JP2000510436A - 瘢痕形成剤としてのコンポーネントｂ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、瘢形成剤としての、特に、体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の処置におけるコンポーネントＢの使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 瘢痕形成剤としてのコンポーネントＢ 本発明は、瘢痕形成剤としてのコンポーネントＢの使用、特に、体内のあらゆ る組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の治療に関する。 コンポーネントＢは、ヒトの尿から最初に単離された８１アミノ酸の蛋白質で ある。ヒト遺伝子がクローン化されてＣＨＯ細胞中において組換えヒトコンポー ネントＢとして発現された。この分子は約８．９ｋＤの分子量を有する。それは 、さらにＷＯ９４／１４２５９に記載される。 そのような蛋白質は１０のシステイン残基を含み、そしてセリンプロテアーゼ 酵素に典型的なモチーフを示す。蛋白質データバンクに対する配列の並びは、コ ンポーネントＢの、公知分子、例えばＣＤ５９、ウロキナーゼ受容体（ｕＰＡ− Ｒ）および幾つかの毒液の毒素（venom toxins）に対する幾らかの相同性を示し た。 マウス中の器官および組織の分配の調査から出願人が得たデータは、目、肺、 および皮膚が、コンポーネントＢのＲＮＡを主に発現する部位であることを示し た。ヒトの組織中では、コンポーネントＢは、免疫組織化学による測定により、 偏平上皮および粘膜、例えば皮膚、食道および頸外部（exocervix）において高 度に発現されていることが見いだされた。最後に、ＥＧＦはヒト偏平上皮Ａ４３ １細胞においてコンポーネントＢのＲＮＡの発現を誘導することが見いだされた 。 コンポーネントＢは、抗炎症、抗凝血および抗腫瘍活性並びにＴＧＦ−αのそ の受容体への結合の阻害剤としての活性を有することが報告されている。 出願人は、今、コンポーネントＢが瘢痕形成剤としても有用であり、したがっ て、特に、体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の治療 に有用であることを見いだした。 したがって、本発明の主題は、瘢痕形成剤として有用な、特に体内のあらゆる 組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の治療に有用な、薬剤組成物の製 造のためのコンポーネントＢの使用である。 本発明のさらなる目的は、有効量のコンポーネントＢを薬学上受容される賦形 剤と共に投与することからなる、体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および 他の外傷性損傷の治療方法である。 本発明の他の目的は、上記により製造された薬剤組成物である。 コンポーネントＢの製造方法およびそのアミノ酸配列に関しては、ＷＯ９４／ １４２５９の開示を引用する。 活性成分の投与は、経口、静脈内、筋肉内、皮下または局所ルートによってよ い。他の投与ルートは各々の成分の所望の血液レベルを確立してよく、本発明に より包含される。 ヒトの治療のためには、好ましい投薬量は全身投与には１ｍｇ／ｋｇまたはそ れ以下であり、そして局所投与には４μｇ／ｃｍ²またはそれ以下である。 本発明は以下の実施例により今記載されるが、実施例は本発明の限定する手段 として解釈されるべきではない。実施例は、以下に特定される図面を引用する。 図面の簡単な説明 図１：コンポーネントＢの静脈内投与のベタメタゾン（Bentelan(ベンテラン)、 登録商標）の静脈内投与との比較における実験用創傷治癒に対する作用を示す。 特に、実験１の結果を要約する。試験薬剤は、連続６日間、０日目（創傷誘導の 日）から５日目まで毎日投与した。 図２：コンポーネントＢ（バッチ００４−００１ｂ）の静脈内投与のベタメタゾ ンメタソン（Bentelan、登録商標）の静脈内投与との比較における実験用創傷治 癒に対する作用を示す。特に、実験２の結果を要約する。試験薬剤は、連続６日 間、０日目（創傷誘導の日）から５日目まで毎日投与した。 図３：コンポーネントＢ（バッチ００４−００１）の局所投与の実験用創傷治癒 に対する作用を示す。特に、実験３の結果を要約する。試験薬剤は、連続５日間 、０日目（創傷誘導の日）から４日目まで毎日投与した。 図４：ウシ血清アルブミンの局所投与の実験用創傷治癒に対する作用を示す。特 に、実験４の結果を要約する。試験薬剤は、連続５日間、０日目（創傷誘導の日 ）から４日目まで毎日投与した。 図５：実験１の結果に適用されたＳ字状投薬量応答分析を報告する。コンポーネ ントＢ（バッチ００４−００１および００４−００１ｂ、それぞれ「００１」お よび「００１ｂ」と示す）およびベタメタゾン（Bentelan、登録商標）の静脈内 投与の実験用創傷治癒に対する作用は、したがって、実験１の結果を基にして統 計学により評価される。 図６：実験２の結果に適用されたＳ字状投薬量応答分析を報告する。コンポーネ ントＢ（バッチ００４−００１ｂ、「００１ｂ」と示す）およびベタメタゾン（ Bentelan、登録商標）の静脈内投与の実験用創傷治癒に対する作用は、したがっ て、実験２の結果を基にして統計学により評価される。 図７：実験１および２の累積された結果に適用されたＳ字状投薬量応答分析を報 告する。コンポーネントＢ（バッチ００４−００１ｂ）の静脈内投与の実験用創 傷治癒に対する作用は、したがって、実験１および２の結果の組み合わせを基に して統計学により評価される。 図８：実験１および２の組み合わせに対する、累積された度数に適用されたＳ字 状投薬量応答分析を報告する。コンポーネントＢ（バッチ００４−００１ｂ）の 作用がそのように評価される。 図９：実験３の結果に適用されたＳ字状投薬量応答分析を報告する。コンポーネ ントＢ（バッチ００４−００１）の局所投与並びに静脈内投与の実験用創傷治癒 に対する作用は、したがって、実験３の結果を基にして統計学により評価される 。 図１０：実験４の結果に適用されたＳ字状投薬量応答分析を報告する。バッファ ーとＢＳＡの創傷減少における作用の比較は、したがって、実験４の結果を基に して統計学により評価される。 実施例 材料 動物 雌雄両方のＳＰＦ ＣＤ−１マウスをチャールズリバーイタリア(Ｃａｌｃｏ ，Ｃｏｍｏ，イタリア）から購入して、制御された環境条件下で(温度：２２± ２℃；湿度：５５±１０％および１２時間の日照／暗黒サイクル)、少なくとも ７日間の順応期間後に、実験に使用した。 試験化合物 −本質的にはＷＯ９４／１４２５９に記載されたとおりにＣＨＯ細胞中で発現さ せて生成したｒｅｃ−ｈコンポーネントＢバッチ００４−００１（硫酸塩の形 態）および００４−００１ｂ（非硫酸塩の形態） −Ｇｌａｘｏ（Ｖｅｒｏｎａ，イタリア）からのベタメタゾンの市販の製造物 （Bentelan、登録商標） −Ｂａｘｔｅｒ（Ｔｒｉｅｓｔｅ，イタリア）からの塩化ナトリウム０．９％ （塩水） −シグマケミカルズ社（セントルイス、ＭＯ，アメリカ合衆国）から供給された ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）のフラクションＶ 方法 実験用の十分な厚さの創傷の治癒 用いられた方法は、Ｊ．Ｊ．Ｐ．ＭｏｒｔｏｎとＭ．Ｈ．Ｍａｌｏｎｅにより 示唆された方法であったが(Ｍｏｒｔｏｎ Ｊ．Ｊ．Ｐ．ａｎｄＭａｌｏｎｅ Ｍ．Ｈ.，Ａｒｃｈ．Ｉｎｔ．Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎ．１９６：１１７，１９ ７)、彼らは、多くの薬剤のラットにおける創傷治癒活性の評価に、この方法を 用いた。 コンポーネントＢの本調査のために、元の方法を、以下のとおりにマウスにて 用いられるように適切に修飾した。 円のインクマーク（１センチの直径）をオスのマウス（３０−３５ｇ，６−７ 週齢）の背中の領域に刻印し、そしてこの標識されたエリアの皮膚（皮筋層およ び接着組織を含む）を外科用ハサミおよび鉗子により切り出した。次に、創傷を ガーゼのパッドにより造血が起こるまで吸い取り乾燥した(blotted dry)。０日 目、即ち外科手術日に、縦、横、および２つの対角線の測定（脊椎柱に対して） を、創傷の直径に対して最短０．１ｍｍまで、直接読み取りカリパスで行った。 測定の正確な点は、消えないインクにより隣接する皮膚をマークすることにより 保護した。次の創傷実験は、日曜日以外の毎日、創傷が完全に閉じるまで行った 。外科手術および測定は、共に、マウスを軽いエーテル麻酔することにより行っ た。 各創傷の面積は、その平均直径の二乗に０．７８５４を掛けることにより得た 。次に、パーセントの創傷の閉鎖を０日目に比較して計算した。各々の測定日に 関する平均パーセント創傷閉鎖の値は、各実験群に関して表にされて、閉鎖時間 ５０％（ＣＴ₅₀）を相互にプロットした。 全身処置 ２つの実験（実験１および２）を実施した。第２の実験においては、処置スケ ジュールを知らされなかった同じ操作者が各実験日に実施した。各実験において 、動物は４つの群に分けられて、以下のスケジュールにしたがって処置した。群の番号 第１実験 第２実験 １ 塩水10mg/kg，i.p. 塩水10mg/kg，i.p. ２ コンポーネントＢ004-001， コンポーネントＢ004-001b， 1mg/kg，i.v. 1mg/kg，i.v. ３ コンポーネントＢ004-001b， コンポーネントＢ004-001b， 1mg/kg，i.v. 1mg/kg，i.v. ４ ベタメタゾン、1mg/kg，i.v. ベタメタゾン、1mg/kg，i.v. 動物は１日１回６日続けて処置された。動物の体重はこの調査の全期間を通じ て監視された。 局所処置 さらなる実験（実験３）においては、異なる投薬量のコンポーネントＢ（バッ チ００４−００１）の局所投与の効果を、以下の表に報告された処置スケジュー ルに従い、創傷誘導のための前に記載された方法を用いて調査した。群の番号 処置 １ リン酸バッファー０．０５ｍｌ、局所 ２ コンポーネントＢ００４−００１、１μｇ，局所 ３ コンポーネントＢ００４−００１、２μｇ，局所 ４ コンポーネントＢ００４−００１、４μｇ，局所 ５ コンポーネントＢ １ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｖ． 試験生成物の溶液を１日目および２日目に創傷上に塗ったが(体積０．０５ｍ ｌ)、連続する日において、かさぶたが形成されていたら、２５Ｇの針を有する シリンジによりかさぶたの下に注射された。 １ｍｇ／ｋｇの投薬量にて静脈内（ｉ．ｖ.）投与されたコンポーネントＢは 陽性参照基準として用いられた。 蛋白質溶液の局所投与の特異的効果の可能性を除外するために、平行実験にお いては、コンポーネントＢと同じモル濃度において(８．８×１０^-6Ｍ)、ＢＳＡ の効果をリン酸バッファーと比較して局所アッセイした(実験４)。 結果 創傷治癒 図１は第１の実験のデータを報告するが、コンポーネントＢの２つのバッチ（ ００４−００１および００４−００１ｂ）の活性を比較した。両方とも瘢痕形成 過程を促進することができたが、それらの効果は処置１日後に既に明らかであっ た。ＣＴ₅₀、即ち５０％の創傷減少が生じる時間はそれぞれ３．０および３．４ 日であり、それらの値は統計学上は異ならない。対照的に、７．８日および７． ２日のＣＴ₅₀がベタメタゾン（Bentelan、登録商標）および塩水においてそれぞ れ観察された(「統計分析」と題される段落を参照されたい)。 第２の実験において(図２)、２種類の投薬量のコンポーネントＢ（バッチ００ ４−００１ｂ）を調査した。もっとも高い投薬量１ｍｇ／ｋｇにおいて、ＣＴ₅₀ は３．７日であり、最も低い投薬量において（０．１ｍｇ／ｋｇ）６．６日であ った。塩水およびベタメタゾン処理した群は、それぞれ９．１日および１０日の ＣＴ₅₀を示した(「統計分析」と題される段落を参照されたい)。 創傷治癒におけるコンポーネントＢの正の効果は他の指数即ちＥＴ₅₀によって も確認され、動物の５０％が完全な創傷の閉鎖を示した時間を示唆する(「統計分 析」と題される段落を参照されたい)。 コンポーネントＢを創傷上に局所適用した際の実験結果（実験３）を図３に報 告する。該化合物を投薬量１、２および４μｇ／日で５日連続して調査した。ア ッセイした全ての投薬量は対照に比して創傷の治癒の進行を高めることができた 。特に、２および４μｇの投薬量はそれぞれ３．８および４．４のＣＴ₅₀値を提 供し、これらは静脈内投与されたコンポーネントＢ１ｍｇ／ｋｇを用いて見いだ された値（３．９）に匹敵した。最も低い投薬量（１μｇ）においては、５．３ 日のＣＴ₅₀値が観察され、他の２つの局所投薬量で得られた価よりも高かったが 、対照よりは顕著に低かった(「統計分析」と題される段落を参照されたい)。 これらのデータは、創傷に局所投与された２μｇの投薬量が最大の効果を生じ ること、および１μｇは瘢痕形成の進行を高めるのにそれでもやはり効果的であ ることを暗示する。 創傷治癒の進行に対するコンポーネントＢの正の効果が生成物に特定の特徴で あるか否かを確認するために、平行実験を実施したが、該実験においては、コン ポーネントＢと同じモル濃度のＢＳＡの効果をリン酸バッファーの効果と比較し た(実験４)。これらのデータを図４に報告する。９．９日および７．９日のＣＴ₅₀ がＢＳＡおよびリン酸バッファーにそれぞれ記録された。上記値は顕著に異な らないことから(「統計分析」と題される段落を参照されたい)、即ち、ＢＳＡのよ うな標準蛋白質溶液は皮膚の創傷修復に影響しないことが示唆される。 これらの実験の個々のデータは表１Ａ−４Ｂに記録される。 統計分析 統計戦略 統計分析はコンポーネントＢ（Ｃｏｍｐ．Ｂ）対塩水と標準薬剤ベンテランの ２つの調製物の時間に関しての効果を比較することを目的とした。 さらに、コンポーネントＢの一つの調製物の全身および局所投与の効果も評価 した。 処置のプロトコルにしたがい、試験薬剤の効果を全観察期間を通して調査した 。 異なる投薬量レベルにおけるコンポーネントＢの効果を確認するために、創傷 減少実験を２回繰り返した。 統計試験 ＣＴ₅₀（即ち、創傷領域が５０％減少した時間）の評価のために、Ｓ字状投薬 量応答分析を統計試験として使用した(Ｆｉｎｎｅｙ Ｄ．Ｊ.，Ｂｉｏｍｅｔｒ ｉｃｓ，３２，ｐｐ．７２１−４０，１９７６を参照されたい)。 統計ユニット １）創傷減少（ＣＴ₅₀）：変化の平均パーセンテージ対平均基底値 ２）累積度数（ＥＴ₅₀）：各時間点における完全な創傷閉鎖を示す動物の累積度 数 処置群（実験１） １−塩水−１０ｍｌ／ｋｇ／日、ｉ．ｐ．６日間 ２−ベンテラン−１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｐ．６日間 ３−コンポーネントＢ 004-001−１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 ４−コンポーネントＢ 004-001b−１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 処置群（実験２） １−塩水−１０ｍｌ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 ２−ベンテラン−１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 ３−コンポーネントＢ 004-001b−０．１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 ４−コンポーネントＢ 004-001b−１ｍｇ／ｋｇ／日、ｉ．ｖ．６日間 処置群（実験３） １−リン酸バッファー−５０μｌ／日、局所５日間 ２−コンポーネントＢ 004-001−１μｇ／日、局所５日間 ３−コンポーネントＢ 004-001−２μｇ／日、局所５日間 ４−コンポーネントＢ 004-001−４μｇ／日、局所５日間 ５−コンポーネントＢ 004-001−１ｍｇ／日、ｉ．ｖ．５日間 処置群（実験４） １−リン酸バッファー−５０μｌ／日、局所５日間 ２−ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）−５０μｌ／日(8.8×10^-6M)、局所５日間 処置スケジュール（実験１、２、３および４） フェーズ１：上記処置群の記載に従った繰り返しの処置日 フェーズ２：創傷が完全に閉鎖した日までの観察期間 統計分析の結果 図５−１０に記録されたダイアグラム（Ｓ字状投薬量応答分析）は、創傷面積 を変数として使用した試験薬剤の効果を要約する。 実験１ 図５を引用する。 実験１に関して創傷面積（area）に適用されたＳ字状投薬量応答分析の結果（ ＣＴ₅₀）を以下の表に記録する。試験薬剤 ＣＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² 塩水 ７．２ ６．２−８．３ ０．９６ ベンテラン 1mg/kg ７．８ ６．９−８．８ ０．９７ コンポーネントＢ 004-001 1mg/kg ３．０ ２．５−３．７ ０．９７ コンポーネントＢ 004-001b １mg/kg ３．４ ２．８−４．１ ０．９７ 実験２ 図６を引用する。 実験２に関して創傷面積（area）に適用されたＳ字状投薬量応答分析の結果（ ＣＴ₅₀）を以下の表に記録する。試験薬剤 ＣＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² 塩水 ９．１ ８．４−９．９ ０．９８ ベンテラン １mg/kg １０．０ ９．６−１０．４ ０．９９ コンポーネントＢ 004-001b １mg/kg ６．６ ５．５−７．７ ０．９４ コンポーネントＢ 004-001b １mg/kg ３．７ ２．８−４．８ ０．９２ 実験１および２の組み合わせ 実験１および２の両者に共通な処置群のデータ、即ち塩水対コンポーネントＢ −００４−００１ｂ １ｍｇ／ｋｇの組み合わせから得られたデータを要約する 。 さらに、創傷の完全な閉鎖を示す動物の時間に関する頻度も実験１および２の 累積から評価した（Ｓ字状投薬量応答分析により）。 実験１および２の組み合わせに関して創傷面積（area）に適用されたＳ字状投 薬量応答分析の結果（ＣＴ₅₀）を以下の表に記録する。試験薬剤 ＣＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² 塩水 ８．２ ７．５−８．９ ０．９５ コンポーネントＢ 004-001b １mg/kg ３．５ ３．０−４．１ ０．９５ 累積頻度に関しては、図８を引用する。 実験１および２の組み合わせに関して累積頻度に適用されたＳ字状投薬量応答 分析の結果（ＥＴ₅₀）を以下の表に記録する。試験薬剤 ＥＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² 塩水 １６．１ １５．４−１６．９ ０．９８ コンポーネントＢ 004-001b 1mg/kg １１．７ １１．２−１２．１ ０．９８ 結論として、ＣＴ₅₀値およびＥＴ₅₀値の間の比較は実験モデル上の各々の試験 薬剤の効果の良好な評価となる。 コンポーネントＢ−００１（１ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｖ.）およびコンポーネント Ｂ −００１ｂ（投薬量レベル０．１ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｖ.）の 両方が実験１および２における塩水およびベンテランとは統計学上異なることが 見いだされた。実験１および２に共通の処置群の組み合わせの結果は、コンポー ネントＢ １ｍｇ／ｋｇによる投与の静脈内（ｉ．ｖ.）ルートの効果を確証す る。 実験３ 図９を引用する。 生成物を局所投与した場合のさらなる実験セットを実施した。静脈内投与のル ートを陽性参照基準として用いた。データは上記と同じ統計モデルを用いて分析 した。 実験３に関して創傷面積（area）に適用されたＳ字状投薬量応答分析の結果（ ＣＴ₅₀）を以下の表に記録する。試験薬剤 ＣＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² リン酸バッファー ８．３ ７．３−９．５ ０．９６ コンポーネントＢ-001 １mcg局所 ５．３ ４．１−６．９ ０．９１ コンポーネントＢ-001 ２mcg局所 ３．８ ２．９−４．９ ０．９２ コンポーネントＢ-001 ４mcg局所 ４．４ ３．４−５．６ ０．９２ コンポーネントＢ-001 １mg/kgi.v. ３．９ ３．０−５．２ ０．９２ 結論として、コンポーネントＢ−００１ｂの局所投与は、試験された全ての投 薬量において、リン酸バッファーとは顕著に異なる創傷の減少（ＣＴ₅₀）を示し た。 実験４ 図１０を引用する。 ダイアグラムは、コンポーネントＢの起こり得る副作用を除外するために、創 傷の減少におけるリン酸バッファーとＢＳＡの間の局所投与の比較を報告する。試験薬剤 ＣＴ₅₀（日） 信頼限界 Ｒ² バッファー ７．９ ７．２−８．７ ０．９８ ＢＳＡ ９．９ ８．５−１１．４ ０．９５ 上記データは、リン酸バッファーとＢＳＡの間の局所投与に何ら差異を示さな かった。 全ての調査の結論 本調査の興味ある結果は、静脈内投与または局所投与の両者による瘢痕形成過 程におけるコンポーネントＢの活性である。本研究に用いられた実験モデルはヒ トの外傷等価物に直接関連し、そして皮膚の外傷性損傷の治癒および粘膜並びに 上皮のプラスチックおよび再生外科手術におけるコンポーネントＢの適用に関す る予報である。 表１Ａ：創傷治癒データー実験１表１Ｂ：創傷治癒データー実験１表１Ｃ：創傷治癒データー実験１表１Ｄ：創傷治癒データー実験１表２Ａ：創傷治癒データー実験２表２Ａ(続き)：創傷治癒データー実験２表２Ｂ：創傷治癒データー実験２表２Ｃ：創傷治癒データー実験２表２Ｃ(続き)：創傷治癒データー実験２表２Ｄ：創傷治癒データー実験２表３Ａ：創傷治癒データー実験３表３Ｂ：創傷治癒データー実験３表３Ｃ：創傷治癒データー実験３表３Ｄ：創傷治癒データー実験３表３Ｅ：創傷治癒データー実験３表４Ａ：創傷治癒データー実験４表４Ｂ：創傷治癒データー実験４

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】平成１０年５月２０日（１９９８．５．２０） 【補正内容】 請求の範囲 １．瘢痕形成剤として有用な医薬の製造のためのコンポーネントＢの使用。 ２．体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の処置におけ る、請求項１記載の使用。 ３．活性成分としてコンポーネントＢ並びに薬学上受容可能な賦形剤を含む、瘢 痕形成剤として適切な形態の医薬組成物。 ４．有効量のコンポーネントＢを薬学上受容可能な賦形剤と共に投与することか らなる、体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の処置方 法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マルテッリ，ファブリツィオ イタリア国イ―00162 ローマ，ヴィア・ サンブクッチオ・ダランド 14 (72)発明者 マストランジェーリ，レナート イタリア国イ―00146 ローマ，ヴィア・ ペスカイア 93

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．瘢痕形成剤として有用な医薬の製造のためのコンポーネントＢの使用。 ２．体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の処置におけ る、請求項１記載の使用。 ３．活性成分としてコンポーネントＢ並びに薬学上受容可能な賦形剤を含む、瘢 痕形成剤として有用な医薬組成物。 ４．有効量のコンポーネントＢを薬学上受容可能な賦形剤と共に投与することか らなる、体内のあらゆる組織に対する創傷、潰瘍および他の外傷性損傷の処置方 法。