JP2000210100A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項1】
試料中の測定対象物を酸化還元反応を用いて測定する方法であって、前記試料が溶血試料であり、前記酸化還元反応に先立ち、試料にテトラゾリウム化合物を添加して前記試料中に含まれる還元物質の影響を排除し、その後、前記測定対象物由来の還元物質または酸化物質を発生させ、この量を、前記テトラゾリウム化合物以外の発色性基質の存在下、酸化還元反応により測定し、この測定値から前記測定対象物の量を決定する測定方法。
【請求項2】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の少なくとも二箇所に環構造置換基を有する請求項1に記載の測定方法。
【請求項3】
前記少なくとも二つの環構造置換基が、ベンゼン環である請求項2に記載の測定方法。
【請求項4】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の少なくとも三箇所に環構造置換基を有し、前記環構造置換基のうち少なくとも2つの環構造置換基の環構造がベンゼン環である請求項1〜3のいずれかに記載の測定方法。
【請求項5】
前記少なくとも一つの環構造置換基が電子吸引性官能基を有する請求項2〜4のいずれか記載の測定方法。
【請求項6】
前記電子吸引性官能基が、ハロゲン基、エーテル基、エステル基、カルボキシ基、アシル基、ニトロソ基、ニトロ基、ヒドロキシ基およびスルホ基からなる群から選択された少なくとも一つの官能基である請求項5記載の測定方法。
【請求項7】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の2位および3位にベンゼン環を有し、前記ベンゼン環のうち少なくとも一方が、ハロゲン基、カルボキシ基、ニトロ基、ヒドロキシ基、スルホ基、メトキシ基およびエトキシ基からなる群から選択された少なくとも一つの官能基を有する請求項1〜6のいずれかに記載の測定方法。
【請求項8】
テトラゾリウム化合物が、2−(4−ヨードフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(2−メトキシ−4−ニトロフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(4−ヨードフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−フェニル−2H−テトラゾリウム塩、3,3'−(1,1'
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ゾリウム塩、3,3'−[3,3'−ジメトキシ−(1,1'−ビフェニル)−
4,4'−ジル]−ビス[2−(4−ニトロフェニル)−5−フェニル−2H−
テトラゾリウム塩]、2,3−ジフェニル−5−(4−クロロフェニル)テトラゾリウム塩、2,5−ジフェニル−3−(p−ジフェニル)テトラゾリウム塩、2,3−ジフェニル−5−(p−ジフェニル)テトラゾリウム塩、2,5−ジフェニル−3−(4−スチリルフェニル)テトラゾリウム塩、2,5−ジフェニル−3−(m−トリル)テトラゾリウム塩および2,5−ジフェニル−3−(p−トリル)テトラゾリウム塩からなる群から選択された少なくとも一つの化合物である請求項1〜7のいずれかに記載の測定方法。
【請求項9】
テトラゾリウム化合物が、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩である請求項1〜8のいずれかに記載の測定方法。
【請求項10】
前記テトラゾリウム化合物が、試料1μl当たり0.001〜100μmolの範囲の濃度になるように添加される請求項1〜9のいずれかに記載の測定方法。
【請求項11】
試料が全血であり、前記テトラゾリウム化合物が、全血1μl当たり0.001〜10μmolの範囲の濃度になるように添加される請求項1〜10のいずれかに記載の測定方法。
【請求項12】
試料が全血であり、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩を、全血1μl当たり、0.001〜0.4μmolの範囲になるように添加する請求項9に記載の測定方法。
【請求項13】
前記測定対象由来の酸化物質が過酸化水素であり、酸化還元反応の測定が、前記過酸化水素量の測定である請求項1〜12のいずれかに記載の測定方法。
【請求項14】
前記過酸化水素量の測定が、ペルオキシダーゼと酸化により発色する基質とを用いた測定である請求項13に記載の測定方法。
【請求項15】
前記基質が、N−(カルボキシメチルアミノカルボニル)−4,4’−ビス(ジメチルアミノ)ジフェニルアミンナトリウムである請求項14に記載の測定方法。
【請求項16】
前記測定対象物が、赤血球内成分である請求項1〜15のいずれかに記載の測定方法。
【請求項17】
前記測定対象物が、赤血球内の糖化タンパク質であり、前記糖化タンパク質の糖部分をフルクトシルアミノ酸オキシダーゼで酸化分解することにより過酸化水素を生成させる請求項13に記載の測定方法。
【請求項18】
前記試料中の還元物質の分子量が、10,000以上である請求項1〜17のいずれかに記載の測定方法。
【請求項19】
前記試料中の還元物質がタンパク質である請求項1〜18のいずれかに記載の測定方法。
【請求項20】
前記試料中の還元物質がヘモグロビンである請求項1〜19のいずれかに記載の測定方法。
【請求項21】
前記糖化タンパク質が、糖化ヘモグロビンである請求項17〜20のいずれかに記載の測定方法。
【請求項1】
試料中の測定対象物を酸化還元反応を用いて測定する方法であって、前記試料が溶血試料であり、前記酸化還元反応に先立ち、試料にテトラゾリウム化合物を添加して前記試料中に含まれる還元物質の影響を排除し、その後、前記測定対象物由来の還元物質または酸化物質を発生させ、この量を、前記テトラゾリウム化合物以外の発色性基質の存在下、酸化還元反応により測定し、この測定値から前記測定対象物の量を決定する測定方法。
【請求項2】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の少なくとも二箇所に環構造置換基を有する請求項1に記載の測定方法。
【請求項3】
前記少なくとも二つの環構造置換基が、ベンゼン環である請求項2に記載の測定方法。
【請求項4】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の少なくとも三箇所に環構造置換基を有し、前記環構造置換基のうち少なくとも2つの環構造置換基の環構造がベンゼン環である請求項1〜3のいずれかに記載の測定方法。
【請求項5】
前記少なくとも一つの環構造置換基が電子吸引性官能基を有する請求項2〜4のいずれか記載の測定方法。
【請求項6】
前記電子吸引性官能基が、ハロゲン基、エーテル基、エステル基、カルボキシ基、アシル基、ニトロソ基、ニトロ基、ヒドロキシ基およびスルホ基からなる群から選択された少なくとも一つの官能基である請求項5記載の測定方法。
【請求項7】
前記テトラゾリウム化合物が、テトラゾール環の2位および3位にベンゼン環を有し、前記ベンゼン環のうち少なくとも一方が、ハロゲン基、カルボキシ基、ニトロ基、ヒドロキシ基、スルホ基、メトキシ基およびエトキシ基からなる群から選択された少なくとも一つの官能基を有する請求項1〜6のいずれかに記載の測定方法。
【請求項8】
テトラゾリウム化合物が、2−(4−ヨードフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(2−メトキシ−4−ニトロフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩、2−(4−ヨードフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−フェニル−2H−テトラゾリウム塩、3,3'−(1,1'
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【請求項9】
テトラゾリウム化合物が、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩である請求項1〜8のいずれかに記載の測定方法。
【請求項10】
前記テトラゾリウム化合物が、試料1μl当たり0.001〜100μmolの範囲の濃度になるように添加される請求項1〜9のいずれかに記載の測定方法。
【請求項11】
試料が全血であり、前記テトラゾリウム化合物が、全血1μl当たり0.001〜10μmolの範囲の濃度になるように添加される請求項1〜10のいずれかに記載の測定方法。
【請求項12】
試料が全血であり、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム塩を、全血1μl当たり、0.001〜0.4μmolの範囲になるように添加する請求項9に記載の測定方法。
【請求項13】
前記測定対象由来の酸化物質が過酸化水素であり、酸化還元反応の測定が、前記過酸化水素量の測定である請求項1〜12のいずれかに記載の測定方法。
【請求項14】
前記過酸化水素量の測定が、ペルオキシダーゼと酸化により発色する基質とを用いた測定である請求項13に記載の測定方法。
【請求項15】
前記基質が、N−(カルボキシメチルアミノカルボニル)−4,4’−ビス(ジメチルアミノ)ジフェニルアミンナトリウムである請求項14に記載の測定方法。
【請求項16】
前記測定対象物が、赤血球内成分である請求項1〜15のいずれかに記載の測定方法。
【請求項17】
前記測定対象物が、赤血球内の糖化タンパク質であり、前記糖化タンパク質の糖部分をフルクトシルアミノ酸オキシダーゼで酸化分解することにより過酸化水素を生成させる請求項13に記載の測定方法。
【請求項18】
前記試料中の還元物質の分子量が、10,000以上である請求項1〜17のいずれかに記載の測定方法。
【請求項19】
前記試料中の還元物質がタンパク質である請求項1〜18のいずれかに記載の測定方法。
【請求項20】
前記試料中の還元物質がヘモグロビンである請求項1〜19のいずれかに記載の測定方法。
【請求項21】
前記糖化タンパク質が、糖化ヘモグロビンである請求項17〜20のいずれかに記載の測定方法。
【0010】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するために、本発明の測定方法は、試料中の測定対象物を酸化還元反応を用いて測定する方法であって、前記試料が溶血試料であり、前記酸化還元反応に先立ち、試料にテトラゾリウム化合物を添加して前記試料中に含まれる還元物質の影響を排除し、その後、前記測定対象物由来の還元物質または酸化物質を発生させ、この量を前記テトラゾリウム化合物以外の発色性基質の存在下、酸化還元反応により測定し、この測定値から前記測定対象物の量を決定することを特徴とする。前記テトラゾリウム化合物とは、テトラゾール環構造を有する化合物である。
【課題を解決するための手段】
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