JP2000516909A

JP2000516909A - 癌の処置に使用するためのカンプトテシン誘導体

Info

Publication number: JP2000516909A
Application number: JP09523912A
Authority: JP
Inventors: カオツァイソング; ベッピーノシー．ギオヴァネラ
Original assignee: ザステーリンファウンデーションフォーキャンサーリサーチ
Priority date: 1996-01-30
Filing date: 1997-01-29
Publication date: 2000-12-19
Anticipated expiration: 2017-01-29
Also published as: DE69739644D1; EP1829880A2; JP3297877B2; AU2005997A; CA2244698A1; HK1018449A1; US5968943A; US20010031761A1; CN1214686A; DK0879236T3; US6218399B1; NO983487D0; US6120793A; CN1107069C; NO983487L; WO1997028165A1; NO322511B1; EP0879236B1; ATE447576T1; EP0879236A1

Abstract

(57)【要約】カンプトテシンの誘導体が開示されており、一般式(Ｉ) ［式中、R₂がHであるとき、R₁はC₂-C₄アルキル基、C₆-C₁₅アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基またはC₂-C₁₅エポキシ基である；およびR₂がニトロ基であるとき、R₁はC₁-C₁₅アルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基、C₃-C₈シクロアルキル基またはエポキシ基である］で示される。これらの誘導体を作製する方法およびそれらを癌の処置に使用する方法も開示されている。

Description

【発明の詳細な説明】癌の処置に使用するためのカンプトテシン誘導体発明の分野本発明は、好ましくは低い毒性を有するカンプトテシンの誘導体、および癌を処置するためのこれらの誘導体の使用に関する。この出願に参照される全ての文献の開示は、本明細書に参考として全面的に援用されている。発明の背景ウォール(Wall)と彼の同僚によってカンプトテカ・アクミナータ(ニサセアエ) (Camptotheca Acuminata(Nyssaceae))の木および樹皮から最初に単離された(J． Am．Chem．Soc．88，3888，1966)細胞障害性アルカロイドであるカンプトテシンは、マウス白血病L 1210システムに対して抗腫瘍作用を有することが示されている。インドールアルカロイド基を共通に生ずるアルカロイドであるカンプトテシンの構造は、一般式(X)として下記のように示される(ヘッケンドルフ(Heckendor f)ら、J Org．Chem．41,2045,1976)。この化合物は、20(S)-立体配置を有するＥリング中に不斉中心を１個のみ有するペンタサイクリックリングシステムを有する。ペンタサイクリックリングシステムは、ピロロ[3,4-b]キノリン部分（リングＡ、ＢおよびＣ）、複合体化ピリドン（リングＤ）、およびα-ヒドロキシル基を有する６員環ラクトン（リングＥ）を含む。カンプトテシンは、マウス白血病L 1210システムでのその注目すべき作用により、最初に単離された時点から大きな関心を引いた。カンプトテシンの抗腫瘍作用に関する初期のデータは、マウスの白血病L 1210、またはラットのウォ-カー(Walker)256腫瘍(Chem．Rev．23，385，1973，Cancer Treat．Rep．60 ，1007，1967)のような実験的に移植された悪性腫瘍を使用して得られた。その後の臨床研究は、この化合物が、その高い毒性によりインビボで抗腫瘍剤として使用できないことを示した。カンプトテシン自身は、水に不溶性である。従って、カンプトテシンは、初期の頃は水溶性のカルボン酸ナトリウム塩として臨床的に評価された。この形態のカンプトテシンは、猛烈な毒性を生じ、抗腫瘍作用を欠くように見えた(ゴットリーブ(Gottlieb)ら、Cancer Chemother．Rep．54，46 1，1970,および56，103，1972，ムギア(Muggia)ら、Cancer Chemother．Rep．56 ，515，1972，モエルテル(Moe rtel)ら、Cancer Chemother．Rep．56，95，1972，およびスカエッピ(Schaeppi) ,Cancer Chemother．Rep．5：25，1974)。これらの結果は、フェイズII試験の中止をもたらした。この物質の継続的評価は、カルボン酸ナトリウム塩が、閉ラクトン環が非修飾(intact)である天然のカンプトテシンの10%ほどしか有効でないことを示した（ウォールら、In International Symposium on Biochemistry And Physiology of The Alkaloids，モーゼス(Mothes)ら編，Academie-Verlag，Ber lin，77，1969，ギオヴァネラ(Giovanella)ら、Cancer res．51，3052，1991）。さらに、カンプトテシン・ファミリーの抗腫瘍作用に関する重要なパラメーターが確立された（ウォールら、Ann．Rev.,Pharmacol．Toxicol．17，117，1977 ）。これらの結果は、非修飾のラクトン環Ｅおよびα-ヒドロキシル基が抗腫瘍作用に必須であることを示す。 1989年に、ギオヴァネラらは、カンプトテシンの非水溶解性の誘導体がヒト腫瘍の異種移植片に対して高い抗腫瘍作用を有することを見い出した（ギオヴァネラら、Science，246，1046，1989）。さらに、閉ラクトン環を有するカンプトテシンの投与が、水に溶解性のカルボン酸塩の注射よりも優れていることが示された（ギオヴァネラら、Cancer Res.，51，3052，1991）。これらの発見は、非修飾のラクトン環の重要性をさらに確認した。明らかに、ラクトン形態を、抗腫瘍作用に必須である構造的エレメント（即ち、20-ヒドロキシルおよびラクトン環Ｅ）を維持しながら体内でより長く留まることを可能にするように20-(S)-カンプトテシン("CPT")を修飾する必要がある。 CPTの開環は、ヒトよりもマウスで、より強力な抗腫瘍作用をもたらす。実際上、筋肉内("i.m．")、皮下("s.c.")、および胃内("i.s.")に投与されたCPTは、マウス中のヒト腫瘍に対して、即ち、ヌードマウス中で異種移植片として増殖しているとき、非常に強力な抗癌剤であることを実証した（ギオヴァネラら、Canc er Res．51:3052，1991）。しかしながら、腫瘍がヒトでCPTにより処置されたとき、マウスよりもヒトで低い度合いの抗癌作用が発揮された（ステーリン(Stehl in)ら、In Camptothecins:New Anticancer Agents，1995，CRC Press，pp.59-65 ）。同じ現象が、他のCPT誘導体で観察された。マウスにおいて、9-ニトロカンプトテシン("9NC")は、ヒト腫瘍異種グラフトに対してCPTよりも２〜３倍強力であり、処置された全てのヒト悪性腫瘍の全面的な根絶を生じることが実証された（パンタジス(Pantazis)ら、Cancer Res．53 :1577，1993；パンタジスら、Int．J．Cancer 53:863，1995）。薬理学的研究は、i.s.投与後の血漿中に存在する9NC薬の大部分(57%)が閉ラクトン形態（図３）であることを実証した。フェイズＩの臨床試験患者に経口投与した後の9NCの血漿レベルに関する薬理学的研究は、平均して〜3%の存在する薬物のみが閉ラクトン形態（図４および５）であることを実証する。そのような発見と完全に一致することとして、この群の患者での臨床的反応は、CPTで得られたものより高いけれども、マウスで得られた結果（マウスで32/32 の完全な腫瘍後退に対してヒトでは2/32）とはほど遠い。明らかに、再び、血液循環への入口におけるラクトン開環を減速させ遅延させる修飾に対する差し迫った必要性がある。カンプトテシンのより活性な誘導体を提供するために多くの試みが為されたが、これらの化合物のいずれもラクトン環Ｅの開環を遅延できることは開示されていない。発明の概要従って、本発明の１つの目的は、有効な抗腫瘍剤、好ましくは経口的および筋肉内経路での薬剤投与に有用である新規なCPT誘導体を提供することである。本発明の他の目的は、ラクトン環Ｅの開環に耐え、それによりその母アナログであるCPTよりも抗腫瘍作用を長く持続させる、新規で活性なCPT誘導体を提供することである。本発明の更に他の目的は、その母化合物であるCPTと同様に著しい抗腫瘍作用を維持し、その母化合物よりも遥かに低い毒性を有する新規なCPT誘導体を提供することである。本発明の更に他の目的は、生体内で優れた吸収性を有する新規なCPT誘導体を提供することである。本発明の更なる目的は、抗腫瘍作用に重要であるラクトンＥ環および20-ヒドロキシル基を非修飾で維持する新規なCPT誘導体を提供することである。本発明のまた更なる目的は、CPT誘導体を調製する方法を提供することである。本発明の更なる目的および利点は、一部は以下に続く説明の中に記載され、一部はその記載から明らかになり、或いは、本発明の実施により習得され得る。本発明の目的および利点は、特に添付の請求の範囲に示されるエレメントおよび組合せにより、実現され達成される。その目的を達成するため、および本明細書中に具現化され広く記載されているように本発明の目的に従うと、本発明は、一般式(Ｉ)の化合物：［式中、R₂はHまたはNO₂であり、R₂がHであるとき、R₁はC₂-C₄アルキル基、C₆-C₁₅ アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基、またはエポキシ基である；およびR₂がNO₂であるとき、R₁はC₁-C₁₅アルキル基、C₁-C₁₅アルケニル基、C₃-C₈シクロアルキル基、またはエポキシ基である］に関する。本発明はまた、哺乳動物における悪性腫瘍を処置する方法に関し、有効量の１種以上の上記化合物を投与することを包含する。図面の簡単な説明図１は、胃内投与後のマウスでの閉ラクトン形態でのCPTの存在を示すグラフである。図２は、経口投与後のヒトでのCPTおよびその閉ラクトン形態の量を示すグラフである。図３は、経口投与後のマウスでの9-ニトロカンプトテシンおよびその閉ラクトン形態の量を示すグラフである。図４および５は、経口投与による投与を受けた臨床試験患者での9-ニトロカンプトテシンおよびその閉ラクトン形態の量を示す。図６は、ヌードマウス内の移植されたヒト乳癌CLOでのカンプトテシン20(S)プロピオナートの抗腫瘍作用を示すグラフである。図７は、経口投与後のヒト血漿中のカンプトテシン20(S)プロピオナートおよびその閉ラクトン環形態の存在を示すグラフである。図８は、9-ニトロカンプトテシン-20-O-プロピオナートを経口的に受けた患者での該化合物の存在を示すグラフである。発明の詳細な説明実験室で行われたヒト血漿中のカンプトテシンの代謝研究は、検出された唯一の代謝物が、有毒で不活性である開環したカルボン酸ナトリウム塩であることを示した。ヒト血漿中のCPTに関する薬物動態の測定は、非修飾のラクトンを有するその薬物の半減期が30分であることを示す。これらの結果は、その薬物が、患者がそれを摂取した後非常に短時間のうちに、その活性の90％を失い多くの毒性を生じることを暗示する。マウスおよびヒトでの比較薬理学研究は、マウスにおいては、胃内投与後の血漿に存在するCPTの大部分は閉ラクトン形態（図1)のものであり、曲線より下の面積の約54％であることを示した。反対に、ヒトでは、CPTの経口投与後には、曲線下の面積の約0.4%のみが閉ラクトン環形態のものである（図２）。マウスとヒトとの相違は、マウスとヒトでは血液pHは同じ、即ち、7.4であるが、CPTをそのナトリウム塩への変換を触媒するヒトアルブミンは、このプロセスにおいてマウスアルブミンより〜100倍効率的であるという事実から生じる（ミィ(Mi)およびブルケ(Burke)、Biochem．33:12540，1994）。本発明によると、CPTは、これ以降プロドラッグとも称される、より脂質に溶解性の分子に変換される。患者に経口的に摂取されるとき、該プロドラッグは患者の血流に迅速に導入され、体内で親化合物に容易に変換される。プロドラッグの母化合物CPTへの変換は、ヒトを含む多くの動物の血液に存在するエステラーゼと呼ばれる一群の酵素により仲介される。プロドラッグは、運搬後短時間のうちに体全体に迅速に分布するので、これらの化合物は、母カンプトテシンを遊離する酵素的加水分解を受ける時点で非常に低い濃度で存在し、CP Tが血流で沈殿するのを妨げる。固有の抗腫瘍作用を維持しながら、極度に低減された毒性を有する新規なCPT 誘導体を合成する試みにおいて、本発明者は、様々な有機酸、有機酸クロリドおよび有機酸無水物を用いてカンプトテシンのアシル化反応を行なった。多くの新規なカンプトテシン誘導体が得られた。それらは、下記に示されるように一般式Ｉ：［式中、R₂はHまたはNO₂であり、R₂がHであるとき、一般式ＩのR₁はC₂-C₄アルキル基、C₆-C₁₅アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基またはC₂ -C₁₅エポキシ基を示す；R₂がNO₂であるとき、R₁はC₁-C₁₅アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基またはC₂-C₁₅エポキシ基である］で特徴付けられる。好ましくは、R₂がHであるとき、R₁はCH₂CH₃；CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂C H₃；CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃； CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃；CH=CH₂；CH=CHCH₃（トランス）；また、R₂がNO₂であるとき、R₁は好ましくはCH₃；CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₃；CH=CH₃；C H=CHCH₃（トランス）； 9-ニトロカンプトテシンのアナローグは、有機無水物を用いた9-ニトロカンプトテシンのアシル化により調製される。全てのエポキシ誘導体は、対応する本発明のアルケニルエステルをベンゼン中m-クロロペルオキシ安息香酸と室温で反応させて調製され得る。好ましい誘導体は、それらの親カンプトテシンであるCPTよりも、かなり低い毒性を伴って、著しい抗腫瘍作用を発揮する。これらの新規な誘導体に関する動物実験データが集められた。カンプトテシン20(S)プロピオナート［R₁はエチルでありR₂はHである］はプロドラッグ２として示され、幾つかのインビボ実験データを開示するための例として採用されている。図６は、ヌードマウスにおける移植されたヒト乳癌(CLO)に対する、この化合物の異なる用量での抗腫瘍作用を示す。表１は、ヌードマウスに対する、この化合物の異なる用量での毒性を示す。マウス体重の変化は、経時的に記録される。テスト期間中、マウス体重の損失はなかった。表１テスト期間中のマウス体重の変化プロドラッグ２であるカンプトテシン20(S)プロピオナートに関する薬物動態の測定は、ラクトン環がヒト血漿において、その母カンプトテシンCPTよりかなり長く非修飾で維持されたことを示す。表２は、この結果を示す。表２ヒト血漿における20(S)プロピオナートのラクトン％とカンプトテシンのラクトン％の比較表に反映されているように、閉ラクトン環の生物学的寿命の増大が達成された。図２に示されるように、経口投与後のヒト血液中の閉ラクトン形態として存在するCPTの％は、0.4％である。そのアナローグである20-(S)プロピオナートは、同様な条件下で７倍の増加である2.8％に達する（図６）。この化合物は、マウスでとてつもない用量であっても、ヒト腫瘍異種グラフトに対する抗腫瘍作用および毒性の例外的な欠如を発揮する。更により印象的なのが、9NCで得られた結果である。図４および５に示されるように、この化合物の経口投与後、その〜3% のみが血漿中にラクトンとして存在する。そのアナローグである本発明のプロドラッグ11［R₁はエチルでありR₂はNO₂である］が調製され患者に経口投与されるとき、ラクトン形態は20倍を越える増加であるトータルの68.7%を構成した（図８）。この化合物も、ヌードマウスにおけるヒト腫瘍の異種グラフトに対して、カンプトテシン・アナローグであるプロドラッグ２［R₁はエチルでありR₂はHである］よりもさらに高い抗腫瘍作用を非常に低い毒性を伴って発揮した。本発明の化合物は、下記の様にして作製され得る。20(S)-カンプトテシンまたは9-ニトロカンプトテシンは、例えばピリジン中の有機無水物と反応され得る。特に、無水物をピリジンと約１：１の比率で混合し、20(S)-カンプトテシンまたは9-ニトロカンプトテシンが全て一度に加えられる均一な溶液が作られる。混合物を、雰囲気下で24〜48時間攪拌する。反応時間の終わりに、混合物を特定量の石油エーテル上に攪拌しながら注ぐ。石油エーテルから沈殿された生成物を濾過で集め、石油エーテルで数回洗浄する。この手順による生成物の純度は、通常98%(HPLC により分析)である。この手順は、一般式(Ｉ)においてR₁がC₇-C₁₅アルキルまたはアルケニル、或いはエポキシ基である場合を除いて、本発明の化合物の全てに適用可能である。R₁がC₇-C₁₅アルキルである誘導体は、カンプトテシンと塩化メチレン中の塩化ノナノイルとを還流下に反応させて得られる。R₁がエポキシ基を含む誘導体は、一般式(Ｉ)においてR₁がアルケニルである、本発明の化合物のエポキシ化によって得られる。本発明の化合物は、哺乳動物の悪性腫瘍を処置するのに有効である。本発明の化合物は、当業者に公知の任意の様式で投与され得る。好ましくは、該化合物は、筋肉内、経口的、または経皮的に投与される。本明細書中で使用される時、用語「悪性腫瘍」は、分化が乏しい形態、中程度に分化した形態、および十分に分化した形態で生じるヒトの癌、肉腫および黒色腫の全ての形態を包含することが意図される。本発明に従い哺乳動物の悪性腫瘍を処置または進行を遅らせることにおいて、本発明の上記のCPT誘導体は、当業者に公知の手段により投与され、一般に知られる方法、例えば、経口投与のためのゼラチンカプセル、並びに筋肉内投与のための脂質中および脂質様エマルジョン中の微小懸濁液および皮下長期投与のためのコレステロールペレット中への包接のような剤型を用いて、好ましくは筋肉内、経皮、または経口的に投与される。本明細書中で使用されるとき、本発明のCPT誘導体の「有効量」は、癌の増殖を阻害または進行を遅らせ、または悪性細胞を殺滅し、悪性腫瘍の退行および一時的緩和を生じる、即ち、そのような腫瘍の体積もしくはサイズを減少または腫瘍を全体として取り除く化合物の量である。ヒトを含む哺乳動物では、有効量は、体表面積に基づいて投与され得る。投与量の相関関係は、様々なサイズおよび種の動物で変動し、ヒト（mg/体表面M²に基づく）に関してはイー．ジェイ．フライライヒ(E.J.Freireich)ら、Cancer Ch emother ．Rep. ，50(4):219(1966)に記載される。体表面積は、個体の身長および体重から、おおよそ決定され得る（例えば、Scientific Tables，Geigy P harmaceuticals，Ardsley，N.Y．pp.537-538(1970)を参照のこと）。本発明におけるカンプトテシン化合物の有効量は、１日当り約12.5〜約31.3mg/体表面m²の範囲であり得る。本発明のCPT誘導体またはプロドラッグのマウスでの好ましい有効量または投与量は、筋肉内経路では週に２回、約1〜約4mgプロドラッグ／体重kgであり、経口経路では約0.75〜約1.5mgプロドラッグ／kg／日である。本発明のCPT誘導体またはプロドラッグのマウスでの有効量または投与量は、経皮経路では例えば、約 1.5mg／kg／週〜約10mg／kg／週のプロドラッグである。投与経路の全てに対して、投与量の投与の正確なタイミングは、最適の結果を得るために変動し得る。一般に、CPT誘導体に関する担体としてイントラリピッド20(Intralipid 20)を使用するとき、患者に到達するCPT誘導体の実際の投与量は、より少なくなる。これは、イントラリピッド20懸濁液に一般的である注射器、針および調製容器の壁上でのCPT誘導体の幾らかの損失による。綿実油のような担体が使用されるとき、CPT誘導体が注射器などの表面にそれほど付着しないので、上記のこの損失はそれほど一般的ではない。例えば、好ましくは、一般に、綿実油を用いて約2.5m gプロドラッグ／体重kgを週に２回筋肉内経路で投与すると、担体としてイントラリピッド20を用いて約4.0mgプロドラッグ／体重kgを週２回と同じ量を患者に送達することになる。一般に、約1mg〜約4mgの誘導体が、約0.1ml〜約1mlの担体に加えられる。本発明により提供される方法の他の重要な特徴は、本明細書中の教示に従って投与されるCPT誘導体の、比較的低い又は皆無の明らかな全体的毒性に関する。全体的毒性は、様々な基準を用いて判定され得る。例えば、被験体における当初記録された（即ち、処置前）体重の10%を越える体重損失は、毒性の１つの兆候と判断され得る。さらに、被験体における全体的な動きや活動性の損失および下痢または膀胱炎の兆候も、毒性の証拠として解釈され得る。以下に続く実施例の１つでは、本発明のカンプトテシン化合物の全体的毒性が評価された。本発明の化合物は、イントラリピッド10もしくは20または天然オイルのような薬学的に許容される担体または希釈剤、或いは親油性化合物に好適な他の乳化剤と組合せて投与されても良い。本発明の化合物を投与する他の方法は、経皮的または経皮性経路による。そのような実施態様の一つの例は、パッチの使用である。特に、パッチは、本出願に開示される化合物の、例えばジメチルスルホキシド(DMSO)、またはDMSOと綿実油との混合物中の細かい懸濁液を用いて作製され、腫瘍担持哺乳動物の皮膚に皮膚ポケット(pouch)内の腫瘍局在部位から離して接触され得る。他の媒体またはそれと他の溶媒および固体支持体との混合物は、同等に作用するであろう。パッチは、本発明のCPT誘導体を液剤または懸濁剤の形態で含み得る。パッチは次に、患者の皮膚に、例えば縫合糸、クリップまたは他の保持用具により皮膚を折り畳み保持することによって形成される患者の皮膚ポケット内に挿入することにより適用され得る。このポケットは、皮膚との持続的接触が哺乳動物の干渉なしに確実にされるように使用されるべきである。皮膚パウチを使用する以外に、パッチを皮膚と接触させて強固に配置することを確実にする任意の用具が使用され得る。例えば、粘着包帯は、パッチを皮膚上の適所に保持するのに使用され得た。本発明は、本発明を純粋に例示することを意図する下記の実施例によって更に明らかにされる。実施例実施例で参照される全てのガラス器具類は、使用される前に最低２時間80-100 ℃で焼かれた。融点は、MEL-TEMP融点装置を用いて得られ、補正されなかった。¹ Hおよび¹³C NMRスペクトルは、JEOL GX-270 WB NMR分光計を用いて270.05_MHZで得られた。テトラメチルシランを内部標準として使用して、ケミカルシフトはppm（δ スケール）で報告される。NMRデータの報告には、下記の略字が使用される：ヘルツでのカップリング定数(J)、シングレット(s)、ダブレット(d)、トリプレット(t)、ブロード・シングレット(brs)、マルチプレット(m)など。質量スペクトルは、VG ZAB-SEQ質量分析計(VGアナリティカル・コーポレーション、イギリス) を分解能10000で用いて記録した。カンプトテシン部分に関するNMRを描出するために使用される番号付けシステムは、一般式(X)に示される。側鎖に関する番号付けは、以下のように示される：実施例１--カンプトテシン２０−Ｏ−プロピオナート 100ml丸底フラスコ内で、無水プロピオン酸25mlおよびピリジン20mlを混合した。30秒間振とうした後、均一な溶液が得られた。この溶液に、2.0gの出発カンプトテシンを懸濁した。この混合物を、40±5℃で48時間攪拌した。室温に冷却した後、反応物を石油エーテル400ml上に攪拌しながら注いだ。石油エーテルから沈殿した生成物を濾過によって集め、石油エーテル150ml(50ml×3)で洗浄した。空気下で１時間乾燥した後、白色粉末2.17gが得られた。HPLCで測定された生成物の純度は98% であった。収率94%、融点250-252℃（分解）。¹H NMR CDCl₃中:0.98(3H,t,J=7.5 Hz，19-メチルプロトン)，1.17(3H,t,J 7.51Hz,24-メチルプロトン)，2.12-2.34 (2H,m,18-メチレンプロトン)，2.48-2.58(2H,m,23-メチレンプロトン)，5.29(2H ,s,5-メチレンプロトン)，5.39-5.72(2H,dd,J=17.12，17.12Hz，17-メチレンプロトン)，7.23(1H,s,14-H，7.68(1H,t,J=6.96Hz，10-H)，7.84(1H,t,J=6.96Hz， 11-H)，7.95(1H,d,J=8.43Hz，9-H)，8.23(1H,d,J=8.06Hz，12-H)，8.40(1H,s,7- H)；¹H NMR TFA中:1.18(3H,t,J=7.5Hz，19-メチルプロトン)，1.32(3H,t,J=7.30 Hz,24-メチルプロトン)，2.30-2.80(4H,m,18-および23-メチレン基)，5.60-6.10 (4H,s+dd,5-メチレンプロトンに関して5.86でs，17-メチレンプロトンに関してd dでJ=18.96，18.32Hz)，7.99(1H,s,14-H)，8.19(1H,t,J=8.06Hz，10-H)，8.20-8 .46(2H,9-ハンド11-H)，8.54(1H,d,J=8.79Hz，12-H)，9.43(1H,s,7-H)；¹³C NMR (TFA):7.42(C19)，8.55(C24)，28.61(C18)，33.07(C23)，53．14(C5)，68.77(C1 7)，78.31(C20)，105.68，113.19，117.35，125.87，131.23，131.36，132.59， 133.40，139.30，139.89，1 40.78，144.62，147.00，149.43(C2，C3，C6-C16，C16a)，172.50，179.76(C21, C22)；質量m/e(相対強度)：405[(M+H)+，100%],404(M+,15%)，331[(M-CH₃CH₂COO ),17%]，317[(M-C₂H₅COO-CH₃+H)，10%]，303[(M-C₂H₅COO-CO),15%]，287[(M-C₂H₅ COO-CO₂)，9%]，261(9%)。実施例２--カンプトテシン２０−Ｏ−ブチラート無水酪酸20ml、ピリジン18mlおよびカンプトテシン1.61gを用いて実施例１と同じ様に反応を行ない、それにより1.77gの標記化合物を茶色がかった粉末として得た、収率92%、融点225-227℃（分解）。¹H NMR CDCl₃中:0.98(6H,t,J=7.51H z，19-および25-メチル基)，1.65-1.74(2H,m,24-メチレンプロトン)，2.14-2.30 (2H,m,18-メチレンプロトン)，2.44-2.51(2H,m,23-メチレンプロトン),5.29(2H, s,5-メチレンプロトン)，5.38-5.71(2H,dd,J=17.59，17.59Hz，17-メチレンプロトン)，7.23(1H,s,14-H)，7.68(1H,t,J=8.06Hz，10-H)，7.84(1H,t,J=7.96Hz，1 1-H)，7.95(1H,d,J=6.96Hz，9-H)，8.23(1H,d,J=8.06Hz，12-H)，8.40(1H,s,7-H )；¹H NMR TFA中:0.75-1.15(6H,m,19-および25-メチル基)，1.70-1.80(2H,m,24- メチレンプロトン)，2.10-2.80(4H,m,18-および23-メチレン基)，5.50-6.00(4H, s+dd,5-メチレンプロトンに関して5. 73でs，17-メチレンプロトンに関してdd)，7.86(1H,s,14-H)，8.05(1H,s,10-H) ，8.30(2H,brs,9-Hおよび11-H)，8.40(1H,s,12-H)，9.30(1H,s,7-H)；¹³C NMR(T FA):7.23(C19)，13.20(C25)，19.20(C24)，32.91(C18)，36.91(C23)，52.96(C5) ，68.58(C17)，78.00(C20)，105.56，113.40，113.50，117.00，117.10，131.00 ，132.40，133.16，139.06，139.15，140.00，144.36，146.90，149.40(C2，C3 ，C6-C16，C16a)，172.50，178.00(C12,C22)；質量m/e(相対強度)：419[(M+H)+ ，100%]，331[(M-C₃H₇COO)，17%]，303[(M-C₃H₇COO-CO),13%]，287[(M-C₃H₇COO- CO₂)，8%]，273(2%)，261(3%)。実施例３--カンプトテシン２０−Ｏ−バレレート無水吉草酸15ml、ピリジン14mlおよび出発カンプトテシン1.51gを用いて実施例１と同じ様に反応を行ない、それにより1.68gの標記化合物を灰色−白色粉末として得た、収率90%、融点265℃（分解）。¹H NMR CDCl₃中:0.92(3H,t,J=7.33H z，26-メチルプロトン)，0.98(3H,t,J=7.51，19-メチルプロトン)，1.37-2.00(4 H,m,24-および25-メチレンプロトン)，2.10-2.28(2H,m,18-メチレンプロトン)， 2.46-2.53(2H,m,23-メチレンプロトン)，5.30(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.38 -5.71(2H,dd,J=17.22， 17.21Hz，17-メチレンプロトン)，7.23(1H,s,14-H)，7.70(1H,t,J=6.96Hz，10-H )，7.82(1H,t,J=6.96Hz，11-H)，7.95(1H,d,J=7.32Hz，9-H)，8.22(1H,d,J=8.42 Hz，12-H)，8.40(1H,s，7-H)；¹H NMR TFA中:0.83(3H,brs,26-メチルプロトン) ，0.99(3H,brs,19-メチルプロトン)，1.32(2H,m,25-メチレンプロトン)，1.60(2 H,m,24-メチレンプロトン)，2.19-2.58(4H，m，18-および23-メチレンプロトン) ，5.49-5.82(4H,s+dd,5-メチレンプロトンに関して5.67でs，17-メチレンプロトンに関してddでJ=17.58,18.68Hz)，7.80(1H,s,14-H)，7.99(1H,s,10-H)，8.23(2 H,brs,9-Hおよび11-H)，8.33(1H,s,12-H)，9.24(1H,s,7-H)；¹³C NMR(TFA):4.48 (C26)，10.37(C19)，20.23(C24)，24.98(C25)，30.15(C18)，32.03(C23)，50.20 (C5)，65.82(C17)，75.36(C20)，102.84，109.89，110.24，114.06，114.39，12 8.25，128.39，129.65，130.41，136.30，137.00，141.62，148.57，149.28(C2, C3,C6-C16,C16a)，169.00，176.80(C21,C22),；質量m/e(相対強度)：433[(M+H)⁺ ，100%]，331[(M-C₄H₉COO)，17%]，303[(M-C₄H₉COO-CO),13%]，287[(M-C₄H₉COO- CO₂)，7%]，273(2%)，261(4%)。実施例４--カンプトテシン２０−Ｏ−ヘプタノエート無水ヘプタン酸15ml、ピリジン13ml、および出発カンプトテシン1.55gを用いて実施例１と同じ様に反応を行ない、それにより2.0gの標記化合物を灰色−白色粉末として得た、収率98%、融点270℃（210℃で変形）。¹H NMR CDCl₃中:0.82(3H, t,J=7.51Hz，28-メチルプロトン)，0.98(3H,t,J=7.01Hz，19-メチルプロトン)， 1.20-1.80(8H,m,24-,25-,26-および27-メチレンプロトン)，2.10-2.30(2H,m,18- メチレンプロトン)，2.40-2.60(2H,m,23-メチレンプロトン)，5.29(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.38-5.72(2H,dd,J=17.69，17.22Hz，17-メチレンプロトン)，7 .23(1H,s,14-H)，7.68(1H,t,J=7.30Hz，10-H)，7.84(1H,t,J=7.42Hz，11-H)，7. 95(1H,d,J=8.06Hz，9-H)，8.22(1H,d,J=8.32Hz，12-H)，8.40(1H,s，7-H)；¹H N MR TFA中:0.74(3H,s,28-メチルプロトン)，0.99(3H,s,19-メチルプロトン)，1.2 1(6H,brs,25-,26-,および27-メチレンプロトン)，1.62(2H,s,24-メチレンプロトン)，2.10-2.30(4H,m,18-およひ23-メチレン基)，5.50-6.00(4H,s+dd,5-メチレンプロトンに関して5.67でs，17-メチレンプロトンに関してdd)，7.80(1H,s,14- H)，7.99(1H,s,10-H)，8.23(2H,s,9-Hおよび11-H)，9.24(1H,s,7-H)；¹³C NMR(T FA):8.63(C19)，14.99(C28)，24.66(C27)，27.14(C26)，31.07(C24)，33.68(C25 )，34.29(C18)，36.45(C23)，5 4.34(C5)，69．98(C17)，79.50(C20)，106．97，114．39，118.55，127.11，132 .41，133.79，134.55，140.46，141.11，142.00，145.79，148.14，150.62，153 .00(C2,C3,C6-C16,C16a)，180.57，193.10(C21,C22),；質量m/e(相対強度)：461 [(M+H)⁺，100%]，331[(M-C₆H₁₃COO)，20%]，317[(M-C₆H₁₃COO-CH₃+H,10%]，303[ (M-C₆H₁₃COO-CO)，15%]，287[(M-C₆H₁₃COO-CO₂)，8%]，273(2%)，261(2%)。実施例５--カンプトテシン２０−Ｏ−ノナノエート 100ml丸底フラスコ内の塩化メチレン40mlに、塩化ノナノイル5mlおよび出発カンプトテシン2gを加えた。この混合物を、還流下に48時間攪拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで蒸発した後、残渣を塩化メチレン-THFを溶出液として用いてクロマトグラフィーにより分離した。標記化合物169mgが淡黄色粉末として得られた、収率6%、融点1800℃。¹H NMRCDCl₃中:0.84(3H,t,J=6.60Hz，30-メチルプロトン)，1.02(3H,t,J=7.69，19-メチルプロトン)，1.20-1.80(12H,m,24-29 メチレンプロトン)，2.10-2.38(2H,m,18-メチレンプロトン)，2.40-2.60(2H,m,2 3-メチレンプロトン)，5.33(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.40-5.80(2H,dd,J=17 .22，17.22Hz，17-メチレンプロトン)，7.26(1H,s,14-H，7.71(1H,t,J=8.06Hz， 10-H)， 7.88(1H,t,J=8.43Hz，11-H，7.99(1H,d,J=7.33Hz，9-H)，8.26(1H,d,J=8.79Hz， 12-H)，8.44(1H,s，7-H)；¹H NMR TFA中:0.96(3H,s,30-メチルプロトン)，1.24( 3H,s,19-メチルプロトン)，1.38(10H,brs,25-29-メチレンプロトン)，1.87(2H,m ,24-メチレンプロトン)，2.40-2.90(4H,m,18-およひ23-メチレンプロトン)，5.7 4-6.07(4H,s+dd,5-メチレンプロトンに関して5.91でs，17-メチレンプロトンに関して17.90，18.21Hzでdd)，8.05(1H,s,14-11)，8.24(1H,t,10-H)，8.48(2H,m, 9-Hおよび11-11)，8.57(1H,d,12-H)，9.48(1H,s,7-11)；¹³C NMR(TFA):4.99(C30 )，11.45(C19)，21.17(C29)，23.53(C28)，27.82(C24,C26-27)，30.52(C25)，30 .63(C18)，32.80(C23)，103.28，110.73，114.91，123.47，128.79，128.90，13 0.14，130.93，136.84，137.46，138.33，142.17，144.47，146.94(C2,C3,C6-C1 6,C16a)，169.98，176.92(C21,C22)；質量m/e(相対強度)：489[(M+H)⁺，100%]， 331[(M-C₈H₁₇COO)，23%]，317[(MC₈H₁₇COO-CH₃+11),13%]，303[(M-C₈H₁₇COO-CO) ，17%]，287[(M-C₂H₁₇COO-CO₂)，8%]，273(3%)，216(2%)。実施例６--カンプトテシン２０−Ｏ−クロトナート 100ml丸底フラスコ内で無水クロトン酸(40ml)およびピリジン(30ml)を混合した。この溶液に、出発カンプトテシン(8g)を加えた。この混合物を、90±10℃で15時間攪拌した。室温に冷却した後、粗生成物を石油エーテル1000ml中で沈殿させ、濾過によって集めた。カラムクロマトグラフィー後、化合物(3g)が得られた、収率31%、融点218-220℃（155℃で変形）。¹H NMR(CDCl₃ ):1.00(3H,t,J=7.51Hz，19-メチルプロトン)，1.94(3H,dd,J_H25H24=6.96Hz,J_H2 _5-H23 =1.89Hz，25-メチルプロトン)，2.15-2.35(2H,m,18-メチレンプロトン)，5 .28(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.38-5.74(2H,dd,J=17.22，17.22Hz,17-メチレンプロトン)，5.99(1H,d,J=13.92Hz，23-H)，7.05-7.14(1H,dq,J_H24-H23=15.38H z,J_H24-H25=6.96Hz，24-H，7.24(1H,s,14-H)，7.67(1H,t,J=6.96Hz，10-H)，7.8 3(1H,t,J=6.96Hz，11-H)，7.94(1H,d,J=7.70Hz，9-H)，8.21(1H,d,J=8.43Hz，12 -H，8.39(1H,s，7-H；質量m/e(相対強度)：416[M⁺，20%]，330[(M-CH₃CH=CHCOOH )，100%]，315[(M-CH₃CH=CHCOOH-CH₃),40%]，302[(M-CH₃CH=CHCOOH-CO)，73%]， 287[(M-CH₃CH=CHCOOH-CO₂+11l)，30%]，274(10%)，259(9%)，246(9%)，234(3%) ，218(5%)，205(4%)，191(3%)；正確な質量：実測値416.137、C₂₄H₂₀N₂O₅は416. 137を必要とする。実施例７--カンプトテシン２０−Ｏ−２’，３’−エポキシ−ブチラート 100ml丸底フラスコ内のベンゼン50mlに、実施例６の出発化合物160mgおよびm- クロロペルオキシ安息香酸(57-86%、アルドリッチケミカルコーポレーション(Al drich Chemical Co.)、ミルウォーキー、ウィスコンシン州)150mgを加えた。この混合物を、室温で１週間攪拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣をクロマトグラフィーにより分離した。化合物(120mg)が白色粉末として得られた、収率72%、融点：化合物は175℃で変形し、210-213℃で分解した。¹ H NMR(CDCl₃):0.99(3H，t,J=7.51Hz，19-メチルプロトン)，.90-1.94(3H,dd,J_H2 _5-H24 =6.96Hz,J_H25-H23=1.84Hz，25-メチルプロトン)，2.07-2.33(2H,m,18-メチレンプロトン)，5.30(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.38-5.72(2H,dd,J=17.59,17 .95Hz，17-メチレンプロトン)，5.95-6.02(1H,dd,J_H23-H24=15.75Hz,J_H23-H24=1 .83Hz，23-H)，7.04-7.12(1H,dq,J_H24-H25=6.59Hz,J_H24-H23=15.38Hz，24-H)，7 .22(1H,s,14-H)，7.75-8.01(4H,m,9-12芳香族プロトン)，8.78(1H,d,J=8.06Hz， 7-H)：質量m/e(相対強度)：432(M⁺，28%)，416[(M-O)，12%]，346[(M-C₄H₆O₂)， 100%]，331[(M-C₄H₅O₃)，53%]，318[(M-C₄H₆O₂-CO),75%]，303[(M-C₄H₅O₃-CO)， 54%]，287[(M−C₄H₅O₃-CO₂)，27%]，275(15%)，259(7%)，246(8%)，231(5%)，21 8(8%)，205(10%)，191(5%)；正確な質量：実測値432.132、C₂₄H₂₀N₂O₆は432.132 を必要とする。実施例８--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−アセテート 9-ニトロカンプトテシン140mgが入れてある50ml丸底フラスコ中で、無水酢酸( 3ml)およびピリジン(2ml)を混合した。混合物を、室温で24時間攪拌した。次に、混合物をクロマトトロンで分離した。標記化合物、70mg、が黄色粉末として得られた、収率45%、融点195℃（165℃で変形）。¹H NMR(CDCl₂):1.02(3H,t,J=7.5 1Hz，19-メチルプロトン)，2.10-2.40(5H,s+m,23-メチルプロトンに関して2.26 でs，18-メチレンプロトンに関してm)，5.40(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.41- 5.75(2H,dd,J=17.59,17.95Hz，17-メチレンプロトン)，7.23(1H,s,14-H)，7.96( 1H,t,6.96Hz，11H)，8.53(1H,d,J 10.99Hz，10-H)，8.58(1H,d,J=9.98Hz,12-H) ，9.31(1H,s,7-H)；質量m/e(相対強度)：435(M⁺，25%)，375[(M-CH₃COOH)，100% ]，360[(MCH₃COOH-CH₃)，40%]，347[(M-CH₃COOH-CO)，87%]，332[(M-CH₃COOH-CO -CH₃),37%]，319(13%)，302(11%)，29 1(10%)，286(11%)，274(10%)，258(4%)，246(5%)，216(8%)；正確な質量：実測値435.107、C₂₂H₁₇N₃O₇は435.107を必要とする。実施例９--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−プロピオナート無水プロピオン酸6ml、ピリジン5ml、および出発9-ニトロカンプトテシン600m gを用いて、実施例８と同じ様に反応を行った。反応後、粗生成物を石油エーテル200mlから沈殿させ、濾過によって集め、カラムクロマトグラフィーで分離し、石油エーテル200mlから再沈殿させて精製した。純粋な化合物(500mg)が黄色粉末として得られた、収率73%、融点163℃（155℃で変形）。¹H NMR(CDCl₃):0.99( 3H,t,J 7.51Hz，19-メチルプロトン)，1.18(3H,t,J=7.46Hz,24-メチルプロトン) ，2.10-2.30(2H,m,18-メチレンプロトン)，2.52-2.70(2H,m，23-メチレンプロトン)，5.37(2h,s,5-メチレンプロトン)，5.39-5.73(2H,dd,J=17.58,17.58Hz，17- メチレンプロトン)，7.22(1H,s，14-H，7.93(1H,t,J=8.06Hz，11-H)，8.50(1H,d ,J=10.60Hz,10-H)，8.54(1H,d,J=8.43Hz,12-H)，9.28(1H,s,7-H)；質量m/e(相対強度)：449(M⁺，28%)，375[(M-C₂H₅COOH)，100%]，360[(M-C₂H₅COOH-CH₃），35% ]，347[(M-C₂H₅COO H-CO)，82%]，332[(M-C₂H₅COOH-CO-CH₃)，26%]，319(9%)，302(8%)，291(7%)，2 74(7%)，258(2%)，245(2%)，216(2%)；正確な質量：実測値449.122、C₂₃H₁₉N₃O₇ は449.122ブチラートを必要とする。実施例１０--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−ブチラート無水酪酸2ml、ピリジン2ml、および出発9-ニトロカンプトテシン60mgを用いて、化合物の調製手順は実施例８と同じであった。標記化合物(40mg)が黄色粉末として得られた、収率56%、融点182℃。¹H NMR(CDCl₃):0.98(6H,m，19-および25- メチル基)，1.65-1.70(2H,m,24-メチレンプロトン)，2．10-2.40(2H,m，18-メチレンプロトン)，2.41-2.60(2H,m，23-メチレンプロトン)，5.36(2H,s,5-メチレンプロトン)，5.38-5.72(2H,dd,J=17.59,17.96Hz，17-メチレンプロトン)，7.22 (1H,s，14-H)，7.92(1H,t，J=7.52Hz，11-H)，8.49(1H,d,J=10.80Hz,10-H)，8.5 3(1H,d,J=9.53Hz,12-H)，9.27(1H,s,7-H)；質量m/e(相対強度)：463(M+，14%)， 375[(MC₃H₇COOH)，100%]，360[(M-C₃H₇COOH-CH₃)，32%]，347[(M-C₃H₇COOH-CO) ，78%]，332[(M-C₃H₇COOH-CO-CH₃)，25%]，319(9%)，302(8%)，291(7%)，274(7% )，258(2%)，245(3%)，216(5%)；正確な質量：実測値463.137、C₂₄H₂₁N₃O₇。実施例１１--カンプトテシン２０−Ｏ−アクリレート塩化カルシウム乾燥チューブを備えた100mlの一頸フラスコに、1g(0.0029モル )のカンプトテシン、50mlの乾燥塩化メチレン、0.42g(0.0058モル)のアクリル酸、および0.5g(0.0041モル)の4-ジメチルアミノピリジンを入れた。1.2g(0.0058 モル)のジシクロヘキシルカルボジイミドを５分間かけて加えながら、溶液を攪拌し０℃に冷却した。さらに５分間０℃にした後、氷浴を取り除き、暗色の反応混合物を15時間室温で攪拌した。ジシクロヘキシルウレアを濾過によって除去した後、有機溶液を無水硫酸ナトリウム上で４時間乾燥した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した後、残渣をクロマトグラフィーで分離した。生成物は、 30%の収率で得られた。質量m/e(相対強度)：403[(M+H⁺，100%]，331[(M-C₃H₃COO )，17%]，303[(M-C₃H₃COO-CO)，13%]，287[(M-C₃H₃COO-CO₂)，8%]，273(2%)，26 1(3%)。実施例１２--カンプトテシン２０−Ｏ−２’，３’−エポキシ−プロピオナート 100ml丸底フラスコ内のベンゼン50mlに、出発カンプトテシン20-O-アクリレート100mgおよびm-クロロペルオキシ安息香酸(57-86%、アルドリッチケミカルコーポレーション、ミルウォーキー、ウィスコンシン州)1 50mgを加えた。混合物を、室温で１週間攪拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣をクロマトグラフィーにより分離した。化合物(80mg)が白色粉末として得られた、収率77%。質量m/e(相対強度)：418(M⁺，22%]，402[(M-O )，10%]，347[(M-C₃H₃O₂)，100%]，331[(M-C₃H₃O₃），53%]，319[(M-C₃H₃O₂-CO) ，65%]，303[(M-C₃H₃O₃-CO)，50%]，287[(M-C₃-H₃O₃-CO₂)，20%]，275(10%)，25 9(7%)，246(8%)，231(5%)，218(8%)，205(10%)，191(5%)。実施例１３--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−シクロプロピオナートマグネティックスターラーを備えた100ml丸底フラスコ内のアセトン20mlに、出発9-ニトロカンプトテシン(0.5g，0.0013モル)およびシクロプロパンカルボン酸クロリド(8ml)を加えた。この混合物に、攪拌しながらピリジン7mlを滴下した。室温で15時間攪拌した後、塩酸の５％水溶液の750ml上に混合物を攪拌しながら加えた。得られた黄色懸濁液を、塩化メチレン400ml(100ml×4)で抽出した。混合した抽出物を蒸留水200mlで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で４時間乾燥した。濾過後、溶媒をロータリーエバポレーターによって除去した。残渣を、メタノール−クロロホルムを溶出液としてクロマトグラフィーにより分離した。純粋な生成物が、黄色粉末として得られた、収率30%、純度99%(HPLC)、融点27 4℃。¹H NMR(CDCl₃):δ0.62-1.07(7H,m，C19-メチル，C24-および25-メチレン基 )，1.70-1.80(1H,m,C23-第３級プロトン)，2.10-2.70(2H,m,C18-メチレンプロトン)，5.23(2H,s,C5-メチレンプロトン)，5.33-5.65(2H,dd,J=17.35,17.35Hz，17 -メチレンプロトン)，7.23(1H,s,C14-H)，7.88(1H,t(d+d),J=8.03，8.28Hz,C11- H)，8.44(1H,d,J=7.51Hz,C10-H)，8.51(1H,d,J=8.55Hz,C12-H)，9.23(1H,s,C7-H )；¹³C NMR,(CDCl₃)，δ7.60(C19)，9.19，9.36(C24,C25)，12.78(C23)，31.90( C18)，50.20(C5)，67.00(C17)，75.64(C20)，96.99，120.99，121.59，125.81， 127.46，128.61，131.55，136.51，144.94，146.04，148.92，153.86，157.21(C 2,C3,C6-C16,C16a)，167.00，173.75(C21,C22)；質量m/e(相対強度)：461(M⁺，1 3%)，375(M-シクロプロパンカルボン酸,100%)，360(M-シクロプロパンカルボン酸-メチル基,30%)，347(M-シクロプロパンカルボン酸-C0，66%)，332(M-シクロプロパンカルボン酸-CO-CH₃，27 %)，319(9%)，302(8%)，291(4%)、正確な質量(C₂₄H₁₉N₃O₇)：実測値461.123。実施例１４--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−シクロヘキザートマグネティックスターラーを備えた100ml丸底フラスコ内のアセトン25mlに、出発9-ニトロカンプトテシン(0.38g，0.0010モル)およびシクロヘキサンカルボン酸クロリドを加えた。この混合物に、ピリジン5mlを滴下した。混合物を40±5 ℃で15時間攪拌した。仕上げおよび実施例１３と同じ分離の後、黄色粉末を得た、収率63％、純度99%(HPLC)、融点186℃。¹H NMR(CDCl₃),0.80-1.15(5H,m,C19- メチル，および26-メチレンプロトン)，1.20-2.40(10H,m，C18-,C24-,C25-,C27- ,およびC28-メチレン基)，2.42-2.60(1H,m,C23-第３級プロトン)，5.36(2H,s,C5 -メチレンプロトン)，5.37-5.72(2H,dd,J=17.34,17.34Hz，C17-メチレンプロトン)，7.23(1H,s，C14-H)，7.92(1H，t(d+d),J=8.02,8.28Hz，C11-H)，8.48(1H,d ，J=7.77Hz，C10-H)，8.56(1H,d,J=8.54Hz,C12-H)，9.28(1H,s,C7-H；¹³C NMR(C DCl₃)：7.63(C19)，25.23(C25,C27),26.65(C24,C28),28.58(C26)，31.84(C18)， 42.49(C23)，50.20(C5)，66.98(C17)，75.32(C20)，96.87，120.99，121.54， 125.75，127.42，128.51，131.54，136.56，144.96，146.02，146.23，148.96， 153.83，157.21(C2，C3，C6-C16，C16a)，167.23，174.77(C21,C22)；質量m/e( 相対強度)：503(M⁺，20%)，375(M-シクロヘキサンカルボン酸,100%)，360(M-シクロヘキサンカルボン酸-メチル基,33%)，347(M-シクロヘキサンカルボン酸-CO ，90%)，332(M-シクロヘキサンカルボン酸-CO-CH₃，26%)，319(10%)，302(10%) ，291(4%)、正確な質量(C₂₇H₂₅N₃O₇)：実測値503.170。実施例15--カンプトテシン２０−Ｏ−シクロプロピオナート無水シクロプロピオン酸をアシル化剤として用いて、実施例１３に記載される手順により生成物カンプトテシン20-０-シクロプロピオナートを調製し、収率35 %で得た。質量m/e(相対強度)：416(M⁺，30%，330(M-シクロプロパンカルボン酸, 100%)，316(M−シクロプロパンカルボン酸-メチル基,20%)，302(M-シクロプロパンカルボン酸-CO，68%)，287(M−シクロプロパンカルボン酸-CO-CH₃，17%)。実施例１６--カンプトテシン２０−Ｏ−シクロヘキサネート無水シクロヘキサンカルボン酸をアシル化剤として用いて、実施例１４に記載される手順により生成物カンプトテシン20-O-シクロヘキサネートを調製し、収率28%で得た。質量m/e(相対強度)：458(M⁺，30%)，330(M-シクロヘキサンカルボン酸,100%)，315(M-シクロヘキサンカルボン酸-メチル基,23%)，302(M-シクロヘキサンカルボン酸-CO，85%)，237(M-シクロヘキサンカルボン酸-CO-CH₃，36%)。実施例１７--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−アクリレート 9-ニトロカンプトテシンを出発物質として、アクリル酸をアシル化剤として用いて、実施例１１に記載される手順により生成物9-ニトロカンプトテシン20-O- アクリレートを調製した。収率38%。質量m/e(相対強度)：447(M⁺，25%)，375(M- アクリル酸,100%)，360(M-アクリル酸-メチル基,28%)，357(M-アクリル酸-CO，7 8%)，342(M-アクリル酸-CO-メチル基，34%)。実施例１８--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−２’，３’−エポキシ−プロピオナート 9-ニトロカンプトテシン20-O-アクリレートを出発物質として、m-クロロペルオキシ安息香酸を酸化剤として用いて、実施例１２に記載される手順により生成物9-ニトロカンプトテシン20-O-2',3'-エポキシ-プロピオナートを調製した。収率76%。質量m/e(相対強度)：463(M⁺，16%)，447(M-O,12%) ，392[(M-C₃H₃O₂)，100%]，376[(M-C₃H₃O₃)，43%]，364[(M-C₃H₃O₂-CO)，52%]， 348[(M-C₃H₃O₃-CO)，45%]，332[(M-C₃H₃O₃-CO₂)，18%]。実施例１９--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−クロトナート 9-ニトロカンプトテシンを出発物質として、無水クロトン酸をアシル化剤として用いて、実施例６に記載される手順に従い、生成物9-ニトロカンプトテシン20 -O-クロトナートを調製した。収率46%。分子イオンピークは、m/e 461で観察された。実施例２０--９−ニトロカンプトテシン２０−Ｏ−２’，３’−エポキシ−ブチラート 9-ニトロカンプトテシン20-O-クロトナートを出発物質として、m-クロロペルオキシ安息香酸を酸化試薬として用いて、実施例７に記載される手順に従い、生成物9-ニトロカンプトテシン20-O-2',3'-エポキシ-ブチラートを調製した。収率76%。分子イオンピークは、m/e 477で観察された。本発明のカンプトテシン誘導体は、癌を患っている患者に、約１〜20mgのカンプトテシン／体重kgの用量を提供する投与量割合で経口的に投与され得る。化合物は、一続きの用量、例えば、３週間ごとに１用量投与され得る。治療は、明確な疾患の進行が止まるまで繰り返され得る。本発明の他の実施態様は、本明細書の検討およびその中に開示される本発明の実施から当業者に明らかとなる。明細書および実施例は例示としてのみ考慮され、本発明の真の範囲および精神は下記の請求の範囲によって示されることが意図される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ギオヴァネラベッピーノシー. アメリカ合衆国 77027 テキサスヒューストンポストオークパークドライブ 1325 エフ

Claims

【特許請求の範囲】１．一般式(Ｉ)：［式中、R₂がHであるとき、R₁はC₂-C₄アルキル基、C₆-C₁₅アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基またはC₂-C₁₅エポキシ基である；およびR₂ がNO₂であるとき、R₁はC₁-C₁₅アルキル基、C₃-C₈シクロアルキル基、C₂-C₁₅アルケニル基またはC₂-C₁₅エポキシ基である］の化合物。２． R₂がHであるときR₁が直鎖状C₂-C₄アルキル基またはC₆-C₁₅アルキル基であり、およびR₂がNO₂であるときR₁が直鎖状C₁-C₁₅アルキル基である、請求項１に記載の化合物。３． R₁が直鎖状C₂-C₁₅アルケニル基である、請求項１に記載の化合物。４． R₁がC₂-C₁₅エポキシ基である、請求項１に記載の化合物。５． R₂がHである、請求項２に記載の化合物。６． R₂がNO₂である、請求項２に記載の化合物。７． R₂がHである、請求項３に記載の化合物。８． R₂がNO₂である、請求項３に記載の化合物。９． R₂がHである、請求項４に記載の化合物。１０． R₂がNO₂である、請求項４に記載の化合物。１１． R₁が直鎖状エチル、プロピル、ブチル、ヘキシルまたはオクチル基であり、R₂がHである、請求項２に記載の化合物。１２． R₁がエチルである、請求項１１に記載の化合物。１３． R₁が直鎖状メチル、エチルまたはプロピル基であり、R₂がNO₂である、請求項２に記載の化合物。１４． R₁がエチルである、請求項１３に記載の化合物。１５． R₁がC₃-C₈シクロアルキル基である、請求項１に記載の化合物。１６． R₂がHである、請求項１５に記載の化合物。１７． R₂がNO₂である、請求項１５に記載の化合物。１８．請求項１の化合物を有効量含む組成物を投与することを包含する患者の悪性腫瘍を処置する方法であって、該悪性腫瘍は該組成物に反応性である方法。１９． R₂がHであるときR₁が直鎖状C₂-C₄アルキル基またはC₆-C₁₅アルキル基であり、およびR₂がNO₂であるときR₁が直鎖状C₁-C₁₅アルキル基である、請求項１８に記載の方法。２０． R₁が直鎖状C₂-C₁₅アルケニル基である、請求項１８に記載の方法。２１． R₁がC₂-C₁₅エポキシ基である、請求項１８に記載の方法。２２． R₂がHである、請求項１９に記載の方法。２３． R₂がNO₂である、請求項１９に記載の方法。２４． R₂がHである、請求項２０に記載の方法。２５． R₂がNO₂である、請求項２０に記載の方法。２６． R₂がHである、請求項２１に記載の方法。２７． R₂がNO₂である、請求項２１に記載の方法。２８． R₁が直鎖状エチル、プロピル、ブチル、ヘキシルまたはオクチル基であり、R₂がHである、請求項１９に記載の方法。２９． R₁がエチルである、請求項２８に記載の方法。３０． R₁が直鎖状メチル、エチルまたはプロピル基であり、R₂がNO₂である、請求項１９に記載の方法。３１． R₁がエチルである、請求項３０に記載の方法。３２． R₁がC₃-C₈シクロアルキル基である、請求項１８に記載の方法。３３． R₂がHである、請求項３２に記載の方法。３４． R₂がNO₂である、請求項３２に記載の方法。