JP2001517223A

JP2001517223A - 原生動物性または寄生生物性疾患の予防、治療または排除のための細菌細胞壁抽出物の使用

Info

Publication number: JP2001517223A
Application number: JP54101898A
Authority: JP
Inventors: アルケメード，スタンレイ，ジェイ．; ヒルデブランド，キャサリン，イー．; フィリップス，ニゲル，シー．; ロガン，ドラガン，アール．
Original assignee: バイオニケライフサイエンシーズインコーポレイテッド
Priority date: 1997-04-02
Filing date: 1998-04-02
Publication date: 2001-10-02
Also published as: CN1251529A; CA2284932A1; NZ338060A; CA2284937A1; JP2001519785A; WO1998043655A1; AU6818098A; EP0971721A1; EP0971720A1; CN1153574C; BR9807917A; AU727781B2; WO1998043656A1; US6139844A; AU6913398A

Abstract

(57)【要約】十分な量の細菌細胞壁抽出物を原生動物性または寄生生物性疾患を有する動物に投与する、動物における原生動物性または寄生生物性疾患の予防、治療または排除方法。細菌細胞壁抽出物は、好ましくは、マイコバクテリウム細胞壁抽出物またはコリネバクテリウム細菌細胞壁抽出物である。細胞壁抽出物は、最も好ましくはマイクロバクテリウム・フレイ細胞壁抽出物である。

Description

【発明の詳細な説明】原生動物性または寄生生物性疾患の予防、治療または排除のための細菌細胞壁抽出物の使用発明の分野本発明は、微生物学および免疫学の分野に、特に動物における原生動物性疾患を予防し、治療し、または排除するための治療薬としての細菌細胞壁抽出物の使用に関する。発明の背景動物における原生動物性および寄生生物性疾患は、治療が難しい。種々の薬剤が種々の原生動物性および寄生生物性疾患を治療するために用いられてきたが、成功例は限られている。これらの薬剤の安全性および有効性は、大部分は投与経路、ならびに原生動物性または寄生生物性疾患の種類および重症度によっている。バベシア症は、このような疾患の一例である。熱帯地方では、バベシア症は、ウマ、ウシおよびイヌを含めた、しかしこれらに限定されない家畜動物に感染する最も蔓延した疾患の１つである。バベシア属は、赤血球中に寄生し、増殖する。この生物に対して感染動物が用いる天然防御メカニズムには、特にマクロファージおよび細胞傷害性リンパ球による食作用による感染赤血球の破壊が含まれる。ウマに感染するバベシア属の最も一般的な２つの種は、バベシア・カバリ(Bab esia caballi)とバベシア・エクイ(Babesia equi)である。いくつかの媒介動物、例えばマダニ、蚊、および吸血蝿のある変種は、馬から馬にB．equi生物を伝染させる。バベシア症の臨床的症状発現としては、発熱、倦怠感、食欲不振、貧血、黄疸およびヘモグロビン尿症が挙げられる。南米諸国では、全競馬ウマの５０％がバベシア属に感染しており、このために競馬能力が低減される、と考えられている。バベシア症を治療するために、多数の薬剤が用いられてきた。今までのところ、もっともよい結果は、化学療法薬であるイミドカルブ（３，３’−ジ−２−イミダゾリン−２−イルカルバニリド）を用いて達成されている。イミドカルブは、 B．caballiを治療するのに非常に有効であるが、しかしB．equiの治療には中等度に有効であるに過ぎない。残念ながら、イミドカルブを投与すると、いくつかの望ましくない副作用、例えば唾液分泌過多、涙液分泌、排便の頻度増大、頻呼吸および腹痛が引き起こされて、毒源性の痛痛を生じる。バベシア症を治療するために用いられる薬剤は、疾患の症状を低減するだけでなく、動物から感染を完全に排除することが非常に重要である。これは無症候性ではあるが、キャリアを保持し、健常動物に疾患を伝染し得る動物からのバベシア属の感染を防止するのに必要である。住血吸虫症は、動物に感染する原生動物（扁形動物）性疾患の一例であり、大きな割合を占める健康問題の一つである。本疾患は、住血吸虫属(Schistosoma) 、例えばマンソン住血吸虫(S．mansoni)、日本住血吸虫(S．japonicum)およびビルハルツ住血吸虫Us．haematobium)の感染により引き起こされる。この疾患は、肺炎、倦怠感、発熱、貧血、下痢および腹痛といった症状を特徴とする。ほとんどの感染個体は、死をもたらし得る慢性感染の消耗性経過をたどる。住血吸虫症を治療するために多数の薬剤が用いられてきた。今までのところ、もっともよい結果は、薬剤であるプラジクアンテル（２−（シクロヘキシルカルボニル）−１，２，３，６，７−１１ｂ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ピラジノ［２，１−ａ］イソキノリン−４−オン）を用いて達成されている。しかしながら、この薬剤は再感染を阻止しないので、それは伝染および疾患の蔓延も阻止できない。旋毛虫症は、原生動物（線虫）性疾患の一例である。旋毛虫属の成貢により引き起こされる旋毛虫症は、ヒトを含めた１００種以上の脊椎動物に感染し、世界的分布を示す。旋毛虫属は、感染動物の腸内で重症の炎症反応を引き起こす。この炎症反応は、Ｔ細胞依存性である非特異的免疫応答に起因すると思われる(Mil ler，HRP．1984，Veterinary Inmmunology and Immunopathology，6:167)。種々の後遺症を有し、感染個体に消耗性作用を引き起こす原生動物性および寄生生物性疾患の多数のその他の例が知られている。さらに、このような疾患は、それらが世界のある地域における風土病であるため、これらの地域の社会的および経済的発展をかなり破壊することになる。したがって、必要なものは、安全且つ有効であり、そして最小度の副作用を生じるかまたは全く引き起こさない治療薬を、種々の投与経路で動物に投与することによる、種々の原生動物および寄生生物性疾患を予防し、治療しまたは排除するための方法である。発明の概要本明細書中で用いる場合、「疾患」という用語は、動物またはその構成部分の性能または機能を妨害するかまたは改変する、正常状態の生きている動物または任意のその構成部分の損傷を指し、そして原生動物および寄生生物のような特定の感染作因に対する反応である。動物における原生動物性または寄生生物性疾患を予防、治療または排除するための方法が提供される。本方法にしたがって、細菌細胞壁抽出物は、疾患を予防、治療または排除するのに十分な量で動物に投与される。細菌細胞壁抽出物は安全であり、最小度の副作用を有するかまたは副作用を全く有さず、そして原生動物性または寄生生物性生物に感染した動物に、例えばヒトを含めた哺乳類、鳥類、魚類、両生類、および、甲殻類（これらに限定されない）に投与され得る。免疫応答は全身に関連し、多数の複雑な相互作用により調節され、影響を受けるので、非特異的免疫刺激は多数の免疫応答を促進および増幅可能である。酵母、細菌、ウイルス、植物、バイオテクノロジーおよび化学起源（これらに限定されない）の製剤は、免疫系を非特異的に刺激し得る。免疫活性を非特異的に刺激するために、マイコバクテリウム属、コリネバクテリウム属(プロプリオネバクテリウム属)、ノカルジア属、ロドコッカス属、ボルデテラ属、リステリア属およびカルメット−ゲラン菌（ＢＣＧ）からの調製物が用いられている。マイコバクテリウム属菌、ロドコッカス属菌およびノカルジア属菌が好ましい細菌である。マイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacterium phlei;チモテ菌)が最も好ましい細菌である。細菌細胞壁抽出物は、当業者に既知の経路により投与され得る。その例としては、例えば局所、経口、鼻腔、静脈内、皮下および筋肉内投与が挙げられるが、これらに限定されない。動物に投与する場合、細菌細胞壁抽出物は、非特異的免疫刺激剤として作用する。すなわち、免疫応答は全身に関係があり、多数の複雑な相互作用により調節され、影響されるので、非特異的免疫刺激は多くの免疫応答を促進し、増幅し得る。したがって、種々の原生動物または寄生生物により引き起こされる疾患の予防、治療または排除における治療薬として有効である。このような生物の例としては、アナプラズマ属(anaplasma)、バベシア属(Babesia)、バランチジウム属(B alantidium)、ベスノイチア属(Besnoitia)、クラミジア属(Chlamydia)、コクシジア属(Coccidia)、クリプトスポリジウム属(Cryptospondium)、サイトークスゾーン属(Cytauxzoon)、アイメリア属(Eimeria)、エントアメーバ属(Entamoeba)、エペリスロゾーン属(Eperythrozoon)、エルリキア属(Erlichia)、ジアルジア属( Giardia)、ヘモバルトネラ属(Haemobartonella)、ハモンジア属(Hammondia)、イソポラ属(Isopora)、リーシュマニア属(Leishmania)、ネオリケッチア属(Neoric hettsia)、プラスモジウム属(Plasmodium)、ニューモシステス属(Pneumocystis) 、リケッチア属(Rickettsia)、住血吸虫属(Schistosama)、サルコシステイス属( Sarcocystis)、タイレリア属(Theileria)、旋毛虫属(Thrichinella)、トキソプラズマ属(Toxoplasma)、トリコモナス属(Trichomonas)、トリパノソーマ属(Tryp anosoma)、ユニカリア属(Unicaria)、ジピリジウム属(Dipylidium)、エキノコックス属(Echinococcuse)、テニア属(Taenia)、鉤虫属(Ancylostoma)、回虫属(Asc aris)、蟯虫属(Enterobius)、ストロンギロイデス属(Strongyloides)、ストロンギルス属(Strongylus)、トキソカラ属(Toxocara)、トキサスカリス属(Toxascari s)および鞭毛属(Trichuris)が挙げられるが、これらに限定されない。手短に言えば、細菌細胞壁抽出物は以下のように調製される。細菌を液体培地中で増殖させて、回収する。細菌を破砕させ、次に遠心分離により沈殿させて破砕菌を回収することにより細胞壁を調製する。細胞壁画分（遠心分離工程からのペレット）をタンパク質分解酵素で消化することにより除タンパクし、界面活性剤で処理して、洗浄し、凍結乾燥する。この画分は、原生動物性疾患に感染した動物またはそれに曝された動物に投与するために適切なアジュバント／安定剤中に懸濁された脂質小滴に吸着され得る。本明細書中に記載した細菌細胞壁抽出物の投与は、血液関連原生動物性および寄生生物性疾患を治療するのに特に有用である。本明細書中に記載した細菌細胞壁抽出物の投与は、免疫系の活性化を非特異的に生じるという点で、従来の療法とは異なる。これは免疫系の防御能力を増強し、それが次に種々の原生動物性および寄生生物性疾患を改善する。したがって、細菌細胞壁抽出物は、感染生物に対する抗体を有さない動物における原生動物性および寄生生物性疾患を治療するのに有効である。したがって、原生動物性または寄生生物性疾患を予防または治療するのに有効な方法を提供することが本発明の目的である。本発明の別の目的は、原生動物性または寄生生物性疾患の再発を予防するのに有効な方法を提供することである。本発明の別の目的は、原生動物性または寄生生物性疾患の再感染を予防するのに有効な方法を提供することである。本発明の別の目的は、原生動物性または寄生生物性疾患を排除するのに有効な方法を提供することである。本発明の別の目的は、動物から原生動物性または寄生生物性疾患を排除することにより原生動物性または寄生生物性疾患の蔓延を低減するのに有効な方法を提供することである。本発明の別の目的は、免疫系を刺激するのに有効な方法を提供することである。本発明の別の目的は、受容者にアナフィラキシーを含めた悪い副作用を引き起こさない方法を提供することである。本発明の別の目的は、受容者に対して非毒性である方法を提供することである。本発明の別の目的は、ツベルクリン皮膚検定に対して受容者を感作しない方法を提供することである。本発明の別の方法は、受容者にアナフィラキシーを引き起こさない方法作用物質を提供することである。本発明の別の目的は、種々の投与経路を首尾良く用い得る方法を提供することである。本発明のこれらのおよびその他の目的、特徴および利点は、下記の開示された実施の形態の詳細な説明および添付の請求の範囲を検討すれば明らかになる。発明の詳細な説明動物における原生動物性または寄生生物性疾患を予防、治療または排除するための方法を、本明細書に記載する。本発明の方法にしたがって、細菌細胞壁抽出物は、感染を予防、低減または排除するのに十分な量で、原生動物性または寄生生物性感染に感染した動物に投与される。細菌細胞壁抽出物は、原生動物性または寄生生物性感染を治療また予防するために、ヒトまたはその他の哺乳類、鳥類、魚類、両生類および甲殻類といった動物(これらに限定されない)に投与し得る。細菌細胞壁抽出物は、当業者に既知の経路により投与され得る。その例としては、例えば局所、経口、鼻腔、静脈内、皮下および筋肉内投与が挙げられるが、これらに限定されない。原生動物または寄生生物感染治療方法は、例えばアナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、プラスモジウム属、ニューモシステス属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属のような、しかしこれらに限定されない種々の原生動物および寄生生物により引き起こされる疾患を予防し、治療しまたは排除するのに有効である。本方法は特に血液関連原生動物性および寄生生物性疾患の治療に有用である。本明細書中に記載した方法は、原生動物または寄生生物に感染した動物の免疫系の活性化を非特異的に刺激するかまたは引き起こすという点で、従来の療法とは異なる。この免疫系活性化は免疫系の防御能力を増強し、それにより種々の原生動物性および寄生生物性疾患を改善する。したがって、本方法は、過去に感染生物に曝露されていない、そして感染生物に対する抗体を未だ保有していない動物における原生動物性および寄生生物性疾患を治療するのに有効である。本発明の治療方法は、受容者における陽性ツベルクリン反応を引き起こさず、細菌細胞壁抽出物を反復投与した場合でさえアナフィラキシー反応を滅多に引き起こさず、そして最小限の副作用を有するかまたは副作用は全く有さない。細菌細胞壁抽出物の投与は免疫感作工程ではないが、しかし一般的に受容者自身の免疫系が原生動物性または寄生生物性疾患を排除し得るように免疫系を刺激するための過程であると理解される。したがって、本発明の原生動物性および寄生生物性疾患治療方法は、理想的には原生動物性および寄生生物性疾患の治療に適しており、従来の薬剤または免疫感作を利用しない新規の方法を提供する。細菌細胞壁抽出物調製あらゆる細菌種を用いて本発明の細菌細胞壁抽出物を調製し得る。それらの例としては、マイコバクテリウム属(Mycobacterium)、コリネバクテリウム属(Cory nebacterium)、プロプリオンバクテリウム属(Proprionebacterium)、ノカルジア属(Nocardia)、ロドコッカス属(Rhodococcus)、ボルデテラ属(Bordetella)、リステリア属(Listeria)およびカルメット−ゲラン桿菌（bacille Calmette-Gueri n;ＢＣＧ）が挙げられるが、これらに限定されない。マイコバクテリウム属菌、ロドコッカス属菌およびノカルジア属菌が好ましい。マイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacterium phlei)が最も好ましい。細菌細胞壁抽出物の好ましい製造方法は、米国特許第４，７４４，９８４号（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）に記載されている。マイコバクテリウム属菌細胞壁抽出物はBi oniche，Inc．(London，Ontario)から市販品として得ることもできる。手短に言えば、細菌細胞壁抽出物は以下のように調製される。細菌を液体培地中で増殖させて、回収する。細菌を破砕し、次に遠心分離沈殿により破砕細菌を回収することによって細胞壁を回収する。遠心分離工程からのペレットである細胞壁画分をタンパク質分解酵素で消化することにより除タンパクし、界面活性剤で処理して、洗浄し、凍結乾燥する。この分画は、感染した動物あるいは原生動物性または寄生性感染に曝される動物に投与する前に適切なアジュバント／安定剤中に懸濁された脂質小滴に吸着され得る。あるいは、細菌細胞壁抽出物は、使用前にアジュバント中で乳化され得る。アジュバントは、当業者に既知の多数のアジュバントのいずれかであり得る。好ましいアジュバントは油と水とのエマルジョンであり、これは細菌細胞壁抽出物を油と混合し、水性緩衝剤を界面活性剤とともに添加し、そして当業者に既知のいくつかの方法のいずれかにより混合物を乳化することにより調製され得る。これらの方法としては、高速ブレンダーまたはポッター−エルベージェムホモジナイザー中での均質化、音波破砕および微流動化(microfluidization)が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、細菌細胞壁抽出物は、例えば、鉱油(Drakeol 6-VR,Penreco,Butler,PA)、スクアラン、スクアレンおよび合成鉱油ｎ−ヘキサデカンといった多数の、しかしこれらに限定されない油中で乳化され得る。エマルジョンの製造方法は重要ではない、と当業者は理解するであろう。油および水性相の組成物の多数の変形物、それらの割合および乳化の手段は当業者には明らかであり、本発明の実施に際して細菌細胞壁抽出物とともに用い得る。細菌細胞壁抽出物の好ましいエマルジョンは、約５ｇ〜１５ｇの乾燥除タンパク細菌細胞壁を乾燥した１リットルビーカーに添加することにより調製される。鉱油、スクアレン、スクアランまたはｎ−ヘキサデカンは、細胞壁１ｇ当たり約１０ｍｌ〜５０ｍｌで添加される。懸濁液を覆い、約３０分間から一夜混合する。細胞壁／油混合物の約１０ｍｌのアリコートを１リットルビーカーに移す。滅菌リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）５００ｍｌを各アリコートに添加する。Mi crofluidics Tabletop Microfluidizer^TMモデルＭ−１１０Ｙを１フロースルーに関して約２０，０００ｐｓｉ〜３０，０００ｐｓｉで用いる微流動化により、約６ｍｌ〜７ｍｌの混合物のアリコートを均質化し、滅菌瓶に移して、４℃で保存する。任意に、水酸化アルミニウム安定剤を細菌細胞壁抽出物エマルジョンに添加してもよい。水酸化アルミニウムをReheis Chemical Co．(Berkeley Heights， NJ)から９．４％圧縮ゲルとして入手し、脱イオン水を添加することにより１．３％酸化アルミニウムに水和する。ゲルを、細菌細胞壁抽出物エマルジョンに添加する前に、オートクレーブ中で１２０℃で２０分間滅菌する。１リットルの最終エマルジョンは、約９００ｍｌの乳化細菌細胞壁抽出物、５０ｍｌの１．３％酸化アルミニウムおよび４０ｍｌの添加ＰＢＳを含有する。Thimer osal（エチルメルクリチオサリチレート、Sigma Chemical Co.,St．Louis，MO）および抗生物質、例えばゲンタマイシンおよびアンホテラシンＢ（これらに限定されない）を、細菌細胞壁抽出物エマルジョンに対する防腐剤として添加し得る。Thimerosalの好ましい濃度は約０．１ｇ／ｌ、ゲンタマイシンは約３０μｇ／ｍｌそしてアンホテラシンＢは約２．５μｇ／ｍｌである。本発明の方法に投与される細菌細胞壁抽出物の既知の活性成分としては、ムラミルジペプチドのファミリー、トレハロースジミコール酸、ならびに細菌の除タンパク細胞壁骨格中に存在し得るあらゆる未知の活性成分が挙げられる。本発明は、例えば好中球、リンパ球およびマクロファージを含めた、しかしそれらに限定されない身体の免疫成分が存在するあらゆる原生動物性または寄生生物性異常の治療に有効である。以下の仮定に拘束されるものではないが、本方法は、感染生物が身体の免疫系の細胞と絶えず接触しているために、原生動物性または寄生生物性疾患を予防、治療および排除するのに有効である、と考えられる。さらに、細菌細胞壁抽出物は免疫系の細胞に作用して、サイトカインの産生増大を刺激する、と考えられる。細菌細胞壁抽出物の処方および投与細菌細胞壁抽出物は、当業者に既知の処方方法を用いて、医薬上許容可能な組成物として提供され得る。処方法の例は、例えばH．C．Ansel，et al.，PHARMAC EUTICAL DOSAGE FORMS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS，6th edition(Williams & W ilkins，Philadelphia 1995)(参照により本明細書中に含まれる)にある。当業者に既知のその他の処方も用い得る。処方物としては、経口、直腸、尿道、眼(硝子体内または眼房内を含む)、鼻、局所的(バッカルおよび舌下を含む)、膣または非経口的（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、気管内および硬膜外を含む）投与に適したものが挙げられるが、これらに限定されない。処方物は、従来の製薬技法により調製される単位投与形態で提供されると便利である。このような技法には、活性成分および製剤担体または賦形剤を組み合わせる工程が含まれる。概して、処方物は、活性成分を液体担体または微細分割固体担体またはその両方と均一に且つ直接組み合わせて、必要な場合には、次に製品を成形することにより調製される。本方法は、応答免疫細胞に提示するために用いられる担体／ビヒクル（担体としては、例えばリポソーム、種々の非分解性ポリマーおよび浸透圧ミニポンプを含むがそれに限定されない）にかかわらず、その中のいずれか一つ、あるいはすべてのまたは任意の成分の組合せでも用い得る。さらに、その組合せを生分解性ポリマー中に組み入れて化合物を持続性放出させ得るが、ポリマーは薬剤送達(d rug delivery)が望ましい場所の付近に埋め込まれる。生分解性ポリマーおよびその使用は、例えばBrem，et al．1991，Journal of Neurosurgery，74:441-446 （参照により本明細書中に含まれる）に記載されている。経口投与に適した本方法の処方物は、個別の単位、例えば各々が所定量の活性成分を含有するカプセル、カシェ剤または錠剤；粉末または顆粒；水性液または非水性液中の溶液または懸濁液；水中油液体エマルジョンまたは油中水エマルジョン、そして巨丸剤として提供され得るが、これらに限定されない。錠剤は、任意に１つまたはそれ以上の副成分とともに圧縮または成形することにより製造し得る。圧縮錠剤は、適切な機械で圧縮することにより調製し得る。易流動性形態の、例えば粉末または顆粒のような活性成分を、結合剤、滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、界面活性剤または分散剤と任意に一緒に混合し得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤化した粉末化化合物の混合物を適切な機械で成形することにより、製造し得る。錠剤は、任意にコーティングするかまたは刻み目を付け得るし、ならびにその中の活性成分か徐々にまたは制御されて放出されるよう処方し得る。口腔に局所投与するのに適した本方法の処方物としては、風味付けした基剤、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントゴム中に活性成分を含むロゼンジ；不活性基剤、例えばゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴム中に活性成分を含む香錠；そして適切な液体担体中で投与される活性成分を含むうがい薬か挙げられる。皮膚に局所投与するのに適した本方法の方法の処方物は、当業界で適切であることが既知の担体中に投与される活性成分を含むエマルジョン、軟膏、クリーム、ゲル、ローションおよびペーストとして提供され得る。直腸投与するための本方法の処方物は、適切な基剤、例えばココアバターまたはサリチレートとともに活性成分を含む坐薬として提供される。鼻腔内投与するのに適した本方法の、担体が固体である処方物は、粒子サイズが例えば２０〜５００μの範囲の粗粉末で、これは、鼻に近く保持される粉末の容器から鼻道を通して迅速に吸入することにより嗅剤が投与される方法で投与される。例えば鼻腔スプレーまたは点鼻薬として投与するための、担体が液体である適切な処方物には、活性成分の水性または油性溶液が含まれる。膣投与に適した本方法の処方物は、活性成分の他に、当業界で適切であることが既知の担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー処方物として提供され得る。非経口投与に適した処方物としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および処方物を意図された受容者の血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性滅菌注入溶液；そして沈殿防止剤および増粘剤を含み得る水性および非水性滅菌懸濁液が挙げられる。処方物は、単位用量または多用量容器中に、例えば密封アンプルおよびバイアル中に提供され得るし、そして使用直前に滅菌液体担体、例えば注入用の水だけを必要とする、冷凍乾燥（凍結乾燥）条件で保存され得る。即時調合する注射溶液および懸濁液は、前記の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製し得る。投与される細菌細胞壁抽出物の最適用量は、治療される動物のサイズにより、そして投与方法によって変わる。免疫系を刺激するのに十分な量が必要なだけである。１回用量は、細菌細胞壁抽出物約０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌ、さらに好ましくは約０．０５〜６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは約０．１〜４．０ｍｇ／ｍｌである。細菌細胞壁抽出物は、約０．０１〜１０ｍｌ、さらに好ましくは約０．０５〜７．５ｍｌ、最も好ましくは約０．１〜５．０ｍｌの総用量で投与される。本発明の細菌細胞壁抽出物は、１回または数回、同一受容者に投与し得る。投与量および投与計画は、当業者により容易に決定され得る。好ましい投与処方物は、本発明に記載した（それらに限定されないが）処方物中に１用量または１単位、亜用量または亜単位、あるいはその分数分の細菌細胞壁抽出物を含有するものである。さらに、本明細書中に具体的に記載した成分の他に、本方法は、用いられる処方物の種類に関係がある業界で慣用的なその他の作用物質を含み得る、と理解されるべきである。以下の実施例で本発明をさらに説明するが、同時に本発明はそれらに限定されないものとする。実施例１細菌細胞壁抽出物の調製実施例１に記載するようなマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacterium phl ei)細胞壁抽出物の調製は、その他の細菌種からの細胞壁抽出物の調製を代表する。 Mycobacterium phleiは、Institut fur Experimental Biologie and Medizin, Borstel,West Germanyから入手し、滅菌乳汁中の懸濁液として−６０℃で保存した。修飾細胞壁の生物活性のいかなる減損も伴わずに、１９７６〜１９８５年の間に、単離物を約１１回移転した。M．phleiは、Petragnani培地（Difco Labs,D etroit,MI）で培養した。ヒートシステム音波処理機（従来はBranson音波処理機と呼ばれていた）ＸＬ２０１５型を用いて、M．phlei細胞壁を調製した。約４００ｇの湿った細胞塊を、約１２００ｍｌの容量を有する清浄なブレンダーに入れた。細胞塊を高速で３０〜６０秒間混合した。混合後、６ｍｌのTween 80および２００〜４００ｍｌの滅菌水を細胞混合物に添加した。次に、全細胞懸濁液を、低速で約１０秒間、ブレンダー中で混合した。ヒートシステム音波処理機と３／４タップホーン(tapped horn)を用いて、超音波細胞破砕により細胞破砕を行った。細胞が容量の約５０％〜７０％を構成する細胞懸濁液５００ｍｌを１リットルビーカーに入れて、８の設定で約５分間、音波処理した。音波処理物は、分画工程中は氷上の滅菌フラスコ内に保存した。音波処理物を２５０ｍｌの遠心分離瓶に移して、ＧＳＡローターを備える中速遠心分離器中で、１５℃において２７，５００×ｇで１時間、遠心分離した。遠心分離からの上清液をデカントし、廃棄した。破損していない細胞の、最下層白色ペレットを廃棄した。沈殿粗細胞壁画分をブレンダーに移して、低速で混合することにより、滅菌脱イオン水中に懸濁した。粗細胞壁画分を、再懸濁および１５℃において２７，５００×ｇで１時間の遠心分離により洗浄した。再び、破損していない細胞の、最下層白色ペレットを廃棄した。粗細胞壁画分を洗浄後、ペレットを滅菌脱イオン水中に再懸濁し、３５０×ｇで５分間回転して非破損細胞を沈殿させる一方で細胞壁は上清液中に保持させた。上清液をデカントし、１５℃において２７，５００×ｇで１時間遠心分離して、粗細胞壁画分を沈殿させた。粗細胞壁画分を、タンパク質分解酵素で消化することにより除タンパクした。約４００ｇの全細胞から得られた粗細胞壁画分を、低速で混合することにより、１リットルの０．０５Ｍトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５中に再懸濁した。粗細胞壁画分がトリス緩衝液中に十分に再懸濁された後、５０ｍｇのトリプシン（膵臓トリプシン、Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO）を添加し、磁気攪拌棒を用いて３５℃で６時間、懸濁液を攪拌した。トリプシン処理後、５０ｍｇのプロナーゼ（ Streptomyces griseusプロテアーゼ、Sigma Chemical Co.,St．Louis，MO）を１リットル毎のトリプシン処理細胞壁懸濁液に添加した。磁気攪拌棒を用いて３５ ℃で１２〜１８時間、懸濁液を攪拌した。プロテアーゼ消化細胞壁画分を、界面活性剤およびフェノールで処理した。１リットル毎の細胞壁懸濁液に、６０ｇの尿素(J．T．Baker Chemical Co.，Phill ipsburg，NJ)、２．０ｍｌの１００％トリトンＸ−１０Ｏ（ポリオキシエチレンエーテル、Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO）および１００ｇのフェノール結晶（Fisher Scientific,Fair Lawn,NJ）を添加した。懸濁液を含むフラスコをアルミホイルで軽く覆い、６０℃〜８０℃に加熱して、１時間攪拌した。除タンパク細胞壁画分を、ＧＳＡローターにより１６，０００×ｇで１０分間回転させた。上清画分をデカントして、廃棄し、ペレットの下の暗色流体を使い捨てピペットを用いて除去した。約１リットルの滅菌水中に再懸濁して細胞壁ペレットを３回洗浄し、ＧＳＡローターにより１６，０００×ｇで１０分間遠心分離した。洗浄し、修飾したマイコバクテリウム属細菌の細胞壁抽出物（ＭＣＷＥ）または細胞壁ペレットを、少量の脱イオン化滅菌水を含む凍結乾燥フラスコに懸濁液を移すことにより、凍結乾燥させた。３０ｇ毎の湿潤細胞壁出発物質に対して、３００ｍｌ凍結乾燥フラスコ１本を用いた。固体二酸化炭素で冷却しておいたエタノール中でフラスコを回転することにより、細胞壁懸濁液をシェル凍結させた。フラスコの内容物を凍結後、フラスコを凍結乾燥装置（Virtis Co.，Inc.，G ardiner，NY）に取り付けて、凍結乾燥した。凍結乾燥後、試料を滅菌ねじ蓋容器に移して、無水硫酸カルシウムを含むデシケーター中で−２０℃で保存した。実施例２細菌細胞壁抽出物の乳化マイコバクテリウム属細菌細胞壁抽出物（ＭＣＷＥ）のエマルジョンを４工程で調製した。すなわち、（１）乾燥除タンパクマイコバクテリウム属細菌細胞壁抽出物およびスクアランの乳化容器への添加、（２）油中での細胞壁抽出物の懸濁、（３）界面活性剤を含有する緩衝化生理食塩溶液の、細胞壁抽出物および油の混合物への添加、そして（４）油−細胞壁抽出物複合体の水性界面活性剤生理食塩溶液中での乳化の工程であった。 Microfluidics Tabletop MicrofluidizerモデルＭ−１１０Ｙを１フロースルーに関して約１０，７００〜２３，０００ｐｓｉで用いる微流動化により乳化を行った。典型的行程容量は、約６〜７ｍｌ／行程であった。数グラムの凍結乾燥ＭＣＷＥ（前記の実施例１に記載されたように調製）を、乾燥滅菌済の１リットルビーカーに添加した。スクアランを１ｇのＭＣＷＥ当たり２０ｍｌの濃度で添加し、混合物を被覆して、一夜放置した。油と水との懸濁液中の油の最適濃度は、約１％〜７％であった。油−ＭＣＷＥ混合物の１０ｍｌアリコートを滅菌１リットルビーカーに移した。５００ｍｌの滅菌リン酸緩衝化生理食塩水（０．０５Ｍリン酸ナトリウム、ｐＨ７．２、９ｇのＮａＣｌおよび２ｍｌのTw een-80／脱イオン水１リットル）を油−ＭＣＷＥの各１０ｍｌアリコートに添加した。混合物を微流動化により均質化し、４℃で保存のために滅菌蓋付瓶に移した。エマルジョンの試料を、光学顕微鏡を用いてカバーガラス下で検査して、油小滴が透明で暗色の縁を有するというよりむしろ、小さく、粒状の外見であることを確認した。粒状の外見の小滴は、細胞壁の油担体への適正な吸着を示す。水中油型エマルジョン中の細胞壁調製物の瓶を滅菌混合容器中にプールし、筋注用に、５０ｍｌの１．３％酸化アルミニウム、５０ｍｌのリン酸緩衝化生理食塩水、30μｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび２．５μｇ／ｍｌのアンホテラシンＢを、１リットル毎の細胞壁抽出物エマルジョンに防腐剤として添加した。Fila matic Vial Filler（National Instrument Co.,Baltimore,MD）を用いて滅菌層状空気流下で、滅菌Ｉ型ガラス瓶およびプラスチック注射器に１．５ｍｌ〜１０ｍｌの安定化エマルジョンを充填した。バイアルおよび注射器に蓋をして、密封し、４℃で保存した。実施例３ＭＣＷＥによるバベシア・エクイ(Babesia equi)の処置ウマにおける処置本試験では、補体結合試験でBabesia equiに対して陽性である５頭の雌ウマを用いた。雌ウマの１頭に、４ｍｇ／ｋｇのイミドカルブの４用量を、７２時間間隔で筋注した。４頭の雌ウマには、１５００ｇのＭＣＷＥ（前記の実施例２と同様に調製した）の２用量を約１４日の間隔をおいて筋注した。ＭＣＷＥ投与後２４時間の間、６時間毎に、各動物の体温をモニタリングした。体温は１．０℃ 〜１．２℃より多くは増大せず、１８〜２４時間以内では正常であった。雌ウマ１−イミドカルブ雌ウマ１は、イミドカルブによる処置の前に、１／２０希釈で＋＋＋＋のB．e qui抗体力価を有した。イミドカルブによる処置の６ヶ月後、雌ウマ１は、B．eq uiに対して再び結果は陽性であった。雌ウマ２−ＭＣＷＥ雌ウマ２は、ＭＣＷＥによる処置の前に、１／５希釈で＋のB．equi抗体力価を有した。ＭＣＷＥによる処置の６ヶ月後、雌ウマ２は、B．equiに対して結果は陰性であった。雌ウマ３−ＭＣＷＥ雌ウマ３は、ＭＣＷＥによる治療の前に、１／２０希釈で＋＋＋＋のB．equi 抗体力価を有した。ＭＣＷＥによる処置の５ヶ月後、雌ウマ３は、B．equiに対して結果は陰性であった。雌ウマ４−ＭＣＷＥ雌ウマ４は、ＭＣＷＥによる処置の前に、１／５希釈で＋＋＋のB．equi抗体力価を有した。ＭＣＷＥによる処置の３ヶ月後、雌ウマ４は、B．equiに対して結果は陰性であった。雌ウマ５−ＭＣＷＥ雌ウマ５は、ＭＣＷＥによる処置の前に、１／４０希釈で＋＋＋＋のＢ．equi 抗体力価を有した。ＭＣＷＥによる処置の３ケ月後、雌ウマ５は、Ｂ．equiに対して結果は陰性であった。ウシにおける処置 B．equiに対して陽性である雌ウシ２０頭を、本試験に用いた。動物は、Veter inary School of Medellin，Colombiaで筋注ＭＣＷＥ（実施例２と同様に調製した）により処置された。ＭＣＷＥ処置後、動物はB．equiに対して結果は陰性であった。これらのデータは、B.equiを処置し、動物からB.equiを排除するための治療薬としてＭＣＷＥが有効であることを示す。実施例４ＭＣＷＥによるトリパノソーマ症の処置本試験では、トリパノソーマに感染したウマ３０頭を用いた。ウマを３群に分けて、ジミナジン、ＭＣＷＥ（実施例２と同様に調製した）またはＭＣＷＥ（実施例２と同様に調製した）＋ジミナジンを筋注処置した。ＭＣＷＥ単独と、ＭＣＷＥ＋ジミナジンは、ウマからトリパノソーマを排除する場合に同等に有効であった。ジミナジン単独は、ウマからトリパノソーマを排除するに際しては、ＭＣＷＥまたはＭＣＷＥ＋ジミナジンより低効力であった。これらのデータは、ＭＣＷＥがトリパノソーマ症を治療するための治療薬として、そして動物からトリパノソーマを排除するのに有効であることを示す。実施例５ＭＣＷＥによるエルリキア・リスチシ(Ehrlichia risticii)の処置本試験では、Ehrlichia risticiiに感染したウマをＭＣＷＥの１回投与で処置した。処置の４日以内に、動物はE．risticii感染から回復した。従来の薬剤を用いた場合、回復時間は通常は２〜３週間である。これらのデータは、ＭＣＷＥが、トリパノソーマE．risticiiを処置するための治療薬として有効であることを示す。実施例６ＭＣＷＥによるマンソン住血吸虫(Schistosoma mansoni)の処置本試験では、６週齢Ｃ５７ＢＬ／５マウス（Charles River，Quebec）を用いた。マウスを４群に分け、表１に示したように処置した。表１処置群Ｃ＝Biomphalaria glabrata巻貝から採取したマンソン住血吸虫セルカリア（L owell University,Lowell,MA）を濃縮し、計数した。０．１ｍｌの生理食塩水中２００個のマンソン住血吸虫セルカリアのアリコートを、マウスの腹腔中に皮下注入した。Ｍ＝０μｇ、２０μｇまたは１００μｇの用量で、スクアランおよび水中で乳化したＭＣＷＥ（前記の実施例２と同様に調製）を、マウスに腹腔内注入した。Ｔ＝終了。マウスを頸部脱臼により屠殺し、虫を各マウスから回収して、それらの数および性別を測定した。表２は、感染マウスにおける虫負荷量に及ぼすＭＣＷＥの作用を示す。表２マンソン住血吸虫負荷量に及ぼすＭＣＷＥの作用＊スチューデントｔ検定により検定した場合に有意。標準誤差および群当たりのマウス数は、括弧内に示す。^a虫−低減は［対照虫− 実験虫］／対照虫×１００％として算出した。^*スチューデントｔ検定により検定した場合に有意。Ｉ群（曝露後）では、対照（Ａ）マウス、２０μｇＭＣＷＥ（Ｂ）処置マウスおよび１００μｇＭＣＷＥ処置（Ｃ）マウスの虫負荷量は、有意に異ならなかった。第２群（曝露後）では、２０μｇＭＣＷＥ処置（Ｂ）マウスにおいて虫負荷量の有意の低減が認められたが、しかし１００μｇＭＣＷＥ処置（Ｃ）マウスでは認められなかった。第３群（曝露前）では、２０μｇＭＣＷＥ処置（Ｂ）マウスおよび１００μｇＭＣＷＥ処置（Ｃ）マウスに虫負荷量の有意の低減が認められた。第４群（曝露前および曝露後）では、１００μｇＭＣＷＥ処置（Ｃ）マウスにおいて虫負荷量の有意の低減が認められたが、しかし２０μｇＭＣＷＥ処置マウスでは認められなかった。これらのデータは、マンソン住血吸虫による感染の前および後の両方におけるＭＣＷＥの投与が虫負荷量を有意に低減することを実証する。セルカリア試験後のＩＶ群（曝露前および曝露後）マウスに関して、生存率を測定した。感染後１６週目では、生存率はＩＶ群Ａマウス（ＰＢＳ）に関しては５５％、ＩＶ群Ｂマウス（２０μｇＭＣＷＥ）に関しては８０％、そしてＩＶ群Ｃマウス（１００μｇＭＣＷＥ）に関しては８５％であった。これらのデータは、ＭＣＷＥがマンソン住血吸虫感染マウスの生存に有意の影響を及ぼし、そしてこの作用が用量依存性であることを示す。これらのデータは、ＭＣＷＥがマンソン住血吸虫を処置するための治療薬として有効であることを示す。実施例７ＭＣＷＥによるトリキネラ・スピラリス(Trichinella spiralis)感染の防止本試験では、体重２０〜２５ｇの寄生虫を有さない同系ＮＩＨ雌マウス２８匹を４群に分けた。ＦＣＡ群には、０.１ｍｌのリン酸緩衝化生理食塩水(ＰＢＳ) 、ｐＨ７.２中の０.１ｍｌフロイント完全アジュバント(Sigma Chemical Co.，S t．Louis，MO)を腹腔内投与した。ＣｏｎＡ群には、２０μｇのコンコナバリンＡ（Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO）を腹腔内投与した。ＭＣＷＥ群には、１００μｇのＭＣＷＥ(実施例ＩＩ)を腹腔内投与した。対照群には、ＰＢＳ０．１ｍｌを腹腔内投与した。７日後、各動物にT．spiralisの３００個の感染性幼虫を経口感染させた。４２日後、動物を屠殺し、筋組織１ｇ当たりの幼虫数を測定した。ＡＮＯＶＡを用いて統計分析を行った。表３は、T．spiralis感染後４２日目のＦＣＡ群、ＣｏｎＡ群、ＭＣＷＥ群および対照群における筋肉組織１ｇ当たりの幼虫数を示す。表３筋肉１ｇ当たりの幼虫これらのデータは、対照群マウスと比較した場合の、ＣｏｎＡ群およびＭＣＷＥ群マウスにおける筋組織１ｇ当たりの幼虫の有意の低減を示す。対照群とＦＣＡ群マウスとの間には、筋組織１ｇ当たりの幼虫の有意の低減は認められなかった。これらのデータは、ＭＣＷＥが旋毛虫Trichinella spiralisによる感染を防止する場合の治療薬として有効であることを示す。実施例８ロドコッカス・エクイ(Rhodococcus equi)細胞壁抽出物（ＲＣＷＥ）の調製従来はCorynebacterium equiと呼ばれていたコリネ型生物であるR．equiの細胞壁抽出物を、実施例１と同様に調製した。実施例９ Rhodococcuse qui細胞壁抽出物（ＲＣＷＥ）の免疫刺激特性３２匹のＣＤ１異系交配マウスに、０．５ｍｌの通常生理食塩水エマルジョン中の２％油中の２００μｇのＲＣＷＥを腹腔内注入した(ＲＣＷＥマウス)。１６匹のＣＤ１異系交配マウスに、０．５ｍｌの通常生理食塩水を腹腔内注入し(生理食塩水対照マウス)、８匹のＣＤ１マウスは環境対照として維持した(環境対照マウス)。７２時間後、１６匹のＲＣＷＥマウスと８匹の生理食塩水対照マウスを５×ＬＤ₅₀のパスツレラ・マルトシダ(Pasteurella multocida)を投与し、１６匹のＲＣＷＥマウスと８匹の生理食塩水対照マウスを２０×ＬＤ₅₀の脳心筋炎（ＥＭＣ）ウイルスを投与した。投与後１４日目に、ＲＣＷＥマウスは３２匹中１０匹が、生理食塩水対照マウスは１６匹中０匹が、そして環境対照マウスは８匹中８匹が生き残った。これらのデータは、ＲＣＷＥが非特異的免疫刺激剤であることを実証する。実施例１０ＲＣＷＥおよびＭＣＷＥによる一酸化窒素産生の刺激ネズミマクロファージ細胞株ＲＡＷ２６４．７細胞を、２４ウエル組織プレートにプレートした。細胞がコンフルエント単層を形成した時に、培地をウエルから除去し、５〜８０μｇのＲＣＷまたは５〜８０μｇのＭＣＷを含有する新鮮な培地１ｍｌと取り換えた。５％ＣＯ₂を含む雰囲気中で３７℃で２４時間インキュベーション後、Griessの比色反応（Griess，P．Demerkungen zu der Abhan dlung der HH．Wesdlsky und Benedikt，UEBER EINIGEAZOVERDINDUNGEN，C hem．Ber．12:426-428，1987）を用いて、一酸化窒素（ＮＯ）産生を測定した。表４平均一酸化窒素（ＮＯ）産生（nmol/10⁶細胞／24時間） ¹ ＲＣＷＥに関する全試料の平均² ＭＣＷＥに関する全試料の平均表４のデータは、非特異的免疫刺激剤ＲＣＷＥが、ＲＡＷ２６４．７細胞によるＮＯの発生の促進に際して、非特異的免疫刺激剤であるＭＣＷＥと同様の非特異的免疫刺激特性を有することを立証する。プロプリオネバクテリウム・アクネ(Proprionebacterium acne) ＣＧ)、ボルデテラ・ペルツスシス(Bordetella pertussis)およびその他のボルデテラ亜種(Bordetella spp.)の細菌菌体調製物、ならびに、麻疹ウイルス生成物ＲＶＩ（Eudaemonic，Omaha，NE）は非特異的免疫刺激剤として用いられており、非特異的免疫刺激剤ＲＣＷＥおよびＭＣＷＥと同様の非特異的免疫刺激特性を有する。非特異的免疫刺激剤ＭＣＷＥを用いて得られた結果は、その他の非特異的免疫刺激剤を用いて得られる結果の代表である。もちろん、前記は本発明の好ましい実施態様に関するだけのものであり、添付の請求の範囲に記載したような本発明の精神および範囲を逸脱しない限り、多数の修正または変更が成され得る、と理解されるべきである。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１１年６月１１日（１９９９．６．１１）【補正内容】請求の範囲１．動物の免疫系を刺激して原生動物性または寄生生物性疾患を予防する方法であって、動物に有効な量の細菌細胞壁抽出物を投与することにより、動物の免疫系を刺激して原生動物性または寄生生物性疾患を予防することを含む前記方法。２．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第１項に記載の方法。３．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacteri um phlei)である請求の範囲第２項に記載の方法。４．前記ロドコッカス種がロドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第２項に記載の方法。５．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１項に記載の方法。６．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第５項に記載の方法。７．動物の免疫系を刺激して原生動物性または寄生生物性疾患を治療する方法であって、動物に有効な量の細菌細胞壁抽出物を投与することによって、動物の免疫系を刺激して原生動物性または寄生生物性疾患を治療することを含む前記方法。８．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第７項に記載の方法。９．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacteri um phlei)である請求の範囲第８項に記載の方法。１０．前記ロドコッカス種がドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第８項に記載の方法。１１．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第７項に記載の方法。１２．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１１項に記載の方法。１３．動物の免疫系を刺激して原生動物性または寄生生物性疾患を排除する方法であって、動物に有効な量の最近細胞壁抽出物を投与することによって、動物の免疫系を刺激し原生動物性または寄生生物性疾患を排除することを含む前記方法。１４．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第１３項に記載の方法。１５．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacte rium phlei)である請求の範囲第１４項に記載の方法。１６．前記ロドコッカス種がドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第１４項に記載の方法。１７．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１３項に記載の方法。１８．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１７項に記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者フィリップス，ニゲル，シー. カナダ，エイチ９アール１ジェイ６ケベック，ポイント―クレール，サイナリーアベニュー 101 (72)発明者ロガン，ドラガン，アール. カナダ，エヌ５ヴイ４エヌ１オンタリオ，ロンドン，サディアベニュー 138

Claims

【特許請求の範囲】１．動物における原生動物性または寄生生物性疾患を予防するのに有効な量の細菌細胞壁抽出物を動物に投与することを含む、動物における原生動物性または寄生生物性疾患の予防方法。２．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第１項に記載の方法。３．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacteri um phlei)である請求の範囲第２項に記載の方法。４．前記ロドコッカス種がロドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第２項に記載の方法。５．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１項に記載の方法。６．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第５項に記載の方法。７．動物における原生動物性または寄生生物性疾患を予防するのに有効な量の細菌細胞壁抽出物を動物に投与することを含む、動物における原生動物性または寄生生物性疾患の治療方法。８．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第７項に記載の方法。９．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacteri um phlei)である請求の範囲第８項に記載の方法。１０．前記ロドコッカス種がドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第８項に記載の方法。１１．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第７項に記載の方法。１２．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１１項に記載の方法。１３．動物における原生動物性または寄生生物性疾患を排除するのに有効な量の最近細胞壁抽出物を原生動物性または寄生生物性疾患を有する動物に投与することを含む、原生動物性または寄生生物性疾患を有する動物からの原生動物性または寄生生物性疾患の排除方法。１４．前記細菌細胞壁抽出物が、マイコバクテリウム種由来の細胞壁抽出物およびロドコッカス種由来の細胞壁抽出物から成る群から選択される請求の範囲第１３項に記載の方法。１５．前記マイコバクテリウム種がマイクロバクテリウム・フレイ(Mycobacte rium phlei)である請求の範囲第１４項に記載の方法。１６．前記ロドコッカス種がドコッカス・エクイ(Rhodoccocus equii)である請求の範囲第１４項に記載の方法。１７．動物における疾患が、アナプラズマ属、バベシア属、バランチジウム属、ベスノイチア属、クラミジア属、コクシジア属、クリプトスポリジウム属、サイトークスゾーン属、アイメリア属、エントアメーバ属、エペリスロゾーン属、エルリキア属、ジアルジア属、ヘモバルトネラ属、ハモンジア属、イソポラ属、リーシュマニア属、ネオリケッチア属、ニューモシステス属、プラスモジウム属、リケッチア属、住血吸虫属、サルコシスティス属、タイレリア属、旋毛虫属、トキソプラズマ属、トリコモナス属、トリパノソーマ属、ユニカリア属、ジピリジウム属、エキノコックス属、テニア属、鉤虫属、回虫属、蟯虫属、ストロンギロイデス属、ストロンギルス属、トキソカラ属、トキサスカリス属および鞭毛属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１３項に記載の方法。１８．動物における疾患が、旋毛虫属、バベシア属、トリパノソーマ属、リケッチア属および住血吸虫属から成る群から選択される生物により引き起こされる請求の範囲第１７項に記載の方法。