JP2002182323A - 共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法およびフォーカス調整方法、共焦点光学系を備えたスキャナならびにフォーカス位置決定用デバイス - Google Patents

共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法およびフォーカス調整方法、共焦点光学系を備えたスキャナならびにフォーカス位置決定用デバイス

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JP2002182323A
JP2002182323A JP2000383782A JP2000383782A JP2002182323A JP 2002182323 A JP2002182323 A JP 2002182323A JP 2000383782 A JP2000383782 A JP 2000383782A JP 2000383782 A JP2000383782 A JP 2000383782A JP 2002182323 A JP2002182323 A JP 2002182323A
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confocal optical
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laser light
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JP2000383782A
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Toru Tsuchiya
徹 土谷
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス
を、所望のように調整することができる共焦点光学系を
備えたスキャナのフォーカス位置決定方法を提供する。 【解決手段】 レーザ光4の照射を受けると、蛍光また
はフォトルミネッセンスを発し、レーザ光の照射を受け
ても劣化することがない色ガラスフィルタ61上に、色
ガラスフィルタが露出されるスリット63が形成される
ように、クロム膜62を設けたフォーカス位置決定用デ
バイス60を、レーザ光によって、走査し、スリットを
介して、色ガラスフィルタを励起し、色ガラスフィルタ
から放出される蛍光を、スリットを介して、光電的に検
出し、共焦点光学系19、30の対物レンズ19の位置
を、所定の移動ピッチで、変化させて、検出された蛍光
の信号強度に基づいて、共焦点光学系のフォーカス位置
を決定することを特徴とする共焦点光学系を備えたスキ
ャナのフォーカス位置決定方法。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、共焦点光学系を備
えたスキャナのフォーカス位置決定方法およびフォーカ
ス調整方法、共焦点光学系を備えたスキャナならびにフ
ォーカス位置決定用デバイスに関するものであり、さら
に詳細には、共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカ
スを、所望のように調整することができる共焦点光学系
を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法およびフォ
ーカス調整方法、共焦点光学系を備えたスキャナならび
にフォーカス位置決定用デバイスに関するものである。
【0002】
【従来の技術】放射線が照射されると、放射線のエネル
ギーを吸収して、蓄積、記録し、その後に、特定の波長
域の電磁波を用いて励起すると、照射された放射線のエ
ネルギーの量に応じた光量の輝尽光を発する特性を有す
る輝尽性蛍光体を、放射線の検出材料として用い、放射
性標識を付与した物質を、生物体に投与した後、その生
物体あるいはその生物体の組織の一部をサンプルとし、
このサンプルを、輝尽性蛍光体層が設けられた蓄積性蛍
光体シートと一定時間重ね合わせることにより、放射線
エネルギーを輝尽性蛍光体に、蓄積、記録し、しかる後
に、電磁波によって、輝尽性蛍光体層を走査して、輝尽
性蛍光体を励起し、輝尽性蛍光体から放出された輝尽光
を光電的に検出して、ディジタル画像信号を生成し、画
像処理を施して、クロムTなどの表示手段上あるいは写
真フイルムなどの記録材料上に、画像を再生するように
構成されたオートラジオグラフィ検出システムが知られ
ている(たとえば、特公平1−60784号公報、特公
平1−60782号公報、特公平4−3952号公報な
ど)。
【0003】蓄積性蛍光体シートを画像の検出材料とし
て使用するオートラジオグラフィ検出システムは、写真
フイルムを用いる場合とは異なり、現像処理という化学
的処理が不必要であるだけでなく、得られた画像データ
に画像処理を施すことによって、所望のように、画像を
再生し、あるいは、コンピュータによる定量解析が可能
になるという利点を有している。
【0004】他方、オートラジオグラフィシステムにお
ける放射性標識物質に代えて、蛍光物質を標識物質とし
て使用した蛍光検出(fluorescence) システムが知られ
ている。このシステムによれば、蛍光画像を読み取るこ
とによって、遺伝子配列、遺伝子の発現レベル、蛋白質
の分離、同定、あるいは、分子量、特性の評価などをお
こなうことができ、たとえば、電気泳動させるべき複数
のDNA断片を含む溶液中に、蛍光色素を加えた後に、
複数のDNA断片をゲル支持体上で電気泳動させ、ある
いは、蛍光色素を含有させたゲル支持体上で、複数のD
NA断片を電気泳動させ、あるいは、複数のDNA断片
を、ゲル支持体上で、電気泳動させた後に、ゲル支持体
を蛍光色素を含んだ溶液に浸すなどして、電気泳動され
たDNA断片を標識し、励起光によって、蛍光色素を励
起して、生じた蛍光を検出することによって、画像を生
成し、ゲル支持体上のDNAを分布を検出したり、ある
いは、複数のDNA断片を、ゲル支持体上で、電気泳動
させた後に、DNAを変性(denaturation) し、次い
で、サザン・ブロッティング法により、ニトロセルロー
スなどの転写支持体上に、変性DNA断片の少なくとも
一部を転写し、目的とするDNAと相補的なDNAもし
くはRNAを蛍光色素で標識して調製したプローブと変
性DNA断片とをハイブリダイズさせ、プローブDNA
もしくはプローブRNAと相補的なDNA断片のみを選
択的に標識し、励起光によって、蛍光色素を励起して、
生じた蛍光を検出することにより、画像を生成し、転写
支持体上の目的とするDNAを分布を検出したりするこ
とができる。さらに、標識物質により標識した目的とす
る遺伝子を含むDNAと相補的なDNAプローブを調製
して、転写支持体上のDNAとハイブリダイズさせ、酵
素を、標識物質により標識された相補的なDNAと結合
させた後、蛍光基質と接触させて、蛍光基質を蛍光を発
する蛍光物質に変化させ、励起光により、生成された蛍
光物質を励起して、生じた蛍光を検出することによっ
て、画像を生成し、転写支持体上の目的とするDNAの
分布を検出したりすることもできる。この蛍光検出シス
テムは、放射性物質を使用することなく、簡易に、遺伝
子配列などを検出することができるという利点がある。
【0005】さらに、近年、スライドガラス板やメンブ
レンフィルタなどの担体表面上の異なる位置に、ホルモ
ン類、腫瘍マーカー、酵素、抗体、抗原、アブザイム、
その他のタンパク質、核酸、cDNA、DNA、RNA
など、生体由来の物質と特異的に結合可能で、かつ、塩
基配列や塩基の長さ、組成などが既知の特異的結合物質
を、スポッター装置を用いて、滴下して、多数の独立し
たスポットを形成し、次いで、ホルモン類、腫瘍マーカ
ー、酵素、抗体、抗原、アブザイム、その他のタンパク
質、核酸、cDNA、DNA、mRNAなど、抽出、単
離などによって、生体から採取され、あるいは、さら
に、化学的処理、化学修飾などの処理が施された生体由
来の物質であって、蛍光物質、色素などの標識物質によ
って標識された物質をハイブリダイズさせたマイクロア
レイに、励起光を照射して、蛍光物質、色素などの標識
物質から発せられた蛍光などの光を光電的に検出して、
生体由来の物質を解析するマイクロアレイ検出システム
が開発されている。このマイクロアレイ検出システムに
よれば、スライドガラス板やメンブレンフィルタなどの
担体表面上の異なる位置に、数多くの特異的結合物質の
スポットを高密度に形成して、標識物質によって標識さ
れた生体由来の物質をハイブリダイズさせることによっ
て、短時間に、生体由来の物質を解析することが可能に
なるという利点がある。
【0006】蛍光検出システムもマイクロアレイ検出シ
ステムもともに、サンプルに、励起光を照射して、蛍光
物質などの標識物質を励起し、蛍光物質から放出された
蛍光などを光電的に検出して、標識物質の画像データや
発光量データなどの生化学解析用のデータを生成するも
のであり、これらのシステムのために用いられるデータ
生成装置は、スキャナを用いたものと、二次元センサを
用いたものに大別される。
【0007】二次元センサを用いる場合に比し、スキャ
ナを用いる場合には、高解像度で、データを生成するこ
とができるという利点がある。
【0008】
【発明が解決しようとする課題】スライドガラス板を担
体としたマイクロアレイシステムの場合には、スライド
ガラス板の表面上で、特異的結合物質とハイブリダイズ
した生体由来の物質を標識している蛍光物質を励起し
て、スライドガラス板の表面からの発せられた蛍光を光
電的に検出するものであるため、S/N比を向上させる
ために、共焦点光学系を用いたスキャナを用いることが
好ましい。
【0009】このような共焦点光学系を備えたスキャナ
においては、データの生成に先立って、共焦点光学系の
フォーカスを調整することが必要不可欠である。
【0010】共焦点光学系のフォーカスを調整するにあ
たり、従来は、蛍光物質によって標識された試料を含む
の蛍光サンプルや、蛍光物質のスポットが形成されたマ
イクロアレイを、励起光によって走査し、共焦点光学系
を構成する対物レンズの位置を動かしながら、蛍光を光
電的に検出して、蛍光の信号強度の積分値が最大となる
対物レンズの位置を求めて、共焦点光学系のフォーカス
を調整していた。
【0011】しかしながら、このように、蛍光物質によ
って標識された試料を含むの蛍光サンプルや、蛍光物質
のスポットが形成されたマイクロアレイに、励起光を照
射して、共焦点光学系のフォーカスを調整する場合に
は、励起光の照射によって、蛍光物質が劣化するため、
共焦点光学系を構成する対物レンズの位置を動かし、蛍
光を光電的に検出している間に、経時的に、蛍光の強度
が減少し、その結果、蛍光を光電的に検出して得られた
蛍光の信号強度の積分値が最大となる共焦点光学系の位
置を決定することができず、所望のように、共焦点光学
系のフォーカスを調整することができないという問題が
あった。
【0012】したがって、本発明は、共焦点光学系を備
えたスキャナのフォーカスを、所望のように調整するこ
とができる共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス
位置決定方法およびフォーカス調整方法、共焦点光学系
を備えたスキャナならびにフォーカス位置用決定用デバ
イスを提供することを目的とするものである。
【0013】
【課題を解決するための手段】本発明のかかる目的は、
共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方
法であって、レーザ光の照射を受けると、蛍光またはフ
ォトルミネッセンスを発し、レーザ光の照射を受けても
劣化することがない無機材料よりなる支持体上に、前記
支持体が露出される開口部が形成されるように、金属膜
を設けたフォーカス位置決定用デバイスを、レーザ光に
よって、走査し、前記開口部を介して、前記支持体を励
起し、前記支持体から放出される蛍光またはフォトルミ
ネッセンスを、前記開口部を介して、光電的に検出し、
共焦点光学系の対物レンズの位置を、所定の移動ピッチ
で、変化させて、検出された前記蛍光またはフォトルミ
ネッセンスの信号強度に基づいて、前記共焦点光学系の
フォーカス位置を決定することを特徴とする共焦点光学
系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法によって
達成される。
【0014】本発明によれば、レーザ光の照射を受ける
と、蛍光またはフォトルミネッセンスを発し、レーザ光
の照射を受けても劣化することがない無機材料よりなる
支持体上に、支持体が露出される開口部が形成されるよ
うに、金属膜を設けたフォーカス位置決定用デバイスを
用いているので、フォーカス位置決定用デバイスに、レ
ーザ光を照射して、共焦点光学系の対物レンズのフォー
カス位置を決定している間に、支持体から放出される蛍
光の光量が低下することはなく、また、フォーカス位置
決定用デバイスを、レーザ光によって、走査し、開口部
を介して、支持体を励起し、支持体から放出される蛍光
またはフォトルミネッセンスを、開口部を介して、光電
的に検出し、共焦点光学系の対物レンズの位置を、所定
の移動ピッチで、変化させて、検出された蛍光またはフ
ォトルミネッセンスの信号強度に基づいて、共焦点光学
系のフォーカス位置を決定するするように構成されてい
るから、高精度で、所望のように、共焦点光学系を備え
たスキャナのフォーカス位置を決定することが可能にな
る。
【0015】本発明の好ましい実施態様においては、検
出された前記蛍光またはフォトルミネッセンスの信号強
度の積分値が最大となる前記共焦点光学系の対物レンズ
の位置を、前記共焦点光学系のフォーカス位置として決
定するように構成されている。
【0016】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記レーザ光による走査の画素ピッチが、前記レー
ザ光のビーム径とほぼ同等か、または、それ以下に設定
されている。
【0017】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記開口部が、スリット状に形成されている。
【0018】本発明のさらに別の好ましい実施態様にお
いては、前記開口部が、ピンホール状に形成されてい
る。
【0019】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の波長毎に、前記共焦点光学系のフォーカ
ス位置を決定するように構成されている。
【0020】レーザ光の波長が異なると、共焦点光学系
のフォーカス位置は変化するが、本発明のさらに好まし
い実施態様によれば、レーザ光の波長毎に、共焦点光学
系のフォーカス位置を決定するように構成されているか
ら、蛍光物質などの標識物質を最も効率的に励起するこ
とのできる波長のレーザ光を、適宜、選択して、サンプ
ルを励起して、サンプルから放出された光を光電的に検
出する場合にも、所望のように、共焦点光学系のフォー
カス位置を決定し、共焦点光学系を備えたスキャナのフ
ォーカス位置を調整することが可能になる。
【0021】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、さらに、前記共焦点光学系の前記フォーカス位置を
メモリに記憶させるように構成されている。
【0022】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、共焦点光学系のフォーカス位置がメモリに記憶され
ているから、メモリに記憶されている共焦点光学系のフ
ォーカス位置を読み出し、共焦点光学系の対物レンズを
移動させることによって、所望のように、共焦点光学系
を備えたスキャナのフォーカス位置を調整することを特
徴とするが可能になる。
【0023】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、IV族元素、II−VI族化合物、
III−V族化合物およびこれらの複合体よりなる群か
ら選ばれた材料によって形成されている。
【0024】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、IV族元素、II−VI族化合物、III−V族化
合物およびこれらの複合体よりなる群から選ばれた材料
は、レーザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミ
ネッセンスを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受
けても、劣化することがないから、共焦点光学系の対物
レンズのフォーカス位置を決定している間に、支持体か
ら放出される蛍光あるいはフォトルミネッセンスの光量
が低下することはなく、したがって、所望のように、共
焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を決定す
ることが可能になる。
【0025】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりな
る群から選ばれた材料を主成分とするガラスに、CdS
−CdSeの固溶体をドープして形成された色ガラスフ
イルタによって形成されている。
【0026】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりなる群から選ばれ
た材料を主成分とするガラスに、CdS−CdSeの固
溶体をドープして形成された色ガラスフイルタは、レー
ザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッセン
スを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けても、
劣化することがないから、共焦点光学系の対物レンズの
フォーカス位置を決定している間に、支持体から放出さ
れる蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下する
ことはなく、したがって、所望のように、共焦点光学系
を備えたスキャナのフォーカス位置を決定することが可
能になる。
【0027】本発明のさらに別の好ましい実施態様にお
いては、前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および石灰石よ
りなる群から選ばれた材料を主成分とするガラスに、Z
nS−CdSの固溶体をドープして形成された色ガラス
フィルタによって形成されている。
【0028】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりなる群から選ばれ
た材料を主成分とするガラスに、ZnS−CdSの固溶
体をドープして形成された色ガラスフィルタは、レーザ
光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッセンス
を放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けても、劣
化することがないから、共焦点光学系の対物レンズのフ
ォーカス位置を決定している間に、支持体から放出され
る蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下するこ
とはなく、したがって、所望のように、共焦点光学系を
備えたスキャナのフォーカス位置を決定することが可能
になる。
【0029】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、InGaAsP層と、GaAs層と
の積層体によって形成され、前記金属膜が、前記InG
aAsP層上に設けられている。
【0030】本発明のさらに別の好ましい実施態様によ
れば、InGaAsP層と、GaAs層との積層体は、
レーザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッ
センスを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けて
も、劣化することがないから、共焦点光学系の対物レン
ズのフォーカス位置を決定している間に、支持体から放
出される蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下
することはなく、したがって、所望のように、共焦点光
学系を備えたスキャナのフォーカス位置を決定すること
が可能になる。
【0031】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、スパッタリング、CVDおよび蒸着
よりなる群から選ばれる形成方法によって形成されてい
る。
【0032】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、スパッタリングによって形成されて
いる。
【0033】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、クロム、アルミニウム、金、ニッケ
ル−クロム合金およびチタン−ニッケル−クロムよりな
る群から選ばれる材料によって形成されている。
【0034】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、クロムによって形成されている。
【0035】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、金属膜が、クロムによって形成されているから、フ
ォーカス位置決定用デバイスの機械的強度を向上させる
ことが可能になる。
【0036】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径の0.5ないし2倍に形成されてい
る。
【0037】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径の0.5ないし2倍に形成されているか
ら、開口部内の支持体のみに、レーザ光を照射して、励
起し、開口部内の支持体から放出された蛍光またはフォ
トルミネッセンスのみを検出することができ、したがっ
て、精度よく、共焦点光学系を備えたスキャナのフォー
カス位置を決定することが可能になる。
【0038】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径の0.8ないし1.2倍に形成されて
いる。
【0039】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径の0.8ないし1.2倍に形成されている
から、開口部内の支持体のみに、レーザ光を照射して、
励起し、開口部内の支持体から放出された蛍光またはフ
ォトルミネッセンスのみを検出することができ、したが
って、精度よく、共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
ーカス位置を決定することが可能になる。
【0040】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径とほぼ同等に形成されている。
【0041】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径とほぼ同等に形成されているから、開口部
内の支持体のみに、レーザ光を照射して、励起し、開口
部内の支持体から放出された蛍光またはフォトルミネッ
センスのみを検出することができ、したがって、精度よ
く、共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を
決定することが可能になる。
【0042】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、前記移動ピッチ以下の膜厚を有して
いる。
【0043】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、金属膜が、共焦点光学系の対物レンズの移動ピッチ
以下の膜厚を有しているから、精度よく、共焦点光学系
を備えたスキャナのフォーカス位置を決定することが可
能になる。
【0044】本発明の前記目的はまた、上述したフォー
カス位置決定方法にしたがって決定され、前記メモリに
記憶されたフォーカス位置に基づいて、前記共焦点光学
系の対物レンズの位置を調整することを特徴とする共焦
点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置調整方法に
よって達成される。
【0045】本発明によれば、レーザ光の照射を受ける
と、蛍光またはフォトルミネッセンスを放出し、レーザ
光の照射を受けても劣化することがない支持体支持体上
に、金属膜を設けて、開口部を形成したフォーカス位置
決定用デバイスを用いているので、共焦点光学系の対物
レンズのフォーカス位置を決定している間に、支持体か
ら放出される蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が
低下することはなく、また、フォーカス位置決定用デバ
イスを、レーザ光によって、走査し、開口部を介して、
支持体を励起し、支持体から放出される蛍光またはフォ
トルミネッセンスを、開口部を介して、光電的に検出
し、共焦点光学系の対物レンズの位置を、所定の移動ピ
ッチで、変化させて、検出された蛍光またはフォトルミ
ネッセンスの信号強度に基づいて、共焦点光学系のフォ
ーカス位置を決定するように構成されているから、高精
度で、所望のように、共焦点光学系を備えたスキャナの
フォーカス位置を決定することが可能になり、こうして
決定された共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス
位置がメモリに記憶されているから、メモリに記憶され
ている共焦点光学系のフォーカス位置を読み出して、共
焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を、所望
のように、調整することが可能になる。
【0046】本発明の好ましい実施態様においては、ス
テッピングモータによって、前記共焦点光学系の対物レ
ンズの位置を調整するように構成されている。
【0047】本発明の前記目的はまた、レーザ光を発す
る少なくとも1つのレーザ励起光源と、サンプルを載置
するサンプルステージと、前記少なくとも1つのレーザ
励起光源から発せられたレーザ光によって、前記サンプ
ルステージに載置された前記サンプルを走査可能なよう
に、前記サンプルステージを移動させる走査手段と、共
焦点光学系と、共焦点光学系を構成する対物レンズを移
動可能なモータと、光を光電的に検出する光検出器と、
メモリと、共焦点光学系のフォーカスを調整するフォー
カス調整手段を備えたスキャナであって、前記メモリ
に、上述したフォーカス位置決定方法にしたがって決定
された前記共焦点光学系のフォーカス位置が記憶され、
前記フォーカス調整手段が、前記メモリに記憶された前
記共焦点光学系のフォーカス位置に基づき、前記モータ
を駆動して、前記共焦点光学系の対物レンズが、前記共
焦点光学系のフォーカス位置に位置するように、前記共
焦点光学系の対物レンズを移動させ、前記共焦点光学系
のフォーカス位置を調整するように構成されたことを特
徴とするスキャナによって達成される。
【0048】本発明によれば、レーザ光の照射を受ける
と、蛍光またはフォトルミネッセンスを放出し、レーザ
光の照射を受けても劣化することがない支持体支持体上
に、金属膜をが設けて、開口部を形成したフォーカス位
置決定用デバイスが、レーザ光によって、走査され、開
口部を介して、支持体が励起され、支持体から放出され
る蛍光またはフォトルミネッセンスが、開口部を介し
て、光電的に検出され、共焦点光学系の対物レンズの位
置が、所定の移動ピッチで、移動されて、検出された蛍
光またはフォトルミネッセンスの信号強度に基づいて、
決定された共焦点光学系のフォーカス位置が、メモリに
記憶され、フォーカス調整手段が、メモリに記憶された
共焦点光学系のフォーカス位置に基づき、モータを駆動
して、共焦点光学系の対物レンズが、共焦点光学系のフ
ォーカス位置に位置するように、共焦点光学系の対物レ
ンズを移動させ、共焦点光学系のフォーカス位置を調整
するように構成されているから、共焦点光学系を備えた
スキャナのフォーカス位置を、所望のように、調整する
ことが可能になる。
【0049】本発明の好ましい実施態様においては、前
記走査手段が、前記サンプルステージを、前記少なくと
も1つのレーザ励起光源から発せられたレーザ光のビー
ム径とほぼ同等か、あるいは、それ以下の画素ピッチ
で、移動させるように構成されている。
【0050】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記メモリが、波長の異なるレーザ光を発する2以
上のレーザ励起光源を用いる場合の前記共焦点光学系の
フォーカス位置を記憶している。
【0051】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、メモリが、波長の異なるレーザ光を発する2以上の
レーザ励起光源を用いる場合の共焦点光学系のフォーカ
ス位置を記憶しているから、サンプルに含まれている標
識物質に応じて、最も効率的に励起可能なレーザ励起光
源を選択して、サンプルのデータを生成することが可能
になり、効率的なスキャナを得ることができる。
【0052】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記モータが、ステッピングモータによって構成さ
れている。
【0053】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、共焦点光学系を構成する対物レンズを移動可能なモ
ータが、ステッピングモータによって構成されているか
ら、所望のピッチで、高精度に、共焦点光学系の対物レ
ンズを移動させることができ、したがって、共焦点光学
系を備えたスキャナのフォーカス位置を、所望のよう
に、調整することが可能になる。
【0054】本発明の前記目的はまた、レーザ光の照射
を受けると、蛍光またはフォトルミネッセンスを放出
し、レーザ光の照射を受けても劣化することがない支持
体上に、金属膜が設けられて、それによって、スリット
が形成されたことを特徴とする共焦点光学系を備えたス
キャナのフォーカス位置決定用デバイスによって達成さ
れる。
【0055】本発明によれば、共焦点光学系を備えたス
キャナのフォーカス位置決定用デバイスは、レーザ光の
照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッセンスを放
出し、レーザ光の照射を受けても劣化することがない支
持体上に、金属膜を設けられて、スリットが形成されて
いるから、フォーカス位置決定用デバイスに、レーザ光
を照射して、共焦点光学系の対物レンズのフォーカス位
置を決定している間に、支持体から放出される蛍光また
はフォトルミネッセンスの光量が低下することはなく、
また、フォーカス位置決定用デバイスを、レーザ光によ
って、走査し、スリットを介して、支持体を励起し、支
持体から放出される蛍光またはフォトルミネッセンス
を、スリットを介して、光電的に検出し、共焦点光学系
の対物レンズの位置を、所定の移動ピッチで、変化させ
て、検出された蛍光の信号強度に基づき、共焦点光学系
のフォーカス位置を決定するように構成されているか
ら、高精度で、所望のように、共焦点光学系を備えたス
キャナのフォーカス位置を決定することが可能になる。
【0056】本発明の好ましい実施態様においては、前
記開口部が、スリット状に形成されている。
【0057】本発明の別の好ましい実施態様において
は、前記開口部が、ピンホール状に形成されている。
【0058】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、IV族元素、II−VI族化合物、
III−V族化合物およびこれらの複合体よりなる群か
ら選ばれた材料によって形成されている。
【0059】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、IV族元素、II−VI族化合物、III−V族化
合物およびこれらの複合体よりなる群から選ばれた材料
は、レーザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミ
ネッセンスを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受
けても、劣化することがないから、共焦点光学系の対物
レンズのフォーカス位置を決定している間に、支持体か
ら放出される蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が
低下することはなく、したがって、所望のように、共焦
点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を決定する
ことが可能になる。
【0060】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりな
る群から選ばれた材料を主成分とするガラスに、CdS
−CdSeの固溶体をドープして形成された色ガラスフ
イルタによって形成されている。
【0061】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりなる群から選ばれ
た材料を主成分とするガラスに、CdS−CdSeの固
溶体をドープして形成された色ガラスフイルタは、レー
ザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッセン
スを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けても、
劣化することがないから、共焦点光学系の対物レンズの
フォーカス位置を決定している間に、支持体から放出さ
れる蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下する
ことはなく、したがって、所望のように、共焦点光学系
を備えたスキャナのフォーカス位置を決定することが可
能になる。
【0062】本発明のさらに別の好ましい実施態様にお
いては、前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および石灰石よ
りなる群から選ばれた材料を主成分とするガラスに、Z
nS−CdSの固溶体をドープして形成された色ガラス
フィルタによって形成されている。
【0063】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、珪砂、ソーダ灰および石灰石よりなる群から選ばれ
た材料を主成分とするガラスに、ZnS−CdSの固溶
体をドープして形成された色ガラスフィルタは、レーザ
光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッセンス
を放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けても、劣
化することがないから、共焦点光学系の対物レンズのフ
ォーカス位置を決定している間に、支持体から放出され
る蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下するこ
とはなく、したがって、所望のように、共焦点光学系を
備えたスキャナのフォーカス位置を決定することが可能
になる。
【0064】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記支持体が、InGaAsP層と、GaAs層と
の積層体によって形成され、前記金属膜が、前記InG
aAsP層上に設けられている。
【0065】本発明のさらに別の好ましい実施態様によ
れば、InGaAsP層と、GaAs層との積層体は、
レーザ光の照射を受けると、蛍光またはフォトルミネッ
センスを放出し、その一方で、レーザ光の照射を受けて
も、劣化することがないから、共焦点光学系の対物レン
ズのフォーカス位置を決定している間に、支持体から放
出される蛍光またはフォトルミネッセンスの光量が低下
することはなく、したがって、所望のように、共焦点光
学系を備えたスキャナのフォーカス位置を決定すること
が可能になる。
【0066】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、スパッタリング、CVDおよび蒸着
よりなる群から選ばれる形成方法によって形成されてい
る。
【0067】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、スパッタリングによって形成されて
いる。
【0068】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、クロム、アルミニウム、金、ニッケ
ル−クロム合金およびチタン−ニッケル−クロムよりな
る群から選ばれる材料によって形成されている。
【0069】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、クロムによって形成されている。
【0070】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、金属膜が、クロムによって形成されているから、フ
ォーカス位置決定用デバイスの機械的強度を向上させる
ことが可能になる。
【0071】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径の0.5ないし2倍に形成されてい
る。
【0072】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径の0.5ないし2倍に形成されているか
ら、開口部内の支持体のみに、レーザ光を照射して、励
起し、開口部内の支持体から放出された蛍光またはフォ
トルミネッセンスのみを検出することができ、したがっ
て、精度よく、共焦点光学系を備えたスキャナのフォー
カス位置を決定することが可能になる。
【0073】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径の0.8ないし1.2倍に形成されて
いる。
【0074】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径の0.8ないし1.2倍に形成されている
から、開口部内の支持体のみに、レーザ光を照射して、
励起し、開口部内の支持体から放出された蛍光またはフ
ォトルミネッセンスのみを検出することができ、したが
って、精度よく、共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
ーカス位置を決定することが可能になる。
【0075】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、レーザ光の走査方向に対する前記開口部の幅が、レ
ーザ光のビーム径とほぼ同等に形成されている。
【0076】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、レーザ光の走査方向に対する開口部の幅が、レーザ
光のビーム径とほぼ同等に形成されているから、開口部
内の支持体のみに、レーザ光を照射して、励起し、開口
部内の支持体から放出された蛍光またはフォトルミネッ
センスのみを検出することができ、したがって、精度よ
く、共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を
決定することが可能になる。
【0077】本発明のさらに好ましい実施態様において
は、前記金属膜が、約10ミクロン以下の膜厚を有して
いる。
【0078】本発明のさらに好ましい実施態様によれ
ば、金属膜が、約10ミクロン以下の膜厚を有し、膜厚
が十分に小さく形成されているから、精度よく、共焦点
光学系を備えたスキャナのフォーカス位置を決定するこ
とが可能になる。
【0079】
【発明の実施の形態】以下、添付図面に基づいて、本発
明の好ましい実施態様につき、詳細に説明を加える。
【0080】図1は、本発明の好ましい実施態様にかか
るフォーカス位置調整方法により、フォーカス位置が調
整される共焦点光学系を備えたスキャナの略斜視図であ
り、本実施態様にかかる共焦点光学系を備えたスキャナ
は、サンプルに含まれた標識物質を励起し、標識物質か
ら放出された光を検出して、生化学解析用のデータを生
成するように構成されている。
【0081】図1に示されるように、本実施態様にかか
るスキャナは、640nmの波長のレーザ光4を発する
第1のレーザ励起光源1と、532nmの波長のレーザ
光4を発する第2のレーザ励起光源2と、473nmの
波長のレーザ光4を発する第3のレーザ励起光源3とを
備えている。本実施態様においては、第1のレーザ励起
光源は、半導体レーザ光源によって構成され、第2のレ
ーザ励起光源2および第3のレーザ励起光源3は、第二
高調波生成(Second Harmonic Generation) 素子によっ
て構成されている。
【0082】第1のレーザ励起光源1により発生された
レーザ光4は、コリメータレンズ5により、平行光とさ
れた後、ミラー6によって反射される。第1のレーザ励
起光源1から発せられ、ミラー6によって反射されたレ
ーザ光4の光路には、640nmのレーザ光4を透過
し、532nmの波長の光を反射する第1のダイクロイ
ックミラー7および532nm以上の波長の光を透過
し、473nmの波長の光を反射する第2のダイクロイ
ックミラー8が設けられており、第1のレーザ励起光源
1により発生されたレーザ光4は、第1のダイクロイッ
クミラー7および第2のダイクロイックミラー8を透過
して、光学ヘッド15に入射する。
【0083】他方、第2のレーザ励起光源2より発生さ
れたレーザ光4は、コリメータレンズ9により、平行光
とされた後、第1のダイクロイックミラー7によって反
射されて、その向きが90度変えられて、第2のダイク
ロイックミラー8を透過し、光学ヘッド15に入射す
る。
【0084】また、第3のレーザ励起光源3から発生さ
れたレーザ光4は、コリメータレンズ10によって、平
行光とされた後、第2のダイクロイックミラー8により
反射されて、その向きが90度変えられた後、光学ヘッ
ド15に入射する。
【0085】光学ヘッド15は、ミラー16と、その中
央部に、穴17が形成された穴明きミラー18と、レン
ズ19を備えており、光学ヘッド15に入射したレーザ
光4は、ミラー16によって反射され、穴明きミラー1
8に形成された穴17およびレンズ19を通過して、サ
ンプルステージ20にセットされたサンプルキャリア2
1上に入射する。ここに、サンプルステージ20は、走
査機構(図1においては、図示せず)によって、図1に
おいて、X方向およびY方向に移動可能に構成されてい
る。
【0086】本実施態様にかかるスキャナは、スライド
ガラス板を担体とし、蛍光色素によって選択的に標識さ
れた試料の数多くのスポットが、スライドガラス板上に
形成されているマイクロアレイを、レーザ光4によって
走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素から放出された
蛍光を光電的に検出して、生化学解析用のデータを生成
可能に構成され、さらに、蛍光色素によって、選択的に
標識された変性DNAを含む転写支持体を担体とした蛍
光サンプルを、レーザ光4によって走査して、蛍光色素
を励起し、蛍光色素から放出された蛍光を光電的に検出
して、生化学解析用のデータを生成可能に構成されると
ともに、放射性標識物質によって選択的に標識された試
料の数多くのスポットが形成されたメンブレンフィルタ
などの担体を、輝尽性蛍光体を含む輝尽性蛍光体層が形
成された蓄積性蛍光体シートと密着させて、輝尽性蛍光
体層を露光して得た放射性標識物質の位置情報が記録さ
れた蓄積性蛍光体シートの輝尽性蛍光体層を、レーザ光
4によって走査して、輝尽性蛍光体を励起し、輝尽性蛍
光体から放出された輝尽光を光電的に検出して、生化学
解析用のデータを生成可能に構成されている。
【0087】レーザ光4が、光学ヘッド15から、サン
プル22上に入射すると、サンプル22が、マイクロア
レイや蛍光サンプルの場合には、レーザ光4によって、
蛍光物質が励起されて、蛍光が発せられ、また、サンプ
ル22が、蓄積性蛍光体シートの場合には、輝尽性蛍光
体層に含まれた輝尽性蛍光体が励起され、輝尽光が発せ
られる。
【0088】サンプル22から発せられた蛍光または輝
尽光25は、光学ヘッド15のレンズ19によって、平
行な光にされ、穴明きミラー17によって反射されて、
4枚のフィルタ28a、28b、28c、28dを備え
たフィルタユニット27のいずれかのフィルタ28a、
28b、28c、28dに入射する。
【0089】フィルタユニット27は、モータ(図示せ
ず)によって、図1において、左右方向に移動可能に構
成され、使用されるレーザ励起光源の種類によって、所
定のフィルタ28a、28b、28c、28dが、蛍光
または輝尽光25の光路に位置するように構成されてい
る。
【0090】ここに、フィルタ28aは、第1のレーザ
励起光源1を用いて、サンプル22に含まれている蛍光
物質を励起し、蛍光を読み取るときに使用されるフィル
タであり、640nmの波長の光をカットし、640n
mよりも波長の長い光を透過する性質を有している。
【0091】また、フィルタ28bは、第2のレーザ励
起光源2を用いて、サンプル22に含まれている蛍光色
素を励起し、蛍光を読み取るときに使用されるフィルタ
であり、532nmの波長の光をカットし、532nm
よりも波長の長い光を透過する性質を有している。
【0092】さらに、フィルタ28cは、第3のレーザ
励起光源3を用いて、サンプル22に含まれている蛍光
色素を励起し、蛍光を読み取るときに使用されるフィル
タであり、473nmの波長の光をカットし、473n
mよりも波長の長い光を透過する性質を有している。
【0093】また、フィルタ28dは、サンプル22が
蓄積性蛍光体シートである場合に、第1のレーザ励起光
源1を用いて、蓄積性蛍光体シートに含まれた輝尽性蛍
光体を励起し、輝尽性蛍光体から発せられた輝尽光を読
み取るときに使用されるフィルタであり、輝尽性蛍光体
から発光される輝尽光の波長域の光のみを透過し、64
0nmの波長の光をカットする性質を有している。
【0094】したがって、使用すべきレーザ励起光源の
種類、すなわち、サンプルの種類、試料を標識している
蛍光物質の種類に応じて、これらのフィルタ28a、2
8b、28c、28dを選択的に使用することによて、
ノイズとなる波長域の光をカットすることが可能にな
る。
【0095】フィルタユニット27のフィルタ28a、
28b、28cを透過して、所定の波長域の光がカット
された後、蛍光または輝尽光25は、ミラー29に入射
し、反射されて、レンズ30によって、集光される。
【0096】レンズ19とレンズ30は、共焦点光学系
を構成している。このように、共焦点光学系を採用して
いるのは、サンプル22が、スライドガラス板を担体と
したマイクロアレイの場合に、スライドガラス板上に形
成された微小なスポット状試料から放出された蛍光を、
高いS/N比で読み取ることができるようにするためで
ある。
【0097】レンズ30の焦点の位置には、共焦点切り
換え部材31が設けられている。
【0098】図2は、共焦点切り換え部材31の略正面
図である。
【0099】図2に示されるように、共焦点切り換え部
材31は、板状をなし、径の異なる3つのピンホール3
2a、32b、32cが形成されている。
【0100】最も径の小さいピンホール32aは、サン
プル22が、スライドガラス板を担体としたマイクロア
レイの場合に、マイクロアレイから放出された蛍光の光
路に配置されるものであり、最も径の大きいピンホール
32cは、サンプル22が、転写支持体を担体とした蛍
光サンプルの場合に、転写支持体から放出された蛍光の
光路に配置されるものである。
【0101】また、中間の径を有するピンホール32b
は、サンプル22が、蓄積性蛍光体シートである場合
に、輝尽性蛍光体層から放出された輝尽光の光路に配置
されるものである。
【0102】このように、レンズ30の焦点の位置に、
共焦点切り換え部材31を設けて、サンプル22が、ス
ライドガラス板を担体としたマイクロアレイの場合に、
最も径の小さいピンホール32aを蛍光の光路に位置さ
せているのは、サンプル22が、スライドガラス板を担
体としたマイクロアレイの場合には、レーザ光4によっ
て、蛍光色素を励起した結果、蛍光はスライドガラス板
の表面から放出され、発光点は深さ方向にほぼ一定であ
るため、共焦点光学系を用いて、径の小さいピンホール
32aに結像させることがS/N比を向上させる上で望
ましいからである。
【0103】これに対して、サンプル22が、転写支持
体を担体とした蛍光サンプルの場合に、最も径の大きい
ピンホール32cを蛍光の光路に位置させているのは、
サンプル22が、転写支持体を担体とした蛍光サンプル
の場合には、レーザ光4によって、蛍光色素を励起した
ときに、蛍光色素はゲル支持体の深さ方向に分布してお
り、しかも、発光点が深さ方向に変動するので、共焦点
光学系によって、径の小さいピンホールに結像させるこ
とができず、径の小さいピンホールを用いると、試料か
ら放出された蛍光がカットされ、蛍光を光電的に検出し
たときに、十分な信号強度が得られないため、径の大き
いピンホール32cを用いる必要があるからである。
【0104】他方、サンプル22が蓄積性蛍光体シート
である場合に、中間の径を有するピンホール32bを輝
尽光の光路に位置させているのは、レーザ光4によっ
て、輝尽性蛍光体層に含まれた輝尽性蛍光体を励起した
ときは、輝尽光の発光点は輝尽性蛍光体層の深さ方向に
分布し、発光点は深さ方向に変動するので、共焦点光学
系によって、径の小さいピンホールに結像させることが
できず、径の小さいピンホールを用いると、試料から放
出された輝尽光がカットされ、輝尽光を光電的に検出し
たときに、十分な信号強度が得られないが、発光点の深
さ方向における分布も、発光点の深さ方向の変動も、ゲ
ル支持体を担体としたマイクロアレイほどではないた
め、中間の径を有するピンホール32bを用いることが
望ましいからである。
【0105】共焦点切り換え部材31を通過した蛍光あ
るいは輝尽光は、フォトマルチプライア33によって光
電的に検出され、アナログデータが生成される。
【0106】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34によって、ディ
ジタルデータに変換され、データ処理装置35に送られ
る。
【0107】図3は、サンプルステージ20の走査機構
のうち、主走査機構の詳細を示す略斜視図である。
【0108】図3に示されるように、副走査用モータ
(図示せず)により、図3において、矢印Yで示される
副走査方向に移動可能な可動基板40上には、一対のガ
イドレール41、41が固定されており、サンプルステ
ージ20は、一対のガイドレール41、41に、スライ
ド可能に取り付けられた3つのスライド部材42、42
(図3においては、2つのみ図示されている。)に固定
されている。
【0109】図3に示されるように、可動基板40上に
は、主走査用モータ43が固定されており、主走査用モ
ータ43の出力軸43aには、プーリ44に巻回された
タイミングベルト45が巻回されるとともに、ロータリ
ーエンコーダ46が取り付けられている。
【0110】したがって、主走査用モータ43を駆動す
ることによって、サンプルステージ20を、一対のガイ
ドレール41、41に沿って、図3において、矢印Xで
示される主走査方向に往復移動させ、一方、副走査用モ
ータ(図示せず)によって、可動基板40を副走査方向
に移動させることによって、サンプルステージ20を二
次元的に移動させ、サンプルステージ20にセットされ
たサンプル22の全面を、レーザ光4によって、走査す
ることが可能になる。
【0111】本実施態様においては、サンプルステージ
20は、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、主走査方向に移動されるように構成されている。
【0112】ここに、サンプルステージ20の位置は、
ロータリーエンコーダ46により、モニターすることが
できるように構成されている。
【0113】図4は、スキャナの検出系、駆動系、入力
系および制御系を示すブロックダイアグラムである。
【0114】図4に示されるように、スキャナの制御系
は、コントロールユニット50と、RAM51と、EP
ROM52と、データ処理装置35を備えている。
【0115】図4に示されるように、スキャナの検出系
は、ロータリーエンコーダ46と、サンプルステージ2
0にセットされたサンプル22を把持するキャリアの種
類を検出するキャリアセンサ53を備えている。
【0116】図4に示されるように、スキャナの駆動系
は、フィルタユニット27を移動させるフィルタユニッ
トモータ54と、共焦点切り換え部材31を移動させる
切り換え部材モータ55と、サンプルステージ20を主
走査方向に移動させる主走査用モータ43と、サンプル
ステージ20を副走査方向に移動させる副走査用モータ
47と、サンプルステージ20に対して、光学ヘッド1
5のレンズ19を、蛍光あるいは輝尽光25の光路に沿
って移動させるステッピングモータ56を備えている。
【0117】また、図4に示されるように、スキャナの
入力系は、キーボード57を備えている。
【0118】以上のように構成された共焦点光学系を備
えたスキャナにおいては、フォーカス位置決定用デバイ
スを用いて、以下のようにして、共焦点光学系のフォー
カスが調整される。
【0119】図5は、共焦点光学系のフォーカスを調整
するためのフォーカス位置決定用デバイスの略縦断面図
である。
【0120】図5に示されるように、共焦点光学系のフ
ォーカスを調整するためのフォーカス位置決定用デバイ
ス60は、レーザ光4が照射されると、蛍光を放出し、
その一方で、レーザ光4の照射を受けても、劣化しない
性質を有する色ガラスフィルタ61と、その表面に形成
されたクロムの蒸着膜62のマスクを備え、クロムの蒸
着膜62によって、レーザ光4の走査方向に対する幅
が、レーザ光4のビーム径とほぼ同等のスリット63が
形成されている。
【0121】本実施態様においては、色ガラスフィルタ
61は、ほぼ矩形状をなし、珪砂、ソーダ灰および石灰
石などを主成分とするガラスに、CdS−CdSeの固
溶体をドープして形成され、スリット63は、色ガラス
フィルタ61のほぼ中央部に形成されている。
【0122】本実施態様においては、レーザ光4のビー
ム径は10ミクロンに調整されており、したがって、レ
ーザ光4の走査方向に対する幅が、約10ミクロンにな
るように、スリット63が形成されている。
【0123】また、本実施態様においては、クロムの蒸
着膜62は、10ミクロン以下の膜厚を有するように形
成されている。
【0124】本実施態様においては、以下のようにし
て、スキャナの共焦点光学系のフォーカスが調整され
る。
【0125】共焦点光学系のフォーカス位置決定にあた
っては、まず、フォーカス位置決定用デバイス60が、
サンプルステージ20に載置される。
【0126】次いで、オペレータによって、フォーカス
位置決定信号が、キーボード57に入力されると、フォ
ーカス位置決定信号は、コントロールユニット50に出
力される。
【0127】フォーカス位置決定信号が入力されると、
コントロールユニット50は、光学ヘッド15のレンズ
19の位置を検出して、ゼロ位置として、RAM51に
記憶させる。
【0128】さらに、コントロールユニット50は、切
り換え部材モータ72に駆動信号を出力して、共焦点切
り換え部材31を、最も径の小さいピンホール32aが
光路内に位置するように、移動させる。
【0129】次いで、コントロールユニット50は、フ
ィルタユニットモータ71に駆動信号を出力して、フィ
ルタユニット27を移動させ、640nmの波長の光を
カットし、640nmよりも波長の長い光を透過する性
質を有するフィルタ28aを光路内に位置させるととも
に、第1のレーザ励起光源1を起動させる。
【0130】その結果、第1のレーザ励起光源1から、
640nmの波長のレーザ光4が発せられ、レーザ光4
は、コリメータレンズ5によって、平行な光とされた
後、ミラー6によって反射され、第1のダイクロイック
ミラー7および第2のダイクロイックミラー8を透過し
て、光学ヘッド15に入射する。
【0131】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20に載置されて、セットされた
フォーカス位置決定用デバイス60に入射する。
【0132】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動されるとともに、副走査用モータ47により、
図3において、矢印Yで示される副走査方向に移動され
るため、640nmの波長のレーザ光4によって、サン
プルステージ20に載置されたフォーカス位置決定用デ
バイス60の全面が走査される。
【0133】スリット63を介して、レーザ光4の照射
を受けると、フォーカス位置決定用デバイス60の色ガ
ラスフィルタ61が励起されて、蛍光が放出される。
【0134】色ガラスフィルタ61から放出された蛍光
25は、レンズ19によって、平行な光とされ、穴明き
ミラー18によって反射され、フィルタユニット27に
入射する。
【0135】フィルタユニット27は、フィルタ28a
が光路内に位置するように移動されているため、蛍光2
5は、640nmの波長の光をカットし、640nmよ
りも波長の長い光を透過させる性質を有するフィルタ2
8aに入射する。
【0136】ここに、蛍光の波長は、励起光であるレー
ザ光4の波長よりも長いため、レーザ光4がカットさ
れ、色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25のみ
が、フィルタ28aを透過する。
【0137】フィルタ28aを透過した蛍光25は、ミ
ラー29によって反射され、レンズ30によって、最も
径の小さいピンホール32a上に集光され、フォトマル
チプライア33によって、光電的に検出されて、アナロ
グデータが生成される。
【0138】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34により、ディジ
タルデータに変換されて、データ処理装置35に送られ
る。
【0139】図6は、データ処理装置のブロックダイア
グラムである。
【0140】図6に示されるように、データ処理装置3
5は、メモリ65と、データ処理部66を備えている。
【0141】A/D変換器34により、ディジタルデー
タに変換され、データ処理装置35に出力されたディジ
タルデータは、メモリ65に記憶される。
【0142】フォーカス位置決定用デバイス60の全面
が、640nmの波長のレーザ光4によって走査され、
色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25が、フォ
トマルチプライア33によって光電的に検出され、A/
D変換器34によってディジタル化されたディジタルデ
ータが、メモリ65に記憶されると、コントロールユニ
ット50は、第1のレーザ励起光源1をオフし、データ
処理部66に、ディジタルデータを、メモリ65から読
み出させる。
【0143】データ処理部66は、メモリ65から読み
出したディジタルデータの信号強度を積分し、蛍光25
の信号強度の積分値を、コントロールユニット50に出
力する。
【0144】コントロールユニット50は、データ処理
装置35のデータ処理部66から入力された蛍光25の
信号強度の積分値を、光学ヘッド15のレンズ19の位
置、すなわち、光学ヘッド15のレンズ19を移動させ
るステッピングモータ56に与えた駆動パルスと関連づ
けて、RAM51に記憶させる。この時点では、まだ、
ステッピングモータ56に、駆動パルスを与えていない
ため、ゼロ位置が、蛍光25の信号強度の積分値ととも
に、RAM51に記憶される。
【0145】データ処理装置35のデータ処理部66か
ら、蛍光25の信号強度の積分値が入力され、RAM5
1に記憶させると、コントロールユニット50は、ステ
ッピングモータ56に、駆動パルス信号を出力して、光
学ヘッド15のレンズ19を、蛍光あるいは輝尽光25
の光路に沿って、サンプルステージ20に対し、10ミ
クロンだけ、移動させ、再び、第1のレーザ励起光源1
を起動する。
【0146】フォーカス位置決定用デバイス60の全面
が、640nmの波長のレーザ光4によって走査され、
色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25が、フォ
トマルチプライア33によって光電的に検出され、A/
D変換器34によってディジタル化されたディジタルデ
ータが、メモリ65に記憶されると、コントロールユニ
ット50は、第1のレーザ励起光源1をオフし、データ
処理部66に、ディジタルデータを、メモリ65から読
み出させる。
【0147】データ処理部66は、メモリ65から読み
出したディジタルデータの信号強度を積分し、蛍光25
の信号強度の積分値を、コントロールユニット50に出
力する。
【0148】コントロールユニット50は、データ処理
装置35のデータ処理部66から入力された蛍光25の
信号強度の積分値を、光学ヘッド15のレンズ19の位
置、すなわち、光学ヘッド15のレンズ19を移動させ
るステッピングモータ56に与えた駆動パルスと関連づ
けて、RAM51に記憶させる。
【0149】データ処理装置35のデータ処理部66か
ら、蛍光25の信号強度の積分値が入力され、RAM5
1に記憶させると、コントロールユニット50は、ステ
ッピングモータ56に、駆動パルス信号を出力して、光
学ヘッド15のレンズ19を、蛍光あるいは輝尽光25
の光路に沿って、サンプルステージ20に対し、10ミ
クロンだけ、移動させ、再び、第1のレーザ励起光源1
を起動する。
【0150】640nmの波長のレーザ光4による色ガ
ラスフィルタ61の励起、蛍光25の検出、ディジタル
データ生成、蛍光25の信号強度の積分値の算出および
RAM51への記憶のサイクルを、所定の回数にわたっ
て、繰り返した後、コントロールユニット50は、RA
M51に記憶されている蛍光25の信号強度の積分値
と、光学ヘッド15のレンズ19の位置に基づき、蛍光
25の信号強度の積分値の最大値が生成されたレンズ1
9の位置を、光学ヘッド15のレンズ19を、ゼロ位置
から移動させるために、ステッピングモータ56に与え
た駆動パルス数の形で求め、第1のレーザ励起光源1を
用いた場合の共焦点光学系のフォーカス位置データとし
て、EPROM52に記憶させる。
【0151】こうして、第1のレーザ励起光源1を用い
た場合の共焦点光学系のフォーカス位置が決定されて、
ステッピングモータ56に与えた駆動パルスの形で、R
AM51に記憶されると、コントロールユニット50
は、ステッピングモータ56に駆動信号を出力して、光
学ヘッド15のレンズ19を元の位置に復帰させ、その
位置をゼロ位置として、RAM51に記憶させる。
【0152】次いで、最も径の小さいピンホール32a
が光路内に位置させたまま、共焦点切り換え部材31を
保持しつつ、コントロールユニット50は、フィルタユ
ニットモータ71に駆動信号を出力して、フィルタユニ
ット27を移動させ、532nmの波長の光をカット
し、532nmよりも波長の長い光を透過する性質を有
するフィルタ28bを光路内に位置させるとともに、第
2のレーザ励起光源2を起動させる。
【0153】第2のレーザ励起光源2から発せられた5
32nmの波長のレーザ光4は、コリメータレンズ9に
よって、平行な光とされた後、第1のダイクロイックミ
ラー7に入射して、反射される。
【0154】第1のダイクロイックミラー7によって反
射されたレーザ光4は、第2のダイクロイックミラー8
を透過し、光学ヘッド15に入射する。
【0155】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20に載置されて、セットされた
フォーカス位置決定用デバイス60に入射する。
【0156】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動されるとともに、副走査用モータ47により、
図3において、矢印Yで示される副走査方向に移動され
るため、532nmの波長のレーザ光4によって、サン
プルステージ20に載置されたフォーカス位置決定用デ
バイス60の全面が走査される。
【0157】スリット63を介して、レーザ光4の照射
を受けると、フォーカス位置決定用デバイス60の色ガ
ラスフィルタ61が励起されて、蛍光が放出される。
【0158】色ガラスフィルタ61から放出された蛍光
25は、レンズ19によって、平行な光とされ、穴明き
ミラー18によって反射され、フィルタユニット27に
入射する。
【0159】フィルタユニット27は、フィルタ28b
が光路内に位置するように移動されているため、蛍光2
5は、532nmの波長の光をカットし、532nmよ
りも波長の長い光を透過させる性質を有するフィルタ2
8bに入射する。
【0160】ここに、蛍光の波長は、励起光であるレー
ザ光4の波長よりも長いため、レーザ光4がカットさ
れ、色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25のみ
が、フィルタ28bを透過する。
【0161】フィルタ28bを透過した蛍光25は、ミ
ラー29によって反射され、レンズ30によって、最も
径の小さいピンホール32a上に集光され、フォトマル
チプライア33によって、光電的に検出されて、アナロ
グデータが生成される。
【0162】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34により、ディジ
タルデータに変換されて、データ処理装置35に送られ
る。
【0163】A/D変換器34により、ディジタルデー
タに変換され、データ処理装置35に出力されたディジ
タルデータは、メモリ65に記憶される。
【0164】フォーカス位置決定用デバイス60の全面
が、532nmの波長のレーザ光4によって走査され、
色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25が、フォ
トマルチプライア33によって光電的に検出され、A/
D変換器34によってディジタル化されたディジタルデ
ータが、メモリ65に記憶されると、コントロールユニ
ット50は、第2のレーザ励起光源2をオフし、データ
処理部66に、ディジタルデータを、メモリ65から読
み出させる。
【0165】データ処理部66は、メモリ65から読み
出したディジタルデータの信号強度を積分し、蛍光25
の信号強度の積分値を、コントロールユニット50に出
力する。
【0166】コントロールユニット50は、データ処理
装置35のデータ処理部66から入力された蛍光25の
信号強度の積分値を、光学ヘッド15のレンズ19の位
置、すなわち、光学ヘッド15のレンズ19を移動させ
るステッピングモータ56に与えた駆動パルスと関連づ
けて、RAM51に記憶させる。この時点では、まだ、
ステッピングモータ56に、駆動パルスを与えていない
ため、ゼロ位置が、蛍光25の信号強度の積分値ととも
に、RAM51に記憶される。
【0167】データ処理装置35のデータ処理部66か
ら、蛍光25の信号強度の積分値が入力され、RAM5
1に記憶させると、コントロールユニット50は、ステ
ッピングモータ56に、駆動パルス信号を出力して、光
学ヘッド15のレンズ19を、蛍光あるいは輝尽光25
の光路に沿って、サンプルステージ20に対し、10ミ
クロンだけ、移動させ、再び、第2のレーザ励起光源2
を起動する。
【0168】こうして、第1のレーザ励起光源1を用い
た場合と全く同様に、532nmの波長のレーザ光4に
よる色ガラスフィルタ61の励起、蛍光25の検出、デ
ィジタルデータ生成、蛍光25の信号強度の積分値の算
出およびRAM51への記憶のサイクルを、所定の回数
にわたって、繰り返した後、コントロールユニット50
は、RAM51に記憶されている蛍光25の信号強度の
積分値と、光学ヘッド15のレンズ19の位置に基づ
き、蛍光25の信号強度の積分値の最大値が生成された
レンズ19の位置を、光学ヘッド15のレンズ19を、
ゼロ位置から移動させるために、ステッピングモータ5
6に与えた駆動パルス数の形で求め、第2のレーザ励起
光源2を用いた場合の共焦点光学系のフォーカス位置デ
ータとして、EPROM52に記憶させる。
【0169】以上のようにして、第2のレーザ励起光源
2を用いた場合における共焦点光学系のフォーカス位置
が決定されて、ステッピングモータ56に与えた駆動パ
ルスの形で、RAM51に記憶されると、コントロール
ユニット50は、ステッピングモータ56に駆動信号を
出力して、光学ヘッド15のレンズ19を元の位置に復
帰させ、その位置をゼロ位置として、RAM51に記憶
させる。
【0170】次いで、最も径の小さいピンホール32a
が光路内に位置させたまま、共焦点切り換え部材31を
保持しつつ、コントロールユニット50は、フィルタユ
ニットモータ71に駆動信号を出力して、フィルタユニ
ット27を移動させ、473nmの波長の光をカット
し、473nmよりも波長の長い光を透過する性質を有
するフィルタ28cを光路内に位置させるとともに、第
3のレーザ励起光源3を起動させる。
【0171】第3のレーザ励起光源3から発せられた4
73nmの波長のレーザ光4は、第2のダイクロイック
ミラー8によって、反射され、光学ヘッド15に入射す
る。
【0172】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20に載置され、セットされたフ
ォーカス位置決定用デバイス60に入射する。
【0173】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動されるとともに、副走査用モータ47により、
図3において、矢印Yで示される副走査方向に移動され
るため、473nmの波長のレーザ光4によって、サン
プルステージ20に載置されたフォーカス位置決定用デ
バイス60の全面が走査される。
【0174】スリット63を介して、レーザ光4の照射
を受けると、フォーカス位置決定用デバイス60の色ガ
ラスフィルタ61が励起されて、蛍光が放出される。
【0175】色ガラスフィルタ61から放出された蛍光
25は、レンズ19によって、平行な光とされ、穴明き
ミラー18によって反射され、フィルタユニット27に
入射する。
【0176】フィルタユニット27は、フィルタ28c
が光路内に位置するように移動されているため、蛍光2
5は、473nmの波長の光をカットし、473nmよ
りも波長の長い光を透過させる性質を有するフィルタ2
8bに入射する。
【0177】ここに、蛍光の波長は、励起光であるレー
ザ光4の波長よりも長いため、レーザ光4がカットさ
れ、色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25のみ
が、フィルタ28cを透過する。
【0178】フィルタ28cを透過した蛍光25は、ミ
ラー29によって反射され、レンズ30によって、最も
径の小さいピンホール32a上に集光され、フォトマル
チプライア33によって、光電的に検出されて、アナロ
グデータが生成される。
【0179】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34により、ディジ
タルデータに変換されて、データ処理装置35に送られ
る。
【0180】A/D変換器34により、ディジタルデー
タに変換され、データ処理装置35に出力されたディジ
タルデータは、メモリ65に記憶される。
【0181】フォーカス位置決定用デバイス60の全面
が、473nmの波長のレーザ光4によって走査され、
色ガラスフィルタ61から放出された蛍光25が、フォ
トマルチプライア33によって光電的に検出され、A/
D変換器34によってディジタル化されたディジタルデ
ータが、メモリ65に記憶されると、コントロールユニ
ット50は、第3のレーザ励起光源3をオフし、データ
処理部66に、ディジタルデータを、メモリ65から読
み出させる。
【0182】データ処理部66は、メモリ65から読み
出したディジタルデータの信号強度を積分し、蛍光25
の信号強度の積分値を、コントロールユニット50に出
力する。
【0183】コントロールユニット50は、データ処理
装置35のデータ処理部66から入力された蛍光25の
信号強度の積分値を、光学ヘッド15のレンズ19の位
置、すなわち、光学ヘッド15のレンズ19を移動させ
るステッピングモータ56に与えた駆動パルスと関連づ
けて、RAM51に記憶させる。この時点では、まだ、
ステッピングモータ56に、駆動パルスを与えていない
ため、ゼロ位置が、蛍光25の信号強度の積分値ととも
に、RAM51に記憶される。
【0184】データ処理装置35のデータ処理部66か
ら、蛍光25の信号強度の積分値が入力され、RAM5
1に記憶させると、コントロールユニット50は、ステ
ッピングモータ56に、駆動パルス信号を出力して、光
学ヘッド15のレンズ19を、蛍光あるいは輝尽光25
の光路に沿って、サンプルステージ20に対し、10ミ
クロンだけ、移動させ、再び、第3のレーザ励起光源3
を起動する。
【0185】こうして、第1のレーザ励起光源1を用い
た場合と全く同様に、473nmの波長のレーザ光4に
よる色ガラスフィルタ61の励起、蛍光25の検出、デ
ィジタルデータ生成、蛍光25の信号強度の積分値の算
出およびRAM51への記憶のサイクルを、所定の回数
にわたって、繰り返した後、コントロールユニット50
は、RAM51に記憶されている蛍光25の信号強度の
積分値と、光学ヘッド15のレンズ19の位置に基づ
き、蛍光25の信号強度の積分値の最大値が生成された
レンズ19の位置を、光学ヘッド15のレンズ19を、
ゼロ位置から移動させるために、ステッピングモータ5
6に与えた駆動パルス数の形で求め、第3のレーザ励起
光源3を用いた場合の共焦点光学系のフォーカス位置デ
ータとして、EPROM52に記憶させる。
【0186】図7は、以上のようにして、ステッピング
モータ56により、光学ヘッド15のレンズ19の位置
を変えつつ、フォーカス位置決定用デバイス60を、6
40nmの波長のレーザ光4、532nmの波長のレー
ザ光4および473nmの波長のレーザ光4によって、
走査し、フォトマルチプライア33によって、色ガラス
フィルタ61から放出された蛍光25を光電的に検出
し、A/D変換器34により、ディジタル化したディジ
タルデータの信号強度の積分値をプロットしたグラフで
ある。
【0187】図7において、Aで示されるプロットデー
タは、640nmの波長のレーザ光4を用いた場合のデ
ィジタルデータの信号強度の積分値のプロットデータで
あり、Bで示されるプロットデータは、532nmの波
長のレーザ光4を用いた場合のディジタルデータの信号
強度の積分値のプロットデータ、Cで示されるプロット
データは、473nmの波長のレーザ光4を用いた場合
のディジタルデータの信号強度の積分値のプロットデー
タである。レーザ光4の波長によって、共焦点光学系の
フォーカスの位置は異なるため、レーザ光4の波長によ
り、それぞれ、異なるプロットデータが得られている。
【0188】レンズ19の焦点に、フォーカス位置決定
用デバイス60の色ガラスフィルタ61が位置している
ときに、蛍光25の集光効率が最も大きいため、図7に
示されるように、各波長のレーザ光4を用いた場合に、
フォトマルチプライア33によって検出された蛍光25
の信号強度の積分値のプロットデータは、フォーカス位
置決定用デバイス60の色ガラスフィルタ61が、レン
ズ19の焦点に、すなわち、フォーカス位置に位置して
いたときに、ピークを有している。
【0189】ここに、色ガラスフィルタ61は、レーザ
光4に照射を受けても、劣化することがないため、こう
して得られた蛍光25の信号強度の積分値のプロットデ
ータに基づき、蛍光25の信号強度の積分値のプロット
データのピークの位置に対応するレンズ19の位置を検
出することによって、共焦点光学系のフォーカス位置を
決定することが可能になる。
【0190】以上のようにして、共焦点光学系のフォー
カス位置データが決定され、EPROM52に記憶され
たスキャナは、以下のようにして、スライドガラス板を
担体とし、蛍光色素によって選択的に標識された試料の
数多くのスポットが、スライドガラス板上に形成されて
いるマイクロアレイを、レーザ光4によって、走査し
て、蛍光色素を励起し、蛍光色素から放出された蛍光を
光電的に検出して、生化学解析用のデータを生成する。
【0191】まず、サンプルステージ20に、サンプル
22であるマイクロアレイを保持したサンプルキャリア
21がセットされると、キャリアセンサ53によって、
サンプルキャリア21の種類が検出され、キャリア検出
信号がコントロールユニット50に出力される。
【0192】キャリアセンサ53からキャリア検出信号
を受けると、コントロールユニット50は、キャリア検
出信号に基づき、切り換え部材モータ55に駆動信号を
出力して、共焦点切り換え部材31を、最も径の小さい
ピンホール32aが光路内に位置するように、移動させ
る。
【0193】次いで、ユーザーによって、標識物質であ
る蛍光物質の種類およびスタート信号が、キーボード5
7に入力されると、キーボード57から指示信号がコン
トロールユニット50に出力される。
【0194】たとえば、蛍光物質の種類として、Cy−
5(登録商標)が入力されると、コントロールユニット
50は、入力された指示信号にしたがって、フィルタユ
ニットモータ54に駆動信号を出力して、フィルタユニ
ット27を移動させ、640nmの波長の光をカット
し、640nmよりも波長の長い光を透過する性質を有
するフィルタ28aを光路内に位置させるとともに、E
PROM52に記憶された第1のレーザ励起光源1を用
いた場合の共焦点光学系のフォーカス位置データにした
がって、所定の駆動パルスの駆動信号を、ステッピング
モータ56に出力し、光学ヘッド15のレンズ19を所
定の位置に移動させて、その位置に保持させる。
【0195】次いで、コントロールユニット50は、第
1のレーザ励起光源1に駆動信号を出力して、オンさせ
る。
【0196】第1のレーザ励起光源1から発せられたレ
ーザ光4は、コリメータレンズ5によって、平行な光と
された後、ミラー6によって反射され、第1のダイクロ
イックミラー7および第2のダイクロイックミラー8を
透過して、光学ヘッド15に入射する。
【0197】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20にセットされたサンプル22
であるマイクロアレイに入射する。
【0198】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動され、副走査用モータ47によって、図3にお
いて、矢印Yで示される副走査方向に移動されるため、
レーザ光4によって、サンプルキャリア21にセットさ
れたサンプル22であるマイクロアレイの全面が走査さ
れる。
【0199】レーザ光4の照射を受けると、プローブD
NAを標識している蛍光色素、たとえば、Cy−5が励
起され、蛍光25が放出される。マイクロアレイの担体
として、スライドガラス板が用いられている場合には、
蛍光色素はスライドガラス板の表面にのみ分布している
ので、蛍光25もスライドガラス板の表面からのみ、発
せられる。
【0200】スライドガラス板の表面から発せられた蛍
光25は、レンズ19によって、平行な光とされ、穴明
きミラー18によって反射され、フィルタユニット27
に入射する。
【0201】ここに、EPROM52に記憶された第1
のレーザ励起光源1を用いた場合の共焦点光学系のフォ
ーカス位置データに基づいて、光学ヘッド15のレンズ
19は、その焦点が、サンプル22の表面に一致する位
置に保持されているので、スライドガラス板の表面に分
布している蛍光色素から放出された蛍光25を最も効率
的に集光することが可能になる。
【0202】フィルタユニット27は、フィルタ28a
が光路内に位置するように移動されているため、蛍光2
5はフィルタ28aに入射し、640nmの波長の光が
カットされ、640nmよりも波長の長い光のみが透過
される。
【0203】フィルタ28aを透過した蛍光25は、ミ
ラー29によって反射され、レンズ30によって、結像
される。
【0204】レーザ光4の照射に先立って、共焦点切り
換え部材31が、最も径の小さいピンホール32aが光
路内に位置するように移動されているため、蛍光25が
ピンホール32a上に結像され、フォトマルチプライア
33によって、光電的に検出されて、アナログデータが
生成される。
【0205】このように、共焦点光学系を用いて、スラ
イドガラス板の表面の蛍光色素から発せられた蛍光25
をフォトマルチプライア33に導いて、光電的に検出し
ているので、データ中のノイズを最小に抑えることが可
能になる。
【0206】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34によって、ディ
ジタルデータに変換され、データ処理装置35に送られ
て、必要に応じて、データ処理が施され、CRTの画面
などの表示手段に、表示される。
【0207】一方、蛍光色素によって、選択的に標識さ
れた変性DNAを含む転写支持体を担体とした蛍光サン
プルを、レーザ光4によって走査して、蛍光色素を励起
し、蛍光色素から放出された蛍光を光電的に検出して、
生化学解析用のデータを生成する場合には、蛍光色素に
よって、選択的に標識された変性DNAを含む転写支持
体を担体とした蛍光サンプル22が保持されたサンプル
キャリア21が、サンプルステージ20にセットされ
る。
【0208】こうして、蛍光サンプル22が保持された
サンプルキャリア21が、サンプルステージ20にセッ
トされると、キャリアセンサ53によって、サンプルキ
ャリア21の種類が検出され、キャリア検出信号がコン
トロールユニット50に出力される。
【0209】キャリアセンサ53からキャリア検出信号
を受けると、コントロールユニット50は、キャリア検
出信号に基づき、切り換え部材モータ55に駆動信号を
出力して、共焦点切り換え部材31を、最も径の大きい
ピンホール32cが光路内に位置するように、移動させ
る。
【0210】次いで、オペレータによって、標識物質で
ある蛍光物質の種類およびスタート信号が、キーボード
57に入力されると、キーボード57から指示信号がコ
ントロールユニット50に出力される。
【0211】たとえば、試料がローダミンによって標識
されているときは、ローダミンは、532nmの波長の
レーザによって、最も効率的に励起することができるか
ら、コントロールユニット50は第2のレーザ励起光源
2を選択するとともに、フィルタ32bを選択し、フィ
ルタユニットモータ54に駆動信号を出力して、フィル
タユニット27を移動させ、532nmの波長の光をカ
ットし、532nmよりも波長の長い光を透過する性質
を有するフィルタ28bを、蛍光25の光路内に位置さ
せるとともに、EPROM52に記憶された第2のレー
ザ励起光源2を用いた場合の共焦点光学系のフォーカス
位置データにしたがって、所定の駆動パルスの駆動信号
を、ステッピングモータ56に出力し、光学ヘッド15
のレンズ19を所定の位置に移動させて、その位置に保
持させる。
【0212】次いで、コントロールユニット50は、第
2のレーザ励起光源2に駆動信号を出力して、オンさせ
る。
【0213】第2のレーザ励起光源2から発せられた5
32nmの波長のレーザ光4は、コリメータレンズ9に
よって、平行な光とされた後、第1のダイクロイックミ
ラー7に入射して、反射される。
【0214】第1のダイクロイックミラー7によって反
射されたレーザ光4は、第2のダイクロイックミラー8
を透過し、光学ヘッド15に入射する。
【0215】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20にセットされた蛍光サンプル
22に入射する。
【0216】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動され、副走査用モータ47によって、図3にお
いて、矢印Yで示される副走査方向に移動されるため、
レーザ光4によって、サンプルキャリア21にセットさ
れた蛍光サンプル22の全面が走査される。
【0217】レーザ光4の照射を受けると、試料を標識
している蛍光色素、たとえば、ローダミンが励起され、
蛍光25が放出される。蛍光サンプル22の担体とし
て、転写支持体が用いられている場合には、蛍光色素
は、転写支持体の深さ方向に分布しているため、転写支
持体の深さ方向の所定の範囲から、蛍光25が発せら
れ、発光点の深さ方向の位置も変動する。
【0218】転写支持体を担体とした蛍光サンプル22
から発せられた蛍光25は、レンズ19によって、平行
な光とされ、穴明きミラー18によって反射され、フィ
ルタユニット27に入射する。
【0219】ここに、EPROM52に記憶された第2
のレーザ励起光源2を用いた場合の共焦点光学系のフォ
ーカス位置データに基づいて、光学ヘッド15のレンズ
19は、その焦点が、サンプル22の表面に一致する位
置に保持されているので、転写支持体に含まれている蛍
光色素から放出された蛍光25を最も効率的に集光する
ことが可能になる。
【0220】フィルタユニット27は、フィルタ28b
が光路内に位置するように移動されているため、蛍光2
5はフィルタ28bに入射し、532nmの波長の光が
カットされ、532nmよりも波長の長い光のみが透過
される。
【0221】フィルタ28bを透過した蛍光は、ミラー
29によって反射され、レンズ30によって、集光され
るが、蛍光25は、転写支持体の深さ方向の所定の範囲
から発せられているため、結像はしない。
【0222】レーザ光4の照射に先立って、共焦点切り
換え部材31が、最も径の大きいピンホール32cが光
路内に位置するように移動されているため、蛍光25は
最も径の大きいピンホール32cを通過して、フォトマ
ルチプライア33によって、光電的に検出されて、アナ
ログデータが生成される。したがって、スライドガラス
板を担体としたマイクロアレイの表面の蛍光色素から発
せられた蛍光25を、高いS/N比で、検出するため
に、共焦点光学系を用いているにもかかわらず、転写支
持体の深さ方向の所定の範囲から発せられた蛍光25も
高い信号強度で検出することが可能になる。
【0223】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34によって、ディ
ジタルデータに変換され、データ処理装置35に送られ
て、必要に応じて、データ処理が施され、CRTの画面
などの表示手段に、表示される。
【0224】これに対して、放射性標識物質によって選
択的に標識された試料の数多くのスポットが形成された
メンブレンフィルタなどの担体を、輝尽性蛍光体を含む
輝尽性蛍光体層が形成された蓄積性蛍光体シートと密着
させて、輝尽性蛍光体層を露光して得た放射性標識物質
の位置情報が記録された蓄積性蛍光体シートの輝尽性蛍
光体層を、レーザ光4によって走査して、輝尽性蛍光体
を励起し、輝尽性蛍光体から放出された輝尽光を光電的
に検出して、生化学解析用のデータを生成する場合に
は、輝尽性蛍光体層が形成された蓄積性蛍光体シートを
保持したサンプルキャリア21が、サンプルステージ2
0にセットされる。
【0225】輝尽性蛍光体層が形成された蓄積性蛍光体
シートを保持したサンプルキャリア21が、サンプルス
テージ20にセットされると、キャリアセンサ53によ
って、サンプルキャリア21の種類が検出され、キャリ
ア検出信号がコントロールユニット50に出力される。
【0226】キャリアセンサ53からキャリア検出信号
を受けると、コントロールユニット50は、キャリア検
出信号に基づき、切り換え部材モータ72に駆動信号を
出力して、共焦点切り換え部材31を、中間の径を有す
るピンホール32bが光路内に位置するように、移動さ
せる。
【0227】さらに、コントロールユニット50は、入
力された指示信号にしたがって、フィルタユニットモー
タ71に駆動信号を出力して、フィルタユニット27を
移動させ、輝尽性蛍光体から発光される輝尽光の波長域
の光のみを透過し、640nmの波長の光をカットする
性質を有するフィルタ28dを光路内に位置させるとと
もに、EPROM52に記憶された第1のレーザ励起光
源1を用いた場合の共焦点光学系のフォーカス位置デー
タにしたがって、所定の駆動パルスの駆動信号を、ステ
ッピングモータ56に出力し、光学ヘッド15のレンズ
19を所定の位置に移動させて、その位置に保持させ
る。
【0228】次いで、コントロールユニット50は、第
1のレーザ励起光源1に駆動信号を出力して、オンさせ
る。
【0229】第1のレーザ励起光源1から発せられたレ
ーザ光4は、コリメータレンズ5によって、平行な光と
された後、ミラー6によって反射され、第1のダイクロ
イックミラー7および第2のダイクロイックミラー8を
透過して、光学ヘッド15に入射する。
【0230】光学ヘッド15に入射したレーザ光4は、
ミラー16によって反射され、穴明きミラー18に形成
された穴17を通過して、レンズ19によって集光さ
れ、サンプルステージ20にセットされたサンプル22
である蓄積性蛍光体シートに入射する。
【0231】サンプルステージ20は、主走査用モータ
43によって、図3において、矢印Xで示される主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、移動され、副走査用モータ47によって、図3にお
いて、矢印Yで示される副走査方向に移動されるため、
レーザ光4によって、サンプルキャリア21にセットさ
れたサンプル22である蓄積性蛍光体シートの輝尽性蛍
光体層の全面が走査される。
【0232】レーザ光4の照射を受けると、輝尽性蛍光
体層に含まれている輝尽性蛍光体が励起され、輝尽光2
5が放出される。蓄積性蛍光体シートの場合には、輝尽
性蛍光体は輝尽性蛍光体層中に含まれており、ある程
度、輝尽性蛍光体層の深さ方向に分布しているため、輝
尽性蛍光体層の深さ方向の所定の範囲から、輝尽光が発
せられ、発光点の深さ方向の位置も変動する。しかしな
がら、輝尽性蛍光体層は薄いため、転写支持体の場合ほ
ど、発光点は深さ方向に分布してはいない。
【0233】輝尽性蛍光体層から放出された輝尽光25
は、レンズ19によって、平行な光とされ、穴明きミラ
ー18によって反射されて、フィルタユニット27に入
射する。
【0234】ここに、EPROM52に記憶された第1
のレーザ励起光源1を用いた場合の共焦点光学系のフォ
ーカス位置データに基づいて、光学ヘッド15のレンズ
19は、その焦点が、サンプル22の表面に一致する位
置に保持されているので、輝尽性蛍光体層に含まれた輝
尽性蛍光体から放出された輝尽光25を最も効率的に集
光することが可能になる。
【0235】フィルタユニット27は、フィルタ28d
が光路内に位置するように移動されているため、輝尽光
25はフィルタ28dに入射し、640nmの波長の光
がカットされ、輝尽性蛍光体から発光される輝尽光の波
長域の光のみが透過される。
【0236】フィルタ28dを透過した輝尽光25は、
ミラー29によって反射され、レンズ30によって、集
光されるが、輝尽光は、蓄積性蛍光体シートに形成され
た輝尽性蛍光体層の深さ方向の所定の範囲から発せられ
ているため、結像はしない。
【0237】レーザ光4の照射に先立って、共焦点切り
換え部材31が、中間の径を有するピンホール32bが
光路内に位置するように移動されているため、輝尽光は
中間の径を有するピンホール32bを通過して、フォト
マルチプライア33により、光電的に検出されて、アナ
ログデータが生成される。したがって、スライドガラス
板を担体としたマイクロアレイの表面の蛍光色素から発
せられた蛍光25を、高いS/N比で、検出するため
に、共焦点光学系を用いているにもかかわらず、蓄積性
蛍光体シートに形成された輝尽性蛍光体層の深さ方向の
所定の範囲から発せられた輝尽光25も高い信号強度で
検出することが可能になる。
【0238】フォトマルチプライア33によって生成さ
れたアナログデータはA/D変換器34によって、ディ
ジタルデータに変換され、データ処理装置35に送られ
て、必要に応じて、データ処理が施され、CRTの画面
などの表示手段に、表示される。
【0239】本実施態様によれば、レーザ光4に照射を
受けても、劣化することがない色ガラスフィルタ61の
表面に、クロムの蒸着膜62を設けて、レーザ光4のビ
ーム径をほぼ同等の幅を有するスリット63を形成した
フォーカス位置決定用デバイス60を、サンプルステー
ジ20にセットし、640nm、532nmおよび47
3nmの波長のレーザ光4によって、フォーカス位置決
定用デバイス60の全面を走査し、色ガラスフィルタ6
1が励起されて、放出した蛍光25を光電的に検出し、
検出した蛍光25の信号強度の積分値が最大となる位置
を、光学ヘッド15のレンズ19のフォーカス位置と決
定しているから、所望のように、共焦点光学系のフォー
カス位置を決定することが可能になる。
【0240】また、本実施態様によれば、光学ヘッド1
5のレンズ19のフォーカス位置データを、EPROM
52に記憶させ、サンプル22のデータを生成するにあ
たっては、EPROM52に記憶されているフォーカス
位置データにしたがって、ステッピングモータ56を駆
動し、光学ヘッド15のレンズ19をフォーカス位置に
移動させ、サンプル22の位置が、レンズ19の焦点に
一致する位置に、レンズ19を保持し、サンプル22
を、レーザ光4によって、走査し、サンプル22から放
出された蛍光あるいは輝尽光25を、光学ヘッド15の
レンズ19によって集光しているから、十分な光量の蛍
光あるいは輝尽光25を、フォトマルチプライア33に
受光させ、高い解像度で、サンプル22のディジタルデ
ータを生成することが可能になる。
【0241】図8は、本発明の他の好ましい実施態様に
かかる共焦点光学系のフォーカスを調整するためのフォ
ーカス位置決定用デバイスの略縦断面図である。
【0242】図8に示されるように、本実施態様にかか
るフォーカス位置決定用デバイス70は、InGaAs
P層71と、GaAs層72とが積層された積層体73
を備え、InGaAsP層71に表面は、クロムのスパ
ッタリング膜74によって、マスクがされ、それによっ
て、ピンホール75が形成されている。
【0243】本実施態様においては、InGaAsP層
71とGaAs層72との積層体73は、ほぼ矩形状に
形成され、ピンホール75は、レーザ光4の走査方向に
対する幅がレーザ光4のビーム径とほぼ同等であり、I
nGaAsP層71とGaAs層72との積層体73の
ほぼ中央部に形成されている。
【0244】InGaAsP層71と、GaAs層72
との積層体73は、レーザ光4の照射を受けると、蛍光
を放出する性質を有し、レーザ光の照射を受けても、劣
化をすることがなく、したがって、色ガラスフィルタ6
1を備えたフォーカス位置決定用デバイス60に代え
て、InGaAsP層71と、GaAs層72との積層
体73を備えたフォーカス位置決定用デバイス70を用
いて、前記実施態様と全く同様にして、所望のように、
共焦点光学系のフォーカス位置を決定することが可能に
なる。
【0245】本発明は、以上の実施態様に限定されるこ
となく、特許請求の範囲に記載された発明の範囲内で種
々の変更が可能であり、それらも本発明の範囲内に包含
されるものであることはいうまでもない。
【0246】たとえば、前記実施態様においては、色ガ
ラスフィルタ61およびInGaAsP層71と、Ga
As層72との積層体73は、ほぼ矩形状をなすように
形成されているが、色ガラスフィルタ61およびInG
aAsP層71と、GaAs層72との積層体73の形
状は、任意に決定することができ、矩形状に限られるも
のではない。
【0247】また、前記実施態様においては、スリット
63は、色ガラスフィルタ61のほぼ中央部に形成さ
れ、ピンホール75は、InGaAsP層71とGaA
s層72との積層体73のほぼ中央部に形成されている
が、スリット63、ピンホール75を形成する位置は任
意に決定することができる。
【0248】さらに、図5に示された実施態様において
は、フォーカス位置決定用デバイス60は、珪砂、ソー
ダ灰および石灰石などを主成分とするガラスに、CdS
−CdSeの固溶体をドープして形成された色ガラスフ
イルタ61を備えているが、色ガラスフイルタとして、
珪砂、ソーダ灰および石灰石などを主成分とするガラス
に、CdS−CdSeの固溶体をドープして形成された
色ガラスフイルタ61に代えて、珪砂、ソーダ灰および
石灰石などを主成分とするガラスに、ZnS−CdSの
固溶体をドープして形成された色ガラスフィルタを用い
るようにしてもよく、さらには、色ガラスフイルタ61
に代えて、図8に示された実施態様と同様に、InGa
AsP層71と、GaAs層72との積層体73を用い
ることもできる。
【0249】さらに、図8に示された実施態様において
は、フォーカス位置決定用デバイス70は、InGaA
sP層71と、GaAs層72との積層体73を備えて
いるが、InGaAsP層71と、GaAs層72との
積層体73に代えて、図5に示された実施態様と同様
に、珪砂、ソーダ灰および石灰石などを主成分とするガ
ラスに、CdS−CdSeの固溶体をドープして形成さ
れた色ガラスフイルタ61を用いてもよく、また、珪
砂、ソーダ灰および石灰石などを主成分とするガラス
に、ZnS−CdSの固溶体をドープして形成された色
ガラスフィルタを用いることもできる。
【0250】さらに、図5に示された実施態様において
は、フォーカス位置決定用デバイス60は、珪砂、ソー
ダ灰および石灰石などを主成分とするガラスに、CdS
−CdSeの固溶体をドープして形成された色ガラスフ
イルタ61を備えており、図8に示された実施態様にお
いては、フォーカス位置決定用デバイス70は、InG
aAsP層71と、GaAs層72との積層体73を備
えているが、フォーカス位置決定用デバイス60、70
は、たとえば、IV族元素、II−VI族化合物、II
I−V族化合物およびこれらの複合体よりなる群から選
ばれた材料など、レーザ光4の照射を受けると、蛍光ま
たはフォトルミネッセンスを放出する性質を有し、レー
ザ光の照射を受けても、劣化をすることがない性質を有
する材料によって構成されていればよく、色ガラスフィ
ルタ61、InGaAsP層71と、GaAs層72と
の積層体73を備えていることは必ずしも必要でない。
【0251】また、前記実施態様においては、フォーカ
ス位置決定用デバイス60の色ガラスフィルタ61はク
ロムの蒸着膜62によって、マスクされ、フォーカス位
置決定用デバイス70のInGaAsP層71と、Ga
As層72との積層体73はクロムのスパッタリング膜
74によって、マスクされ、それぞれ、スリット63、
ピンホール75が形成されているが、金属膜の材料はク
ロムに限定されるものではなく、アルミニウム、金、ニ
ッケル−クロム合金およびチタン−ニッケル−クロムな
どの材料によって、金属膜を形成することができ、ま
た、金属膜の形成方法も、蒸着、スパッタリングに限定
されることなく、CVDによって、金属膜を形成するし
てもよく、クロムの蒸着膜62、クロムのスパッタリン
グ膜75を設けて、マスクして、スリット63、ピンホ
ール75を生成することは必ずしも必要がない。
【0252】さらに、前記実施態様においては、レーザ
光4のビーム径は10ミクロンに調整され、レーザ光4
の走査方向に対する幅が、約10ミクロンになるよう
に、スリット63が形成されているが、レーザ光4のビ
ーム径を10ミクロンに調整することも、スリット63
を、レーザ光4の走査方向に対する幅が、約10ミクロ
ンになるように、形成することも必ずしも必要ではな
く、スリット63を、レーザ光4の走査方向に対する幅
が、レーザ光4のビーム径の0.5ないし2倍、好まし
くは、0.8ないし1.2倍となるように、形成すれば
よい。
【0253】さらに、前記実施態様においては、サンプ
ルステージ20は、主走査用モータ43により、主走査
方向に、レーザ光4のビーム径とほぼ同等の画素ピッチ
で、高速で往復移動されるように構成されているが、サ
ンプルステージ20が、主走査方向に、レーザ光4のビ
ーム径とほぼ同等の画素ピッチで、移動されるように構
成されることは必ずしも必要でなく、レーザ光4のビー
ム径以下の画素ピッチで、サンプルステージ20が、主
走査方向に移動されるように構成することもできる。
【0254】また、前記実施態様においては、それぞ
れ、クロムの蒸着膜62およびクロムのスパッタリング
膜74は、10ミクロン以下の膜厚を有するように形成
されているが、クロムの蒸着膜62およびクロムのスパ
ッタリング膜74の膜厚は、光学ヘッド15のレンズ1
9の焦点距離に応じて、任意に決定することができ、好
ましくは、ステッピングモータ56によって、レンズ1
9を移動させるピッチ以下に、設定される。
【0255】さらに、前記実施態様においては、光学ヘ
ッド15のレンズ19が、ステッピングモータ56によ
って、10ミクロン単位で移動されるように構成されて
いるが、光学ヘッド15のレンズ19を、10ミクロン
単位で移動させることは必ずしも必要でなく、光学ヘッ
ド15のレンズ19の焦点距離に応じて、任意のピッチ
で、光学ヘッド15のレンズ19を移動させることがで
きる。
【0256】また、前記実施態様においては、ステッピ
ングモータ56を用いて、光学ヘッド15のレンズ19
を移動させているが、ステッピングモータ56以外の駆
動手段を用いて、光学ヘッド15のレンズ19を移動さ
せるようにしてもよい。
【0257】さらに、前記実施態様においては、スキャ
ナは、第1のレーザ励起光源1、第2のレーザ励起光源
2および第3のレーザ励起光源3を備えているが、3つ
のレーザ励起光源を備えていることは必ずしも必要な
い。
【0258】また、前記実施態様においては、第1のレ
ーザ励起光源1として、640nmの波長のレーザ光4
を発する半導体レーザ光源を用いているが、640nm
の波長のレーザ光4を発する半導体レーザ光源に代え
て、633nmの波長を有するレーザ光4を発するHe
−Neレーザ光源あるいは635nmのレーザ光4を発
する半導体レーザ光源を用いてもよい。
【0259】さらに、前記実施態様においては、第2の
レーザ励起光源2として、532nmのレーザ光を発す
るレーザ光源を用い、第3のレーザ励起光源3として、
473nmのレーザ光を発するレーザ光源を用いている
が、励起する蛍光物質の種類に応じて、第2のレーザ励
起光源2として、530ないし540nmのレーザ光を
発するレーザ光源を、第3のレーザ励起光源3として、
470ないし490nmのレーザ光を発するレーザ光源
を、それぞれ、用いることもできる。
【0260】また、前記実施態様においては、スキャナ
は、640nmの波長を有するレーザ光4を発する第1
のレーザ励起光源1、532nmの波長を有するレーザ
光4を発する第2のレーザ励起光源2および473nm
の波長を有するレーザ光4を発する第3のレーザ励起光
源3を備え、したがって、640nmの波長を有するレ
ーザ光4を発する第1のレーザ励起光源1、532nm
の波長を有するレーザ光4を発する第2のレーザ励起光
源2および473nmの波長を有するレーザ光4を発す
る第3のレーザ励起光源3を用いた場合のそれぞれにつ
き、共焦点光学系のフォーカス位置を決定し、フォーカ
ス位置データをEPROM52に記憶させているが、レ
ーザ光4の波長は任意であり、使用するレーザ光4の波
長に応じて、共焦点光学系のフォーカス位置を決定し、
フォーカス位置データをEPROM52に記憶させ、フ
ォーカス位置データを用いて、光学ヘッド15のレンズ
19の位置を調整すればよく、640nmの波長を有す
るレーザ光4を発する第1のレーザ励起光源1、532
nmの波長を有するレーザ光4を発する第2のレーザ励
起光源2および473nmの波長を有するレーザ光4を
発する第3のレーザ励起光源3を用いた場合のそれぞれ
につき、共焦点光学系のフォーカス位置を決定し、フォ
ーカス位置データをEPROM52に記憶させておくこ
とは必ずしも必要でない。
【0261】また、前記実施態様においては、共焦点切
り換え部材31には、3つの径の異なるピンホール32
a、32b、32cが形成され、蛍光色素によって選択
的に標識された試料の数多くのスポットが、スライドガ
ラス板上に形成されているマイクロアレイを、レーザ光
4によって走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素から
放出された蛍光を光電的に検出して、生化学解析用のデ
ータを生成するときには、ピンホール32aが、輝尽性
蛍光体層を露光して得た放射性標識物質の位置情報が記
録された蓄積性蛍光体シートの輝尽性蛍光体層を、レー
ザ光4によって走査して、輝尽性蛍光体を励起し、輝尽
性蛍光体から放出された輝尽光を光電的に検出して、生
化学解析用のデータを生成するときには、ピンホール3
2bが、転写支持体を担体とする蛍光サンプルを、レー
ザ光4によって走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素
から放出された蛍光を光電的に検出して、生化学解析用
のデータを生成するときには、ピンホール32cが、そ
れぞれ、用いられているが、共焦点切り換え部材31
に、ピンホール32a、32bのみを形成し、蛍光色素
によって選択的に標識された試料の数多くのスポット
が、スライドガラス板上に形成されているマイクロアレ
イを、レーザ光4によって走査して、蛍光色素を励起
し、蛍光色素から放出された蛍光を光電的に検出して、
生化学解析用のデータを生成するときには、ピンホール
32aを介して、蛍光25を受光し、輝尽性蛍光体層か
ら放出された輝尽光25を光電的に検出して、生化学解
析用のデータを生成するときには、ピンホール32bを
介して、輝尽光を受光し、転写支持体を担体とした蛍光
サンプルから放出された蛍光25を光電的に検出して、
生化学解析用のデータを生成するときには、共焦点切り
換え部材31を、蛍光25の光路から退避させ、フォト
マルチプライア33の受光光量が増大するように構成す
ることもできるし、また、共焦点切り換え部材31に、
ピンホール32aのみを形成し、蛍光色素によって選択
的に標識された試料の数多くのスポットが、スライドガ
ラス板上に形成されているマイクロアレイを、レーザ光
4によって走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素から
放出された蛍光を光電的に検出して、生化学解析用のデ
ータを生成するときにのみ、ピンホール32aを介し
て、蛍光25を受光し、輝尽性蛍光体層から放出された
輝尽光25を光電的に検出して、生化学解析用のデータ
を生成するときおよび転写支持体を担体とした蛍光サン
プルから放出された蛍光25を光電的に検出して、生化
学解析用のデータを生成するときには、共焦点切り換え
部材31を、蛍光25の光路から退避させ、フォトマル
チプライア33の受光光量が増大するように構成するこ
ともできる。
【0262】さらに、前記実施態様においては、スキャ
ナは、スライドガラス板を担体とし、蛍光色素によって
選択的に標識された試料の数多くのスポットが、スライ
ドガラス板上に形成されているマイクロアレイを、レー
ザ光4によって走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素
から放出された蛍光を光電的に検出して、生化学解析用
の画像データを生成可能に構成され、さらに、蛍光色素
によって、選択的に標識された変性DNAを含む転写支
持体を担体とした蛍光サンプルを、レーザ光4によって
走査して、蛍光色素を励起し、蛍光色素から放出された
蛍光を光電的に検出して、生化学解析用の画像データを
生成可能に構成されるとともに、放射性標識物質によっ
て選択的に標識された試料の数多くのスポットが形成さ
れたメンブレンフィルタなどの担体を、輝尽性蛍光体を
含む輝尽性蛍光体層が形成された蓄積性蛍光体シートと
密着させて、輝尽性蛍光体層を露光して得た放射性標識
物質の位置情報が記録された蓄積性蛍光体シートの輝尽
性蛍光体層を、レーザ光4によって走査して、輝尽性蛍
光体を励起し、輝尽性蛍光体から放出された輝尽光を光
電的に検出して、生化学解析用の画像データを生成可能
に構成されているが、スライドガラス板を担体とし、蛍
光色素によって選択的に標識された試料の数多くのスポ
ットが、スライドガラス板上に形成されているマイクロ
アレイを、レーザ光4によって走査して、蛍光色素を励
起し、蛍光色素から放出された蛍光を光電的に検出し
て、生化学解析用の画像データを生成可能に構成されて
いればよく、さらに、蛍光色素によって、選択的に標識
された変性DNAを含む転写支持体を担体とした蛍光サ
ンプルを、レーザ光4によって走査して、蛍光色素を励
起し、蛍光色素から放出された蛍光を光電的に検出し
て、生化学解析用の画像データを生成可能に構成される
とともに、放射性標識物質によって選択的に標識された
試料の数多くのスポットが形成されたメンブレンフィル
タなどの担体を、輝尽性蛍光体を含む輝尽性蛍光体層が
形成された蓄積性蛍光体シートと密着させて、輝尽性蛍
光体層を露光して得た放射性標識物質の位置情報が記録
された蓄積性蛍光体シートの輝尽性蛍光体層を、レーザ
光4によって走査して、輝尽性蛍光体を励起し、輝尽性
蛍光体から放出された輝尽光を光電的に検出して、生化
学解析用の画像データを生成可能に構成されていること
は、必ずしも必要でない。
【0263】
【発明の効果】本発明によれば、共焦点光学系を備えた
スキャナのフォーカスを、所望のように調整することが
できる共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置
決定方法およびフォーカス調整方法、共焦点光学系を備
えたスキャナならびにフォーカス位置決定用デバイスを
提供することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【図1】図1は、本発明の好ましい実施態様にかかるフ
ォーカス位置調整方法により、フォーカス位置が調整さ
れる共焦点光学系を備えたスキャナの略斜視図である。
【図2】図2は、共焦点切り換え部材の略正面図であ
る。
【図3】図3は、サンプルステージの走査機構のうち、
主走査機構の詳細を示す略斜視図である。
【図4】図4は、スキャナの検出系、駆動系、入力系お
よび制御系を示すブロックダイアグラムである。
【図5】図5は、共焦点光学系のフォーカスを調整する
ためのフォーカス位置決定用デバイスの略縦断面図であ
る。
【図6】図6は、データ処理装置のブロックダイアグラ
ムである。
【図7】図7は、レンズの位置を変えつつ、フォーカス
位置決定用デバイスを、640nmの波長のレーザ光、
532nmの波長のレーザ光および473nmの波長の
レーザ4によって、走査して、得たディジタルデータの
信号強度の積分値をプロットしたグラフである。
【図8】図8は、本発明の他の好ましい実施態様にかか
る共焦点光学系のフォーカスを調整するためのフォーカ
ス位置決定用デバイスの略縦断面図である。
【符号の説明】
1 第1のレーザ励起光源 2 第2のレーザ励起光源 3 第3のレーザ励起光源 4 レーザ光 5 コリメータレンズ 6 ミラー 7 第1のダイクロイックミラー 8 第2のダイクロイックミラー 9 コリメータレンズ 10 コリメータレンズ 15 光学ヘッド 16 ミラー 17 穴 18 穴明きミラー 19 レンズ 20 サンプルステージ 21 サンプルキャリア 22 サンプル 23 滴下されたcDNA 25 蛍光または輝尽光 27 フィルタユニット 28a、28b、28c、28d フィルタ 29 ミラー 30 レンズ 31 共焦点切り換え部材 32a、32b、32c、32d、32e ピンホール 33 フォトマルチプライア 34 A/D変換器 35 データ処理装置 40 可動基板 41、41 一対のガイドレール 42 スライド部材 43 主走査用モータ 43a 主走査用モータの出力軸 44 プーリ 45 タイミングベルト 46 ロータリーエンコーダ 47 副走査用モータ 50 コントロールユニット 51 RAM 52 EPROM 53 キャリアセンサ 54 フィルタユニットモータ 55 切り換え部材モータ 56 ステッピングモータ 57 キーボード 60 フォーカス位置決定用デバイス 61 色ガラスフィルタ 62 クロムの蒸着膜 63 スリット 65 メモリ 66 データ処理部 70 フォーカス位置決定用デバイス 71 InGaAsP層 72 GaAs層 73 積層体 74 クロムのスパッタリング膜 75 ピンホール
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Fターム(参考) 2G043 AA03 BA16 CA04 DA02 DA05 EA01 EA19 FA01 GA04 GB18 GB19 HA01 HA02 HA09 JA02 JA03 KA02 KA05 KA09 LA01 NA06 2H013 AC01 AC03 AC05 AC06 AC20 4B029 AA07 AA21 AA23 BB15 BB20 CC03 CC08 CC11 FA11 FA12 FA15

Claims (40)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 共焦点光学系を備えたスキャナのフォー
    カス位置決定方法であって、レーザ光の照射を受ける
    と、蛍光またはフォトルミネッセンスを発し、レーザ光
    の照射を受けても劣化することがない無機材料よりなる
    支持体上に、前記支持体が露出される開口部が形成され
    るように、金属膜を設けたフォーカス位置決定用デバイ
    スを、レーザ光によって、走査し、前記開口部を介し
    て、前記支持体を励起し、前記支持体から放出される蛍
    光またはフォトルミネッセンスを、前記開口部を介し
    て、光電的に検出し、共焦点光学系の対物レンズの位置
    を、所定の移動ピッチで、変化させて、検出された前記
    蛍光またはフォトルミネッセンスの信号強度に基づい
    て、前記共焦点光学系のフォーカス位置を決定すること
    を特徴とする共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカ
    ス位置決定方法。
  2. 【請求項2】 検出された前記蛍光またはフォトルミネ
    ッセンスの信号強度の積分値が最大となる前記共焦点光
    学系の対物レンズの位置を、前記共焦点光学系のフォー
    カス位置として決定することを特徴とする請求項1に記
    載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決
    定方法。
  3. 【請求項3】 前記レーザ光による走査の画素ピッチ
    が、前記レーザ光のビーム径とほぼ同等か、または、そ
    れ以下であることを特徴とする請求項1または2に記載
    の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定
    方法。
  4. 【請求項4】 前記開口部が、スリット状に形成された
    ことを特徴とする請求項1ないし3のいずれか1項に記
    載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決
    定方法。
  5. 【請求項5】 前記開口部が、ピンホール状に形成され
    たことを特徴とする請求項1ないし3のいずれか1項に
    記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置
    決定方法。
  6. 【請求項6】 レーザ光の波長毎に、前記共焦点光学系
    のフォーカス位置を決定することを特徴とする請求項1
    ないし5のいずれか1項に記載の共焦点光学系を備えた
    スキャナのフォーカス位置決定方法。
  7. 【請求項7】 さらに、前記共焦点光学系の前記フォー
    カス位置をメモリに記憶させることを特徴とする請求項
    1ないし6のいずれか1項に記載の共焦点光学系を備え
    たスキャナのフォーカス位置決定方法。
  8. 【請求項8】 前記支持体が、IV族元素、II−VI
    族化合物、III−V族化合物およびこれらの複合体よ
    りなる群から選ばれた材料によって形成されたことを特
    徴とする請求項1ないし7のいずれか1項に記載の共焦
    点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法。
  9. 【請求項9】 前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および石
    灰石よりなる群から選ばれた材料を主成分とするガラス
    に、CdS−CdSeの固溶体をドープして形成された
    色ガラスフイルタによって形成されたことを特徴とする
    請求項8に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
    ーカス位置決定方法。
  10. 【請求項10】 前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および
    石灰石よりなる群から選ばれた材料を主成分とするガラ
    スに、ZnS−CdSの固溶体をドープして形成された
    色ガラスフィルタによって形成されたことを特徴とする
    請求項9に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
    ーカス位置決定方法。
  11. 【請求項11】 前記支持体が、InGaAsP層と、
    GaAs層との積層体によって形成され、前記金属膜
    が、前記InGaAsP層上に設けられたことを特徴と
    する請求項8に記載の共焦点光学系を備えたスキャナの
    フォーカス位置決定方法。
  12. 【請求項12】 前記金属膜が、スパッタリング、CV
    Dおよび蒸着よりなる群から選ばれる形成方法によって
    形成されたことを特徴とする請求項1ないし11のいず
    れか1項に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
    ーカス位置決定方法。
  13. 【請求項13】 前記金属膜が、スパッタリングによっ
    て形成されたことを特徴とする請求項12に記載の共焦
    点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法。
  14. 【請求項14】 前記金属膜が、クロム、アルミニウ
    ム、金、ニッケル−クロム合金およびチタン−ニッケル
    −クロムよりなる群から選ばれる材料によって形成され
    たことを特徴とする請求項1ないし13のいずれか1項
    に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位
    置決定方法。
  15. 【請求項15】 前記金属膜が、クロムによって形成さ
    れたことを特徴とする請求項14に記載の共焦点光学系
    を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法。
  16. 【請求項16】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径の0.5ないし
    2倍に形成されたことを特徴とする請求項1ないし15
    のいずれか1項に記載の共焦点光学系を備えたスキャナ
    のフォーカス位置決定方法。
  17. 【請求項17】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径の0.8ないし
    1.2倍に形成されたことを特徴とする請求項16に記
    載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決
    定方法。
  18. 【請求項18】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径とほぼ同等に形
    成されたことを特徴とする請求項17に記載の共焦点光
    学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定方法。
  19. 【請求項19】 前記金属膜が、前記共焦点光学系の対
    物レンズの前記移動ピッチ以下の膜厚を有していること
    を特徴とする請求項1ないし18のいずれか1項に記載
    の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定
    方法。
  20. 【請求項20】 共焦点光学系を備えたスキャナのフォ
    ーカス位置調整方法であって、請求項7ないし19のい
    ずれか1項に記載されたフォーカス位置決定方法にした
    がって決定され、前記メモリに記憶されたフォーカス位
    置に基づいて、前記共焦点光学系の対物レンズの位置を
    調整することを特徴とする共焦点光学系を備えたスキャ
    ナのフォーカス位置調整方法。
  21. 【請求項21】 ステッピングモータによって、前記共
    焦点光学系の対物レンズの位置を調整することを特徴と
    する請求項20に記載の共焦点光学系を備えたスキャナ
    のフォーカス位置調整方法。
  22. 【請求項22】 レーザ光を発する少なくとも1つのレ
    ーザ励起光源と、サンプルを載置するサンプルステージ
    と、前記少なくとも1つのレーザ励起光源から発せられ
    たレーザ光によって、前記サンプルステージに載置され
    た前記サンプルを走査可能なように、前記サンプルステ
    ージを移動させる走査手段と、共焦点光学系と、共焦点
    光学系を構成する対物レンズを移動可能なモータと、光
    を光電的に検出する光検出器と、メモリと、共焦点光学
    系のフォーカスを調整するフォーカス調整手段を備えた
    スキャナであって、前記メモリに、請求項7ないし19
    のいずれか1項に記載されたフォーカス位置決定方法に
    したがって決定された前記共焦点光学系のフォーカス位
    置が記憶され、前記フォーカス調整手段が、前記メモリ
    に記憶された前記共焦点光学系のフォーカス位置に基づ
    き、前記モータを駆動して、前記共焦点光学系の対物レ
    ンズが、前記共焦点光学系のフォーカス位置に位置する
    ように、前記共焦点光学系の対物レンズを移動させ、前
    記共焦点光学系のフォーカス位置を調整するように構成
    されたことを特徴とするスキャナ。
  23. 【請求項23】 前記走査手段が、前記サンプルステー
    ジを、前記少なくとも1つのレーザ励起光源から発せら
    れたレーザ光のビーム径とほぼ同等か、または、それ以
    下の画素ピッチで、移動させるように構成されたことを
    特徴とする請求項22に記載のスキャナ。
  24. 【請求項24】 前記メモリが、波長の異なるレーザ光
    を発する2以上のレーザ励起光源を用いる場合の前記共
    焦点光学系のフォーカス位置を記憶していることを特徴
    とする請求項22または23に記載のスキャナ。
  25. 【請求項25】 前記モータが、ステッピングモータに
    よって構成されたことを特徴とする請求項22ないし2
    4のいずれか1項に記載のスキャナ。
  26. 【請求項26】 レーザ光の照射を受けると、蛍光また
    はフォトルミネッセンスを発し、レーザ光の照射を受け
    ても劣化することがない無機材料よりなる支持体上に、
    前記支持体が露出される開口部が形成されるように、金
    属膜を設けたことを特徴とする共焦点光学系を備えたス
    キャナのフォーカス位置決定用デバイス。
  27. 【請求項27】 前記開口部が、スリット状に形成され
    たことを特徴とする請求項26に記載の共焦点光学系を
    備えたスキャナのフォーカス位置決定用デバイス。
  28. 【請求項28】 前記開口部が、ピンホール状に形成さ
    れたことを特徴とする請求項27に記載の共焦点光学系
    を備えたスキャナのフォーカス位置決定用デバイス。
  29. 【請求項29】 前記支持体が、IV族元素、II−V
    I族化合物、III−V族化合物およびこれらの複合体
    よりなる群から選ばれた材料によって形成されたことを
    特徴とする請求項26ないし28のいずれか1項に記載
    の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定
    用デバイス。
  30. 【請求項30】 前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および
    石灰石よりなる群から選ばれた材料を主成分とするガラ
    スに、CdS−CdSeの固溶体をドープして形成され
    た色ガラスフイルタによって形成されたことを特徴とす
    る請求項29に記載の共焦点光学系を備えたスキャナの
    フォーカス位置決定用デバイス。
  31. 【請求項31】 前記支持体が、珪砂、ソーダ灰および
    石灰石よりなる群から選ばれた材料を主成分とするガラ
    スに、ZnS−CdSの固溶体をドープして形成された
    色ガラスフィルタによって形成されたことを特徴とする
    請求項30に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフ
    ォーカス位置決定用デバイス。
  32. 【請求項32】 前記支持体が、InGaAsP層と、
    GaAs層の積層体によって形成され、前記金属膜が、
    前記InGaAsP層上に設けられたことを特徴とする
    請求項29に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフ
    ォーカス位置決定用デバイス。
  33. 【請求項33】 前記金属膜が、スパッタリング、CV
    Dおよび蒸着よりなる群から選ばれる形成方法によって
    形成されたことを特徴とする請求項26ないし32のい
    ずれか1項に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフ
    ォーカス位置決定用デバイス。
  34. 【請求項34】 前記金属膜が、スパッタリングによっ
    て形成されたことを特徴とする請求項33に記載の共焦
    点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定用デバ
    イス。
  35. 【請求項35】 前記金属膜が、クロム、アルミニウ
    ム、金、ニッケル−クロム合金およびチタン−ニッケル
    −クロムよりなる群から選ばれる材料によって形成され
    たことを特徴とする請求項26ないし34のいずれか1
    項に記載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス
    位置決定用デバイス。
  36. 【請求項36】 前記金属膜が、クロムによって形成さ
    れたことを特徴とする請求項35に記載の共焦点光学系
    を備えたスキャナのフォーカス位置決定用デバイス。
  37. 【請求項37】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径の0.5ないし
    2倍に形成されたことを特徴とする請求項26ないし3
    6のいずれか1項に記載の共焦点光学系を備えたスキャ
    ナのフォーカス位置決定用デバイス。
  38. 【請求項38】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径の0.8ないし
    1.2倍に形成されたことを特徴とする請求項37に記
    載の共焦点光学系を備えたスキャナのフォーカス位置決
    定用デバイス。
  39. 【請求項39】 前記レーザ光の走査方向に対する前記
    開口部の幅が、前記レーザ光のビーム径とほぼ同等に形
    成されたことを特徴とする請求項38に記載の共焦点光
    学系を備えたスキャナのフォーカス位置決定用デバイ
    ス。
  40. 【請求項40】 前記金属膜が、約10ミクロン以下の
    膜厚を有していることを特徴とする請求項26ないし3
    9のいずれか1項に記載の共焦点光学系を備えたスキャ
    ナのフォーカス位置決定用デバイス。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2002328087A (ja) * 2001-04-27 2002-11-15 Fuji Photo Film Co Ltd 全反射減衰を利用した測定装置の調整方法および装置並びに調整治具

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