JP2001172296A - 軟骨型プロテオグリカンの精製方法 - Google Patents
軟骨型プロテオグリカンの精製方法Info
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- JP2001172296A JP2001172296A JP33137599A JP33137599A JP2001172296A JP 2001172296 A JP2001172296 A JP 2001172296A JP 33137599 A JP33137599 A JP 33137599A JP 33137599 A JP33137599 A JP 33137599A JP 2001172296 A JP2001172296 A JP 2001172296A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】本発明の目的は軟骨型プロテオグリカンを完全
な形で容易に、且つ、安価に精製する方法を提供する事
を目的とする。 【構成】鮭の鼻軟骨から軟骨型プロテオグリカンを分離
精製することを特徴とする軟骨型プロテオグリカンの精
製方法である。
な形で容易に、且つ、安価に精製する方法を提供する事
を目的とする。 【構成】鮭の鼻軟骨から軟骨型プロテオグリカンを分離
精製することを特徴とする軟骨型プロテオグリカンの精
製方法である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は軟骨型プロテオグリ
カンの新規な精製方法に関する。
カンの新規な精製方法に関する。
【０００２】
【従来技術】プロテオグリカンは、生体内に複合糖質の
一種としてコラーゲン、ヒアルロン酸とともに細胞と細
胞の間にある細胞外マトリックスの主成分として存在す
る（図１）。そして、その構造は、単独では、分子量数
万から数十万のコアタンパク質に分子量数千から数十万
の糖鎖グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）が、数本から数
十本結合している（図２）。ここで、ＧＡＧとは、プロ
テオグリカンの代謝物であり、その基本骨格によりコン
ドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など数種のものがあ
り、各々生物活性ドメインを持つ。ＧＡＧは、基本的に
はアミノ糖とウロン酸が結合したもの二糖の繰り返し構
造から成る直鎖状の多糖で、ヒアルロン酸以外は、コア
タンパク質に結合してプロテオグリカンの形で存在して
いる。ところで、このプロテオグリカンの従来の精製方
法は、主として牛や鯨等の軟骨より超遠心機により分離
した後、イオン交換樹脂を用いたカラムクロマトグラフ
ィー等の方法によっているが、操作が煩雑なうえ、収率
も低く、又原材料の安価な入手も困難なため、非常に高
コストである。
一種としてコラーゲン、ヒアルロン酸とともに細胞と細
胞の間にある細胞外マトリックスの主成分として存在す
る（図１）。そして、その構造は、単独では、分子量数
万から数十万のコアタンパク質に分子量数千から数十万
の糖鎖グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）が、数本から数
十本結合している（図２）。ここで、ＧＡＧとは、プロ
テオグリカンの代謝物であり、その基本骨格によりコン
ドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など数種のものがあ
り、各々生物活性ドメインを持つ。ＧＡＧは、基本的に
はアミノ糖とウロン酸が結合したもの二糖の繰り返し構
造から成る直鎖状の多糖で、ヒアルロン酸以外は、コア
タンパク質に結合してプロテオグリカンの形で存在して
いる。ところで、このプロテオグリカンの従来の精製方
法は、主として牛や鯨等の軟骨より超遠心機により分離
した後、イオン交換樹脂を用いたカラムクロマトグラフ
ィー等の方法によっているが、操作が煩雑なうえ、収率
も低く、又原材料の安価な入手も困難なため、非常に高
コストである。
【０００３】細胞外マトリックスの各分子は、細胞外マ
トリックス中の他の分子や細胞と結合、あるいは接着し
て相互作用し、組織の構造支持体となると同時に、細胞
の形や、増殖、分化、移動、代謝などを調節している。
これらの分子やＧＡＧは、単独でも水分保持、補充、解
毒、鎮痛などの機能をもつが、互いに結合、あるいは接
着し、巨大な構造になって相互作用したときには、より
大きな効果を発揮する。また、プロテオグリカンは、コ
ラーゲン、ヒアルロン酸、ＧＡＧのみの構造よりも、巨
大かつ複雑であるため、単独でも他より高い水分保持、
補充能力をもつとともに、ＧＡＧ糖鎖部分の種類や長さ
に依存した他の機能をも期待できる。しかも、将来、糖
鎖の組み換えとそのタンパク質への導入が容易になれ
ば、プロテオグリカンの機能の幅も広がることが期待さ
れる。
トリックス中の他の分子や細胞と結合、あるいは接着し
て相互作用し、組織の構造支持体となると同時に、細胞
の形や、増殖、分化、移動、代謝などを調節している。
これらの分子やＧＡＧは、単独でも水分保持、補充、解
毒、鎮痛などの機能をもつが、互いに結合、あるいは接
着し、巨大な構造になって相互作用したときには、より
大きな効果を発揮する。また、プロテオグリカンは、コ
ラーゲン、ヒアルロン酸、ＧＡＧのみの構造よりも、巨
大かつ複雑であるため、単独でも他より高い水分保持、
補充能力をもつとともに、ＧＡＧ糖鎖部分の種類や長さ
に依存した他の機能をも期待できる。しかも、将来、糖
鎖の組み換えとそのタンパク質への導入が容易になれ
ば、プロテオグリカンの機能の幅も広がることが期待さ
れる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】ところで、従来プロテ
オグリカンは、牛や鯨等の軟骨より超遠心機により分離
した後、陰イオン交換樹脂を用いたカラムクロマトグラ
フィー等の方法により精製しているが、操作が煩雑なう
え、収率も低く、そのため現時点ではこのプロテオグリ
カンは非常に高価で稀少価値の高い物質であり、その有
用性を調べるための供給は難しい。また、サケ鼻軟骨よ
り糖鎖（ＧＡＧ）のみの単離はされているが、プロテオ
グリカンとしての完全な形での単離及び利用はされてい
ない。そこで、本発明者はプロテオグリカンを完全な形
で安価に精製すべく種々検討した結果、サケ鼻軟骨より
プロテオグリカンを完全な形で抽出することに成功し、
本発明を完成したもので、本発明の目的は軟骨型プロテ
オグリカンを完全な形で容易に、且つ、安価に精製する
方法を提供する。
オグリカンは、牛や鯨等の軟骨より超遠心機により分離
した後、陰イオン交換樹脂を用いたカラムクロマトグラ
フィー等の方法により精製しているが、操作が煩雑なう
え、収率も低く、そのため現時点ではこのプロテオグリ
カンは非常に高価で稀少価値の高い物質であり、その有
用性を調べるための供給は難しい。また、サケ鼻軟骨よ
り糖鎖（ＧＡＧ）のみの単離はされているが、プロテオ
グリカンとしての完全な形での単離及び利用はされてい
ない。そこで、本発明者はプロテオグリカンを完全な形
で安価に精製すべく種々検討した結果、サケ鼻軟骨より
プロテオグリカンを完全な形で抽出することに成功し、
本発明を完成したもので、本発明の目的は軟骨型プロテ
オグリカンを完全な形で容易に、且つ、安価に精製する
方法を提供する。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、鮭の鼻軟骨か
ら分離精製を特徴とする軟骨型プロテオグリカンの精製
方法であり、その方法として、鮭の鼻軟骨を粉砕、脱脂
処理を施して得た脱脂乾燥粉末を抽出溶媒で抽出し、得
られた抽出液から粗プロテオグリカンを分離精製し、し
かる後、透析を行うことを特徴とする。抽出するに当た
り使用する抽出溶液は、タンパク質分解酵素阻害剤を含
むことが望ましい。
ら分離精製を特徴とする軟骨型プロテオグリカンの精製
方法であり、その方法として、鮭の鼻軟骨を粉砕、脱脂
処理を施して得た脱脂乾燥粉末を抽出溶媒で抽出し、得
られた抽出液から粗プロテオグリカンを分離精製し、し
かる後、透析を行うことを特徴とする。抽出するに当た
り使用する抽出溶液は、タンパク質分解酵素阻害剤を含
むことが望ましい。
【０００６】
【発明の実施の態様】本発明について詳細に述べる。サ
ケ鼻軟骨は正式には吻軟骨と称されているものであり、
本発明ではこのサケ鼻軟骨を使用することを特徴として
いる。特にサケの種類には関係はなく、何れのサケも使
用できる。本発明ではこのサケ鼻軟骨を、約５ｍｍ四方
程度の細片に切断、粉砕後、脱脂処理を行なう。脱脂処
理に際して、使用する溶剤は特に限定はされないが、出
来る限り脱脂を完全に行なう。脱脂に使用する溶剤とし
ては通常の溶剤を使用することが出来るが、例えばアセ
トン、クロロホルム−メタノール混合溶剤等である。
ケ鼻軟骨は正式には吻軟骨と称されているものであり、
本発明ではこのサケ鼻軟骨を使用することを特徴として
いる。特にサケの種類には関係はなく、何れのサケも使
用できる。本発明ではこのサケ鼻軟骨を、約５ｍｍ四方
程度の細片に切断、粉砕後、脱脂処理を行なう。脱脂処
理に際して、使用する溶剤は特に限定はされないが、出
来る限り脱脂を完全に行なう。脱脂に使用する溶剤とし
ては通常の溶剤を使用することが出来るが、例えばアセ
トン、クロロホルム−メタノール混合溶剤等である。
【０００７】脱脂処理を施して得た乾燥粉末について抽
出処理を施す。抽出処理に使用する抽出溶媒としては
０．１５Ｍ ＫＣｌ溶液等が使用できるが、プロテオグ
リカン製品の均一性及び収率の点から４Ｍグアニジン塩
酸溶液を使用することが好ましい。抽出処理は１回でも
ある程度の量の粗プロテオグリカンが得られるが、粗プ
ロテオグリカンの収率を向上させるために２回程度行な
うことが有効である。１回目に使用する抽出溶媒と２回
目に使用する抽出溶媒とは同一であっても、また、異な
っていてもよい。抽出溶媒には各種タンパク質分解酵素
阻害剤を添加しておくことが好ましい。タンパク質分解
酵素阻害剤としてはフェニルメタンスルホニルフルオリ
ド（ＰＭＳＦ）、Ｎ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）、ペ
プスタチン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を使
用することが出来る。
出処理を施す。抽出処理に使用する抽出溶媒としては
０．１５Ｍ ＫＣｌ溶液等が使用できるが、プロテオグ
リカン製品の均一性及び収率の点から４Ｍグアニジン塩
酸溶液を使用することが好ましい。抽出処理は１回でも
ある程度の量の粗プロテオグリカンが得られるが、粗プ
ロテオグリカンの収率を向上させるために２回程度行な
うことが有効である。１回目に使用する抽出溶媒と２回
目に使用する抽出溶媒とは同一であっても、また、異な
っていてもよい。抽出溶媒には各種タンパク質分解酵素
阻害剤を添加しておくことが好ましい。タンパク質分解
酵素阻害剤としてはフェニルメタンスルホニルフルオリ
ド（ＰＭＳＦ）、Ｎ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）、ペ
プスタチン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を使
用することが出来る。
【０００８】抽出して得られた粗プロテオグリカンを分
離精製し、しかる後、透析を行なうことにより高純度の
プロテオグリカンを得ることができる。分離精製手段と
しては陰イオン交換樹脂等を使用し、また、透析にはセ
ルロースエステル透析チューブ等を使用する。分離精製
及び透析の条件としては、粗プロテオグリカン抽出液
に、直接陰イオン交換樹脂を添加し、吸収性の違いによ
り分離する。又、透析チューブは排除限界が分子量１０
０万のものを使用する。
離精製し、しかる後、透析を行なうことにより高純度の
プロテオグリカンを得ることができる。分離精製手段と
しては陰イオン交換樹脂等を使用し、また、透析にはセ
ルロースエステル透析チューブ等を使用する。分離精製
及び透析の条件としては、粗プロテオグリカン抽出液
に、直接陰イオン交換樹脂を添加し、吸収性の違いによ
り分離する。又、透析チューブは排除限界が分子量１０
０万のものを使用する。
【０００９】
【実施例】本発明を実施例をもって、更に具体的に説明
する。 実施例 青森県沿岸で採れたシロサケの頭部を−３０℃保存から
解凍（４℃、２０時間）し、生理的食塩水で洗浄後、カ
ミソリを用いて鼻軟骨を取り出した。サケ鼻軟骨は約８
００ｇ（５０匹相当）の鼻軟骨を出発材料として使用し
た。ピンセットを使って固形脂肪をできる限り除去した
後、冷アセトンと冷クロロホルムーメタノール（２：
１）を用いて脱脂し、デシケーター中、減圧乾燥を行
い、サケ鼻軟骨の脱脂乾燥粉末８２ｇを得た。これを各
種タンパク質分解酵素阻害剤（１ｍＭフエニルメタンス
ルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、０．０１Ｍエチレン
ジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、０．０１Ｍ Ｎ−エチル
マレイミド（ＮＥＭ）、３．６ｍＭペプスタチン）を含
む２０倍量（ｗ／ｖ）の４Ｍグアニジン塩酸溶液（５０
ｍＭトリス塩酸緩衝液、ｐＨ７．３）（以下これを抽出
溶媒１とする）中で、４℃にて２４時間抽出後、ステン
レス−スチール メッシュ（１５０μｍ）にて濾過し、
その濾液を１０，０００ｒｐｍ、４℃にて６０分間遠心
分離を行い、その上澄み（約１．４ｌ）を粗プロテオグ
リカン抽出画分（乾燥品としては３８ｇ）として得た。
この粗プロテオグリカン抽出画分に水を加えて２倍に稀
釈後、３倍量（v／v）の冷９５％（v／v）エタノール、
１．３％（ｗ／ｖ）酢酸カリウムを加え攪拌後、４℃に
て３０分間遠心分離を行い、その沈殿画分を回収した。
続いて、１ｌの７Ｍ尿素溶液（５０ｍＭトリス塩酸緩衝
液、ｐＨ７．３、前述と同じ各種タンパク質分解酵素阻
害剤を含む）（以下抽出溶媒２とする）に溶解し、それ
に抽出溶媒２で平衝化した１ｌ陰イオン交換樹脂（DEAE
−Sephacel）を加え、４℃にて２４時間放置した。同抽
出溶媒で陰イオン交換樹脂を十分に洗浄した。さらに、
０．２ＭＮａＣｌを含む抽出溶媒２で洗浄後、ＮａＣｌ
濃度を２．０Ｍに上げた抽出溶媒２でプロテオグリカン
を溶出させた。その溶出画分を水に対して十分に透析、
凍結乾燥し１．４ｇの高純度プロテオグリカンを得た。
得られたプロテオグリカンの物理化学的性質と純度につ
いて調べた。プロテオグリカンの組成分析の結果を表１
に示した。
する。 実施例 青森県沿岸で採れたシロサケの頭部を−３０℃保存から
解凍（４℃、２０時間）し、生理的食塩水で洗浄後、カ
ミソリを用いて鼻軟骨を取り出した。サケ鼻軟骨は約８
００ｇ（５０匹相当）の鼻軟骨を出発材料として使用し
た。ピンセットを使って固形脂肪をできる限り除去した
後、冷アセトンと冷クロロホルムーメタノール（２：
１）を用いて脱脂し、デシケーター中、減圧乾燥を行
い、サケ鼻軟骨の脱脂乾燥粉末８２ｇを得た。これを各
種タンパク質分解酵素阻害剤（１ｍＭフエニルメタンス
ルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、０．０１Ｍエチレン
ジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、０．０１Ｍ Ｎ−エチル
マレイミド（ＮＥＭ）、３．６ｍＭペプスタチン）を含
む２０倍量（ｗ／ｖ）の４Ｍグアニジン塩酸溶液（５０
ｍＭトリス塩酸緩衝液、ｐＨ７．３）（以下これを抽出
溶媒１とする）中で、４℃にて２４時間抽出後、ステン
レス−スチール メッシュ（１５０μｍ）にて濾過し、
その濾液を１０，０００ｒｐｍ、４℃にて６０分間遠心
分離を行い、その上澄み（約１．４ｌ）を粗プロテオグ
リカン抽出画分（乾燥品としては３８ｇ）として得た。
この粗プロテオグリカン抽出画分に水を加えて２倍に稀
釈後、３倍量（v／v）の冷９５％（v／v）エタノール、
１．３％（ｗ／ｖ）酢酸カリウムを加え攪拌後、４℃に
て３０分間遠心分離を行い、その沈殿画分を回収した。
続いて、１ｌの７Ｍ尿素溶液（５０ｍＭトリス塩酸緩衝
液、ｐＨ７．３、前述と同じ各種タンパク質分解酵素阻
害剤を含む）（以下抽出溶媒２とする）に溶解し、それ
に抽出溶媒２で平衝化した１ｌ陰イオン交換樹脂（DEAE
−Sephacel）を加え、４℃にて２４時間放置した。同抽
出溶媒で陰イオン交換樹脂を十分に洗浄した。さらに、
０．２ＭＮａＣｌを含む抽出溶媒２で洗浄後、ＮａＣｌ
濃度を２．０Ｍに上げた抽出溶媒２でプロテオグリカン
を溶出させた。その溶出画分を水に対して十分に透析、
凍結乾燥し１．４ｇの高純度プロテオグリカンを得た。
得られたプロテオグリカンの物理化学的性質と純度につ
いて調べた。プロテオグリカンの組成分析の結果を表１
に示した。
【００１０】
【表１】
【００１１】表１においてウロン酸及び硫酸はヘキソサ
ミンを１．００モルとしたときのモル比で、その値はそ
れぞれ０．９９と０．７７であり、ほぼ当量存在するこ
とが知られた。また、コアタンパク質は６．８６％（ｗ
／ｗ）であり、ウロン酸との比（コアタンパク質／ウロ
ン酸）は０．２１（ｗ／ｗ）であった。この値はプロテ
オグリカンの純度を示す一つの値であり、その理論値
０．２に近似していた。また、５〜１０％ポリアクリル
アミドゲルを使って、SDS−PAGEを行った。２０ｍＡ／
ゲルの条件で約２時間電気泳動した後、コマジーブリリ
アントブルーＲ−２５０でタンパク質染色を行った（図
３参照）。その結果、プロテオグリカンは分離ゲルには
入らず、分子量は少なくとも５００，０００以上である
ことが示された。さらに、他の染色されたバンドは見ら
れなかった。以上２つの結果は、このサケ鼻軟骨プロテ
オグリカンが高純度であることを示している。従って、
上述の実施例より５０匹分のサケ鼻軟骨を出発原料とし
て、約１．４ｇのプロテオグリカンを得ることに成功し
たことになる。
ミンを１．００モルとしたときのモル比で、その値はそ
れぞれ０．９９と０．７７であり、ほぼ当量存在するこ
とが知られた。また、コアタンパク質は６．８６％（ｗ
／ｗ）であり、ウロン酸との比（コアタンパク質／ウロ
ン酸）は０．２１（ｗ／ｗ）であった。この値はプロテ
オグリカンの純度を示す一つの値であり、その理論値
０．２に近似していた。また、５〜１０％ポリアクリル
アミドゲルを使って、SDS−PAGEを行った。２０ｍＡ／
ゲルの条件で約２時間電気泳動した後、コマジーブリリ
アントブルーＲ−２５０でタンパク質染色を行った（図
３参照）。その結果、プロテオグリカンは分離ゲルには
入らず、分子量は少なくとも５００，０００以上である
ことが示された。さらに、他の染色されたバンドは見ら
れなかった。以上２つの結果は、このサケ鼻軟骨プロテ
オグリカンが高純度であることを示している。従って、
上述の実施例より５０匹分のサケ鼻軟骨を出発原料とし
て、約１．４ｇのプロテオグリカンを得ることに成功し
たことになる。
【００１２】
【発明の効果】以上述べたように、本発明はサケ鼻軟骨
を出発原料として使用し、これより高純度のプロテオグ
リカンを完全な形で分離精製することが出来たので、医
用材料、化粧品材料、医薬品などの実用化への道が拓か
れることが期待される。さらに、今後糖鎖工学的に新た
な付加価値を付ける事により、サケ鼻軟骨プロテオグリ
カンは高機能性素材に生まれ変わることも可能となり、
より高度な応用製品の開発が可能となる。
を出発原料として使用し、これより高純度のプロテオグ
リカンを完全な形で分離精製することが出来たので、医
用材料、化粧品材料、医薬品などの実用化への道が拓か
れることが期待される。さらに、今後糖鎖工学的に新た
な付加価値を付ける事により、サケ鼻軟骨プロテオグリ
カンは高機能性素材に生まれ変わることも可能となり、
より高度な応用製品の開発が可能となる。
【図１】細胞外マトリックスの模式図
【図２】プロテオグリカンの構造を示す模式図
【図３】精製プロテオグリカンのＳＤＳ−ポリアクリル
アミド電気泳動像
アミド電気泳動像
【符号の説明】 １ プロテオグリカン ２ ヒアルロン酸 ３
コラーゲン ４ コアタンパク質 ５ グリコサミノグリカン糖
鎖
コラーゲン ４ コアタンパク質 ５ グリコサミノグリカン糖
鎖
Claims (3)
- 【請求項１】鮭の鼻軟骨から軟骨型プロテオグリカンを
分離精製することを特徴とする軟骨型プロテオグリカン
の精製方法。 - 【請求項２】 分離精製が鮭の鼻軟骨を粉砕、脱脂処理
を施して得た脱脂乾燥粉末を抽出溶媒で抽出し、得られ
た抽出液から粗プロテオグリカンを分離精製し、しかる
後、透析を行うことを特徴とする請求項１記載のプロテ
オグリカンの精製方法。 - 【請求項３】 陰イオン交換樹脂と透析膜を使用するこ
とを特徴とする請求項２記載のプロテオグリカンの精製
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33137599A JP2001172296A (ja) | 1999-10-07 | 1999-11-22 | 軟骨型プロテオグリカンの精製方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28739299 | 1999-10-07 | ||
| JP11-287392 | 1999-10-07 | ||
| JP33137599A JP2001172296A (ja) | 1999-10-07 | 1999-11-22 | 軟骨型プロテオグリカンの精製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001172296A true JP2001172296A (ja) | 2001-06-26 |
Family
ID=26556706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP33137599A Pending JP2001172296A (ja) | 1999-10-07 | 1999-11-22 | 軟骨型プロテオグリカンの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001172296A (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007094248A1 (ja) | 2006-02-14 | 2007-08-23 | Kushiro Industrial Technology Center | プロテオグリカンの製造方法 |
| WO2007111242A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Rohto Pharmaceutical Co., Ltd. | メタボリック症候群改善剤 |
| WO2011007885A1 (ja) | 2009-07-16 | 2011-01-20 | サンスター株式会社 | プロテオグリカン含有物 |
| WO2012099216A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの大量調製法 |
| JP2012236776A (ja) * | 2011-05-09 | 2012-12-06 | Institute Glycosmo Co Ltd | プロテオグリカンの製造方法 |
| JPWO2012099224A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2014-06-30 | 国立大学法人弘前大学 | 水棲動物軟骨抽出物 |
| JP2016029150A (ja) * | 2014-07-16 | 2016-03-03 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 高保水性プロテオグリカン、化粧料および高保水性プロテオグリカンの製造法 |
| JP2016113382A (ja) * | 2014-12-12 | 2016-06-23 | 国立大学法人 和歌山大学 | プロテオグリカン製造方法 |
| JP2016160226A (ja) * | 2015-03-03 | 2016-09-05 | 国立大学法人弘前大学 | 動物の軟骨からプロテオグリカンを調製する方法 |
| JP2017125164A (ja) * | 2016-01-15 | 2017-07-20 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 高保水性改変プロテオグリカン |
| JP2018127423A (ja) * | 2017-02-10 | 2018-08-16 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | チロシナーゼ活性阻害剤、医薬品、化粧品および食品褐変防止剤 |
| KR20210110669A (ko) | 2019-01-17 | 2021-09-08 | 가부시키가이샤 리나이스 | 프로테오글리칸 함유 조성물의 제조방법 및 프로테오글리칸 함유 조성물 |
-
1999
- 1999-11-22 JP JP33137599A patent/JP2001172296A/ja active Pending
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8153769B2 (en) | 2006-02-14 | 2012-04-10 | Kushiro Industrial Technology Center | Process for producing proteoglycan |
| WO2007094248A1 (ja) | 2006-02-14 | 2007-08-23 | Kushiro Industrial Technology Center | プロテオグリカンの製造方法 |
| WO2007111242A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Rohto Pharmaceutical Co., Ltd. | メタボリック症候群改善剤 |
| US20140080761A1 (en) * | 2009-07-16 | 2014-03-20 | Hirosaki University | Proteoglycan-containing material |
| WO2011007885A1 (ja) | 2009-07-16 | 2011-01-20 | サンスター株式会社 | プロテオグリカン含有物 |
| US9585828B2 (en) * | 2009-07-16 | 2017-03-07 | Sunstar Inc. | Proteoglycan-containing material |
| WO2012099216A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの大量調製法 |
| JPWO2012099224A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2014-06-30 | 国立大学法人弘前大学 | 水棲動物軟骨抽出物 |
| US9284359B2 (en) | 2011-01-19 | 2016-03-15 | Hirosaki University | Method for mass preparation of proteoglycan |
| JP2012236776A (ja) * | 2011-05-09 | 2012-12-06 | Institute Glycosmo Co Ltd | プロテオグリカンの製造方法 |
| JP2016029150A (ja) * | 2014-07-16 | 2016-03-03 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 高保水性プロテオグリカン、化粧料および高保水性プロテオグリカンの製造法 |
| JP2016113382A (ja) * | 2014-12-12 | 2016-06-23 | 国立大学法人 和歌山大学 | プロテオグリカン製造方法 |
| JP2016160226A (ja) * | 2015-03-03 | 2016-09-05 | 国立大学法人弘前大学 | 動物の軟骨からプロテオグリカンを調製する方法 |
| JP2017125164A (ja) * | 2016-01-15 | 2017-07-20 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 高保水性改変プロテオグリカン |
| JP2018127423A (ja) * | 2017-02-10 | 2018-08-16 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | チロシナーゼ活性阻害剤、医薬品、化粧品および食品褐変防止剤 |
| KR20210110669A (ko) | 2019-01-17 | 2021-09-08 | 가부시키가이샤 리나이스 | 프로테오글리칸 함유 조성물의 제조방법 및 프로테오글리칸 함유 조성물 |
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