JP2001213875A

JP2001213875A - ３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘導体及び抗癌剤

Info

Publication number: JP2001213875A
Application number: JP2000018639A
Authority: JP
Inventors: Daisuke Kamimura; 大輔上村; Kiyotake Suenaga; 聖武末永; Kaoru Yamada; 薫山田; Akira Takada; 晃高田; Kazuyoshi Yazawa; 一良矢澤
Original assignee: Sagami Chemical Research Institute
Current assignee: Sagami Chemical Research Institute
Priority date: 2000-01-27
Filing date: 2000-01-27
Publication date: 2001-08-07

Abstract

(57)【要約】【課題】新規な構造を有する３，６−ジヒドロ−１，
２−ジオキシン誘導体及び抗癌剤を提供する。【解決手段】下記一般式【化１】（式中、Ｒ¹、Ｒ²は水素原子を表すか、または一体と
なって各々結合している炭素原子と共に炭素−炭素二重
結合を形成する。Ｒ³は水素原子または低級アルキル基
を表す。）で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体及びこの３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体又はその薬学上許容される塩を有効成分と
する抗癌剤。【効果】上記３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン
誘導体は白血病細胞等の癌細胞の増殖阻害活性を持ち、
例えば、抗癌剤等の医薬としての用途を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は癌細胞の増殖阻害活
性を持つ３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘導体
及びそれを有効成分とする抗癌剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】天然物質由来の抗癌剤はアドリアマイシ
ン、マイトマイシン等、数多く知られているが、必ずし
も満足の行かない治療成績や重篤な副作用等の点で問題
が残っており、医療の場では常により有効で、より副作
用の少ない薬剤が求められている。

【０００３】３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘
導体としては例えば、既に抗菌作用及び弱い細胞毒性を
示す物質として報告されているプラコルチン類等がある
（Higgs, M. D. and Faulkner, D. J., J. Org. Chem.,
43, 3454, 1978:、Gunasekera, S. P. et al., J. Nat
ural Products, 53, 669, 1990. 等）。しかしながら前
記一般式（１）で表されるような炭素骨格を有する誘導
体は未だ報告されておらず、また前記一般式（１）で表
される誘導体のように低濃度で腫瘍細胞の増殖を阻害す
る例も報告されていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明は、癌細
胞の増殖阻害活性を持ち、抗癌剤としての用途が期待さ
れる新規な物質を提供することを目的とする。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決するため鋭意検討した結果、沖縄県波照間島周辺海
域で採集したカイメンから分離した前記一般式（１）で
表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘導体
が、マウスリンパ性白血病細胞Ｐ３８８に対して強い増
殖阻害活性を有することを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は下記一般式（１）

【０００６】

【化３】（式中、Ｒ¹、Ｒ²は水素原子を表すか、または一体と
なって各々結合している炭素原子と共に炭素−炭素二重
結合を形成する。Ｒ³は水素原子または低級アルキル基
を表す。）で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体及び、下記一般式（１）

【０００７】

【化４】（式中、Ｒ¹、Ｒ²は水素原子を表すか、または一体と
なって各々結合している炭素原子と共に炭素−炭素二重
結合を形成する。Ｒ³は水素原子または低級アルキル基
を表す。）で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体又はその薬学上許容される塩を有効成分と
する抗癌剤を提供する。

【０００８】

【発明の実施の形態】前記一般式（１）中の低級アルキ
ル基としては炭素数１〜６のアルキル基、具体的にはメ
チル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチ
ル基、ペンチル基、ヘキシル基等を例示することができ
る。また、薬学上許容される塩とは、ナトリウム塩、カ
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウ
ム塩等を挙げることができる。

【０００９】本発明の上記一般式（１）で表される３，
６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘導体は、沖縄県波
照間島周辺海域で採集した海洋生物、例えばカイメン
（Ｐｌａｋｏｒｔｉｓｓｐ．）を有機溶媒で抽出後、
分離精製することにより、あるいは得られた化合物につ
いて公知の方法を用いて中和、エステル化等することに
よって得られる。

【００１０】抽出に用いられる溶媒としてはメタノー
ル、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム
等が挙げられ、クロマトグラフィはカラム、薄層及び高
速液体クロマトグラフィが用いられ、カラムクロマトグ
ラフィの充填剤としてはシリカゲルの他、セファデック
スＬＨ２０、逆相系のＲＰ−１８等が用いられ、薄層及
び高速液体クロマトグラフィの充填剤としては、シリカ
ゲルの他、ＲＰ−１８等が用いられる。

【００１１】本発明における前記一般式（１）に含まれ
る化合物としては具体的には、

【００１２】

【化５】で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオキシン誘導
体１ａ、及び１ｂが挙げられる。

【００１３】本発明の化合物は治療のために経口的ある
いは非経口的に投与することができる。経口投与剤とし
ては散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの固形製剤あ
るいはシロップ剤、エリキシル剤などの液状製剤とする
ことができる。また、非経口投与剤として注射剤、粘膜
投与剤、外用剤とすることができる。

【００１４】これらの製剤は活性成分に薬理学的、製剤
学的に認容される製造助剤を加えることにより常法に従
って製造される。更に公知の技術により持続性製剤とす
ることも可能である。当該製造助剤を用いる場合は、本
発明の製剤中の有効成分の配合量は通常は０．１〜１０
重量％、好ましくは０．２〜５重量％である。

【００１５】上記製造助剤として、内服用製剤（経口
剤）、注射用製剤（注射剤）、粘膜投与剤（バッカル、
トロ−チ、坐剤等）、外用剤（軟膏、貼付剤等）などの
投与経路に応じた適当な製剤用成分が使用される。例え
ば、経口剤および粘膜投与剤にあっては、賦形剤（例：
澱粉、乳糖、結晶セルロース、乳酸カルシウム、メタケ
イ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸、マンニトー
ル）、結合剤（例えばヒドロキシプロピルセルロース、
ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（例：カルボキシメ
チルセルロ−ス、カルボキシメチルセルロースカルシウ
ム）、滑沢剤（例：ステアリン酸マグネシム、タル
ク）、コ−ティング剤（例：ヒドロキシエチルセルロ−
ス）、矯味剤などの製剤用成分が、また注射剤にあって
は、水性注射剤を構成し得る溶解剤ないし溶解補助剤
（例：注射用蒸留水、生理食塩水、プロピレングリコ−
ル）、懸濁剤（例：ポリソルベ−ト８０などの界面活性
剤）、ｐＨ調整剤（例：有機酸またはその金属塩）、安
定剤などの製剤用成分が、さらに外用剤にあっては、水
性ないし油性の溶解剤ないし溶解補助剤（例：アルコ−
ル、脂肪酸エステル類）、粘着剤（例：カルボキシビニ
ルポリマ−、多糖類）、乳化剤（例：界面活性剤）、安
定剤などの製剤用成分が使用される。

【００１６】上記構成を有する本発明の薬剤は、公知の
製造法、例えば日本薬局方第１０版製剤総則記載の方法
ないし適当な改良を加えた方法によって製造することが
できる。

【００１７】本発明に係る有効成分の投与量は、成人を
治療する場合で１〜１０００mgであり、これを１日２〜
３回に分けて投与することが好ましい。この投与量は、
患者の年齢、体重および症状によって増減することがで
きる。

【００１８】以下、実施例及び試験例により詳細に説明
する。

【００１９】

【実施例】

【００２０】実施例１．カイメンの抽出と３，６−ジヒ
ドロ−１，２−ジオキシン誘導体（１ａ）の分離精製沖縄県波照間島周辺海域の水深２０ｍで採集したカイメ
ン（Plakortis lita）３８０ｇをはさみで細断した後、
アセトンを加えてウォーリングブレンダーを用いて粉砕
した。室温で７日間静置後、濾過し、濾液（１Ｌ）を加
熱減圧下有機溶媒を留去した。水性残渣を酢酸エチル
（０．５Ｌ）で３回抽出し、合わせて溶媒を留去濃縮し
て、酢酸エチル抽出物 7.7 gを得た。この粗生成物を９
０％メタノール（３００ｍＬ）、ヘキサン（３×３００
ｍＬ）で分配し、得られた９０％メタノール可溶物２．
３ｇを６０％メタノール（２００ｍＬ）、ジクロロメタ
ン（２×２００ｍＬ）で分配した。ジクロロメタン層を
加熱減圧下有機溶媒を留去し、ジクロロメタン抽出物を
２．２ｇ得た。

【００２１】内径２ｃｍのガラスカラムにベンゼンで懸
濁させたシリカゲル４０ｇを充填し、少量のベンゼンに
溶解したジクロロメタン抽出物２．２ｇをこれに吸着さ
せた。このカラムに順次ベンゼン、ベンゼン／酢酸エチ
ル＝１９／１、ベンゼン／酢酸エチル＝７／３、酢酸エ
チル、酢酸エチル／メタノール＝７／３を各２４０ｍＬ
流し、最後にメタノールで流し出した。ベンゼン／酢酸
エチル＝１９／１溶出画分の最後の１／２及びベンゼン
／酢酸エチル＝７／３溶出画分の最初の１／６をまとめ
て濃縮し黄色油状物０．９４ｇを得た。

【００２２】内径１．５ｃｍのガラスカラムにメタノー
ルで懸濁した逆相系ＲＰ−１８（ナカライテクス（株）
製Ｃｏｓｍｏｓｉｌ７５Ｃ₁₈−ＯＰＮ）、２０ｇを
充填した後６０％メタノールで十分置換し、少量の６０
％メタノールに溶解した上記黄色油状物を吸着させた。
このカラムに６０％メタノール２４０ｍＬ、７０％メタ
ノール１６０ｍＬ、８０％メタノール１２０ｍＬ、メタ
ノール１２０ｍＬを順次流し、クロロホルム／メタノー
ル＝９／１で流し出した。７０%メタノール溶出画分の
最後の２／３及び８０％メタノール溶出画分の最初の１
／６をまとめて濃縮し３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体（１ａ）を１４５ｍｇ、黄色油状物として
得た。

【００２３】分子式 : C₁₈H₃₀O₄ ¹ H-NMR(800MHz,CDCl₃):δ0.79(3H, t, J=7.4Hz, 14-H),
0.88(3H, t, J=7.5Hz,16-H), 0.96(3H, t, J=7.5Hz, 1
2-H), 1.07(3H, t, J=7.3Hz, 18-H), 1.15(1H,m, 17-H
a), 1.37(1H, m, 17-Hb), 1.50(1H, dd, J=8.1, 14.6H
z, 7-Ha), 1.58(1H, dd, J=3.7, 14.6Hz, 7-Hb), 1.63
(1H, dq, J=7.5, 14.1Hz, 15-Ha), 1.74(1H, dq, J=7.
5, 14.1Hz, 15-Hb), 1.92(1H, m, 8-H), 1.98(4H, comp
lex, 11-Ha,11-Hb, 13-Ha, 13-Hb), 2.61(1H, dd, J=3.
0, 16.2Hz, 2-Ha), 2.94(1H, dd, J=9.5, 16.2Hz, 2-H
b), 4.59(1H, brd, J=8.1Hz, 3-H), 5.08(1H, dd, J=9.
1, 15.0Hz, 9-H), 5.28(1H, dt, J=6.6, 15.0Hz, 10-
H), 5.51(1H, ｄ, J=1.5Hz, 5-H).¹³ C-NMR(200MHz,CDCl₃) :δ8.1(q, 16-C), 11.6(q, 14-
C), 11.6(q, 18-C), 14.1(q, 12-C), 25.0(t, 13-C), 2
5.7(t, 11-C), 30.0(t, 17-C), 31.0(t, 15-C),36.7(t,
2-C), 39.7(d, 8-C), 40.7(t, 7-C), 76.4(d, 3-C), 8
3.0(s, 6-C), 125.6(d, 5-C), 131.8(d, 10-C), 134.3
(d, 9-C), 136.4(s, 4-C), 176.4(s, 1-C). IR(CHCl₃, cm^-1) : 2500 - 3400(br), 1715. FABMS(m/z) : 333(M+Na)⁺. FABHRM(m/z) : 333.2050(calcd. for C₁₈H₃₀O₄Na, 333.
2042). 旋光度 : ［α］²⁹ _D -102°(C 1.56, MeOH).

【００２４】実施例２．３，６−ジヒドロ−１，２−ジ
オキシン誘導体（１ｂ）の分離精製上記ＯＤＳカラムクロマト処理の、８０％メタノール溶
出画分の最後の１／２を濃縮し、黄色油状物を１５０ｍ
ｇ得た。このうち４７．２ｍｇを高速液体クロマトグラ
フィ（ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＯＤＳカラム（φ２０×２
５０ｍｍ）、０．１％トリフルオロ酢酸含有８５％メタ
ノール、流速５ｍＬ／ｍｉｎ、検出２１５ｎｍ）で分
離し、保持時間７０．６分に現われたピークに対応する
画分を採り、濃縮して３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体（１ｂ）を９．５ｍｇ、黄色油状物とし
て得た。

【００２５】分子式 : C₁₈H₃₂O₄ ¹ H-NMR(800MHz, CDCl₃) :δ0.82(3H, t, J=7.3Hz, 18-
H), 0.89(3H, t, J=7.1Hz, 12-H), 0.90(3H, t, J=7.3H
z, 16-H), 1.08(3H, t, J=7.3Hz, 14-H), 1.18(2H, com
plex, 9-Ha, 10-Ha), 1.19(1H, m, 11-Ha), 1.24(1H,
m, 17-Ha), 1.25(2H, complex, 9-Hb, 10-Hb), 1.26(1
H, m, 11-Hb), 1.29(1H, m, 8-H), 1.35(1H,ｍ, 17-H
b), 1.36(1H, dd, J=4.4, 15.0Hz, 7-Ha), 1.50(1H, d
d, J=5.7, 15.0Hz, 7-Hb), 1.66(1H, dq, J=7.3, 13.9H
z, 15-Ha), 1.76(1H, dq, J=7.3, 13.9Hz, 15-Hb), 2.0
2(2H, complex, 13-Ha, 13Hb), 2.62(1H, brd, J=13.6H
z, 2-Ha),2.93(1H, brs, 2-Hb), 4.58(1H, brd, J=7.3,
3-H), 5.51(1H, s, 5-H).¹³C-NMR(100MHz, CDCl₃) :δ
8.2(q, 16-C), 10.7(q, 18-C), 11.7(q, 14-C), 14.1
(q, 12-C), 23.0(t, 11-C), 24.9(t, 13-C), 27.7(t, 1
7-C), 29.0(t, 10-C),30.8(t, 15-C), 34.2(t, 9-C), 3
4.3(d, 8-C), 37.3(t, 2-C), 39.3(t, 7-C),77.2(d, 3-
C), 83.5(s, 6-C), 125.2(d, 5-C), 137.5(s, 4-C), 17
6.3(s, 1-C).IR(CHCl₃, cm^-1) : 2500-3400(br), 1715 FABMS(m/z) : 335(M+Na)⁺. FABHRM(m/z) : 335.2226(calcd. for C₁₈H₃₂O₄Na, 335.
21980). 旋光度 :［α］²⁹ _D -28°(C 0.42, MeOH).

【００２６】試験例１．マウスリンパ性白血病細胞（Ｐ
３８８）を２−ヒドロキシエチルジスルフィド５μＭ、
硫酸カナマイシン１００μｇ／ｍＬを添加した１０％牛
胎児血清含有のＲＰＭＩ−１６４０培地に加え、培養細
胞を１ｘ１０⁴ 個／ｍＬに調製し、前記３，６−ジヒド
ロ−１，２−ジオキシン誘導体１ａおよび１ｂを所定の
濃度になるように添加し、ＣＯ₂ 培養器（ＣＯ₂ ５％、
湿度１００％、３７℃）で４日間培養した。ＭＴＴ比色
法により生存細胞数を計測して、対照群に対する増殖阻
害率から求めた５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ₅₀）を表
１に示す。

【００２７】表１Ｐ３８８増殖阻害活性試験結果 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 化合物ＩＣ₅₀（μｇ／ｍＬ） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ １ａ０．００５５１ｂ０．００３３ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

【００２８】

【発明の効果】本発明の３，６−ジヒドロ−１，２−ジ
オキシン誘導体は白血病細胞等の癌細胞の増殖阻害活性
を持ち、例えば、抗癌剤等の医薬としての用途を有す
る。

フロントページの続き (72)発明者矢澤一良神奈川県藤沢市鵠沼松が岡３−19−９Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 BA14 GA17 MA01 MA04 NA05 NA06 NA14 ZB26 ZB27

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式（１）、【化１】（式中、Ｒ¹、Ｒ²は水素原子を表すか、または一体と
なって各々結合している炭素原子と共に炭素−炭素二重
結合を形成する。Ｒ³は水素原子または低級アルキル基
を表す。）で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体。
【請求項２】下記一般式（１）、【化２】（式中、Ｒ¹、Ｒ²は水素原子を表すか、または一体と
なって各々結合している炭素原子と共に炭素−炭素二重
結合を形成する。Ｒ³は水素原子または低級アルキル基
を表す。）で表される３，６−ジヒドロ−１，２−ジオ
キシン誘導体又はその薬学上許容される塩を有効成分と
する抗癌剤。