JP2000270890A - マンノース又はマンノース含有飼料の製造方法 - Google Patents
マンノース又はマンノース含有飼料の製造方法Info
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- JP2000270890A JP2000270890A JP11077602A JP7760299A JP2000270890A JP 2000270890 A JP2000270890 A JP 2000270890A JP 11077602 A JP11077602 A JP 11077602A JP 7760299 A JP7760299 A JP 7760299A JP 2000270890 A JP2000270890 A JP 2000270890A
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- mannose
- mannan
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 マンノースを容易かつ安価に製造することの
できるマンノースの製造方法及びマンノース含有飼料の
製造方法を提供する。 【解決手段】 マンナンを含有する培地でマンナン分解
酵素産生能を有する微生物を培養してマンナン分解酵素
を発現させた後、培養物の温度を制御して、発現させた
マンナン分解酵素の作用によって培地中のマンナンから
マンノースを遊離させることを特徴とするマンノースの
製造方法。
できるマンノースの製造方法及びマンノース含有飼料の
製造方法を提供する。 【解決手段】 マンナンを含有する培地でマンナン分解
酵素産生能を有する微生物を培養してマンナン分解酵素
を発現させた後、培養物の温度を制御して、発現させた
マンナン分解酵素の作用によって培地中のマンナンから
マンノースを遊離させることを特徴とするマンノースの
製造方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はマンノース又はマン
ノース含有飼料の製造方法に関するものである。
ノース含有飼料の製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】マンノースは、飼料へ有害細菌の感染を
防止するために添加されたり、食品に用いられたり、あ
るいはマンニトールなどの医薬品合成原料などとして多
岐にわたって用いられている。
防止するために添加されたり、食品に用いられたり、あ
るいはマンニトールなどの医薬品合成原料などとして多
岐にわたって用いられている。
【０００３】従来マンノースは、モリブデン酸を触媒と
してグルコースから製造する方法や、フラクトースにマ
ンノースイソメラーゼを作用させることにより製造する
方法が知られている。また、木材、こんにゃく等に含ま
れるグルコマンナンやグァーガムなどに含まれるガラク
トマンナンを酸分解や酵素分解することにより製造され
ている。
してグルコースから製造する方法や、フラクトースにマ
ンノースイソメラーゼを作用させることにより製造する
方法が知られている。また、木材、こんにゃく等に含ま
れるグルコマンナンやグァーガムなどに含まれるガラク
トマンナンを酸分解や酵素分解することにより製造され
ている。
【０００４】これらの方法のうち、モリブデン酸を触媒
とする方法では、操作が煩雑であるうえ、有機合成法で
あるので、合成したマンノースを食品等の用途に利用す
るのは安全性の観点から難しいという問題点がある。ま
た、マンノースイソメラーゼを作用させる方法では、安
価なフラクトースを原料としているものの、マンノース
の収量が低いという欠点があり、マンノースを安価に製
造するという観点からも、十分な製造方法とは言えない
のが現状である。一方、マンナンを酸分解する方法で
は、その特有の反応条件によって生じる高いコストがマ
ンノースを安価に製造する上での大きな問題点であり、
マンナンを酵素分解する方法は、製造に必要なマンナン
分解酵素の生産とマンノース遊離の酵素反応が別々の系
で行われているため、それに伴うコストといった点にお
いて更なる改善の余地がある。
とする方法では、操作が煩雑であるうえ、有機合成法で
あるので、合成したマンノースを食品等の用途に利用す
るのは安全性の観点から難しいという問題点がある。ま
た、マンノースイソメラーゼを作用させる方法では、安
価なフラクトースを原料としているものの、マンノース
の収量が低いという欠点があり、マンノースを安価に製
造するという観点からも、十分な製造方法とは言えない
のが現状である。一方、マンナンを酸分解する方法で
は、その特有の反応条件によって生じる高いコストがマ
ンノースを安価に製造する上での大きな問題点であり、
マンナンを酵素分解する方法は、製造に必要なマンナン
分解酵素の生産とマンノース遊離の酵素反応が別々の系
で行われているため、それに伴うコストといった点にお
いて更なる改善の余地がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、マンノース
をより安価かつ容易に製造することのできるマンノース
又はマンノース含有飼料の製造方法を提供することを目
的とするものである。
をより安価かつ容易に製造することのできるマンノース
又はマンノース含有飼料の製造方法を提供することを目
的とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記課題
を解決するために鋭意検討の結果、マンナンを含有する
培地で微生物を培養することにより、温度制御のみで、
マンノースを製造することができることを見出し、本発
明を完成するに至った。
を解決するために鋭意検討の結果、マンナンを含有する
培地で微生物を培養することにより、温度制御のみで、
マンノースを製造することができることを見出し、本発
明を完成するに至った。
【０００７】すなわち第１の発明は、マンナンを含有す
る培地でマンナン分解酵素産生能を有する微生物を培養
してマンナン分解酵素を発現させた後、培養物の温度を
制御して、発現させたマンナン分解酵素の作用によって
培地中のマンナンからマンノースを遊離させることを特
徴とするマンノースの製造方法を要旨とするものであ
る。また、第２の発明は、マンナンを含有する培地でマ
ンナン分解酵素産生能を有する微生物を培養してマンナ
ン分解酵素を発現させた後、培養物の温度を制御して、
発現させたマンナン分解酵素の作用によって培地中のマ
ンナンからマンノースを遊離させ、得られた処理物を乾
燥させることを特徴とするマンノース含有飼料の製造方
法を要旨とするものである。
る培地でマンナン分解酵素産生能を有する微生物を培養
してマンナン分解酵素を発現させた後、培養物の温度を
制御して、発現させたマンナン分解酵素の作用によって
培地中のマンナンからマンノースを遊離させることを特
徴とするマンノースの製造方法を要旨とするものであ
る。また、第２の発明は、マンナンを含有する培地でマ
ンナン分解酵素産生能を有する微生物を培養してマンナ
ン分解酵素を発現させた後、培養物の温度を制御して、
発現させたマンナン分解酵素の作用によって培地中のマ
ンナンからマンノースを遊離させ、得られた処理物を乾
燥させることを特徴とするマンノース含有飼料の製造方
法を要旨とするものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるマンナン分解酵素産生能を有する微
生物としては、マンナナーゼ（マンナーゼ）、マンノシ
ダーゼ等のマンナンを分解してマンノースを遊離する酵
素を産生する微生物であれば特に限定されるものではな
く、枯草菌（バチルス・サブチルス）、糸状菌（アスペ
ルギルス・アキュレエイタンス、アスペルギルス・アワ
モリ、アスペルギルス・ニガー、アスペルギルス・ウサ
ミ、フミコラ・インソレンス、トリコデルラ・ハルジア
ヌム、トリコデルラ・コニンギ、トリコデルラ・ロンギ
ブラキアツム、トリコデルラ・ビリデ）、担子菌（コル
チキウム、ピクノポルス・コッキネウム）等が挙げられ
る。これらの微生物の中でもアスペルギルス属の菌はマ
ンナン分解酵素産生能が高いために好ましく、特にアス
ペルギルス・ニガー（IFO6661、IFO4417、IFO31012、IF
O8541、IFO31125）が好ましい。
本発明に用いられるマンナン分解酵素産生能を有する微
生物としては、マンナナーゼ（マンナーゼ）、マンノシ
ダーゼ等のマンナンを分解してマンノースを遊離する酵
素を産生する微生物であれば特に限定されるものではな
く、枯草菌（バチルス・サブチルス）、糸状菌（アスペ
ルギルス・アキュレエイタンス、アスペルギルス・アワ
モリ、アスペルギルス・ニガー、アスペルギルス・ウサ
ミ、フミコラ・インソレンス、トリコデルラ・ハルジア
ヌム、トリコデルラ・コニンギ、トリコデルラ・ロンギ
ブラキアツム、トリコデルラ・ビリデ）、担子菌（コル
チキウム、ピクノポルス・コッキネウム）等が挙げられ
る。これらの微生物の中でもアスペルギルス属の菌はマ
ンナン分解酵素産生能が高いために好ましく、特にアス
ペルギルス・ニガー（IFO6661、IFO4417、IFO31012、IF
O8541、IFO31125）が好ましい。
【０００９】また、このような微生物の培養及びマンノ
ースの遊離反応に用いられる培地としては、マンナンを
含有するものであれば特に限定されるものではなく、マ
ンナンとしては、特に精製されたものである必要はな
い。具体的にマンナンとしては、椰子油抽出残さ粉砕物
であるコプラミール、ツクネイモマンナン、ヤマイモマ
ンナン、ローカストビーンガム、ソイビーンフル、タム
ソンガム、グァーガム、コンニャクイモなどが挙げられ
る。培地中のマンナンは、微生物の培養（酵素製造）段
階には、炭素源として、マンノースの遊離反応の段階に
は、反応の基質となる。
ースの遊離反応に用いられる培地としては、マンナンを
含有するものであれば特に限定されるものではなく、マ
ンナンとしては、特に精製されたものである必要はな
い。具体的にマンナンとしては、椰子油抽出残さ粉砕物
であるコプラミール、ツクネイモマンナン、ヤマイモマ
ンナン、ローカストビーンガム、ソイビーンフル、タム
ソンガム、グァーガム、コンニャクイモなどが挙げられ
る。培地中のマンナンは、微生物の培養（酵素製造）段
階には、炭素源として、マンノースの遊離反応の段階に
は、反応の基質となる。
【００１０】培地中のその他の成分としては、窒素源
（酵母エキス、ペプトン、肉エキス、コーンスティープ
リカー、大豆粕などの有機窒素源；硫安、尿素、硝酸ア
ンモニウムなどの無機窒素源）の他、無機塩（鉄、マグ
ネシウム、カルシウム、カリウムなどの硫酸塩、リン酸
塩、塩酸塩など）などを添加してもよい。また、培地
は、液体、固体どちらであってもよい。培地中のマンナ
ンの含有量としては、０．２〜８０重量％が好ましく、
特に１〜６０重量％が好ましい。
（酵母エキス、ペプトン、肉エキス、コーンスティープ
リカー、大豆粕などの有機窒素源；硫安、尿素、硝酸ア
ンモニウムなどの無機窒素源）の他、無機塩（鉄、マグ
ネシウム、カルシウム、カリウムなどの硫酸塩、リン酸
塩、塩酸塩など）などを添加してもよい。また、培地
は、液体、固体どちらであってもよい。培地中のマンナ
ンの含有量としては、０．２〜８０重量％が好ましく、
特に１〜６０重量％が好ましい。
【００１１】本発明においては、このような培地に、マ
ンナン分解酵素産生能を有する微生物を接種して、ま
ず、微生物の至適生育温度付近にて、好気的に培養する
ことにより、培地中にマンナン分解酵素を発現させ、次
に、培養温度をマンナン分解酵素の至適温度付近に設定
することで、マンナンからマンノースを遊離させる。
ンナン分解酵素産生能を有する微生物を接種して、ま
ず、微生物の至適生育温度付近にて、好気的に培養する
ことにより、培地中にマンナン分解酵素を発現させ、次
に、培養温度をマンナン分解酵素の至適温度付近に設定
することで、マンナンからマンノースを遊離させる。
【００１２】酵素を発現させるときの温度としては、用
いた微生物の至適温度付近であることが好ましく、２０
〜４０℃が好ましい。また、培養時間としては、２４〜
９６時間が好ましい。また、マンノースを遊離させる際
の温度としては、酵素の作用適温であることが好まし
く、さらに、酵素が失活しない温度であって、微生物の
増殖を抑制する温度とすることが望ましい。具体的に
は、４５〜９０℃、好ましくは５０〜８０℃、さらに好
ましくは６５〜７０℃がよい。反応時間は菌体から発現
した酵素量に依存するが、通常３〜２４時間に設定する
のが作業上好ましい。
いた微生物の至適温度付近であることが好ましく、２０
〜４０℃が好ましい。また、培養時間としては、２４〜
９６時間が好ましい。また、マンノースを遊離させる際
の温度としては、酵素の作用適温であることが好まし
く、さらに、酵素が失活しない温度であって、微生物の
増殖を抑制する温度とすることが望ましい。具体的に
は、４５〜９０℃、好ましくは５０〜８０℃、さらに好
ましくは６５〜７０℃がよい。反応時間は菌体から発現
した酵素量に依存するが、通常３〜２４時間に設定する
のが作業上好ましい。
【００１３】また、マンノースの生成量を増大させるた
めに、酵素反応の温度設定に切り替える際に、ｐＨ調整
のために酸を添加することや固体培地を使用している場
合には水を添加することも可能である。このように本発
明によれば、培養物の温度を制御する以外には特別の作
業をしなくてもマンノースを製造することができる。特
にマンナンとしてコプラミールを用いた場合には、培地
中に特に他の成分を添加しなくても、例えば水分含量を
４０〜７０重量％とすることで、マンノース製造のため
の固体培地として用いることが可能であり、コプラミー
ルに水と微生物を添加後、温度を制御するだけでマンノ
ースを製造することが可能である。
めに、酵素反応の温度設定に切り替える際に、ｐＨ調整
のために酸を添加することや固体培地を使用している場
合には水を添加することも可能である。このように本発
明によれば、培養物の温度を制御する以外には特別の作
業をしなくてもマンノースを製造することができる。特
にマンナンとしてコプラミールを用いた場合には、培地
中に特に他の成分を添加しなくても、例えば水分含量を
４０〜７０重量％とすることで、マンノース製造のため
の固体培地として用いることが可能であり、コプラミー
ルに水と微生物を添加後、温度を制御するだけでマンノ
ースを製造することが可能である。
【００１４】このようにして得られたマンノースは、さ
らに活性炭やイオン交換樹脂を用いた各種クロマトグラ
フィーを用いて精製することができる。また、噴霧乾燥
によって粉末状にしたり、エタノールを添加することに
よって結晶化させることができる。
らに活性炭やイオン交換樹脂を用いた各種クロマトグラ
フィーを用いて精製することができる。また、噴霧乾燥
によって粉末状にしたり、エタノールを添加することに
よって結晶化させることができる。
【００１５】また、本発明においては、このようにして
得られたマンノースを含有する処理物を、真空乾燥機、
真空撹拌乾燥機、ドラム乾燥機、バンド乾燥機等を用い
て乾燥させることにより、マンノース含有飼料を製造す
ることができる。この場合、乾燥のコストを抑えるため
に、培地として固体培地を用いることが好ましい。乾燥
の際の温度としては、雑菌の生育を抑え、さらにマンノ
ースを分解させないためにも５０〜１００℃、好ましく
は７０〜９０℃がよい。
得られたマンノースを含有する処理物を、真空乾燥機、
真空撹拌乾燥機、ドラム乾燥機、バンド乾燥機等を用い
て乾燥させることにより、マンノース含有飼料を製造す
ることができる。この場合、乾燥のコストを抑えるため
に、培地として固体培地を用いることが好ましい。乾燥
の際の温度としては、雑菌の生育を抑え、さらにマンノ
ースを分解させないためにも５０〜１００℃、好ましく
は７０〜９０℃がよい。
【００１６】
【実施例】以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。 実施例１ コプラミール１００ｇ（脂肪分１０重量％、水分７．２
重量％）に水１００ｍＬを添加した固体培地に、Asperg
illus niger（IFO 6661）を植菌し、３７℃で４８時間
静置培養した。次いで、培養温度を６５℃に上げ、１６
時間培養を続けた。培養終了後、培養物を１Ｌの水に懸
濁し、上澄みを濾過することにより、マンノースを含む
清澄な溶液１Ｌを得た。この溶液中の糖の分析を高速液
体カラムクロマトグラフィーにより行った。分析用カラ
ムはバイオラッド社製アミネックスＨＰＸ−８７Ｐを用
いた。カラム温度は８５℃、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎと
し、水で溶出を行った。糖の検出は示唆屈折計を用い、
標準品の定量値からマンノースの含有量を求めた。上記
の反応後の溶液を分析した結果、１Ｌ中に２２ｇのマン
ノースが蓄積していた。
る。 実施例１ コプラミール１００ｇ（脂肪分１０重量％、水分７．２
重量％）に水１００ｍＬを添加した固体培地に、Asperg
illus niger（IFO 6661）を植菌し、３７℃で４８時間
静置培養した。次いで、培養温度を６５℃に上げ、１６
時間培養を続けた。培養終了後、培養物を１Ｌの水に懸
濁し、上澄みを濾過することにより、マンノースを含む
清澄な溶液１Ｌを得た。この溶液中の糖の分析を高速液
体カラムクロマトグラフィーにより行った。分析用カラ
ムはバイオラッド社製アミネックスＨＰＸ−８７Ｐを用
いた。カラム温度は８５℃、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎと
し、水で溶出を行った。糖の検出は示唆屈折計を用い、
標準品の定量値からマンノースの含有量を求めた。上記
の反応後の溶液を分析した結果、１Ｌ中に２２ｇのマン
ノースが蓄積していた。
【００１７】次いで、この溶液をエチルエーテルで脱脂
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０、ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮し、マンノースを含む糖液を得た。この糖
液中のマンノースの純度は８７％（水分は除く）であっ
た。
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０、ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮し、マンノースを含む糖液を得た。この糖
液中のマンノースの純度は８７％（水分は除く）であっ
た。
【００１８】実施例２ コプラミール１００ｇ（脂肪分１０重量％、水分７．２
重量％）に水１００ｍｌを添加した固体培地に、Asperg
illus niger（IFO 6661）を植菌し、実施例１と同様に
してマンノースを含有する処理物を得た。この処理物を
真空乾燥機（ヤマト社製、Vaccum Drying Oven DP32）
にて９０℃、５時間真空乾燥し、水分含量約７．０％の
マンノース含有飼料を得た。
重量％）に水１００ｍｌを添加した固体培地に、Asperg
illus niger（IFO 6661）を植菌し、実施例１と同様に
してマンノースを含有する処理物を得た。この処理物を
真空乾燥機（ヤマト社製、Vaccum Drying Oven DP32）
にて９０℃、５時間真空乾燥し、水分含量約７．０％の
マンノース含有飼料を得た。
【００１９】実施例３ ローカストビーンガムを含有する液体培地（ローカスト
ビーンガム２重量％、ＫＨ2ＰＯ4 １％、ＭｇＳＯ4・７
Ｈ2Ｏ０．５％、酵母エキス０．２％、コーンスティー
プリカー０．５％、ｐＨ５．５）５００ｍＬにAspergil
lus niger（IFO8541）を植菌し、３０℃で４８時間１２
０ｒｐｍで振とう培養を行った。次いで、培養温度を６
５℃に上げ、１６時間培養を続けた。反応終了後、０℃
で１５分間、１２００ｒｐｍで遠心分離を行い、培養上
澄を分離した。得られた培養上澄を濾過することによ
り、マンノースを含む清澄な溶液４７５ｍＬを得た。こ
の溶液中の糖の分析を高速液体カラムクロマトグラフィ
ーにより行った。分析用カラムはバイオラッド社製アミ
ネックスＨＰＸ−８７Ｐを用いた。カラム温度は８５
℃、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎとし、水で溶出を行った。
糖の検出は示唆屈折計を用い、標準品の定量値からマン
ノースの含有量を求めた。上記の反応後の溶液を分析し
た結果、１Ｌ中に４．１ｇのマンノースが蓄積してい
た。
ビーンガム２重量％、ＫＨ2ＰＯ4 １％、ＭｇＳＯ4・７
Ｈ2Ｏ０．５％、酵母エキス０．２％、コーンスティー
プリカー０．５％、ｐＨ５．５）５００ｍＬにAspergil
lus niger（IFO8541）を植菌し、３０℃で４８時間１２
０ｒｐｍで振とう培養を行った。次いで、培養温度を６
５℃に上げ、１６時間培養を続けた。反応終了後、０℃
で１５分間、１２００ｒｐｍで遠心分離を行い、培養上
澄を分離した。得られた培養上澄を濾過することによ
り、マンノースを含む清澄な溶液４７５ｍＬを得た。こ
の溶液中の糖の分析を高速液体カラムクロマトグラフィ
ーにより行った。分析用カラムはバイオラッド社製アミ
ネックスＨＰＸ−８７Ｐを用いた。カラム温度は８５
℃、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎとし、水で溶出を行った。
糖の検出は示唆屈折計を用い、標準品の定量値からマン
ノースの含有量を求めた。上記の反応後の溶液を分析し
た結果、１Ｌ中に４．１ｇのマンノースが蓄積してい
た。
【００２０】次いで、この溶液をエチルエーテルで脱脂
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０，ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮した後、熱エタノールを最終濃度８５容量
％となるように添加し、少量のＤ−マンノースを添加
し、４℃で放置した。この溶液を濾過することにより、
２．８ｇの結晶マンノースを得た。得られたマンノース
の融点は１３１．５〜１３２．５℃であった。
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０，ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮した後、熱エタノールを最終濃度８５容量
％となるように添加し、少量のＤ−マンノースを添加
し、４℃で放置した。この溶液を濾過することにより、
２．８ｇの結晶マンノースを得た。得られたマンノース
の融点は１３１．５〜１３２．５℃であった。
【００２１】実施例４ グァーガムを含有する液体培地（グァーガム２重量％、
ＫＨ2ＰＯ4 １重量％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．５％、
酵母エキス０．２％、コーンスティープリカー０．５
％、ｐＨ５．５）５００ｍＬにAspergillus niger（IFO
4417）を植菌し、３０℃で４８時間１２０ｒｐｍで振
とう培養を行った。次いで、培養温度を６５℃に上げ、
１６時間培養を続けた。培養終了後、０℃で１５分間、
１２００ｒｐｍで遠心分離を行い、培養上澄を分離し
た。得られた培養上澄を濾過することにより、マンノー
スを含む清澄な溶液４９０ｍＬを得た。この溶液中の糖
の分析を高速液体カラムクロマトグラフィーにより行っ
た。分析用カラムはバイオラッド社製アミネックスＨＰ
Ｘ−８７Ｐを用いた。カラム温度は８５℃、流速０．６
ｍＬ／ｍｉｎとし、水で溶出を行った。糖の検出は示唆
屈折計を用い、標準品の定量値からマンノースの含有量
を求めた。上記の反応後の溶液を分析した結果、１Ｌ中
に３．１ｇのマンノースが蓄積していた。
ＫＨ2ＰＯ4 １重量％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．５％、
酵母エキス０．２％、コーンスティープリカー０．５
％、ｐＨ５．５）５００ｍＬにAspergillus niger（IFO
4417）を植菌し、３０℃で４８時間１２０ｒｐｍで振
とう培養を行った。次いで、培養温度を６５℃に上げ、
１６時間培養を続けた。培養終了後、０℃で１５分間、
１２００ｒｐｍで遠心分離を行い、培養上澄を分離し
た。得られた培養上澄を濾過することにより、マンノー
スを含む清澄な溶液４９０ｍＬを得た。この溶液中の糖
の分析を高速液体カラムクロマトグラフィーにより行っ
た。分析用カラムはバイオラッド社製アミネックスＨＰ
Ｘ−８７Ｐを用いた。カラム温度は８５℃、流速０．６
ｍＬ／ｍｉｎとし、水で溶出を行った。糖の検出は示唆
屈折計を用い、標準品の定量値からマンノースの含有量
を求めた。上記の反応後の溶液を分析した結果、１Ｌ中
に３．１ｇのマンノースが蓄積していた。
【００２２】次いで、この溶液をエチルエーテルで脱脂
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０、ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮し、マンノースを含む糖液を得た。この糖
液中のマンノースの純度は８９％（水分は除く）であっ
た。
した後、アニオン交換樹脂（室町化学社製ダウエックス
ＳＡＲ、ＯＨ-型、ベットボリューム５０ｍＬ）、カチ
オン交換樹脂（室町化学製ダウエックスＨＣＲＷ２、Ｈ
+型、ベットボリューム５０ｍＬ）、活性炭（三菱化学
社製ダイアホープＳ８０、ベットボリューム５０ｍＬ）
にこの順序で通液し、マンノースを含む糖液を回収し
た。回収した糖液をブリックス７０となるまでエバポレ
ーターで濃縮し、マンノースを含む糖液を得た。この糖
液中のマンノースの純度は８９％（水分は除く）であっ
た。
【００２３】
【発明の効果】本発明によれば、酵素生産からマンノー
ス生産までを温度制御のみで行うことが可能となり、従
来よりも容易にかつ安価にマンノース及びマンノース含
有飼料を製造することができる。
ス生産までを温度制御のみで行うことが可能となり、従
来よりも容易にかつ安価にマンノース及びマンノース含
有飼料を製造することができる。
Claims (2)
- 【請求項１】 マンナンを含有する培地でマンナン分解
酵素産生能を有する微生物を培養してマンナン分解酵素
を発現させた後、培養物の温度を制御して、発現させた
マンナン分解酵素の作用によって培地中のマンナンから
マンノースを遊離させることを特徴とするマンノースの
製造方法。 - 【請求項２】 マンナンを含有する培地でマンナン分解
酵素産生能を有する微生物を培養してマンナン分解酵素
を発現させた後、培養物の温度を制御して、発現させた
マンナン分解酵素の作用によって培地中のマンナンから
マンノースを遊離させ、得られた処理物を乾燥させるこ
とを特徴とするマンノース含有飼料の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11077602A JP2000270890A (ja) | 1999-03-23 | 1999-03-23 | マンノース又はマンノース含有飼料の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11077602A JP2000270890A (ja) | 1999-03-23 | 1999-03-23 | マンノース又はマンノース含有飼料の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000270890A true JP2000270890A (ja) | 2000-10-03 |
Family
ID=13638498
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11077602A Pending JP2000270890A (ja) | 1999-03-23 | 1999-03-23 | マンノース又はマンノース含有飼料の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000270890A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002052947A1 (en) * | 2000-12-27 | 2002-07-11 | Fuji Oil Co., Ltd. | Method for producing meal containing mannnose |
| JP2002300899A (ja) * | 2001-02-02 | 2002-10-15 | Kao Corp | グルコース−１−リン酸の製造法 |
| US6896918B2 (en) * | 2001-04-05 | 2005-05-24 | Fuji Oil Co., Ltd | Mannose-containing palm kernel meal |
-
1999
- 1999-03-23 JP JP11077602A patent/JP2000270890A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002052947A1 (en) * | 2000-12-27 | 2002-07-11 | Fuji Oil Co., Ltd. | Method for producing meal containing mannnose |
| US6797292B2 (en) | 2000-12-27 | 2004-09-28 | Fuji Oil Co., Ltd. | Method for producing meal containing mannose |
| JP2002300899A (ja) * | 2001-02-02 | 2002-10-15 | Kao Corp | グルコース−１−リン酸の製造法 |
| JP4658417B2 (ja) * | 2001-02-02 | 2011-03-23 | 花王株式会社 | グルコース−１−リン酸の製造法 |
| US6896918B2 (en) * | 2001-04-05 | 2005-05-24 | Fuji Oil Co., Ltd | Mannose-containing palm kernel meal |
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Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081021 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090310 |