JP2001514257A - プロテアーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、カテプシンＫを包含するプロテアーゼを阻害する、 【化１】 [式中：Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃は、独立して，−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、１〜３個のフッ素により置換された−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＮ、−Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ₁、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣＮ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＯ₂、−ＮＲ₁ＳＯ₂Ｒ₃、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁(Ｃ＝ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＯＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣＮ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)Ｒ₂、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＯＲ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＯＲ₃、−Ｏ(ＣＨ₂)₂ＯＨ、−ＯＣ(Ｏ)Ｒ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)Ｒ₁、−ＳＲ₁、−ＳＯ₂ＮＲ₁Ｒ₂または−Ｓ(Ｏ)_mＲ₃から選択され；ｍは、０、１または２であり；ｑは、１または２であり；ｎは、０〜２であり；Ｒ₁は、−Ｈ、−Ｃ_{1 -6}アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であるか；または、Ｒ₁およびＲ₂がＮＲ₁Ｒ₂として一緒にある場合、これらは窒素原子と一緒になって、炭素または炭素および１もしくはそれ以上のＯ、ＮまたはＳから選択されるさらなるヘテロ原子からなる５〜７員環を形成してもよく；Ｒ₂は、Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり；Ｒ₃は、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり；Ｘ₄は、−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＯＡｒ、−ＣＯＯＣ_1-6アルキルまたはＣＯＯＡｒである]で示される式Ｉの化合物、かかる化合物の医薬組成物、骨粗鬆症を包含する過剰な骨損失または軟骨もしくはマトリックスの分解の疾病；歯肉炎および歯周炎を包含する歯肉の疾病；関節炎、より詳細には、骨関節炎およびリューマチ性関節炎；パジェット病；悪性腫瘍の高カルシウム血症；および代謝性骨疾病を治療する方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 発明の分野 一般的には、本発明は、チアゾールグアニジンプロテアーゼ阻害剤、詳細には
、システインおよびセリンプロテアーゼの阻害剤、より詳細には、システインプ
ロテアーゼを阻害する化合物、さらに詳細には、パパインスーパーファミリーの
システインプロテアーゼを阻害する化合物、ずっと詳細には、カテプシンファミ
リーのシステインプロテアーゼを阻害する化合物、最も詳細には、カテプシンＫ
を阻害する化合物に関する。かかる化合物は、システインプロテアーゼが関与し
ている疾患、特に、過剰な骨または軟骨の損失に関する疾患、例えば、骨粗鬆症
、歯周炎および関節炎の治療に有用である。

【０００２】 発明の背景 骨は、紡錘−または板−形状のヒドロキシアパタイト結晶が組み込まれている
蛋白マトリックスから構成される。タイプＩコラーゲンは骨の主要な構造蛋白質
であり、構造蛋白質の約９０％を占める。マトリックスの残りの１０％は、オス
テオカルシン、プロテオグリカン、オステオポンチン、オステオネクチン、トロ
ンボスポンジン、フィブロネクチン、および骨シアロ蛋白質を包含する多くの非
コラーゲン蛋白質からなっている。骨格筋は、生存している間に別々の部位で再
構築を受ける。これらの部位または再構築単位は、骨吸収期、ついで、骨置換期
からなるサイクルを経る。

【０００３】 骨吸収は、造血系の多核細胞である破骨細胞により行われる。破骨細胞は骨表
面に付着し、堅固なシーリングゾーンを形成し、次いで、その頂点(すなわち、 骨吸収)表面に広がったしわのある膜を形成する。これにより、閉じた細胞外コ ンパートメントが骨表面上に形成され、それはしわのある膜中のプロトンポンプ
により酸性化され、破骨細胞はその中に蛋白分解酵素を分泌する。蛋白分解酵素
が蛋白マトリックスを消化する間、コンパートメントのｐＨが低いので骨表面の
ヒドロキシアパタイト結晶が溶解される。このようにして、吸収裂口またはピッ
トが形成される。サイクルのこの期間の終わりに、破骨細胞は、引き続き無機質
化される新たな蛋白マトリックスを形成する。骨粗鬆症およびパジット病などの
いくつかの疾患状態において、骨吸収と骨形成との間の正常なバランスが崩れ、
各サイクルにおいて正味の骨損失が生じる。最終的に、このことは骨の弱体化を
引き起こし、最小限の外傷でも骨折する危険性を増加させうる。

【０００４】 いくつかの公表された研究は、システインプロテアーゼの阻害剤は、破骨細胞
により媒介される骨吸収の抑制に効果的であることを示しており、骨吸収におけ
るシステインプロテアーゼの必須の役割を示している。例えば、Delaisse, et a
l., Biochem. J., 1980, 192, 365には、マウス・骨器官培養系中の一連のプロ テアーゼ阻害剤が開示されており、システインプロテアーゼの阻害剤(例えば、 ロイペプチン、Ｚ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−ＣＨＮ₂)は骨吸収を防止するが、セリンプ
ロテアーゼ阻害剤は効果がないことが示唆されている。Delaisse, et al., Bioc
hem. Biophys. Res. Commun., 1984, 125, 441には、カルシウム欠乏食を与えた
ラットの血清カルシウムの急激な変化により測定したところ、Ｅ−６４およびロ
イペプチンはインビボでの骨吸収の予防にも効果的であることが開示されている
。Lerner, et al., J. Bone Min. Res., 1992, 7, 433には、内在性システイン プロテアーゼ阻害剤であるシスタチンは、マウス・頭蓋冠におけるＰＴＨにより
刺激された骨吸収を阻害することが開示されている。Delaisse, et al., Bone,
1987, 8, 305, Hill, et al., J. Cell. Biochem., 1994, 56, 118,および Ever
ts, et al., J. Cell. Physiol., 1992, 150, 221などの他の研究にも、システ インプロテアーゼ活性の阻害と骨吸収との間の関連が報告されている。Tezuka,
et al., J. Biol. Chem., 1994, 269, 1106, Inaoka, et al., Biochem. Biophy
s. Res. Commun., 1995, 206, 89 および Shi, et al., FEBS Lett., 1995, 357
, 129には、正常な条件下で、システインプロテアーゼであるカテプシンＫ(これ
はまたカテプシンＯとも呼ばれる。)が破骨細胞中に豊富に発現され、これらの 細胞に存在する主要システインプロテアーゼでありうることが開示されている。

【０００５】 破骨細胞におけるカテプシンＫの豊富な選択的発現は、この酵素が骨吸収に必
須であることを強く示唆する。よって、カテプシンＫの選択的阻害は、骨粗鬆症
、パジェット病、悪性の高カルシウム血症、ならびに代謝性骨疾患を包含するが
これに限定されるものではない、過剰な骨の損失の疾患に有効な治療を提供する
。骨関節炎滑液の軟骨吸収細胞において、カテプシンＫレベルが上昇することも
示されている。よって、カテプシンＫの選択的阻害もまた、骨関節炎およびリュ
ーマチ性関節炎を包含するがこれに限定されない軟骨またはマトリックスの過剰
な分解の疾患の治療に有用でありうる。典型的には、転移性新生物細胞も、周囲
のマトリックスを分解する高レベルの蛋白分解酵素を発現する。よって、カテプ
シンＫの選択的阻害もまた、ある種の新生物疾患の治療に有用でありうる。

【０００６】 Palmer, et al., J. Med. Chem., 1995, 38, 3193には、カテプシンＢ、Ｌ、 Ｓ、Ｏ２およびクルゼイン(cruzain)などのシステインプロテアーゼを不可逆的 に阻害するある種のビニルスルホンが開示される。アルデヒド、ニトリル、ａ−
ケトカルボニル化合物、ハロメチルケトン、ジアゾメチルケトン、(アシルオキ シ)メチルケトン、ケトメチルスルホニウム塩およびエポキシスクシニル化合物 などの他のクラスの化合物もまた、システインプロテアーゼを阻害することが報
告されている。ペプチド模倣物としてアザチド(ポリアクリルヒドラジド)の合成
が、Han and Janda, J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 2539により最近報告されて
いる。

【０００７】 Ｎ−フェニル−Ｎ'−(２−フェニルオキサゾール−４−イルカルボニル)ヒド ラジドならびにそのＮ−(２，４−ジニトロフェニル)誘導体が、Afriジ, A., et
al., J. Chem. Soc, Perkin Trans. I, 1976, 3, 315-20に記載されている。Be
nko, A.,et al., Justus Liebigs Ann. Chem., 1968, 717, 148-53には、Ｎ−( ４−エトキシカルボニルチアゾール−２−イル)−Ｎ'−[２−(４−ピリジニル) チアゾール−４−イルカルボニル]ヒドラジドの製造が記載される。

【０００８】 かくして、構造的に多様なシステインプロテアーゼ阻害剤が同定されてきた。
しかしながら、これらの公知の阻害剤は、動物、特にヒトにおける治療薬として
の使用に適当でないと考えられる。なぜなら、それらは種々の短所を有するから
である。これらの短所は、選択性の欠如、細胞毒性、溶解度が低いこと、および
早すぎる血漿クリアランスを包含する。それゆえ、カテプシン類、特にカテプシ
ンＫを包含するプロテアーゼ、特にシステインプロテアーゼの病因となるレベル
により引き起こされる疾患の治療方法、ならびにかかる方法において有用な新規
阻害剤化合物に対する必要性が存在する。

【０００９】 今回我々は、プロテアーゼ阻害剤、最も詳細にはカテプシンＫの阻害剤である
新規クラスのチアゾールグアニジン化合物を今回見いだした。 本明細書中で引用した種々の雑誌、特許および他の刊行物に対する種々の言及
は当該分野の現状を含むものであり、それらを参照することにより本明細書に完
全に記載されているものとみなす。

【００１０】 発明の概要 本発明の１の目的は、システインおよびセリンプロテアーゼの阻害剤のごとき
複素環ケトヒドラジドプロテアーゼ阻害剤、より詳細には、システインプロテア
ーゼを阻害する該化合物、さらに詳細には、パパインスーパーファミリーのシス
テインプロテアーゼを阻害する該化合物、さらに詳細には、カテプシンファミリ
ーのシステインプロテアーゼを阻害する該化合物、最も詳細には、カテプシンＫ
を阻害する該化合物を提供することであり、本発明化合物は、かかるプロテアー
ゼの活性を変化させることにより治療的に修飾される疾患の治療に有用である。 したがって、第１の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物を提供する。 別の態様において、本発明は、式(Ｉ)の化合物および医薬上許容される担体、
希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。

【００１１】 さらに別の態様において、本発明は、プロテアーゼ、詳細には、システインお
よびセリンプロテアーゼ、より詳細には、システインプロテアーゼ、さらに詳細
には、パパインスーパーファミリーのシステインプロテアーゼ、ずっと詳細には
、カテプシンファミリーのシステインプロテアーゼ、最も詳細には、カテプシン
Ｋを阻害することにより疾患状態が治療的に変化されうる疾患の治療方法を提供
する。 もう１つの態様において、本発明化合物は、骨粗鬆症のごとき骨の損失により
特徴づけられる疾患、ならびに歯肉炎および歯周炎のごとき歯肉の疾患、あるい
は骨関節炎およびリューマチ性関節炎のごとき軟骨またはマトリックスの過剰な
分解により特徴づけられる疾患の治療に特に有用である。

【００１２】 発明の詳説 本発明は、式Ｉ：

【００１３】

【化２】 [式中： Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃は、独立して，−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、１〜３個のフ
ッ素により置換された−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＮ、−Ｃ
(Ｏ)Ｒ₁、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ₁、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣ
Ｎ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＯ₂、−ＮＲ₁ＳＯ₂Ｒ₃、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ) Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁(Ｃ＝ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｎ
Ｒ₁Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＯＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣ
Ｎ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)Ｒ₂、−Ｃｌ
、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＯＲ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＯＲ₃、−Ｏ(ＣＨ₂)₂ＯＨ、−Ｏ
Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)Ｒ₁、−ＳＲ₁、 −ＳＯ₂ＮＲ₁Ｒ₂または−Ｓ(Ｏ)_mＲ₃から選択され； ｍは、０、１または２であり； ｑは、１または２であり； ｎは、０〜２であり； Ｒ₁は、−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であるか；また は、Ｒ₁およびＲ₂がＮＲ₁Ｒ₂として一緒にある場合、これらは窒素原子と一緒に
なって、炭素または炭素および１もしくはそれ以上のＯ、ＮまたはＳから選択さ
れるさらなるヘテロ原子からなる５〜７員環を形成してもよく； Ｒ₂は、Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり； Ｒ₃は、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり； Ｘ₄は、−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＯＡｒ、−Ｃ ＯＯＣ_1-6アルキルまたはＣＯＯＡｒである] で示される化合物を提供する。

【００１４】 本発明の好ましい具体例には、 Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃が独立してＨまたはハロゲンであり； Ｘ₄がＣＨ₃またはＣｂｚであり； ｎ＝１または２である、 式Ｉの化合物が包含される。

【００１５】 本発明のさらに好ましい具体例には、 Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃が独立してＨまたはＣｌであり； Ｘ₄がＣＨ₃である、 式Ｉの化合物が包含される。

【００１６】 本発明のよりさらに好ましい具体例には、 ＸおよびＸ₁がＣｌであり； Ｘ₂およびＸ₃がＨであり； Ｘ₄が−ＣＨ₃であり； ｎ＝１である、 式Ｉの化合物が包含される。

【００１７】 以下の化合物は、本発明の特に好ましい具体例である： Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブ トキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル−Ｎ −メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチル
アミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ピペラジノブトキシ)フェニル]チア
ゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝ウレア；および Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−カルボベンジルオキシ−Ｎ−(３ ，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル ｝グアニジン。

【００１８】 定義 本発明は、本発明化合物のすべての水和物、溶媒和物、錯体およびプロドラッ
グを包含する。プロドラッグは、インビボにおいて活性な式Ｉの親薬物を遊離す
るいずれかの共有結合化合物である。キラル中心または別形態の異性中心が本発
明化合物中に存在する場合、エナンチオマーおよびジアステレオマーを含め、か
かるすべての形態の異性体は本発明に包含される。キラル中心を含む本発明化合
物をラセミ混合物、エナンチオマー的に豊富な混合物として使用してもよく、あ
るいは周知の方法を用いてラセミ混合物を分離し、個々のエナンチオマーを単独
で使用してもよい。化合物が不飽和炭素−炭素二重結合を有する場合、シス(Ｚ)
およびトランス(Ｅ)異性体の両方が本発明の範囲内のものとなる。化合物がケト
−エノール互変異性体のごとき互変異性体として存在しうる場合、各互変異性体
は、平衡状態または一方の異性体が優勢であっても、本発明の範囲内のものであ
る。

【００１９】 特記しない限り、１の場合における式Ｉまたはその部分式中のいずれの置換基
も、他の場合における式Ｉまたはその部分式中のいずれの置換基とは独立のもの
である。 ペプチドおよび化学の分野で通常使用される略号およびシンボルを本明細書に
用いて本発明化合物を説明する。一般的には、アミノ酸の略号は、Eur. J. Bioc
hem., 158, 9 (1984)に記載されるように、IUPAC-IUB Joint Commission on Bio
chemical Nomenclatureに従う。本明細書の用語「アミノ酸」は、アラニン、ア ルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミ
ン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、
フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン
およびバリンのＤ−またはＬ−異性体をいう。

【００２０】 本明細書で用いる「Ｃ_1-6アルキル」は、置換および未置換のメチル、エチル 、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチル、ペ
ンチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルおよびヘキシルならびにそ
れらの単純脂肪族異性体を包含する。いずれのＣ_1-6アルキル基も１または２個 のハロゲン、ＳＲ’、ＯＲ’、Ｎ(Ｒ’)₂、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ’)₂、カルバミルまたは
Ｃ_1-4アルキル(ここでＲ’は、Ｃ_1-6アルキルである)により所望により独立して
置換されていてもよい。Ｃ₀アルキルは、いずれのアルキル基も基内に存在しな いことを意味する。それゆえ、Ａｒ−Ｃ₀アルキルは、Ａｒと等価である。

【００２１】 本明細書で用いる「Ｃ_3-7シクロアルキル」は、置換または未置換のシクロプ ロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタンを包
含する。置換されている場合、置換基は上記の「Ｃ_1-6アルキル」についての記 載と同意義である。 「ハロゲン」はＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを意味する。

【００２２】 「Ａｒ」または「アリール」は、１またはそれ以上のＰｈ−Ｃ_0-6アルキル、 Ｈｅｔ−Ｃ_0-6アルキル、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルコキシ、Ｐｈ−Ｃ_0-6アルコ
キシ、Ｈｅｔ−Ｃ_0-6アルコキシ、ＯＨ、(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、Ｏ(ＣＨ₂)_1-6Ｎ Ｒ₄Ｒ₅、ＣＯ₂Ｒ’またはハロゲンにより所望により独立して置換されていても よいフェニルまたはナフチルを意味する。Ｒ₄およびＲ₅は、独立して、Ｈ、Ｃ_{1- 6} アルキル、Ｃ_2-6アルケニル、Ａｒ−Ｃ_0-6アルキルまたはＨｅｔ−Ｃ_0-6アルキ
ルである。２つのＣ_1-6アルキル基は一緒になって飽和または不飽和のＡｒ環に 縮合する５〜７員環を形成してもよい。Ｐｈは、１またはそれ以上のＣ_1-6アル キル、Ｃ_1-6アルコキシ、ＯＨ、(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、Ｏ(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、 ＣＯ₂Ｒ’、またはハロゲンにより所望により置換されていてもよい。

【００２３】 本明細書における「Ｈｅｔ」または「複素環」および「Ｒ₁およびＲ₂がＮＲ₁ Ｒ₂として一緒にある場合、これらは窒素原子と一緒になって、炭素または炭素 および１もしくはそれ以上のＯ、ＮまたはＳから選択されるさらなるヘテロ原子
からなる５〜７員環を形成してもよい」は、飽和または不飽和のいずれかの、安
定な５−〜７−員複素環を意味し、複素環は、炭素原子と１〜３個のＮ、Ｏおよ
びＳからなる群より選択されるヘテロ原子からなり、窒素および硫黄へテロ原子
は、所望により酸化されていてもよく、窒素へテロ原子は、所望により４級であ
ってもよい。複素環は、安定な構造となるいずれのヘテロ原子または炭素原子に
て結合してもよく、Ｐｈ−Ｃ_0-6アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ_0-6アルキル、Ｃ_1-6アル キル、Ｃ_1-6アルコキシ、Ｐｈ−Ｃ_0-6アルコキシ、Ｈｅｔ−Ｃ_0-6アルコキシ、 ＯＨ、(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、Ｏ(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、ＣＯ₂Ｒ’からなる群より 選択される１または２個の基により所望により置換されていてもよい。２つのＣ _1-6 アルキル基は、一緒になって、飽和または不飽和の、Ｈｅｔ環上に縮合する ５〜７員環を形成してもよい。Ｐｈは、１またはそれ以上のＣ_1-6アルキル、Ｃ_{1 -6} アルコキシ、ＯＨ、(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、Ｏ(ＣＨ₂)_1-6ＮＲ₄Ｒ₅、ＣＯ₂Ｒ’ またはハロゲンにより所望により置換されていてもよい。かかる複素環の例には
、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジ
ニル、２−オキソピロロジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル
、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリ
ル、ピリジル、ピラジニル、オキサゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリル
、イソキサゾリル、モルホリニル、チアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリル
、キヌクリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾ
リル、ベンゾピラニル、ベンズオキサゾリル、フリル、ピラニル、テトラヒドロ
フリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンズオキサゾリル、チアモルホリ
ニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、およびオキサジアゾリル環が包
含される。

【００２４】 本明細書では特定の基を略記する。ｔ−Ｂｕは第三ブチル基、Ｂｏｃはｔ−ブ
チルオキシカルボニル基、Ｆｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニル基、Ｐｈ
はフェニル基、Ｃｂｚはベンジルオキシカルボニル基を意味する。 本明細書では特定の試薬を略記する。ＤＭＡＰは、ジメチルアミノピリジン、
ＤＭＦは、ジメチルホルムアミド、ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸、およびＴＨＦ
は、テトラヒドロフランを意味する。

【００２５】 調製方法 ヒドロキシアセトフェノン、１−スキーム１を、１−ブロモ−３−クロロプロ
パンなどのｗ−ジハロアルカンおよび水酸化カリウムなどの適当な塩基と、還流
メタノールなどの適当な溶媒中で反応させることにより、アルキル化してもよい
。メタノールが選択溶媒であるとき、少量のメトキシアルコキシ−アセトフェノ
ン、２−スキーム１を、副産物として単離してもよい。

【００２６】

【化３】

【００２７】

【化４】

【００２８】 ３−(４−メトキシブトキシ)アセトフェノン、１−スキーム２をはじめに臭素
などの適当な臭化剤でジクロロメタンなどのハロゲン化溶媒中処理し、ついでエ
タノールなどの還流アルコール性溶媒中で２−イミノ−４−チオビウレットと処
理することにより、チアゾールグアニジン、２−スキーム２に変換してもよい。
例えば、化合物、２−スキーム２を、例えばジクロロメタン溶媒とジメチルアミ
ノピリジン共反応物などの適当な条件下、ジ−ｔ−ブチルジカーボネートなどの
適当なカルバミル化試薬と反応させることにより形成できるｔ−ブトキシカルボ
ニルグアニジンなどの適当な誘導体を調製することにより、グアニジン基をアル
キル化に対して活性化する。活性化グアニジンのアルキル化を、適当な塩基、特
に水素化ナトリウムで、ジメチルホルムアミドなどの適当な溶媒中脱プロトン化
し、ついで、所望のアルキル化剤、この例では、ベンジルブロマイドを加えるこ
とにより、化合物、３−スキーム−２を得る。例えば、ジクロロメタン中トリフ
ルオロ酢酸でのグアニジンの脱保護により、最終生成物、４−スキーム２を得る
。

【００２９】

【化５】

【００３０】 別に、３−(４−クロロブトキシ)アセトフェノン、１−スキーム３を用いて、
アニリン、この例ではＮ−メチルアニリンを、ジメチルホルムアミドまたはニト
ロメタンなどの適当な溶媒中、高加熱で、アルキル化してもよい。得られるアセ
トフェノン、２−スキーム３を、はじめにジクロロメタンなどのハロゲン化溶媒
中、臭素などの適当な臭素化試薬で処理し、ついで、エタノールなどの還流アル
コール性溶媒中、２−イミノ−４−チオビウレットと反応させることにより、チ
アゾールグアニジン、３−スキーム３に変換してもよい。臭素化条件は、アニリ
ン環のパラ−臭素化ならびにα−ブロモケトン中間体の形成を導く。例えば、化
合物、３−スキーム３を、ジクロロメタン溶媒とジメチルアミノピリジン共反応
物などの適当な条件下、ジ−ｔ−ブチルジカーボネートなどの適当なカルバミル
化試薬と反応させることにより形成できるｔ−ブトキシカルボニルグアニジンな
どの適当な誘導体を形成することにより、グアニジン基をアルキル化に対して活
性化する。活性化グアニジンのアルキル化を、適当な塩基、特に水素化ナトリウ
ムで、ジメチルホルムアミドなどの適当な溶媒中脱プロトン化し、ついで、所望
のアルキル化剤、この例では、ベンジルブロマイドを加えることにより行うこと
ができる。例えば、ジクロロメタン中トリフルオロ酢酸でのグアニジンの脱保護
により、最終生成物、４−スキーム３を得る。

【００３１】

【化６】

【００３２】 種々の反応条件がチアゾール形成において有用であることが見出された。例え
ば、上記したように、クロロアルコキシ−アセトフェノン、１−スキーム４をジ
クロロメタンなどの適当なハロゲン化溶媒中臭素と処理し、ついで、エタノール
などの還流アルコール性溶媒中２−イミノ−４−チオビウレットと処理して、４
−(クロロアルコキシフェニル)−２−グアニジルチアゾール、２−スキーム４を
得る。フェニルトリメチルアンモニウムトリブロマイドなどの異なる臭素化試薬
を、テトラヒドロフランなどの適当な溶媒中で用いることにより臭素化条件を変
更することを除いて同じ反応条件を用いて、４−[４−(３−クロロプロポキシ) フェニル]−２−グアニジルチアゾール、３−スキーム４を得る。２−イミノ− ４−チオビウレットをチオウレアに置き換えること以外は同じ反応条件を用いて
、例えば、２−アミノ−４−[４−(３−クロロプロポキシ)フェニル]チアゾール
、４−スキーム４などのアミノチアゾールの調製が可能である。

【００３３】 スキーム５

【化７】

【００３４】 カルバメート、特に、共試薬としてジメチルアミノピリジンおよび溶媒として
ジクロロメタン−メタノールを用いるなどの適当な反応条件下、ジ−ｔ−ブチル
ジカーボネートなどの適当なカルバミル化試薬との処理により形成するｔ−ブト
キシカルボニルグアニジン、２−スキーム５などの適当な誘導体の形成により、
モノ置換グアニジン、１−スキーム５をアルキル化に対して活性化する。ｔ−ブ
トキシカルボニルグアニジン、２−スキーム５を、ジメチルホルムアミドなどの
適当な溶媒中、水素化ナトリウムなどの適当な塩基で脱プロトン化し、ついで、
例えば、ヨウ化メチルまたはベンジルブロマイドおよび添加ヨウ化ナトリウムな
どのアルキル化試薬と処理して、所望のｔ−ブトキシカルボニル−保護二置換グ
アニジン、３−スキーム５を得てもよい。

【００３５】 クロロアルコキシ芳香族、１−スキーム６を用い、例えばＮ−メチルアニリン
などのアニリンを、適当な溶媒、特にジメチルホルムアミド、アセトニトリルま
たはニトロメタン中、高加熱にて、ヨウ化ナトリウムを添加するかまたは添加な
しで、アルキル化してもよい。これらの反応条件により、ｔ−ブトキシカルボニ
ル基もまた除去され、最終生成物、２−スキーム６が得られる。別に、還流アセ
トン中ヨウ化ナトリウムとの処理などの、多くのハロゲン交換反応の一つを用い
、アニリン化反応を行ってもよい。

【００３６】

【化８】

【００３７】

【化９】

【００３８】 ヨードブトキシ芳香族、１−スキーム７を、高加熱にて、ジメチルホルムアミ
ドなどの適当な溶媒中、第２アミン、この例では、モルホリンまたはＮ−ｔ−ブ
トキシカルボニルピペラジンと反応させ、アミノ化化合物、２−スキーム７を得
てもよい。適当な条件下、特にジクロロメタン中トリフルオロ酢酸でのｔ−ブト
キシカルボニル基の脱保護により、最終化合物、３−スキーム７および４−スキ ーム７ を得る。

【００３９】

【化１０】

【００４０】 アミノチアゾール、１−スキーム８をベンジルイソシアネートなどのイソシア
ネートと、還流トルエンなどの適当な溶媒中に反応させ、置換された、チアゾー
ルウレア、２−スキーム８を得てもよい。適当な反応条件下、特に還流アセトン
中ヨウ化ナトリウムとの処理、ついで、ジメチルホルムアミドまたはニトロメタ
ンなどの適当な溶媒中、Ｎ−メチルアニリンとの高加熱での処理によるハロゲン
交換により、所望の化合物、３−スキーム８を得る。

【００４１】 ヨードプロポキシ芳香族、１−スキーム９を、カルバメートのアニオン、特に
３，４−ジクロロアニリンのベンジルまたはｔ−ブチルカルバメートと反応させ
、アニリン化中間体を調製してもよい。アニオンを、保護されたアニリンと、適
当な塩基、例えば、ブチルリチウムまたは水素化金属、特に水素化ナトリウムを
、適当な溶媒中、例えば、テトラヒドロフランまたはジメチルホルムアミド、特
にジメチルホルムアミド中で反応させることにより形成してもよい。ｔ−ブトキ
シカルボニル基の除去を、中間体を、トリフルオロ酢酸などの適当な試薬と、ジ
クロロメタンなどの適当な溶媒中に反応させることにより行い、二置換されたア
ニリン、２−スキーム９およびベンジルカルバメート置換アナログ、３−スキー ム９ を得てもよい。

【００４２】 スキーム９

【化１１】

【００４３】 本明細書で使用する出発物質は市販されているアミノ酸であるか、あるいは当
業者に周知の慣用方法により調製され、COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METH
ODS, Vol. I-VI (Wiley-Interscienceにより出版)などの標準的な参考書に見い だされるものである。 本明細書におけるアミド結合を形成するための連結方法は当該分野において周
知である。一般的には、Bodansky et al., THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS
, Springer-Verlag, Berlin, 1984; E. Gross and J. Meienhofer, THE PEPTIDE
S, Vol. 1, 1-284 (1979);およびJ.M. Stewart and J.D. Young, SOLID PHASE P
EPTIDE SYNTHESIS, 2d Ed., Pierce Chemical Co., Rockford, Ill., 1984に示 されたペプチド合成方法はこの技術の例であり、参照により本明細書に記載され
ているものとみなす。

【００４４】 本発明化合物を調製するための合成方法には、しばしば、反応性官能基をマス
クし、あるいは望ましくない副反応を最小化するために保護基が用いられる。か
かる保護基は、Green, T. W., PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, John
Wiley & Sons, New York (1981)に記載されている。用語「アミノ保護基」は、
一般的には、Ｂｏｃ、アセチル、ベンゾイル、ＦｍｏｃおよびＣｂｚ基ならびに
当該分野で公知のそれらの誘導体をいう。保護および脱保護、ならびにアミノ保
護基の別の残基での置換は当該分野において周知である。

【００４５】 式Ｉの化合物の酸付加塩を、標準的方法にて、適当な溶媒中で、親化合物およ
び、塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸
、マレイン酸、コハク酸またはメタンスルホン酸などの過剰の酸から調製する。
ある種の化合物は内部塩または対イオンを形成するが、それらは許容される。適
当なカチオンを含む水酸化物、炭酸塩またはアルコキシドなどの過剰なアルカリ
性試薬で、または適当な有機アミンで親化合物を処理することにより、カチオン
性の塩を調製する。Ｌｉ⁺、Ｎａ⁺、Ｋ⁺、Ｃａ⁺⁺、Ｍｇ⁺⁺およびＮＨ₄ ⁺などのカ チオンは、医薬上許容される塩中に存在するカチオンの特別な例である。ハライ
ド、スルフェート、ホスフェート、アルカノエート(アセテートおよびトリフル オロアセテートなど)、ベンゾエート、およびスルホネート(メシレートなど)は 医薬上許容される塩中に存在するアニオンの例である。

【００４６】 また本発明は、式Ｉの化合物および医薬上許容される担体、希釈剤または賦形
剤を含む医薬組成物を提供する。したがって、式Ｉの化合物を薬剤の製造に用い
てもよい。上記のごとく調製された式Ｉの化合物の医薬組成物を非経口投与用の
溶液または凍結乾燥粉末として処方してもよい。使用前に適当な希釈剤または他
の医薬上許容される担体を加えることにより、粉末を復元してもよい。液体処方
は緩衝化された等張水溶液であってもよい。適当な希釈剤の例は、通常の等張生
理食塩水溶液、標準水中５％デキストロースまたは緩衝化酢酸ナトリウムもしく
はアンモニウムであってもよい。かかる処方は、特に非経口投与に適するが、経
口投与にも使用でき、あるいは計量目盛りつき吸入器または吸入用霧化器に入れ
てもよい。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アラビア
ゴム、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸
ナトリウムのごとき賦形剤を添加することが望ましい。

【００４７】 別法として、これらの化合物をカプセル封入、錠剤化してもよく、あるいは経
口投与用にエマルジョンもしくはシロップとしてもよい。医薬上許容される固体
または液体担体を添加して組成物を増量または安定化させてもよく、あるいは組
成物の調製を容易にしてもよい。固体担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カル
シウム二水和物、白陶土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タル
ク、ペクチン、アラビアゴム、寒天またはゼラチンを包含する。液体担体は、シ
ロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、塩水および水を包含する。担体は、モノス
テアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリルのみ、あるいはそれらとロウ
との混合物のごとき除放性物質を含有していてもよい。固体担体量は種々である
が、好ましくは、投与単位あたり約２０ｍｇないし約１ｇの間である。錠剤形態
が望まれる場合には粉砕、混合、顆粒化、および打錠；あるいは硬ゼラチンカプ
セル形態が望まれる場合には粉砕、混合、および充填を包含する慣用的な製薬手
法に従って医薬調合品を製造する。液体担体を用いる場合、調合品はシロップ、
エリキシル、エマルジョンまたは水性もしくは非水性懸濁液の形態であろう。か
かる液体処方を直接経口投与してもよく、あるいは軟ゼラチンカプセル中に充填
してもよい。 直腸投与には、本発明化合物をカカオ脂、グリセリン、ゼラチンまたはポリエ
チレングリコールのごとき賦形剤と混合してもよく、坐薬に成型してもよい。

【００４８】 本発明の有用性 本発明のチアゾールグアニジンは、低い基質濃度にて比較的弱い阻害剤である
、非競合的阻害剤である。より具体的には、我々はこれらの化合物が２つの阻害
形式を示すことを見出した： １)基質のＫｍレベルが高い場合に基質(すなわち、酵素が分解するか、さもなけ
ればそこで作用するタンパク質)の存在下で誘導される基質阻害、本発明の化合 物は基質が酵素の阻害剤となることを誘発する。すなわち、本発明のチアゾール
グアニジンは、すでに基質と結合している酵素に排他的に結合するようである；
および ２)本発明のチアゾールグアニジンおよび活性部位に指向し、メカニズムに基づ く阻害剤である典型的なプロテアーゼ阻害剤(特に、1997年5月９日に国際公開さ
れた、WO97/16433に記載されるようなカテプシンＫ)による二重阻害研究により 、本発明の化合物およびメカニズムに基づく阻害剤は、両方が同時に結合し、互
いに他の結合を増強できることが示されている。

【００４９】 式Ｉの化合物は、プロテアーゼ阻害剤としてとして有用である、式Ｉの化合物
は、詳細にはシステインおよびセリンプロテアーゼの阻害剤として、より詳細に
はシステインプロテアーゼの阻害剤として、さらにより詳細にはパパインスーパ
ーファミリーのシステインプロテアーゼの阻害剤として、さらにより詳細にはカ
テプシンファミリーのシステインプロテアーゼの阻害剤として、最も詳細には、
カテプシンＫの阻害剤として有用である。また本発明は、該化合物の有用な組成
物および処方を提供し、それらには該化合物の医薬組成物および処方が包含され
る。

【００５０】 本発明化合物は、ニューモシスチス・カリニ(pneumocystis carinii)、トリパ
ノソーマ・クルジ(trypsanoma cruzi)、トリパノソーマ・ブルセイ(trypsanoma
brucei)、およびクリチジア・フシクラタ(Crithiジa fusiculata)による感染； ならびに、住血吸虫症、マラリア、腫瘍転移、異染性白質萎縮症、筋ジストロフ
ィー、筋萎縮症を包含するシステインプロテアーゼが関与する疾患；そして特に
骨粗鬆症、歯肉炎および歯周病を包含する歯肉の疾患、関節炎、より詳細には骨
関節炎およびリューマチ性関節炎、パジェット病；悪性の高カルシウム血症、お
よび代謝性の骨の疾患を包含する、カテプシンＫが関与している疾患、最も詳細
には、過剰な骨または軟骨の損失が関与している疾患の治療に有用である。 典型的には、転移性新生物細胞も、周囲のマトリックスを分解する高レベルの
蛋白分解酵素を発現するものであり、本発明化合物を用いてある種の腫瘍および
転移性新生物を治療してもよい。

【００５１】 また本発明は、疾患を発生させるレベルのプロテアーゼ、詳細にはシステイン
およびセリンプロテアーゼ、より詳細にはシステインプロテアーゼ、さらにより
詳細にはパパインスーパーファミリーのシステインプロテアーゼ、さらにより詳
細にはカテプシンファミリーのシステインプロテアーゼにより引き起こされる疾
患の治療方法を提供する。これらの方法は、治療を必要とする動物、詳細には哺
乳動物、最も詳細にはヒトに有効量の本発明化合物または本発明化合物の組み合
わせを、所望により、有効量の、酵素阻害特性が本発明の化合物の存在により増
加可能である、活性部位指向性の、メカニズムに基づく阻害剤とともに投与する
ことを含む。かかる阻害剤の例は、１９９７年５月９日に国際公開された、ＷＯ
９７／１６４３３開示される。特に、本発明は、疾患を発生させるレベルのカテ
プシンＫにより引き起こされる疾患の治療方法を提供し、該方法は、治療を必要
とする動物、詳細には哺乳動物、最も詳細にはヒトに有効量の本発明化合物また
は本発明化合物の組み合わせを、所望により、有効量の、酵素阻害特性が本発明
の化合物の存在により増加可能である、活性部位指向性の、メカニズムに基づく
阻害剤(例えば、１９９７年５月９日に国際公開された、ＷＯ９７／１６４３３ 開示されるような)とともに投与することを含む。当業者は、「有効量」なる用 語が、該疾患を発生させるレベルの標的酵素、例えばカテプシンＫにより引き起
こされる疾患の臨床的に望ましくない症状(例えば、骨粗鬆症におけるもろく弱 い骨)を改善または治療するのに十分な本発明化合物または本発明化合物の組み 合わせの量を意味することを理解するであろう。詳細には、本発明は、ニューモ
シスチス・カリニ、トリパノソーマ・クルジ、トリパノソーマ・ブルセイ、およ
びクリチジア・フシクラタによる感染；ならびに、住血吸虫症、マラリア、腫瘍
転移、異染性白質萎縮症、筋ジストロフィー、筋萎縮症を包含するシステインプ
ロテアーゼが関与する疾患；そして特にカテプシンＫが関与している疾患、最も
詳細には、骨粗鬆症を包含する骨または軟骨の過剰な損失の疾患、歯肉炎および
歯周病を包含する歯肉の疾患、関節炎、より特別には骨関節炎およびリューマチ
性関節炎、パジェット病、悪性の高カルシウム血症、および代謝性の骨の疾患を
包含する疾患の治療方法を提供する。

【００５２】 さらに本発明は、骨粗鬆症の治療方法または骨の損失の抑制方法を提供し、該
方法は、有効量の式Ｉの化合物または化合物の組み合わせを、所望により、有効
量の、本発明共阻害剤の存在により増強可能なカテプシンＫの阻害剤(例えば、 １９９７年５月９日に国際公開された、ＷＯ９７／１６４３３開示されるような
)とともに、単独または他の骨吸収阻害剤、ビスホスホネート類(すなわち、アレ
ンドロネート)、ホルモン置換治療剤、抗エストロゲン、またはカルシトニンな どを所望により組み合わせて、該治療を必要とする動物、詳細には哺乳動物、最
も詳細にはヒトに投与することを含む。さらに、所望により、有効量の、本発明
共阻害剤の存在により増強可能なカテプシンＫの阻害剤(例えば、１９９７年５ 月９日に国際公開された、ＷＯ９７／１６４３３開示されるような)とともに、 本発明化合物および骨形態形成蛋白イプロフラボンなどの同化剤を用いて骨損失
を予防し、または骨量を増加させてもよい。

【００５３】 急性治療用には、式Ｉの化合物を、所望により同時にまたは連続的に、有効量
の、本発明共阻害剤の存在により増強可能なプロテアーゼ阻害剤(例えば、１９ ９７年５月９日に国際公開された、ＷＯ９７／１６４３３開示されるような)と ともに、非経口投与することが好ましい。水または通常の塩水中５％デキストロ
ース中または適当な賦形剤を伴った同様の処方中の本発明化合物の静脈注入が最
も効果的であるが、筋肉内ボーラス注入もまた有用である。典型的には、非経口
投与量は、約０.０１ないし約１００ｍｇ／ｋｇ；好ましくは０.１ないし２０ｍ
ｇ／ｋｇの間であり、血漿中の薬剤濃度をカテプシンＫ阻害に効果的な濃度に維
持するようにする。１日の全用量が約０.４ないし約４００ｍｇ／ｋｇ／日とな るレベルで１日１ないし４回化合物を投与する。治療上有効な本発明化合物の正
確な量、およびかかる化合物がもっともよく投与される経路は、治療効果を有す
るのに必要とされる薬剤濃度と血中レベルとを比較することにより当業者により
容易に決定される。

【００５４】 薬剤濃度が骨吸収を、阻害または本明細書記載の他の治療指針を達成するに十
分であるように本発明化合物を、所望により同時にまたは連続的に、有効量の、
本発明共阻害剤の存在により増強可能なプロテアーゼ阻害剤(例えば、１９９７ 年５月９日に国際公開された、ＷＯ９７／１６４３３開示されるような)ととも に、患者に経口投与してもよい。典型的には、本発明化合物を含有する医薬組成
物を、患者の状態に適合した方法で、約０.１ないし約５０ｍｇ／ｋｇの間の経 口投与量として投与する。好ましくは、経口投与量は、約０.５ないし約２０ｍ ｇ／ｋｇであろう。 本発明化合物を本発明により投与する場合、許容されない毒物学的効果は考え
られない。

【００５５】 生物学的アッセイ 数種の生物学的アッセイのうちの１つにおいて本発明化合物を試験して、所定
の薬理学的効果を得るのに必要な化合物濃度を決定してももよい。

【００５６】 カテプシンＫの蛋白分解触媒活性の測定 ヒト組み換え酵素を用いて、カテプシンＫに関するすべてのアッセイを行った
。動力学的定数を決定するための標準的アッセイ条件には蛍光発生ペプチド基質
、典型的には、Ｃｂｚ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣを用い、２０ｍＭシステインお
よび５ｍＭ ＥＤＴＡを含有するｐＨ５.５の１００ｍＭ酢酸ナトリウム中で測定
した。ＤＭＳＯ中１０ｍＭまたは２０ｍＭの濃度でストック基質溶液を調製し、
アッセイにおける最終基質濃度を２０μＭとした。すべてのアッセイ系は１０％
ＤＭＳＯを含んでいた。別の実験により、このレベルのＤＭＳＯは酵素活性また
は反応定数に何ら影響しないことがわかった。すべてのアッセイを周囲温度で行
なった。Perceptive Biosystems Cytofluor II蛍光プレートリーダーを用いて、
生成物の蛍光(３６０ｎｍで励起；エミッション４６０ｎｍ)をモニターした。２
０ないし３０分間生成進行曲線を得て、ついで、ＡＭＣ生成物を得た。

【００５７】 阻害の研究 進行曲線法を用いて阻害剤である可能性のある物質を評価した。種々の濃度の
試験化合物の存在下でアッセイを行なった。阻害剤および基質の緩衝化溶液に酵
素を添加することにより反応を開始した。阻害剤存在下の進行曲線の外観に応じ
て２種の手順のうちの一方によりデータ分析を行なった。進行曲線が直線である
化合物については、等式１(Brandt et al., Biochemitsry, 1989, 28, 140)： ｖ＝Ｖ_mＡ／[Ｋ_a(１＋Ｉ／Ｋ_i，_app)＋Ａ] (１) [式中、ｖは反応速度、Ｖ_mは最大反応速度、Ａは基質濃度、Ｋ_aはミカエリス定 数、Ｉは阻害剤濃度] を用いて見かけの阻害定数(Ｋ_i，_app)を計算した。

【００５８】 進行曲線が時間依存的阻害の特徴を有する下降曲線を示す化合物については、
個々のセットからのデータを分析して、等式２： [ＡＭＣ]＝ｖ_ssｔ＋(ｖ０−ｖ_ss)[１−ｅｘｐ(−ｋ_obsｔ)]／ｋ_obs (２) [式中、[ＡＭＣ]は時間ｔの間に生じた生成物濃度、ｖ０は反応初速度、ｖ_ssは 最終定常状態での速度] によりｋ_obsを得た。ついで、ｋ_obsに関する値を阻害剤濃度の直線的関数として
分析して、時間依存的阻害を説明する見かけの２次反応速度定数(ｋ_obs／阻害剤
濃度またはｋ_obs／[Ｉ])を得た。この動力学的処理についての完全な議論は充分
に説明されている(Morrison et al., Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol.,
1988, 61, 201)。

【００５９】 ヒト・破骨細胞吸収アッセイ 破骨細胞腫由来細胞懸濁液の一部を液体窒素貯蔵物から取り、３７℃ですばや
く暖め、遠心分離(４℃にて１０００ｒｐｍ、５分)によりＲＰＭＩ−１６４０培
地で１回洗浄した。培地を吸引し、ＲＰＭＩ−１６４０培地中１：３希釈された
ネズミ・抗−ＨＬＡ−ＤＲ抗体でに置換し、氷上で３０分インキュベーションし
た。細胞懸濁液を頻繁に混合した。 遠心分離(４℃にて１０００ｒｐｍ、５分)により冷ＲＰＭＩ−１６４０で２回
細胞を洗浄し、ついで、滅菌した１５ｍｌ遠心チューブに移した。改良型Neubau
er計数チャンバ中で単核細胞を計数した。 ヤギ・抗−マウスＩｇＧで被覆した十分量の磁気ビーズ(５個／単核細胞)をス
トック瓶から取り、５ｍｌの新鮮培地中に入れた(このことにより毒性アジド保 存料が洗浄された)。ビーズを磁石上に固定することにより培地を除去し、新鮮 培地と交換する。 ビーズを細胞と混合し、懸濁液を氷上で３０分間インキュベーションした。懸
濁液を頻繁に混合した。ビーズ被覆細胞を磁石上に固定し、残りの細胞(破骨細 胞リッチなフラクション)を滅菌した５０ｍｌ遠心チューブ中にデカンテーショ ンした。ビーズ被覆細胞に新鮮培地を添加して、トラップされている破骨細胞を
除去した。この洗浄プロセスを１０回繰り返した。ビーズ被覆細胞を捨てた。

【００６０】 大きな孔を有する使い捨てのプラスチック製パスツールピペットを用いてチャ
ンバに試料ごと入れて、計数チャンバ中で破骨細胞を計数した。遠心分離により
細胞をペレット化し、１０％ウシ胎仔血清および１.７ｇ／リットルの重炭酸ナ トリウムを補足したＥＭＥＭ培地中で破骨細胞密度を１.５ｘ１０⁴／ｍｌとした
。細胞懸濁液を３ｍｌ(１処理あたり)分取し、１５ｍｌ遠心チューブ中にデカン
テーションした。これらの細胞を遠心分離によりペレット化した。各チューブに
適当な処理液３ｍｌを添加した(ＥＭＥＭ培地中５０μＭに希釈)。さらに、適当
な担体対照、陽性対照(１００μＭ／ｍｌに希釈した８７ＭＥＭ１)およびイソタ
イプ対照(１００μＭ／ｍｌに希釈したＩｇＧ２ａ)を付けた。チューブを３７℃
で３０分間インキュベーションした。 ４８ウェル中プレート中の滅菌象牙質切片上に０.５ｍｌの細胞を撒き、３７ ℃で２時間インキュベーションした。各処理物を４系でスクリーニングした。温
ＰＢＳを６回交換(６ウェルプレート中１０ｍｌ／ウェル)することにより切片を
洗浄し、ついで、新鮮処理物または対照中に置き、３７℃で４８時間インキュベ
ーションした。ついで、リン酸塩緩衝化塩水で切片を洗浄し、２％グルタルアル
デヒド(０.２Ｍカコジル酸ナトリウム中)で固定し、ついで、水洗し、緩衝液中 ３７℃で５分インキュベーションした。ついで、切片を冷水で洗浄し、冷酢酸緩
衝液／ファストレッドガーネット(fast red garnet)中４℃で５分インキュベー ションした。過剰の緩衝液を吸引し、切片を風乾し、ついで、水洗した。 明視野顕微鏡によりＴＲＡＰ陽性破骨細胞を計数し、ついで、超音波処理によ
り象牙質表面から除去した。Nikon/Lasertec ILM21W共焦点顕微鏡を用いてピッ ト体積を測定した。

【００６１】 一般的方法 Bruker AM 250またはBruker AC 400スペクトル計を用いて核磁気共鳴スペクト
ルをそれぞれ２５０または４００ＭＨｚのいずれかにおいて記録した。ＣＤＣｌ ₃ はジューテリオクロロホルムであり、ＤＭＳＯ−ｄ₆はヘキサジューテリオジメ
チルスルホキシドであり、ＣＤ₃ＯＤはテトラジューテリオメタノールである。 内部標準テトラメチルシランから低磁場側へ１００万(ｄ)あたりの割合で化学シ
フトを表す。ＮＭＲデータの略号は次のとおりである：ｓ＝シングレット、ｄ＝
ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｍ＝マルチプレット、ｄｄ＝
ダブレットのダブレット、ｄｔ＝トリプレットのダブレット、ａｐｐ＝見かけ、
ｂｒ＝広い。Ｊは、測定されたＮＭＲ結合定数をヘルツ単位で示す。連続波赤外
(ＩＲ)スペクトルをPerkin-Elmer 683赤外スペクトル計で記録し、フーリエ変換
赤外(ＦＴＩＲ)スペクトルをNicolet Impact 400D赤外スペクトル計で記録した 。ＩＲおよびＦＴＩＲスペクトルをトランスミッションモードで記録し、バンド
位置を波数の逆数(ｃｍ^-1)で示す。高速原子衝撃(ＦＡＢ)または電子スプレイ( ＥＳ)イオン化法を用い、VG 70 FE、PE Syx API III、またはVG ZAB HF装置によ
り質量スペクトルを得た。Perkin-Elmer 240C元素分析装置を用いて元素分析を 行なった。融点をThomas-Hoover融点測定装置により測定し、修正していない。 すべての温度はセ氏で表す。 AnaltechシリカゲルGFおよびE. Merckシリカゲル60F-254薄層プレートを薄層 クロマトグラフィーに使用した。フラッシュクロマトグラフィーおよび重力クロ
マトグラフィーの両方をE. Merck Kieselgel 60(２３０−４００メッシュ)シリ カゲルを用いて行なった。 指示する場合は、ある種の材料をAldrich Chemical Co., Milwaukee, Wiscons
in、Chemical Dynamics Corp., South Plainfield, New JerseyおよびAdvanced
Chemtech, Louisville, Kentuckyから購入した。

【００６２】 実施例 下記の合成の実施例において、温度はセ氏(℃)である。特記しない限り、すべ
ての出発物質は市販ソースから入手した。さらに工夫することなしに、当該者は
前記載に従って、本発明をその最大の範囲で利用することができる。これらの実
施例は本発明を説明するものであり、その範囲を限定するものではない。発明者
に留保される事項については、上記する請求の範囲にて言及するとおりである。

【００６３】 実施例１ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブ トキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン １ａ．３−(４−クロロブトキシ)アセトフェノン メタノール(２５ｍＬ)中の３−ヒドロキシアセトフェノン(５．０７ｇ，３７ ｍｍｏｌ)および１−ブロモ−４−クロロブタン(１２．０ｍＬ，１０４ｍｍｏｌ
)の溶液を、室温にて水酸化カリウム(６．３ｇ，１１２ｍｍｏｌ)と少量ずつ反 応させた。濃縮した白色懸濁液を２４時間還流しながら攪拌し、冷却した。反応
混合物をセライトを通して濾過し、エーテルでよく洗浄し、濾液を蒸発させた。
残渣をエーテル中に溶解し、水で２回、塩水で１回洗浄し、乾燥させた(硫酸マ グネシウム)。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、１：９酢酸エチル ：ヘキサンで溶出し、無色油として３−(４−クロロブトキシ)アセトフェノン( ７．２９ｇ，８７％)を得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ)：δ７．５４(ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１ Ｈ)，７．４７(ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ)，７．３７(ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１
Ｈ)，７．１０(ｄｄ，Ｊ＝２．３，７．８Ｈｚ，１Ｈ)，４．０５(ｔ，Ｊ＝５．
６Ｈｚ，２Ｈ)，３．６３(ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ)，２．６０(ｓ，３Ｈ)， １．９９(ｍ，４Ｈ)ｐｐｍ． また、副産物として３−(４−メトキシブトキシ)アセトフェノン(０．６０ｇ ，８％)を無色油として単離した。¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ)：δ ７．５２(ｄｄ，Ｊ＝０．９，６．８Ｈｚ，１Ｈ)７．４７(ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ ，１Ｈ)，７．３６(ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ)，７．１０(ｄｄ，Ｊ＝２．２，
７．９Ｈｚ)，４．０４(ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ)，３．４５(ｔ，Ｊ＝６．４
Ｈｚ，２Ｈ)，３．３５(ｓ，３Ｈ)，２．５９(ｓ，３Ｈ)，１．８８(ｍ，４Ｈ) ｐｐｍ．

【００６４】 １ｂ．Ｎ−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝
グアニジン ３−(４−クロロブトキシ)アセトフェノン(１．０ｇ，４．４１ｍｍｏｌ)のジ
クロロメタン(１５ｍＬ)中溶液を、室温にて、５分にわたって臭素(０．２２５ ｍＬ，４．４１ｍｍｏｌ)のジクロロメタン(５ｍＬ)中溶液を滴下して反応させ 、１５分間攪拌し、蒸発させた。残渣をエタノール(２５ｍＬ)中に溶解し、イミ
ノチオビウレット(０．５２ｇ，４．４１ｍｍｏｌ)と反応させ、２４時間還流し
、冷却し、蒸発させた。．フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、５：９
５メタノール：ジクロロメタンで溶出させ、Ｎ−｛４−[３−(４−クロロブトキ
シ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(１．１５ｇ，８０％)を黄褐色
色固体として得た。ｍ．ｐ．１２６−１２９℃．

【００６５】 １ｃ．Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ) フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グア
ニジン(１．１５ｇ，４．４７ｍｍｏｌ)、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート(１． ６８ｇ，９．８４ｍｍｏｌ)および４−(Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジンの少 量の結晶のジクロロメタン(２０ｍＬ)中の混合物を、室温にてアルゴン下、３日
間攪拌した。反応物を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、
１５：８５酢酸エチル：ヘキサンで溶出し、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’
−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジ
ン(０．８５ｇ，４５％)を白色泡として得た。ｍ．ｐ．５３−５６℃。

【００６６】 １ｄ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ク
ロロブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．４５ｇ，１．０５ｍｍｏｌ)およ び６０％水素化ナトリウム／鉱油懸濁液(０．０４６ｇ，１．１６ｍｍｏｌ)のジ
メチルホルムアミド(５ｍＬ)中混合物を室温にてアルゴン下、０．５時間攪拌し
、ついでベンジルブロマイド(０．１４ｍＬ，１．１６ｍｍｏｌ)およびヨウ化ナ
トリウム(０．０１５ｇ，１０％)と反応させ、２４時間攪拌した．反応物を水で
希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄
し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー
により精製し、１：９酢酸エチル：ヘキサンで溶出し、Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−
ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]チアゾ
ール−２−イル｝グアニジン(０．２４ｇ，４３％)を白色ワックスとして得た。
ｍ．ｐ．７１−７３℃。

【００６７】 １ｅ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)ア ミノブトキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロ
ブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１８ｇ，０．３５ ｍｍｏｌ)、Ｎ−メチルアニリン(０．０７５ｍＬ，０．７０ｍｍｏｌ)およびヨ ウ化ナトリウム(０．０５ｇ，０．３５ｍｍｏｌ)のジメチルホルムアミド中溶液
を１３０−１３５℃にて４日間攪拌し、冷却した。反応物を水で希釈し、酢酸エ
チルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ( 硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し 、３５：６５酢酸エチル：ヘキサンで溶出し、標記化合物(０．０６０ｇ，３６ ％)を淡琥珀ガラスとして得た。ｍ．ｐ．４１−４３℃。 計算値Ｃ₂₈Ｈ₃₁Ｎ₅ＯＳ．０．３Ｈ₂Ｏ：Ｃ６８．４９，Ｈ６．４９，Ｎ１４．２
６：実測値：Ｃ６８．４４，Ｈ６．３３，Ｎ１３．９５．

【００６８】 上記した中間体を適当な中間体に置き換えることを以外は、実施例１における
のと同様な方法を行って、以下の化合物を実施例２〜７に示すように合成した：

【００６９】 実施例２ Ｎ−メチル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブト キシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン 計算値Ｃ₂₂Ｈ₂₇Ｎ₅ＯＳ：Ｃ６４．５２，Ｈ６．６５，Ｎ１７．１０：実測値： Ｃ６４．４４，Ｈ６．５９，Ｎ１６．６９，ｍ．ｐ．４４−４８℃．

【００７０】 実施例３ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノブトキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン 計算値Ｃ₂₈Ｈ₂₉Ｃｌ₂Ｎ₅ＯＳ：Ｃ６０．６５，Ｈ５．２７，Ｎ１２．６３：実測
値：Ｃ６０．７８，Ｈ５．４５，Ｎ１２．３２．，ｍ．ｐ．４３−４７℃．

【００７１】 実施例４ Ｎ−(３，４−ジクロロベンジル)−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジ クロロフェニル)−Ｎ−メチル)アミノブトキシ]フェニル｝チアゾール−２−イ ル｝グアニジン マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(６２１．９，６２４．２，６２４．３，６２ ６．２)，ｍ．ｐ．４１−４９℃．

【００７２】 実施例５ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(５４０．２，５４２．１)，ｍ．ｐ．５６−６
０℃．

【００７３】 実施例６ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(５４０．２，５４２．２)，¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤ
Ｃｌ₃，４００ＭＨｚ)：δ７．５６(ｂｒ，２Ｈ)，７．４１(ｍ，６Ｈ)，７．１
９(ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ)，６．８５(ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ)，６．７
６(ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ)，６．７４(ｓ，１Ｈ)，６．５３(ｄｄ，Ｊ＝２ ．８，９．１Ｈｚ，１Ｈ)，４．５２(ｓ，２Ｈ)，３．９９(ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ
，２Ｈ)，３．５３(ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ)，２．９２(ｓ，３Ｈ)，２．０ ４(ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ)ｐｐｍ．

【００７４】 実施例７ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノプ ロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン 計算値Ｃ₂₇Ｈ₂₉Ｎ₅ＯＳ．０．２Ｈ₂Ｏ：Ｃ６８．２４，Ｈ６．２４，Ｎ１４．７
４：実測値：Ｃ６８．２０，Ｈ６．１８，Ｎ１４．５２；ｍ．ｐ．１０１−１０
２℃．

【００７５】 実施例８ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル−Ｎ −メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(３−クロロ
プロポキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．２５ｇ，０．４ ８ｍｍｏｌ)，[実施例１ｄからの中間体と類似の方法で調製]、Ｎ−３，４−ジ クロロフェニル−Ｎ−メチルアミン(０．１７ｇ，０．９６ｍｍｏｌ)およびヨウ
化ナトリウム(０．０７２ｇ，０．４８ｍｍｏｌ)のジメチルホルムアミド中溶液
を１３０〜１３５℃にて４日間加熱し、冷却した。反応物を水で希釈し、酢酸エ
チルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ( 硫酸マグネシウム)、蒸発させた。はじめに３５：６５酢酸エチル：ヘキサン、 ついで、２：８アセトン：ヘキサンで溶出させ、２回のフラッシュクロマトグラ
フィーにより精製し、標記化合物およびＮ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[３ −クロロプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．０４４
ｇ)の混合物を得た。アルゴン下、反応チューブ中のメタノール(１ｍＬ)中のこ の混合物の溶液に、−７８℃にて、濃縮アンモニアを５０滴加え、チューブを密
封し、４５〜５０℃にて５日間加熱した。反応物を冷却し、蒸発させた。フラッ
シュクロマトグラフィーにより精製し、３５：６５酢酸エチル：ヘキサンで溶出
させ、標記化合物(０．０２７ｇ，１０％)を淡褐色ガラスとして得た。 マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(５５４．２，５５６．２)．¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤ
Ｃｌ₃，４００ＭＨｚ)：δ７．２−７．４(ｍ，９Ｈ)，７．１９(ｄ，Ｊ＝８． ９Ｈｚ，１Ｈ)，６．８２(ｓ，１Ｈ)，６．７９(ｄｄ，Ｊ＝２．３，９．１Ｈｚ
，１Ｈ)，６．７１(ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ)，６．５０(ｄｄ，Ｊ＝３．０，
９．１Ｈｚ，１Ｈ)，４．４８(ｓ，２Ｈ)，３．９７(ｂｒｓ，２Ｈ)，３．３５(
ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ)，２．９１(ｓ，３Ｈ)，１．７７(ｍ，４Ｈ)ｐｐｍ ．

【００７６】 上記した中間体を適当な中間体に置き換えることを以外は、実施例８における
のと同様な方法を行って、以下の化合物を調製した：

【００７７】 実施例９ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノブトキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(４７２．２)，ｍ．ｐ．４０−４５℃

【００７８】 実施例１０ Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブトキシ]フェニル
｝チアゾール−２−イル｝グアニジン １０ａ．Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨードブトキシ
)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１００ｇ，０．２４ｍｍｏｌ)お よびヨウ化ナトリウム(０．０３９ｇ，０．２５ｍｍｏｌ)のアセトン(５ｍＬ)中
混合物をアルゴン下４８時間還流した。懸濁液を冷却し、濾過し、蒸発させ、Ｎ
−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]
チアゾール−２−イル｝グアニジンおよびＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−
｛４−[３−(４−ヨードブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン
(０．１２ｇ)の約１：１混合物を得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ)：δ９．９(ｂｒ，１Ｈ)，８．８(ｂｒ ，１Ｈ)，７．３−７．５(ｍ，３Ｈ)，６．９５(ｍ，１Ｈ)，６．８５(ｍ，１Ｈ
)，４．０５(ｍ，２Ｈ)，３．６３(ｔ，０．５５Ｈ，ＣＨ₂Ｃｌ)，３．２６(ｔ ，０．４５Ｈ，ＣＨ₂Ｉ)，１．９−２．１(ｍ，４Ｈ)，１．５−１．６(ｂｒ， ９Ｈ)ｐｐｍ．

【００７９】 １０ｂ．Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブトキシ]
フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン ジメチルホルムアミド(３ｍＬ)中のＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４
−[３−(４−クロロブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジンおよ
びＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨードブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１２ｇ)の約１：１混合物ならび にＮ−メチルアニリン(０．０５５ｍＬ，０．４８ｍｍｏｌ)を１３０〜１３５℃
にて３日間加熱した。反応物を冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した
。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、
蒸発させた。はじめに６：４酢酸エチル：ヘキサン、ついで３５：６３アセトン
：ヘキサンで溶出する２回のフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標記
化合物(０．０３１ｇ，３３％)を無色ガラスとして得た。ｍ．ｐ．１１１−１１
３℃．マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ３９６．１．

【００８０】 実施例１１ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−メトキシブトキシ)フェニル]チアゾール
−２−イル｝グアニジン １１ａ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
メトキシブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン 実施例１ａにおいて副産物として得た３−(４−メトキシブトキシ)アセトフェ
ノンから開始して、実施例１において記載した方法に従って、Ｎ−ベンジル−Ｎ
−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−メトキシブトキシ)フェニ ル]チアゾール−２−イル｝グアニジンを調製した。ｍ．ｐ．７０−７１℃．

【００８１】 １１ｂ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−メトキシブトキシ)フェニル]チ
アゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−メトキ
シブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．０４５ｇ，０． ０８９ｍｍｏｌ)およびトリフルオロ酢酸(０．０３５ｍＬ，０．４５ｍｍｏｌ) のジクロロメタン(３ｍＬ)中溶液を、室温にてアルゴン下、７日間攪拌した。反
応物を水で希釈し、中和し(重炭酸ナトリウム)、５／９５メタノール／ジクロロ
メタンで３回抽出し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュク
ロマトグラフィーにより精製し、２：９８メタノール：ジクロロメタンで溶出さ
せ、標記化合物(０．０１７ｇ，４６％)を油として得た。 マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ４１１．２．¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ ＭＨｚ)：δ７．２−７．４(ｍ，８Ｈ)，６．８０(ｍ，２Ｈ)，４．４８(ｍ，２
Ｈ)，３．９８(ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ)，３．４３(ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２
Ｈ)，３．３４(ｓ，３Ｈ)，１．８５(ｍ，２Ｈ)，１．７６(ｍ，２Ｈ)ｐｐｍ．

【００８２】 実施例１２ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチル
アミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン １２ａ．３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノブトキシ)]アセトフェノン ３−(４−クロロブトキシ)アセトフェノン(２．９８ｇ，１３．２ｍｍｏｌ)( 実施例１ａにおいて調製)およびＮ−メチルアニリン(２．９０ｍＬ，２６．４ｍ
ｍｏｌ)のジメチルホルムアミド(３０ｍＬ)中溶液を１３０〜１４０℃にて３日 間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機相を
水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラ
ッシュクロマトグラフィーにより精製し、７：９３酢酸エチル：ヘキサンで溶出
させ、３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノブトキシ)]アセトフェノン( ３．０３ｇ，７７％)を無色油として得た。¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨ
ｚ)：δ７．５２(ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ)，７．４７(ｄｄ，Ｊ＝１．４，２
．３Ｈｚ，１Ｈ)，７．３６(ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ)，７．２３(ｔ，Ｊ＝７
．９Ｈｚ，２Ｈ)，７．０９(ｄｄ，Ｊ＝２．３，６．７Ｈｚ，１Ｈ)，６．７０(
ｍ，２Ｈ)，４．０３(ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ)，３．４０(ｔ，Ｊ＝８．１Ｈ
ｚ，２Ｈ)，２．９５(ｓ，３Ｈ)，２．５９(ｓ，３Ｈ)，１．８１(ｍ，４Ｈ)ｐ ｐｍ．

【００８３】 １２ｂ．Ｎ−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチルアミノブ
トキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン ３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノブトキシ)]アセトフェノン(３． ０２ｇ，１０．２ｍｍｏｌ)のジクロロメタン(３５ｍＬ)中溶液を室温にて１０ 分にわたり臭素(０．５２５ｍＬ，１０．２ｍｍｏｌ)のジクロロメタン(２０ｍ Ｌ)中溶液を滴下して反応させ、ついで２０分間攪拌し、蒸発させた。残渣を無 水エタノール(５０ｍＬ)中に溶解し、イミノチオビウレット(１．１８ｇ，１０ ．２ｍｍｏｌ)と反応させ、２４時間還流し、冷却し、蒸発させた。フラッシュ クロマトグラフィーにより精製し、５：９５メタノール：ジクロロメタンで溶出
させ、Ｎ−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチルアミノブト
キシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．４４ｇ，９％)を茶色固
体として得た。ｍ．ｐ．５２−５７℃．

【００８４】 １２ｃ．Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロ モフェニル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グ アニジン Ｎ−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ
)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．４４ｇ，０．９２ｍｍｏｌ)
、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート(０．２５ｇ，１．１５ｍｍｏｌ)および４−( Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジンの数個の結晶のジクロロメタン(５ｍＬ)中混 合物を室温にてアルゴン下２０時間攪拌した。反応物を蒸発させ、フラッシュク
ロマトグラフィーにより精製し、１５：８５酢酸エチル：ヘキサンで溶出させ、
Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニ ル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(
０．４８ｇ，９０％)を無色油として得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(５
７４．２，５７６．２)．

【００８５】 １２ｄ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−
２−イル｝グアニジン Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェ ニル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジ ン(０．３５ｇ，０．６５ｍｍｏｌ)および６０％水素化ナトリウム／鉱油懸濁液
(０．０２８ｇ，０．７２ｍｍｏｌ)のジメチルホルムアミド(５ｍＬ)中混合物を
室温にてアルゴン下、０．５時間攪拌し、ついで、ベンジルブロマイド(０．０ ８５ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ)と反応させ、３日間攪拌した。反応物を水で希釈 し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、
乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーによ
り精製し、７：９３酢酸エチル：ヘキサンで溶出させ、Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−
ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−
メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１３ ｇ，４３％)を無色油として得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(６６４．２
，６６６．２)．

【００８６】 １２ｅ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ
−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−( ４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチルアミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２− イル｝グアニジン(０．１５ｇ，０．２４ｍｍｏｌ)およびトリフルオロ酢酸(０ ．０９５ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ)のジクロロメタン(５ｍＬ)中溶液を、室温にて アルゴン下、７日間攪拌した。反応物を水で希釈し、中和し(重炭酸ナトリウム)
、５／９５メタノール／ジクロロメタンで３回抽出し、乾燥させ(硫酸マグネシ ウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、２：９８メ タノール：ジクロロメタンで溶出させ、標記化合物(０．０８１ｇ，６０％)をオ
フ−ホワイト色の固体として得た。ｍ．ｐ．４７−５０℃． 計算値Ｃ₂₈Ｈ₃₀ＢｒＮ₅ＯＳ：Ｃ５９．５７，Ｈ５．３６，Ｎ１２．４１：実測 値：Ｃ５９．４９，Ｈ５．３７，Ｎ１２．１８

【００８７】 実施例１３ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−モルホリノブトキシ)フェニル]チア
ゾール−２−イル｝グアニジン １３ａ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
ヨードブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロ
ブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．２６ｇ，０．５１ ｍｍｏｌ)およびヨウ化ナトリウム(０．２３ｇ，１．５３ｍｍｏｌ)のアセトン(
１０ｍＬ)中混合物を４８時間還流した。反応物を冷却し、濾過し、蒸発させ、 Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨードブ
トキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．２５ｇ，８２％)を黄
色油として得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ６０７．１．

【００８８】 １３ｂ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
Ｎ−モルホリノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨード
ブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．２５ｇ，０．４２ ｍｍｏｌ)およびモルホリン(０．１８５ｍＬ，２．１ｍｍｏｌ)のジメチルホル ムアミド(５ｍＬ)中溶液を１３５〜１４０℃にて１．５時間加熱した。反応物を
冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩
水で１回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。はじめに３：９７
メタノール：ジクロロメタンで、ついで３：１酢酸エチル：ヘキサンで溶出する
２回のフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブ
トキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−モルホリノブトキシ)フェニル]
チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１４ｇ，６０％)を無色油として得た。
マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ５６６．２．

【００８９】 １３ｃ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−モルホリノブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−モ
ルホリノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．１４ｇ， ０．２５ｍｍｏｌ)およびトリフルオロ酢酸(２ｍＬ)のジクロロメタン(２ｍＬ) 中溶液を、室温にて５時間攪拌した。反応物を水で希釈し、中和し(重炭酸ナト リウム)、５：９５メタノール：ジクロロメタンで３回抽出し、乾燥させ(硫酸マ
グネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、１： ９メタノール：ジクロロメタンで溶出させ、標記化合物(０．０７６ｇ，６５％)
を琥珀色ガラスとして得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ４６６．３． 計算値Ｃ₂₅Ｈ₃₁Ｎ₅Ｏ₂Ｓ．０．４Ｈ₂Ｏ：Ｃ６３．５１，Ｈ６．７８，Ｎ１４． ８１：実測値：Ｃ６３．５６，Ｈ６．６７，Ｎ１４．５１．

【００９０】 実施例１４ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ピペラジノブトキシ)フェニル]チア
ゾール−２−イル｝グアニジン １４ａ．Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨードブトキシ
)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−クロロブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(３．５２ｇ，８．２７ｍｍｏｌ)およ びヨウ化ナトリウム(３．７０ｇ，２４．８ｍｍｏｌ)のアセトン(７５ｍＬ)中混
合物を２４時間還流した。反応物を冷却し、セライトを通して濾過し、エーテル
で洗浄し、蒸発させ、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨ
ードブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(２．５２ｇ，５９ ％)を黄色油として得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ５１７．０．

【００９１】 １４ｂ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
ブロモブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ヨードブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(２．５２ｇ，４．８８ｍｍｏｌ)およ び６０％水素化ナトリウム／鉱油懸濁液(０．２１５ｇ，５．３７ｍｍｏｌ)のジ
メチルホルムアミド(３０ｍＬ)中混合物を、ベンジルブロマイド(０．６５ｍＬ ，５．３７ｍｍｏｌ)と反応させ、２時間攪拌した。反応物を水で希釈し、酢酸 エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ
(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製し
、５：９５酢酸エチル：ヘキサンで溶出させ、Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシ
カルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ブロモブトキシ)フェニル]チアゾール−２
−イル｝グアニジン(１．４０ｇ，５１％)をワックス状の白色固体として得た。
ｍ．ｐ．８０−８１℃．

【００９２】 １４ｃ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−
(Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルピペラジノブトキシ)フェニル]チアゾール−２− イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−ブロモ
ブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．２４ｇ，０．４２ ｍｍｏｌ)およびＮ−ｔ−ブトキシカルボニルピペラジン(０．３９ｇ，２．１ｍ
ｍｏｌ)のジメチルホルムアミド(５ｍＬ)中溶液を１３５〜１４０℃で３時間加 熱した。反応物を冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機
相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。
はじめに３：９７メタノール：ジクロロメタン、ついで３：１酢酸エチル：ヘキ
サンで溶出する２回のフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ−ベンジ
ル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ｔ−ブトキシカ
ルボニルピペラジノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン(０ ．２９ｇ，１００％)を無色油として得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：(Ｍ＋Ｈ−
２ＢＯＣ)４６５．４．

【００９３】 １４ｄ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ピペラジノブトキシ)フェ ニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ｔ
−ブトキシカルボニルピペラジノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グ
アニジン(０．２９ｇ，０．４２ｍｍｏｌ)およびトリフルオロ酢酸(１．５ｍＬ)
のジクロロメタン(１．５ｍＬ)中溶液を室温にて５時間攪拌した。反応物を水で
希釈し、中和し(重炭酸ナトリウム)、５／９５メタノール／ジクロロメタンで３
回抽出し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラ
フィーにより精製し、０．２：２：８水酸化アンモニウム：メタノール：ジクロ
ロメタンで溶出させ、標記化合物(０．１１ｇ，５８％)をワックス状の淡ピンク
色固体として得た。ｍ．ｐ．１３０−１３４℃． 計算値Ｃ₂₅Ｈ₃₂Ｎ₆ＯＳ．０．６５Ｈ₂Ｏ：Ｃ６３．０４，Ｈ７．０５，Ｎ１７．
６４：実測値：Ｃ６３．００，Ｈ６．７３，Ｎ１７．４５

【００９４】 実施例１５ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝ウレア １５ａ．２−アミノ−４−[４−(３−クロロプロポキシ)フェニル]チアゾール ４−(３−クロロプロポキシ)アセトフェノン(２．４３ｇ，１１．４ｍｍｏｌ)
(適当な試薬に置き換えて実施例１ａにおいて記載した方法にしたがって調製し た)のテトラヒドロフラン(４５ｍＬ)中懸濁液を、室温にてフェニルトリメチル アンモニウムトリブロマイド(４．２９ｇ，１１．４ｍｍｏｌ)を滴下して反応さ
せ、１時間攪拌し、濾過した。濾液を蒸発させた。残渣をエタノール(５０ｍＬ)
中に溶解し、チオウレア(０．８７ｇ，１１．４ｍｍｏｌ)と反応させ、５時間還
流し、室温にて２０時間攪拌し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーに
より精製し、５：９５メタノール：ジクロロメタンで溶出させ、２−アミノ−４
−[４−(３−クロロプロポキシ)フェニル]チアゾール(２．２７ｇ，７４％)を黄
色固体として得た。ｍ．ｐ．１３０−１３２℃．

【００９５】 １５ｂ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−クロロプロポキシ]フェニル｝
チアゾール−２−イル｝ウレア ２−アミノ−４−[４−(３−クロロプロポキシ)フェニル]チアゾール(０．１ ３ｇ，０．５ｍｍｏｌ)のトルエン(５ｍＬ)中懸濁液を、ベンジルイソシアネー ト(０．０７０ｍＬ，０．５５ｍｍｏｌ)と反応させ、８０〜８５℃℃にて５時間
、室温にて１８時間攪拌した。反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで３回抽出
し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー
により精製し、２：８酢酸エチル：ヘキサンで溶出させ、Ｎ−ベンジル−Ｎ’−
｛４−｛４−[３−クロロプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝ウレア
(０．１２ｇ，５９％)を白色固体として得た。ｍ．ｐ．１６０−１６１℃．

【００９６】 １５ｃ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−ヨードプロポキシ]フェニル｝
チアゾール−２−イル｝ウレア Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−クロロプロポキシ]フェニル｝チアゾ
ール−２−イル｝ウレア(０．１７ｇ，０．４３ｍｍｏｌ)およびヨウ化ナトリウ
ム(０．３２ｇ，２．１５ｍｍｏｌ)のアセトン(５ｍＬ)中混合物を２４時間還流
し、冷却し、蒸発させた。残渣をエーテルでトリチュレートし、濾過した。濾液
を蒸発させ、Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−ヨードプロポキシ]フェニ
ル｝チアゾール−２−イル｝ウレア(０．１７ｇ，８１％)を黄色油として得た。

【００９７】 １５ｄ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェ ニル)−Ｎ−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝ウレ ア Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−ヨードプロポキシ]フェニル｝チアゾ
ール−２−イル｝ウレア(０．１７ｇ，０．３５ｍｍｏｌ)およびＮ−(３，４− ジクロロフェニル)−Ｎ−メチルアミン(０．１３ｇ，０．７ｍｍｏｌ)のジメチ ルホルムアミド(３ｍＬ)中溶液(０．２４ｇ，０．４２ｍｍｏｌ)を１３５〜１４
０℃にて８時間、ついで室温にて１８時間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸
エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩水で１回洗浄し、乾燥させ
(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。はじめに３：７酢酸エチル：ヘキサン、つい
で２５：７５アセトン：ヘキサンで溶出する２回のフラッシュクロマトグラフィ
ーにより精製し、Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジク ロロフェニル)−Ｎ−メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イ ル｝ウレア(０．０１５ｇ，８％)をオフ−ホワイト色の泡として得た。ｍ．ｐ．
６５−６９℃．マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(５４１．２，５４３．２)

【００９８】 実施例１６ Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−カルボベンジルオキシ−Ｎ−(３ ，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル ｝グアニジン １６ａ．Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−｛４−[３ −[Ｎ−カルボベンジルオキシ−Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポ
キシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン Ｎ−カルボベンジルオキシ−３，４−ジクロロアニリン(０．０３９ｇ，０． １３ｍｍｏｌ)および６０％水素化ナトリウム／鉱油(０．００６ｇ，０．１５ｍ
ｍｏｌ)のジメチルホルムアミド(２ｍＬ)中溶液を１５分間攪拌した。ジメチル ホルムアミド(１ｍＬ)中のＮ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−
｛４−[４−(３−ヨードプロポキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジ
ン(０．０７７ｇ，０．１３ｍｍｏｌ)(適当な中間体に置き換えて、実施例６ａ において記載したように調製した)を加え、反応物を室温にて５時間攪拌した。 反応物を水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合した有機相を水で３回、塩
水で１回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。フラッシュクロマ
トグラフィーにより精製し、１５：８５酢酸エチル：ヘキサンで溶出させ、Ｎ−
ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−カルボ
ベンジルオキシ−Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フェニル
｝チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．０５３ｇ，５３％)を淡黄色膜として
得た。マススペクトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(７６０．４，７６２．３)．

【００９９】 １６ｂ．Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−カルボベンジルオキシ−
Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２
−イル｝グアニジン Ｎ−ベンジル−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−
カルボベンジルオキシ−Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フ
ェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン(０．０６３ｇ，０．０８３ｍｍｏ ｌ)のジクロロメタン(２ｍＬ)中溶液およびトリフルオロ酢酸(２ｍＬ)中溶液を 室温にてアルゴン下３時間攪拌した。反応物を重炭酸ナトリウム(水溶液)で中和
し、ジクロロメタンで３回抽出し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、蒸発させた。
フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、３５：６５酢酸エチル：ヘキサン
で溶出させ、標記化合物(０．０１３ｇ，２４％)を無色膜として得た。マススペ
クトル(ＥＳ＋)：Ｍ＋Ｈ(６６０．３，６６２．３)．¹Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃， ４００ＭＨｚ)：δ７．２−７．６(ｍ，１４Ｈ)，７．０９(ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ
，１Ｈ)，６．７５(ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ)，６．７０(ｓ，１Ｈ)，５．１ ３(ｓ，２Ｈ)，４．４９(ｓ，２Ｈ)，３．９８(ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ)，３
．８９(ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ)，２．０５(ｍ，２Ｈ)，２．０(ｂｒ，２Ｈ)
ｐｐｍ．

【０１００】 上記の詳細な説明および実施例は、いかにして本発明化合物を製造し、使用す
るのかを完全に開示する。しかしながら、本発明は、上記の特定の具体例に限定
されるものではなく、下記の請求の範囲内に属する本発明のすべての修飾を包含
する。本明細書中で引用した種々の雑誌、特許および他の刊行物に対する種々の
言及は当該分野の現状を含むものであり、それらを参照することにより本明細書
に完全に記載されているものとみなす。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 19/08 Ａ６１Ｐ 19/08 19/10 19/10 29/00 １０１ 29/00 １０１ 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ， ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，Ｋ Ｐ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ， ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，Ｙ Ｕ (72)発明者 ルネ・ルイーズ・デスジャーレイス アメリカ合衆国19087ペンシルベニア州セ ント・デイビッズ、コーンウォール・サー クル11番 (72)発明者 コーネリア・ジュッタ・フォースター アメリカ合衆国19020ペンシルベニア州ベ ンセーレム、ウィンザー・ドライブ2605番 Ｆターム(参考） 4C033 AD06 AD13 AD17 AD20 4C086 AA01 AA02 AA03 BC82 MA04 NA14 ZA67 ZA96 ZA97 ZB15 ZC20 【要約の続き】 化合物、かかる化合物の医薬組成物、骨粗鬆症を包含す る過剰な骨損失または軟骨もしくはマトリックスの分解 の疾病；歯肉炎および歯周炎を包含する歯肉の疾病；関 節炎、より詳細には、骨関節炎およびリューマチ性関節 炎；パジェット病；悪性腫瘍の高カルシウム血症；およ び代謝性骨疾病を治療する方法を提供する。

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 【化１】 [式中： Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃は、独立して，−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、１〜３個のフ
   ッ素により置換された−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＮ、−Ｃ
   (Ｏ)Ｒ₁、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ₁、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣ
   Ｎ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＯ₂、−ＮＲ₁ＳＯ₂Ｒ₃、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ) Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁(Ｃ＝ＮＲ₁)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｎ
   Ｒ₁Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)ＯＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣＮ)ＳＲ₃、−ＮＲ₁Ｃ(ＮＣ
   Ｎ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−ＮＲ₁Ｃ(Ｏ)Ｃ(Ｏ)Ｒ₂、−Ｃｌ
   、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＯＲ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＯＲ₃、−Ｏ(ＣＨ₂)₂ＯＨ、−Ｏ
   Ｃ(Ｏ)Ｒ₁、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)ＮＲ₁Ｒ₂、−Ｏ(ＣＨ₂)_qＣ(Ｏ)Ｒ₁、−ＳＲ₁、 −ＳＯ₂ＮＲ₁Ｒ₂または−Ｓ(Ｏ)_mＲ₃から選択され； ｍは、０、１または２であり； ｑは、１または２であり； ｎは、０〜２であり； Ｒ₁は、−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であるか；また は、Ｒ₁およびＲ₂がＮＲ₁Ｒ₂として一緒にある場合、これらは窒素原子と一緒に
   なって、炭素または炭素および１もしくはそれ以上のＯ、ＮまたはＳから選択さ
   れるさらなるヘテロ原子からなる５〜７員環を形成してもよく； Ｒ₂は、Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり； Ｒ₃は、−Ｃ_1-6アルキル、−ＣＦ₃または−ＣＨ₂ＣＦ₃であり； Ｘ₄は、−Ｈ、−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ_3-7シクロアルキル、−ＣＯＡｒ、−Ｃ ＯＯＣ_1-6アルキルまたはＣＯＯＡｒである] で示される式Ｉの化合物、またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒
   和物。
2. 【請求項２】 Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃が独立してＨまたはハロゲンであり； Ｘ₄がＣＨ₃またはＣｂｚであり； ｎ＝１または２である、 請求項１記載の化合物。
3. 【請求項３】 Ｘ、Ｘ₁、Ｘ₂およびＸ₃が独立してＨまたはＣｌであり； Ｘ₄がＣＨ₃である、 請求項１記載の化合物。
4. 【請求項４】 ＸおよびＸ₁がＣｌであり； Ｘ₂およびＸ₃がＨであり； Ｘ₄が−ＣＨ₃であり； ｎ＝１である、 請求項３記載の化合物。
5. 【請求項５】 Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−メチル−Ｎ−フェニル)アミノブ トキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛３−[４−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル−Ｎ −メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−(４−ブロモフェニル)−Ｎ−メチル
   アミノブトキシ)フェニル]チアゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−[３−(４−Ｎ−ピペラジノブトキシ)フェニル]チア
   ゾール−２−イル｝グアニジン； Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−(Ｎ−(３，４−ジクロロフェニル)−Ｎ
   −メチル)アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル｝ウレア；および Ｎ−ベンジル−Ｎ’−｛４−｛４−[３−[Ｎ−カルボベンジルオキシ−Ｎ−(３ ，４−ジクロロフェニル)]アミノプロポキシ]フェニル｝チアゾール−２−イル ｝グアニジン からなる群より選択される請求項１記載の化合物。
6. 【請求項６】 請求項１記載の化合物および医薬上許容される担体、希釈剤
   または賦形剤を含む医薬組成物。
7. 【請求項７】 請求項５記載の化合物および医薬上許容される担体、希釈剤
   または賦形剤を含む医薬組成物。
8. 【請求項８】 システインプロテアーゼおよびセリンプロテアーゼからなる
   群より選択されるプロテアーゼを阻害するための医薬の製造における請求項１な
   いし５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
9. 【請求項９】 プロテアーゼがシステインプロテアーゼである請求項８記載
   の使用。
10. 【請求項１０】 システインプロテアーゼがカテプシンＫである請求項９記
    載の使用。
11. 【請求項１１】 骨の損失により特徴づけられる疾患を治療するための医薬
    の製造における、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
12. 【請求項１２】 疾患が骨粗鬆症である請求項１１記載の使用。
13. 【請求項１３】 疾患が歯周炎である請求項１１記載の使用。
14. 【請求項１４】 疾患が歯肉炎である請求項５２記載の使用。
15. 【請求項１５】 過剰な軟骨またはマトリックスの分解により特徴づけられ
    る疾患を治療するための医薬の製造における、請求項１ないし５のいずれか１項
    に記載の化合物の使用。
16. 【請求項１６】 疾患が骨関節炎である請求項１５記載の使用。
17. 【請求項１７】 疾患がリューマチ性関節炎である請求項５６記載の使用。