JP2000279046A - イネの培養方法 - Google Patents
イネの培養方法Info
- Publication number
- JP2000279046A JP2000279046A JP11093191A JP9319199A JP2000279046A JP 2000279046 A JP2000279046 A JP 2000279046A JP 11093191 A JP11093191 A JP 11093191A JP 9319199 A JP9319199 A JP 9319199A JP 2000279046 A JP2000279046 A JP 2000279046A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- callus
- rice
- medium
- plant
- anther
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 二段階法並の労力で、三段階法並のカルス誘
導率及び植物体の再分化率を達成することができる新し
いイネの葯培養方法を提供するものである。 【解決手段】 イネの一部を液体培地２で培養して該イ
ネの一部からカルス３を誘導し、続いて、該カルス３か
らイネの植物体４を再分化するイネの培養方法であっ
て、イネの一部からカルス３を誘導した後、前記液体培
地２に、２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカルス
３からイネの植物体４を再分化する為に必要な成分を含
む栄養液５を加えてカルス３の増殖を行うものである。
導率及び植物体の再分化率を達成することができる新し
いイネの葯培養方法を提供するものである。 【解決手段】 イネの一部を液体培地２で培養して該イ
ネの一部からカルス３を誘導し、続いて、該カルス３か
らイネの植物体４を再分化するイネの培養方法であっ
て、イネの一部からカルス３を誘導した後、前記液体培
地２に、２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカルス
３からイネの植物体４を再分化する為に必要な成分を含
む栄養液５を加えてカルス３の増殖を行うものである。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、イネの培養方法に
関するものである。
関するものである。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】イネの
品種改良方法には、異なる品種を掛け合わせたもの（Ｆ
１）を何世代もかけて品種を固定していく交雑育種方法
や、異なる品種を掛け合わせたもの（Ｆ１）から、葯を
取り出し該葯からカルスを誘導し、このカルスからイネ
の植物体を再分化して品種を固定する葯培養方法等があ
る。
品種改良方法には、異なる品種を掛け合わせたもの（Ｆ
１）を何世代もかけて品種を固定していく交雑育種方法
や、異なる品種を掛け合わせたもの（Ｆ１）から、葯を
取り出し該葯からカルスを誘導し、このカルスからイネ
の植物体を再分化して品種を固定する葯培養方法等があ
る。
【０００３】交雑育種方法は何世代もかけて品種を固定
する為、１０年以上もの時間がかかるケースが多く、現
在では早期に品種を固定することができる葯培養方法が
主流となってきている。
する為、１０年以上もの時間がかかるケースが多く、現
在では早期に品種を固定することができる葯培養方法が
主流となってきている。
【０００４】ところで、葯培養方法には、葯から植物体
を再分化するまでの間の培地の変更回数により、一段階
法、二段階法、三段階法等がある。この各方法は、主
に、葯からカルスを誘導する為に使用する薬剤（通常、
２,４−Ｄ（２,４−dichlorophenoxyacetic acid）が使
用される。）やカルスから植物体を再分化する為に使用
する薬剤（通常、カイネチンが使用される。）の使用方
法、及び、培地（カンテン状の固体培地か液体培地か）
において相違する。
を再分化するまでの間の培地の変更回数により、一段階
法、二段階法、三段階法等がある。この各方法は、主
に、葯からカルスを誘導する為に使用する薬剤（通常、
２,４−Ｄ（２,４−dichlorophenoxyacetic acid）が使
用される。）やカルスから植物体を再分化する為に使用
する薬剤（通常、カイネチンが使用される。）の使用方
法、及び、培地（カンテン状の固体培地か液体培地か）
において相違する。
【０００５】具体的には、一段階法は、カイネチン及び
２,４−Ｄが混入された固体培地を使用し、該固体培地
に混入する２,４−Ｄを必要量よりも少なめとして葯か
ら植物体を再分化するまでを行う方法である（図１参
照）。
２,４−Ｄが混入された固体培地を使用し、該固体培地
に混入する２,４−Ｄを必要量よりも少なめとして葯か
ら植物体を再分化するまでを行う方法である（図１参
照）。
【０００６】２,４−Ｄは葯からカルスを誘導する際に
使用されるものであるが、カルスからイネの植物体を再
分化する作用を阻害する性質を有している為、一段階法
のように同じ培地で葯から植物体を再分化するまでを行
う場合には、培地に混入する２,４−Ｄを少なめとしな
ければならない。
使用されるものであるが、カルスからイネの植物体を再
分化する作用を阻害する性質を有している為、一段階法
のように同じ培地で葯から植物体を再分化するまでを行
う場合には、培地に混入する２,４−Ｄを少なめとしな
ければならない。
【０００７】従って、一段階法は、同じ培地で葯から植
物体を再分化までを行う為、労力は少ないが、使用する
２,４−Ｄが少ない為にカルス誘導率が低く、必然的
に、該葯からの植物体の再分化率も低くなる。
物体を再分化までを行う為、労力は少ないが、使用する
２,４−Ｄが少ない為にカルス誘導率が低く、必然的
に、該葯からの植物体の再分化率も低くなる。
【０００８】しかし、イネの品種改良方法においては、
カルス誘導率が高く且つ植物体の再分化率が高い程、前
記掛け合わされた異なる品種の夫々の長所や短所を様々
なパターンで有する植物体を得られる可能性が高まるこ
とになる為、このカルス誘導率と再分化率を高めること
は極めて重要である。
カルス誘導率が高く且つ植物体の再分化率が高い程、前
記掛け合わされた異なる品種の夫々の長所や短所を様々
なパターンで有する植物体を得られる可能性が高まるこ
とになる為、このカルス誘導率と再分化率を高めること
は極めて重要である。
【０００９】即ち、例えば、収量は多いが味の良くない
米と収量は少ないが味の良い米とを掛け合わせた場合、
収量が多くて味の良い米と、収量が多くて味のが良くな
い米と、収量は少ないが味の良い米と、収量が少なくて
味の良くない米とができる可能性があるが、カルス誘導
率や再分化率が低いほどに上記４パターンの内の幾つか
が植物体にまで増殖することができなくなるおそれが高
まり、結果的に品種改良が成功しない可能性が高まるか
らである。
米と収量は少ないが味の良い米とを掛け合わせた場合、
収量が多くて味の良い米と、収量が多くて味のが良くな
い米と、収量は少ないが味の良い米と、収量が少なくて
味の良くない米とができる可能性があるが、カルス誘導
率や再分化率が低いほどに上記４パターンの内の幾つか
が植物体にまで増殖することができなくなるおそれが高
まり、結果的に品種改良が成功しない可能性が高まるか
らである。
【００１０】二段階法は、一段階法よりもカルス誘導率
や再分化率が高い方法である。
や再分化率が高い方法である。
【００１１】この二段階法では、先ず十分な２,４−Ｄ
が混入されている固体培地を使用し、該固体培地で葯か
らカルスを誘導し、このカルスをカイネチンが混入され
且つ２,４−Ｄが混入されていない別の固体培地にピン
セット等を使用して移し替え、該固体培地でカルスから
植物体を再分化するものである（図２参照）。
が混入されている固体培地を使用し、該固体培地で葯か
らカルスを誘導し、このカルスをカイネチンが混入され
且つ２,４−Ｄが混入されていない別の固体培地にピン
セット等を使用して移し替え、該固体培地でカルスから
植物体を再分化するものである（図２参照）。
【００１２】従って、二段階法は、一度カルスを別の培
地に移し替える為に一段階法より労力は多くなるが、葯
からカルスを誘導する際に２,４−Ｄが十分存在する為
にカルス誘導率が高く、必然的に、該葯からの植物体の
再分化率も高くなるという長所がある。
地に移し替える為に一段階法より労力は多くなるが、葯
からカルスを誘導する際に２,４−Ｄが十分存在する為
にカルス誘導率が高く、必然的に、該葯からの植物体の
再分化率も高くなるという長所がある。
【００１３】この二段階法を改良して更にカルス誘導率
や再分化率を高めたのが三段階法である。
や再分化率を高めたのが三段階法である。
【００１４】三段階法は、先ず十分な２,４−Ｄが混入
されている液体培地を使用し、該液体培地で葯からカル
スを誘導する。液体培地では固体培地に比しカルス誘導
率が高いという長所があるからである。続いて、該カル
スを液体培地からピペット等を使用して取り出し、２,
４−Ｄが混入されている固体培地に移し替えてカルスを
成長させ、この成長したカルスをカイネチンが混入され
且つ２,４−Ｄが混入されていない別の固体培地にピン
セット等を使用して移し替え、該固体培地でカルスから
植物体を再分化するものである（図３参照）。
されている液体培地を使用し、該液体培地で葯からカル
スを誘導する。液体培地では固体培地に比しカルス誘導
率が高いという長所があるからである。続いて、該カル
スを液体培地からピペット等を使用して取り出し、２,
４−Ｄが混入されている固体培地に移し替えてカルスを
成長させ、この成長したカルスをカイネチンが混入され
且つ２,４−Ｄが混入されていない別の固体培地にピン
セット等を使用して移し替え、該固体培地でカルスから
植物体を再分化するものである（図３参照）。
【００１５】ところで、液体培地では固体培地に比しカ
ルス誘導率が高いという事実が確認されているが、反
面、液体培地中ではカルスから植物体への再分化が起こ
りにくいという事実も確認されている（液体培地で誘導
されたカルスは植物体を容易に再分化できる状態ではな
い。具体的には、液体培地中ではカルスが湿った状態で
細胞がばらけ易く、またカルス内のホルモン濃度やホル
モンバランスも植物体が再分化しにくい状態になってい
るといわれている。）。従って、カルスを液体培地で誘
導した後、固体培地に移し替え、エンブリオジェニック
・カルスと呼ばれる植物体が再分化し易いカルスにし、
その後、該カルスを固体培地に移し替え、植物体を再分
化させるのである。
ルス誘導率が高いという事実が確認されているが、反
面、液体培地中ではカルスから植物体への再分化が起こ
りにくいという事実も確認されている（液体培地で誘導
されたカルスは植物体を容易に再分化できる状態ではな
い。具体的には、液体培地中ではカルスが湿った状態で
細胞がばらけ易く、またカルス内のホルモン濃度やホル
モンバランスも植物体が再分化しにくい状態になってい
るといわれている。）。従って、カルスを液体培地で誘
導した後、固体培地に移し替え、エンブリオジェニック
・カルスと呼ばれる植物体が再分化し易いカルスにし、
その後、該カルスを固体培地に移し替え、植物体を再分
化させるのである。
【００１６】従って、三段階法は、液体培地でカルスを
誘導する為にカルス誘導率が二段階法に比し更に高くな
り、必然的に、葯からの植物体の再分化率が更に高まる
のである。
誘導する為にカルス誘導率が二段階法に比し更に高くな
り、必然的に、葯からの植物体の再分化率が更に高まる
のである。
【００１７】しかし、この三段階法は、二段階法より更
に労力が多くなるという問題点がある。
に労力が多くなるという問題点がある。
【００１８】本発明は、上記問題点に鑑みてなされたも
ので、二段階法と三段階法との長所を両方とも発揮させ
るべく鋭意研究を重ねて発見された、二段階法並の労力
で、三段階法並のカルス誘導率及び植物体の再分化率を
達成することができる新しいイネの葯培養方法を提供す
るものである。
ので、二段階法と三段階法との長所を両方とも発揮させ
るべく鋭意研究を重ねて発見された、二段階法並の労力
で、三段階法並のカルス誘導率及び植物体の再分化率を
達成することができる新しいイネの葯培養方法を提供す
るものである。
【００１９】
【課題を解決するための手段】添付図面を参照して本発
明の要旨を説明する。
明の要旨を説明する。
【００２０】イネの一部を液体培地２で培養して該イネ
の一部からカルス３を誘導し、続いて、該カルス３から
イネの植物体４を再分化するイネの培養方法であって、
イネの一部からカルス３を誘導した後、前記液体培地２
に、２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカルス３か
らイネの植物体４を再分化する為に必要な成分を含む栄
養液５を加えてカルス３の増殖を行うことを特徴とする
イネの培養方法に係るものである。
の一部からカルス３を誘導し、続いて、該カルス３から
イネの植物体４を再分化するイネの培養方法であって、
イネの一部からカルス３を誘導した後、前記液体培地２
に、２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカルス３か
らイネの植物体４を再分化する為に必要な成分を含む栄
養液５を加えてカルス３の増殖を行うことを特徴とする
イネの培養方法に係るものである。
【００２１】また、請求項１記載のイネの培養方法にお
いて、イネの一部として葯１を採用し、該葯１中の花粉
からカルス３を誘導することを特徴とするイネの培養方
法に係るものである。
いて、イネの一部として葯１を採用し、該葯１中の花粉
からカルス３を誘導することを特徴とするイネの培養方
法に係るものである。
【００２２】また、請求項１，２いずれか１項に記載の
イネの培養方法において、液体培地２に栄養液５を加え
てカルス３の増殖を行った後、該カルス３を固体培地６
に移植して植物体４を再分化することを特徴とするイネ
の培養方法に係るものである。
イネの培養方法において、液体培地２に栄養液５を加え
てカルス３の増殖を行った後、該カルス３を固体培地６
に移植して植物体４を再分化することを特徴とするイネ
の培養方法に係るものである。
【００２３】また、請求項１〜３いずれか１項に記載の
イネの培養方法において、栄養液５は、ソルビトール，
カイネチン，アブシジン酸，カザミノ酸，アスパラギン
酸，グルタミン，Ｂ５培地のビタミン類及びＤＫＮ培地
の無機塩類を含むことを特徴とするイネの培養方法に係
るものである。
イネの培養方法において、栄養液５は、ソルビトール，
カイネチン，アブシジン酸，カザミノ酸，アスパラギン
酸，グルタミン，Ｂ５培地のビタミン類及びＤＫＮ培地
の無機塩類を含むことを特徴とするイネの培養方法に係
るものである。
【００２４】
【発明の作用及び効果】イネの一部、例えば、葯１を液
体培地２で培養するから、三段階法と同様にカルス誘導
率が高く、葯１から多量のカルス３が誘導される。
体培地２で培養するから、三段階法と同様にカルス誘導
率が高く、葯１から多量のカルス３が誘導される。
【００２５】液体培地２中では、前述の通り、カルス３
が再分化しやすい状態とはならないが、本発明では、液
体培地２に２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカル
ス３からイネの植物体４を再分化し易い状態にする為に
必要な成分を含む栄養液５を加えるから、該栄養液５の
作用によって前記葯１から誘導されたカルス３が再分化
し易い状態となり、よって三段階法において使用されて
いたカルスを成長させる為の固体培地が不要となり、液
体培地２で培養，成長させたカルス３を一度固体培地等
に移し替えるだけで、植物体４を容易に再分化できるこ
とになる。
が再分化しやすい状態とはならないが、本発明では、液
体培地２に２，４−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカル
ス３からイネの植物体４を再分化し易い状態にする為に
必要な成分を含む栄養液５を加えるから、該栄養液５の
作用によって前記葯１から誘導されたカルス３が再分化
し易い状態となり、よって三段階法において使用されて
いたカルスを成長させる為の固体培地が不要となり、液
体培地２で培養，成長させたカルス３を一度固体培地等
に移し替えるだけで、植物体４を容易に再分化できるこ
とになる。
【００２６】この栄養液５の作用は明確ではないが、栄
養液５中の糖類により浸透圧が変化してカルス３中の水
分が脱水されること、及び栄養液５中のカイネチンがカ
ルスの再分化への移行を促すからではないかと推測され
る。
養液５中の糖類により浸透圧が変化してカルス３中の水
分が脱水されること、及び栄養液５中のカイネチンがカ
ルスの再分化への移行を促すからではないかと推測され
る。
【００２７】尚、栄養液５の成分は実験により確認され
たもので、三段階法において使用されていた成分とは異
なり、２，４−Ｄは必要とせず、またアガロースのよう
な固化材も必要とせず、植物体４の再分化に必要な糖
類，カイネチン，アブシジン酸等、及び栄養分であるア
ミノ酸や、ビタミン類や、ＤＫＮ無機塩類を含むものを
使用する。
たもので、三段階法において使用されていた成分とは異
なり、２，４−Ｄは必要とせず、またアガロースのよう
な固化材も必要とせず、植物体４の再分化に必要な糖
類，カイネチン，アブシジン酸等、及び栄養分であるア
ミノ酸や、ビタミン類や、ＤＫＮ無機塩類を含むものを
使用する。
【００２８】本発明は上述のように、培地を一度移し替
えるだけであるから、二段階法並の労力となり、しか
も、液体培地２で葯１からカルス３を誘導するから、三
段階法並のカルス誘導率及び植物体の再分化率を達成す
ることができ、必然的に異なる品種を掛け合わせたもの
（Ｆ１）から多量のカルス３及び多量のカルス３由来の
植物体４が得られ、品種改良を良好に行える実用性，作
業性に秀れたイネの培養方法となる。
えるだけであるから、二段階法並の労力となり、しか
も、液体培地２で葯１からカルス３を誘導するから、三
段階法並のカルス誘導率及び植物体の再分化率を達成す
ることができ、必然的に異なる品種を掛け合わせたもの
（Ｆ１）から多量のカルス３及び多量のカルス３由来の
植物体４が得られ、品種改良を良好に行える実用性，作
業性に秀れたイネの培養方法となる。
【００２９】
【発明の実施の形態】図４〜７は本発明の一実施例を図
示したものであり、以下に説明する。
示したものであり、以下に説明する。
【００３０】異なる品種を掛け合わせたイネ（Ｆ１）か
ら葯１を取り出す。
ら葯１を取り出す。
【００３１】この葯１を、三段階法と同様に２，４−Ｄ
を含む液体培地２で培養し、該葯１中の花粉からカルス
３を誘導する（図５参照）。
を含む液体培地２で培養し、該葯１中の花粉からカルス
３を誘導する（図５参照）。
【００３２】続いて、液体培地２に、２，４−Ｄを含ま
ず糖類やビタミン等のカルス３からイネの植物体４を再
分化する為に必要な成分を含む栄養液５を加えてカルス
３の増殖を行う（図６参照）。
ず糖類やビタミン等のカルス３からイネの植物体４を再
分化する為に必要な成分を含む栄養液５を加えてカルス
３の増殖を行う（図６参照）。
【００３３】栄養液５は、糖類としてソルビトール（カ
ルス３から植物体４を再分化に向かわせる成分、液体培
地２中の浸透圧を変化させてカルス３中の水分を脱水す
るものと考えられる。）、植物ホルモンとしてカイネチ
ン（カルス３から植物体４を再分化に向かわせる成
分。）及びアフシジン酸（カルス３を固めにし、カルス
３から植物体４を再分化に向かわせる成分）、栄養分と
してカザミノ酸，アスパラギン酸，グルタミン，Ｂ５培
地のビタミン類及びＤＫＮ培地の無機塩類（Ｒ２培地の
無機塩類の内、ＫＮＯ3と（ＮＨ4）2ＳＯ4を１／５濃度
としたもの。具体的には、ＫＮＯ3，（ＮＨ4）2ＳＯ4，
ＣａＣｌ2・２Ｈ2０，ＭｇＳＯ4・７Ｈ2０，Ｆｅ−ＥＤ
ＴＡやＩ，Ｂ，Ｍｏ，Ｍｎ等を含む。）を含むものであ
り、該栄養液５の成分は実験により選定されたものであ
る。
ルス３から植物体４を再分化に向かわせる成分、液体培
地２中の浸透圧を変化させてカルス３中の水分を脱水す
るものと考えられる。）、植物ホルモンとしてカイネチ
ン（カルス３から植物体４を再分化に向かわせる成
分。）及びアフシジン酸（カルス３を固めにし、カルス
３から植物体４を再分化に向かわせる成分）、栄養分と
してカザミノ酸，アスパラギン酸，グルタミン，Ｂ５培
地のビタミン類及びＤＫＮ培地の無機塩類（Ｒ２培地の
無機塩類の内、ＫＮＯ3と（ＮＨ4）2ＳＯ4を１／５濃度
としたもの。具体的には、ＫＮＯ3，（ＮＨ4）2ＳＯ4，
ＣａＣｌ2・２Ｈ2０，ＭｇＳＯ4・７Ｈ2０，Ｆｅ−ＥＤ
ＴＡやＩ，Ｂ，Ｍｏ，Ｍｎ等を含む。）を含むものであ
り、該栄養液５の成分は実験により選定されたものであ
る。
【００３４】特に、栄養液５中の２，４−Ｄ濃度と、植
物体再分化率との関係を実験したところ、栄養液５中の
２，４−Ｄが少なければ少ない程、植物体再分化率が向
上することが判明した。従って、栄養液５中は２，４−
Ｄを含まない方が良い。
物体再分化率との関係を実験したところ、栄養液５中の
２，４−Ｄが少なければ少ない程、植物体再分化率が向
上することが判明した。従って、栄養液５中は２，４−
Ｄを含まない方が良い。
【００３５】尚、三段階法における二段階目の培地とし
て使用される固体培地の成分として、上記栄養液５の成
分に、更に、糖類としてショ糖、植物ホルモンとして
２，４−Ｄ、固体培地とする為のアガロースを加えたも
のが使用されている。尚、三段階法における二段階目の
培地は、液体培地で誘導されたカルス３を、再分化する
為の培地（三段階目の培地として使用される固体培地）
に移植する前に、該カルス３のホルモンバランスを調整
し且つ該カルス３を乾いた状態にする為に使用されるも
のである。
て使用される固体培地の成分として、上記栄養液５の成
分に、更に、糖類としてショ糖、植物ホルモンとして
２，４−Ｄ、固体培地とする為のアガロースを加えたも
のが使用されている。尚、三段階法における二段階目の
培地は、液体培地で誘導されたカルス３を、再分化する
為の培地（三段階目の培地として使用される固体培地）
に移植する前に、該カルス３のホルモンバランスを調整
し且つ該カルス３を乾いた状態にする為に使用されるも
のである。
【００３６】続いて、増殖されたカルス３を固体培地６
に移植し、該固体培地６でイネの植物体４を再分化する
（図７参照）。
に移植し、該固体培地６でイネの植物体４を再分化する
（図７参照）。
【００３７】上記本実施例における作業時間と、従来の
三段階法における作業時間との比較結果を下記表１に示
す。尚、イネ（Ｆ１）から葯１を取り出し、液体培地２
でカルス３を誘導する前までの作業時間と、液体培地２
でカルス３を増殖した後、該カルス３を固体培地６に移
植して植物体４を再分化するまでの作業時間は、本実施
例も三段階法も同様である。
三段階法における作業時間との比較結果を下記表１に示
す。尚、イネ（Ｆ１）から葯１を取り出し、液体培地２
でカルス３を誘導する前までの作業時間と、液体培地２
でカルス３を増殖した後、該カルス３を固体培地６に移
植して植物体４を再分化するまでの作業時間は、本実施
例も三段階法も同様である。
【００３８】
【表１】
【００３９】このように本実施例における作業時間は三
段階法における作業時間は大幅に短縮されることにな
り、作業時間については二段階法並となることが判明し
た。
段階法における作業時間は大幅に短縮されることにな
り、作業時間については二段階法並となることが判明し
た。
【００４０】しかも、三段階法の作業の中で最も厄介な
作業である、ピペット等でのカルス３の吸い出し作業
や、シャーレ中の液体培地の取り除き作業を行わなくて
も良くなり、作業性が著しく向上した。また、三段階法
ではカルス３の吸い出し作業時にカルス３を損傷したり
損失したりすることが多かったが、本実施例では、液体
培地２から固体培地６にカルス３を移植する際に一度だ
けしかカルス３を移動しない為、カルス３を損傷したり
損失したりすることが少なくなった。
作業である、ピペット等でのカルス３の吸い出し作業
や、シャーレ中の液体培地の取り除き作業を行わなくて
も良くなり、作業性が著しく向上した。また、三段階法
ではカルス３の吸い出し作業時にカルス３を損傷したり
損失したりすることが多かったが、本実施例では、液体
培地２から固体培地６にカルス３を移植する際に一度だ
けしかカルス３を移動しない為、カルス３を損傷したり
損失したりすることが少なくなった。
【００４１】尚、二段階法では上記表１の作業工程はな
い。
い。
【００４２】また、本実施例により、各種Ｆ１（わせじ
まんと新潟５０号、長１１５８号と朝日、長９２５号と
新潟５０号、北陸１７０号とＢｉｏ−３５、Ｂｉｏ−４
３と新潟４８号、放育系ＬＧＣ−１と長１１６２号、新
潟４６号とミルキークイーン）について実験を行ったと
ころ、いずれの組み合わせにおいても、カルス誘導率も
植物体再分化率も三段階法並であることが判明した。
まんと新潟５０号、長１１５８号と朝日、長９２５号と
新潟５０号、北陸１７０号とＢｉｏ−３５、Ｂｉｏ−４
３と新潟４８号、放育系ＬＧＣ−１と長１１６２号、新
潟４６号とミルキークイーン）について実験を行ったと
ころ、いずれの組み合わせにおいても、カルス誘導率も
植物体再分化率も三段階法並であることが判明した。
【００４３】尚、本実施例の葯１からのカルス誘導率は
平均２４３.８％（三段階法では平均１９８.３％）葯１
からの緑色植物体再分化率は平均４９．７％（三段階法
では平均５１.２％）であった。
平均２４３.８％（三段階法では平均１９８.３％）葯１
からの緑色植物体再分化率は平均４９．７％（三段階法
では平均５１.２％）であった。
【００４４】また、再分化された植物体４は緑色植物体
４（正常な植物体）が多く、アルビノ植物体（異常な植
物体）が少ないという結果も得られた。二組のＦ１（長
１３２４号と北陸１７７号、新潟５６号とどんとこい）
について実験を行ったところ、本実施例の再分化植物４
に占めるアルビノ植物の割合は平均５４.０％（三段階
法では平均７７.１％）このアルビノ植物体とは、色素
が無く白っぽく見える異常個体である。葯培養において
は、染色体を半数しか持たない半数体（花粉）から染色
体が倍化する為、イネの性質を固定し易いという長所が
あるが、染色体異常によってアルビノ植物体の発生が多
いという問題点があった。
４（正常な植物体）が多く、アルビノ植物体（異常な植
物体）が少ないという結果も得られた。二組のＦ１（長
１３２４号と北陸１７７号、新潟５６号とどんとこい）
について実験を行ったところ、本実施例の再分化植物４
に占めるアルビノ植物の割合は平均５４.０％（三段階
法では平均７７.１％）このアルビノ植物体とは、色素
が無く白っぽく見える異常個体である。葯培養において
は、染色体を半数しか持たない半数体（花粉）から染色
体が倍化する為、イネの性質を固定し易いという長所が
あるが、染色体異常によってアルビノ植物体の発生が多
いという問題点があった。
【００４５】本実施例は上述のようにするから、三段階
法並のカルス誘導率及び植物体再分化率でありながら、
二段階法並の作業時間及び作業労力で葯１から植物体４
を再分化することができる実用性，作業性に秀れた葯培
養方法となる。
法並のカルス誘導率及び植物体再分化率でありながら、
二段階法並の作業時間及び作業労力で葯１から植物体４
を再分化することができる実用性，作業性に秀れた葯培
養方法となる。
【００４６】尚、本実施例においてはイネの葯１からカ
ルス３を誘導する方法について詳述したが、例えばめし
べの卵細胞からカルスを誘導する方法や、葯壁からカル
スを誘導する方法や、花枝からカルスを誘導する方法に
おいても同様である。
ルス３を誘導する方法について詳述したが、例えばめし
べの卵細胞からカルスを誘導する方法や、葯壁からカル
スを誘導する方法や、花枝からカルスを誘導する方法に
おいても同様である。
【図１】一段階法のフローチャートである。
【図２】二段階法のフローチャートである。
【図３】三段階法のフローチャートである。
【図４】本実施例のフローチャートである。
【図５】本実施例の説明図である。
【図６】本実施例の説明図である。
【図７】本実施例の説明図である。
１ 葯 ２ 液体培地 ３ カルス ４ 植物体 ５ 栄養液 ６ 固体培地
Claims (4)
- 【請求項１】 イネの一部を液体培地で培養して該イネ
の一部からカルスを誘導し、続いて、該カルスからイネ
の植物体を再分化するイネの培養方法であって、イネの
一部からカルスを誘導した後、前記液体培地に、２，４
−Ｄを含まず糖類やビタミン等のカルスからイネの植物
体を再分化する為に必要な成分を含む栄養液を加えてカ
ルスの増殖を行うことを特徴とするイネの培養方法。 - 【請求項２】 請求項１記載のイネの培養方法におい
て、イネの一部として葯を採用し、該葯中の花粉からカ
ルスを誘導することを特徴とするイネの培養方法。 - 【請求項３】 請求項１，２いずれか１項に記載のイネ
の培養方法において、液体培地に栄養液を加えてカルス
の増殖を行った後、該カルスを固体培地に移植して植物
体を再分化することを特徴とするイネの培養方法。 - 【請求項４】 請求項１〜３いずれか１項に記載のイネ
の培養方法において、栄養液は、ソルビトール，カイネ
チン，アブシジン酸，カザミノ酸，アスパラギン酸，グ
ルタミン，Ｂ５培地のビタミン類及びＤＫＮ培地の無機
塩類を含むことを特徴とするイネの培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11093191A JP2000279046A (ja) | 1999-03-31 | 1999-03-31 | イネの培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11093191A JP2000279046A (ja) | 1999-03-31 | 1999-03-31 | イネの培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000279046A true JP2000279046A (ja) | 2000-10-10 |
Family
ID=14075699
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11093191A Pending JP2000279046A (ja) | 1999-03-31 | 1999-03-31 | イネの培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000279046A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015089356A (ja) * | 2013-11-06 | 2015-05-11 | 住友ゴム工業株式会社 | Ｓｏｎｃｈｕｓ属植物の形質転換植物の作成方法 |
| CN104705189A (zh) * | 2015-04-04 | 2015-06-17 | 安徽袁粮水稻产业有限公司 | 一种粳稻花药诱导培养基配方 |
| CN104719169A (zh) * | 2015-04-04 | 2015-06-24 | 陈丁龙 | 一种高效地诱导粳稻花药培养的诱导培养基配方 |
-
1999
- 1999-03-31 JP JP11093191A patent/JP2000279046A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015089356A (ja) * | 2013-11-06 | 2015-05-11 | 住友ゴム工業株式会社 | Ｓｏｎｃｈｕｓ属植物の形質転換植物の作成方法 |
| CN104705189A (zh) * | 2015-04-04 | 2015-06-17 | 安徽袁粮水稻产业有限公司 | 一种粳稻花药诱导培养基配方 |
| CN104719169A (zh) * | 2015-04-04 | 2015-06-24 | 陈丁龙 | 一种高效地诱导粳稻花药培养的诱导培养基配方 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bonga et al. | Rejuvenation of tissues from mature conifers and its implications for propagation in vitro | |
| CN103444552B (zh) | 一种诱导茄子花药再生单倍体植株的方法 | |
| CN103210844B (zh) | 一种提高粳稻花药培养愈伤组织诱导率和绿苗分化率的方法 | |
| CN105475137B (zh) | 一种兼顾荷花增殖与生根的组培方法 | |
| CN105010147A (zh) | 一种用于增加十二卷属多肉植物组培繁殖速度的专用培养基及组培方法 | |
| Mori et al. | Callus formation and plant regeneration in various Lilium species and cultivars | |
| CN105028212B (zh) | 藓竺竹高效再生体系的建立方法 | |
| CN108770690B (zh) | 一种利用马来甜龙竹芽尖进行高效稳定再生体系的建立方法 | |
| CN105359977A (zh) | 一种雪落樱组培快速繁殖方法 | |
| Chen et al. | Interspecific hybridization of Begonia semperflorens (section Begonia) with B. pearcei (section Eupetalum) for introducing yellow flower color | |
| Hossain et al. | High efficiency plant regeneration from petiole explants of Carica papaya L. through organogenesis | |
| Khandakar et al. | Regeneration of haploid plantlet through anther culture of Chrysanthemum (Dendranthema grandiflorum) | |
| Chi | The efficiencies of various embryo rescue methods in interspecific crosses of Lilium | |
| Mezghani et al. | Morpho-histological study on shoot bud regeneration in cotyledon cultures of pepper (Capsicum annuum) | |
| CN105802901A (zh) | 用于制备棉花胚性愈伤组织的培养基、试剂盒及其用途 | |
| JP2000279046A (ja) | イネの培養方法 | |
| Rhimi et al. | Plant regeneration via somatic embryogenesis from in vitro tissue culture in two Tunisian Cucumis melo cultivars Maazoun and Beji | |
| CN104115751B (zh) | 一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法 | |
| CN104026010B (zh) | 一种桑树子叶不定芽的诱导方法 | |
| JP2008228609A (ja) | ソバの組織培養法、ソバの植物体 | |
| CN111771724B (zh) | 一种基于单细胞起源的番木瓜高效植株再生方法 | |
| CN112042532B (zh) | 一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用 | |
| KR101681062B1 (ko) | 국화 ''백마''의 조직 배양용 최적 배지 조성물 및 이를 이용한 조직 배양 방법 | |
| KR100736207B1 (ko) | 참깨에서의 기내 식물체 재생방법 | |
| CN114600772A (zh) | 一种深山含笑的组培方法和快速繁殖方法 |