JP2001504584A - 拮抗薬依存性ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ抗体の検出 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、患者の血漿をＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と共にインキュベートして、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を形成し、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を二次抗ヒト検出可能抗体と共にインキュベートして、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体を形成し、さらにＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体中の二次抗ヒト検出可能抗体の存在を検出することを含む、フィブリノゲンレセプタ拮抗薬誘発の血小板減少症を発症する危険性のある患者を同定するための方法である。

Description

【発明の詳細な説明】 拮抗薬依存性ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ抗体の検出 発明の背景 薬物性血小板減少症は、広い範囲の薬剤で治療された患者において、罹病、そ して時には死亡の原因となる（Ｋａｒｐａｔｋｉｎ，Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ ．２６２：６８（１９７１））。ヘパリン、キニーネ、キニジンおよびスルホン アミド抗生物質を含めて、百を越える様々な医薬品が薬物性血小板減少症に関係 づけられてきた（Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｒｏ ｍｂｏｓｉｓ（第２版）Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔ ｔ（１９８７）ｐ．４５２、およびＫｒａｃｋｅら、ＪＡＭＡ１２２：１６８（ １９４３））。 血小板と反応する薬物依存性抗体がごく少い例同定されている。Ｃｕｒｔｉｓ ら、Ｂｌｏｏｄ，８４巻、Ｎｏ．１（７月１日）１９８４：ｐ．１７６−１８３ は、スルホンアミド抗生物質によって誘発されるそのような抗体の検出にフロー サイトメトリーを応用した。Ｖｉｓｅｎｔｉｎら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ、１ ９９０年１０月、３０（８）ｐ．６９４−７００は、 抗原捕獲ＥＬＩＳＡとフローサイトメトリーによる薬物依存性血小板反応性抗体 の検出について述べている。 本発明は、患者において、精製血小板または精製ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプ タと選択されたＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬とで形成される、ＧＰＩＩ ｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬の複合体を認識す る、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ（フィブリノゲンレセプタ）拮抗薬誘発血小 板減少症におけるひとつまたはそれ以上の抗体の存在を同定するための手段であ る。そのような抗体を同定することにより、選択されたＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレ セプタ拮抗薬を患者に投与することから生じる血小板減少症発現の危険性のある 患者を同定する。発明の要旨 本発明は、選択されたフィブリノゲンレセプタ拮抗薬で患者を治療することか ら生じる、フィブリノゲンレセプタ拮抗薬誘発の血小板減少症を発症する危険性 のある患者を同定する方法であり、患者の血漿をＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と反応させて第一反応産物を形成 し、第一反応産物を二次抗ヒト検出可能抗体と反応さ せて第二反応産物を形成し、第二反応産物において二次抗ヒト検出可能抗体とＧ ＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体の間 での結合レベルを検出することを含む。二次抗ヒト検出可能抗体がＧＰＩＩｂ／ ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と結合するとい う指標は、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗 薬複合体と患者血漿抗体との間に相互作用が存在することを示す。そのような相 互作用の存在は、選択されたフィブリノゲンレセプタ拮抗薬による治療後に血小 板減少症を発症する危険性のある患者を同定する。発明の詳細な説明 本発明の方法において、危険性のある患者は、フィブリノゲンのＧＰＩＩｂ／ ＩＩＩａレセプタへの結合を阻害する選択されたフィブリノゲンレセプタ拮抗薬 を投与することによる血小板減少症を抑制するための治療を受けている患者であ る。 本発明の方法の目的は、患者の血漿が、選択されたフィブリノゲンレセプタ拮 抗薬がＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタに結合するときに形成されるＧＰＩＩｂ／ ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体に対する抗体を 含むかど うかを判定することである。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩ Ｉａレセプタ拮抗薬複合体は、本発明の方法のために、血小板あるいは精製血小 板上のＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板レセプタを含むが、これらに限定されない市 販のＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板レセプタ、ならびにＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ血小 板レセプタおよび精製ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板レセプタを、選択されたフィ ブリノゲンレセプタ拮抗薬で被覆して、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩ Ｉｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体を形成することによって調製できる。 危険性のある患者を同定するための方法は、患者の血漿をＧＰＩＩｂ／ＩＩＩ ａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と共にインキュベート して、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬： 血漿抗体複合体を形成し、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩ ａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を二次抗ヒト検出可能抗体と共にインキュベ ートして、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗 薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体を形成し、さらにＧＰＩＩｂ／Ｉ ＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿 抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体において二次抗ヒト検出可能抗体の存在を 検出することを含む。 本発明の方法では、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレ セプタ拮抗薬複合体を患者の血漿と共にインキュベートする。拮抗薬依存性抗体 を含む患者血漿は、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセ プタ拮抗薬：血漿抗体複合体の形成を誘発する。拮抗薬依存性抗体を含まない血 漿は、このインキュベーション段階後にＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩ Ｉｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を形成しない。インキュベーシ ョン段階後に形成される物質を洗浄して、形成されたＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセ プタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体に関係のない物質 を除去する。 次に、上述したインキュベーション段階後に形成される物質を、二次抗ヒト検 出可能抗体（たとえば蛍光標識あるいは酵素（たとえば該酵素によって作用を受 ける基質と接触したとき検出可能な反応を誘導するホースラディッシュペルオキ シダーゼ）のような検出可能なマーカーと結合した抗ヒトＩｇＧ、抗ヒトＩｇＭ 、抗ヒトＩｇＡ）と共にインキュベートする。患者 の血漿を加えた後にＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセ プタ拮抗薬：血漿抗体複合体が形成されれば、その後二次抗ヒト検出可能抗体が ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗 体複合体と複合し、洗浄段階において洗い流されることはない。患者の血漿を加 えた後にＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬 ：血漿抗体複合体が形成されなければ、その後二次抗体はＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ レセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と複合せず、その後の洗 浄段階において洗い流される。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／Ｉ ＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体の存在の検出 は、患者が血小板と反応性である拮抗薬依存性抗体を有していること、そして患 者が選択されたフィブリノゲンレセプタ拮抗薬の摂取後血小板減少症を発症する 危険性があることの指標である。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体が存在しな いことは、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗 薬：血漿抗体複合体が形成されなかったこと、そして患者がフィブ リノゲンレセプタ拮抗薬が誘発する血小板減少症を発症する危険性がないことを 示す。 より特定すると、二次抗ヒト検出可能抗体は、たとえば、蛍光標識Ｆ（ａｂ’ ）２抗ＩｇＧ、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＭ、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗Ｉ ｇＡ、酵素標識ＩｇＧ、酵素標識ＩｇＭ、あるいは酵素標識ＩｇＡである。蛍光 標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＧ、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＭ、蛍光標識Ｆ（ ａｂ’）２抗ＩｇＡ抗体は、フルオレセインによって適切に標識することができ る。酵素標識ＩｇＧ、酵素標識ＩｇＭ、および酵素標識ＩｇＡ抗体は、ホースラ ディッシュペルオキシダーゼのような酵素によって適切に標識することができる 。 本発明はまた、患者の血漿をＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／Ｉ ＩＩａレセプタ拮抗薬複合体と反応させて第一反応産物を形成し、第一反応産物 を二次抗ヒト検出可能抗体と反応させて第二反応産物を形成し、第二反応産物か らＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬複合体 と複合していない物質を洗い流して、洗浄された第二反応産物を形成し、洗浄さ れた第二反応産物中に二次抗ヒト検出可能抗体が存在しないことを検出すること を含む、フィブ リノゲンレセプタ拮抗薬誘発の血小板減少症を発症する危険性のない患者を同定 する方法である。 本発明の方法に適する選択されたＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬は、フ ィブリノゲンがＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板レセプタに結合するのを阻害するた めに有用な拮抗薬である。そのような拮抗薬は当該技術において周知である。 ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタに対する拮抗薬は、たとえば、米国特許第５， ４７０，８４９号、５，４６３，０１１号、５，４５５，２４３号、５，４５１ ，５７８号、５，４４６，０５６号、５，４４１，９５２号、５，４２２，２４ ９号、５，４１６，０９９号、５，４０５，８５４号、５，３９７，７９１号、 ５，３９３，７６０号、５，３８９，６３１号、５，３８０，７１３号、５，３ ７４，６２２号、５，３５８，９５６号、５，３４４，７８３号、５，３４０， ７９８号、５，３３８，７２３号、５，３３４，５９６号、５，３２１，０３４ 号、５，３１８，８９９号（たとえば環状ヘプタペプチドＭｐｒ−（アセトイミ ジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂、Ｍｐｒ− （アセトイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｐｅｎ−ＮＨ₂ 、Ｍｐｒ−（フェニ ルイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｐｅｎ−ＮＨ₂、お よびＭｐｒ−（フェニルイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ −Ｃｙｓ−ＮＨ₂、ここで、Ｍｐｒはメルカプトプロピオニルである）、５，３ １２，９２３号、５，２９４，６１６号、５，２９２，７５６号（たとえば２− Ｓ−（ｎ−ブチルスルホニルアミノ）−３［４−（ピペリジン−４−イル）ブチ ルオキシフェニル］プロピオン酸ヒドロクロリド）、５，２８１，５８５号、５ ，２７２，１５８号、５，２６４，４２０号、５，２６０，３０７号、５，２３ ９，１１３号（たとえばエチル３−［［４−［［４−（アミノイミノメチル）フ ェニル］アミノ］−１，４−ジオキソブチル］アミノ］−４−ペンチノエート） 、５，２２７，４９０号、５，２０６，３７３号、４，７０３，０３６号（たと えばＮ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−ホルミル−４− グアニジノブチル］−Ｌ−プロリンアミド）、ＥＰ５０５８６８号（たとえば（ （１−（２−（（４（アミノイミノメチル）ベンゾイル）アミノ）−３−（４− ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロピル）−４−ピペリジニル）オキシ）− （Ｓ）−酢酸）、ＷＯ９３１１１５２号（たとえばＮ−（２−（２− （（（３−（（アミノイミノメチル）アミノ）プロピル）アミノ）−カルボニル ）−１−ピペリジニル）−１−（シクロヘキシルメチル）−２−オキソエチル） −（Ｒ，Ｓ）−グリシン、ＷＯ９４１８９８１号（たとえば２（Ｓ）−［（ｐ− トルエンスルホニル）アミノ］−３−［［［５，６，７，８−テトラヒドロ−４ −オキソ−５−［２−（ピペリジン−４−イル）エチル］−４Ｈ−ピラゾロ−［ １，５−ａ］［１，４］ジアゼピン−２−イル］カルボニル］−アミノ］プロピ オン酸）、ＷＯ９５１４６８３号（たとえばメチル−Ｎ³−［２−｛３−（４− ホルムアミジノフェニル）−イソキサゾリン−５（Ｒ）−イル｝−アセチル］− Ｎ²−（ｎ−ブチルオキシカルボニル）−２，３−（Ｓ）−ジアミノプロピオネ ートアセテート塩）、ＥＰ３３３ ３５６号およびＷＯ９４２２８２０号の中に 記述されている。これらは、フィブリノゲンの結合を阻害し、血餅の形成を抑制 する上で有用であると述べられている。実施例１ ＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬治療およびＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬誘発の 血小板減少症を発症する危険性のある患者を同定するための方法 急性冠状動脈虚血性症候群の患者は血管形成術による冠状動脈再生を受ける。 血管形成術の少なくとも２時間前とその後毎日、アスピリンを３２５ｍｇの用量 で投与する。ヘパリンを１０，０００〜１２，０００単位の初回ボーラス用量で 静脈内投与し、その後１５分間隔で３０００単位までの漸増ボーラス用量を投与 するが、処置の間に２０，０００単位以上は投与しない。目標は、手術中に３０ ０〜３５０秒間の活性凝固時間を維持することである。ヘパリンを持続注入によ って少なくとも１２時間継続し、対照値の１．５〜２．５倍の活性化部分トロン ボプラスチン時間を維持する。退院時には３２５ｍｇ／日の用量のアスピリンが 必要である。 患者が、ＷＯ９４／１８９８１号に述べられている、フィブリノゲンレセプタ ｇｐＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬、２（Ｓ）−［（ｐ−トルエンスルホニル）アミノ ］−３−［［［５，６，７，８−テトラヒドロ−４−オキソ−５−［２−（ピペ リジン−４−イル）エチル］−４Ｈ−ピラゾロ−［１，５−ａ］［１，４］ジア ゼピン−２−イル］カルボニル］−アミノ］プロピオン酸（化合物１−１）１５ ｍｇを含有する経口錠剤を服用するようにスケジュールする。化合物１−１によ る治療を開始する前に、 患者が化合物１−１によって誘発される血小板減少症を発症する危険性があるか どうかを調べるために患者をスクリーニングする。患者から血漿サンプルを採取 し、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合物１−１複合体と共にインキュベート して、拮抗薬依存性血漿抗体を当該複合体に結合させ、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレ セプタ：化合物１−１：血漿抗体複合体を形成させる。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレ セプタ：化合物１−１：血漿抗体複合体をホースラディッシュペルオキシダーゼ 抗ヒトＩｇＧと共にインキュベートして、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合 物１−１：血漿抗体：ホースラディッシュペルオキシダーゼ抗ヒトＩｇＧ複合体 を形成させる。ホースラディッシュペルオキシダーゼ誘導の酵素反応を観察する ことによりＧＰＩＩｂ／１１Ｉａレセプタ：化合物１−１：血漿抗体：ホースラ ディッシュペルオキシダーゼ抗ヒトＩｇＧ複合体中のホースラディッシュペルオ キシダーゼの存在を検出し、これによってＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合 物１−１複合体に対する血小板減少性反応に結びつく血漿抗体の存在を確認する 。このようにして、患者が拮抗薬誘発の血小板減少症を発症する危険性があるこ とが判定される。実施例２ ＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬治療およびＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬誘発の 血小板減少症を発症する危険性のない患者を同定するための方法 急性冠状動脈虚血性症候群の患者は血管形成術による冠状動脈再生を受ける。 血管形成術の少なくとも２時間前とその後毎日、アスピリンを３２５ｍｇの用量 で投与する。ヘパリンを１０，０００〜１２，０００単位の初回ボーラス用量で 静脈内投与し、その後１５分問隔で３０００単位までの漸増ボーラス用量を投与 するが、処置の間に２０，０００単位以上は投与しない。目標は、手術中に３０ ０〜３５０秒間の活性凝固時間を維持することである。ヘパリンを持続注入によ って少なくとも１２時間継続し、対照値の１．５〜２．５倍の活性化部分トロン ボプラスチン時間を維持する。退院時には３２５ｍｇ／日の用量のアスピリンが 必要である。 患者が、ＷＯ９４／１８９８１号に述べられている、フィブリノゲンレセプタ ｇｐＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬、２（Ｓ）−［（ｐ−トルエンスルホニル）アミノ ］−３−［［［５，６，７，８−テトラヒドロ−４−オキソ−５−［２−（ピペ リジン−４− イル）エチル］−４Ｈ−ピラゾロ−［１，５−ａ］［１，４］ジアゼピン−２− イル］カルボニル］−アミノ］プロピオン酸（化合物１−１）１５ｍｇを含有す る経口錠剤を服用するようにスケジュールする。化合物１−１による治療を開始 する前に、患者が化合物１−１によつて誘発される血小板減少症を発症する危険 性があるかどうかを調べるために患者をスクリーニングする。患者から血漿サン プルを採取し、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合物１−１複合体と共にイン キュベートして、拮抗薬依存性血漿抗体を当該複合体に結合させてＧＰＩＩｂ／ ＩＩＩａレセプタ：化合物１−１：血漿抗体複合体を形成することを試みる。し かし、患者血漿抗体は存在せず、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ化合物１−１： 血漿抗体複合体は形成されない。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合物１−１ 複合体をホースラディッシュペルオキシダーゼ抗ヒトＩｇＧと共にインキュベー トする。血漿抗体複合体が形成されないので、ホースラディッシュペルオキシダ ーゼ抗ヒトＩｇＧはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：化合物１−１複合体と結合 しない。ホースラディッシュペルオキシダーゼ抗ヒトＩｇＧがＧＰＩＩｂ／ＩＩ Ｉａレセプタ：化合物１−１複合体と複合しないため、ホースラ ディッシュペルオキシダーゼ抗ヒトＩｇＧは洗い流される。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩ ａレセプタ：化合物１−１複合体を、ホースラディッシュペルオキシダーゼ抗ヒ トＩｇＧの存在を同定する条件に接触させることは、酵素が存在しないこと、お よび患者血漿が化合物１−１誘発の血小板減少症に結びつく血漿抗体を有してい ないこと、そして患者に血小板減少症を発症する危険性がないことを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号 ９７０２８２２．９ (32)優先日 平成９年２月12日(1997．2．12) (33)優先権主張国 イギリス（ＧＢ） (31)優先権主張番号 ９７０５８５６．４ (32)優先日 平成９年３月21日(1997．3．21) (33)優先権主張国 イギリス（ＧＢ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＣＡ，ＪＰ，ＵＳ (72)発明者 ゴールド，ロバート・ジエイ アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカー ン・アベニユー・126

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．患者の血漿をＧＰＴＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプ タ拮抗薬複合体と共にインキュベートして、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：Ｇ ＰＩ１ｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を形成し、ＧＰＩＩｂ／Ｉ ＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体複合体を二次 抗ヒト検出可能抗体と共にインキュベートして、ＧＰＩＩｂ／ＴＩＩａレセプタ ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複 合体を形成し、さらにＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレ セプタ拮抗薬：血漿抗体：二次抗ヒト検出可能抗体複合体において二次抗ヒト検 出可能抗体の存在を検出することを含む、フィブリノゲンレセプタ拮抗薬誘発の 血小板減少症を発症する危険性のある患者を同定するための方法。 ２．拮抗薬が Ｍｐｒ−（アセトイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｃｙ ｓ−ＮＨ₂、 Ｍｐｒ−（アセトイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒ ｐ−Ｐｈｅ−Ｐｅｎ−ＮＨ₂、 Ｍｐｒ−（フェニルイミジル−Ｌｙs)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｐｅ ｎ−ＮＨ₂、 Ｍｐｒ−（フェニルイミジル−Ｌｙｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｃ ｙｓ−ＮＨ₂、 Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−ホルミル−４−グア ニジノブチル］−Ｌ−プロリンアミド）、 （（１−（２−（（４（アミノイミノメチル）ベンゾイル）アミノ）−３−（４ −ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロピル）−４−ピペリジニル）オキシ） −（Ｓ）−酢酸、 エチル３−［［４−［［４−（アミノイミノメチル）フェニル］アミノ］−１， ４−ジオキソブチル］アミノ］−４−ペンチノエート、 Ｎ−（２−（２−（（（３−（（アミノイミノメチル）アミノ）プロピル）アミ ノ）−カルボニル）−１−ピペリジニル）−１−（シクロヘキシルメチル）−２ −オキソエチル）−（Ｒ，Ｓ）−グリシン、 （２−Ｓ−（ｎ−ブチルスルホニルアミノ）−３［４−（ピペリジン−４−イル ）ブチルオキシフェニル］プロピオン酸ヒド ロタロリド、 エチル３−［［４−［［４−（アミノイミノメチル）フェニル］アミノ］−１， ４−ジオキソブチル］アミノ］−４−ペンチノエート、 ２（Ｓ）−［（ｐ−トルエンスルホニル）アミノ］−３−［［［５，６，７，８ −テトラヒドロ−４−オキソ−５−［２−（ピペリジン−４−イル）エチル］− ４Ｈ−ピラゾロ−［１，５−ａ］［１，４］ジアゼピン−２−イル］カルボニル ］−アミノ］プロピオン酸、 （Ｒ）−メチル−３−［［［３−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−４ ，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］アセチル］アミノ］−Ｎ−（ブトキシカ ルボニル）−Ｌ−アラニンモノアセテート、 およびそれらの製薬学的に許容しうる塩 からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。 ３．二次抗ヒト検出可能抗体が、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＧ、蛍光標識Ｆ （ａｂ’）２抗ＩｇＭ、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＡ、酵素標識ＩｇＧ、酵 素標識ＩｇＭ、あるいは酵素標識ＩｇＡから選択される、請求項２に記載の方法 。 ４．蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＧ、蛍光標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＭ、蛍光 標識Ｆ（ａｂ’）２抗ＩｇＡ抗体がフルオレセインで標識されている、請求項３ に記載の方法。 ５．酵素標識ＩｇＧ、酵素標識ＴｇＭ、および酵素標識ＩｇＡ抗体がホースラデ ィッシュペルオキシダーゼで標識されている、請求項３に記載の方法。 ６．患者の血漿をＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプ タ拮抗薬複合体と共にインキュベートして第一反応産物を形成し、第一反応産物 を二次抗ヒト検出可能抗体と共にインキュベートして第二反応産物を形成し、第 二反応産物からＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ：ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａレセプタ 拮抗薬複合体と複合していない物質を洗い流して、洗浄された第二反応産物を形 成し、洗浄された第二反応産物中に二次抗ヒト検出可能抗体が存在しないことを 検出することを含む、フィブリノケンレセプタ拮抗薬誘発の血小板減少症を発症 する危険性のない患者を同定するための方法。