JP2000292425A - リガンドクロマト測定法の増感方法及び装置 - Google Patents
リガンドクロマト測定法の増感方法及び装置Info
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- JP2000292425A JP2000292425A JP11131774A JP13177499A JP2000292425A JP 2000292425 A JP2000292425 A JP 2000292425A JP 11131774 A JP11131774 A JP 11131774A JP 13177499 A JP13177499 A JP 13177499A JP 2000292425 A JP2000292425 A JP 2000292425A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】毛管流を利用するリガンド測定法及び装置にお
いて、検出感度を向上させる方法及び装置を提供する。 【解決手段】シグナルを検出する部位の幅、長さ、面積
もしくは体積を標識リガンドが保持されている部位のそ
れらよりも小さく調製することにより、検出部位におい
て捕獲される標識リガンドを集中させることでき検出感
度の向上が図れる。
いて、検出感度を向上させる方法及び装置を提供する。 【解決手段】シグナルを検出する部位の幅、長さ、面積
もしくは体積を標識リガンドが保持されている部位のそ
れらよりも小さく調製することにより、検出部位におい
て捕獲される標識リガンドを集中させることでき検出感
度の向上が図れる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は臨床検査に用いられ
るリガンドクロマト測定法及び装置に関する。
るリガンドクロマト測定法及び装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】毛管流を利用するリガンド測定法及び装
置は免疫クロマト測定法として広く臨床検査に用いられ
ている。しかし、これらの装置は何れも標識リガンドを
保持している部位とシグナルを検出する部位の幅、長
さ、面積もしくは体積が等しく調製されていた。標識リ
ガンドは毛管流の起こる範囲に分散して移動したものが
検出部位で捕獲され、バンドを形成してシグナルを与え
ていた。この場合、低濃度の試料においては、バンドが
明確に形成しなくなり、明確な判定が困難になる。その
結果、検出感度を向上させられなかった。
置は免疫クロマト測定法として広く臨床検査に用いられ
ている。しかし、これらの装置は何れも標識リガンドを
保持している部位とシグナルを検出する部位の幅、長
さ、面積もしくは体積が等しく調製されていた。標識リ
ガンドは毛管流の起こる範囲に分散して移動したものが
検出部位で捕獲され、バンドを形成してシグナルを与え
ていた。この場合、低濃度の試料においては、バンドが
明確に形成しなくなり、明確な判定が困難になる。その
結果、検出感度を向上させられなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】毛管流を利用するリガ
ンド測定法及び装置において、検出感度を向上させる方
法及び装置を提供する。
ンド測定法及び装置において、検出感度を向上させる方
法及び装置を提供する。
【０００４】
【解決する手段】本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、
シグナルを検出する部位の幅、長さ、面積もしくは体積
を標識リガンドが保持されている部位のそれらよりも小
さく調製することにより、検出部位において捕獲される
標識リガンドを集中させることができ、検出感度の向上
が図れることを見出し、本発明を完成させるに至った。
以下に本発明の実施態様の例を挙げて本発明を詳細に説
明する。
シグナルを検出する部位の幅、長さ、面積もしくは体積
を標識リガンドが保持されている部位のそれらよりも小
さく調製することにより、検出部位において捕獲される
標識リガンドを集中させることができ、検出感度の向上
が図れることを見出し、本発明を完成させるに至った。
以下に本発明の実施態様の例を挙げて本発明を詳細に説
明する。
【０００５】従来の免疫クロマト法は図１に示すように
標識リガンドが保持されている幅ａと標識リガンドが捕
獲される検出部位の幅ｂが等しく設置されていた。この
場合、毛管流により移動される標識リガンドは装置の全
幅に広がって移動する。そして、検出部位の幅全体に渡
って標識リガンドが捕獲される。従って、被検試料の測
定対象物の濃度が低い場合には得られるバンドは不明確
であった。そのため、高感度な検出を必要とする測定対
象物には適用されなかった。
標識リガンドが保持されている幅ａと標識リガンドが捕
獲される検出部位の幅ｂが等しく設置されていた。この
場合、毛管流により移動される標識リガンドは装置の全
幅に広がって移動する。そして、検出部位の幅全体に渡
って標識リガンドが捕獲される。従って、被検試料の測
定対象物の濃度が低い場合には得られるバンドは不明確
であった。そのため、高感度な検出を必要とする測定対
象物には適用されなかった。
【０００６】本発明の具体的な実施態様の例を図２，
３，及び４に示す。これらは何れも毛管流を形成する部
位が検出部位で小さくなっていることが特徴である。標
識リガンドは装置の内部に保持されていても、外部から
添加されても良い。標識リガンドの標識物は、酵素、色
素、蛍光色素、金属コロイド、ラテックス微粒子、着色
微粒子、蛍光微粒子、蓄光体等が用いられる。一方リガ
ンドはリガンド対を形成できるものであれば特に限定さ
れない、例えば、抗体−抗原、遺伝子対、アビジン及び
ストレプトアビジン−ビオチン、ハウトグロビン−ヘモ
グロビン、酵素−酵素インヒビター、ヘパリン−アンチ
トロンビンＩＩＩ、ホルモン−レセプター、ウイルス−
レセプター、インターロイキン−レセプター及びキレー
ト剤−金属イオン等が一般的である。分析対象物は抗
原、抗体、ハプテン、遺伝子等であり、蛋白質、細菌、
ウイルス、薬剤、ホルモン、脂質、糖質等免疫学的に反
応する物質および核酸や遺伝子等が対象となる。
３，及び４に示す。これらは何れも毛管流を形成する部
位が検出部位で小さくなっていることが特徴である。標
識リガンドは装置の内部に保持されていても、外部から
添加されても良い。標識リガンドの標識物は、酵素、色
素、蛍光色素、金属コロイド、ラテックス微粒子、着色
微粒子、蛍光微粒子、蓄光体等が用いられる。一方リガ
ンドはリガンド対を形成できるものであれば特に限定さ
れない、例えば、抗体−抗原、遺伝子対、アビジン及び
ストレプトアビジン−ビオチン、ハウトグロビン−ヘモ
グロビン、酵素−酵素インヒビター、ヘパリン−アンチ
トロンビンＩＩＩ、ホルモン−レセプター、ウイルス−
レセプター、インターロイキン−レセプター及びキレー
ト剤−金属イオン等が一般的である。分析対象物は抗
原、抗体、ハプテン、遺伝子等であり、蛋白質、細菌、
ウイルス、薬剤、ホルモン、脂質、糖質等免疫学的に反
応する物質および核酸や遺伝子等が対象となる。
【０００７】検出部位に固定化される物質は、上記の分
析対象物と免疫学的に反応する抗原や抗体及び核酸や遺
伝子が固定化される。これらの固定化される物質は、直
接支持体に固定化されても良いし、微粒子等の表面に吸
着固定化したものを支持体に固定化しても良い。
析対象物と免疫学的に反応する抗原や抗体及び核酸や遺
伝子が固定化される。これらの固定化される物質は、直
接支持体に固定化されても良いし、微粒子等の表面に吸
着固定化したものを支持体に固定化しても良い。
【０００８】支持体は、ニトロセルロース膜、アセチル
セルロース膜、ガラス繊維濾紙及びセルロース繊維濾紙
等が用いられる。
セルロース膜、ガラス繊維濾紙及びセルロース繊維濾紙
等が用いられる。
【０００９】
【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を更に説明する
が、本発明は実施例に限定されるものではない。
が、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００１０】
【実施例１】標識リガンドの保持部分の幅ａと検出部位
の幅ｂの異なる４種の装置を調製し、標識リガンドの保
持部分には抗ヒトヘモグロビンモノクロナル抗体を金コ
ロイド粒子に吸着させた、金コロイド標識抗ヒトヘモグ
ロビンモノクロナル抗体をセルロースパッドに保持させ
た。検出部位にはウサギ由来の抗ヒトヘモグロビン抗体
を１試験片当たり１μｇずつニトロセルロースメンブラ
ン上に固定化した。ヒトヘモグロビンを各０、５、１
０、２５、５０ｎｇ／ｍｌ含む試料１００μＬを試料添
加部位に添加して測定を行った。その結果を表１に示し
た。
の幅ｂの異なる４種の装置を調製し、標識リガンドの保
持部分には抗ヒトヘモグロビンモノクロナル抗体を金コ
ロイド粒子に吸着させた、金コロイド標識抗ヒトヘモグ
ロビンモノクロナル抗体をセルロースパッドに保持させ
た。検出部位にはウサギ由来の抗ヒトヘモグロビン抗体
を１試験片当たり１μｇずつニトロセルロースメンブラ
ン上に固定化した。ヒトヘモグロビンを各０、５、１
０、２５、５０ｎｇ／ｍｌ含む試料１００μＬを試料添
加部位に添加して測定を行った。その結果を表１に示し
た。
【００１１】
【表１】
【００１２】以上の結果、従来の方法（装置Ｎｏ．１）
では検出感度が５０ｎｇ／ｍｌ程度であったにもかかわ
らず、本発明の方法ではａ／ｂ値が上昇する従って、最
低検出感度が上昇し、ａ／ｂ＝１０とすると５ｎｇ／ｍ
ｌの感度を有することが判った。
では検出感度が５０ｎｇ／ｍｌ程度であったにもかかわ
らず、本発明の方法ではａ／ｂ値が上昇する従って、最
低検出感度が上昇し、ａ／ｂ＝１０とすると５ｎｇ／ｍ
ｌの感度を有することが判った。
【００１３】
【発明の効果】シグナルを検出する部位の幅、長さ、面
積もしくは体積を標識リガンドが保持されている部位の
それらよりも小さく調製することにより、検出部位にお
いて捕獲される標識リガンドを集中させることでき検出
感度の向上が可能となった。
積もしくは体積を標識リガンドが保持されている部位の
それらよりも小さく調製することにより、検出部位にお
いて捕獲される標識リガンドを集中させることでき検出
感度の向上が可能となった。
図１は従来の標識リガンド保持部位と検出部位の幅が等
しい装置例の図である。図２は標識リガンド保持部位と
検出部位の幅の比を変化させた装置例の図ある。図３は
柱状の装置に本発明の方法を適用した装置例の図であ
る。図４は図３と同様の形状を有する装置で、外部より
標識リガンドを添加する方式の装置例の図である。
しい装置例の図である。図２は標識リガンド保持部位と
検出部位の幅の比を変化させた装置例の図ある。図３は
柱状の装置に本発明の方法を適用した装置例の図であ
る。図４は図３と同様の形状を有する装置で、外部より
標識リガンドを添加する方式の装置例の図である。
Claims (4)
- 【請求項１】 装置の一部に検出部位を含むリガンド測
定対象物と反応する標識された反応対の片方（標識リガ
ンド）を用いて測定対象物を測定又は検出する方法にお
いて、標識リガンドが保持又は供給される部位の幅、長
さ、面積もしくは体積よりも小さい幅、長さ、面積もし
くは体積の検出部位を有することを特徴とする毛管流を
利用するリガンド測定法の増感方法。 - 【請求項２】 リガンドが免疫反応対もしくは遺伝子で
ある請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 装置の一部に検出部位を含むリガンド測
定対象物と反応する標識された反応対の片方（標識リガ
ンド）を用いて測定対象物を測定又は検出する装置にお
いて、標識リガンドが保持又は供給される部位の面積も
しくは体積よりも小さい面積もしくは体積の検出部位を
有することを特徴とする毛管流を利用するリガンド測定
法の増感方法を備えた装置。 - 【請求項４】 リガンドが免疫反応対もしくは遺伝子で
ある請求項３記載の装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11131774A JP2000292425A (ja) | 1999-04-02 | 1999-04-02 | リガンドクロマト測定法の増感方法及び装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11131774A JP2000292425A (ja) | 1999-04-02 | 1999-04-02 | リガンドクロマト測定法の増感方法及び装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000292425A true JP2000292425A (ja) | 2000-10-20 |
Family
ID=15065849
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11131774A Pending JP2000292425A (ja) | 1999-04-02 | 1999-04-02 | リガンドクロマト測定法の増感方法及び装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000292425A (ja) |
-
1999
- 1999-04-02 JP JP11131774A patent/JP2000292425A/ja active Pending
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20050928 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20051101 |