JP2001522803A - 肥満細胞媒介性アレルギー反応の軽減方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、肥満細胞媒介性アレルギーおよび喘息を含む肥満細胞媒介性アレルギー反応を軽減する方法に関する。アレルゲンに対するＩ型過敏性応答および喘息を含む肥満細胞媒介性アレルギー反応は、デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）誘導体を、患者に、有効薬剤の血中レベルを迅速に上昇させる方法で投与することによって軽減される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （発明の背景） 本発明は、肥満細胞媒介性アレルギーおよび喘息を含む肥満細胞媒介性アレル
ギー反応の作用を軽減する方法に関する。本発明によれば、これらのアレルギー
反応は、デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）誘導体を投与することによ
って軽減される。

【０００２】 発明の背景を明かにし、特定の場合に、実施に関してさらなる詳細を提供する
ために本明細書において使用される刊行物および他の資料を出典明示で本明細書
に援用し、便宜上、以下の明細書中では数字により示し、添付した文献リストに
それぞれ分類している。

【０００３】 弱いアンドロゲンであるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）は、アン
ドロゲンおよびエストロゲンの両方の生合成において主要な前駆体として作用す
る（１）。ＤＨＥＡは、肥満、糖尿病、発癌、自己免疫、神経学的記憶喪失（２
−５）、およびマウスＴ細胞によるＩＬ−２産生に対するＧＣＳの負の作用（６
）において緩和する役割を果たすことが報告された。

【０００４】 ＤＨＥＡの作用機序への最近の識見は、虚血誘発性再灌流損傷の研究に由来し
ている。創傷拡張の病理学的過程を示すために用いられる臨床用語は、進行性真
皮虚血であり、それは、宿主開始性時間依存性再灌流損傷（host-initiated, ti
me-dependent reperfusion injury）の結果を表すようである。ＤＨＥＡ、ＤＨ ＥＡＳ、ＤＨＥＡコンジナー（congener）およびＤＨＥＡ誘導体は、熱性損傷マ
ウスを、微細脈管構造の再灌流損傷に対して軽減または保護することが見出され
ている。さらに、この有効薬剤を用いる介入治療は、熱傷後４時間まで実質的な
治療的恩恵を有して阻止し得る。熱傷損傷に対する即時型応答は、多くの点で、
他の組織における実験的再灌流損傷に類似していることが観察されている。ＤＨ
ＥＡが、直接的または間接的に、内皮に対するその作用を介して、再灌流損傷に
おける微細脈管構造に対する損傷を予防することが、研究によって示唆される。

【０００５】 別の研究において、単離されたラット精巣挙筋の虚血／再灌流損傷に対するＤ
ＨＥＡの効果が評価された。実験アプローチは、単離された筋肉の虚血／再灌流
前のラットのＤＨＥＡ前処置が微細循環の毛細血管および細静脈への損傷に対し
て保護するかどうかを証明するために生体内顕微鏡検査法を用いた。これらの研
究は、対照動物においては、６時間の虚血、それに続く９０分目および２４時間
目の再流分析が筋肉の不十分な灌流を導くことを示した。ＤＨＥＡ前処置ラット
においては、６時間の虚血、続く９０分目、２４時間目および４日目でさえの再
流分析は、単離された筋肉において正常な灌流価を示した。さらに、ＤＨＥＡ前
処置が好中球の内皮への付着を防止したことは明らかであった。全体的虚血モデ
ルにおけるさらなる研究は、臨床的に死亡したラットの蘇生後に静脈内投与した
ＤＨＥＡの保護的効果を示した。

【０００６】 細菌トランスロケーションは、固有の腸フローラが腸管関門に浸透し、無菌組
織に侵入するプロセスである。微生物の、排出している腸間膜リンパ節、脾臓、
肝臓、血液、および場合によっては肺への移動は、このプロセスに包含される（
７、８）。この現象は、熱性損傷後（９−１１）および虚血−再灌流損傷後（１
２）のヒトにおいて示されている。ＤＨＥＡ、ＤＨＥＡＳ、ＤＨＥＡコンジナー
およびＤＨＥＡ誘導体は、細菌トランスロケーションを軽減または予防すること
が見出されている。

【０００７】 成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）における好中球の役割に関する証拠は、実質
的であるが、間接的である（１３）。好中球がＡＲＤＳ様の状況を引き起こし得
るという最初の示唆のいくつかは、ドナー好中球を静脈内に注入された重篤な好
中球減少症患者において見出された。場合により、好中球注入の数時間以内に、
肺の突然の「ホワイト−アウト（white-out）」（Ｘ線による）およびＡＲＤＳ の徴候の開始があった。多くの研究は、好中球がＡＲＤＳの間に肺中に蓄積する
ことを示した。例えば、それらの存在は、組織学的に示された。ＡＲＤＳの初期
の間、循環全血球の数は、おそらく、それらの異常な肺分離のため、一時的に減
少する。肺毛細血管内に蓄積するいくつかの好中球は、血管腔を離れ、間質およ
び肺胞空間に移動する。正常な健康ボランティアにおいて、好中球は、気管支肺
胞洗浄（ＢＡＬ）により得ることができる細胞の３％未満の割合を占める。ＡＲ
ＤＳに罹患している患者においては、この洗浄中の好中球の割合は、７６〜８５
％に著しく増加する。好中球の蓄積は、それらの活性化の証拠に関係している。
それらは、増強された走化性を示し、インビトロ刺激後に異常に高レベルの酸素
代謝物を生じる。ラクトフェリンなどの好中球分泌産物の上昇した濃度は、ＡＲ
ＤＳに罹患している患者の血漿中で検出された。好中球が肺損傷に能動的に関与
するというさらなる証拠は、無関係の理由（例えば、化学療法を受けていること
）のために好中球減少症になった軽い肺損傷に罹患している患者の臨床研究から
得られた。患者の血液病学的症状が改善され、循環好中球数が正常レベルに回復
した場合に、肺障害がしばしば悪化することが注目された。

【０００８】 刺激された好中球が独立して肺組織に損傷を与えることができるさらなる証拠
として、インビトロ実験が、標的として血管内皮および肺上皮細胞を用いて行な
われている。いくつかの報告において、好中球が組織培養ディッシュの表面から
内皮細胞または肺胞上皮細胞を剥離させることが示された。明かに、かかる事象
がインビボで生じれば、露出表面は、血漿内容物の実質的な漏出を可能にする。
さらにまた、多くの報告は、刺激された好中球が培養血管内皮細胞および肺胞上
皮細胞の溶解を促進できることを明確に証明した。ＤＨＥＡ、ＤＨＥＡＳ、ＤＨ
ＥＡコンジナーおよびＤＨＥＡ誘導体は、ＡＲＤＳを軽減または予防することが
見出されている。

【０００９】 アメリカ合衆国において、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、５番目に一般的
な死因である（１４）。ＣＯＰＤはまた、労働不適格および行動制限の最も重大
な原因の１つを構成している（１５）。ＣＯＰＤは、多くの他の肺疾患とともに
、肺高血圧症および右心室肥大または肺性心を引き起こす。アメリカ合衆国のみ
において１２００万人を超える患者が、慢性気管支炎または気腫に罹っており、
約３００万人は、ＰａＯ₂＜６０ｍｍＨｇで慢性的に低酸素性である。これらの 患者において、低酸素性肺血管収縮が発生し、最後には、右心室肥大が発生する
（１６）。右心室肥大が発生すると、これらの患者の３年死亡率は、６０％であ
る（１７，１８）。現行の管理と関係なく、ＣＯＰＤおよび肺高血圧症に罹って
いる患者の罹患率および死亡率は、高いままである。

【００１０】 肺高血圧症を研究するための１つのモデルは、肺胞低酸素症により誘発される
肺血管収縮である。単離された動物（１９）およびヒト（２０）の肺動脈におけ
る実験は、低酸素症誘発性肺血管収縮が低酸素症の肺血管平滑筋細胞に対する直
接的な影響により媒介されることを示唆している。低酸素症が組織Ｎａ⁺の増加 およびＫ⁺の減少を誘発することにより肺血管平滑筋膜を脱分極できることが報 告された（２１）。より最近には、低酸素症がラット主肺動脈平滑筋細胞の膜ポ
テンシャルを変化させることができ、電位ゲートチャンネルを介してＣａ²⁺流入
を刺激できることが報告された（２２）。Ｃａ²⁺進入遮断が、単離されたラット
肺において（２３）、および、慢性閉塞性肺疾患に罹患している患者において（
２４）、低酸素性肺血管収縮を弱めることができるという強力な証拠がある。低
酸素症は、Ｃａ²⁺の流入および／または流出に関与する他の膜輸送機構に影響を
及ぼし得ると考えられる。例えば、Voelkel et al.（２５）は、低酸素症がＣａ ²⁺ 排出を損ない得ると推測した。Farrukh et al.（２６）は、ｃＡＭＰおよびｃ
ＧＭＰが、Ｃａ²⁺ＡＴＰアーゼ依存性のＣａ²⁺の排出および／または再分布を刺
激することにより低酸素性肺血管収縮を逆転することを示した。ＤＨＥＡ、ＤＨ
ＥＡＳ、ＤＨＥＡコンジナーおよびＤＨＥＡ誘導体は、肺高血圧症を軽減または
防止することが見出されている。

【００１１】 上記の知見ならびにＤＨＥＡ、ＤＨＥＡＳ、ＤＨＥＡコンジナーおよびＤＨＥ
Ａ誘導体が内皮細胞によるｐ−セレクチンの発現を減少させるという知見は、例
えば、米国特許第５，４８９，５８１号；同第５，５３２，２３０号；同第５，
５８３，１２６号；同第５，５８７，３６９号；および同第５，６３５，４９６
号ならびにＰＣＴ／ＵＳ９５／１０９９０の公開公報（全てを本明細書に出典明
示で援用する）に示されている。

【００１２】 アレルギー性疾患は、少なくとも部分的に、ＩｇＥ抗体によって媒介されてお
り；ＩｇＥ抗体産生は、アレルギー性疾患の中心的な特徴である。アレルギー性
疾患は食物アレルギー、刺虫（stinging insect）アレルギー、ラテックスアレ ルギー、ならびにアナフィラキシー、アレルギー性鼻炎および喘息を包含する。
これは一時的にアトピー性皮膚炎（その病因は不明であるが、他のアレルギー性
疾患に関連しているようである）のような疾患にも関与する。この章はヒトの系
に焦点をあてているが、げっ歯類モデルについてのいくつかの結果を含む。

【００１３】 アメリカ合衆国の人口の２０％〜３０％がアレルギー性疾患に罹患している（
２７）。このことは、この疾患の患者であることの選択的優勢を示唆し得る。ア
レルギー性疾患の患者の大部分はアトピー性である。アトピー性個体は空気で運
ばれるアレルゲン（ブタクサ中のタンパク質および／または草の花粉および／ま
たは塵ダニ（dust mite））に対するＩｇＥ抗体を産生し、この個体はアレルギ ー性鼻炎よび／または喘息および／またはアトピー性皮膚炎を発現する。食物ア
レルギーはしばしば、若いアトピー性小児におけるアレルギー性疾患の最初の発
現である。さらに、アトピー性状態には強い遺伝的要素がある。

【００１４】 アレルギー性疾患の発現には、アレルゲンへの曝露、ＩｇＥ抗体産生の誘発、
ＩｇＥの肥満細胞および好塩基球の表面受容体への結合、アレルゲンへの再曝露
、アレルゲンへの細胞会合ＩｇＥへの結合、肥満細胞および好塩基球におけるシ
グナル伝達、メディエーターの分泌、ならびに末端器官（血管および気管支平滑
筋のような）に対するメディエーターの作用を包含する多数の連続的事象が必要
とされる。

【００１５】 CoombsおよびGell（２８）によって定義されるように、過敏症反応をＩ、ＩＩ
、ＩＩＩおよびＩＶと呼ばれる４つの型に細分化することができ、これらは組織
損傷を生じる４つの異なる免疫機構を表す。ＩＶ型反応のＩＶ ＡおよびＩＶ
Ｂへの細分化も以下に記載する。この分類を表１に概説する。これらの同じ４つ
の過程は、下記のように、感染性因子からの免疫防御の機構を表す。

【００１６】 Ｉ型反応は「即時型過敏症」または古典的アレルギー反応である。この反応は
可溶性抗原と肥満細胞に結合したＩｇＥ抗体との相互作用の後１５分以内に生じ
る。この病状は肥満細胞の脱顆粒に関連しており、この反応はヒスタミンおよび
リューコトリンＣ４（ＬＴＣ４）のような肥満細胞メディエーターによって駆動
される。インビボにおける対応物の例はペニシリンアレルギー患者におけるペニ
シリン注射後のじんま疹反応である。感染性生物からの防御におけるＩ型反応の
重要性は不明であるが、この反応によって媒介される血管透過性の上昇によって
、おそらく抗体および炎症細胞が感染部位に到着する能力が促進される（２９）
。

【００１７】 ＩｇＥ抗体応答を誘発することによって即時型過敏症の徴候を誘発する物質は
アレルゲンと呼ばれる。大部分のアトピー性個体はアエロアレルゲン（aeroalle
rgen）、すなわち空気中に見出されるアレルゲンの長いリストに対するＩｇＥ抗
体を産生する。これらのアレルゲンは、鼻または呼吸管における輸入免疫系に対
する曝露を介して感作を誘発する。屋外および室内の空気で運ばれる供給源、食
物ならびに昆虫毒に由来する種々のアレルゲンがクローン化され、配列決定され
ている。アレルゲンに対するＴ細胞応答パターンは、抗原フラグメントがＭＨＣ
クラスＩＩ分子を介して抗原提示細胞上にＴ細胞受容体に対して提示されるとう
い点で、従来の抗原に非常に類似しているようである（３０）。免疫優性ペプチ
ドがいくつかのアレルゲンで同定されている；これらは一般にＤＲ拘束性であっ
たが、最近の研究によってＤＰ拘束性応答が同定された（３１）。曝露の用量、
曝露の経路（例えば、粒子の型が何であるか）、および宿主の遺伝的背景のすべ
てが相互作用して、アレルゲンに対するＩｇＥ応答の程度が決定される。空気で
運ばれるアレルゲンに対する曝露のレベルは非常に低く、このことは特定のアレ
ルゲンエピトープに対する応答性を決定する免疫応答遺伝子が同定され得ること
を示唆する（３２）。さらに、アトピー性患者がＩｇＥを産生し、他の免疫応答
を空気で運ばれるアレルゲンに対して生じさせ、非アトピー性患者はそうではな
いことの理由は説明されていない。

【００１８】 ＩｇＥ抗体は寄生性抗原またはアレルゲンに応答して優先的に形成される。濃
度は低いが、ＩｇＥ抗体は高親和性で肥満細胞および好塩基球上の特異的受容体
（ＦｃεＲＩ）に結合する。ＩｇＥ分子とそれが結合する受容体との抗原架橋に
よって種々の細胞性メディエーターの放出または産生が開始される。メディエー
ターは一連の生理学的事象を開始し、これは、アレルギー性鼻炎、喘息およびじ
んま疹のようなアレルギー性疾患を導くが、寄生体に対する特異的防御免疫の付
与も補助し得る。

【００１９】 ＦｃεＲＩの抗原媒介性架橋の結果、肥満細胞からのメディエーターの分泌が
生じる。肥満細胞の形態および組織液中のメディエーターのレベルの両方によっ
て、肥満細胞の脱顆粒がインビボにおいてアレルギー反応の間に生じることが確
認される（３３、３４）。肥満細胞および好塩基球によって分泌されるメディエ
ーターによって、アレルギー反応の徴候が説明される（３５）。これは以下の事
前に形成され、顆粒に会合しているメディエーターを包含する：ヒスタミン（硫
酸化プロテオグリカンに結合、へパリまたはコンドロイチン硫酸のいずれか）、
プロテオグリカン自体、ならびにいくつかのプロテアーゼ（中性プロテアーゼ、
カルボキシペプチダーゼ（単数または複数）、トリプターゼ、および（いくつか
の肥満細胞において）キマーゼを包含する）。サイトカインＴＮＦ−αは部分的
に肥満細胞において貯蔵形態から放出されるが（３６）、このサイトカインはマ
クロファージまたはＴ細胞においては貯蔵されない。さらに、新たに合成された
分子（ＬＴＣ４、ＰＧＤ２およびＰＡＦを包含する）ならびにサイトカインが存
在する。

【００２０】 喘息は肺の大気道および小気道の慢性疾患であり（３７−３９）、人口の５％
〜１０％が罹患している。この疾患は小児においてより一般的であるが、何年も
持続し得、成人生活においてのみ発達し得る。喘息はいくつかの臨床的および病
理学的特徴によって特徴付けられる。最も顕著な特徴は気管支痙攣または気道の
狭化である；気管支痙攣はしばしば経時的にまたは処置によって回復する。喘息
患者は大気道および小気道の平滑筋の顕著な収縮、粘液産生の増加、ならびに好
酸球ならびに好塩基球およびＴリンパ球からなる炎症性浸潤物を有し；上皮細胞
の脱落が生じる（４０、４１）。気道の狭化は気管支平滑筋収縮のみならず粘液
産生および炎症にも起因する。重要な研究室の所見として、気道の狭化の証拠、
循環好酸球の増加および総血清ＩｇＥの穏やかな増加（同年令の非喘息患者と比
較して）が挙げられる。相当な数の患者がアトピー性であり、相当の数が特定の
アレルゲン（塵ダニのような）に対するＩｇＥ抗体を発現している（４２）。１
つのさらなる所見は、気道過剰反応性である。すなわち、ヒスタミンおよびメタ
コリン（アセチルコリン様因子）のような平滑筋収縮を誘発する刺激が全ての個
体において気管支痙攣を誘発し得るが、ずっと低濃度のこれらの気管支痙攣性因
子が過剰反応性個体において気管支収縮を誘発するために必要とされる。

【００２１】 喘息における全ての病理学的所見を誘発する機構が知られているわけではない
。多くの喘息患者において、アレルゲン曝露は全開の重篤な気道炎症のエピソー
ドを誘発し得る。そのような患者において、機構は、アレルゲンの吸入後に肺Ｌ
ＰＲを誘発する機構と同じであると推定される：すなわち、アレルゲンは肥満細
胞会合ＩｇＥ抗体を架橋し、これは次に肥満細胞メディエーターの放出を導く。

【００２２】 ヒスタミンおよびＬＴＣ４のような肥満細胞メディエーターは気管支痙攣およ
び粘液産生の重要なインデューサーである。おそらく肥満細胞またはＴ細胞（こ
れらは抗原提示細胞によってプロセシングされた抗原と相互作用い得る）に由来
するサイトカインは、炎症を誘発する。主要塩基性タンパク質、ペルオキシダー
ゼおよびカチオン性タンパク質のような好酸球由来メディエーターは上皮損傷の
誘発において重要であるようである（４０、４３）。非抗原依存性の喘息誘発機
構（ウイルス感染および運動を含む）が存在するようである。これらおよび他の
機構もまた肥満細胞活性化の共通経路によって開始される可能性がある（しかし
、多くの研究者は肥満細胞は中心的に重要ではないと考えている）。好酸球は重
要な喘息のメディエーターであるようであり；患者において、循環好酸球のレベ
ルは喘息が悪化すると増加する。さらに、グルココルチコイドは軽度のおよび重
篤な喘息の処置ならびに循環および組織の好酸球のレベルの低下に有効である。

【００２３】 いくつかの異常が喘息患者に存在し得る。これらはアトピー性である傾向にあ
り、従ってアレルゲンに対してＩｇＥを産生する傾向が増加しているのみならず
、その好塩基球は特定の刺激に応答してより容易にメディエーターを分泌する傾
向にある（４４）。さらに、多くの喘息患者はオートクラインまたは神経ペプチ
ド受容体のいくつかの異常を有することが報告されている。数年前、喘息患者に
おいて一般に、β−アドレナリン受容体（平滑筋の弛緩を媒介する）応答性が減
少し、コリン作動性およびβ−アドレナリン作動性（平滑筋収縮を媒介する）応
答性が増加することに注目された；実際、これらの患者の何人かは、β−アドレ
ナリン受容体に対する循環抗体を有する。しかし、これらの知見は、喘息に特異
的ではない（４５）。より最近では、喘息患者において、血管作用性腸ペプチド
（平滑筋を弛緩させるリガンド）の受容体が減少し、おそらくサブスタンスＰ（
平滑筋を収縮させるリガンド）の受容体が増加することが報告された（４６、４
７）。

【００２４】 いくつかの非ＩｇＥ経路が喘息をもたらす。ウイルス感染は付随する肺機能の
悪化を伴う（３８）。アスピリンのような非ステロイド抗炎症剤は喘息を悪化さ
せ得る；喘息患者の約５％はこの薬剤に感受性である（４８）。これらの薬剤が
アラキドン酸の代謝を変化させることによって作用するという仮説がたてられて
いる。なぜならこれらの薬剤はプロスタグランジン合成をブロックするからであ
る。しかし、正確な機構は不明である。喘息の別の原因は運動であり、これは見
かけ上、気道の温度および湿度の低下による。機構は明らかではない。１つの興
味深い仮説は、運動誘発性喘息が局所的高浸透圧の誘発から生じ、これが次に肥
満細胞の活性化を引き起こすというものであるが、これは確認されていない。こ
れら全ての非ＩｇＥ経路の中で、肥満細胞のメディエーター放出が役割を担うか
どうかは議論の余地がある。

【００２５】 最近の最も興味深い研究領域の１つは、アレルゲンの役割に関する。喘息に関
する救急処置室入室許可の事例研究によって、特定のアレルゲン、すなわち、塵
ダニ、ネコおよびゴキブリ由来の「室内アレルゲン」に対するＩｇＥ抗体が重要
な危険因子であることが確立された（３７、４９）。他の研究によって、アレル
ギー患者においてこれらのアレルゲンの吸入チャレンジが炎症性ＬＰＲおよび気
管支過剰反応を誘発することが示された。塵ダニ感受性の喘息患者は、塵ダニの
ない環境に移動させると、劇的な徴候の改善を示し得る（５０）。これらの後者
の知見は刺激的ではあるが、管理された研究において反復する必要がある。予想
外に、何人かの患者の改善には数ヶ月を要した；これについての明確な説明は存
在しない。以前に示されたように、塵ダニに関する他の研究によって、人生の最
初の２年間における塵ダニへの高い曝露が、１０才での喘息の存在の予測となる
ことが示唆されている。その結果、これらのアレルゲンの環境制御が喘息の処置
におけるその有効性について試験されている。さらに、免疫療法（下記を参照の
こと）はアレルゲン誘発性喘息のいくらかの患者に有効である。

【００２６】 アレルゲン以外の環境因子が喘息において重要であり得る。オゾンおよび一酸
化窒素のような特定の化学物質が喘息を悪化させることが報告されている（５１
、５２）。また、受動的なタバコ煙への曝露は喘息を悪化させる（５３）。

【００２７】 過去１０年の間に、喘息の発症率、その重篤度および喘息からの死亡が増加し
ている。喘息の罹患率および死亡率の増加は小児において最も顕著であり、アメ
リカ合衆国において罹患率および死亡率は過密地区のアメリカ黒人の小児におい
て最高である（５４）。これらの疫学的傾向は、適切には説明されていない。１
つの興味深い考えは、家屋のエネルギー効率を改善する試みで、これらの家屋が
より「気密性」になり、漏れが少なくなり、アレルゲンおよび他の有害環境因子
の濃度を増加させたというものである（５５）。

【００２８】 肥満細胞媒介性アレルギー反応（アレルゲンに対するＩ型過敏症応答および喘
息を含む）の処置に有用な化合物を同定することが所望されている。

【００２９】 （発明の概要） 本発明は、肥満細胞媒介性アレルギーおよび喘息を含む肥満細胞媒介性アレル
ギー反応を軽減する方法に関する。アレルゲンに対するＩ型過敏症応答および喘
息を含む肥満細胞媒介性アレルギー反応は、デヒドロエピアンドロステロン（Ｄ
ＨＥＡ）誘導体を患者に有効薬剤の血中レベルを迅速に上昇させる方法で投与す
ることによって軽減される。

【００３０】 （発明の詳細な説明） 本発明は、肥満細胞媒介性アレルギーおよび喘息を含む肥満細胞媒介性アレル
ギー反応を軽減する方法に関する。アレルゲンに対するＩ型過敏症応答および喘
息を含む肥満細胞媒介性アレルギー反応は、デヒドロエピアンドロステロン（Ｄ
ＨＥＡ）誘導体を患者に有効薬剤の血中レベルを迅速に上昇させる方法で投与す
ることによって軽減される。有効薬剤の血中レベルを迅速に上昇させるいずれか
の方法を利用することができるが、有効薬剤を静脈内、腹腔内または筋肉内で投
与することが好ましい。

【００３１】 ＤＨＥＡ誘導体の例としては、限定するものではないが、一般式ＩおよびＩＩ
：

【化２】

【００３２】 ［式中、 Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴およびＲ ¹⁹ は、独立して、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルまたはＣ_1-10アルコキシ
であり； Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立して、ＯＨ、ＳＨ、Ｈ、ハロゲン、医薬上許容されるエ ステル、医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるエーテル、医薬上許
容されるチオエーテル、医薬上許容される無機エステル、医薬上許容される単糖
、二糖またはオリゴ糖、スピロオキシラン、スピロチラン（spirothirane）、−
ＯＳＯ₂Ｒ²⁰、−ＯＰＯＲ²⁰Ｒ²¹またはＣ_1-10アルキルであるか；または Ｒ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであるか；または Ｒ¹⁰およびＲ¹¹は一緒になって＝Ｏであり； Ｒ¹⁵は、 （１）Ｒ¹⁶が−Ｃ(Ｏ)ＯＲ²²である場合、Ｈ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルもしく
はＣ_1-10アルコキシであるか、または （２）Ｒ¹⁶がハロゲン、ＯＨまたはＣ_1-10アルキルである場合、Ｈ、ハロゲン、
ＯＨもしくはＣ_1-10アルキルであるか、または （３）Ｒ¹⁶がＯＨである場合、Ｈ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルケニ
ル、Ｃ_1-10アルキニル、ホルミル、Ｃ_1-10アルカノイルもしくはエポキシである
か；または （４）Ｒ¹⁶がＨである場合、ＯＨ、ＳＨ、Ｈ、ハロゲン、医薬上許容されるエス
テル、医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるエーテル、医薬上許容
されるチオエーテル、医薬上許容される無機エステル、医薬上許容される単糖、
二糖またはオリゴ糖、スピロオキシラン、スピロチラン、−ＯＳＯ₂Ｒ²⁰または −ＯＰＯＲ²⁰Ｒ²¹であるか；または Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり； Ｒ¹⁷およびＲ¹⁸は、独立して、 （１）Ｒ¹⁶がＨ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルまたは−Ｃ(Ｏ)ＯＲ²²である
場合、Ｈ、−ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルもしくはＣ_1-10アルコキシである
か、または （２）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶が一緒になって＝Ｏである場合、Ｈ、(Ｃ_1-10アルキル)_n アミノ、(Ｃ_1-10アルキル)_nアミノ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、ヒド ロキシ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ−Ｃ_1-10アルキル、(ハロゲン)_m− Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルカノイル、ホルミル、Ｃ_1-10カルボアルコキシもし
くはＣ_1-10アルカノイルオキシであるか；または Ｒ¹⁷およびＲ¹⁸は、一緒になって＝Ｏであるか、または、それらが結合してい
る炭素と一緒になって、酸素原子０または１個を含有する３〜６員環を形成する
か；または Ｒ¹⁵およびＲ¹⁷は、それらが結合している炭素と一緒になって、エポキシド環
を形成し； Ｒ²⁰およびＲ²¹は独立して、ＯＨ、医薬上許容されるエステルまたは医薬上許
容されるエーテルであり； Ｒ²²は、Ｈ、(ハロゲン)_m−Ｃ_1-10アルキルまたはＣ_1-10アルキルであり； ｎは、０、１または２であり； ｍは、１、２または３である］ で示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩が挙げられる。

【００３３】 一般式ＩおよびＩＩで示される化合物は、米国特許第４，８９８，６９４号；
第５，００１，１１９号；第５，０２８，６３１号；および第５，１７５，１５
４号の記載（本明細書に出典明示で援用する）に従って合成される。一般式Ｉお
よびＩＩで示される化合物は、多くの立体異性体形で存在しており、これらの式
は、種々の立体異性体を包含することを意図している。

【００３４】 適切なＤＨＥＡ誘導体の例は式中以下である化合物を包含する： （１）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵は
ＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬
上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹ 、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸ およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵は
ＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬
上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷ はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、 Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （３）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上 許容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容さ
れる塩であり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、
Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （４）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上 許容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容さ
れる塩であり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、 Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （５）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨであ りかつＲ⁵およびＲ¹¹は独立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上 許容されるエーテルもしくは医薬上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶ ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、 Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈであ
る； （６）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨであ りかつＲ⁵およびＲ¹¹は独立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上 許容されるエーテルもしくは医薬上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶ ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンで
あり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ^{1 9} は、各々Ｈである； （７）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立し てＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルも
しくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、
Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （８）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立し てＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルも
しくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴ 、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈで
ある； （９）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵はＯＨ、その医薬上許容され
るエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬上許容される塩であるか、
またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸ 、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々 Ｈである； （１０）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ³はＨであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵はＯＨ、 その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬上許容
される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロ
ゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、 Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１１）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル 、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹、Ｒ² 、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷ 、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１２）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル 、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹⁷はハ
ロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、
Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１３）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨでありかつＲ⁵およびＲ¹¹は独
立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしく
は医薬上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は
独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹² 、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１４）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨでありかつＲ⁵およびＲ¹¹は独
立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしく
は医薬上許容される塩であるか、またはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は
独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴ 、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである ； （１５）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立してＳＨ、その医薬上許容 されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される
塩であり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴ 、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１６）Ｒ¹⁵はＯＨであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立してＳＨ、その医薬上許容 されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される
塩であり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、
Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１７）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵はＯＨ、その医薬上許容さ
れるエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬上許容される塩であるか
またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸ 、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々 Ｈである； （１８）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁶はＨでありかつＲ⁵はＯＨ、その医薬上許容さ
れるエステル、医薬上許容されるエーテルもしくは医薬上許容される塩であるか
またはＲ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、 Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸お
よびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （１９）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル 、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹、Ｒ² 、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷ 、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２０）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁵はＳＨ、その医薬上許容されるチオエステル 、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容される塩であり、Ｒ¹⁷はハ
ロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³ 、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２１）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨでありかつＲ⁵およびＲ¹¹は独
立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしく
は医薬上許容される塩であるかまたはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は独
立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、 Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２２）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁶およびＲ¹⁰はＨでありかつＲ⁵およびＲ¹¹は独
立してＯＨ、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルもしく
は医薬上許容される塩であるかまたはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹は独
立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、
Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２３）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立してはＳＨ、その医薬上許 容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容され
る塩であり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ ¹⁴ 、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２４）Ｒ¹⁵はＳＨであり、Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立してはＳＨ、その医薬上許 容されるチオエステル、医薬上許容されるチオエーテルもしくは医薬上許容され
る塩であり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹ 、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈである； （２５）Ｒ⁶、Ｒ¹⁰およびＲ¹⁶はＨでありかつＲ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵は独立して
ＯＨ、糖残基、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルまた
は医薬上許容される塩であるかまたはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹なら
びにＲ¹⁵およびＲ¹⁶は独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、
Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈであり、 Ｒ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵の少なくとも１個は糖残基である； （２６）Ｒ⁶、Ｒ¹⁰およびＲ¹⁶はＨでありかつＲ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵は独立して
ＯＨ、糖残基、その医薬上許容されるエステル、医薬上許容されるエーテルまた
は医薬上許容される塩であるかまたはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹なら
びにＲ¹⁵およびＲ¹⁶は独立して一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり
、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は 、各々Ｈであり、Ｒ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵の少なくとも１個は糖残基である； （２７）Ｒ⁶、Ｒ¹⁰およびＲ¹⁶はＨでありかつＲ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵は独立して
ＯＨ、その医薬上許容される無機エステル、または医薬上許容される塩であるか
またはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹ならびにＲ¹⁵およびＲ¹⁶は独立して
一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、 Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈであり、Ｒ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵の少なく とも１個は無機エステルである； （２８）Ｒ⁶、Ｒ¹⁰およびＲ¹⁶はＨでありかつＲ⁵、Ｒ¹¹およびＲ¹⁵は独立して
ＯＨ、その医薬上許容される無機エステル、または医薬上許容される塩であるか
またはＲ⁵およびＲ⁶ならびにＲ¹⁰およびＲ¹¹ならびにＲ¹⁵およびＲ¹⁶は独立して
一緒になって＝Ｏであり、Ｒ¹⁷はハロゲンであり、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁷、 Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、各々Ｈであり、Ｒ⁵、Ｒ¹¹お よびＲ¹⁵の少なくとも１個は無機エステルである。

【００３５】 医薬上許容されるエステルまたはチオエステルは、限定するものではないが、
式−ＯＯＣＲまたは−ＳＯＣＲ［式中、Ｒは医薬上許容されるアルキル、アルケ
ニル、アリール、アルキルアリール、スフィンゴシン（spingosine）、または置
換スフィンゴ脂質（spingolipid）基、例えば、プロピオネート、エナンテート 、シピオネート（cypionate）、スクシネート、デカノエートおよびフェニルプ ロピオネートエステルである］で表されるエステルまたはチオエステルを包含す
る。

【００３６】 医薬上許容されるエーテルまたはチオエーテルは、限定するものではないが、
式−ＯＲまたは−ＳＲ［式中、Ｒは上記で定義したとおりであるかまたはエノー
ルであるか、または−ＯＲは非置換もしくは置換スピロオキシランであるかまた
は−ＳＲはスピロチアン（spirothiane）である］で表されるエーテルまたはチ オエーテルを包含する。

【００３７】 適切な糖残基は、限定するものではないが、単糖、二糖およびオリゴ糖、例え
ばグルクロネートを包含する。

【００３８】 医薬上許容される無機エステルは、限定するものではないが、式−ＯＳＯ₂Ｒ^{2 0} または−ＯＰＯＲ²⁰Ｒ²¹［式中、Ｒ²⁰およびＲ²¹は独立して−ＯＨ、医薬上許 容されるエステル、医薬上許容されるエーテルまたは医薬上許容される塩である
］で表される無機エステルを包含する。

【００３９】 一般式ＩおよびＩＩで示される範囲内に入る代表的な化合物の例は、以下を包
含する： ５α−アンドロスタン−１７−オン； １６α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７−オン； ３β−メチル−５α−アンドロステン−１７−オン； １６α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７−オン； １７β−ブロモ−５−アンドロステン−１６−オン； １７β−フルオロ−３β−メチル−５−アンドロステン−１６−オン； １７α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１６−オン； ３β−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７−オン； １７α−メチル−５α−アンドロスタン−１６−オン； １６α−メチル−５−アンドロステン−１７−オン； ３β,１６α−ジメチル−５−アンドロステン−１７−オン； ３β,１７α−ジメチル−５−アンドロステン−１６−オン； １６α−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７−オン； １６α−フルオロ−１６β−メチル−５−アンドロステン−１７−オン； １６α−メチル−５α−アンドロスタン−１７−オン； １６−ジメチルアミノメチル−５α−アンドロスタン−１７−オン； １６β−メトキシ−５−アンドロステン−１７−オン； １６α−フルオロメチル−５−アンドロステン−１７−オン； １６−メチレン−５−アンドロステン−１７−オン； １６−シクロプロピル−５α−アンドロスタン−１７−オン； １６−シクロブチル−５−アンドロステン−１７−オン； １６−ヒドロキシメチレン−５−アンドロステン−１７−オン； ３α−ブロモ−１６α−メトキシ−５−アンドロステン−１７−オン； １６−オキシメチレン−５−アンドロステン−１７−オン； ３β−メチル−１６ξ−トリフルオロメチル−５α−アンドロスタン−１７−
オン； １６−カルボメトキシ−５−アンドロステン−１７−オン； ３β−メチル−１６β−メトキシ−５α−アンドロスタン−１７−オン； ３β−ヒドロキシ−１６α−ジメチルアミノ−５−アンドロステン−１７−オ
ン； １７α−メチル−５−アンドロステン−１７β−オール； １７α−エチニル−５α−アンドロスタン−１７β−オール； １７β−ホルミル−５α−アンドロスタン−１７β−オール； ２０,２１−エポキシ−５α−プレグナン−１７α−オール； ３β−ヒドロキシ−２０,２１−エポキシ−５α−プレグナン−１７α−オー ル； １６α−フルオロ−１７α−エテニル−５−アンドロステン−１７β−オール
； １６α−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７α−オール； １６α−メチル−５α−アンドロスタン−１７α−オール； １６α−メチル−１６β−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７α−オール
； １６α−メチル−１６β−フルオロ−３−ヒドロキシ−５−アンドロステン−
１７α−オール； ３β,１６β−ジメチル−５−アンドロステン−１７β−オール； ３β,１６,１６−トリメチル−５−アンドロステン−１７β−オール； ３β,１６,１６−トリメチル−５−アンドロステン−１７−オン； ３β−ヒドロキシ−４α−メチル−５−アンドロステン−１７α−オール； ３β−ヒドロキシ−４α−メチル−５−アンドロステン−１７−オン； ３α−ヒドロキシ−１α−メチル−５−アンドロステン−１７−オン； ３α−エトキシ−５α−アンドロスタン−１７β−オール； ５α−プレグナン−２０−オン； ３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン； １６α−メチル−５−プレグネン−２０−オン； １６α−メチル−３β−ヒドロキシ−５−プレグネン−２０−オン； １７α−フルオロ−５−プレグネン−２０−オン； ２１−フルオロ−５α−プレグナン−２０−オン； １７α−メチル−５−プレグネン−２０−オン； ２０−アセトキシ−シス−１７(２０)−５α−プレグネン； ３α−メチル−１６,１７−エポキシ−５−プレグネン−２０−オン。

【００４０】 患者への、治療有効量の、上記一般式ＩおよびＩＩで定義されるＤＨＥＡ、Ｄ
ＨＥＡＳ、ＤＨＥＡコンジナーまたはＤＨＥＡ誘導体の、生理学上許容される担
体中での投与が、アレルゲンに対するＩ型過敏症応答および喘息を含む肥満細胞
媒介性アレルギー反応を軽減または防止し得ることが見出された。ＤＨＥＡ誘導
体を、アレルゲンに対するＩ型過敏症応答または喘息応答の徴候が出現した後に
できるだけすぐに投与する。ＤＨＥＡ誘導体を、全身投与を確実にし、その結果
、有効薬剤の血中レベルを迅速に上昇させるような方法で投与する。適切な投与
様式は、静脈内、筋肉内、鼻内、眼内、吸入、エアロゾルまたは腹腔を包含する
。さらに、有効薬剤の迅速な取り込みを可能にするパッチを使用することができ
る。ＤＨＥＡ誘導体を患者に、他の医薬上許容される形態で、結合剤、エリキシ
ルまたは他の医薬上許容される混合物内で、他の医薬上許容される担体とともに
投与する。

【００４１】 有効成分として本発明の化合物を含有する医薬組成物を、従来の医薬調合技術
に従って調製することができる。例えば、Remington's Pharmaceutical Science s , 18版（1990, Mack Publishing Co., Eaton, PA）を参照のこと。代表的には 、治療有効量の有効成分を医薬上許容される担体とともに混合する。担体は、投
与（例えば、静脈内、筋肉内、鼻内、眼内、吸入または非経口）に所望される調
製物の形態に依存して、広範な形態をとり得る。

【００４２】 非経口投与のためには、化合物を医薬担体中に溶解して、溶液または懸濁液の
いずれかとして投与してもよい。適切な担体の例は、水、生理食塩水、デキスト
ロース溶液、フルクトース溶液、エタノール、または動物、植物もしくは合成起
源の油である。担体はまた、他の成分（例えば、保存剤、懸濁剤、可溶化剤、緩
衝剤など）を含有してもよい。

【００４３】 ＤＨＥＡ誘導体の用量は、例えば、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１
〜５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは２〜２０ｍｇ／ｋｇのＤＨＥＡ等価用量を送
達するように、周知の医薬上許容される原理に基づく。一般に、このレベルのＤ
ＨＥＡ用量またはＤＨＥＡ等価用量を送達するために必要なＤＨＥＡ誘導体の用
量は、１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２〜５００ｍｇ／ｋｇ、より好まし
くは２〜２００ｍｇ／ｋｇである。ＤＨＥＡ誘導体の用量を常法を用いて容易に
決定することができ、それは一般に上記の用量の範囲内である。非保護化合物、
すなわちヒトのスルホトランスフェラーゼまたはスルファターゼによって硫酸化
されることができるものについては、特にスルファターゼが組織損傷部位におい
て活性でない場合、過剰用量を投与して、十分な有効薬剤が投与されることを確
実にすることが好ましい。

【００４４】 いくつかの処置プロトコルを、肥満細胞由来アレルギー反応を軽減するために
使用することができる。１つの実施態様において、ＤＨＥＡ誘導体のボーラスを
投与し、系から浄化させる。さらに６回までの処置を２４時間の期間にわたって
行うことができる。第２の実施態様において、ＤＨＥＡ誘導体のボーラスを投与
し、続いてＤＨＥＡ誘導体を注入する。注入を１時間の期間にわたって行い、こ
れは上記の用量の半分を含有する。ＤＨＥＡ誘導体を系から浄化させ、さらに６
回までの処置を２４時間の期間にわたって行うことができる。さらに、これらの
プロトコルのいずれかの組合せを使用することができる。処置がアレルゲンに対
するＩ型過敏症応答用である場合、応答の徴候および重篤度に依存して、好まし
い送達様式は、吸入、エアロゾル、鼻内または眼内である。処置が喘息用である
場合、好ましい送達様式は、吸入、エアロゾル、静脈内および筋肉内である。

【００４５】 本発明を、以下の実施例を参照して記載する。これらの実施例は、説明のため
に記載しており、如何なる場合も本発明を限定するものではない。当該技術分野
において周知の標準的技術または以下に詳細に記載する技術を利用した。

【００４６】実施例１ 再灌流損傷に対するＤＨＥＡの効果 体重１３０〜１７０ｇの雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、前処置
なし、ビヒクル前処置またはＤＨＥＡ前処置（４ｍｇ／ｋｇ）にランダムに振り
分けた。手術前日および当日に動物をビヒクルまたはＤＨＥＡで処置した。腹腔
内ペントバルビタール（６０〜７０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔を誘発した。このラット
を加熱パッド上に置き、体温（直腸プローブにより測定した）を３５〜３７℃に
維持した。精巣挙筋のその神経血管茎上での検出は、慣用的な技術に従って行っ
た（７８−８０）。すなわち、皮膚切開は、前腸骨棘から陰嚢の先端まで行う。
次いで、精巣挙筋が無傷のまま精巣を陰嚢から解剖して取り出す。精巣挙筋の腹
側表面に１ｃｍの開口を設け、精巣および精索を取り出す。次いで、顕微鏡下、
外腸骨動脈および静脈から血管の起点まで解剖することにより、恥骨−上腹部動
脈、静脈および陰部大腿神経からなる神経血管茎を完全に単離する。最後に、精
巣挙筋嚢の前壁を開き、生体内ビデオ顕微鏡検査用に島状精巣挙筋皮弁を調製す
る。ラットを特別に設計した組織浴上で固定し、精巣挙筋皮弁を浴底部の開口部
にあるカバーガラスに広げ、５−０シルク縫合糸で固定する。次いで、光ファイ
バータングステンランプを用いて下から透過する。筋肉は、湿気を保持し、不浸
透性プラスチックフィルムで覆う。温度制御のために特別に設計した組織浴を０
．９％生理食塩水で満たし、温度を３５〜３６℃に維持する。顕微鏡には、カラ
ービデオカメラを装備している。微小循環のビデオ画像を、最終倍率が×１８０
０である１９”モニターに映す。筋肉の単離後に微小血管活性の測定値を記録し
て、虚血前基準を確立する。筋肉皮弁への血流を完全に遮断するように鉗子を適
当な位置に付けた後の虚血期間は、６時間である。鉗子を取り外して再灌流損傷
を誘発した後、微小脈管構造における活性を、再灌流の３０、６０および９０分
後に測定する。全ての実験対象において、虚血の後に再流動が続き、次いで、微
小循環を通る最初の血流期間がそれに続く。この循環活性の突発の後に、流動の
損失を誘発する著しい再灌流損傷が続く。

【００４７】 以下のパラメーターを用いて、虚血前および再灌流後の精巣挙筋微小血管系の
状態を評価する。

【００４８】 １）灌流した毛細血管の密度。３つの皮弁領域（ゾーン１、２および３）の各
々における灌流した毛細血管の密度を、予め選択した後毛細管細静脈の付近に流
動している毛細血管の数を計数することにより測定する。精巣挙筋皮弁当たり合
計２７個の視野とするために、各後毛細管細静脈部位で毛細血管の９つの視野を
計数する。ゾーン１、２および３についての結果を、各々、図１Ａ、１Ｂおよび
１Ｃに示す。

【００４９】 ２）後毛細管細静脈における白血球数。３つの予め選択した後毛細管細静脈の
ビデオスキャンを、近位、中位および遠位の皮弁領域で行う。各細静脈について
、２分間にわたって、内腔を通って運ばれている白血球の数、内皮に接着してい
る数および内皮を通過して移動した数を記録する。運ばれるもの、付着するもの
および血管外遊出についての結果を、各々、図２Ａ、２Ｂおよ２Ｃに示す。

【００５０】 ３）Ａ１（一次）およびＡ２（二次）細動脈における赤血球速度。特別注文の
光学的ドップラー速度計測器（optical Doppler velocimeter）を用いて、精巣 挙筋皮弁の主細動脈における赤血球速度を記録する。静脈血および動脈血の速度
についての結果を、各々、図３Ａおよび３Ｂに示す。

【００５１】 Ａ．未処置およびビヒクル処置ラットにおける再灌流損傷 ラット６匹は、未処置であり、ラット６匹は、ビヒクルで前処置した。虚血６
時間および再灌流９０分間の条件下、運ばれている白血球、付着している白血球
および遊出した白血球の絶対数が再灌流の６０分以内に劇的に増加し、９０分後
にさらなる増加を示した（図２Ａ−２Ｃ）。再灌流の３０および６０分後の両方
で存在した高倍率視野当たりの灌流した毛細血管の絶対数において劇的な減少が
観察され、再灌流の９０分後に流動している毛細血管の数の減少が持続している
ことが観察された（図１Ａ−１Ｃ）。同様に、Ａ２サイズの血管の赤血球速度は
、再灌流の６０および９０分後に有意に遅くなっていた（図３Ａおよび３Ｂ）。

【００５２】 Ｂ．ＤＨＥＡ処置ラットにおける再灌流損傷 手術前日および当日にラットを皮下注射によりＤＨＥＡ ４ｍｇ／ｋｇで前処 置した条件下、治療の著しくかつ非常に有意な保護効果を測定した。３つのパラ
メーターは全て、正常値に近いか、または正常値と同一の値を示した。重要なこ
とには、全ての時点で、内皮接着特性が基準値から変化しなかったことに注目し
た。この結論は、運ばれている白血球、付着している白血球および遊出している
白血球の数が基準値と著しく類似しているようであるという事実に基づいている
（図２Ａ−２Ｃ）。Ａ２細動脈における赤血球速度は、遅くなって正常な流速に
戻り、いくつかの領域における速度は、再灌流の９０分後に正常の７５％と測定
された（図３Ａおよび３Ｂ）。この９０分の時点で、微小脈管構造において流動
している毛細血管の数は、虚血前に得られた基準値とは有意には異なっていなか
った（図１Ａ−１Ｃ）。

【００５３】 ＤＨＥＡの代わりに、用いたＤＨＥＡの１．５倍の用量のＤＨＥＡＳを用いた
場合、同様の結果が得られる。上記ＤＨＥＡ誘導体について、同様の結果が得ら
れる。

【００５４】 ＤＨＥＡコンジナーの生理学的および生化学的作用のいずれの理論にも拘束さ
れずに、これらの化合物の抗虚血効果は、好中球の内皮細胞への接着に対するそ
れらの活性によるものであると考えられる。従って、これらの化合物は、内皮細
胞への接着に影響を及ぼすことにより調節できる他のタイプの組織損傷から生じ
得る虚血を防止または軽減するのに有効である。この好中球接着の阻害は、好中
球の活性化および内皮の組織側への遊出を防止する。好中球の遊出が阻害される
ので、内皮細胞および実質細胞に対する好中球により誘発される大きな損傷が防
止される。好中球の活性化が防止されるので、血小板凝集に至る細胞因子の生産
（好中球による）もまた防止される。このようにして、進行性組織壊死が防止ま
たは軽減される。さらに、腸組織の進行性虚血（細菌トランスロケーションに至
る）および上皮および心筋の進行性虚血ならびに肺胞壁の虚血（ＡＲＤＳに至る
）は、同様の機構を介して媒介される。従って、これらの化合物は、また、細菌
トランスロケーションおよびＡＲＤＳを防止または軽減するのに有効である。

【００５５】実施例２ 血小板によるＰ−セレクチンの発現に対するＤＨＥＡの効果 新しく採血した血液（円熟成人および年配者）から血小板を分別した。非洗浄
または洗浄のいずれかの血小板を用いた。洗浄血小板は、常法により得た（８１
，８２）。すなわち、７容量の血液に対して１容量の抗凝固剤（０．０８５Ｍク
エン酸ナトリウム、０．０６５Ｍクエン酸、２％デキストロース）を含有する注
射器に血液を採集した。慣用的に、血液５０ｍｌを採血し、血液試料を室温で１
５分間１８０×ｇで遠心分離して赤血球および白血球を沈降させた。血小板に富
む血漿上清の上部３分の２を吸引により注意深く取りだし、室温で１０分間、１
１００×ｇで遠心分離することにより血小板をペレット化した。上清をデカント
し、試料を洗浄用緩衝液（カルシウムを含有しないタイロード緩衝液、ｐＨ６．
５０、３７℃）２ｍｌに穏やかに混合することにより血小板を再懸濁した。次い
で、血小板懸濁液をタイロード緩衝液で初期採血容量と同量になるまで希釈し、
室温で１０分間、１１００×ｇで遠心分離した。血小板を遠心分離によりさらに
２回洗浄し、インキュベーション緩衝液（３７℃でｐＨ７．４に調節した洗浄用
緩衝液）５ｍｌに再懸濁した。血小板をノイバウエル血球計算板で計数した。

【００５６】 洗浄および非洗浄血小板を直接免疫染色法によりＰ−セレクチンの存在につい
て試験した。血小板（１×１０⁶）を、氷上で１５分間、フィコエリトリンと結 合した陰性対照抗体または抗ヒトＰ−セレクチンモノクローナル抗体（ＣＤ６２
抗体、ＣＡＭＦｏｌｉｏ、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ)のいずれかと一 緒にインキュベートした。その後、試料を染色用緩衝液（ＰＢＳ、０．１％アジ
化ナトリウム、２％ウシ胎児血清）で２回洗浄し、染色用緩衝液５００μｌで再
構成し、ＦＡＣＳｃａｎフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓ
ｏｎ）により分析した。蛍光は、一様目盛上での単一パラメーターヒストグラム
として示した。

【００５７】 円熟個体の血液から得た洗浄血小板の表面上でのＰ−セレクチンレベルの測定
は、洗浄血小板（休止血小板）の約５０％がＰ−セレクチンの存在について陽性
の結果であることを示した。年配個体の血液から得た非洗浄血小板の６８％は、
Ｐ−セレクチンについて陽性の結果であった。この個体からの全血を血小板の分
別前に最終濃度１０μＭのＤＨＥＡで補充して試験した場合、血小板の１２％が
Ｐ−セレクチンについて陽性に染色されただけであった。このＤＨＥＡによるＰ
−セレクチンのダウンレギュレーションは、トロンビン活性化血小板凝集の４０
％の減少を伴った。この後者の個体をＤＨＥＡＳによる補充療法下に置き、血小
板をＤＨＥＡＳによる補充療法の間に採血した血液から分別した場合、この血小
板は、治療前の活性化と同量のトロンビンで活性化すると、外因性ＤＨＥＡに不
応性であった。このように、観察された、ＤＨＥＡによる年配個体由来の血小板
の表面上でのＰ−セレクチンのダウンレギュレーションは、ＤＨＥＡによるこれ
らの血小板のトロンビン刺激性凝集の防止を伴った。

【００５８】 ＤＨＥＡの代わりに、ＤＨＥＡの１．５倍の用量のＤＨＥＡＳを用いた場合、
同様の結果が得られる。上記ＤＨＥＡ誘導体について、同様の結果が得られる。

【００５９】実施例３ 内皮細胞によるＰ−セレクチンの発現に対するＤＨＥＡの効果 慣用的な技術を用いて、非ウイルス形質転換ヒト皮膚微小血管内皮細胞を培養
した。継代数２の細胞を付着因子（attachment factor）で被覆したカバーガラ ス上に置き、それらが集密状態になるまで、フェノールレッドを含まない無血清
系中で増殖させた。細胞群をビヒクルのみ、または１μＭ、１０μＭ、２５μＭ
、５０μＭもしくは１００μＭ ＤＨＥＡと一緒に３７℃で１０分間インキュベ ートした。次いで、細胞を１０^-5Ｍヒスタミンまたはダルベッコのリン酸緩衝生
理食塩水（ｄＰＢＳ）で３７℃で５分間活性化した。

【００６０】 次いで、細胞を間接免疫染色／蛍光顕微鏡検査により試験した。すなわち、細
胞をまず１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するｄＰＢＳで２〜３回、毎
回１〜２分間洗浄した。次いで、細胞を氷冷メタノール中で５〜７分間固定し、
次いで、１％ＢＳＡおよび０．０１％アジドを含有するｄＰＢＳで２〜３回洗浄
した。次いで、細胞を、抗Ｐ−セレクチン抗体と一緒に４℃で加湿チャンバー中
で３０分間インキュベートした。次いで、細胞を、４℃の１％ＢＳＡを含有する
ｄＰＢＳで２〜３回、毎回１〜２分間洗浄した。次いで、細胞を、Ｐ−フィコエ
リトリンに結合した抗抗体と一緒に４℃で３０〜４０分間インキュベートし、そ
の後、細胞を、４℃の１％ＢＳＡを含有するｄＰＢＳで２〜３回、毎回１〜２分
間洗浄した。次いで、スライドに載せ、ローダミンフィルターセット用いて、蛍
光顕微鏡検査で、内皮上でのＰ−セレクチン発現を試験する。

【００６１】 血小板におけるＰ−セレクチン発現について見られたと同様の結果が示される
。すなわち、１０μＭまたはそれよりも高い濃度のＤＨＥＡは、ヒスタミンに応
答して内皮上で通常観察されるＰ−セレクチン発現のアップレギュレーションを
防止した。ヒスタミン活性化前にＤＨＥＡと一緒にインキュベートした内皮は、
対照である非活性化内皮と同様に見えた。

【００６２】 ＤＨＥＡの代わりにＤＨＥＡＳを用いた場合、同様の結果が得られる。上記Ｄ
ＨＥＡ誘導体について、同様の結果が得られる。

【００６３】実施例４ 出血性ショックに対するＤＨＥＡＳの効果 ６〜８月齢のＣＦ−１マウスにメトキシフルロタン（methoxyflurothane）を 用いて麻酔をかけ、腹部手術の準備をした。必要な外科レベルの麻酔を維持する
ために、必要に応じて、ノーズ・コーン装置（nose cone apparatus）中でメト キシフルロタンを用いた。各マウスを呼吸のレベル、まばたき応答および皮膚を
つまむことに対する応答について試験して、手術に適した麻酔のレベルを確実に
した。腹部手術時間は、約２時間であり、その間に、動物の血液の量の３５〜４
０％を３０分間にわたって取り出す。制御された方法における血液の除去は、出
血性ショックの作用を刺激する。中心静脈へ取り出した血液および２倍の容量の
蘇生用流体（乳酸加リンゲル溶液）をゆっくりと静脈内注入した。蘇生用流体を
ＤＨＥＡＳ ２ｍｇまたはプラセボとしての賦形剤で補充した。腹膜およびその 上に重なる皮膚を別々に縫合した。完全に回復するまで、動物を３８°〜３９℃
に維持した。これらの条件下で、プラセボ処置動物のほとんどが２４〜４８時間
以内に死亡した。術後４時間目に、細菌についてのコロニー形成単位（ＣＦＵ）
アッセイを行い、慣用的な技術を用いて、肝臓中のマロンジアルデヒドをアッセ
イした。すなわち、腸間膜リンパ節（ＭＬＮ）を取り出し、血液寒天プレート上
で培養し、培養後、ＣＦＵの数を計数した。肝臓を取り出し、マロンジアルデヒ
ドの量を測定した。生存率、ＣＦＵおよびマロンジアルデヒドの結果を表２に示
す。

【００６４】

【表１】

【００６５】 ＤＨＥＡＳの代わりにＤＨＥＡを用いた場合、同様の結果が得られる。上記Ｄ
ＨＥＡ誘導体について、同様の結果が得られる。

【００６６】実施例５ 低酸素症誘発性肺血管収縮に対するＤＨＥＡの効果 単離し灌流したフェレットの肺は、二次的肺高血圧症を研究するための確立し
た動物モデルであり、これをこの実施例で用いた。すなわち、雄性のフェレット
をペントバルビタールナトリウムで腹腔内麻酔し、胸部を切開した。ステンレス
製カニューレを左心房および肺動脈中に固定し、肺動脈および大動脈を結紮した
。８５ｍｌ／分の一定速度での循環方法で自己血液およびＫｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓ
ｅｌｅｉｔ緩衝液の混合物で肺を灌流した。灌流回路は、灌流液レザバー、ロー
ラー灌流ポンプ、フィルターおよび熱交換器を包含していた。灌流系は、接続の
ためおよび灌流ポンプの通過のために用いたタイゴン（tygon)管からなっていた
。灌流液の温度は、３７〜３８℃に維持し、ｐＨは、必要に応じてレザバーに重
炭酸ナトリウムを添加することにより、７．３５〜７．４０に維持した。静脈レ
ザバーは、肺の最下部の下に設置した。

【００６７】 Ｈａｒｖａｒｄ動物人工呼吸器を用いて、気管切開術により、肺を５％ＣＯ₂ 、４％Ｏ₂、および９１％Ｎ₂からなる低酸素ガス混合物で換気した。動物を、呼
吸１８回／分の速度および２ｃｍ Ｈ₂Ｏ呼気終末陽圧で、一回換気量３０ｍｌで
換気した。測定のために、肺動脈、左心房および気管の圧力を、流入循環に接続
したＧｏｕｌｄ Ｓｔａｔｈａ Ｐ２３１Ｄ圧変換器を用いてモニターし、Ｇｒ
ａｓｓポリグラフで記録した。低酸素ガス混合物で３０分間換気した後、体重１
ｋｇ当たり８〜１２ｍｇの用量のＤＨＥＡをレザバーに添加し、灌流液をフェレ
ットの肺に１．５時間灌流した。ＤＨＥＡの送達に際して肺動脈圧の基準レベル
への突然の低下が見られた。実験の最後まで、すなわち、合計２時間、肺動脈圧
は、基準レベルのままであった。これらの結果は、低酸素症に応答して収縮した
肺循環におけるＤＨＥＡの血管拡張効果を示す。ＤＨＥＡ処置は、肺圧を完全に
正常値に低下させ、この圧低下は、保持された。同一モデルにおいて酸化窒素（
慣用的に用いられている治療薬）と比較した場合、ＤＨＥＡの方が肺動脈圧の低
下において強力であった。硝酸の効果は、ほんの数分間続いただけであるが、Ｄ
ＨＥＡの効果は、少なくとも２時間続いた。上記ＤＨＥＡ誘導体について、同様
の結果が得られる。

【００６８】実施例６ 骨髄由来肥満細胞プロトコル 肥満細胞を常法によって調製する（５６−５８）。すなわち、脚をＢａｌｂ／
ｃマウスから取り出し、肉を剥し、髄をＰＢＳで２７ｇ針を使用してフラッシュ
する。細胞を２／３ ＲＰＭＩ−１６４０＋１９％ＦＢＳおよび組換えＩＬ−３
を分泌する細胞の混合物中で培養する。実験に使用する前に、ＩＬ−３含有混合
物中で１８〜２５日間、骨髄細胞を分化させる。このようにして培養した骨髄細
胞が粘膜肥満細胞と類似の表現型を有することが決定されており、これを骨髄由
来肥満細胞（ＢＭＭＣ）という。

【００６９】 刺激後、ＢＭＭＣの脱顆粒を分光光学的に測定する。すなわち、ＨＢＳＳ中１
０⁷細胞／ｍｌの密度のＢＭＭＣを１０分間室温で、ＤＭＳＯ中に溶解した１０ ０μＭ ＤＨＥＡまたはＤＭＳＯ単独とともにインキュベートする。次いで、刺
激物を添加し、細胞を３０分間３７℃で脱顆粒させる。次いで、細胞を遠心分離
し、上清を採集する。上清を３連でグルクロニダーゼ（-glucoronidase）活性に
ついて、１００μＬの上清を、クエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）中０．５ｍｇ／ｍ
Ｌのフェノールフタレイン−グルクロン酸１５０μＬに添加することによってア
ッセイする。反応を１．５時間３７℃で進行させ、その後、２５０μＬの０．４
Ｍグリシン（ｐＨ １０．５）を添加することによって停止する。次いで、試料
の吸光度を分光光学的に５５２ｎｍにおいて読み取る。

【００７０】実施例７ ＡＴＰを使用する培養マウス肥満細胞のインビトロにおける脱顆粒 肥満細胞の均質な集団を、マウス骨髄から、上記のような、受け入れられ、十
分に記載された方法を使用して培養した。インビトロで増殖させた肥満細胞の均
質性を、ＩｇＥのＦｃ受容体について染色する従来のフローサイトメトリー技術
により確認および保証した。増殖の１４日目と２１日目との間に、成熟肥満細胞
を回収し、試験培養用に調製した。目的は、肥満細胞刺激共役脱顆粒に対するＤ
ＨＥＡの効果を評価することであった。調製した肥満細胞を試験培養ウェル中に
、１×１０⁷細胞／ｍｌの密度で分注した。いくつかの培養物において、１００ μＭ ＡＴＰを試験培養物に添加した後、肥満細胞を誘導して脱顆粒させた。肥
満細胞培養物の平行群を種々の用量のＤＨＥＡに再曝露し、続いてＡＴＰで活性
化した。図４の例において、刺激の非存在下において、細胞の細胞質ゾル貯蔵顆
粒からのβ−グルクロニダーゼの放出によって測定したところ、肥満細胞の測定
可能な脱顆粒は存在しない。なお、１００μＭ ＡＴＰの培養物への導入によっ
てβ−グルクロニダーゼの有意な放出が引き起こされた。肥満細胞をＤＨＥＡ単
独に曝露した場合、測定可能な脱顆粒は存在しなかった。しかし、ＡＴＰによる
活性化の５〜１０分前にＤＨＥＡの１００μＭ用量に前曝露した肥満細胞培養物
は、脱顆粒の約８０％阻害を示した。より低い用量のＤＨＥＡは代表的には比例
してより低い脱顆粒阻害能力を示す。

【００７１】実施例８ ＩｇＥ受容体の生理的刺激架橋を使用する培養マウス肥満細胞のインビトロにお ける脱顆粒 肥満細胞の均質な集団をマウス骨髄から、上記のような、受け入れられ、十分
に記載された方法を使用して培養した。インビトロで増殖させた肥満細胞の均質
性を、細胞型特異的マーカーについて染色して他の細胞型を排除するかまたは含
める従来のフローサイトメトリー技術により確認および保証した。増殖の１４日
目と２１日目との間に、成熟細胞を回収し、試験培養用に調製した。目的は、肥
満細胞刺激共役脱顆粒に対するＤＨＥＡの効果を評価することであった。調製し
た肥満細胞を試験培養ウェル中に、１×１０⁷細胞／ｍｌの密度で分注した。い くつかの培養物において、ＩｇＥ受容体をＩｇＥ抗原−抗体複合体と架橋させた
後、肥満細胞を誘導して脱顆粒させた。培養物の平行群において、肥満細胞を種
々の用量のＤＨＥＡに再曝露し、抗ＩｇＥ抗体を使用して活性化した。図５の例
において、刺激の非存在下において、細胞の細胞質ゾル貯蔵顆粒からのβ−グル
クロニダーゼの放出によって測定したところ、肥満細胞の測定可能な脱顆粒は存
在しない。なお、抗ＩｇＥ受容体抗体の培養物への導入によってβ−グルクロニ
ダーゼの有意な放出が引き起こされた。肥満細胞をＤＨＥＡ単独に曝露した場合
、測定可能な脱顆粒は存在しなかった。しかし、抗ＩｇＥ抗原−抗体複合体での
活性化の５〜１０分前にＤＨＥＡの１００μＭ用量に前曝露した肥満細胞は、１
００μＭ用量において脱顆粒の約７０％阻害を示した。より低い用量のＤＨＥＡ
は比例してより低い脱顆粒阻害能力を示した。

【００７２】実施例９ ＤＨＥＡＳまたはＤＨＥＡのいずれかの投与による即時型過敏症反応のインビボ における阻害 皮膚の即時型過敏症反応は容易に実験マウスにおいて誘起される。皮膚モデル
はアレルギー反応の発達および伝播を調節する薬物候補を研究するための基本的
な道具として、そして一般にアレルギー反応に適用可能な基本的モデルとして役
立ち得る。マウスにおける応答を、肥満細胞を活性化することが知られている物
質の皮内注射を介して誘発する。実験を、ＤＨＥＡのマウスにおける即時型過敏
症反応に対する効果を試験するために設計した。即時型炎症反応を誘起するため
に、段階的な用量のＡＴＰを１０μｌの容量で、マウス（１群あたり５匹）の側
方、背面表面へ高精密シリンジによって送達して、マウスに与える。ＡＴＰ刺激
注射の４５分後、マウスを屠殺する。影響を受けた皮膚および影響を受けなかっ
た皮膚の両方を含む皮膚切片を切除し、平らにし、１０％緩衝化ホルマリン中で
１週間固定する。切片を対照（影響を受けなかった皮膚）対ＡＴＰ（影響を受け
た皮膚）での皮膚の厚みの測定を可能にするように切り取る。図６において、注
射部位（０．００１インチ）における皮膚の硬化によって測定したところ、１０
または５０μｇ ＡＴＰの皮内注射によって用量依存性の炎症性反応が誘起され
ることが示される。背面の第３の部位におけるＰＢＳの皮内注射によっては硬化
はほとんどまたは全く引き起こされなかった。齢および性別を適合させたマウス
の別の群に、１２ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡＳまたは匹敵する容量のプラセボ物質を
静脈内投与した。試験品の投与の９０分後に、ＡＴＰを皮内注射して、過敏症反
応を誘起した。本発明者らは、皮膚反応の誘発前の静脈内でのＤＨＥＡＳへの前
曝露によって＞８０％の有意な硬化の阻害が引き起こされることを観察した。図
７において、齢および性別を適合させたマウスの別の群に、１５、７．５、５も
しくは２．５ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡの用量または匹敵する容量のプラセボ物質を
静脈内で与えた。試験品の投与の１５分後に、ＡＴＰを皮内注射して、過敏症反
応を誘起した。本発明者らは、皮膚反応の誘発前の静脈内での５および７．５ｍ
ｇ／ｋｇのＤＨＥＡへの前曝露によって＞８０の有意な硬化の阻害が引き起こさ
れることを観察した。より高い用量およびより低い用量はより少ない阻害を引き
起こした。

【００７３】実施例１０ インビボ即時型過敏症反応は肥満細胞依存性である 実験を、マウスにおける肥満細胞に対するＡＴＰ媒介性皮膚即時型過敏症反応
の依存性を試験するために設計した。ホモ接合型ＷＢＢ６Ｆ_l／Ｊ−Ｗ／Ｗ^v肥満
細胞欠損およびそのヘテロ接合型肥満細胞野生型同腹子（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ−Ｗ ^v ／Ｗ）を、刺激としてＡＴＰを使用する皮膚即時型炎症反応について試験した 。段階的な用量のＡＴＰを１０μｌの容量で、マウスの側方、背面表面へ高精密
シリンジによって送達して、各型由来の５匹のマウスの群に与える。ＡＴＰ刺激
注射の４５分後、マウスを屠殺する。影響を受けた皮膚および影響を受けなかっ
た皮膚の両方を含む皮膚切片を切除し、平らにし、１０％緩衝化ホルマリン中で
１週間固定する。切片を対照（影響を受けなかった皮膚）対ＡＴＰ（影響を受け
た皮膚）での皮膚の厚みの測定を可能にするように切り取る。１０または５０μ
ｇ ＡＴＰの皮内注射によって、野生型同腹子において用量依存性炎症反応が誘
起されたが、肥満細胞欠損マウスにおいては反応は誘起されなかった。背面の第
３の部位における生理食塩水の皮内注射によっては硬化はほとんどまたは全く引
き起こされなかった。

【００７４】実施例１１ 判明したアレルギーを有するヒトボランティアにおける皮膚チャレンジに対する アレルギー応答の程度に対するＤＨＥＡＳの単回用量の効果 ヒトボランティアの病歴を取って、彼／彼女が皮膚アレルギーを有するかどう
かを決定する。これがボランティアの医学的記録によって確認できない場合は、
ボランティアは皮膚アレルギーチャレンジを経るように要請される。確認された
皮膚アレルギーを有するボランティアのみを研究に登録する。この研究について
のボランティアの許容性を決定するために、彼らは以下の規準でなければならな
い： 包含規準 既知のアレルゲンに対する実証可能な皮膚アレルギーを有する健常ボランティ
ア。 病歴、身体検査および試験室スクリーニングによって決定される有意な疾患が
ない。 研究を完了するために利用可能である。 インフォームドコンセントを与えることができる。 女性ボランティアは出産潜在性があってはならなず、研究への参加の少なくと
も６ヶ月前に外科的に不妊にされているか、その研究への参加前の少なくとも１
２ヶ月間月経がないことによって証明される閉経後である。 排除規準 それ以前４ヶ月間の研究薬物試験への参加。 それ以前３ヶ月間に４５０ｍＬ以上献血したか、または彼／彼女が研究に参加
した後３ヶ月以内に献血することを意図しているボランティア。 薬物治療の規則的クールを、彼／彼女が研究に参加する以前４週間の間に受け
たボランティア。 アルコールまたは薬物濫用の経歴を有するか、または尿薬物スクリーニングに
おいて１つ以上の薬物について陽性と試験されるボランティア。 規則的に１週間当り２１単位より多くのアルコールを飲むボランティア。 １日当り１０本より多くのタバコを吸うボランティア。 ２１以上３２以下の範囲外のボディマスインデックス。 Ｂ型肝炎表面抗原について陽性と試験されるボランティア。 抗ヒスタミン、ステロイド、抗炎症薬またはいずれかの免疫調節剤を受けてい
るボランティア。 アナフィラキシーの病歴を有するボランティア。 ボランティアが過去５年以内に悪性腫瘍の病歴を有する（首尾よく基底細胞ガ
ンを切除した場合を除く）。 ボランティアが、研究者の意見で、安全性、薬物動態または臨床評価に影響を
及ぼすような、いずれかの臨床的に有意な症状または病気を有する。 ボランティアが多血症の病歴を有する。

【００７５】 スクリーニングにおいて、標準化皮膚アレルギーチャレンジを陽性および陰性
対照を含めて実施する。チャレンジの３０分後、チャレンジの２時間後に、膨疹
の大きさを測定し、記録し、写真撮影する。

【００７６】 ボランティアを第１相ユニット（Phase 1 Unit）に各投与期間前の夕方のほぼ
１８００時（６ｐ．ｍ．）に入室させる。各ボランティアに彼／彼女のスクリー
ニング以来のいずれかの有害な経験および薬物治療に関して質問する。連続的ホ
ルターＥＣＧモニターを入室の夕方に開始し、投与の約２４時間後の解放まで継
続する。

【００７７】 試験薬物の最初の用量（１２ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡＳまたはプラセボ）の投与
の前に、静脈血のサンプリングを容易にするためにボランティアの前腕静脈にカ
ニューレを挿入する。血液試料（各々１０ｍＬ）を試験薬物の投与の前に採血す
る。血液試料を使用して試験室安全性試験（血液学および化学）ならびに薬物動
態分析を実施する。各々のサンプリングにおいてカニューレから取った最初の１
ミリリットル（ｍＬ）の血液を捨てる。各サンプリング後に、カニューレを２ｍ
Ｌの０．９％注射用塩化ナトリウムでフラッシュする。

【００７８】 第２のカニューレをボランティアのもう一方の腕の適切な前腕静脈に挿入する
。このカニューレを試験薬物（ＤＨＥＡＳまたはプラセボ）の投与用にのみ使用
し、これを注入の完了に際して取り除く。試験薬物を少なくとも３０分間の期間
にわたって注入する。これを注入前に２５０ｍＬの５％注射用デキストロースと
混合する。ボランティアは半横臥位で試験薬物の注入の間ベッドに横たわる。

【００７９】 薬物動態血液試料（各々１０ｍＬ）を下記の時点で採血する：投与前、注入完
了後１５、３０、４５、６０（１時間）、９０、１２０（２時間）、１５０、１
８０（３時間）および２４０分（４時間）。血圧を測定し、投与前、試験薬物の
注入の開始の後、注入完了の１時間後まで１０分毎、次いで注入完了の６時間後
まで１時間毎。

【００８０】 皮膚アレルギーチャレンジ（スクリーニングの間に実施したような）を試験薬
物（ＤＨＥＡＳまたはプラセボ）の注入完了の６０分後に実施する。チャレンジ
の３０分後および２時間後に、皮膚試験部位を検査し、測定し、評価し、写真撮
影する。

【００８１】 血液試料（１０ｍＬ）を投与の２４時間後に採血する。試料を使用して試験室
安全性（血液学および化学）試験ならびに薬物動態分析を実施する。ホルターＥ
ＣＧモニターを中断し、研究者の裁量で、ボランティアは第１相ユニットから解
放され得る。

【００８２】 試験薬物の最初の用量の投与後１０〜１４日の期間内に、ボランティアは第１
相ユニットに戻って、彼／彼女の試験薬物の第２の用量を受ける。上記のような
手順および評価を反復する。さらに、フローサイトメトリー測定を行う。試験薬
物の第２の用量の投与後５〜１０日の期間の間に、ボランティアは安全性追跡評
価のために第１相ユニットに戻る。

【００８３】 この研究において、アレルゲンのチャレンジ後の膨疹の大きさによって測定し
たところ、ＤＨＥＡＳの投与はアレルギー反応を軽減することが認められる。

【００８４】実施例１２ ヒトボランティアにおける運動誘発性喘息に対するＤＨＥＡＳの単回用量の効果 ヒトボランティアの病歴を取って、彼／彼女が運動誘発性喘息の病歴を有する
かどうかを決定する。ボランティアは運動を伴う冷空気チャレンジを経るように
要請される。チャレンジ前の基準値から少なくとも１７％の努力肺活量（ＦＶＣ
）および努力呼気肺活量（ＦＥＶ）が減少したボランティアのみを研究に登録す
る。この研究についてのボランティアの許容性を決定するために、彼らは以下の
規準でなければならない： 包含規準 実証可能な運動誘発性喘息の病歴を有する健常ボランティア。 病歴、身体検査および試験室スクリーニングによって決定される有意な疾患が
ない。 研究を完了するために利用可能である。 インフォームドコンセントを与えることができる。 女性ボランティアは出産潜在性があってはならなず、研究の少なくとも６ヶ月
前に外科的に不妊にされているか、研究前の少なくとも１２ヶ月間月経がないこ
とによって証明される閉経後である。 排除規準 それ以前４ヶ月間の研究薬物試験への参加。 それ以前３ヶ月間に４５０ｍＬ以上献血したか、または研究終了の３ヶ月以内
に献血することを意図しているボランティア。 薬物治療の規則的クールを、研究前４週間の間に受けたボランティア。 アルコールまたは薬物濫用の経歴を有するボランティア。尿薬物スクリーニン
グにおいて１つ以上の薬物について陽性と試験される。 規則的に１週間当り２１単位より多くのアルコールを飲むボランティア。 タバコを吸うか、または研究前の６ヶ月にタバコを吸ったボランティア。 ２１以上３２以下の範囲外のボディマスインデックス。 Ｂ型肝炎表面抗原について陽性と試験されるボランティア。 抗ヒスタミン、ステロイド、抗炎症薬またはいずれかの免疫調節剤を受けてい
るボランティア。必要に応じてβアゴニストを吸入で受けているボランティアは
研究に適格である。 アナフィラキシーの病歴を有するボランティア。 ボランティアが、研究者の意見で、安全性、薬物動態または臨床評価に影響を
及ぼすような、いずれかの臨床的に有意な症状または病気を有する。 ボランティアが多血症の病歴を有する。

【００８５】 ボランティアは、彼／彼女の研究の参加前４週間の内に、設計されたスクリー
ニング手順を経る。スクリーニングの間、ボランティアは下記の手順を経る：（
ａ） 病歴取得；（ｂ）完全な身体検査（生命徴候を含む）；（ｃ）運動を伴う冷空気
チャレンジ［冷空気（ジェネレーターからの４℃の乾燥した空気）を呼吸しなが
らの、標準プロトコルに従うトレッドミル（レベル１：ブルース等級（Bruce gr
ade）２ − ２分間；レベル２：ブルース等級３ − ２分間；レベル３：ブ ルース等級５ − ６分間）］；（ｄ）血液学、化学およびＢ型肝炎表面抗原試
験用に採血する血液試料（１５ｍＬ）；（ｅ）尿検査（薬物濫用についてのスク
リーニングを含む）；ならびに（ｆ）包含／排除規準に対する適格性の確認。

【００８６】 試験薬物日（Test Drug Day）１、試験薬物日２および試験薬物日３での試験 薬物の投与の１日前に、ボランティアを第１相ユニット（Phase 1 Unit）に各投
与期間前の夕方のほぼ１８００時に入室させる。各ボランティアに彼／彼女のス
クリーニング以来のいずれかの有害な経験および薬物治療に関して質問する。連
続的ホルターＥＣＧモニターを入室の夕方に開始し、投与の約２４時間後の解放
まで継続する。

【００８７】 試験薬物の最初の用量（１２ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡＳまたはプラセボ）の投与
の前に、静脈血のサンプリングを容易にするためにボランティアの前腕静脈にカ
ニューレを挿入する。血液試料を試験薬物の投与の前に採血する。血液試料を使
用して試験室安全性試験（血液学および化学）、サイトカインアッセイ、フロー
サイトメトリーならびに薬物動態分析を実施する。各々のサンプリングにおいて
カニューレから取った最初の１ミリリットル（ｍＬ）の血液を捨てる。各サンプ
リング後に、カニューレを２ｍＬの０．９％注射用塩化ナトリウムでフラッシュ
する。

【００８８】 第２のカニューレをボランティアのもう一方の腕の適切な前腕静脈に挿入する
。このカニューレを試験薬物（ＤＨＥＡＳまたはプラセボ）の投与用にのみ使用
し、これを注入の完了に際して取り除く。試験薬物を少なくとも３０分間の期間
にわたって注入する。これを注入前に２５０ｍＬの注射用デキストロースと混合
する。ボランティアは半横臥位で試験薬物の注入の間ベッドに横たわる。

【００８９】 薬物動態血液試料（各々１０ｍＬ）を下記の時点で採血する：投与前、注入完
了後１５、３０、４５、６０（１時間）、９０、１２０（２時間）、１５０、１
８０（３時間）、２４０分（４時間）および２４時間。血圧を測定し、投与前、
試験薬物の注入の開始後、注入完了の１時間後まで１０分毎、次いで注入完了の
６時間後まで１時間毎。さらなる血圧記録を、冷空気／運動チャレンジの期間の
間に行う。

【００９０】 試験薬物の注入完了の約４５分後に、ボランティアを心臓分析試験室（Cardio
-Analytics laboratory）に連れて行き、そこで運動前流量ループ（pre-exercis
e flow volume loop）を記録する。投与の６０分後に血液試料を得、上記のよう
な運動を伴う冷空気チャレンジを実施する。

【００９１】 ２日目（試験薬物の最初の投与後の第１日目）に、血液試料を投与の２４時間
後に採血する。試料を使用して試験室安全性（血液学および化学）試験ならびに
薬物動態分析を実施する。ホルターＥＣＧモニターを中断し、研究者の裁量で、
ボランティアは第１相ユニットから解放され得る。

【００９２】 １０〜１４日目（試験薬物の第２の投与の日を含む）に、試験薬物の最初の用
量の投与後１０〜１４日の期間内に、ボランティアは第１相ユニットに戻って、
彼／彼女の試験薬物の第２の用量を受ける。上記のような手順および評価を反復
する。

【００９３】 試験薬物の第２の用量の投与後５〜１０日の期間の間に、ボランティアは安全
性追跡評価のために第１相ユニットに戻る。追跡は以下を含む：完全な身体検査
（生命徴候を含む）；ＥＣＧ；血液学および化学試験；ならびに尿検査。この研
究において、ＤＨＥＡＳの投与は喘息徴候を軽減することが認められる。

【００９４】 明かなごとく、本発明の方法および組成物は、種々の具体例の形に組み込むこ
とができ、そのいくつかのみを本明細書に記載している。他の具体例が存在し、
本発明の趣旨から逸脱しないことは、当業者に明かであろう。したがって、記載
した具体例は、説明であり、これに限定するものと解釈すべきではない。

【００９５】文献リスト (1) De Peretti, E. et al. (1978). J. Clin. Endocrinol. Metab. 47:572. (2) Swartz, A.G. et al. (1981). Nutr. Cancer 3:46. (3) Yen, T.T. et al. (1977). Lipids 12:409. (4) Coleman. D.C. (1982). Diabetes 31:830 (1982). (5) Flood, J.F. (1988). Brain Res. 447:269 (6) Daynes, R.A. et al. (1990). Eur. J. Immunol. 19:2319. (7) Morehouse, J.L. et al. (1986). Gastroenterol 91:673-682. (8) Maejimak, et al. (1984). Arch. Surg. 119:166-172. (9) Czaja, A.J. et al. (1974). N. Engl. J. Med. 291:925-929 (10) Seavitt, S. (1967). Br. J. Surg. 54:32-41. (11) Desai, M.H. et al. (1991). Surgery. Gyn. Obstet. 172:257-261. (12) Deitch, E.A. and R. Berg (1987). J. Burn Rehab. 8:475-482. (13) Simon, R.H. and Ward, P.A. (1992). In Inflammation: Basic Principle s and Clinical Correlates , 2d Ed., Galin, J.I. et al., Eds., Raven Press
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【図面の簡単な説明】

【図１】 図１Ａは、再灌流損傷の間のゾーン１における後毛細管細静脈付
近の流動状毛細血管の数を示す。 図１Ｂは、再灌流損傷の間のゾーン２における後毛細管細静脈付近の流動状毛
細血管の数を示す。 図１Ｃは、再灌流損傷の間のゾーン３における後毛細管細静脈付近の流動状毛
細血管の数を示す。

【図２】 図２Ａは、２分間に、後毛細管細静脈の内腔を通って運搬されて
いる白血球の数を示す。 図２Ｂは、２分間に、後毛細管細静脈の内腔に接着または付着している白血球
の数を示す。 図２Ｃは、２分間に、内皮を横断して移動する白血球の数を示す。

【図３】 図３Ａは、再灌流後の静脈血の赤血球速度を示す。 図３Ｂは、再灌流後の動脈血の赤血球速度を示す。

【図４】 図４は、ＡＴＰ活性化によって誘発される肥満細胞の脱顆粒が、
ＤＨＥＡの投与によって阻害されることを示す。肥満細胞を増殖培養物から回収
し、１×１０⁷細胞／ｍｌで分注した。次いで、細胞をビヒクル物質、１ｍＭ ＡＴＰ、１００μＭ ＤＨＥＡ、または１ｍＭ ＡＴＰでの刺激前の１００μＭ ＤＨＥＡのいずれかに曝露した。培養上清を最後の試験物質の添加の１０分後
に回収して、肥満細胞脱顆粒の産物であるβ−グルクロニダーゼの量を定量した
。この試験の間、細胞培養物の生存性は９０％より高いままであった。

【図５】 図５は、ＩｇＥ−抗ＩｇＥ複合体活性化によって誘発される肥満
細胞の脱顆粒が、ＤＨＥＡの投与によって阻害されることを示す。肥満細胞を増
殖培養物から回収し、１×１０⁷細胞／ｍｌで分注した。次いで、細胞をビヒク ル物質、ＩｇＥ−抗Ｉｇ−Ｅ複合体、１００μＭ ＤＨＥＡ、またはＩｇ−Ｅ混
合物での刺激前の１００μＭ ＤＨＥＡのいずれかに曝露した。培養上清を最後
の試験物質の添加の１０分後に回収して、肥満細胞脱顆粒の産物であるβ−グル
クロニダーゼの量を定量した。この試験の間、細胞培養物の生存性は９０％より
高いままであった。

【図６】 図６は、肥満細胞によって媒介されるアレルギー反応が、ＤＨＥ
ＡＳへの曝露によって防止されることを示す。齢および性別を適合させたＢａｌ
ｂ／ｃマウスの群に１２ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡＳ、プラセボまたは生理食塩水を
、アレルギー性皮膚反応の誘発の９０分前に静脈注射によって投与した。皮膚中
に存在する肥満細胞を１０μｌのＰＢＳ、１０μＭ ＡＴＰまたは５０μＭ Ａ
ＴＰのいずれかを用いて活性化した。４５分後、マウスを屠殺し、皮膚を誘発の
測定用に調製した。

【図７】 図７は、肥満細胞によって媒介されるアレルギー反応が、ＤＨＥ
Ａへの曝露によって防止されることを示す。齢および性別を適合させたＢａｌｂ
／ｃマウスの群に１５、７．５もしくは２．５ｍｇ／ｋｇ ＤＨＥＡＳ、または
プラセボ物質を、アレルギー性皮膚反応の誘発の１５分前に投与した。皮膚中に
存在する肥満細胞を１０μｌのＰＢＳ、１０μＭ ＡＴＰまたは５０μＭ ＡＴ
Ｐのいずれかを用いて活性化した。４５分後、マウスを屠殺し、皮膚を誘発の測
定用に調製した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 スティーブン・ディ・ノートン アメリカ合衆国84108ユタ州ソルト・レイ ク・シティ、サウス・コロニアル・サーク ル1337番 (72)発明者 バーバラ・エイ・アラネオ アメリカ合衆国84117ユタ州ソルト・レイ ク・シティ、ケンタッキー・アベニュー 2434番 Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 DA08 DA09 DA10 MA01 MA04 NA14 ZA59 ZB13 ZC02

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 それを必要とする患者において肥満細胞媒介性アレルギー反
   応を軽減するための医薬組成物を製造するための、一般式ＩおよびＩＩ： 【化１】 ［式中、 Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴およびＲ ¹⁹ は、独立して、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルまたはＣ_1-10アルコキシ
   であり； Ｒ⁵およびＲ¹¹は独立して、ＯＨ、ＳＨ、Ｈ、ハロゲン、医薬上許容されるエ ステル、医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるエーテル、医薬上許
   容されるチオエーテル、医薬上許容される無機エステル、医薬上許容される単糖
   、二糖またはオリゴ糖、スピロオキシラン、スピロチラン、−ＯＳＯ₂Ｒ²⁰、− ＯＰＯＲ²⁰Ｒ²¹またはＣ_1-10アルキルであるか；または Ｒ⁵およびＲ⁶は一緒になって＝Ｏであるか；または Ｒ¹⁰およびＲ¹¹は一緒になって＝Ｏであり； Ｒ¹⁵は、 （１）Ｒ¹⁶が−Ｃ(Ｏ)ＯＲ²²である場合、Ｈ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルもしく
   はＣ_1-10アルコキシであるか、または （２）Ｒ¹⁶がハロゲン、ＯＨまたはＣ_1-10アルキルである場合、Ｈ、ハロゲン、
   ＯＨもしくはＣ_1-10アルキルであるか、または （３）Ｒ¹⁶がＯＨである場合、Ｈ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルケニ
   ル、Ｃ_1-10アルキニル、ホルミル、Ｃ_1-10アルカノイルもしくはエポキシである
   か；または （４）Ｒ¹⁶がＨである場合、ＯＨ、ＳＨ、Ｈ、ハロゲン、医薬上許容されるエス
   テル、医薬上許容されるチオエステル、医薬上許容されるエーテル、医薬上許容
   されるチオエーテル、医薬上許容される無機エステル、医薬上許容される単糖、
   二糖またはオリゴ糖、スピロオキシラン、スピロチラン、−ＯＳＯ₂Ｒ²⁰または −ＯＰＯＲ²⁰Ｒ²¹であるか；または Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって＝Ｏであり； Ｒ¹⁷およびＲ¹⁸は、独立して、 （１）Ｒ¹⁶がＨ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルまたは−Ｃ(Ｏ)ＯＲ²²である
   場合、Ｈ、−ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキルもしくはＣ_1-10アルコキシである
   か、または （２）Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶が一緒になって＝Ｏである場合、Ｈ、(Ｃ_1-10アルキル)_n アミノ、(Ｃ_1-10アルキル)_nアミノ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、ヒド ロキシ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ−Ｃ_1-10アルキル、(ハロゲン)_m− Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルカノイル、ホルミル、Ｃ_1-10カルボアルコキシもし
   くはＣ_1-10アルカノイルオキシであるか；または Ｒ¹⁷およびＲ¹⁸は、一緒になって＝Ｏであるか、または、それらが結合してい
   る炭素と一緒になって、酸素原子０または１個を含有する３〜６員環を形成する
   か；または Ｒ¹⁵およびＲ¹⁷は、それらが結合している炭素と一緒になって、エポキシド環
   を形成し； Ｒ²⁰およびＲ²¹は独立して、ＯＨ、医薬上許容されるエステルまたは医薬上許
   容されるエーテルであり； Ｒ²²は、Ｈ、(ハロゲン)_m−Ｃ_1-10アルキルまたはＣ_1-10アルキルであり； ｎは、０、１または２であり； ｍは、１、２または３である］ で表されるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）誘導体およびそれらの医
   薬上許容される塩を含む化合物の使用。
2. 【請求項２】 Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶が一緒になって＝Ｏである請求項１記載の使
   用。
3. 【請求項３】 Ｒ⁵がＯＨである請求項２記載の使用。
4. 【請求項４】 Ｒ⁵が−ＯＳＯ₂Ｒ²⁰である請求項２記載の使用。
5. 【請求項５】 Ｒ²⁰がＨである請求項４記載の使用。
6. 【請求項６】 化合物が静脈内投与される請求項１〜５のいずれか１項記載
   の使用。
7. 【請求項７】 化合物が筋肉内投与される請求項１〜５のいずれか１項記載
   の使用。
8. 【請求項８】 化合物が鼻内投与される請求項１〜５のいずれか１項記載の
   使用。
9. 【請求項９】 化合物が眼内投与される請求項１〜５のいずれか１項記載の
   使用。
10. 【請求項１０】 化合物が吸入剤として投与される請求項１〜５のいずれか
    １項記載の使用。
11. 【請求項１１】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    １〜５のいずれか１項記載の使用。
12. 【請求項１２】 化合物が２〜２００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項１
    〜５のいずれか１項記載の使用。
13. 【請求項１３】 化合物が０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの有効ＤＨＥＡ用量を
    送達するような量で投与される請求項１〜５のいずれか１項記載の使用。
14. 【請求項１４】 化合物が１〜５０ｍｇ／ｋｇの有効ＤＨＥＡ用量を送達す
    るような量で投与される請求項１〜５のいずれか１項記載の使用。
15. 【請求項１５】 化合物が２〜２０ｍｇ／ｋｇの有効ＤＨＥＡ用量を送達す
    るような量で投与される請求項１〜５のいずれか１項記載の使用。
16. 【請求項１６】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    ６記載の使用。
17. 【請求項１７】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    ７記載の使用。
18. 【請求項１８】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    ８記載の使用。
19. 【請求項１９】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    ９記載の使用。
20. 【請求項２０】 化合物が１〜１０００ｍｇ／ｋｇの量で投与される請求項
    １０記載の使用。