１５〜２０％、炭水化物１０〜１５％、脂肪
１．７〜６％、灰分０．７〜２％含むとされている。ロ
ーヤルゼリーの生物学的・薬理学的作用については、老
化予防作用、酵素作用、抗菌作用、抗腫瘍作用、血液・
循環器に対する作用などが知られている。本発明のロー
ヤルゼリーは、分子量約３５０キロダルトンのタンパク
質のローヤルゼリー中総蛋白質量あたりに占める割合
が、３５重量％以上であることを特徴とする。ローヤル
ゼリー中の蛋白質は、熱に対して不安定であり、ほとん
どの蛋白質が分解する。その中でもこの分子量約３５０
キロダルトンのタンパク質は比較的安定に存在するが、
高温に曝されると該蛋白質も分解されてくる。該蛋白質
が分解される時にはローヤルゼリー中の殆どの蛋白質が
分解されており、ローヤルゼリー中の該蛋白質の分解は
ローヤルゼリーの完全な変性や劣化につながる。また、
ローヤルゼリー中での該蛋白質の含有量が減少すると、
ローヤルゼリーの種々の生理活性が低下する。ローヤル
ゼリーの生理活性として、例えば、限界運動量増強作
用、肝細胞増殖促進作用、血中アンモニア濃度抑制作
用、血中乳酸蓄積抑制作用などの活性を発現することを
我々は見出している。ここで、この該タンパク質の含有
量であるが、前記効果を十分に発揮する為には、分子量
約３５０キロダルトンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総
蛋白質量あたりに占める割合が、少なくとも３５重量％
以上含んでいることが好ましい。このタンパク質はＧＰ
Ｃカラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによって
定量する事ができる。即ち、該指標物質の多少により、
ローヤルゼリーの効果の程度がわかる。更に、ローヤル
ゼリーを採取直後より、経時的に保存し、この指標物質
を定量した場合、この指標物質の含有量は、特に５０℃
の高温で単調に減少し、それに伴い、上記したローヤル
ゼリーの種々の生理活性も同様に減少するため、分子量
約３５０キロダルトンのタンパク質はローヤルゼリーの
鮮度の指標物質であることがわかる。
【０００８】（２）高速液体クロマトグラフィーによる
ローヤルゼリーの鮮度の指標物質の分析 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、高速液体クロマトグラフィーにより
特定できることを特徴とする。上記の指標物質は、高速
液体クロマトグラフィーによるゲル濾過でも識別・定量
することが出来る。従って、この様な分析結果をもっ
て、品質管理や効果の鑑別・評価に使用することもでき
る。かかるゲル濾過分析は、通常に知られている方法に
従って行えば良く、この様な好ましい例としては、例え
ば、ト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷをカ
ラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリウム、０．０５
％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７．
０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／ｍｉｎ、カラム
温度を３５℃に設定し、２８０ｎｍの吸光度で検出した
結果、鮮度の指標タンパク質量を求めることができる。
この分析条件下で、上記指標タンパク質は、保持時間１
９〜２１分にピークとして現れる（電気泳動で検出され
る蛋白質との同一性を確認）。また、既知分子量のゲル
濾過分析の結果より、上記指標物質の分子量は、約３５
０キロダルトンと確定された。
ローヤルゼリーの鮮度の指標物質の分析 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、高速液体クロマトグラフィーにより
特定できることを特徴とする。上記の指標物質は、高速
液体クロマトグラフィーによるゲル濾過でも識別・定量
することが出来る。従って、この様な分析結果をもっ
て、品質管理や効果の鑑別・評価に使用することもでき
る。かかるゲル濾過分析は、通常に知られている方法に
従って行えば良く、この様な好ましい例としては、例え
ば、ト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷをカ
ラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリウム、０．０５
％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７．
０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／ｍｉｎ、カラム
温度を３５℃に設定し、２８０ｎｍの吸光度で検出した
結果、鮮度の指標タンパク質量を求めることができる。
この分析条件下で、上記指標タンパク質は、保持時間１
９〜２１分にピークとして現れる（電気泳動で検出され
る蛋白質との同一性を確認）。また、既知分子量のゲル
濾過分析の結果より、上記指標物質の分子量は、約３５
０キロダルトンと確定された。
【０００９】（３）陰イオン交換クロマトグラフィーに
よるローヤルゼリーの350キロダルトン蛋白質の指標物
質の分離精製 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、陰イオン交換クロマトグラフィーに
より精製することができる。生ローヤルゼリーを蒸留水
でに溶解し、その後、50mMのリン酸バッファー（pH6.
2）で透析を行う。その溶液は20000×ｇで20分間4℃で
遠心分離し、その上清を粗ローヤルゼリ蛋白質溶液とし
た。その粗ローヤルゼリ蛋白質溶液をＤＥＡＥーＴｏｙ
ｏｐｅａｒｌ６５０Ｍをカラムとして用いて、50ｍＭリ
ン酸緩衝液（ｐＨ6．2）を展開液Ａ、50ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ6．2）と0.3ＭＮａＣｌを展開液Ｂとしてグラ
ジェントにより、２８０ｎｍの吸光度で検出し、6.0ml
／チューブで分画したフラクション70?110に分子量350
キロダルトンの蛋白質分画を分離精製することができ
る。また、既知分子量のゲル濾過分析の結果より、上記
タンパク質は、分子量約３５０キロダルトンタンパク質
であると確定された（米倉ら、ローヤルゼリーの蛋白質
の特徴と機能 ミツバチ科学、第19巻第1号、第15-22
頁、1998年）。
よるローヤルゼリーの350キロダルトン蛋白質の指標物
質の分離精製 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、陰イオン交換クロマトグラフィーに
より精製することができる。生ローヤルゼリーを蒸留水
でに溶解し、その後、50mMのリン酸バッファー（pH6.
2）で透析を行う。その溶液は20000×ｇで20分間4℃で
遠心分離し、その上清を粗ローヤルゼリ蛋白質溶液とし
た。その粗ローヤルゼリ蛋白質溶液をＤＥＡＥーＴｏｙ
ｏｐｅａｒｌ６５０Ｍをカラムとして用いて、50ｍＭリ
ン酸緩衝液（ｐＨ6．2）を展開液Ａ、50ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ6．2）と0.3ＭＮａＣｌを展開液Ｂとしてグラ
ジェントにより、２８０ｎｍの吸光度で検出し、6.0ml
／チューブで分画したフラクション70?110に分子量350
キロダルトンの蛋白質分画を分離精製することができ
る。また、既知分子量のゲル濾過分析の結果より、上記
タンパク質は、分子量約３５０キロダルトンタンパク質
であると確定された（米倉ら、ローヤルゼリーの蛋白質
の特徴と機能 ミツバチ科学、第19巻第1号、第15-22
頁、1998年）。
【００１０】（４）電気泳動によるローヤルゼリー中の
分子量約３５０キロダルトンのタンパク質の定性方法 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、電気泳動によりタンパク質の構成を
分析し、タンパク質を特定することを特徴とする。まず
非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動の方法として
は、特に限定されないが、好ましい方法としては、水溶
性ローヤルゼリータンパク質（3％ローヤルゼリー水溶
液（Ｗ／Ｖ））をポリアクリルアミドゲル（１０％均
一）にて、電流２０ｍＡで電気泳動し、クマシーブリリ
アントブルーにより染色して、タンパク質を特定する方
法である。上記の条件でローヤルゼリー中の蛋白質の電
気泳動を行うと、上記鮮度指標蛋白質は、単一バンドを
形成する。この点で、電気泳動により上記蛋白質の分解
を調べるには、非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動
が好ましい。分子量マーカーとしてＨＭＷマーカーキッ
ト：Native PAGE用（ファルマシアバイオテク社）を用
いた場合、上記蛋白質の分子量は約３５０キロダルトン
であることが分かった。
分子量約３５０キロダルトンのタンパク質の定性方法 本発明のローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルト
ンのタンパク質は、電気泳動によりタンパク質の構成を
分析し、タンパク質を特定することを特徴とする。まず
非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動の方法として
は、特に限定されないが、好ましい方法としては、水溶
性ローヤルゼリータンパク質（3％ローヤルゼリー水溶
液（Ｗ／Ｖ））をポリアクリルアミドゲル（１０％均
一）にて、電流２０ｍＡで電気泳動し、クマシーブリリ
アントブルーにより染色して、タンパク質を特定する方
法である。上記の条件でローヤルゼリー中の蛋白質の電
気泳動を行うと、上記鮮度指標蛋白質は、単一バンドを
形成する。この点で、電気泳動により上記蛋白質の分解
を調べるには、非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動
が好ましい。分子量マーカーとしてＨＭＷマーカーキッ
ト：Native PAGE用（ファルマシアバイオテク社）を用
いた場合、上記蛋白質の分子量は約３５０キロダルトン
であることが分かった。
【００１１】
【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明について更に
詳細について説明を加えるが、本発明がかかる実施例に
のみ限定を受けないことは、言うまでもない。
詳細について説明を加えるが、本発明がかかる実施例に
のみ限定を受けないことは、言うまでもない。
【００１２】＜実施例１＞各種保存温度条件下に於ける
ローヤルゼリーの鮮度の指標である分子量約３５０キロ
ダルトンの蛋白質をト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３
０００ＳＷをカラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリ
ウム、０．０５％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７．０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／
ｍｉｎ、カラム温度を３５℃に設定したＧＣＰにより含
有率を測定した。即ち、ローヤルゼリーを４℃、２０
℃、４０℃及び５０℃に保存し、０日（スタート時の新
鮮なローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルトン蛋
白質の含有量／ローヤルゼリー中の総蛋白質量
（％）），１日後，３日後，５日後，７日後のローヤル
ゼリー中の分子量約３５０キロダルトン蛋白質の含有量
を測定した。表１に示すように、４℃と２０℃における
保存では、分子量約３５０キロダルトン蛋白質は、７日
後まで安定であった。一方、４０℃保存、７日後で初め
て、２８．８％に減少した。５０℃保存では、１〜７日
後まで、分子量約３５０キロダルトン蛋白質は経時的に
減少し２１．８％まで減少した。即ち、この分子量約３
５０キロダルトンのタンパク質は、ローヤルゼリーの鮮
度の指標物質となりうることがわかる。
ローヤルゼリーの鮮度の指標である分子量約３５０キロ
ダルトンの蛋白質をト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３
０００ＳＷをカラムとして用いて、０．３Ｍ塩化ナトリ
ウム、０．０５％アジ化ナトリウム含有０．１Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７．０）を展開液とし、流速を０．３ｍｌ／
ｍｉｎ、カラム温度を３５℃に設定したＧＣＰにより含
有率を測定した。即ち、ローヤルゼリーを４℃、２０
℃、４０℃及び５０℃に保存し、０日（スタート時の新
鮮なローヤルゼリー中の分子量約３５０キロダルトン蛋
白質の含有量／ローヤルゼリー中の総蛋白質量
（％）），１日後，３日後，５日後，７日後のローヤル
ゼリー中の分子量約３５０キロダルトン蛋白質の含有量
を測定した。表１に示すように、４℃と２０℃における
保存では、分子量約３５０キロダルトン蛋白質は、７日
後まで安定であった。一方、４０℃保存、７日後で初め
て、２８．８％に減少した。５０℃保存では、１〜７日
後まで、分子量約３５０キロダルトン蛋白質は経時的に
減少し２１．８％まで減少した。即ち、この分子量約３
５０キロダルトンのタンパク質は、ローヤルゼリーの鮮
度の指標物質となりうることがわかる。
【００１３】
【表１】
【００１４】＜実施例２＞マウス抗疲労試験を指標とし
て、実施例１の５０℃で経時的に保存したローヤルゼリ
ーの生理活性試験を行った。即ち、実験動物としてｄｄ
Ｙマウス、５週齢、雄、１群１０匹を用いた。ローヤル
ゼリーの投与方法として、ローヤルゼリーの凍結乾燥物
を生換算で５％になるように粉餌（ＣＥー２）に混ぜて
２週間自由摂取させた。（計算上の摂取量は５ｇ/Ｋ
ｇ）抗疲労試験として、京大松元式マウス運動量測定流
水層を用いた。水層の水流量は８Ｌ/分で流し、マウス
を遊泳させ、７秒間以上息継ぎが出来なくなった時点を
遊泳時間とした。群分けとして、群分けとして、１群は
コントロール（通常食）、２群は、新鮮なローヤルゼリ
ー投与群、３群は、５０℃で１日保存したローヤルゼリ
ー投与群、４群は、５０℃で３日保存したローヤルゼリ
ー投与群、５群は５０℃で５日保存したローヤルゼリー
投与群、６群は５０℃で７日保存したローヤルゼリー投
与群とした。マウスの選定とし、マウスは泳ぎの上手い
ものと下手なものがおり、下手なものは遊泳を重ねても
遊泳時間がほとんど伸びなかった。従って、投与前遊泳
時間において４０分以上泳いだものだけを選出し実験に
供した。実験のスケジュールとして、まず、マウスを週
１回遊泳させた。１週目に予備遊泳させ、２週目に投与
前遊泳時間を測定した。４週目に投与開始後２週目の遊
泳時間を測定した。結果を平均遊泳時間比（投与前の遊
泳時間を１とした場合の投与後の遊泳時間の比を平均し
たもの。）として表２に示す。これより、ローヤルゼリ
ーの鮮度の指標物質である分子量約３５０キロダルトン
のタンパク質の含有量の多いものほど遊泳時間がのびて
いることがわかる。従って、該タンパク質が抗疲労の生
理活性と極めて良好な相関があることが確かめられた。
て、実施例１の５０℃で経時的に保存したローヤルゼリ
ーの生理活性試験を行った。即ち、実験動物としてｄｄ
Ｙマウス、５週齢、雄、１群１０匹を用いた。ローヤル
ゼリーの投与方法として、ローヤルゼリーの凍結乾燥物
を生換算で５％になるように粉餌（ＣＥー２）に混ぜて
２週間自由摂取させた。（計算上の摂取量は５ｇ/Ｋ
ｇ）抗疲労試験として、京大松元式マウス運動量測定流
水層を用いた。水層の水流量は８Ｌ/分で流し、マウス
を遊泳させ、７秒間以上息継ぎが出来なくなった時点を
遊泳時間とした。群分けとして、群分けとして、１群は
コントロール（通常食）、２群は、新鮮なローヤルゼリ
ー投与群、３群は、５０℃で１日保存したローヤルゼリ
ー投与群、４群は、５０℃で３日保存したローヤルゼリ
ー投与群、５群は５０℃で５日保存したローヤルゼリー
投与群、６群は５０℃で７日保存したローヤルゼリー投
与群とした。マウスの選定とし、マウスは泳ぎの上手い
ものと下手なものがおり、下手なものは遊泳を重ねても
遊泳時間がほとんど伸びなかった。従って、投与前遊泳
時間において４０分以上泳いだものだけを選出し実験に
供した。実験のスケジュールとして、まず、マウスを週
１回遊泳させた。１週目に予備遊泳させ、２週目に投与
前遊泳時間を測定した。４週目に投与開始後２週目の遊
泳時間を測定した。結果を平均遊泳時間比（投与前の遊
泳時間を１とした場合の投与後の遊泳時間の比を平均し
たもの。）として表２に示す。これより、ローヤルゼリ
ーの鮮度の指標物質である分子量約３５０キロダルトン
のタンパク質の含有量の多いものほど遊泳時間がのびて
いることがわかる。従って、該タンパク質が抗疲労の生
理活性と極めて良好な相関があることが確かめられた。
【００１５】
【表２】
【００１６】
【発明の効果】本発明によれば、ローヤルゼリーの鮮度
を明らかにする指標物質を提供することができる。
を明らかにする指標物質を提供することができる。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｇ０１Ｎ 30/88 Ｇ０１Ｎ 33/02 33/02 33/15 Ｚ 33/15 Ａ２３Ｌ 1/076 // Ａ２３Ｌ 1/076 Ｇ０１Ｎ 27/26 ３０１Ａ (72)発明者 宮崎 博隆 神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560 ポーラ 戸塚研究所内 Ｆターム(参考） 4B041 LC10 LD06 LK14 4H045 AA20 AA30 CA51 EA50 FA71 GA23 HA07
Claims (4)
- 【請求項１】 ローヤルゼリー中の分子量約３５０キロ
ダルトンのタンパク質を指標とする事を特徴とする、ロ
ーヤルゼリーの鮮度の指標物質。 - 【請求項２】 分子量約３５０キロダルトンタンパク質
が、下記に示す性質を有するものであることを特徴とす
る、請求項１記載のローヤルゼリーの鮮度の指標物質。
１）ローヤルゼリー中のタンパク質が非変性ポリアクリ
ルアミドゲル電気泳動において単一バンドを形成する。
２）前記蛋白質が、ト−ソー株式会社製ＴＳＫゲルＧ３
０００ＳＷ（7.5×30ｃｍ）をカラムとして用いて、
０．３Ｍ塩化ナトリウム、０．０５％アジ化ナトリウム
含有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７．０）を展開液とし、
流速を０．３ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度を３５℃に設定
し、２８０ｎｍの吸光度で検出する高速液体クロマトグ
ラフィーにおいて、保持時間１９〜２１分にピークを有
する蛋白質であり、ゲル濾過法により測定される分子量
が約３５０キロダルトンである。 - 【請求項３】 指標物質が、ローヤルゼリーの鮮度を示
すことを特徴とする、請求項１又は２に記載のローヤル
ゼリーの鮮度の指標物質。 - 【請求項４】 請求項１〜３の何れか一項に記載のロー
ヤルゼリーの鮮度の指標物質である分子量約３５０キロ
ダルトンの蛋白質が、ローヤルゼリー中総蛋白質量あた
りに占める割合が、３５重量％以上であることを特徴と
する、ローヤルゼリーの鮮度の指標物質。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2001145874A JP2002338598A (ja) | 2001-05-16 | 2001-05-16 | ローヤルゼリーの鮮度の指標物質 |
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|---|---|
| JP2002338598A true JP2002338598A (ja) | 2002-11-27 |
| JP2002338598A5 JP2002338598A5 (ja) | 2008-05-01 |
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| JP2001145874A Pending JP2002338598A (ja) | 2001-05-16 | 2001-05-16 | ローヤルゼリーの鮮度の指標物質 |
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|---|---|
| JP (1) | JP2002338598A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101320030B (zh) * | 2008-07-21 | 2011-11-30 | 中国农业科学院蜜蜂研究所 | 一种测定蜂王浆新鲜度的方法 |
| CN102507527A (zh) * | 2011-12-02 | 2012-06-20 | 中国农业科学院蜜蜂研究所 | 一种蜂王浆新鲜度测定的方法 |
| CN101324550B (zh) * | 2008-07-28 | 2012-12-26 | 中国农业科学院蜜蜂研究所 | 一种蜂王浆新鲜度的红外光谱评价方法 |
| CN111665366A (zh) * | 2020-06-15 | 2020-09-15 | 石城县康皇蜂业有限公司 | 一种用于蜂王浆的新鲜度检测方法 |
Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| JP2000199753A (ja) * | 1998-10-29 | 2000-07-18 | Pola Chem Ind Inc | ロ―ヤルゼリ―の品質評価法 |
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-
2001
- 2001-05-16 JP JP2001145874A patent/JP2002338598A/ja active Pending
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