JP2000342250A

JP2000342250A - 重油分解能を有する新規細菌株、その細菌混合物、重油分解菌生育用組成物、石油成分の処理方法およびその被処理物を含む建築土木材料

Info

Publication number: JP2000342250A
Application number: JP2000065763A
Authority: JP
Inventors: Tokio Fujita; 藤樹夫藤田
Original assignee: GIJUTSU ITEN KIKO KK
Current assignee: GIJUTSU ITEN KIKO KK
Priority date: 1999-03-29
Filing date: 2000-03-06
Publication date: 2000-12-12

Abstract

(57)【要約】【課題】安価に調製でき、分解除去作業および保存・
輸送等が簡便に行える重油分解菌、重油分解菌混合物、
その生育用組成物、上記細菌を用いる重油分解方法並び
に重油分解産物を含む建築土木材料を提供する。【解決手段】アシネトバクター（Acinetobacter ）属
に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクタ
ー（Acinetobacter ）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４
９菌株、シュドモナス（Pseudomonas)属に属するＦＥＲ
ＭＢＰ−７０４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligene
s)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株をそれぞれ単
独で、または少なくとも一種を含む細菌混合物を被処理
物に対し作用させる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、重油分解に使用さ
れる新規細菌株、細菌混合物、重油分解菌生育用組成
物、石油成分の処理方法およびその被処理物を含む建築
土木材料に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】近年、世界各海域において、大型タンカ
ー事故、海底油田開発等に伴う重油、原油流出による海
洋汚染が進み、地球環境悪化の原因の一つとなってい
る。

【０００３】従来より、海洋に流出した重油、原油等の
石油類を、これらの含有成分である主に炭化水素等に対
する分解能を有する微生物を利用して分解除去する手段
が用いられている。具体的には、まず、石油成分である
飽和炭化水素・芳香族炭化水素等を資化・分解できる微
生物を自然界よりスクリーニングした後、単離して生育
させ、その培養液を調製して利用に供する方法が一般的
に行われる。

【０００４】また、分解除去過程において、微生物の生
育に必要とされる栄養分を同時に加えることにより、上
記微生物の分解能を最大限に引き出すことが可能であ
る。さらには、微生物を含まない上記栄養分のみを重油
等の被処理物に対し加え、被処理物周辺に元来存在して
いる他の微生物の分解能を利用して、石油類を分解除去
する手段を採用することが可能である。

【０００５】たとえば、炭化水素に対する分解能を有す
る細菌は、通常の海岸において常在している。これを利
用して、該細菌に対して上記栄養分を加えることによ
り、細菌が本来有する炭化水素分解能を活性化させるこ
とができれば、生態系に悪影響を及ぼすことなく、重油
等を分解除去でき、環境保全上有用である。

【０００６】一方、大型タンカー事故等により流出した
重油を分解除去するに際しては、重油が付着した状態で
の土砂を、重油と同時に処理せざるを得ない場合が多々
ある。たとえば、海岸に打ち上げられた重油を、砂浜に
て分解除去する場合は、重油と土砂とを分離することな
く分解除去作業が行われることが一般的である。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記従
来の炭化水素等に対する分解能を有する微生物を用いて
石油等を分解除去する場合、種々の栄養分を使用して、
微生物の生育条件を調整する必要がある。

【０００８】すなわち、微生物を用いた石油成分の分解
除去は、炭化水素等に対する分解能が最も高くなる定常
期の生育菌体を用いて行うことが最も効率的である。こ
のことから、上記定常期における生育菌体を調製するた
めに、高コストの栄養分を含有する培養液が必要となる
とともに、生育条件の設定を厳密に行うための調製作業
に労力を要するという問題がある。具体的には、重油等
の分解除去作業においては、大規模なスケールでの生育
菌体が必要となるため、培養液単位体積当たりに用いる
栄養分（栄養塩）の必要量および単価が高い場合には、
高コストとなり、また、生育時期を調節するために多大
な労力が必要になるという問題点を有している。

【０００９】また、培養液中の生育菌体を分解作業に用
いる場合は、培養液の保存・運搬等に特別な設備を必要
とするため、準備、操作が煩雑となるという問題点があ
る。

【００１０】一方、上記重油が付着した状態での土砂
を、重油と分離させることなく微生物の分解除去作用に
供した後、分解産物およびアスファルト等の残存成分を
含有した土砂を処理する場合にもコストがかかるという
問題点がある。

【００１１】本発明は上記問題点を解決するためになさ
れたもので、その目的は、安価に調製でき、分解除去作
業および保存・輸送等が簡便に行える重油分解菌、重油
分解菌混合物、その生育用組成物、その重油分解菌生育
用組成物を含む製剤、上記細菌を用いる重油分解方法、
石油成分の処理方法および重油分解被処理物を含む建築
土木材料を提供することにある。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の諸
問題を解決するために鋭意研究を続けてきた。その結
果、海水よりスクリーニングにより採取した菌株（細
菌）およびそれら細菌混合物を用いることによって上記
の目的を達成できることを見出し、本発明を完成するに
至った。

【００１３】請求項１に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌
株であることを特徴としている。

【００１４】請求項２に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌
株であることを特徴としている。

【００１５】請求項３に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、シュドモナス（Ps
eudomonas)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４７菌株であ
ることを特徴としている。

【００１６】請求項４に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、アルカリジェネス
（Alcaligenes)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株
であることを特徴としている。

【００１７】請求項５に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、フラボバクテリウ
ム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５
０菌株であることを特徴としている。

【００１８】請求項６に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、フラボバクテリウ
ム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５
１菌株であることを特徴としている。

【００１９】請求項７に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、フラボバクテリウ
ム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５
２菌株であることを特徴としている。

【００２０】請求項８に記載の菌株は、上記の課題を解
決するために、重油分解能を有する、モラキセラ（Mora
xella)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌株であるこ
とを特徴としている。

【００２１】請求項９に記載の細菌混合物は、上記の課
題を解決するために、アシネトバクター（Acinetobacte
r)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバ
クター（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０
４９菌株、シュドモナス（Pseudomonas ) 属に属するＦ
ＥＲＭＢＰ−７０４７菌株、アルカリジェネス（Alcali
genes)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる
群より選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する細
菌を含むことを特徴としている。

【００２２】尚、この結果、本発明には、上記群より選
ばれる少なくとも一種の細菌と、この群に含まれない他
の細菌とを含む細菌混合物となる場合も含まれることと
なる。

【００２３】請求項１０に記載の細菌混合物は、上記の
課題を解決するために、フラボバクテリウム（Flavobac
terium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５０菌株、フラ
ボバクテリウム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭ
ＢＰ−７０５１菌株、フラボバクテリウム（Flavobacte
rium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５２菌株、モラキ
セラ（Moraxella)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌
株からなる群より選ばれる少なくとも一種の重油分解能
を有する細菌を含むことを特徴としている。

【００２４】請求項１１に記載の細菌混合物は、上記の
課題を解決するために、請求項１０に記載の細菌混合物
の構成に加えて、アシネトバクター（Acinetobacter)属
に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクタ
ー（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９
菌株、シュドモナス（Pseudomonas ) 属に属するＦＥＲ
ＭＢＰ−７０４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligene
s)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる群よ
り選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する細菌を
含むことを特徴としている。

【００２５】上記の構成によれば、上記細菌または、細
菌混合物は、天然界に近い貧栄養状態で炭化水素分解能
を有する菌株を見出すべく海水から単離したものであ
る。このため、安価な栄養源により簡便に生育すること
ができ、炭化水素を効率的に分解することができる。し
たがって、たとえば、流出した石油成分を、安価、簡
便、かつ効率的に分解除去することができる。

【００２６】特に、上記細菌混合物によれば、上記細菌
をそれぞれ単独で使用した場合と比較して、特に優れた
重油分解能を発揮するため、さらに効率的に重油を分解
除去することができる。

【００２７】また、上記細菌混合物において、フラボバ
クテリウム属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５０菌株、フ
ラボバクテリウム属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５１菌
株、フラボバクテリウム属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０
５２菌株、およびモラキセラ属に属するＦＥＲＭＢＰ−
７０５３菌株からなる群より選ばれる少なくとも一種の
重油分解能を有する細菌を用いることで、重油分解をさ
らに促進することができる。

【００２８】請求項１２に記載の重油分解菌生育用組成
物は、上記の課題を解決するために、請求項１ないし８
のいずれか１項に記載の菌株からなる群より選ばれる少
なくとも１種の細菌を生育すべく、硝酸アンモニウム４
０〜９０重量％、リン酸第二カリウム１〜５０重量％、
硫酸マグネシウム２〜５０重量％、塩化鉄（III ）１〜
２０重量％、塩化カルシウム０．２〜１５重量％、およ
び酵母エキス０．１〜１０重量％を有効成分として含む
ことを特徴としている。

【００２９】上記の構成によれば、重油分解菌生育用組
成物は、安価に調製でき、かつ、重油分解菌の生育およ
び重油分解能の活性化を促進することができる。このた
め、たとえば、流出した石油成分に対して、重油分解菌
生育用組成物を、そのままの状態で、または、海水等で
５００倍ないし２０００倍に溶解した水溶液の状態で、
あるいは、これらに細菌混合物を添加した状態で散布等
により作用させることで、該石油成分を安価、簡便、か
つ効率的に分解除去することができる。

【００３０】請求項１３に記載の重油分解菌生育用組成
物は、上記の課題を解決するために、請求項１ないし８
のいずれか１項に記載の菌株からなる群より選ばれる少
なくとも１種の細菌を生育すべく、硝酸アンモニウム４
０〜９０重量％、リン酸第二カリウム１〜５０重量％、
硫酸マグネシウム２〜５０重量％、塩化鉄（III ）１〜
２０重量％、塩化カルシウム０．２〜１５重量％、およ
び酵母エキス０．１〜１０重量％を有効成分として含
み、かつ、これらを、ペレット状に成形し、または、シ
ート状の有機基材に染み込ませてなることを特徴として
いる。

【００３１】上記の構成によれば、上記菌株をペレット
状に成形し、またははシート状の有機基材に染み込ませ
ることにより調製し、たとえば、製剤の形状とした重油
分解菌生育用組成物を、砂等の被処理物上に散布すると
いう簡便な作業によって、被処理物の石油成分分解を行
うことができる。また、上記の場合、重油分解菌生育用
組成物は、固形物となっているため、保存、運搬を簡便
に行うことができる。

【００３２】請求項１４に記載の石油成分の処理方法
は、請求項１ないし８のいずれか１項に記載の菌株から
なる群より選ばれる少なくともいずれか１つを用いるこ
とを特徴としている。

【００３３】上記の方法によれば、上記菌株が、安価な
栄養源により簡便に生育することができ、炭化水素を効
率的に分解することができるため、たとえば、流出した
石油成分を、安価、簡便、かつ効率的に分解除去するこ
とができる。

【００３４】請求項１５に記載の建築土木材料は、請求
項１ないし８のいずれか１項に記載の菌株からなる群よ
り選ばれる少なくともいずれか１つを用いて重油付着土
砂を処理した被処理物を含むことを特徴としている。

【００３５】上記の構成によれば、重油が付着した土砂
を本発明にかかる上記菌株からなる群より選ばれる少な
くともいずれか１つを用いて処理した後の被処理物は、
重油分が分解されたものであり、土砂として再生された
ものである。さらに、この再生された土砂は、建築土木
材料に適用される。

【００３６】これにより、タンカーの座礁事故等にて流
出し、海岸の砂浜に到達した重油混じりの土砂を、上記
菌株、細菌混合物、重油分解菌生育用組成物、製剤から
なる群より選ばれる少なくともいずれか１つを用いて処
理した後、道路舗装用のアスファルトコンクリートやセ
メントモルタル等の建築土木材料として使用することが
可能となる。

【００３７】この結果、従来では焼却して埋め立てる等
しか用途がなかった重油付着土砂を再生利用すべく建築
土木材料として提供することが可能となる。

【００３８】

【発明の実施の形態】〔実施の形態１〕本発明のアシネ
トバクター（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−
７０４６菌株、アシネトバクター（Acinetobacter)属に
属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌株、シュドモナス（Ps
eudomonas)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４７菌株、ア
ルカリジェネス（Alcaligenes)属に属するＦＥＲＭＢＰ
−７０４８菌株は、いずれも、スクリーニングにより天
然界から採取した新規の菌株であり、たとえば、重油等
の石油成分分解能に代表される炭化水素分解能を有する
有用微生物として単離されたものである。

【００３９】本発明において、重油分解能を有すると
は、重油中に含まれる比較的高分子の炭化水素を分解す
る能力のみならず、上記高分子の炭化水素が分解されて
生成した比較的低分子の炭化水素を分解する能力をも含
む意である。

【００４０】また、上記４菌株からなる群より選ばれる
少なくとも一種の細菌を含む細菌混合物、およびフラボ
バクテリウム（Flavobacterium) 属に属する菌株および
／またはアシネトバクター（Acinetobacter ）属に属す
る菌株を含む細菌群をさらに含む上記細菌混合物は、本
発明の上記４菌株をそれぞれ単独で被処理物に対し作用
させた場合と比較して、さらに高い炭化水素分解能を有
する。

【００４１】以下において、本発明にかかる上記細菌を
単離した経過について説明する。

【００４２】本発明にかかるアシネトバクター属に属す
るＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株（ＴＦＢＯＬ−１）、ア
シネトバクター属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌株
（ＴＦＢＯＬ−７）、シュドモナス属に属するＦＥＲＭ
ＢＰ−７０４７菌株（ＴＦＢＯＬ−２）、およびアルカ
リジェネス属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株（Ｔ
ＦＢＯＬ−３）は、いずれも天然海水より単離した細菌
である。

【００４３】１次スクリーニングは、以下の方法により
行った。

【００４４】上記海水およびその他、日本国内各港湾、
近海、および河川より採取した水または堆積物計５０種
類よりなる供試料から細菌を分離するための分離培地と
しては、できるだけ天然界に近い貧栄状態で炭化水素分
解能を有する菌株を分離するため、炭素源として流動パ
ラフィン（ナカライテスク（株））を用いるべく、以下
の表１に示す組成の培地を用いた。ここで、流動パラフ
ィンとは、炭素数１５〜３０程度の飽和炭化水素混合物
である。

【００４５】

【表１】

【００４６】上記海水等の供試料をフィルター濾過（孔
径０．４５μｍ）して分離した供試料が液体である場合
は、その１ｍｌ、固体である場合はその１ｇを、湿熱殺
菌処理（１２１℃、２０ｍｉｎ）した上記分離培地１０
０ｍｌと共に５００ｍｌ容振とうフラスコ中に添加し
た。

【００４７】上記供試料および分離培地混合物を、７〜
１０日間振とう培養（３０℃、１２０ストローク／分、
５ｃｍ）し、その培養液１ｍｌを新しい分離培地に植え
継ぐ培養を４回繰り返すことにより、集積培養を行い、
４回目の集積培養液中に生存する微生物を飽和炭化水素
分解菌の混合菌として得た。

【００４８】次に、２次スクリーニングとして、上記混
合菌を含有する集積培養液を分離培地に体積比１：１の
割合で混合した後、振とう培養（１２０ストローク／
分、５ｃｍ、３０℃）し、肉眼による観察によって、流
動パラフィンの乳化、分散の速度が一定値以上であり、
かつ、７日間培養後のｎ−ヘキサン抽出画分量が最も少
ない培養液を優良混合菌株として得た。この２次スクリ
ーニングについて以下に説明する。

【００４９】まず、上記集積培養により得た飽和炭化水
素分解菌の混合菌を、以下の表２に示す前培養培地中で
４日間振とう培養（１２０ストローク／分、５ｃｍ、２
５℃）した前培養液を、遠心分離（３５００ｒｐｍ、２
０ｍｉｎ）して集菌した後、上記前培養培地により２回
洗浄し、菌懸濁液１ｍｌを得た。次に、本培養として、
上記菌懸濁液１ｍｌ（細菌数として、１０⁹個／ｍｌ）
を５００ｍｌ容振とうフラスコ中で、以下の表３に示す
基礎塩培地１００ｍｌに接種し、振とう培養（１２０ス
トローク／分、５ｃｍ、３０℃）した。

【００５０】

【表２】

【００５１】

【表３】

【００５２】上記本培養液を適宜採取し、６１０ｎｍに
おける吸光度を分光光度計（島津製作所、ＵＶ−１２０
０）を用いて測定することにより、７日間培養後の定常
期にある混合菌を得た。得られた混合菌の菌数は、上記
分光光度計により菌懸濁液の６１０ｎｍにおける吸光度
を測定することにより算出した。

【００５３】ｎ−ヘキサン抽出画分量すなわち、培養液
中に残存する流動パラフィン由来の飽和炭化水素量は、
以下の方法により測定した。

【００５４】まず、培養液を１００ｍｌのｎ−ヘキサン
で２回抽出し、該抽出液１００ｍｌを無水硫酸ナトリウ
ムのカラム中を通過させて脱水、菌体除去後濃縮した。
次に、活性アルミナクロマトグラフィー（活性アルミ
ナ：２００ｍｅｓｈ６０ｍｌ、（株）和光純薬工業、
ガラスカラム：２０×６００ｍｍＰｙｒｅｘｇｌａ
ｓｓ、流速２０ｍｌ／ｈ）により精製し、脂肪酸等の代
謝物を除去した後、恒量になるまで乾燥処理（６０℃、
空気流入下）し、該乾燥重量をｎ−ヘキサン抽出画分量
すなわち、残存飽和炭化水素量として求めた。

【００５５】上記ｎ−ヘキサン抽出画分量は、ガスクロ
マトグラフィーにより定量した。ガスクロマトグラフィ
ーの分析条件は、カラム：ＳＵＰＯＲＴＰＥＴＲＯＣ
ＯＬＢカラム（ＳＵＰＥＬＣＯ）、オーブン温度：５
０℃〜３５０℃、１０℃／分，インジェクター温度：３
００℃、検出温度：３６０℃、検出器：ＦＩＤ、キャリ
アガス：ヘリウムとした。

【００５６】また、流動パラフィンの培養液中への乳化
度測定は、培養液を遠心分離（３５００ｒｐｍ、２０ｍ
ｉｎ）して菌体を除去した上澄み液の６１０ｎｍにおけ
る吸光度を測定することにより行った。

【００５７】以上の方法により、２次スクリーニングを
行った各種供試料５種類より、最も流動パラフィンの乳
化が速く、かつ、培養７日後におけるｎ−ヘキサン抽出
各分量が最も少ない混合菌として、上記海水より得た、
アシネトバクター（Acinetobacter ）属に属するＦＥＲ
ＭＢＰ−７０４６菌株（ＴＦＢＯＬ−１）、アシネトバ
クター（Acinetobacter ）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７
０４９菌株（ＴＦＢＯＬ−７）、シュドモナス（Pseudo
monas)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４７菌株（ＴＦＢ
ＯＬ−２）、およびアルカリジェネス（Alcaligenes)属
に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株（ＴＦＢＯＬ−
３）を含む飽和炭化水素分解菌群を得た。

【００５８】次に、上記のようにして得た飽和炭化水素
分解菌群からの各菌株の単離を行った。単離用の培地と
して、Ｂａｒｕａｈらの方法（「微生物の分離法」、Ｒ
＆Ｄプランニング社出版、児玉徹著）によるハイドロカ
ーボンプレート培地および普通寒天培地を使用した。ハ
イドロカーボンプレート培地とは、流動パラフィンをシ
リカゲルに予め吸着させて粉末状とした後、少量の水に
懸濁してスラリー状とし、上記表２に示す基礎塩培地に
対し寒天を２重量％添加した寒天培地と完全に混合させ
た培地である。

【００５９】上記単離用の培地上に飽和炭化水素分解菌
群を含む培養液を塗沫法で塗布し、２７℃、４８時間培
養した後、出現したコロニーを採取し、３７℃、２〜３
日培養した結果、細菌類ＴＦＢＯＬ−１、２、３、７の
４菌株を本発明にかかる各菌株として得た。

【００６０】次に、単離した本発明にかかる各菌株の同
定は、「Ｂｅｒｇｅｙ’ｓＭａｎｕａｌｏｆｄｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
（第９版）」に基づき行った。

【００６１】細菌類ＴＦＢＯＬ−１〜８の８菌株の同定
方法は、形態的特徴としての栄養細胞の形態、細胞の多
形性、運動性、芽胞の有無、さらに生理学的特徴として
のグラム染色性、カタラーゼ反応、オキシダーゼ反応、
発酵性（糖類からの酸、ガスの生成）の他、嫌気および
好気条件下での発育性等、それぞれの特徴について生理
試験を行うことにより、属、種の検索を行った。結果を
表４に示す。

【００６２】

【表４】

【００６３】表４に示すように、ＴＦＢＯＬ−１、７株
は、いずれもグラム陰性の短桿菌で運動性がなく、嫌気
条件下で発育せず、カタラーゼ反応陽性、オキシダーゼ
反応陰性、発酵性テスト（ＯＦテスト、Ｏｘｉｄａｔｉ
ｏｎ−Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｅｓｔ）は、Ｏで
あった。この結果により、アシネトバクター（Acinetob
acter ）属に同定した。

【００６４】上記ＴＦＢＯＬ−１、７株は、平成１１年
２月２４日付で、工業技術院生命工学工業技術研究所
（郵便番号３０５茨城県つくば市東一丁目１番３号）に
国内寄託され、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１７２３３およ
びＦＥＲＭＢＰ−１７２３６がそれぞれ付与されてい
る。

【００６５】その後、上記ＴＦＢＯＬ−１、７株は、２
０００年２月２３日付で、上記工業技術院生命工学工業
技術研究所に国際寄託され、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−７
０４６およびＦＥＲＭＢＰ−７０４９がそれぞれ付与さ
れている。

【００６６】ＴＦＢＯＬ−２株は、グラム陰性の短桿菌
で運動性があり、嫌気条件下で発育し、カタラーゼ反応
陽性、オキシダーゼ反応陽性、ＯＦテストは、Ｏであっ
た。この結果により、シュドモナス（Pseudomonas)属に
同定した。

【００６７】上記ＴＦＢＯＬ−２株は、上記同様に国内
寄託され、受託番号ＦＥＲＭＰ−１７２３４が付与され
ている。

【００６８】その後、上記ＴＦＢＯＬ−２株は、２００
０年２月２３日付で、上記同様に国際寄託され、受託番
号ＦＥＲＭＢＰ−７０４７がそれぞれ付与されている。

【００６９】ＴＦＢＯＬ−３株は、グラム陰性の短桿菌
で運動性があり、嫌気条件下で発育せず、カタラーゼ反
応陽性、オキシダーゼ反応陽性、グルコースからの酸の
生産をしないことからアルカリジェネス（Alcaligenes)
属に同定した。

【００７０】上記ＴＦＢＯＬ−３株は、上記同様に国内
寄託され、受託番号ＦＥＲＭＰ−１７２３５が付与され
ている。

【００７１】その後、上記ＴＦＢＯＬ−３株は、２００
０年２月２３日付で、上記同様に国際寄託され、受託番
号ＦＥＲＭＢＰ−７０４８が付与されている。

【００７２】ＴＦＢＯＬ−４、５、６株は、グラム陰性
の短桿菌で運動性がなく、嫌気条件下で発育せず、カタ
ラーゼ反応陽性、オキシダーゼ反応陽性、ＯＦテスト
は、Ｏであった。この結果により、フラボバクテリウム
（Flavobacterium）属に同定した。

【００７３】ＴＦＢＯＬ−４、５、６株は、２０００年
２月２３日付で、上記工業技術院生命工学工業技術研究
所に国際寄託され、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−７０５０、
受託番号ＦＥＲＭＢＰ−７０５１、および受託番号ＦＥ
ＲＭＢＰ−７０５２がそれぞれ付与されている。

【００７４】ＴＦＢＯＬ−８株は、グラム陰性の短桿菌
で運動性がなく、嫌気条件下で発育せず、カタラーゼ反
応陽性、オキシダーゼ反応陽性、グルコースからの酸の
生産をしなかった。この結果により、モラキセラ（Mora
xella)属に同定した。

【００７５】ＴＦＢＯＬ−８株は、２０００年２月２３
日付で、上記同様に国際寄託され、受託番号ＦＥＲＭＢ
Ｐ−７０５３が付与されている。

【００７６】上記細菌のうち、本発明にかかる菌株であ
る、アシネトバクター属ＦＥＲＭＢＰ−７０４６（ＴＦ
ＢＯＬ−１）、シュドモナス属ＦＥＲＭＢＰ−７０４７
（ＴＦＢＯＬ−２）、アルカリジェネス属ＦＥＲＭＢＰ
−７０４８（ＴＦＢＯＬ−３）、およびアシネトバクタ
ー属ＦＥＲＭＢＰ−７０４９（ＴＦＢＯＬ−７）は、そ
れぞれ単独で用いて重油等の石油成分中に存在する飽和
炭化水素分解活性を示すと共に、必要に応じて、混合さ
れた細菌混合物として用いた場合も上記分解活性を示
す。

【００７７】また、上記細菌のうち、本発明にかかる菌
株である、フラボバクテリウム属ＦＥＲＭＢＰ−７０５
０（ＴＦＢＯＬ−４）、フラボバクテリウム属ＦＥＲＭ
ＢＰ−７０５１（ＴＦＢＯＬ−５）、フラボバクテリウ
ム属ＦＥＲＭＢＰ−７０５２（ＴＦＢＯＬ−６）、およ
びモラキセラ属ＦＥＲＭＢＰ−７０５３（ＴＦＢＯＬ−
８）は、上記ＴＦＢＯＬ−１〜３、７のうち少なくとも
いずれか１つと混合された細菌混合物として用いた場合
に、優れた上記分解活性を示す。

【００７８】特に、重油等の石油成分中に存在する飽和
炭化水素分解を行うに際し、上記ＴＦＢＯＬ−４、５、
６、８および上記ＴＦＢＯＬ−１〜３、７を全て含む細
菌混合物を用いることが最も好ましい。

【００７９】ここで、細菌混合物とは、細菌を二種以上
含む混合物をいう。

【００８０】すなわち、上記本発明の菌株の混合物であ
る、細菌混合物には、必要に応じて、フラボバクテリウ
ム属に属する菌株（ＴＦＢＯＬ−４）、フラボバクテリ
ウム属に属する菌株（ＴＦＢＯＬ−５）、フラボバクテ
リウム属に属する菌株（ＴＦＢＯＬ−６）、モラキセラ
属に属する菌株（ＴＦＢＯＬ−８）が、混合して添加さ
れていてもよい。また、上記菌株を一種使用しかつ他の
異なる菌株を添加して二種以上の細菌混合物とすること
も可能である。

【００８１】上記ＴＦＢＯＬ−４、ＴＦＢＯＬ−５、Ｔ
ＦＢＯＬ−６、ＴＦＢＯＬ−８の菌株は、それぞれ単独
では、飽和炭化水素を分解する活性が低いが、上記本発
明にかかる細菌または細菌混合物に添加して用いた場
合、全体としての飽和炭化水素分解活性が、総細菌数を
同じにして比較した場合であって、これらを添加しない
ときと比較して高くなることが判明した。

【００８２】ＴＦＢＯＬ−４、ＴＦＢＯＬ−５、ＴＦＢ
ＯＬ−６、ＴＦＢＯＬ−８を添加することにより上記分
解活性の上昇がもたらされる機構については、明らかで
はないが、飽和炭化水素が本発明にかかる細菌または細
菌混合物により分解される過程で、芳香族炭化水素等、
他の石油成分の分解をこれらの細菌が担っていると考え
られる。

【００８３】本発明の重油分解菌生育用組成物は、硝酸
アンモニウム４０〜９０重量％、リン酸第二カリウム１
〜５０重量％、硫酸マグネシウム２〜５０重量％、塩化
鉄（III ）１〜２０重量％、塩化カルシウム０．２〜１
５重量％、および酵母エキス０．１〜１０重量％を必須
の有効成分として含む。

【００８４】硝酸アンモニウムの濃度は、６０〜８０重
量％であることが好ましく、７０〜７５重量％の範囲内
であることが最も好ましい。

【００８５】リン酸第二カリウムの濃度は、２〜２５重
量％であることが好ましく、５〜１０重量％の範囲内で
あることが最も好ましい。

【００８６】硫酸マグネシウムの濃度は、４〜２５重量
％であることが好ましく、１０〜２０重量％の範囲内で
あることが最も好ましい。

【００８７】塩化鉄（III ）の濃度は、２〜１０重量％
であることが好ましく、３〜５重量％の範囲内であるこ
とが最も好ましい。

【００８８】塩化カルシウムの濃度は、０．６〜５重量
％であることが好ましく、１〜３重量％の範囲内である
ことが最も好ましい。

【００８９】酵母エキスの濃度は、０．２〜３重量％で
あることが好ましく、０．５〜１重量％の範囲内である
ことが最も好ましい。

【００９０】上記重油分解菌生育用組成物は、重油分解
能等の炭化水素分解能を有する細菌、放線菌、酵母等の
微生物の培養および保存用の栄養塩培地の成分として好
適に用いられる。重油分解菌生育用組成物は、特に、本
発明の細菌および細菌混合物を培養および保存するため
の栄養塩培地に含有させることにより好適に用いること
ができる。

【００９１】たとえば、本発明の細菌および細菌混合物
を重油分解菌として用いる場合、上記重油分解菌生育用
組成物を水、海水等で重量比にてたとえば、５００倍な
いし２０００倍となるように希釈した水溶液の状態とす
る。該水溶液に対し、重油分解活性を発現できる濃度、
量となるように細菌または細菌混合物を同水溶液中にお
いて培養し、または添加して、重油等の被処理物に作用
させることにより、重油を分解除去することができる。
上記水溶液とする場合の重油分解菌生育用組成物の濃度
は特に限定されないが、上記したように、水または海水
で重量比にて５００倍ないし２０００倍となるように溶
解、希釈して用いることが好ましい。

【００９２】また、上記細菌または、細菌混合物を添加
せず、重油分解菌生育用組成物をそのまま、または上記
水溶液の状態で、直接、重油が付着した土砂等に作用さ
せることにより、重油の分解除去を行うこともできる。
すなわち、土砂等に含まれる微生物を、重油分解菌生育
用組成物により生育、活性化させることによって、重油
中に含まれる炭化水素類の分解を進行させてもよい。

【００９３】また、上記必須成分は、上記に例示したよ
うに、微量で機能を発揮する。また、重油分解菌の生育
には、炭素源として重油自体を利用することが可能であ
り、ペプトン等の他の炭素源は必要とならない。このた
め、従来と比較して安価に調製でき、特に、大容量で使
用される重油分解菌の生育、保存用培地として有用であ
る。

【００９４】重油分解菌生育用組成物を用いた栄養塩培
地には、必要に応じて食塩その他の無機化合物または、
たとえば、流動パラフィン等の有機化合物が添加されて
いてもよい。

【００９５】また、重油分解菌生育用組成物を溶解、希
釈した水溶液の状態で用いる場合のｐＨは、対象となる
微生物の種類に応じて適宜決定することができるが、ｐ
Ｈ５．０〜８．０の範囲内であることが好ましく、ｐＨ
６．０〜７．５の範囲内であることがさらに好ましく、
ｐＨ６．５〜７．０の範囲内であることが最も好まし
い。

【００９６】本発明の細菌、細菌混合物、重油分解菌生
育用組成物、および製剤を使用して処理する被処理物と
しては、炭素数１７〜４０の飽和炭化水素；ベンゼン、
トルエン、ナフタレン等の芳香族炭化水素；上記飽和炭
化水素または芳香族炭化水素を含む重油その他の石油成
分；等が挙げられる。

【００９７】上記製剤とは、上記重油分解菌生育用組成
物を単独で、または、上記細菌または細菌混合物その
他、たとえば、重油分解能を有する微生物、水等を含ん
だ状態で成形された製剤をいう。製剤の形態としては、
特に限定されず、たとえば、ペレット状、シート状、団
子状等を挙げることができる。

【００９８】具体的には、たとえば、でんぷん、セルロ
ース、ゼオライト、バーミキュライト、海綿等に上記重
油分解菌生育用組成物水溶液および細菌または細菌混合
物を含浸させてペレット状、またはシート状としたもの
や、団子状に成形し固形物としたもの、生分解性を有す
るカプセル中に封入したものを挙げることができる。

【００９９】上記製剤の使用方法としては、たとえば、
ペレット状または団子状に成形された製剤を、重油が漂
着した海岸の砂浜に散布等により敷設し、重油の分解が
進行するに十分な時間放置することによって、重油の分
解除去を行う方法等が挙げられる。また、ペレット状、
団子状、またはカプセル状に成形された製剤を用いるこ
とで、製剤により固定された重油分解菌生育用組成物お
よび細菌または細菌混合物が、徐々に被処理物に対し流
出、浸透していくことから、重油等に対する分解作用を
長期間持続させることができる。

【０１００】以上のように、上記の製剤を用いることに
より、きわめて簡便な作業により、広範囲にわたって、
効率的に重油分解除去を行うことができる。

【０１０１】上記製剤を散布する方法としては、手作業
で行う他、種まき機等の機械を適宜用いてもよい。

【０１０２】本発明にかかる細菌、細菌混合物、重油分
解菌生育用組成物、および製剤を使用して、重油等の石
油成分を分解除去する被処理物の形態は、特に限定され
ないが、たとえば、船舶事故等により海面に流出した重
油、該重油等が付着した土砂、該重油等が付着した船体
等の各種建造物の他、該重油等が付着した岩礁等を挙げ
ることができる。

【０１０３】本発明の石油成分の処理方法としては、た
とえば、上記細菌、細菌混合物、重油分解菌生育用組成
物、および製剤のうち、少なくともいずれか一つを用い
て重油等の石油成分を有する被処理物に対し直接添加
し、重油の分解が進行するに十分な時間放置する方法の
他、重油等が付着した、たとえば土砂等を予め、カラム
に充填し、上記細菌、細菌混合物、重油分解菌生育用組
成物を含む溶液を上方より添加することによって、被処
理物を処理する方法等が挙げられる。

【０１０４】上記処理する場合における温度としては、
１５℃〜４５℃の範囲内が好ましく、２０℃〜３５℃の
範囲内がさらに好ましく、２２℃〜２８℃の範囲内が最
も好ましい。

【０１０５】より具体的には、定常期にまで生育した上
記細菌または細菌混合物を含む培養液を、直接被処理物
に対し添加する方法、上記重油分解菌生育用組成物を含
む溶液のみを直接被処理物に対し添加する方法、上記重
油分解菌生育用組成物にさらに上記細菌または細菌混合
物を加えた溶液を直接被処理物に対し添加する方法、上
記例示の溶液を土砂等の被処理物を充填した容器中に添
加する方法等が挙げられる。

【０１０６】また、重油等の石油成分を分解除去する場
合において、上記本発明の細菌または細菌混合物として
含まれる細菌数の範囲は、特に限定されないが、たとえ
ば、重油が付着した１ｇの被処理物に対して用いる場
合、１×１０⁶個〜１×１０⁹個の範囲内であることが
好ましい。

【０１０７】〔実施の形態２〕前記実施の形態１に示し
たように、重油等の石油成分が付着した土砂を本発明に
かかる細菌、細菌混合物、重油分解菌生育用組成物、製
剤の少なくともいずれか一つを用いて処理した後の被処
理物は、重油分が分解されたものであり、土砂として再
生されたものである。

【０１０８】そこで、本実施の形態では、被処理物とし
ての砂（以下、「再生砂」という）をたとえば道路舗装
用のアスファルトコンクリートあるいはセメントモルタ
ル中の骨材、またはその補助材、つまり建築土木材料と
して実用に供することができるか否かについて検討し
た。具体的検討については、後述する実施例にて示す。

【０１０９】その結果、まず、道路舗装用のアスファル
トコンクリートへの適用について以下の結果が得られ
た。

【０１１０】すなわち、重油７重量％付着砂を前記重油
分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混
合物により５６日間で処理した再生砂Ａと、重油７重量
％付着砂を前記重油分解菌生育用組成物を含有する栄養
塩培地のみにより５６日間で処理した再生砂Ｂとに対し
て、大型乾燥機にて乾燥した後、道路舗装用のアスファ
ルトコンクリートへの骨材として１５％添加混入したも
のについて、充分、道路舗装用のアスファルトコンクリ
ートの規格値を満足することが確認できた。

【０１１１】なお、実施例の結果からすると、余裕をも
って道路舗装用のアスファルトコンクリートの規格値を
満足しているので、再生砂Ａまたは再生砂Ｂを骨材全体
の２０〜３０％添加混入したものにおいても、充分に道
路舗装用のアスファルトコンクリートへの適用が可能で
あると考えられる。

【０１１２】また、道路舗装用のアスファルトコンクリ
ートとして適用する場合には、使用に際して道路舗装用
のアスファルトコンクリートは通常１６０℃以上に加熱
される。このため、土砂等の処理後の被処理物中に含ま
れる生育状態にある細菌または細菌混合物は、道路舗装
用のアスファルトコンクリート形成時の上記加熱によ
り、完全に死滅する。すなわち、細菌または細菌混合物
は、通常では約６０℃にて死滅する。また、胞子の状態
となったとしても１２０℃以上では死滅する。したがっ
て、１６０℃以上では、細菌または細菌混合物は、完全
に死滅していると考えられる。

【０１１３】この結果、道路舗装用のアスファルトコン
クリートに適用する場合において、衛生的であり、細菌
または細菌混合物が道路舗装用のアスファルトコンクリ
ートに及ぼす生物的な影響は皆無とすることができる。

【０１１４】次に、再生砂のセメントモルタルへの適用
については、以下の結果が得られた。

【０１１５】すなわち、重油７重量％付着砂を前記重油
分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混
合物により５６日間で処理した再生砂Ａと、重油７重量
％付着砂を前記重油分解菌生育用組成物を含有する栄養
塩培地のみにより５６日間で処理した再生砂Ｂとに対し
て、大型乾燥機にて乾燥した後、セメントモルタルの骨
材として１００％使用したものについて、一軸圧縮試験
および曲げ試験等を行って、性能を確かめた。

【０１１６】その結果、中質のセメントモルタルとして
充分に使用できることが確認できた。したがって、上質
のセメントモルタルに対しても補助的骨材への適用が可
能であると考えられる。

【０１１７】なお、再生砂Ａと再生砂Ｂとの関係では、
若干再生砂Ａ（栄養塩培地および細菌混合物を用いて処
理した砂）を用いたセメントモルタルの品質が良かっ
た。

【０１１８】また、本実施の形態においては、再生砂と
して、重油７重量％付着砂を重油分解菌生育用組成物を
含有する栄養塩培地および細菌混合物、または重油分解
菌生育用組成物を含有する栄養塩培地のみにより５６日
間で処理したものの適用について説明したが、本発明に
おいては、必ずしもこれに限らず、図２に基づいて、２
１日間程度で処理したものについても適用が可能であ
る。

【０１１９】さらに、重油３重量％付着砂を重油分解菌
生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物、
または重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地の
みにより５６日間で処理したものの適用については、重
油７重量％付着砂よりもさらに効果的に処理できること
はいうまでもない。

【０１２０】なお、砂に付着する重油の最大付着量は、
重油１０重量％程度であり、それ以上は付着せずに流れ
るのみである。したがって、重油７重量％付着砂におけ
る再生砂の検討により、実用的には充分であると考えら
れる。また、重油１０重量％程度においても、重油成分
は分解されるので、建築土木材料としての適用は可能で
ある。

【０１２１】さらに、本実施の形態では、重油分解菌生
育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物、ま
たは重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地のみ
についての適用について説明したが、菌株、細菌混合
物、製剤からなる群より選ばれる少なくともいずれか１
つを用いて重油付着土砂を処理した被処理物に対して
も、道路舗装用のアスファルトコンクリートあるいはセ
メントモルタル中の骨材またはその補助材、つまり建築
土木材料として実用に供することができる。

【０１２２】

【実施例】本発明にかかる細菌ＴＦＢＯＬ−１、２、
３、７それぞれについて、石油成分分解量を、分解基質
として原油（Ａｒａｂｉａｎｌｉｇｈｔｏｉｌ）を
用い、上記表２に示す前培養培地または、以下の表５に
示す栄養塩培地を、本発明にかかる重油分解菌生育用組
成物を含有する培地として用いて以下のように測定し
た。

【０１２３】

【表５】

【０１２４】〔実施例１〕まず、上記表２に示す前培養
培地に、細菌ＴＦＢＯＬ−１を植菌し、２５℃で４日間
振とう培養（１２０ストローク／分、５ｃｍ）して前培
養液を得た。次に、該前培養液を遠心分離（３５００ｒ
ｐｍ、２０分）により集菌した後、滅菌済の前培養培地
で２回洗浄して同前培養培地１ｍｌ中に懸濁した細菌懸
濁液１ｍｌ（細菌数として１０⁹個／ｍｌ）を得た。

【０１２５】本培養液は、上記表５に示す栄養塩培地
に、上記原油を１重量％となるように添加した培地を１
２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌したものを用い
た。該本培養液１００ｍｌ（５００ｍｌ容振とうフラス
コ）に上記細菌懸濁液１ｍｌを接種し、３０℃で１０日
間振とう培養（１２０ストローク／分、５ｃｍ）した。
１０日間培養後の上記細菌ＴＦＢＯＬ−１は、細菌数と
して６．５×１０⁹個であった。

【０１２６】１０日間培養後における本培養液を、培養
液１００ｍｌ当たり、クロロホルム各１００ｍｌで２回
抽出した抽出液を、無水硫酸ナトリウムを充填したカラ
ムに通過させて脱水および菌体除去を行い、クロロホル
ム抽出画分を得た。該クロロホルム抽出画分を恒量にな
るまで乾燥処理（６０℃、空気流入下）し、乾燥重量を
残存原油量とした。

【０１２７】生分解率は、細菌接種前における分解基質
量、すなわち、原油量を１００％とした場合における分
解により消失した分解基質量（％）として求めた。

【０１２８】細菌ＴＦＢＯＬ−１にかえて、細菌ＴＦＢ
ＯＬ−２〜８をそれぞれ用いて上記の方法により生分解
率を求めた。結果を表６に示す。

【０１２９】

【表６】

【０１３０】表６より明らかなように、細菌ＴＦＢＯＬ
−１、ＴＦＢＯＬ−２、ＴＦＢＯＬ−３、およびＴＦＢ
ＯＬ−７が、生分解率１０％以上の高い数値を示し、重
油分解活性が高いことがわかる。尚、表６において、比
較的高分子の炭化水素分解能が低く、生分解率が１０％
未満となった細菌については、数値を省略した。

【０１３１】〔実施例２〕細菌懸濁液を、前培養培地１
ｍｌ中に上記ＴＦＢＯＬ−１、ＴＦＢＯＬ−２、ＴＦＢ
ＯＬ−３、およびＴＦＢＯＬ−７をそれぞれ、菌数とし
て、０．５×１０⁹個ずつ含む細菌懸濁液とする以外
は、実施例１と同様の操作をして、生分解率を測定し
た。結果を表７に示す。

【０１３２】

【表７】

【０１３３】〔実施例３〕細菌懸濁液を、基礎塩培地１
ｍｌ中に細菌ＴＦＢＯＬ−１〜８全てを各０．７×１０
⁹個ずつ含む細菌懸濁液とする以外は、実施例１と同様
の操作をして、生分解率を測定した。結果を表７に示
す。

【０１３４】表７より明らかなように、生分解率１０％
以上の高い数値を示した細菌ＴＦＢＯＬ−１、ＴＦＢＯ
Ｌ−２、ＴＦＢＯＬ−３、およびＴＦＢＯＬ−７を含む
細菌混合物は生分解率１０％以上と、高い重油分解活性
を有することがわかる。また、細菌ＴＦＢＯＬ−１〜８
全てを含む細菌混合物は、さらに高い生分解率を示し、
重油分解活性が高いことがわかる。

【０１３５】〔実施例４〕実施例２と同様の操作を行っ
て、本発明にかかる細菌混合物を用いたクロロホルム抽
出画分を得た。該クロロホルム抽出画分中に残存する原
油を活性アルミナクロマトグラフィー（活性アルミナ：
２００ｍｅｓｈ６０ｍｌ、（株）和光純薬工業、ガラ
スカラム：２０×６００ｍｍＰｙｒｅｘｇｌａｓ
ｓ、流速２０ｍｌ／ｈ）により分離し、飽和炭化水素、
芳香族炭化水素、アスファルテン、カラム残さ（以下、
各々Ｓａ，Ａｒ，Ａｓ，Ｒｅと略す）に分画した。得ら
れたＳａ画分をガスクロマトグラフィーにて定法により
分析した。ガスクロマトグラフィーの分析条件は、カラ
ム：ＵｌｔｒａＡＬＬＯＹＣａｐｉｌｌａｒｙＣ
ｏｌｕｍｎＤＸ３０（１５ｍ、０．５ｍ）、オーブン
温度：１００℃（０分）〜２５０℃（３０分）、４℃／
分、インジェクター温度２５０℃、検出温度：２５０
℃、検出器：ＦＩＤ、キャリアガス：ヘリウムとした。

【０１３６】図１（ａ）（ｂ）は、上記ガスクロマトグ
ラフィー分析による、それぞれ処理前および処理後にお
ける同一量のＳａ画分についての溶出パターンを、縦軸
に同一スケールの強度を取って示した説明図である。図
１に示すように、本発明にかかる細菌混合物を用いるこ
とにより、炭素数３５以下の原油成分である飽和炭化水
素が全て分解されることがわかる。

【０１３７】〔実施例５〕重油として、Ｃ重油を用い、
３重量％重油を含有する砂１ｋｇに対し、本発明にかか
る重油分解菌生育用組成物を含有する培地として、１０
０ｍｌの上記表５に示す組成からなる栄養塩培地と、本
発明にかかる細菌混合物として、各菌数１×１０⁹個か
らなるＴＦＢＯＬ−１〜８とを添加して混合した。混合
後の砂を袋詰めにして砂浜に埋設し、７日毎に所定量採
取して残存する重油量（残存油量）を、実施例１におけ
る残存原油量と同様の方法で測定した。未処理の、３重
量％重油を含有する砂１ｋｇの０日目における残存油量
を１００％とした場合の残存油量（％）を算出し、残存
油量の経時的変化を調べた結果を図２（ａ）に示す。ま
た、７日目および５６日目に採取した砂について、実施
例４と同様の操作を行って、飽和炭化水素画分を得た後
ガスクロマトグラフィーにより分析した。尚、コントロ
ールとして、未処理の同量の砂についても、経時的変化
を調べた。結果を図３（ａ）〜（ｃ）に示す。尚、図３
（ａ）〜（ｃ）および以下の図４（ａ）〜（ｃ）は、上
記図１と同様に、同一スケールの強度を縦軸にとって比
較した説明図である。

【０１３８】〔実施例６〕上記細菌混合物を添加しない
他は、実施例５と同様にして残存油量の経時的変化、お
よび飽和炭化水素画分のガスクロマトグラフィーにより
分析を行った。結果を図２（ａ）、図４（ａ）〜（ｃ）
に示す。

【０１３９】〔実施例７、８〕重油濃度を７重量％とす
る以外は、実施例５〜６と同様の操作を行ってそれぞれ
残存油量の経時的変化、および飽和炭化水素画分のガス
クロマトグラフィーにより分析を行った。結果を図２
（ｂ）に示す。

【０１４０】図２（ａ）に示すように、未処理の３重量
％重油を含有する砂は、試験開始から１４日目の時点に
おいて、僅かに３．１％の重油が減少していた。これに
対し、重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地の
みにより処理した場合は３４％、また、重油分解菌生育
用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物により
処理した場合は４４％の重油の急激な減少が認められ
た。

【０１４１】また、図２（ｂ）に示すように、未処理の
７重量％重油を含有する砂は、試験開始から２１日目の
時点において、僅かに２．３％の重油が減少していた。
これに対し、重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩
培地のみにより処理した場合は２８％、また、重油分解
菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物
により処理した場合は４６．７％の重油の急激な減少が
認められた。

【０１４２】これらの結果より、砂浜での重油分解速度
は、重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地およ
び細菌混合物により処理した場合が最も速く、重油分解
菌生育用組成物を含有する栄養塩培地のみにより処理し
た場合においても、これに次ぐ高い重油分解速度を示し
た。このことから、重油分解菌生育用組成物を含有する
栄養塩培地および細菌混合物により処理した場合は、細
菌混合物により、また、重油分解菌生育用組成物を含有
する栄養塩培地のみにより処理した場合は、砂浜に常在
する炭化水素分解細菌の生育、活性が重油分解菌生育用
組成物により促進されることによって、高速度での重油
分解が行われたことがわかる。

【０１４３】尚、上記試験において使用したＣ重油は、
水に溶解し、または蒸発する低沸点の飽和炭化水素、芳
香族炭化水素の含有量が無視できる程度に少ない。この
ため、これら水への溶解または蒸発による低沸点の飽和
炭化水素、芳香族炭化水素の消失量は無視することがで
きる。

【０１４４】また、図３、図４に示すように、重油分解
菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物
による処理または、重油分解菌生育用組成物を含有する
栄養塩培地のみによる処理で、炭素数３５以下の原油成
分である飽和炭化水素が分解され、特に、重油分解菌生
育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物によ
る処理を行うことにより、上記飽和炭化水素の分解が急
激に進行することがわかる。

【０１４５】〔実施例９〕重油として、Ｃ重油を用い、
３重量％重油を含有する砂１ｋｇに対し、１００ｍｌ
の、重油分解菌生育用組成物を含有する上記表５に示す
組成からなる栄養塩培地、および、本発明にかかる細菌
混合物として、各菌数１×１０⁹個からなるＴＦＢＯＬ
−１、２、３、７を添加して混合した。混合後の砂を袋
詰めにして砂浜に埋設し、１４日目において各所定量の
砂を採取した。

【０１４６】採取した各砂について、実施例４と同様の
操作を行って、飽和炭化水素、芳香族炭化水素、アスフ
ァルテン、カラム残さ（以下、各々Ｓａ，Ａｒ，Ａｓ，
Ｒｅと略す）に分画し、得られたＳａ，Ａｒ，Ａｓ，Ｒ
ｅ画分をガスクロマトグラフィーにより分析することに
よって、３重量％重油を含有する砂における重油成分組
成の変化を測定した。ガスクロマトグラフィーの分析条
件は、カラム：ＵｌｔｒａＡＬＬＯＹＣａｐｉｌｌ
ａｒｙＣｏｌｕｍｎＤＸ３０（１５ｍ，０．５
ｍ），オーブン温度：１００℃（０分）〜２５０℃（３
０分）、４℃／分、インジェクター温度２５０℃、検出
温度：２５０℃、検出器：ＦＩＤ、キャリアガス：ヘリ
ウムとした。

【０１４７】〔実施例１０〕細菌混合物を添加しない以
外は、実施例９と同様の操作を行って本発明にかかる重
油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地を作用させ
た場合の３重量％重油を含有する砂における重油成分組
成の変化を測定した。

【０１４８】図５（ａ）に示すように、本発明にかかる
細菌混合物を用いることにより、試験開始１４日目にお
いて、飽和炭化水素画分が急激に分解されることがわか
る。また、本発明の重油分解菌生育用組成物を含有する
栄養塩培地のみにより処理した場合も、細菌混合物を用
いる場合に次いで、飽和炭化水素が高速度で分解される
ことがわかる。

【０１４９】〔実施例１１〕重油濃度を７重量％とする
以外は、実施例９と同様の操作を行って成分組成の変化
を測定した。結果を図５（ｂ）に示す。

【０１５０】〔実施例１２〕細菌混合物を添加しない以
外は、実施例１１と同様の操作を行って本発明にかかる
重油分解菌生育用組成物を作用させた場合の７重量％重
油を含有する砂における重油成分組成の変化を測定し
た。

【０１５１】図５（ａ）（ｂ）に示すように、本発明に
かかる細菌混合物を用いることにより、試験開始１４日
目または２１日目において、飽和炭化水素画分が急激に
分解されることがわかる。また、本発明の重油分解菌生
育用組成物のみにより処理した場合も、細菌混合物を用
いる場合に次いで、飽和炭化水素が高速度で分解される
ことがわかる。

【０１５２】〔実施例１３〕本実施例では、重油の付着
した砂を前記重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩
培地および細菌混合物、または前記重油分解菌生育用組
成物を含有する栄養塩培地のみにより処理した砂（以
下、「再生砂」という）を道路舗装用のアスファルトコ
ンクリートとして利用できるか否かについての検討結果
を示す。

【０１５３】検討方法として、道路舗装用のアスファル
トコンクリートの補助的骨材として、再生砂を使用した
ときに、道路舗装用のアスファルトコンクリートの規格
を満足するかについて実験を行った。

【０１５４】再生砂としては、重油７重量％付着砂を重
油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌
混合物により５６日間で処理した再生砂Ａと、重油７重
量％付着砂を重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩
培地のみにより５６日間で処理した再生砂Ｂとの２種類
を使用した。

【０１５５】骨材の配合条件は表８の通りとした。すな
わち、配合条件１は再生砂Ａを骨材全体の１５％混入し
た場合であり、配合条件２は再生砂Ｂを骨材全体の１５
％混入した場合を示している。また、配合条件３は、再
生砂Ａおよび再生砂Ｂのいずれも使用しない場合であ
り、道路舗装用のアスファルトコンクリートに適用され
る一般的な骨材の配合条件を示している。なお、今回使
用した再生砂Ａおよび再生砂Ｂは、大型乾燥機にて１１
℃、２４時間乾燥し、かつ１８０℃にて１６時間加熱し
たものを使用した。

【０１５６】

【表８】

【０１５７】ここで、上記各骨材種別における配合前の
各粒度分布は、表９に示す通りであった。

【０１５８】

【表９】

【０１５９】また、表９の各粒度分布を示す各骨材種別
について各配合条件１、配合条件２および配合条件３に
て混合した骨材の粒度分布は表１０の通りであった。こ
れらはいずれも、同表最右欄に示す道路舗装用のアスフ
ァルトコンクリートの要綱を満足するものである。

【０１６０】

【表１０】

【０１６１】次に、道路舗装用のアスファルトコンクリ
ートとしての混合条件および締め固め条件は、表１１と
した。なお、アスファルトは、ＪＩＳＫ２２０７
「石油アスファルト」に規定するストレートアスファル
ト６０〜８０を使用した。このストレートアスファルト
６０〜８０とは、２５℃における針入度が４０を超え６
０以下となっているものである。

【０１６２】

【表１１】

【０１６３】試験項目は、見掛け密度の他、道路舗装用
のアスファルトコンクリートの要綱に定められるフロー
試験、マーシャル安定度試験および残留安定度試験と
し、マーシャル安定度試験および残留安定度試験の条件
は表１２に示す通りとした。

【０１６４】

【表１２】

【０１６５】上記の各試験条件の下に行った試験結果
は、表１３に示す通りとなった。

【０１６６】

【表１３】

【０１６７】表１３の結果、再生砂Ａを使用した配合条
件１および再生砂Ｂを使用した配合条件２のものは、い
ずれも道路舗装用のアスファルトコンクリートの品質規
格値を満足していることが分かった。

【０１６８】これにより、重油７重量％付着砂を重油分
解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合
物により５６日間で処理した再生砂Ａを道路舗装用のア
スファルトコンクリートの補助的骨材として１５％使用
したもの、および重油７重量％付着砂を重油分解菌生育
用組成物を含有する栄養塩培地のみにより５６日間で処
理した再生砂Ｂを道路舗装用のアスファルトコンクリー
トの補助的骨材として１５％使用したもののいずれも、
道路舗装用のアスファルトコンクリートとして利用でき
ることが確認できた。

【０１６９】〔実施例１４〕本実施例では、重油の付着
した砂を前記細菌または細菌混合物にて処理した再生砂
をセメントモルタルへ適用が可能か否かについての検討
結果について説明する。

【０１７０】検討として、前記実施例１３で使用した２
種類の再生砂、つまり重油７重量％付着砂を重油分解菌
生育用組成物を含有する栄養塩培地および細菌混合物に
より５６日間で処理した再生砂Ａと、重油７重量％付着
砂を重油分解菌生育用組成物を含有する栄養塩培地のみ
により５６日間で処理した再生砂Ｂとを用いてセメント
モルタルへの適用を図るため、再生砂Ａ・Ｂを骨材とし
て用いてセメントと共に混練りを施し、強度試験用の試
験体を作成し、一軸圧縮強度および曲げ強度について測
定を行った。なお、試験はＪＩＳＲ５２０１「セメ
ントの物理試験方法」に準拠して行った。

【０１７１】上記再生砂Ａおよび再生砂Ｂの粒度分布は
それぞれ表１４に示す通りである。

【０１７２】

【表１４】

【０１７３】また、強度試験方法について、試験体を作
製するための型枠は、４×４×１６ｃｍ３連形の型枠を
使用した。また、試験体は、普通ポルトランドセメント
を用いて骨材セメント比（Ｓ／Ｃ）＝２、および水セメ
ント比（Ｗ／Ｃ）＝６５％にて混練りした。なお、型枠
に入れる前に、混練りしたセメントモルタルについてフ
ロー試験を行った。

【０１７４】さらに、上記型枠を用いて試験体を作製
し、翌日に脱型し、重量測定した後、水温２０±３℃の
水槽にて水中養生を開始した。そして、７日、および２
８日経過後に取出したものについてそれぞれ重量測定、
一軸圧縮試験および曲げ試験を行った。

【０１７５】試験結果として、表１５にフロー試験結果
を示すと共に、表１６に強度試験結果を示した。なお、
表１５に示すフロー値とは、フローコーンに混練りした
セメントを充填し、該フローコーンを上方に引き上げた
ときの下に広がったモルタルの径をｍｍを単位とする無
名数で表したものである。

【０１７６】

【表１５】

【０１７７】

【表１６】

【０１７８】ここで、ＪＩＳで定める上質のセメントモ
ルタルの圧縮強度に関する規格値は、材令７日における
圧縮強度が１４．７１Ｎ／ｍｍ²以上であり、材令２８
日における圧縮強度が２９．４２Ｎ／ｍｍ²以上であ
る。また、一般的な圧縮強度の試験値は、材令７日にお
ける圧縮強度が２５Ｎ／ｍｍ²程度であり、材令２８日
における圧縮強度が４１Ｎ／ｍｍ²程度である。さら
に、一般的な曲げ強度は、材令７日における曲げ強度が
５Ｎ／ｍｍ²程度であり、材令２８日における曲げ強度
が７Ｎ／ｍｍ²程度である。

【０１７９】上記のことを踏まえた表１５の結果は、再
生砂Ａを使用した配合条件１および再生砂Ｂを使用した
配合条件２のものは、いずれも材令７日における圧縮強
度の規格値１４．７１Ｎ／ｍｍ²以上を満足している。
ただし、材令２８日における圧縮強度の規格値２９．４
２Ｎ／ｍｍ²以上に対しては、いずれも若干規格を下回
った。

【０１８０】一方、曲げ強度については、いずれも材令
７日における一般的な曲げ強度約５Ｎ／ｍｍ²程度、材
令２８日における一般的な曲げ強度約７Ｎ／ｍｍ²程度
を若干下回った。

【０１８１】また、再生砂Ａと再生砂Ｂとの関係では、
再生砂Ａが若干強度が大きかった。

【０１８２】これらの結果から判断できることは、再生
砂Ａまたは再生砂Ｂを骨材の全てとしてセメントモルタ
ルに適用した場合においては、上質のモルタルセメント
としてではなく、中質のモルタルセメントとしては充分
利用できることが分かった。

【０１８３】なお、上記の試験は、骨材として再生砂Ａ
または再生砂Ｂのみを使用したものであるので、前記道
路舗装用のアスファルトコンクリートへの適用形態のよ
うに、補助的な骨材として使用するときには、充分に上
質のモルタルセメントとしても使用できるものと思われ
る。

【０１８４】

【発明の効果】請求項１に記載の菌株は、以上のよう
に、重油分解能を有する、アシネトバクター（Acinetob
acter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株である構
成である。

【０１８５】請求項２に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、アシネトバクター（Acinetobacte
r)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌株である構成で
ある。

【０１８６】請求項３に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、シュドモナス（Pseudomonas)属に
属するＦＥＲＭＢＰ−７０４７菌株である構成である。

【０１８７】請求項４に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、アルカリジェネス（Alcaligenes)
属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株である構成であ
る。

【０１８８】請求項５に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、フラボバクテリウム（Flavobacte
rium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５０菌株である構
成である。

【０１８９】請求項６に記載の菌株は、以上のように解
決するために、重油分解能を有する、フラボバクテリウ
ム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５
１菌株である構成である。

【０１９０】請求項７に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、フラボバクテリウム（Flavobacte
rium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５２菌株である構
成である。

【０１９１】請求項８に記載の菌株は、以上のように、
重油分解能を有する、モラキセラ（Moraxella)属に属す
るＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌株である構成である。

【０１９２】請求項９に記載の細菌混合物は、以上のよ
うに、アシネトバクター（Acinetobacter)属に属するＦ
ＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクター（Acinet
obacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌株、シュ
ドモナス（Pseudomonas ) 属に属するＦＥＲＭＢＰ−７
０４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligenes)属に属す
るＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる群より選ばれる
少なくとも一種の重油分解能を有する細菌を含む構成で
ある。

【０１９３】請求項１０に記載の細菌混合物は、以上の
ように、フラボバクテリウム（Flavobacterium）属に属
するＦＥＲＭＢＰ−７０５０菌株、フラボバクテリウム
（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５１
菌株、フラボバクテリウム（Flavobacterium）属に属す
るＦＥＲＭＢＰ−７０５２菌株、モラキセラ（Moraxell
a)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌株からなる群よ
り選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する細菌を
含む構成である。

【０１９４】請求項１１に記載の細菌混合物は、以上の
ように、請求項１０に記載の細菌混合物の構成に加え
て、アシネトバクター（Acinetobacter)属に属するＦＥ
ＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクター（Acinetob
acter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌株、シュド
モナス（Pseudomonas ) 属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０
４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligenes)属に属する
ＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる群より選ばれる少
なくとも一種の重油分解能を有する細菌を含む構成であ
る。

【０１９５】それゆえ、上記細菌または、細菌混合物
は、天然界に近い貧栄養状態で炭化水素分解能を有する
菌株を見出すべく海水から単離したものである。このた
め、安価な栄養源により簡便に生育することができ、炭
化水素を効率的に分解することができる。したがって、
たとえば、流出した石油成分を、安価、簡便、かつ効率
的に分解除去できるという効果を奏する。

【０１９６】特に、上記細菌混合物によれば、上記細菌
をそれぞれ単独で使用した場合と比較して、特に優れた
重油分解能を発揮するため、さらに効率的に重油を分解
除去できるという効果を奏する。

【０１９７】請求項１２に記載の重油分解菌生育用組成
物は、以上のように、請求項１ないし８のいずれか１項
に記載の菌株からなる群より選ばれる少なくとも１種の
細菌を生育すべく、硝酸アンモニウム４０〜９０重量
％、リン酸第二カリウム１〜５０重量％、硫酸マグネシ
ウム２〜５０重量％、塩化鉄（III ）１〜２０重量％、
塩化カルシウム０．２〜１５重量％、および酵母エキス
０．１〜１０重量％を有効成分として含む構成である。

【０１９８】それゆえ、重油分解菌生育用組成物は、安
価に調製でき、かつ、重油分解菌の生育および重油分解
能の活性化を促進することができる。このため、たとえ
ば、流出した石油成分に対して、重油分解菌生育用組成
物を、そのままの状態で、または、海水等で５００倍な
いし２０００倍に溶解した水溶液の状態で、あるいは、
これらに細菌混合物を添加した状態で散布等により作用
させることで、該石油成分を安価、簡便、かつ効率的に
分解除去できるという効果を奏する。

【０１９９】請求項１３に記載の重油分解菌生育用組成
物は、以上のように、請求項１ないし８のいずれか１項
に記載の菌株からなる群より選ばれる少なくとも１種の
細菌を生育すべく、硝酸アンモニウム４０〜９０重量
％、リン酸第二カリウム１〜５０重量％、硫酸マグネシ
ウム２〜５０重量％、塩化鉄（III ）１〜２０重量％、
塩化カルシウム０．２〜１５重量％、および酵母エキス
０．１〜１０重量％を有効成分として含み、かつ、これ
らを、ペレット状に成形し、または、シート状の有機基
材に染み込ませてなる構成である。

【０２００】それゆえ、上記菌株をペレット状に成形
し、またははシート状の有機基材に染み込ませることに
より調製し、たとえば、製剤の形状とした重油分解菌生
育用組成物を、砂等の被処理物上に散布するという簡便
な作業によって、被処理物の石油成分分解を行うことが
できる。また、重油分解菌生育用組成物は、固形物とな
っているため、保存、運搬を簡便に行えるという効果を
奏する。

【０２０１】請求項１４に記載の石油成分の処理方法
は、以上のように、請求項１ないし８のいずれか１項に
記載の菌株からなる群より選ばれる少なくともいずれか
１つを用いる構成である。

【０２０２】それゆえ、上記菌株が、安価な栄養源によ
り簡便に生育することができ、炭化水素を効率的に分解
することができるため、たとえば、流出した石油成分
を、安価、簡便、かつ効率的に分解除去できるという効
果を奏する。

【０２０３】請求項１５に記載の建築土木材料は、請求
項１ないし８のいずれか１項に記載の菌株からなる群よ
り選ばれる少なくともいずれか１つを用いて重油付着土
砂を処理した被処理物を含む構成である。

【０２０４】それゆえ、従来では焼却して埋め立てる等
しか用途がなかった重油付着土砂を再生利用すべく、道
路舗装用のアスファルトコンクリートやセメントモルタ
ル等の建築土木材料に適用できるという効果を奏する。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明にかかる細菌混合物による、重油中に含
まれる飽和炭化水素成分の分解除去を、ガスクロマトグ
ラフィー分析による溶出パターンにより示すものであ
り、（ａ）は分解前の状態を示す説明図、（ｂ）は分解
後の状態を示す説明図である。

【図２】図２（ａ）は、重油濃度３重量％の重油が付着
した砂に対し、本発明にかかる細菌混合物または重油分
解菌生育用組成物を作用させた場合の残存油量の経日変
化を示すグラフである。図２（ｂ）は、重油濃度７重量
％の重油が付着した砂に対し、本発明にかかる細菌混合
物または重油分解菌生育用組成物を作用させた場合の残
存油量の経日変化を示すグラフである。

【図３】図３（ａ）〜（ｃ）は、重油濃度３重量％の重
油が付着した砂に対し、本発明にかかる細菌混合物と重
油分解菌生育用組成物とを作用させた場合の飽和炭化水
素画分の経時的変化をガスクロマトグラフィー分析によ
る溶出パターンにより示す説明図である。

【図４】図４（ａ）〜（ｃ）は、重油濃度３重量％の重
油が付着した砂に対し、本発明にかかる重油分解菌生育
用組成物を作用させた場合の飽和炭化水素画分の経時的
変化をガスクロマトグラフィー分析による溶出パターン
により示す説明図である。

【図５】図５（ａ）は、３重量％重油を含有する砂に対
する本発明にかかる細菌混合物または重油分解菌生育用
組成物を用いた処理による重油成分組成の変化を説明す
るグラフである。図５（ｂ）は、７重量％重油を含有す
る砂に対する本発明にかかる細菌混合物または重油分解
菌生育用組成物を用いた処理による重油成分組成の変化
を説明するグラフである。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） // Ｂ０９Ｃ 1/10 ＺＡＢＢ０９Ｂ 3/00 ＺＡＢＥ (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:05） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:20）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】重油分解能を有する、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌
株。
【請求項２】重油分解能を有する、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌
株。
【請求項３】重油分解能を有する、シュドモナス（Pseu
domonas)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４７菌株。
【請求項４】重油分解能を有する、アルカリジェネス
（Alcaligenes)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌
株。
【請求項５】重油分解能を有する、フラボバクテリウム
（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５０
菌株。
【請求項６】重油分解能を有する、フラボバクテリウム
（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５１
菌株。
【請求項７】重油分解能を有する、フラボバクテリウム
（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５２
菌株。
【請求項８】重油分解能を有する、モラキセラ（Moraxe
lla)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌株。
【請求項９】アシネトバクター（Acinetobacter)属に属
するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌
株、シュドモナス（Pseudomonas ) 属に属するＦＥＲＭ
ＢＰ−７０４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligenes)
属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる群より
選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する細菌を含
むことを特徴とする細菌混合物。
【請求項１０】フラボバクテリウム（Flavobacterium）
属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５０菌株、フラボバクテ
リウム（Flavobacterium）属に属するＦＥＲＭＢＰ−７
０５１菌株、フラボバクテリウム（Flavobacterium）属
に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５２菌株、モラキセラ（Mo
raxella)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０５３菌株からな
る群より選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する
細菌を含むことを特徴とする細菌混合物。
【請求項１１】アシネトバクター（Acinetobacter)属に
属するＦＥＲＭＢＰ−７０４６菌株、アシネトバクター
（Acinetobacter)属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４９菌
株、シュドモナス（Pseudomonas ) 属に属するＦＥＲＭ
ＢＰ−７０４７菌株、アルカリジェネス（Alcaligenes)
属に属するＦＥＲＭＢＰ−７０４８菌株からなる群より
選ばれる少なくとも一種の重油分解能を有する細菌を含
むことを特徴とする請求項１０記載の細菌混合物。
【請求項１２】請求項１ないし８のいずれか１項に記載
の菌株からなる群より選ばれる少なくとも１種の細菌を
生育すべく、硝酸アンモニウム４０〜９０重量％、リン
酸第二カリウム１〜５０重量％、硫酸マグネシウム２〜
５０重量％、塩化鉄（III ）１〜２０重量％、塩化カル
シウム０．２〜１５重量％、および酵母エキス０．１〜
１０重量％を有効成分として含むことを特徴とする重油
分解菌生育用組成物。
【請求項１３】請求項１ないし８のいずれか１項に記載
の菌株からなる群より選ばれる少なくとも１種の細菌を
生育すべく、硝酸アンモニウム４０〜９０重量％、リン
酸第二カリウム１〜５０重量％、硫酸マグネシウム２〜
５０重量％、塩化鉄（III ）１〜２０重量％、塩化カル
シウム０．２〜１５重量％、および酵母エキス０．１〜
１０重量％を有効成分として含み、かつ、これらを、ペ
レット状に成形し、または、シート状の有機基材に染み
込ませてなることを特徴とする重油分解菌生育用組成
物。
【請求項１４】請求項１ないし８のいずれか１項に記載
の菌株からなる群より選ばれる少なくともいずれか１つ
を用いることを特徴とする石油成分の処理方法。
【請求項１５】請求項１ないし８のいずれか１項に記載
の菌株からなる群より選ばれる少なくともいずれか１つ
を用いて重油付着土砂を処理した被処理物を含むことを
特徴とする建築土木材料。