JP2000511409A

JP2000511409A - Ｃｃ型ケモカイン

Info

Publication number: JP2000511409A
Application number: JP09538595A
Authority: JP
Inventors: ボルフ―ゲオルグフォースマン; アンドレアスパルディゴル; ハンス―ユルゲンマーゲルト; ペーターシュルツ―ナッペ
Original assignee: ボルフ―ゲオルグフォースマン
Priority date: 1996-04-30
Filing date: 1997-04-30
Publication date: 2000-09-05
Also published as: DE59712567D1; ATE317012T1; EP0907736B1; WO1997041230A3; EP0907736A2; US6180773B1; AU2775397A; WO1997041230A2; ES2256885T3

Abstract

(57)【要約】 CC型ケモカインは、免疫反応の媒介体であることが明らかにされているポリペプチド族に分類され、最近、HIVに対するその抗ウイルス活性により注目を集めている。配列がMIP-1αの配列と非常に類似している２つの新規CC型ケモカインの近くに連結したコーディング領域を含むヒトタンデム遺伝子のクローニング及び分子の特徴付けが開示されている。タンデム遺伝子の転写は、最近記載された因子HCC-1及び以前として未知であるCC-2と呼ばれるCC型ケモカインの非重複オープンリーディングフレームを含むビシストロニック成熟転写物に導いた。更に、一次転写の自動スプライシングは、少なくとも１つのCC型ケモカイン、サイトカインCC-3を更に生じた。２つの機能性プロモーター領域は、タンデム遺伝子内で特定された。開示されたデータは、新規ヒトCC-2/HCC-1タンデム遺伝子の構造及び発現についての幾つかの基本的な知識を提供し、高度真核生物において調節することができる近くに連結している遺伝子の同時発現の機構を説明する。

Description

【発明の詳細な説明】 CC 型ケモカイン本発明は、サイトカイン群の２つのポリペプチドをコードするタンデム(tandem) 遺伝子の核酸、サイトカインＣＣ-2及びＣＣ-3並びにその生物学的活性フラグメント及び／又は誘導体、本発明のペプチドを含有する薬剤、診断用試薬、医薬用標識のためのサイトカインＣＣ-2及びＣＣ-3の使用、及びサイトカインＣＣ-2及びＣＣ-3をコードするポリヌクレオチド又はそのフラグメントにハイブリダイズする核酸プローブに関する。ＣＣ型ケモカインは、免疫反応の媒介体であることが明らかにされているポリペプチド族に分類され、最近、ＨＩＶに対するその抗ウイルス活性により注目を集めている。ケモカインは小さい、基本的な、ヘパリン結合ポリペプチドであり、免疫反応の誘導及び炎症作用(1、2)に関連している。１８世紀半ばに、この族の最初の物質は、刺激された扁桃腺リンパ球又はマクロファージからクローンされた。この族は、始めの２つのシステインの相互配置によりCXC及びCCケモカインに更に分類される。大部分のCXC及びCCケモカインは、免疫反応に関係する細胞に関して化学走性を有する。幾つかのCCケモカインは、複数の生物学的活性、例えば、血液生成始原細胞の増殖及び分化の制御(5、6、7、8、9)、免疫細胞の広い範囲の活性化及び誘引(10、11)、及びCD4+Ｔリンパ球におけるHIV-１及びHIV-２の複製制御の仮定された関係(postulated participation)(12)を示す。上記CCケモカインで一番良く説明され、一番良く研究されているものには、MIP-１α、MIP-１β及びRANTESが含まれている。ケモカインの分類、CC及びCXCケモカインは、染色体でのその構造及びその遺伝子の位置を反映している(14、15、16、17)。ヒトCXC ケモカインの遺伝子は、一般的に染色体４にあり、４つのエクソン及び３つのイントロンから成っているが、CCケモカインの遺伝子はヒト染色体17にあり、3 つのエクソン及び２つのイントロンを有する保存された構造を持っている(18、1 9)。1995年に、ケモカインの新しい型が発見された。これは、Ｃ族と呼ばれ、ネズミリンパタクチン(lymphotactin)から得られる(20)。この発見は、ケモカインが２つの小族にのみ限られるものではないことを示した。本発明は、とりわけ、ヒトタンデム遺伝子のクローニング、並びに６つのシステイン残基を有する新規CCケモカインCC-2及び上記因子HCC-１のためのオープンリーディングフレーム(ORFs)を含む、対応する成熟(mature)ビシストロニック(bic istronic)ｍRNAに関する。この因子は、ヒト血液濾過物から単離され、健康な固体(1-5nM)及び腎疾患に苦しむ患者(5-80nM)のヒト血漿において高いレベルで循環していることが示されている(21)。他と異なり、CCケモカインと関連してHCC- １は、単球に対する化学活性を有しておらず、これらの細胞の細胞内Ca²⁺の移動及び酵素の放出を少し刺激するのみである。更に、HCC-1は分量依存的な方法でC D34+骨髄芽細胞の増殖を促進する(21)。HCC-1について説明された活性以外に、その主要な生物学的機能は明らかになっていない。本発明のヒトタンデム遺伝子の核酸は、２つの新規CC型ケモカインをコードし、その配列はMIP-1αの配列と誤って多少相同である。従って、本発明は、以下の配列を有するタンデム遺伝子の核酸に関する。及び上記配列は、以下のアミノ酸配列を有するヒトサイトカインCC-2及びCC-3をコードする。タンデム遺伝子の転写は、最近記載された因子HCC-1及びCC-2の非重複オープンリーディングフレームを含むビシストロニック成熟転写物に導いた。更に、一次転写のオルタナティブスプライシングは、少なくとも１つのCC型ケモカイン、サイトカインCC-3を更に生成した。本発明は、更に、これらの新規CC型サイトカイン及びそれらの生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び/又はグリコシル化誘導体に関する。２つの機能性プロモーター領域が、タンデム遺伝子内で特定された。タンデム遺伝子の発現を誘導するそれらの能力を研究した。得られたデータは、新規ヒトCC -2／HCC-1タンデム遺伝子の構造及び発現についての幾つかの基本的な知識を提供し、高度真核生物において調節することができる近接して連結している遺伝子の同時発現の機構を説明する。本発明は、サイトカインCC-2及び／又はCC-3並びにそれらの生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び／又はグルコシル化誘導体を活性成分として含有する薬剤に関する。薬剤は、その投与方法に適合する適当なガレニクス(galenic s)に従って投与される。ペプチドについて通常のように、本発明の薬剤は、非経口静脈内、筋内、鼻腔内又は口腔内(bucal)経路を介して投与することができる。投与されるべきペプチドの分量は、単位投与あたり10から3000μｇの間である。本発明の診断試薬は、ELISA又はRIA等の公知のアッセイに使用されるべき、本発明のペプチドに対するポリ又はモノクローナル抗体を、所望により蛍光標識又は放射標識形態で含む。本発明の診断試薬は、サイトカイン、mRNA、本発明の核酸若しくはそのフラグメントをコードする核酸、又はサイトカインCC-2及び／又はCC-3をコードする核酸にハイブリダイズすることができるポリ若しくはオリゴヌクレオチドを含むことができる。本発明のペプチドサイトカインCC-2及び／又はCC-3は、細胞移入障害、免疫系の疾病、癌及び調節成長機能異常の治療のための薬剤の調製のために使用することができる。本発明は、更に、ストリンジェントな条件下、本発明の核酸にハイブリダイズすることができる核酸プローブに関する。ビシストロニックCC-2／HCC-1ｃDNAの配列の完全長cDNAは、T-84細胞から得られた５μｇの全RNAを用いて５’-RACE PCRにより得られた。PCRフラグメントは直接シークエンスされ、特異的プライマーと組み合わせたオリゴ-dTプライマーを用いて、成体肝臓cDNAの第一鎖から再増幅(35サイクル)された。入れ子状に重なった(nested)プライマーを用いて、第二の増幅工程(30サイクル)が続けられた。コンピューターに補助された配列分析は、cDNA内の２つのオープンリーディングフレーム(ORF)の存在を確認した。上流ORFは、長さ113アミノ酸(aa)の仮想の前駆体をコードする。興味深いことに、最初のORFの翻訳は、３つの終止コドンにより終結する。疎水性プロットは、リーダーペプチドとすることができる20aaのＮ末端疎水性配列を示した。我々がCC-2と呼ぶ仮想のペプチドの配列は、MIP-1 αの配列と46%の相同性を示すが、２つのシステインを更に有している。下流ORF はHCC-1をコードする。一次転写のイントロン１内のオルタナティブスプライシングは、16アミノ酸を更に含むHCC-1のペプチドの変形物(variations)を提供する。ヒトCC-2/HCC-1タンデム遺伝子の構造が決定された。ヒトDNAライブラリーから単離されたλ-FIX-IIファージから単離された20kbpのタンデム遺伝子は、７つのエクソンを含み、エクソンα-δは仮想ペプチドCC-2をコードし、エクソン1-3は HCC-1をコードする。全領域については、制限酵素による分析により地図が作製された。Sstl制限酵素フラグメントの順序及び配向は、それぞれのSstI制限酵素部位のフランキング領域のシークエンシングにより決定された。シークエンシングは、自動蛍光シーケンサーを用いて行われた。HCC-1遺伝子を含む制限酵素フラグメントは、放射標識プローブとしてHCC-1cDNAを用いるサザンブロッティングにより検出された。モノシストロニックHCC-1cDNAの15つの末端bp(エクソン１より上流の黒の部分に斜線で示されたボックス)は、ビシストロニックm RNAには出現しない。従って、末端bpは、同時にエクソン１及びイントロンδの一部である。CC-2遺伝子配列はプライマー歩行(walking)により決定された。全てのエクソン/イントロンスプライシング連結は、共通配列と良く合致している。プライマー配列は、ビシストロニックCC-2 cDNAから誘導される。２つのプロモーター(黒い矢印、P1及びP2)の活性は、ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイにより研究された。転写の出発部位は、予めプライマー伸長、半定量的RT-P CR及び５'-RACEにより決定された。本発明は、以下の実施例により更に例示される。 HCC-1遺伝子の調節を研究するために、HCC-1をコードする遺伝子は、ハイブリダイゼイションプローブとしてHCC-1 cDNAの一部分を用いてクローンされた。配列分析は、HCC-1の配向が、CC遺伝子の典型的な３つのエクソン及び２つのイントロンにより形成された記載の構造と良く一致していることを示した。遺伝子の染色体地図を得るために、それぞれ特定された分量のヒトの染色体を含む３つのネズミ細胞ハイブリッドのDNAを用いてPCRが行われた。結果は、HCC-1遺伝子が染色体17に位置しており、従って、ccケモカイン遺伝子の小群に分類することができることを示した。 HCC-1プロモーターの活性の研究は、以下のように行われた。始めに、転写開始部位は、プライマー伸長及び半定量的RT-PCR分析（逆転写酵素PCR）により決定され、オルタナティブ転写開始点は、骨髄及び扁桃腺に比べて、肝臓に存在していることが示された(データは示されていない)。調節成分及びTATAボックスモチーフを含むと推測される上流領域の約700bpは、ルシフェラーゼレセプター遺伝子から上流にpGL-2塩基ベクターでクローンされた。レセプター遺伝子のアッセイは、５つの５'-切断欠失構築物及び記載のHCC-1プロモーター/レセプター遺伝子構築物をHUH-1、Ｔ84及びRK13と呼ばれる３つの異なる細胞系に移入することにより行われた。トランスフェクションの前に、HUH-7及びT-84細胞は、HCC -1遺伝子の発現について試験され、どちらの細胞系もHCC-1遺伝子を発現することが分かった。驚くべきことに、弱いプロモーター活性のみ(バックグラウンド活性の２から３倍)が、HUH-7及びT-84細胞において測定され、低い活性(バックグラウンド活性の６倍)がRK-13細胞において検出された。しかしながら、ノーザンブロット分析は肝臓において強いHCC-1 mRNA信号を、かつ大腸において明らかに検出可能な信号を示し、HCC-1プロモーターのin vivoでの活性は、レポーター遺伝子構築物では欠落しているエンハンサー成分に依存していることが示唆された。発現された配列断片(ESTs)のデータベースの慣例の配列研究の過程において、5' -伸長部分HCC-1cDNA配列が見つかった。追加的な5'-末端配列は、調節HCC-1上流領域には現れておらず、プロモーター活性についての試験により、少なくとも１つの更なる上流非翻訳エクソンの存在が示唆された。興味深いことに、HCC-1cDN A(21)の15の5'末端ヌクレオチドは、伸長されたcDNAには現れていないが、レセプター遺伝子アッセイにおいて試験されたフラグメントはHCC-1プロモーターの一部であった。これらの発見は、驚いたことに、最初の非翻訳エクソンから上流の第二のプロモーター領域があることを示している。遺伝子内で第二プロモーターをの位置を確かめるために、完全伸長HCC-1cDNAが、T-84細胞の全RNAから合成された第一鎖のcDNAを用いて5'-RACE PCR法により単離された。得られた生成物は、出版されたHCC-1cDNA配列に比べて441のヌクレオチドを更に含んでいた。ES Tが、RACE PCT生成物の5'末端と一致するデータベースから発見することができたことは驚くべきことである。これは、伸長されたcDNAが完全長鎖である可能性を強めた。cDNA配列の分析は、cDNAの最初の5'末端ORFはHCC-1をコードせず、新規CCケモカイン、CC-2をコードすることを示した。このcDNA配列から誘導されたペプチドは、113アミノ酸から成り、リーダーペプチドの典型的な特徴である20 アミノ酸の疎水性N-末端配列を含んでいる。配列比較研究は、CC-2及びMIP-1αの前駆体は46%の相同性を有することを示した。しかしながら、仮想CC-2は６つのシステイン残基を含むが、最近、これがCC-2と低い配列相同性を示す、同じシステインのパターンを有する２つの新規ネズミCCケモカイン、C10(22)及びCCF18(23)にも報告されている。ヒトCCケモカインI-309( 27)も、６つのシステイン残基を含むが、２つの更なるシステイン残基については異なる相互配置を有している。従って、CC-2、C10及びCCF18は、ヒト及びネズミで保存された新規CCケモカインの小群を形成し、仮想ジスルフィド結合を更に有する。ビシストロニック転写物が形質転換されていない組織細胞においても合成されることを証明するために、完全長cDNAは成体肝臓のcDNAの第一鎖から単離され、シークエンスされた。CC-2及びHCC-1のオープンリーディングフレームは重複せず、101ヌクレオチド離れていた。シークエンスされたcDNAクローンは、下流のコーディング領域に48のヌクレオチドを更に含み、16のアミノ酸を更に含むHCC-1ペプチドの変性物を生成した。このCCケモカインはCC-3と呼ばれた。HCC -1遺伝子の遺伝的配列との比較から、追加エクソンがイントロン１に存在し、一次転写のオルタナティブスプライシングにより生成されることが示された。更に、CC-2遺伝子配列の構造が測定され、対応する遺伝子の調節が研究された。従って、HCC-1遺伝子のスクリーニング中に初めに単離されたλ-FIX-IIファージの全挿入物がマッピングされた。HCC-1遺伝子の5'-上流領域を含む16kpb制限酵素フラグメントが見つかった。配列分析は、このフラグメント中のCC-2ヌクレオチド配列をコードする領域をはっきりと確認した。２つのイントロンにより分離されている３つのエクソンを含む全てのCCケモカイン遺伝子と比較して、CC-2遺伝子をコードする領域は、３つのイントロンにより分離されている４つのエクソンから成っている。CC-2遺伝子のエクソンδの末端からHCC-1遺伝子のエクソン１までの距離は、約12kbpである。タンデム遺伝子のエクソンαの上流領域は、転写開始部位に関して-32の位置にTATAボックスモチーフ(TATAAT)を含むが、GC 又はCCAATボックスモチーフは含まない。pGL-2塩基ベクターにクローンされた約 900bpの仮想プロモーターの相対活性は、T-84細胞を移入することにより試験された。プロモーターはバックグラウンド活性の８から９倍の活性を有していることが示され、これは、タンデム遺伝子が有効に転写されたことを証明している。２つのプロモーターの比較に弱い活性を考慮すると、肝臓及び他の様々な組織におけるHCC-1の強い構築的発現を生じる相乗作用が２つのプロモーター領域にあるのではないかという疑問を生じるであろう。しかしながら、タンデム遺伝子複合体内の２つのプロモーター領域の存在は、タンデム遺伝子の２つの転写的単位は独立に活性化されていることも示している。これは、イントロンとして表向きには機能する、間のスペーサー領域の重要性を強調し、よって、近接して連結した遺伝子をつなげるための真核生物のゲノム内の提示領域は特定の状況において重要になる可能性がある。ヒト及びネズミのビシストロニック成熟ｍRNAｓの存在は、最初にGDF-1で報告され、U0G-1(28)と呼ばれる未知の因子で次に報告された。従って、CC-2/HCC-1タンデム遺伝子は、成熟ビシストロニックヒトｍRNAの２番目の例であり、ポリシストロニック成熟転写物が、高度真核生物において更に広い範囲にあるという仮説を支持する。最近、転写因子GA TA-1(24)及び幾つかの他の因子(25、26)で示されたように、最初のATG出発コドンの使用は、原核生物のｍRNAsに限定されず、真核生物の細胞においても起こる。真核生物の成熟ポリシストロニックmRNAsの転写が多数の遺伝子生成物を生じることを証明することが残されている。この観点から、我々の研究は、近接して連結した遺伝子の構造及び調節並びにポリシストロニックmRNAsの形成について幾つかの新規な基本的な知識を提供する。１．バギオリーニ(Baggiolini)、M．&ダヒンデン(Dahinden)、C．A．Immunolo gy Today 15、127-133(1994) ２．フーリエ(Furie)、M.B.&ランドルフ(Randolph)、G.J.Am.J.Pathol.146、1 287-1301(1995) ３．オバル(Obaru)、K．ら、J．Biochem．99、885-894(1986) ４．ダバテリス(Davatelis)、G．ら、J．Exp．Med．167，1939-1944(1988) ５．グラハム(Graham)、G.J.&プラグネル(Pragnell)、I.B.Dev.Biol．151、37 7-381(1992) ６．バーファイリー(Verfaillie)、C.M．ら，J.Exp.Med．179、643-649(1994) ７．ブロクシメイヤー(Broxmeyer)、H．E．ら、J．Immunol．147、2586-2594( 1991) ８．ブロクシメイヤー(Broxmeyer)、H．E．ら、J．Immunol．150、3448-3458( 1993) ９．グラハム(Graham)、G．J．ら、Nature 344、442-444(1990) １０．アガッシオーニ(Uguccioni)、M．ら、Eur．J．Immunol．25、64-68(1995) １１．ロット(Rot)、A．ら、J．Exp．Med．176、1489-1495(1992) １２．コックチー(Cocchi)、F．ら、Science270、1811-1815(1995) １４．ウィドマー(Widmer)、U．ら、J．Immunol．146、4031-4040(1991) １５．ウィドマー(Widmer)、U．ら、J．Immunol．150、4996-5012(1993) １６．ナポリターノ(Napolitano)、M．ら、J.Biol.Chem.266、17531-17536(1991 ) １７．イルビング(Irving)、S.G．ら、Nucleic Acids Rsearch18、3261-3270(19 90) １８．バギオリーニ(Baggiolini)、M．ら、Adv．Immunol．55、97-179(1994) １９．オッペンヘイム(Oppenheim)、J．J．ら、Annu．Rev．Immunol．9、617-64 8(1991) ２０．ケルナー(Kelner)、G．S．ら、Science266、1395-1399(1994) ２１．シャルツ-カナッペ(Schulz-Knappe)、P．ら、J．Exp．Med．183、295-299 (1996) ２２．オルロフスキー(Orlofsky)、A．ら、Cell Regul．2、403-xyz(1991) ２３．ハラ(Hara)、T．ら、J．Immunol．155、5352-5358(1995) ２４．カルリガリス(Calligaris)、R．ら、Proc．Natl．Acad．Sci．92、11598- 11602(1995) ２５．デルマス(Delmas)、V．ら、Proc.Natl.Acad．Sci.89、4226-4230(1992) ２６．ショラー(Scholer)、H．R．ら、Nature344、435-439(1990) ２７．ミラー(Miller)、M．D．ら、J．Immunol．143、2907-2916(1989) ２８．リー(Lee)、S.J.、Proc.Natl.Acad.Sci88、4250-4254(1991)

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年６月１６日（１９９８．６．１６）【補正内容】請求の範囲１．以下の配列を有するタンデム遺伝子の核酸。及び上記配列は、以下のアミノ酸配列を有するヒトサイトカインCC-2及びCC-3 をコードする。２．請求項１に示されたアミノ酸配列を有するサイトカイン、CC-2及びその生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び/又はグリコシル化誘導体。３．請求項１に示されたアミノ酸配列を有するサイトカイン、CC-3及びその生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び/又はグリコシル化誘導体。４．請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又はCC-3を活性成分として含有する薬剤。５．請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又は３に対するポリクローナル若しくはモノクローナル抗体、サイトカイン、mRNAs、請求項１に記載の核酸をコードする核酸、又はサイトカインCC-2及び/又はCC-3をコードする核酸にハイブリダイズすることができるポリ-若しくはオリゴヌクレオチドを含む診断用試薬。６．細胞移入障害、免疫系の疾病、癌及び調節成長機能異常の治療のための薬剤の調製のための請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又はCC-3 の使用。７．請求項１に記載のポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸プローブ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｋ 16/24 Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｎ 5/10 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ 15/02 Ｇ０１Ｎ 33/53 ＰＣ１２Ｐ 21/08 33/566 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＣＧ０１Ｎ 33/53 5/00 Ｂ 33/566 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者フォースマンボルフ―ゲオルグドイツ連邦共和国、ハノーファーＤ― 30625、フェオドール―リネン―シュトラーセ 31、ニーデルサシッシェインスティタットフュアペプチド―フォーシュング（ＩＰＦ）ゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング (72)発明者パルディゴルアンドレアスドイツ連邦共和国、ハノーファーＤ― 30625、フェオドール―リネン―シュトラーセ 31、ニーデルサシッシェインスティタットフュアペプチド―フォーシュング（ＩＰＦ）ゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング (72)発明者マーゲルトハンス―ユルゲンドイツ連邦共和国、ハノーファーＤ― 30625、フェオドール―リネン―シュトラーセ 31、ニーデルサシッシェインスティタットフュアペプチド―フォーシュング（ＩＰＦ）ゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング (72)発明者シュルツ―ナッペペータードイツ連邦共和国、ハノーファーＤ― 30625、フェオドール―リネン―シュトラーセ 31、ニーデルサシッシェインスティタットフュアペプチド―フォーシュング（ＩＰＦ）ゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング

Claims

【特許請求の範囲】１．以下の配列を有するタンデム遺伝子の核酸。及び上記配列は、以下のアミノ酸配列を有するヒトサイトカインCC-2及びCC-3 をコードする。２．請求項１に示されたアミノ酸配列を有するサイトカイン、CC-2及びその生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び/又はグリコシル化誘導体。３．請求項１に示されたアミノ酸配列を有するサイトカイン、CC-3及びその生物学的活性アミド化、アセチル化、リン酸化及び/又はグリコシル化誘導体。４．請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又はCC-3を活性成分として含有する薬剤。５．請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又は３に対するポリクローナル若しくはモノクローナル抗体、サイトカイン、mRNAs、請求項１に記載の核酸若しくはそのフラグメントをコードする核酸、又はサイトカインCC-2及び/又はCC-3をコードする核酸にハイブリダイズすることができるポリ-若しくはオリゴヌクレオチドを含む診断用試薬。６．細胞移入障害、免疫系の疾病、癌及び調節成長機能異常の治療のための薬剤の調製のための請求項２及び/又は３に記載のサイトカインCC-2及び/又はCC-3 の使用。７．請求項１に記載のポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸プローブ。