JP2002181814A - マルチアナライトイムノアッセイ - Google Patents
マルチアナライトイムノアッセイInfo
- Publication number
- JP2002181814A JP2002181814A JP2001302642A JP2001302642A JP2002181814A JP 2002181814 A JP2002181814 A JP 2002181814A JP 2001302642 A JP2001302642 A JP 2001302642A JP 2001302642 A JP2001302642 A JP 2001302642A JP 2002181814 A JP2002181814 A JP 2002181814A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- analyte
- assay
- antibody
- calibration curve
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 サンプル中のアナライトに特異的なアッセイ
方法を提供すること。 【解決手段】 サンプル中のアナライトのアッセイであ
って、サンプルを、アナライトに特異的なリガンドと、
該アナライトに結合してその利用可能な濃度を減少させ
るスカベンジャー物質をも含むリガンドのアレイと接触
させることを特徴とするアッセイ。
方法を提供すること。 【解決手段】 サンプル中のアナライトのアッセイであ
って、サンプルを、アナライトに特異的なリガンドと、
該アナライトに結合してその利用可能な濃度を減少させ
るスカベンジャー物質をも含むリガンドのアレイと接触
させることを特徴とするアッセイ。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、例えば、その上に
アナライト特異的なリガンドのアレイを備えたバイオチ
ップまたはマイクロチップを用いる、マルチアナライト
イムノアッセイに関する。
アナライト特異的なリガンドのアレイを備えたバイオチ
ップまたはマイクロチップを用いる、マルチアナライト
イムノアッセイに関する。
【０００２】
【従来の技術】バイオチップ／マイクロチップは、イム
ノアッセイまたはヌクレオチドハイブリダイゼーション
アッセイのいずれかでの多数のアレイの測定に関して記
載されている。作製されたアレイは、通常、多数の、固
体支持体上で空間的に異なる領域に位置する個別の反応
部位を有するように設計されている。アレイは、固体支
持体表面上に固定された、高密度の同一または異なる分
子を含み得る。
ノアッセイまたはヌクレオチドハイブリダイゼーション
アッセイのいずれかでの多数のアレイの測定に関して記
載されている。作製されたアレイは、通常、多数の、固
体支持体上で空間的に異なる領域に位置する個別の反応
部位を有するように設計されている。アレイは、固体支
持体表面上に固定された、高密度の同一または異なる分
子を含み得る。
【０００３】マルチアナライトパネルが試験される場
合、それは必ず、未知のサンプル中に存在する各アナラ
イトの量を正確に定量する必要がある。従って、マルチ
アナライトパネル上に提示される各アナライトについて
最適な検量線（標準曲線）が作製されなければならな
い。この検量線は、提示される特定のアナライトの測定
に適した動的範囲（dynamic-range)をカバーしていなけ
ればならず、そして測定する患者サンプルのタイプに適
していなければならない。この動的範囲は、測定される
アナライトに対するアッセイの感受性の指標である。
合、それは必ず、未知のサンプル中に存在する各アナラ
イトの量を正確に定量する必要がある。従って、マルチ
アナライトパネル上に提示される各アナライトについて
最適な検量線（標準曲線）が作製されなければならな
い。この検量線は、提示される特定のアナライトの測定
に適した動的範囲（dynamic-range)をカバーしていなけ
ればならず、そして測定する患者サンプルのタイプに適
していなければならない。この動的範囲は、測定される
アナライトに対するアッセイの感受性の指標である。
【０００４】各アナライトについて、検出されなければ
ならない濃度範囲で困難が生じる。測定されるべき濃度
範囲がパネル上の各アナライト毎で大きく異なりうるの
で、各検量線の最適化は感受性の問題を引き起こすかも
しれない。
ならない濃度範囲で困難が生じる。測定されるべき濃度
範囲がパネル上の各アナライト毎で大きく異なりうるの
で、各検量線の最適化は感受性の問題を引き起こすかも
しれない。
【０００５】マルチアナライトパネルの検量線内に包含
されねばならない動的範囲のこの多様性は、各バイオチ
ップに付加されねばならないマルチ結合体（multi-conj
ugate)の製造に際する実際上の問題へとつながる。マル
チ結合体とは、これのおかげで各々個別のイムノアッセ
イに適した検出マーカーがバイオチップに付加されるよ
うな試薬のことである。検出マーカーとは、どのように
してイムノアッセイが可視化され、続いてバイオチップ
上で定量されるかに係る。
されねばならない動的範囲のこの多様性は、各バイオチ
ップに付加されねばならないマルチ結合体（multi-conj
ugate)の製造に際する実際上の問題へとつながる。マル
チ結合体とは、これのおかげで各々個別のイムノアッセ
イに適した検出マーカーがバイオチップに付加されるよ
うな試薬のことである。検出マーカーとは、どのように
してイムノアッセイが可視化され、続いてバイオチップ
上で定量されるかに係る。
【０００６】例えば、バイオチップフォーマットでは濫
用薬物に結合するリガンドのアレイについて検量線の形
状を制御する必要がある。現在のスクリーニングガイド
ラインは、広い範囲の濃度にわたっている；例えば、カ
ットオフ（cut-off）範囲は、ＬＳＤに関する０．５ng
／mlから、アヘンに関する２０００ng／mlまでである。
用薬物に結合するリガンドのアレイについて検量線の形
状を制御する必要がある。現在のスクリーニングガイド
ラインは、広い範囲の濃度にわたっている；例えば、カ
ットオフ（cut-off）範囲は、ＬＳＤに関する０．５ng
／mlから、アヘンに関する２０００ng／mlまでである。
【０００７】問題となる分子が分子量および免疫原性と
いう点で非常に類似する場合、このことを達成するのは
極めて困難である。従って、これらの分子に対する抗体
は全て達成し得る検出限界という点で非常に類似する特
性を有する。現在の試験方法では、各薬物はそれ自体に
特有の試験がある。これにより、試験業者は各個別の試
験を改変して特定の薬物試験についてのスクリーニング
ガイドラインに最も良く適応させることができる。しか
しながら、マルチアナライトフォーマットでは、条件
は、バイオチップ上に存在するアッセイの全範囲に適用
される。従って、広範囲のカットオフ限界に適応させる
ために利用可能な選択肢は限定されている。
いう点で非常に類似する場合、このことを達成するのは
極めて困難である。従って、これらの分子に対する抗体
は全て達成し得る検出限界という点で非常に類似する特
性を有する。現在の試験方法では、各薬物はそれ自体に
特有の試験がある。これにより、試験業者は各個別の試
験を改変して特定の薬物試験についてのスクリーニング
ガイドラインに最も良く適応させることができる。しか
しながら、マルチアナライトフォーマットでは、条件
は、バイオチップ上に存在するアッセイの全範囲に適用
される。従って、広範囲のカットオフ限界に適応させる
ために利用可能な選択肢は限定されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】ＵＳ−Ａ−４７２２８
８９およびＵＳ−Ａ−５０２６６５３は、アナライトに
対する特異性を有する標識抗体を用いる反応によるサン
プル中のアナライトのアッセイを開示している。さら
に、アナライトに対しては特異性が低いが、干渉物とし
て働くアナログに対しては特異性が高いスカベンジャー
モノクローナル抗体を使用することができる。
８９およびＵＳ−Ａ−５０２６６５３は、アナライトに
対する特異性を有する標識抗体を用いる反応によるサン
プル中のアナライトのアッセイを開示している。さら
に、アナライトに対しては特異性が低いが、干渉物とし
て働くアナログに対しては特異性が高いスカベンジャー
モノクローナル抗体を使用することができる。
【０００９】ＷＯ−Ａ−９８／２６６４４は、アナライ
トと反応する「検出抗体」を用いる、サンプル中のアナ
ライト（例えば、濫用薬物）に対するアッセイを開示し
ている。第２の反応は、アナライトと結合する「中和抗
体」（これは検出抗体と同一であっても良い）を使用
し、これにより検出抗体を用いて行われるアッセイで陽
性反応が生じることを防ぐ。かくして、検出抗体とは陽
性反応を示すが、第２の反応では減少した反応を示すサ
ンプルは、真のアナライトを含有する；両方で類似の陽
性反応を示すサンプルは干渉物を含む。この手順の利点
は、干渉物の正確な性質を知る必要性を避けていること
である。
トと反応する「検出抗体」を用いる、サンプル中のアナ
ライト（例えば、濫用薬物）に対するアッセイを開示し
ている。第２の反応は、アナライトと結合する「中和抗
体」（これは検出抗体と同一であっても良い）を使用
し、これにより検出抗体を用いて行われるアッセイで陽
性反応が生じることを防ぐ。かくして、検出抗体とは陽
性反応を示すが、第２の反応では減少した反応を示すサ
ンプルは、真のアナライトを含有する；両方で類似の陽
性反応を示すサンプルは干渉物を含む。この手順の利点
は、干渉物の正確な性質を知る必要性を避けていること
である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明は、パネル上の各
アナライトが往々にして他とは非常に異なる濃度で検出
されねばならず、そして各結合体が、それが認識する特
定のアナライトに対して適した濃度／希釈度でマルチ結
合体試薬中に提示されねばならない、と考えられる場合
には、動的範囲の最適化が困難でありうるという認識に
基づく。現在、パネル内のアナライトは互いに非常に異
なる濃度で検出され、定量される必要があるだろうとい
うことが理解されている。
アナライトが往々にして他とは非常に異なる濃度で検出
されねばならず、そして各結合体が、それが認識する特
定のアナライトに対して適した濃度／希釈度でマルチ結
合体試薬中に提示されねばならない、と考えられる場合
には、動的範囲の最適化が困難でありうるという認識に
基づく。現在、パネル内のアナライトは互いに非常に異
なる濃度で検出され、定量される必要があるだろうとい
うことが理解されている。
【００１１】具体的には、本発明は、（アナライト）／
（考慮中のマルチアナライトパネル中に見出されるアナ
ライトの範囲）に関して、ある領域では感受性が非常に
高いが、別の領域では感受性が十分でないと認められる
検量線の感受性を変更することに関する。これは、特定
の量のスカベンジャー抗体または他のスカベンジャー物
質の、アッセイ系（例えば、アッセイ緩衝液）への添加
を伴う。このスカベンジャー物質は、アナライトを捕獲
するためにバイオチップ表面に固定されているものと同
一であっても良いし、同一でなくてもよい。スカベンジ
ャー物質の目的は、サンプル（コントロールまたは患者
サンプル）中のアナライトのいくらかを特異的に清掃／
除去し、これによって利用可能な測定しうる濃度を低下
させることである。これは、次いで、検量線の非常に感
度の高い部位の感度を減少する効果およびグラフ中の別
の領域の感受性を改善する効果を有している。
（考慮中のマルチアナライトパネル中に見出されるアナ
ライトの範囲）に関して、ある領域では感受性が非常に
高いが、別の領域では感受性が十分でないと認められる
検量線の感受性を変更することに関する。これは、特定
の量のスカベンジャー抗体または他のスカベンジャー物
質の、アッセイ系（例えば、アッセイ緩衝液）への添加
を伴う。このスカベンジャー物質は、アナライトを捕獲
するためにバイオチップ表面に固定されているものと同
一であっても良いし、同一でなくてもよい。スカベンジ
ャー物質の目的は、サンプル（コントロールまたは患者
サンプル）中のアナライトのいくらかを特異的に清掃／
除去し、これによって利用可能な測定しうる濃度を低下
させることである。これは、次いで、検量線の非常に感
度の高い部位の感度を減少する効果およびグラフ中の別
の領域の感受性を改善する効果を有している。
【００１２】
【発明の実施の形態】本発明で使用するためのバイオチ
ップは、公知の方法により製造することができる。例え
ば、ＧＢ−Ａ−２３２４８６６を参照のこと。
ップは、公知の方法により製造することができる。例え
ば、ＧＢ−Ａ−２３２４８６６を参照のこと。
【００１３】このようなバイオチップはリガンド（例え
ば、抗体）のアレイを提供する。異なるアナライトに対
して特異性を有するいくつかの異なるリガンドが存在し
得る。新規なアッセイは、このようなアナライトの１つ
またはそれ以上について試験するために使用することが
でき、それは１つ以上の抗体の使用を伴うであろう。使
用し得るスキャベンジャー物質は当業者にとって容易に
明らかであり、例えばアプタマーが挙げれられる。典型
的には、スカベンジャー物質はアッセイ緩衝液中に含ま
れ、それ以外には、通常、溶媒などのような従来的な成
分を含有する。
ば、抗体）のアレイを提供する。異なるアナライトに対
して特異性を有するいくつかの異なるリガンドが存在し
得る。新規なアッセイは、このようなアナライトの１つ
またはそれ以上について試験するために使用することが
でき、それは１つ以上の抗体の使用を伴うであろう。使
用し得るスキャベンジャー物質は当業者にとって容易に
明らかであり、例えばアプタマーが挙げれられる。典型
的には、スカベンジャー物質はアッセイ緩衝液中に含ま
れ、それ以外には、通常、溶媒などのような従来的な成
分を含有する。
【００１４】検量線の感受性は、Ｂ／Ｂｏの関数であ
り、ここでＢおよびＢＯは、それぞれ、結合種に対する
光単位の値、およびゼロ標準を表す。検量線は、定量ア
ッセイが必要とされるそれぞれの場合に構築され得る。
あるいは、例えば、濫用薬物アッセイに関しては、その
目的には検量線１００％カットオフが適切であるyes/no
アッセイでも満足のいくものである。
り、ここでＢおよびＢＯは、それぞれ、結合種に対する
光単位の値、およびゼロ標準を表す。検量線は、定量ア
ッセイが必要とされるそれぞれの場合に構築され得る。
あるいは、例えば、濫用薬物アッセイに関しては、その
目的には検量線１００％カットオフが適切であるyes/no
アッセイでも満足のいくものである。
【００１５】例示として、本発明を、濫用薬物のマルチ
アナライトパネルおよびスカベンジャーとしての抗体の
使用に関連して考察する。このようなパネルの典型は、
以下の濫用薬物に関する競合的イムノアッセイを含む：
アンフェタミン、メタンフェタミン、ＴＨＣ、ベンゾジ
アゼピン、アヘン、バルビツール、ベンゾイルエクゴニ
ン（benzoylecgonine）、メタドン、ＰＣＰおよびＬＳ
Ｄ。
アナライトパネルおよびスカベンジャーとしての抗体の
使用に関連して考察する。このようなパネルの典型は、
以下の濫用薬物に関する競合的イムノアッセイを含む：
アンフェタミン、メタンフェタミン、ＴＨＣ、ベンゾジ
アゼピン、アヘン、バルビツール、ベンゾイルエクゴニ
ン（benzoylecgonine）、メタドン、ＰＣＰおよびＬＳ
Ｄ。
【００１６】濫用薬物の検量線（０％〜３００％）に関
して、１００％スタンダードにはこれらの各薬物のカッ
トオフ濃度（すなわち、その濃度未満ではサンプルが薬
物に関して陰性であると断言され、それを超える濃度で
はサンプルが薬物に関して陽性であると断言される濃
度）が含まれる。以下に列挙するように、マルチ結合物
の添加により、全アナライトに関して適切な検量線を得
る際の問題の原因は、広範な範囲のカットオフ濃度であ
る。
して、１００％スタンダードにはこれらの各薬物のカッ
トオフ濃度（すなわち、その濃度未満ではサンプルが薬
物に関して陰性であると断言され、それを超える濃度で
はサンプルが薬物に関して陽性であると断言される濃
度）が含まれる。以下に列挙するように、マルチ結合物
の添加により、全アナライトに関して適切な検量線を得
る際の問題の原因は、広範な範囲のカットオフ濃度であ
る。
【化１】
【００１７】使用されるべきスカベンジャー抗体の量を
決定する際には、一般的に、スタンダード０％〜２５％
の間におけるＢ／Ｂｏ値の増加と、７５％〜１００％〜
１２５％の間でのドロップを減少させないこととの間で
妥協を図らなければならない。言いかえると、０％〜２
５％の間の検量線の感受性をより低くするように努力さ
れるべきであるが、各薬物に関するカットオフ決定がな
される７５％〜１２５％の間では感受性を低下させては
ならない。従って、カットオフ領域付近の感受性を最大
にすることは重要であり、これによりサンプルの陽性ま
たは陰性の正確な決定を行うことができる。
決定する際には、一般的に、スタンダード０％〜２５％
の間におけるＢ／Ｂｏ値の増加と、７５％〜１００％〜
１２５％の間でのドロップを減少させないこととの間で
妥協を図らなければならない。言いかえると、０％〜２
５％の間の検量線の感受性をより低くするように努力さ
れるべきであるが、各薬物に関するカットオフ決定がな
される７５％〜１２５％の間では感受性を低下させては
ならない。従って、カットオフ領域付近の感受性を最大
にすることは重要であり、これによりサンプルの陽性ま
たは陰性の正確な決定を行うことができる。
【００１８】任意の特定のアナライトに対するカットオ
フ領域は公知であり、当業者により容易に決定され得
る。また、当業者はどのようにすれば検量線の感受性を
目的の点の付近で最大にすることができるかを容易に決
定することができる。
フ領域は公知であり、当業者により容易に決定され得
る。また、当業者はどのようにすれば検量線の感受性を
目的の点の付近で最大にすることができるかを容易に決
定することができる。
【００１９】
【実施例】
【００２０】様々な量の適切なスカベンジャー抗体を添
加することにより検量線のカットオフ領域で達成される
変化の程度を証明するために、ＰＣＰ、ＢＺＧおよびア
ンフェタミンを用いて実験を行った。より具体的には、
ＰＣＰ、ＢＺＧおよびアンフェタミンに関する以下のデ
ータは、スカベンジャー抗体の添加無しでは検量線がカ
ットオフ領域で十分に感受性でないことを示している
（各々の場合において、０％〜２５％の間では過度に感
受性であった）。本発明の目的から、およびこれらのア
ナライトに関して、検量線は０％〜２５％の間では過度
に感受性であり、この点を超えると感受性が不十分であ
る。
加することにより検量線のカットオフ領域で達成される
変化の程度を証明するために、ＰＣＰ、ＢＺＧおよびア
ンフェタミンを用いて実験を行った。より具体的には、
ＰＣＰ、ＢＺＧおよびアンフェタミンに関する以下のデ
ータは、スカベンジャー抗体の添加無しでは検量線がカ
ットオフ領域で十分に感受性でないことを示している
（各々の場合において、０％〜２５％の間では過度に感
受性であった）。本発明の目的から、およびこれらのア
ナライトに関して、検量線は０％〜２５％の間では過度
に感受性であり、この点を超えると感受性が不十分であ
る。
【００２１】ＰＣＰに関する結果は以下の通りである：
【表１】
【００２２】１〜２mg／Ｌ ＰＣＰ抗体を添加すること
により、７５〜１２５％のカットオフ領域付近の検量線
の感受性はかなり改善される。このことは、阻害ドロッ
プ率（％）が抗体を添加しない場合には１１．４５％
（Ｂ／Ｂｏ ７５％で３１．７９〜１２５％で２０．３
４）であり、２mg／Ｌ ＰＣＰ抗体の添加ありの場合に
は４６．２２％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で９５．７２〜１２
５％で４９．５０）であることにより、明確に証明され
ている。
により、７５〜１２５％のカットオフ領域付近の検量線
の感受性はかなり改善される。このことは、阻害ドロッ
プ率（％）が抗体を添加しない場合には１１．４５％
（Ｂ／Ｂｏ ７５％で３１．７９〜１２５％で２０．３
４）であり、２mg／Ｌ ＰＣＰ抗体の添加ありの場合に
は４６．２２％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で９５．７２〜１２
５％で４９．５０）であることにより、明確に証明され
ている。
【００２３】ＢＺＧに関する結果は以下の通りである：
【表２】
【００２４】この検量線の感受性を有意に変更するため
には、実質的な量のＢＺＧ抗体を添加しなければならな
い。カットオフ領域の感受性を改善するためには、５０
〜８０mg／Ｌの添加が必要である。抗体を添加しない場
合、阻害ドロップ率は４．９９％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で
１４．４６〜１２５％で９．４７）であるが、ＢＺＧ抗
体を８０mg／Ｌ添加すると１７．５１％（Ｂ／Ｂｏ ７
５％で４７．８９〜１２５％で３０．３８）まで改善さ
れる。
には、実質的な量のＢＺＧ抗体を添加しなければならな
い。カットオフ領域の感受性を改善するためには、５０
〜８０mg／Ｌの添加が必要である。抗体を添加しない場
合、阻害ドロップ率は４．９９％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で
１４．４６〜１２５％で９．４７）であるが、ＢＺＧ抗
体を８０mg／Ｌ添加すると１７．５１％（Ｂ／Ｂｏ ７
５％で４７．８９〜１２５％で３０．３８）まで改善さ
れる。
【００２５】アンフェタミンに関する結果は以下の通り
である：
である：
【表３】
【００２６】検量線のカットオフ領域の感受性を改善す
るために最適なアンフェタミン抗体の添加量は１．２５
mg／Ｌである。１．２５mg／Ｌを超える濃度は、結果を
これ以上改善することはなかった。抗体を添加しない場
合、阻害ドロップ率は２．１２％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で
５．６１％〜１２５％で３．４９％）であるが、アンフ
ェタミン抗体を１．２５mg／Ｌ添加すると２６．９２％
（７５％でのＢ／Ｂｏ６７．８３％〜１２５％での４
０．９１）まで改善される。
るために最適なアンフェタミン抗体の添加量は１．２５
mg／Ｌである。１．２５mg／Ｌを超える濃度は、結果を
これ以上改善することはなかった。抗体を添加しない場
合、阻害ドロップ率は２．１２％（Ｂ／Ｂｏ ７５％で
５．６１％〜１２５％で３．４９％）であるが、アンフ
ェタミン抗体を１．２５mg／Ｌ添加すると２６．９２％
（７５％でのＢ／Ｂｏ６７．８３％〜１２５％での４
０．９１）まで改善される。
フロントページの続き (72)発明者 スティーブン・ピーター・フィッツジェラ ルド イギリス、ビーティ29・４キューワイ、カ ウンティ・アントリム、クラムリン、ダイ ヤモンド・ロード、アードモア、ランドッ クス・ラボラトリーズ・リミテッド内 (72)発明者 ジョン・ビクター・ラモント イギリス、ビーティ29・４キューワイ、カ ウンティ・アントリム、クラムリン、ダイ ヤモンド・ロード、アードモア、ランドッ クス・ラボラトリーズ・リミテッド内 (72)発明者 ロバート・イバン・マッコネル イギリス、ビーティ29・４キューワイ、カ ウンティ・アントリム、クラムリン、ダイ ヤモンド・ロード、アードモア、ランドッ クス・ラボラトリーズ・リミテッド内
Claims (4)
- 【請求項１】 サンプル中のアナライトのアッセイであ
って、サンプルを、アナライトに特異的なリガンドと、
該アナライトに結合してその利用可能な濃度を減少させ
るスカベンジャー物質をも含むリガンドのアレイと接触
させることを特徴とするアッセイ。 - 【請求項２】 前記アナライトが濫用薬物である請求項
１に記載のアッセイ。 - 【請求項３】 添加される抗体の量が、カットオフ領域
周辺での検量線の感受性を最大化する量である、請求項
１または請求項２に記載のアッセイ。 - 【請求項４】 前記スカベンジャー物質が抗体である、
請求項１〜３のいずれかに記載のアッセイ。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0027064.5A GB0027064D0 (en) | 2000-11-06 | 2000-11-06 | Multi-analyte immunoassay |
| GB0027064 | 2000-11-06 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002181814A true JP2002181814A (ja) | 2002-06-26 |
| JP4571353B2 JP4571353B2 (ja) | 2010-10-27 |
Family
ID=9902625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001302642A Expired - Fee Related JP4571353B2 (ja) | 2000-11-06 | 2001-09-28 | マルチアナライトイムノアッセイ |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20020086337A1 (ja) |
| EP (1) | EP1203957B1 (ja) |
| JP (1) | JP4571353B2 (ja) |
| CN (1) | CN100504387C (ja) |
| AT (1) | ATE347104T1 (ja) |
| CA (1) | CA2357348A1 (ja) |
| DE (1) | DE60124846T2 (ja) |
| GB (1) | GB0027064D0 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007527527A (ja) * | 2003-11-21 | 2007-09-27 | ソマロジック・インコーポレーテッド | 多重化アッセイにおいて個々の分析物の定量範囲を調整するための方法 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2839783B1 (fr) * | 2002-05-17 | 2004-08-06 | Apibio | Nouvelle disposition des sites de liaison d'une biopuce |
| FR2840072B1 (fr) * | 2002-05-24 | 2004-08-06 | Apibio | Biopuce presentant une organisation amelioree |
| US7396689B2 (en) * | 2005-02-04 | 2008-07-08 | Decision Biomarkers Incorporated | Method of adjusting the working range of a multi-analyte assay |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5026653A (en) * | 1985-04-02 | 1991-06-25 | Leeco Diagnostic, Inc. | Scavenger antibody mixture and its use for immunometric assay |
| WO1998026644A2 (en) * | 1998-03-27 | 1998-06-25 | Microgenics Corporation | Confirmatory assays for small molecule drugs |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4595661A (en) * | 1983-11-18 | 1986-06-17 | Beckman Instruments, Inc. | Immunoassays and kits for use therein which include low affinity antibodies for reducing the hook effect |
| US4722889A (en) * | 1985-04-02 | 1988-02-02 | Leeco Diagnostics, Inc. | Immunoassays using multiple monoclonal antibodies and scavenger antibodies |
| US4743542A (en) * | 1985-04-11 | 1988-05-10 | Ortho Diagnostic | Method for forestalling the hook effect in a multi-ligand immunoassay system |
| DE4218257A1 (de) * | 1992-06-03 | 1993-12-09 | Behringwerke Ag | Verfahren zur immunchemischen Bestimmung eines Analyten |
| DE4309393A1 (de) * | 1993-03-23 | 1994-09-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verringerung des Hook-Effekts in Immuntests mit teilchenförmigem Trägermaterial |
| CN1097252A (zh) * | 1993-07-03 | 1995-01-11 | 首钢总公司 | 多元同步标记分析法 |
| DE19504198A1 (de) * | 1995-02-09 | 1996-08-14 | Behringwerke Ag | Kompetitiver Immuntest unter Verwendung komplexierter Analytderivate |
| BR9800655A (pt) * | 1997-04-21 | 1999-08-10 | Randox Lab Ltd | Dispositivo de estado sólido para efetuar ensaios com múltiplos analisados seu uso e e sistema para análise de múltiplos analisados |
-
2000
- 2000-11-06 GB GBGB0027064.5A patent/GB0027064D0/en not_active Ceased
-
2001
- 2001-09-12 US US09/949,756 patent/US20020086337A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-12 CA CA002357348A patent/CA2357348A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-28 JP JP2001302642A patent/JP4571353B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-10-29 EP EP01309145A patent/EP1203957B1/en not_active Revoked
- 2001-10-29 AT AT01309145T patent/ATE347104T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-10-29 DE DE60124846T patent/DE60124846T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-06 CN CNB011379383A patent/CN100504387C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5026653A (en) * | 1985-04-02 | 1991-06-25 | Leeco Diagnostic, Inc. | Scavenger antibody mixture and its use for immunometric assay |
| WO1998026644A2 (en) * | 1998-03-27 | 1998-06-25 | Microgenics Corporation | Confirmatory assays for small molecule drugs |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007527527A (ja) * | 2003-11-21 | 2007-09-27 | ソマロジック・インコーポレーテッド | 多重化アッセイにおいて個々の分析物の定量範囲を調整するための方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE347104T1 (de) | 2006-12-15 |
| CN1353312A (zh) | 2002-06-12 |
| DE60124846T2 (de) | 2007-06-21 |
| EP1203957A3 (en) | 2002-07-10 |
| EP1203957A2 (en) | 2002-05-08 |
| EP1203957B1 (en) | 2006-11-29 |
| GB0027064D0 (en) | 2000-12-20 |
| JP4571353B2 (ja) | 2010-10-27 |
| DE60124846D1 (de) | 2007-01-11 |
| CA2357348A1 (en) | 2002-05-06 |
| US20020086337A1 (en) | 2002-07-04 |
| CN100504387C (zh) | 2009-06-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5047131B2 (ja) | 検出方法において干渉性のサンプルを検出するためのコントロール領域の使用 | |
| US7858396B2 (en) | Lateral flow assay device with multiple equidistant capture zones | |
| US20030162236A1 (en) | Compensation for variability in specific binding in quantitative assays | |
| CN100420947C (zh) | 用单一捕获剂定量检测特异性分析物的方法及其试剂盒 | |
| JP2019535015A5 (ja) | ||
| Hayrapetyan et al. | Enzyme-linked immunosorbent assay: types and applications | |
| JP2019530875A5 (ja) | ||
| AU2020201874B2 (en) | Immunoassay utilizing trapping conjugate | |
| US20070065952A1 (en) | Multi-directional immunochromatographic assays | |
| JP4274944B2 (ja) | ダイナミックレンジが拡張された粒子利用リガンドアッセイ | |
| JP2005510706A5 (ja) | ||
| US20040157281A1 (en) | Method and apparatus for detecting an analyte | |
| Jain et al. | A microarray immunoassay for serum thyrotropin and thyroglobulin using antibodies immobilized on track-etched membranes | |
| JP4571353B2 (ja) | マルチアナライトイムノアッセイ | |
| Park et al. | Beads-and oil-free single molecule assay with immuno-rolling circle amplification for detection of SARS-CoV-2 from saliva | |
| Morozova et al. | Force differentiation in recognition of cross-reactive antigens by magnetic beads | |
| JP4440540B2 (ja) | アッセイ方法およびそのためのキット | |
| US20200088727A1 (en) | Human papilloma virus detection |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080908 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100302 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100601 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100604 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100623 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100803 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100812 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130820 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4571353 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |