JP2001509169A

JP2001509169A - Ｃｍ１０１／ｇｂｓ毒素を用いた創傷治癒促進法

Info

Publication number: JP2001509169A
Application number: JP53227698A
Authority: JP
Inventors: ジー．ヘラークビスト，カール; ニーマン，マイカル; ディー．ワミル，バーバラ; アブラモビッチ，リナット
Original assignee: バンダービルトユニバーシティ; エダリサーチアンドディベロップメントカンパニー，リミティド
Priority date: 1997-01-29
Filing date: 1998-01-29
Publication date: 2001-07-10
Also published as: ES2196539T3; IL131001A0; AU6051898A; CN1251998A; DK0973531T3; HK1027755A1; US6569838B1; EP0973531B1; PT973531E; CN100389776C; US20030180331A1; ATE236647T1; EP0973531A1; DE69813200D1; WO1998032453A1; US5858991A; DE69813200T2

Abstract

(57)【要約】本発明は創傷を持つ患者の治療法、特にＢ群β溶血型連鎖球菌より単離したＣＭ１０１またはＧＢＳ毒素を投与し、瘢痕化を最小にし創傷の治癒を促進し治療する方法を提供する。治療可能な創傷の型には表面または内部創傷が含まれる。本発明の方法は、創傷の治癒を促進し、腫瘍進行の蓋然性を最小にすることを目的とした、腫瘍を持つ手術患者へのＣＭ１０１またはＧＢＳ毒素を投与も含む。

Description

【発明の詳細な説明】ＣＭ１０１／ＧＢＳ毒素を用いた創傷治癒促進法発明の分野本発明は瘢痕化を最小にし、治癒を促進することで患者の創傷の治癒を促進する方法に関する。本発明はまた創傷関連腫瘍の進行を遅らせる方法にも関する。発明の背景手術または傷害によりできた皮膚創傷の一般的な治癒のプロセスには、血餅形成と、しばしば痂皮の形成が含まれる。より詳細には、第一段階あるいは一次治癒は通常清浄切開部でおこり、第２段階あるいは二次治癒は離れた創傷縁で起こる。フィブリン蛋白が創傷周囲の皮膚縁をまとめて固定し、痂皮が創傷を覆い感染を防止する。炎症反応がこの領域の血液細胞数を増加させ、修復プロセスを支援すると同時に、上皮組織は再生し、毛細血管は創傷周縁の血管から成長する。毛細血管は創傷域内に血管を再生し、肉芽組織の形成をもたらし、それが続いて瘢痕化を引き起こす。肉芽組織の形成は創傷部内に始まり、創傷誘導後約５日以内に創傷部を満たす。肉芽組織は新生コラーゲンや繊維芽細胞、新生血管や炎症細胞、特にマクロファージを含んでいる（Ｅ．ＲｕｂｉｎとＪ．Ｌ．Ｆａｒｂｅｒ，「Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ」、Ｌｉｐｐｉｎｏｃｏｔｔ出版、ｐｐ．８５−９５（１９９４））。７日から１０日後では、創傷部の強度は元の組織の１０％しか回復していない。二次治癒ではより大きな炎症反応が起こり、より大きな肉芽組織が形成される。さらに、肉芽組織の繊維芽細胞の収縮により傷口は収縮し、傷口縁が一つになって治癒プロセスは加速するが、時に醜く衰弱した瘢痕を残すことがある。さらに、細胞外マトリックスの過剰な蓄積により不規則な形をし、瘢痕が盛り上がり進行性に拡大する傾向を示すケロイドの形成、または過形成瘢痕がおこる。一般に、血管形成は修復に必要な特徴の一つであると信じられている〔Ｋｏｖａｃｓ，Ｅ．ら、繊維芽性サイトカインと結合組織産生（Ｆｉｂｒｏｇｅｎｉｃｃｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｐｒｏｄｃｔｉｏｎ）、「ＦＡＳＥＢＪ」８：８５４−８６１（１９９４）〕。凝固に反応してまず血小板から分泌され、ついで低酸素状態と乳酸性アシド−シスに反応してマクロファージから分泌される様々な成長因子やサイトカインが血管新生を促進する（Ｓｈａｈ，Ｍら、「ＴｈｅＬａｎｃｅｔ．」３３９：２１３− ２１４（１９９２））。一般に傷害のおよそ４日後には、血管新生は顕微鏡で見ることができるレベルとなるが、新生毛細血管が既存の血管から伸びだし、血小板やマクロファージより放出された化学走性誘因物質に反応して傷害部にむかって伸長し始めるのはさらに２から３日早い。一次創傷閉鎖では、伸びだした血管は創傷部の反対側から移動してきた相手と直ぐに出会い、創傷部を横切る血流が再確立する。閉鎖されていない創傷部、または閉鎖状態が不良な創傷部では、新生した毛細血管は同方向に移動する近接の血管と融合し、たくさんの肉芽組織が形成される。正常な創傷治癒では、一般に傷害の１から２日後では創傷部周囲の組織は低酸素状態になり、それに伴って血管内皮細胞成長因子、またはＶＥＧＦの分泌が増大する〔Ｂｒｏｗｎ，Ｌ．Ｆ．ら、創傷治癒中の上皮ケラチノ細胞でのＶＰＦ（ＶＥＧＦ）の発現（ＥｓｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＰＦ（ＶＥＧＦ）ｂｙｅｐｉｄｅｒｍａｌｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓｄｕｒｉｎｇｗｏｕｎｄｈｅｌｉｎｇ）、「J．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．」１７６：１３７５−７９〕。ＶＥＧＦは血管内皮細胞を刺激して急速に増殖させ、密に伸びだした毛細血管の形成を引き起こす。この低酸素により急速に誘導されたＶＥＧＦによる毛細血管形成は炎症細胞の浸潤を促進し、結果として瘢痕化を引き起こす。炎症により瘢痕化が起こるが、炎症は利点も有している。炎症細胞は修復に極めて重要な成長シグナルや溶菌酵素を放出する。事実、抗炎症剤投与を受けた患者は創傷部の炎症が不適当なことによる治癒障害を経験することが多い。創傷修復の重要な観点の一つはそれに要する時間の問題である。創傷治癒の早さは、患者の感染防止や健康全体の改善に深く関わっている。過剰に収縮することなく治癒した場合でも、医療および化粧的観点からは早さが望まれる。更に、腫瘍患者では、切除部位が腫瘍部位の近くにある場合には、手術による切除が腫瘍を進行させる臨床現象が確認されている。さらに、手術による切除は、転移による移植の可能性を高める（Ｍｕｒｔｈｙら、「Ｃａｎｃｅｒ」６４：２０３５−２０４４（１９８９）；Ｍｕｒｔｈｙら、「Ｃａｎｃｅｒ」６８：１７２４−１７３０（１９９１）；Ｓｃｈａｃｋｅｒｔ，Ｈ．Ｋら、「Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」４４：１７７−８１（１９８９））。腫瘍への創傷部の刺激作用は、手術干渉部分近くの残存腫瘍の成長の促進、並びに手術部の転移性移植体の蓋然性の上昇として現れる。さらに、腫瘍部に位置する創傷は一様に治癒しない〔Ｇａｔｅｎｂｙ，Ｒ．Ａら、腫瘍動物での創傷治癒の抑制（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｗｏｕｎｄｈｅａｌｉｎｇｉｎｔｕｍｏｒｂｅａｒｉｎｇａｎｉｍａｌｓ）、「ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ」５０：７９９７− ８００１（１９９０）〕。持続性に腫瘍の進行を促進する持続創傷は、癌治療に伴う外科手術の介入のよくある副作用の一つと考えられる。従って、腫瘍患者への手術をするかどうかの決定は、手術の利点が癌患者の全身症状を悪化させるリスクと比べなければならず、しばしば難しくなる。上記より、本発明の目的の一つは、創傷の治癒過程での瘢痕形成を防止または小さくする方法を提供することである。本発明の別の目的は創傷の治癒の速度を速める方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、腫瘍患者の創傷の治癒を早めながら、腫瘍の進行の蓋然性を小さくする方法を提供することである。発明の概要本発明の目的は、Ｂ群β型溶血連鎖球菌（ＧＢＳ）より単離される一般に無毒なポリサッカライドであるＣＭ１０１を瘢根形成を小さくすることと、創傷の治癒を速めることを目的に創傷を有する患者に投与し、治療する方法を提供することである。本発明は体表ならびに体内の創傷の治療に有用性がある。本発明の別の観点は、ケロイドを切除し、ＣＭ１０１を投与するケロイド治療のための方法である。本発明は、手術、またはその他腫瘍患者への創傷誘導の前、最中及び／または後に、ＣＭ１０１を投与して瘍患者の腫瘍の進行、即ち創傷が誘導する腫瘍の増殖または転移移植の蓋然性を小さくする方法も提供する。ＧＢＳ毒素、特にＣＭ１０１、及び治療のための使用説明書を含む製品並びにその製品の製造方法も開示する。図面の簡単な説明図１は、ＣＭ１０１または生理食塩水で治療された無腫瘍マウスの創傷周辺の血管密度を図示する。図２は、ＣＭ１０１または生理食塩水で治療された腫瘍を持ったマウスの創傷周辺の血管密度を図示する。図３は、創傷後の皮膚強度の回復に及ぼすＣＭ１０１の効果を図示する。発明の詳細な説明本発明は、ＧＢＳ毒素と、特にＣＭ１０１が治癒を加速化し、瘢痕化を小さくすることで創傷の治癒を促すという発見にある程度基づいている。ＣＭ１０１は、創傷治癒に伴う瘢痕化に関与する低酸素症関連ＶＥＧＦによる急速な血管新生を減じさせることにより、これら有益な効果を生じると考えられている。この作用メカニズムはまた、腫瘍患者の創傷の治癒をも早め、それによって術部または他の創傷部における腫瘍増殖または転移移植の蓋然性を低下させる。ＧＢＳ毒素の１種であるＣＭ１０１はＢ群β型溶血連鎖球菌（ＧＢＳ）より単離されたポリサッカライド分子である。特に、病原性Ｂ型β型溶血連鎖球菌はポリサッカライド外毒素を産生する。この外毒素はヒト新生児のＧＢＳ肺炎、または“早期発病疾患”の原因体と推測されている。これら新生乳児は敗血症、顆粒細胞減少症や呼吸困難、すなわち肺性高血圧や蛋白性肺浮腫を発症する〔Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、Ｂ群β型溶血連鎖球菌Ｉの研究。細胞外毒素の分離と部分解析（ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｇｒｏｕｐＢ β−ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓＩ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｅｘｔｒａ−ｃｅｌｌｕｌａｒｔｏｘｉｎ）「Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｒｅｓ．」１２：８９２−８９８（１９８１）〕。ＣＭ１０１に対するレセプターは元来新生児の肺に存在しており、早期発症疾患に対し新生児を感受性にしているが、出産後およそ４日から７日後に肺細胞はこのＣＭ１０１レセプターを失うと信じられている。従って、ＣＭＣ１０１はＧＢＳに曝された新生児には有害な作用を及ぼすが、それ以上の年齢の人間には毒性を示さないことが判明している。単離されたＣＭ１０１はＧＢＳ乳児肺炎を模したヒツジ実験モデルに対し有毒作用を示した〔Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、Ｂ群β型溶血連鎖球菌Ｉの研究。細胞外毒素の分離と部分解析（ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｇｒｏｕｐＢ β −ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓＩ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｅｘｔｒａ−ｃｅｌｌｕｌａｒｔｏｘｉｎ）「Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｒｅｓ．」１２：８９２−８９８（１９８１）〕。新生児の早期発病疾患のヒツジモデルでは、ＧＢＳ毒素は肺性高血圧を引き起こし、肺血管透過性を上げ、顆粒細胞減少症や顆粒細胞の肺分画症が発症する。ＣＭ１０１は分子量およそ３００，０００ダルトンで、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコース、ガラクトースとマンノース残基を、およそ１：１：１：３：１の割合で含んでいる。カルボン酸残基も分子の内部に組み込まれていると信じられている。ＣＭ１０１に対する病理生理学的反応では、繰り返し存在する活性エピトープが標的となる内皮細胞上のレセプターと相互結合し、重要な役割を果たすと思われている〔Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、癌患者のＣＭＣ１０１の第１相試験の初期結果（ＥａｒｌｙＲｅｓｕｌｔｓｏｆａＰｈａｓｅＩＴｒｉａｌｏｆＣＭ１０１ｉｎＣａｎｃｅｒＰａｔｉｅｎｔｓ）「ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｎｕａｌＭｅｅｔｉｎｇ」３６：２２４（１９９５）〕。ＧＢＳ毒素の調整方法は米国特許第５，０１０，０６２号に提供されている。しかし、ＣＭ１０１は、ここに参照され組み込まれる国際出願ＰＣＴ／ＵＳ９７／１７５３５号に開示された方法に従い精製されることが好ましい。本発明の方法に用いるＣＭ１０１を単離する出発材料は、最近感染した、または新生児に感染できるＢ群β溶血型連鎖球菌の培養株より得られるだろう。これら株の単離体は感染した小児の血液または脳脊髄液から得られるだろう。本発明に使用するＧＢＳ毒素は、天然のまたは溶解されたＧＢＳ菌より単離される、または溶解された及び／またはオートクレーブ処理したＧＢＳ菌の培地上清に由来し、ヒツジアッセイにおいて呼吸困難を誘導すること〔Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、Ｂ群β型溶血連鎖球菌Ｉの研究。細胞外毒素の分離と部分解析（ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｇｒｏｕｐＢ β−ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓＩ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｅｘｔｒａ−ｃｅｌｌｕｌａｒｔｏｘｉｎ）「Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｒｅｓ．」１２：８９２−８９８（１９８１）〕、または腫瘍組織標本でのパーオキシダーゼ−抗パーオキシダーゼ（ＰＡＰ）アッセイにより示される補体の活性化と新生血管への結合〔Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、ＧＢＳ毒素の抗腫瘍作用：Ｂ群β溶血型連鎖球菌のポリサッカライド外毒素（Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｓｏｆＧＢＳｔｏｘｉｎ；ａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｅｘｏｔｏｘｉｎｆｒｏｍｇｒｏｕｐＢ β−ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、「Ｊ．Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」１２０：６３−７０（１９９３）；Ｈｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔ，Ｃ．Ｇら、癌患者のＣＭＣ１０１の第１相試験の初期結果（ＥａｒｌｙＲｅｓｕｌｔｓｏｆａＰｈａｓｅＩＴｒｉａｌｏｆＣＭ１０１ｉｎＣａｎｃｅｒＰａｔｉｅｎｔｓ）「ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｎｕａｌＭｅｅｔｉｎｇ」３６：２２４（１９９５）〕により示される生物活性を有する分画または成分として定義される。ＧＢＳ毒素は、前記活性を有するＧＢＳ− 由来分子と同一の構造または活性を持つあらゆる天然または合成ポリサッカライドも意味する。本質的に純粋なＧＢＳとは、ＧＢＳ毒素が４０％以上純粋であり（例えば、重量濃度で少なくともおよそ４０％存在する）、好ましくは少なくともおよそ６０％が純粋であり、さらに好ましくは少なくともおよそ９０％が純粋であり、最も好ましくは少なくとも９５％が純粋である標本を意味する。ＧＢＳ毒素の純度については国際出願ＰＣＴ／ＵＳ９７／１７５３５号により詳細に記載されている。本発明記載の投与量は９５％純粋ＧＢＳ毒素についてのものである。従って、より純度の低いＧＢＳ毒素の投与量については変更する必要があるだろう。本発明の観点の一つは、ＧＢＳ毒素、例えばＣＭ１０１を瘢痕を減じ、及び／または創傷の治癒を速めるに十分な量投与し、創傷を有する患者を治療する方法を提供することである。瘢痕の低下及び／または治癒の加速の測定は、もとよりこれに限定されるものではないが目視観察、例えば磁気共鳴画像検査などによる創傷部の血管密度の測定や、肉芽組織形成部位での量及び／または速度の測定と創傷部位での皮膚張力の測定を含む各種方法により実施できるだろう。ＣＭ１０１またはその他のＧＢＳ毒素は、薬剤として許容し得る担体と組み合わせ、そして患者に全身性に投与されることが好ましい。担体としては、容易にＣＭ１０１と混合でき、静脈投与（ＩＶ）により投与可能な組成物を形成するものが好ましい。即ち、担体は好ましくは生理食塩水であり、当該担体は静脈投与への適合性を保証するために、他の薬剤として許容し得る賦形剤を含むことができる。得られる組成物は殺菌され、許容し得る浸透性を有するだろう。一般に、好適なＩＶ処方は当業者公知の標準的な技術に従い調製される。例えば、ここに参照し取り込まれる「Ｐｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ」の第１８版，Ｍａｒｃｈ出版（１９９０）の中のＳａｌｖａｔｏｒｅＪ．Ｔｕｒｃｏ著、第85章「静脈添加剤（ＩｎｔｒａｖｅｎｏｕｓＡｄｍｉｘｔｕｒｅｓ）」は、本発明に有益な薬剤として許容し得るＩＶ成分の調製に関する標準的技術を提供している。ＣＭ１０１を投与するその他の投与形状も利用できるだろう。全身投与に代わり、ＣＭ１０１を創傷部に局所的に投与できるだろう。患者へのＣＭ１０１の投与は、手術または外傷により創傷を負う前、間、及び／または後に行われるだろう。ＣＭ１０１は創傷を負った後の適当な一時的な期間に投与されることが好ましい。創傷を負った直後のＣＭ１０１の投与が最も好ましい。例えば、１日以内、または好ましくは６時間以内の投与が最善である。創傷部の瘢痕を減じ治癒を速めるために患者に投与されるＣＭ１０１の量は、創傷部の肉芽組織形成量または速度を減じるのに十分な量であるか、または創傷部の血管新生を減じ、特に血管密度を減らすのに十分な量である。好適な投与量の範囲は１ないし１００μｇ／ｋｇ体重である。より好ましい投与量は１μｇ／ｋｇないし５０μｇ／ｋｇであり、最も好ましくは１ μｇ／ｋｇないし２５μｇ／ｋｇの範囲である。しかし、特定の患者に関する特異的な投与レベルは、年齢、体重、全身の健康状態、性、日常の食事、創傷の重症度を含む様々な要因に拠ることが理解されるだろう。各投与量は、１２０分以内に注入で投与することが好ましく、好ましい持続範囲は５分ないし６０分であり、最も好ましい投与時間範囲は５分から３０分である。週１回の治療が好ましく、また結果を証明するにも十分であると考えられる。ＣＭ１０１治療は各種組織の創傷の搬痕化を阻止し、また治癒を早め、様々な深さの創傷にも適している。本発明の治療は、創傷が深く、あるいは組織縁が一つに閉鎖しない筋肉組織またはその他創傷処置が知られている組織の縫合と結びつけて用いることが好ましい。上皮レベルの瘢痕化ならびに内部の瘢痕化は、本発明の方法により最小化される。本明細書における瘢痕とは、組織、特に創傷の過程で損傷を受けた組織が結合組織により置換され形成された不規則な形の皮膚またはその他の組織を意味する。この意味では、癒着もまた瘢痕の一つと考えられる。本明細書における創傷とは、皮膚またはその他の組織に有害が影響された、具体的には皮膚またはその他の組織がせん断され、貫通し、切断され、または破壊された傷害または損傷を意味する。更に、本発明は手術創傷または外傷性創傷時の再灌流傷害の治療にも利用できるだろう。例えば、手術中には体の一部への血流はクランピングなどにより一時的に閉塞されることがある。この閉塞を解除した後、虚血状態にあった箇所へ血液が再灌流した結果、組織、特に血管内部に対して灌流傷害を引き起こすことがある。再灌流傷害は移植手術における臓器不全や臓器拒絶の主要関連因子の一つである。ＣＭ１０１を閉塞が起きる前に患者に投与することで、虚血や再灌流による傷害を最小化できるだろう。ＣＭ１０１は閉塞が起きた後でも投与できる。血管内の瘢痕化の結果としてしばしば生じ、血管腔の閉塞を引き起こす再狭窄もまた、本発明の方法により有利に治療されるだろう。更に、本発明は、癒着、たとえば、腹腔手術の結果として時々起こる型の形成の可能性を最小にするために用い得る。明らかに、この方法は種々の型の外科手術、たとえば形成または美容整形外科体内移植、再構築、移植、バイパス手術及びバルーン血管形成術などの結果発生し、創傷の治癒が重要であり、瘢痕化が重大な問題となる外科手術に利用できるだろう。これら処置の多くには、低酸素症による血管新生または脈管形成が関与すると信じられている。ＣＭ１０１はケロイドを持つ患者の治療に特に有用である。通常、これら過剰増殖した瘢痕の手術による切除は、瘢痕が持続的に大きくなり、そしてより醜い形になり成功しない。本発明は、手術によりケロイドを切除し、そして術後直ぐにＣＭ１０１を投与し最小の瘢痕形成で治癒させる治療法を教示する。上記の如く、腫瘍への創傷の剌激作用は、手術処置部近傍の残存腫瘍の増殖を促進し、同時に手術部の転移性の体内移植の蓋然性を高める形で現れる臨床現象と認識される。本発明は、ＣＭ１０１を創傷の治癒を速め、転移性体内移植と腫瘍増殖を抑えるための腫瘍手術患者への投与も含む。腫瘍を有する手術患者の創傷治癒のための処置は、創傷部へ移動する腫瘍の予防、発生の蓋然性の低下、そしてその減少も含む。明らかに瘢痕化の最小化と創傷治癒の促進を目的とした術前のＣＭ１０１投与は大きな有用性を有しており、また医療社会に好ましいインパクトを与えるだろう。同様に、不慮の傷害により受けた創傷を持つ患者へのＣＭ１０１の投与は、創傷治癒の促進に大きな有用性を持つ。特定の理論に限定されることなく、ＧＢＳ毒素、特にＣＭ１０１は、組織肉芽形成と瘢痕化をもたらす、低酸素状態に誘導されたＶＥＧＦによる血管形成を妨げるが、傷の治癒に必要な生理的な血管修復プロセスを妨げないから、創傷治癒の加速と瘢痕最小化に重要な役割を果たす。血管形成は、低酸素状態下にＶＥＧＦのアップレギュレーションに反応し、最終的に密な毛細血管発芽の迅速形成をもたらす内皮細胞の脱分化を含むと信じられている。一方、生理的血管新生は、創傷を受けたことによる接触阻害の破綻に続き既存内皮細胞の増殖が起こるに関係する基本的な修復メカニズムであると信じられる。ＣＭ１０１は生理的修復メカニズムを進行させるが、病的血管新生を妨げないことから、創傷の治療に極めて有益な化合物である。さらに、ＣＭ１０１は、補体Ｃ３活性化により毛細血管の出芽をオプソニン化し、これにより瘢痕化に必要な炎症性の血管形成を阻害することが示唆されている。ＶＥＧＦ−による血管形成は再灌流型の傷害性創傷にも作用するとも信じられており、従ってＣＭ１０１の投与はこの様な傷害の防止に有効である。本発明の発明者の幾人かにより行われたこれまでの研究より、ＧＢＳ毒素が腫瘍治療における抗癌剤として利用できることが示されている。具体的には米国特許第５，０１０，０６２号とそれに対応する欧州特許ＥＰ０４４５２８０（Ｂ１）号は、患者に阻害有効量のＧＢＳ毒素を非経口的に投与することで、発達中の固形癌の血管形成を少なくとも部分的に阻害する方法を教える。この過去の研究から、ＧＢＳ毒素、特にＣＭ１０１の創傷部の血管形成に及ぼす効果についての研究が始まった。初期の研究では、ＣＭ１０１は創傷の治癒に効果を持たないとした。特に、Ｑｕｉｎｎ，Ｔ．Ｅ．ら、「Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」１２１：２５３−６（１９９５）は創傷治癒モデルとして、マウスにポリビニルアルコール（ＰＶＡ）スポンジ移植技術を用い、カーマイン染料注入法を用いて新血管の形成を測定した。この研究では、ＣＭ１０１またはコントロールのデキストランで治療されたマウスにおける血管形成の阻害レベルに有意な差は認められなかった。正常および癌をもったマウスの両方で同じ結果を得た。これらの結果は、ＣＭ１０１がスポンジモデルで測定する場合、創傷治癒の血管新生に大きな影響を及ぼさないことを示した。即ち、創傷治癒対するＣＭ１０１の作用に関する初期の研究と本発明は区別される。磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）は血管形成を可視化し、血管密度の相対測定に有用である。この技術はヌードマウスにおけるｉｎｖｉｖｏでの創傷−腫瘍相互作用の可視化に（ＡｂｒａｍｏｖｉｔｃｈＲ．，ＭｅｉｒＧ．とＮｅｅｍａｎＭ．，血管新生により誘導された移植Ｃ６グリオーマ多細胞スフェロイドの増殖：磁気共鳴映像法〔ＮｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｇｒｏｗｔｈｏｆｉｍｐｌａｎｔｅｄＣ６ｇｌｉｏｍａｍｕｌｔｉｃｅｌｌｕｌａｒｓｐｈｅｒｏｉｄｓ：ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｍｉｃｒｏｉｍａｇｉｎｇ）、「ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．」５５：１９５６ −１９６２（１９９５）〕、及び創傷が血管新生促進を介し間接的に、また腫瘍細胞の増殖を誘導することで直接的に腫瘍の進行に影響することを示すのに用いられている。これらの観察の中では、腫瘍部の創傷は治癒しなかった。ＣＭ１０１を除くほとんどの抗血管形成治療または抗血管新生治療（Ｂｒｏａｄｌｅｙ，Ｋ．Ｎ．ら、「Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ」６１（５）：５７１−５７５（１９８９）；Ｓｔｏｕｔ，Ａ．Ｊ．ら、「Ｉｎｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ．」７４（１）：７９−８５（１９９３）；Ｐｉｅｒｃｅ，Ｇ．Ｆ．、「Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．」４６：４６７−４８１（１９９５））は創傷治癒を阻害することから、腫瘍増殖に対する手術の促進作用を阻害する目的に使用することはできない。これまでにＣＭ１０１が腫瘍の血管新生を阻害することが示されおり（米国特許第５，０１０，０６２号）、またこれまでの研究者はＣＭ１０１は創傷の血管新生に大きな作用を及ぼさないと結論した〔ＱｕｉｎｎＴ．Ｅ．，ＴｈｕｒｍａｎＧ．Ｂ．，ＳｕｎｄｅｌｌＡ．Ｋ．，ＺｈａｎｇＭ．，とＨｅｌｌｅｒｑｖｉｓｔＣ．Ｇ．，ポリサッカライド抗癌剤ＣＭ１０１はマウスモデルでの創傷治癒を阻害しない（ＣＭ１０１、ａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｔｉｔｕｍｏｒａｇｅｎｔ，ｄｏｅｓｎｏｔｉｎｈｉｂｉｔｗｏｕｎｄｈｅａｌｉｎｇｉｎｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌｓ），「Ｊ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｌｏ．」１２１：２５３−２５６（１９９５）〕。これに対し、本発明はＣＭ１０１が創傷治癒速度を上げ、瘢痕化を最小化し、更に癌患者では腫瘍による創傷の増殖効果を阻害することを教示する。本発明の別の観点は、キットの様な製品と製品を製造する方法である。製品は、ＧＢＳ毒素、特にＣＭ１０１から成る医薬組成物と医薬品に許容し得る坦体を含む。医薬組成物は当業者に公知の如く、好適な容器に入れられることもある。また本発明の方法に従った患者治療のための使用説明書も含まれる。ここに一般的に記された本発明は、本発明を例示する実施例を参照することでより理解できるだろうが、もとより本発明の範囲または精神はこれに制限されるものではない。実施例実施例１ＣＭ１０１は腫瘍を持たない患者の創傷治癒を促進する。創傷治癒のＣＭ１０１の、腫瘍を持たないＣＤ−１ヌードマウスでの効果を調べた。創傷は微細な外科用ハサミで作り、４ｍｍの完全厚の皮膚の切開からなった。無菌の接着包帯（Ｔｅｇａｄｅｒｍ_TM、米国）で各創傷を覆った。実験日０日にマウスに２４０μｇ／ｋｇのＣＭ１０１または生理食塩水を静脈投与し、創傷した。各創傷部の新血管形成を磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）を用いて確認した。磁気共鳴映像は０、１、２、３と５日目に撮った。ＭＲＩ実験は２ｃｍの表面高周波コイルを用いた水平型４．７ＴＢｉｏｓｐｅｃスペクトロメーター（Ｂｒｕｋｅｒ，ドイツ）を用いて実施した。勾配エコー画像（スライス厚０．５ｍｍ、ＴＲ１００ｍｓ、２５６×２５６ピクセル、平面解像度１１０μｍ）をエコー時間１０．５と２０ｍｓで撮った。毛細血管床の成長は、切開部周囲１ｍｍの対象域に於ける平均強度の低下として現れる。血管のコントラスト（ＡＣ）は、離れた組織の平均強度に対する切開部周囲１ｍｍの対象域の平均強度の比で規定した。明瞭な血管密度が見られる場合を１−ＡＣとした。次に、麻酔した各マウスをＭＲＩ装置内に切開部を表面コイル中央部に来るように仰臥位に置き、ＭＲＩ像を１時間記録した。図１は、実験の時間経過に伴うＭＲＩによる血管密度測定値を示す。図１に示す如く、生理食塩水処理したコントロールのマウスの創傷では、創傷部近傍に強い血管新生が見られる。この血管新生は傷害後２日目にピークを示した。これに対し、ＣＭ１０１の治療を受けたマウスでは、創傷周囲の血管新生は大きく低下した。実施例２ＣＭ１０１は腫瘍を持つ患者の創傷治癒を促進する。グリオームスフェロイドを移植されたマウスを用いて、創傷部の血管新生に対するＣＭ１０１の効果について試験した。Ｃ６グリオームスフェロイド（直径約８００μｍ）を１つ、６匹の雄のＤ１−ヌードマウスの下背に皮下移植した〔ＡｂｒａｍｏｖｉｔｃｈＲ．，ＭｅｉｒＧ．とＮｅｅｍａｎ（血管新生により誘導された移植Ｃ６グリオーマ多細胞スフェロイドの増殖：磁気共鳴映像法（ＮｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｇｒｏｗｔｈｏｆｉｍｐｌａｎｔｅｄＣ６ｇｌｉｏｍａｍｕｌｔｉｃｅｌｌｕｌａｒｓｐｈｅｒｏｉｄｓ：ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｍｉｃｒｏｉｍａｇｉｎｇ）、「ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．」５５：１９５６−１９６２（１９９５）〕。８日後、実験０日にマウスに７５μｇ／ｇのケタミンと３μｇ／ｇとキシラジンを腹腔内投与し麻酔した。このマウスに、０、６０、１２０あるいは２４０μ ｇ／ｋｇのＣＭ１０１を含む生理食塩水を尾静脈投与した。実施例１記載の如く、磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）を用いて創傷部の血管新生を調べた。麻酔された各マウスを表面コイルの中央部に腫瘍部が来るようにＭＲＩの上に仰臥位に置き、ＭＲＩ画像を１時間記録した。１時間の観察及びＭＲＩデータの記録後、腫瘍部から５〜１０ｍｍの位置に４ｍｍの皮膚切開を行い、マウスに創傷を作った。前記同様に、創傷部は微細な外科用ハサミを用いて、組織の全厚を４ｍｍ切開して作り、滅菌した接着包帯（Ｔｅｇａｄｅｒｍ^TM、米国）で覆った。続いて血管新生のＭＲＩ像を２、５、７、及び１３日目に撮った。グリオームを持つマウスでは、ＣＭ１０１の１回注射により創傷治癒が改善された。図２に見られる様に、傷害２日後の創傷縁部の血管密度は、ＣＭ１０１で治療したマウスで約６倍低下していた。創傷後大きな血管新生の最初の波はＣＭ１０１治療マウスでは阻害されたが、この阻害は創傷治癒を障害しなっかた。実際、傷害２４時間後と４８時間後に、ＣＭ１０１治療を受けたマウスでは創傷部はほとんど検出できなかったが、コントロールのマウスではより明確に創傷を示した。更に、生理食塩水治療されたコントロールのマウスに比べて、ＣＭ１０１で治療された腫瘍持つマウスでは傷害１３日後には殆ど瘢痕を認めることはできなかった。以上により、ＣＭ１０１で治療された腫瘍を持つ患者は、傷害１−２日後に創傷部を囲む大きな血管新生を抑え、創傷部の治癒を促進し、瘢痕化を最小化した。実施例３ＣＭ１０１処置は切開部の改善治癒を促進する。創傷部の目による観察でも、ＣＭ１０１治療の有効性を示す証拠が得られた。２匹のマウスに前記実施例と同様にして創傷を作った。その後、２４０μｇ／ｋｇ投与量のＣＭ１０１生理食塩水をマウスに静脈投与した。コントロールマウスには同様の方法で生理食塩水を投与した。切開４８時間後とＣＭ１０１治療４８時間後に創傷部を目で観察し、創傷部がほとんど認められないことを確認した。逆に、コントロール動物で上記に相当する創傷部は、同時点で明確な創傷の証拠を示した。より遅い時点では、コントロール動物に比べ実験動物はほとんど瘢痕化の証拠も示さなかった。実施例４ＣＭ１０１は創傷の治癒を促進する。創傷破壊強度または、創傷部を横切る組織張力をＣＤ１−ヌードマウスで評価した。右脚域に皮膚全幅切開を行い、次いで３０及び６０μｇ／ｋｇのＣＭ１０１または生理食塩水を静脈注射した。創傷部を破壊するに必要な力を切開４０時間後と７日後に測定した。ＣＭ１０１治療した動物はコントロール動物に比べて創傷治癒の力が有意に増加していた。６ｍｍの切開を０日目に行った。２日目と７日目に創傷部を吸引し（ＤｉｍｅｎｓｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓＳｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）ながら、創傷部の両側においた反射物の小点の動きを赤外光照射ビデオカメラに録画し、張力を測定した。図３は、２日目までにＣＭ１０１処置した創傷とコントロールの創傷との間に測定可能な差があることを示している。ＣＭ１０１治療マウスでは７日目まで瘢痕組織は認められず、また組織は非傷害組織の張力を有していた。逆に、治療しなかった創傷はＣＭ１０１治療創傷に比べて強度は５０％以上低かった。実施例５ＣＭ１０１は創傷により誘導される腫瘍進行効果を低下させる。皮下に少なくとも直径５ｍｍのＣ６グリオーム腫瘍を持つＣＤ−１ヌードマウス２４匹を調製した。腫瘍増殖と転移性移植体に及ぼすＣＭ１０１の効果を、グリオームスフェロイドを移植したマウスを用いて試験した。単一のＣ６グリオームスフェロイド（少なくとも直径５ｍｍ）を２４匹のＣＤ１−ヌードマウスの各下背に皮下移植した〔ＡｂｒａｍｏｖｉｔｃｈＲ．，ＭｅｉｒＧ．とＮｅｅｍａｎ（血管新生により誘導された移植Ｃ６グリオーム多細胞スフェロイドの増殖：磁気共鳴映像法（ＮｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｇｒｏｗｔｈｏｆｉｍｐｌａｎｔｅｄＣ６ｇｌｉｏｍａｍｕｌｔｉｃｅｌｌｕｌａｒｓｐｈｅｒｏｉｄｓ：ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｍｉｃｒｏｉｍａｇｉｎｇ）、「ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．」５５：１９５６−１９６２（１９９５）〕。８日後、実験０日にマウスの第１群（ｎ＝８）に腫瘍近位部（腫瘍縁３ｍｍ以内）の皮膚を４ｍｍ切開し傷害し、第２群のマウス（ｎ＝８）には腫瘍遠位部（腫瘍縁から１０ｍｍ以上）の皮膚を４ｍｍ切開し傷害し、コントロール群のマウスには創傷を作らなかった。同日、マウスに０、６０、１２０または２４０μｇ／ｋｇのＣＭ１０１を投与した（上記各群、特定のＣＭ１０１濃度について２匹づつ）。２週間、腫瘍はｉｎｓｉｔｕに増殖し、創傷部に腫瘍を移植し、創傷部の血管新生を磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）を用いて実施例１と同様に調べた。２週終了時に、マウスを犠牲にし、腫瘍部と創傷部の周辺組織を創傷治癒の組織と腫瘍形態の組織学解析のためにフォルマリン固定した。腫瘍近位部に創傷を持つ動物では、ＣＭ１０１治療は創傷部への腫瘍増殖を減じた。同様にＣＭ１０１は創傷部から離れた腫瘍を持つ動物でも、創傷部の転移性腫瘍移植を阻害した。実施例６ＣＭ１０１は再灌流傷害に有効である。ＣＭ１０１の再灌流傷害に対する防止能力を、確立した動物モデルを用いて調べた〔Ｈａｎら、シアリルＬｅｗｉｓ^xオリゴサッカライドはウサギ耳の虚血− 再灌流傷害を減らす（ＳｉａｌｙｌＬｅｗｉｓｘＯｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｒｅｄｕｃｅｓＩｓｃｈｅｍｉａ−ＲｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎＩｎｊｕｒｙｉｎｔｈｅＲａｂｂｉｔＥａｒ）、「Ｊ．ｏｆＩｍｍｕｎｏｌ．」１５５（８）：４０１１−４０１５（１９９５）、Ｍｉｓｓａｗａら、全肝臓虚血と再灌流に於けるシアリルＬｅｗｉｓ^xの役割（ＲｏｌｅｏｆＳｉａｌｙｌＬｅｗｉｓ^x ｉｎＴｏｔａｌＨｅｐａｔｉｃＩｓｃｈｅｍｉａａｎｄＲｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）、「Ｊ．ｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＳｕｒｇｅｏｎｓ」１８２：２５１−２５６（１９９６），Ｌｏｐｅｚ−Ｎｅｂｌｉｎａら、虚血性ラット腎臓に於ける好中球浸潤防止を介したベラパミルの防止メカニズム（ＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｏｆＶｅｒａｐａｍｉｌｂｙＰｒｅｖｅｎｔｉｎｇＮｅｕｔｒｏｐｈｉｌＩｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅＩｓｃｈｍｅｉｃＲａｔＫｉｄｎｅｙ）、「Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．」６１（２）：４６９−４７２（１９９６）〕。耳モデルでも腎臓モデルでも、ＣＭ１０１治療された臓器は、治療されなかった臓器に比べ損傷が有意に少なかった。マウス耳モデル：Ｂａｌｂ／ｃマウスにリン酸緩衝生理食塩水（ｎ＝１０）またはリン酸緩衝生理食塩水で調製した６０μｇ／ｋｇのＣＭ１０１（ｎ＝１０）のいずれかを静脈投与した。注射後、各マウスについて一方の耳に血液を供給する動脈を６０分間クランプした。６０分後、クランプした耳は無色で、閉塞の効果が認められた。クランプ除去後、各マウスの耳を自然に灌流させた。マウスは実験を通じて２４℃に室温を安定させ維持された。６時間後、全てのマウスの耳を直接目により調べ、また顕微鏡でも調べた（１００×）。また、通常のカリパーを用いて腫脹についても測定した。生理食塩水治療したマウスについて、クランプした耳を調べたところ、同じマウスのクランプしていないもう一方の耳に比べて、腫脹と出血を示す有意な血管漏出と炎症性浸潤を示した。逆に、ＣＭ１０１で処置された各マウスでは、再灌流を受けた耳と、同じマウスのクランプされていない耳との間に有意な差は認められなかった。マウス腎臓モデル：麻酔したＢａｌｂ／ｃマウスを開腹し、一方の腎臓への血流をクランプしてブロックした。一方の腎臓をクランピングしてから、リン酸緩衝生理食塩水（亜群Ａ）またはリン酸緩衝生理食塩水中の６０μｇ／ｋｇのＣＭ１０１（亜群Ｂ）のいずれかを尾静脈から各マウスに静脈注入した。注入５分後、各動物のもう一方の腎臓への血流をクランプした。マウス毎に、前もって決められた閉塞時間後両方のクランプを外し、通常通り再灌流を行った。室温は２４℃に安定に維持した。前もって決めて置いた再灌流時間後、各マウスを犠牲にし、検証した。第１群マウス｛生理食塩水−治療マウス６匹（群１Ａ）とＣＭ１０１−治療マウス６匹（群１Ｂ）｝は３０分間クランピングして腎臓への血流を閉塞してから２時間再灌流した。第２群｛生理食塩水−治療マウス６匹（群２Ａ）とＣＭ１０１−治療マウス６匹（群１Ｂ）｝は４５分間クランピングしてから５時間再灌流した。第３群｛生理食塩水−治療マウス６匹（群３Ａ）とＣＭ１０１−治療マウス６匹（群３Ｂ）｝は６０分間クランピングしてから６時間再灌流した。生理食塩水治療マウスでは、生理食塩水処置した腎臓の組織学的検証から、再灌流による損傷の徴候がしめされ、再灌流時間の増加に伴い傷害はより強くなった。即ち、毛細血管への損傷は再灌流２時間後（群１Ａ）には明確であり、再灌流６時間のマウス（群３Ａ）では血管新生、出血、炎症が顕著であった。更に、４時間までに（群２Ａ）細胞死が観察された。逆に、ＣＭ１０１治療マウスの場合、何れも時点でも血管の微小な拡張が見られたものの、血管間の出血、炎症、あるいは細胞死は示さなかった。このことは、虚血性ならびに再灌流性障害に於けるＣＭ１０１の防御的役割を示している。個々の出版物あるいは特許出願が特別かつ個別に参照され、取り込まれる旨記載されたと同様の範囲で、本明細書記載の全ての出版物と特許出願はここに参照され取り込まれる。本発明はここに全て記載されるものであるが、添付のクレームの精神と範囲から外れることなくこれに多くの変更と改良が可能であることは当業者にとって明らかであろう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者ニーマン，マイカルイスラエル国，76804 マズケレットバトヤ，ハゴレンストリート 10 (72)発明者ワミル，バーバラディー. アメリカ合衆国，テネシー 37221―3229, ナッシュビル，アンバーヒルズレーン 7913 (72)発明者アブラモビッチ，リナットイスラエル国，79145 モルデチャイ，キブツヤド

Claims

【特許請求の範囲】１．Ｂ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を創傷を有する患者に当該創傷部の瘢痕化を減じるに十分な量投与することから成る、創傷を有する患者の治療方法。２．Ｂ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を創傷を有する患者に当該創傷部の治癒を促進するに十分な量投与することから成る、創傷を有する患者の治療方法。３．創痕の治癒を促進する請求項１の方法。４．瘢痕化を最小にして創傷の治癒を達成する請求項２の方法。５．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項１または２の方法。６．ＣＭ１０１が実質的に純粋である請求項５の方法。７．ＣＭ１０１の純度が少なくとも約９０％である請求項６の方法。８．ＧＢＳ毒素治療された創傷部の血管密度が、ＧＢＳ毒素治療を受けていない相当する創傷部の血管密度に対して低くするのに十分な量のＧＢＳ毒素を患者に投与する請求項１または２の方法。９．減少した血管密度が０．０〜０．２（１−ＡＣ）の範囲内である請求項８の方法。１０．ＧＢＳ毒素治療された創傷部の張力が、ＧＢＳ毒素治療を受けていない創傷部の張力に対し改善されるのに十分な量のＧＢＳ毒素を患者に投与する請求項１または２の方法。１１．ＧＢＳ毒素を患者に非経口的に投与する請求項１または２の方法。１２．ＧＢＳ毒素を患者に静脈より投与する請求項１または２の方法。１３．ＧＢＳ毒素を、創傷近位部に投与する請求項１または２の方法。１４．ＧＢＳ毒素を患者に１〜１００μｇ／ｋｇ体重の範囲で投与する請求項１または２の方法。１５．ＧＢＳ毒素を患者に１〜２５μｇ／ｋｇ体重の範囲で投与する請求項１４の方法。１６．投与量を３０分以内の単回注射により投与する請求項１４の方法。１７．投与量を週１回投与する請求項１４の方法。１８．創傷部の血管形成を低下させるのに十分な量のＧＢＳ毒素を患者に投与する請求項１または２の方法。１９．創傷部の低酸素症誘導ＶＥＧＦによる血管新生を低下させるのに十分な量のＧＢＳ毒素を患者に投与する請求項１８の方法。２０．患者が腫瘍を持つ請求項１または２の方法。２１．患者が未知腫瘍を持つ請求項１または２の方法。２２．患者が少なくとも４日齢である請求項１または２の方法。２３．患者が少なくとも７日齢である請求項２２の方法。２４．創傷が外傷の結果である請求項１または２の方法。２５．創傷が手術の結果である請求項１または２の方法。２６．創傷が血管内である請求項１または２の方法。２７．ケロイドを持つ患者の治療方法であって、該方法が（ａ）ケロイドを切除し創傷をつくり、そして（ｂ）該創傷部の瘢痕化を低下させるのに十分な量のＢ群β型−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を患者に投与する、工程を含む方法。２８．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項２７の方法。２９．ＣＭＣ１０１の純度が少なくとも約９０％である請求項２８の方法。３０．術部の瘢痕化を低下し、または創傷の治癒を促進するのに十分な量のＢ群β一溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を患者に投与することから成る、手術患者に於ける術部近傍への転移性腫瘍移植の蓋然性を低下させる方法。３１．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項３０の方法。３２．ＣＭＣ１０１の純度が少なくとも約９０％である請求項３１の方法。３３．ＧＢＳ毒素を患者に静脈から投与する請求項３０の方法。３４．術部の瘢痕化を低下し、または創傷の治癒を促進するのに十分な量のＢ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を患者に投与することから成る、手術患者における腫瘍増殖の蓋然性を低下させる方法。３５．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項３４の方法。３６．ＣＭＣ１０１の純度が少なくとも約９０％である請求項３５の方法。３７．ＧＢＳ毒素を患者に静脈から投与する請求項３４の方法。３８．血管の再灌流前にＢ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素を患者に投与することを含む、患者における再灌流傷害の防止方法。３９．ＧＢＳ毒素を血管閉塞前に投与する請求項３８の方法。４０．（ａ）（ｉ）Ｂ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素、と（ｉｉ）医薬として許容し得る担体を有する医薬組成物と（ｂ）創傷を有する患者への前記医薬組成物の投与法の取扱説明書とを含む製品。４１．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項４０の製品。４１．ＧＢＳ毒素がＣＭ１０１である請求項４０の製品。４２．ＣＭＣ１０１の純度が少なくとも約９０％である請求項４１の製品。４３．取扱説明書が、創傷部の瘢痕化を低下するのに十分な量の医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４０の製品。４４．取扱説明書が、創傷部治癒促進に十分な量の医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４０の製品。４５．取扱説明書が、ケロイドを切除し、そして創傷部の瘢痕化低下に十分な量の医薬組成物を投与しケロイドを治療することを目的とする該医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４０の製品。４６．取扱説明書が、手術部の瘢痕化を低下、または創傷の治癒を促進するのに十分な量の医薬組成物を投与することにより、患者の手術部近傍への転移性腫瘍移植の蓋然性を下げることを目的とする、該医薬組成物の患者への投与を記述する請求項４０の製品。４７．取扱説明書が、手術部の瘢痕化を低下、または創傷の治癒を促進するのに十分な量の医薬組成物を投与することにより、患者における腫瘍増殖の蓋然性を下げるこをと目的とする、該医薬組成物の患者への投与を記述する請求項４０の製品。４８．（ａ）以下より成る医薬組成物を含む容器；（ｉ）Ｂ群β−溶血型連鎖球菌（ＧＢＳ）毒素、及び（ｉｉ）医薬として許容し得る担体、と（ｂ）患者への医薬組成物の投与により創傷を有する患者を治療するためのラベルされた取扱説明書を組み合わせることを含む製品の製造方法。４９．取扱説明書が、創傷部の瘢痕化を低下するのに十分な量の医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４８の方法。５０．取扱説明書が、創傷部治癒促進に十分な量の医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４８の方法。５１．取扱説明書が、ケロイドを切除し、そして創傷瘢の搬痕化低下に十分な量の医薬組成物を投与しケロイドを治療することを目的とする該医薬組成物の患者への投与を記述している請求項４８の方法。５２．取扱説明書が、手術部の瘢痕化を低下、または創傷の治癒を促進するのに十分な量の医薬組成物を投与することにより、患者の手術部近傍への転移性腫瘍移植の蓋然性を下げることを目的とする、該医薬組成物の患者への投与を記述する請求項４８の方法。５３．取扱説明書が、手術部の瘢痕化を低下、または創傷の治癒を促進するのに十分な量の医薬組成物を投与することで、患者における腫瘍増殖の蓋然性を下げるこをと目的とする、該医薬組成物の患者への投与を記述する請求項４８の方法。