JP2000125885A - イネいもち病抵抗性遺伝子および関連遺伝子 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 イネいもち病抵抗性遺伝子とその抵抗性関連
遺伝子、その遺伝子工学的利用のための材料、およびこ
の遺伝子を導入したいもち病抵抗性イネ品種等の遺伝子
導入植物を提供する。 【解決手段】 配列番号１の塩基配列を有するイネいも
ち病抵抗性遺伝子、この遺伝子保有する組換えベクタ
ー、この遺伝子をいもち病感受性イネに導入することに
よって作出されたいもち病抵抗性イネ、並びにイネいも
ち病抵抗性関連遺伝子。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この出願は、日本における大
部分のイネいもち病菌株に対して抵抗性を示すイネいも
ち病抵抗性遺伝子と、この遺伝子の植物遺伝子工学への
応用に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】「イモチ病（blast）」は、カビの一種
である子のう菌Magnaporthe grisea（Pyricularia oryz
ae）が引き起こすイネの最大の病害である。このいもち
病は、イネの様々な器官で発病するが、葉では特徴的な
灰緑色の目玉状病斑を作り、症状が重篤な場合には生育
停止から枯死にも至るため、我が国の米生産に対して最
大の脅威となっている病害である。

【０００３】いもち病の原因菌には病原性の異なる複数
の菌株（レース：race）が存在するが、様々なイネ品種
の中には「いもち病抵抗性遺伝子」を保有することによ
って特定レースのいもち病菌に対して抵抗性を示す品種
が存在する。このいもち病抵抗性遺伝子の研究は、佐々
木の報告（遺伝学雑誌、第１巻、第８１−８８頁、１９
２２年）以来、長い歴史がある。ただし、現在、米市場
の大半を占めている良食味イネ品種の多くはこの抵抗性
遺伝子を持たない感受性品種である。

【０００４】そこで、いもち病感受性イネ品種に対し
て、いもち病抵抗性遺伝子を導入してその遺伝形質を抵
抗性に改変する試みが行われてきた。例えば、農林水産
省は種々のレースのいもち病菌に抵抗性を示すササニシ
キ複数系統を１９９４年に「ササニシキＢＬ」として品
種登録している。このササニシキＢＬは、異なるレース
に抵抗性を持つ複数のササニシキの同質遺伝子系統（マ
ルチライン系統）から構成されており、これらを混植す
ることで、あらゆるレースのいもち病菌に対して圃場で
の抵抗性を増すことを目的としている。

【０００５】しかしながら、このササニシキＢＬの作出
に用いられたような従来の育種法は数回から十数回にわ
たる反復戻し交雑と、同じく数代から十数代にわたる固
定化のための自植が必要であり、十年以上の歳月と多大
の労力とを必要とする。しかもこの反復戻し交雑の場合
には、良食味等の元品種の品質を完全に維持した状態で
抵抗性遺伝子を導入することは困難である。実際に、遠
縁の品種に由来する抵抗性遺伝子ほど抵抗性のスペクト
ルは広いが、目的遺伝子以外のゲノム成分が混入するた
め、元の品種の優良形質が失われることもしばしば起こ
った。

【０００６】さらに、いもち病抵抗性遺伝子のうちの真
性抵抗性遺伝子は、強い抵抗性を一遺伝子で付与するこ
とができる反面、抵抗性の崩壊がおこりやすい傾向があ
る。しかも、遺伝子の抵抗性そのものが障害となるた
め、より崩壊が起こりにくい圃場抵抗性等のバックグラ
ウンドをチェックすることができず、抵抗性が崩壊した
時のリスクの大きさを評価できないという問題も存在し
た。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】抵抗性の崩壊のリスク
を予想した上での施肥管理等による最良のコントロール
を行うためには、各種の抵抗性のバックグラウンドが良
く知られているイネ品種に、その形質に影響しない形で
遺伝子を導入することが必要となる。また、病原体の変
異に対応するためには、同一のイネ品種に多種類の抵抗
性遺伝子を別々に、または同時に導入し、マルチライン
系統の作出あるいはジーンピラミディングを行うという
戦略が必要でもある。

【０００８】そして、このような遺伝子導入を実施する
ためには、実体としての遺伝子、すなわち、植物遺伝子
工学的に操作可能な遺伝子ＤＮＡとしてのイネいもち病
抵抗性遺伝子の存在が不可欠である。しかしながら、多
くの精力的な研究活動にもかかわらず、イネいもち病抵
抗性遺伝子のクローニングは現在までのところ成功して
いない。

【０００９】なお、この出願の発明者等は、イネいもち
病抵抗性遺伝子のゲノム位置を特定するための核酸マー
カーを発明し、既に特許出願している（特願平６−１７
９３１３号；特願平６−１７９３１４号）。そして、こ
の出願の発明者等は、これらの核酸マーカーが指示する
ゲノム位置の１ｃＭ以内にイネいもち病抵抗性遺伝子が
存在することを見出しているが、遺伝子そのものの特定
は未だなされていなかった。

【００１０】この出願は、以上のとおりの事情に鑑みて
なされたものであり、これまでに単離されていないイネ
いもち病抵抗性遺伝子を提供することを課題としてい
る。またこの出願は、このイネいもち病抵抗性遺伝子を
植物遺伝子工学的に利用するための各種材料と、その応
用の成果を提供することを課題としている。さらにこの
出願は、イネのいもち病抵抗性機能に関連する遺伝子
（プロテインカイネース遺伝子）を抵抗することを課題
としてもいる。

【００１１】

【課題を解決するための手段】この出願は、前記の課題
を解決するための発明として、以下の(1)〜(30)の発明
を提供する。 (1) 配列番号１の塩基配列を有するイネいもち病抵抗
性遺伝子。 (2) イネ品種ＢＬ−１から単離された遺伝子である前
記(1)のイネいもち病抵抗性遺伝子。 (3) 配列番号１の一部配列からなるＤＮＡ断片。 (4) 前記(1)の遺伝子のｃＤＮＡであって、配列番号２
の塩基配列を有するｃＤＮＡ。 (5) 配列番号２の部分配列からなるＤＮＡ断片。 (6) 前記(1)の遺伝子を保有する組換えベクター。 (7) 前記(3)のＤＮＡ断片を保有する組換えベクター。 (8) 前記(4)のｃＤＮＡを保有する組換えベクター。 (9) 前記(1)の遺伝子をいもち病感受性イネに導入する
ことによって作出されたいもち病抵抗性イネ。 (10) 前記(3)のＤＮＡ断片をいもち病感受性イネに導
入することによって作出されたいもち病抵抗性イネ。 (11) 前記(4)のｃＤＮＡをいもち病感受性イネに導入
することによって作出されたいもち病抵抗性イネ。 (12) 前記(1)の遺伝子と他の遺伝子および／または遺
伝子制御配列とからなる融合遺伝子または組み合わせ遺
伝子。 (13) 前記(3)のＤＮＡ断片と他の遺伝子および／また
は遺伝子制御配列とからなる融合遺伝子または組み合わ
せ遺伝子。 (14) 前記(4)のｃＤＮＡと他の遺伝子および／または
遺伝子制御配列とからなる融合遺伝子または組み合わせ
遺伝子。 (15) 配列番号１における１以上の塩基を人為的に欠
失、置換もしくは付加した塩基配列からなる変異遺伝
子。 (16) 配列番号２における１以上の塩基を人為的に欠
失、置換もしくは付加した塩基配列からなる変異ｃＤＮ
Ａ。 (17) 前記(1)の遺伝子と、他の遺伝子および／または
遺伝子制御配列を植物に導入することによって作出され
た遺伝子導入植物。 (18) 前記(3)のＤＮＡ断片と、他の遺伝子および／ま
たは遺伝子制御配列を植物に導入することによって作出
された遺伝子導入植物。 (19) 前記(4)のｃＤＮＡと、他の遺伝子および／また
は遺伝子制御配列を植物に導入することによって作出さ
れた遺伝子導入植物。 (20) 前記(12)の融合遺伝子または組み合わせ遺伝子を
植物に導入することによって作出された遺伝子導入植
物。 (21) 前記(13)の融合遺伝子または組み合わせ遺伝子を
植物に導入することによって作出された遺伝子導入植
物。 (22) 前記(14)の融合遺伝子または組み合わせ遺伝子を
植物に導入することによって作出された遺伝子導入植
物。 (23) 前記(15)の変異遺伝子を植物に導入することによ
って作出された遺伝子導入植物。 (24) 前記(16)の変異ｃＤＮＡを植物に導入することに
よって作出された遺伝子導入植物。 (25) 配列番号１の塩基配列との相同性に基づいて単離
された遺伝子。 (26) 前記(1)の遺伝子が発現するタンパク質分子であ
って、配列番号３のアミノ酸配列を有するタンパク質分
子。 (27) 前記(26)のタンパク質分子と相互作用するタンパ
ク質分子をコードする遺伝子。 (28) 前記(1)のイネいもち病抵抗性遺伝子の関連遺伝
子であって、配列番号４の塩基配列を有するイネいもち
病抵抗性関連遺伝子。 (29) 前記(28)の遺伝子のｃＤＮＡであって、配列番号
５の塩基配列を有するｃＤＮＡ。 (30) 前記(28)の遺伝子の発現するタンパク質分子であ
って、配列番号６のアミノ酸配列を有するタンパク質分
子。

【００１２】以下、この出願の各発明について、発明の
実施形態を詳しく説明する。

【００１３】

【発明の実施の形態】この出願によって提供される前記
（１）の遺伝子は、下記のポジショナルクローニング法
により、いもち病抵抗性品種ＢＬ−１からその位置の遺
伝学的解析をもとに単離された遺伝子であり、従来から
存在が確認されていた複数のイネいもち病抵抗性遺伝子
のうち、遺伝子Ｐｉ−ｂに対応する。

【００１４】なお、いもち病による判別菌系によりＰｉ
−ｂとされる遺伝子をもつ系統は、図１に示したよう
に、インドネシア品種（Tjina、Tjahaja）およびマレー
シア品種（Engkatek、Milek Kuning）の４系統が知られ
ている。以下、この遺伝子の単離方法について詳細に説
明する。 （ａ）近傍マーカーの特定 この出願の発明者等による先願発明（特願平６−１７９
３１３号；特願平６−１７９３１４号）に記載された方
法に基づき、抵抗性遺伝子のイネ染色体上の精密な位置
を、Ｐｉ−ｂの同質遺伝子系統ＢＬ−１、またはいもち
病感受性のインディカ品種（カサラス）およびいもち病
感受性のジャポニカ品種（農林２５号、愛知旭）との交
配によるＦ２集団と核酸マーカーとによるＦ２分析によ
り決定した（図２）。

【００１５】正確な抵抗性形質の有無の判定を行い、か
つ少ないＦ２個体の分析で２倍の染色体の判別を行うた
めに、劣性ホモ個体である感受性個体について核酸を抽
出して前記マーカーでＲＦＬＰ（restriction fragment
length polymorphism：制限酵素切断長多型）分析およ
びＲＡＰＤ（randomly amplified polymorphic DNAs）
分析を行った。結果的に、０ｃＭ（センチモルガン）の
マーカー２個（ＲＺ１２３、ｂ−１）と、左側１．９ｃ
Ｍ（ＲＺ２１３）、右側０．５ｃＭ（Ｇ１２３４）の位
置にそれぞれ１個のマーカーが得られた（宮本他、Mole
cular Plant Microbe Interactions, 9:6-13, 1996）。 （ｂ）イネのゲノムライブラリーの作製 上記（ａ）で特定した近傍マーカーを用いて目的遺伝子
もしくはその対立遺伝子を含むゲノム断片をつり上げる
ために、大容量のバクテリア人工染色体（ＢＡＣ）によ
るイネのゲノムライブラリーを構築した。すなわち、イ
ネいもち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｔａを保有するイネ品種
シモキタのゲノム断片をそれぞれＢＡＣにクローニング
し、イネの７ゲノム相当をカバーする約20,000クローン
（平均インサートサイズ約１６０ｋＢ）からなる高品位
ライブラリーを作成した（図３）。

【００１６】このＢＡＣライブラリーを７枚のマイクロ
プレートサイズのナイロンメンブレンに、８×１２＝９
６穴のマイクロプレートと同じ配列で、１穴の面積に３
２のクローンとマーカー４つとが６×６のミニマトリク
スとして載り、メンブレン１枚では３２×９６＝３，０
７２づつのクローンが載るように整列転写した（図
４）。このメンブレン１枚分がイネの１ゲノムにほぼ相
当する（中村他、Molecular General Genetics, 254:61
1-620, 1997）。 （ｃ）目的遺伝子を含むＢＡＣクローンの単離 前記（ａ）の近傍マーカーをプローブとして（ｂ）のプ
レートからＢＡＣクローンを拾い上げ、クローンの両端
部をＴＡＩＬ（Thermal Assymmetric Interlaced）−Ｐ
ＣＲ法により増幅し、ＰＣＲ産物をプローブに用いて相
互のオーバーラップを解析することにより、この領域を
カバーする４ステップからなる互いに隣接するクローン
の集合（contig）を作製した（図２）。このcontigにお
いて、遺伝子Ｐｉ−ｂを挟む遺伝学的距離２．４ｃＭの
両側のマーカー間の物理的距離は約３００ｋＢであっ
た。

【００１７】さらに、前記contig中で０ｃＭマーカー
（ｂ−１）をプローブとしてヒットされた数クローンの
両端をＴＡＩＬ−ＰＣＲ法で増幅し、そのＰＣＲ産物を
プローブとして前記（ａ）で得られたＦ２集団でのＲＦ
ＬＰを分析することにより、目的遺伝子Ｐｉ−ｂの存在
範囲を単一クローンＢＡＣ１４５Ｇ７（約１８０ｋＢ）
の中に絞り込んだ。 （ｄ）Ｐｉ−ｂ領域特異的ｃＤＮＡライブラリーの作製 ＢＡＣ１４５Ｇ７クローン領域中で発現している遺伝子
を調べるため、遺伝子Ｐｉ−ｂを保有する抵抗性品種Ｂ
Ｌ−１のｃＤＮＡ断片をｐＢＲ３２２にそれぞれクロー
ニングしてｃＤＮＡライブラリーを作製した。一方、Ｂ
ＡＣ１４５Ｇ７のＤＮＡを超音波で平均１ｋＢに細断
し、ＧＭＡ（glycidyl methacrylate）化したラテック
スビーズに結合させた。

【００１８】次いで、ＢＬ−１のｃＤＮＡライブラリー
のインサート部をＰＣＲ増幅し、このＰＣＲ産物を前記
ラテックスビーズの懸濁液と６５℃で一夜反応させ、ビ
ーズ上のＢＡＣ１４５Ｇ７断片とハイブリダイズさせた
のち、２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳで非結合分画を洗浄
した。洗浄後も結合しているクローンをＴＥ緩衝液で溶
出させ、再びＰＣＲ増幅したのち、ｐＢＲ３２２に組み
込んでＢＡＣ１４５Ｇ７領域特異的濃縮ライブラリーを
作製した。なお、ＢＡＣ１４５Ｇ７が由来するイネ品種
シモキタは抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂそのものは持たない
が、それと相同性を有する対立遺伝子を含むことは、こ
れまでの抵抗性遺伝子の研究から十分期待される。 （ｅ）Ｐｉ−ｂ領域で発現しているｃＤＮＡキャラクタ
リゼーション 前記（ｄ）で得られたＢＡＣ１４５Ｇ７領域特異的濃縮
ｃＤＮＡライブラリーから９６０クローンを選び、ＢＡ
Ｃ１４５Ｇ７断片をプローブとするコロニーハイブリダ
イゼーションによりこれらクローンを検定した結果、１
３％のクローンがＢＡＣ１４５Ｇ７クローンとハイブリ
ダイズし、ＢＡＣ１４５Ｇ７特異的なｃＤＮＡの濃縮が
確認された。そして、ハイブリダイズした２０クローン
の部分シークエンスを行った結果、これらの２０クロー
ンが８種類のｃＤＮＡクローンからなることが明らかに
なった。

【００１９】次いで、これらのｃＤＮＡクローンを濃縮
ライブラリーの残りの９４０クローンにハイブリダイゼ
ーションさせ、ハイブリダイズしないクローンの解析か
らさらに７種のｃＤＮＡを得た。さらに、検索クローン
数を12,000に増やし、ＢＡＣ１４５Ｇ７には結合する
が、前記１５種のｃＤＮＡクローンには結合しないクロ
ーン２種を得て、表１に示すように、最終的にＢＡＣ１
４５Ｇ７領域で発現している遺伝子１７種を確認した。

【００２０】

【表１】

【００２１】なお、この濃縮ライブラリーに含まれるth
iolaseのクローンについて、元のｃＤＮＡライブラリー
での出現率と、濃縮ライブラリーでの出現率とを比較し
た結果、濃縮ライブラリーの濃縮率は約１５８倍と算出
された。すなわち、濃縮ライブラリー12,000クローンの
探索は、通常のｃＤＮＡライブラリー約2,000,000クロ
ーンの探索に相当する。 （ｆ）遺伝子導入イネの作出と、イネいもち病抵抗性遺
伝子Ｐｉ−ｂの単離 大容量バイナリーベクターｐＢＩＧＲＺ（特願平８−２
５５１８４号）を用い、抵抗性品種ＢＬ−１の機能性ゲ
ノムライブラリーとＢＡＣ１４５Ｇ７クローンのサブゲ
ノムライブラリー（平均インサートサイズ３０〜４０ｋ
Ｂ）を作製した。まず、ＢＡＣクローンのサブライブラ
リーからＢＡＣクローンをカバーするサブcontigを作製
した。これをもとにＢＬ−１の全ゲノムの機能性ライブ
ラリーから対応するクローンを拾い上げ、抵抗性品種の
ゲノム断片によるＰｉ−ｂ領域をカバーするｐＢＩＧＲ
Ｚベクターによる機能性contigを構築した（図５、図
６、図７、図８：なお、図５と図６は連続する図面であ
り、図５右上のＡ１と図６左上のＡ２は重複している。
同様に図７と図８も連続する図面であり、図７右上のＢ
１と図８左上のＢ２は重複している）。

【００２２】次いで、これらの機能性contigクローンを
いもち病感受性イネ品種「日本晴」に実施例１と同様に
して導入し、それぞれのクローンに対応する再生個体を
得た。得られた再生個体に、イネいもち病菌株００７ま
たは１３７（Ｐｉ−ｂ保有イネ品種を侵さない菌株）を
２〜３×１０⁵分生子／ｍｌの濃度で噴霧接種し、８〜
１０日後に感染の程度を観察した。その結果、クローン
ｐＢＩＧＲＺＮ７−１による形質転換個体だけが抵抗性
イネ品種ＢＬ−１と同程度の抵抗性を示し、いもち病特
有の病斑はほとんど認められなかった。一方、他のクロ
ーンによる形質転換個体は全て日本晴と同程度の進行性
病斑を形成し、いもち病感受性であった（図１０）。

【００２３】以上の結果から、クローンｐＢＩＧＲＺＮ
７−１がイネいもち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂを含んでい
ることが確認された。さらに、クローンｐＢＩＧＲＺＮ
７−１は約５０ｋＢのサイズを持つが、クローンｐＢＩ
ＧＲＺＮ７−１とそれぞれ約１６ｋＢおよび約２６ｋＢ
のオーバーラップのあるクローンｐＢＩＧＲＺ９−４お
よび９−２ａが抵抗性を示さなかったので、抵抗性遺伝
子の存在部位は、この残りの１２．６ｋＢに存在するＯ
ＲＦ（open reading frame）の１つに対応する遺伝子で
あることが確認された（図９および図１１）。

【００２４】ゲノム断片を解析した結果、このイネいも
ち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂは、ＬＲＲ（ロイシンリッチ
リピート）とＮＢＳ（ヌクレオチドバインディングサイ
ト）とからなる抵抗性遺伝子に特有の構造を有してお
り、その塩基配列は配列番号１のとおりであった。遺伝
子の構造は図10に示したとおりであった。また、この遺
伝子は従来既知のアマのＣ２Ｉ遺伝子やシロイヌナズナ
のＲＰＳ２やＲＰＭ１等の抵抗性遺伝子と相同性を示し
たが、特に近い構造をもつものはなかった。

【００２５】さらに、抵抗性を示した形質転換個体の葉
のＤＮＡを抽出し、サザンブロット分析を行ったとこ
ろ、導入インサートの部分が再編成を受けることなくそ
のまま導入されていることが確認された。また、クロー
ンｐＢＩＧＲＺＮ７−１の後代（Ｒ１）の種子を発芽さ
せ、４−５葉期にいもち病菌（００７株）分生胞子の噴
霧接種を行ったところ、約３：１の割合で抵抗性株と感
受性株が分離した。これは導入当代での抵抗性がシング
ルクローンの導入遺伝子によるものであることを示して
いる。

【００２６】形質転換株はいずれも００７．２株（Ｐｉ
−ｂを侵すいもち病菌株）には感受性を示し、００７株
に対して抵抗性であることと考え合わせると、この抵抗
性が遺伝子Ｐｉ−ｂによるものであることが確認され
た。以上詳しく説明したとおり、この発明(1)のイネい
もち病抵抗性遺伝子は、抵抗性イネ品種ＢＬ−１から単
離された遺伝子であって、配列番号１の塩基配列を有す
る遺伝子であり、配列番号３に示した１２５１個のアミ
ノ酸残基の配列からなるタンパク質分子をコードしてい
る。また、この発明の遺伝子には、配列番号１における
１以上の塩基が欠失、置換または付加された塩基配列か
らなる遺伝子も含まれる。

【００２７】このイネいもち病抵抗性遺伝子は、配列番
号１の塩基配列またはその一部配列からなるオリゴヌク
レオチドをプローブとして、遺伝子Ｐｉ−ｂを保有する
抵抗性イネ品種のゲノムライブラリーから単離して取得
することができ、あるいは、配列番号１の塩基配列をも
とに作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとし、ゲ
ノムライブラリーを鋳型とするＰＣＲ法によって取得す
ることもできる。

【００２８】この出願の前記(3)のＤＮＡ断片は、配列
番号１の塩基配列のうち、１０ｂｐ以上の連続配列から
なるＤＮＡ断片であり、そのセンス鎖およびアンチセン
ス鎖を含むものである。これらのＤＮＡ断片はプローブ
またはＰＣＲプライマーとして有用であるばかりか、遺
伝子導入植物作製の導入遺伝子材料や、融合遺伝子材料
としても用いることができる。

【００２９】この出願の前記(4)のｃＤＮＡは、配列番
号２で表される塩基配列を含むことを特徴とするもので
ある。このｃＤＮＡは、例えば、配列番号２に記載のｃ
ＤＮＡの塩基配列に基づいて合成したオリゴヌクレオチ
ドプローブを用いて、いもち病抵抗性イネ品種から作製
したイネｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするこ
とにより、この発明のｃＤＮＡと同一のクローンを容易
に得ることができる。あるいは、これらのオリゴヌクレ
オチドをプライマーとして、抵抗性イネのｍＲＮＡから
ＲＴ−ＰＣＲ法を用いて、目的ｃＤＮＡを合成すること
もできる。

【００３０】また、配列番号２において、１または複数
個のヌクレオチドの付加、欠失および／または他のヌク
レオチドによる置換がなされているｃＤＮＡもこの発明
に含まれるものである。この出願の前記発明(5)のＤＮ
Ａ断片には、配列番号２で表される塩基配列のいかなる
部分塩基配列を含むｃＤＮＡ断片（１０ｂｐ以上）も含
まれる。また、センス鎖およびアンチセンス鎖からなる
ＤＮＡ断片もこの範疇にはいる。これらのＤＮＡ断片は
任意のイネ品種における抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂの存在を
検定するためのプローブ等として用いることができる。

【００３１】この出願の前記発明(6)〜(7)は、前記(1)
の遺伝子、前記(3)のＤＮＡ断片または前記(4)のＤＮＡ
断片をそれぞれベクターに組み込んだ組換えベクターで
ある。ベクターの種類としては、使用目的に応じて任意
のクローニング用ベクターまたは発現用ベクターを用い
ることができる。ただし、後述する遺伝子導入のための
組換えベクターとしては、遺伝子導入用の宿主（Agroba
cterium等）との適合性を考慮したベクター系を採用す
る。そのようなベクター系としては、短鎖のＤＮＡ断片
の場合には通常のバイナリーベクター等を用いることが
できるが、遺伝子Ｐｉ−ｂの全長またはこれを含むゲノ
ム断片を対象とする場合には、この出願の発明者等が開
発した大容量バイナリーベクターｐＢＩＧＲＺ（特願平
８−２５５１８４号）の使用が好ましい。

【００３２】この出願の前記発明(9)〜(11)のいもち病
抵抗性イネは、例えば前記(1)の遺伝子を保有する組換
えバイナリーベクターをAgrobacterium等の宿主にエレ
クトロポーレーション等で導入し、この宿主をいもち病
感受性イネのカルスと共存培養し、このカルスをハイグ
ロマイシン等による選択の後に再分化させて個体発生さ
せることにより作出することができる。いもち病抵抗性
への形質転換に要する期間は、通常の遺伝子導入による
形質転換植物の作出と同じく３ヶ月程度であり、少人数
（例えば１人）の作業で同時に多数の感受性イネ品種へ
の遺伝子導入を行うことが可能である。固定化について
も、従来法の数分の１の世代での安定化が期待できる。

【００３３】このようにして得られる新品種のいもち病
抵抗性イネは、その圃場抵抗性が、導入遺伝子の起源で
ある品種と原理的に変わらないので、抵抗性崩壊時の状
況を予め把握して対応を計画しておくことが可能とな
る。また、この発明によって提供される遺伝子導入イネ
の場合には、従来の反復戻し交配による品種とは異な
り、被導入品種の本来の優良形質が影響されることはほ
とんどない。

【００３４】この出願の前記発明(12)〜(14)の融合遺伝
子または組み合わせ遺伝子は、例えば前記(1)の遺伝子
Ｐｉ−ｂと他の遺伝子および／または遺伝子制御配列と
を公知の方法で融合または共存させて作製することがで
きる。他の遺伝子としては、微生物、植物または動物等
のゲノム遺伝子もしくはｃＤＮＡ等を適宜に選択して用
いることができる。また、遺伝子制御配列は、融合遺伝
子の上流ないしは下流に存在して、遺伝子発現を制御す
るプロモーター配列および／またはエンハンサー配列な
いしはターミネーター配列である。融合遺伝子または組
み合わせ遺伝子との適合性を考慮して適当なものを用い
ることができる。このような融合遺伝子または組み合わ
せ遺伝子は、組み合わせる遺伝子の種類に応じて、例え
ばシグナル発信機構および認識機構等について新しい機
能を有する遺伝分子を設計することが可能となる。そし
て、これらの融合遺伝子をイネをはじめとする各種の植
物に導入することによって、従来にない遺伝形質を有す
る遺伝子導入植物［この出願の発明(20)〜(22)］を作出
することができる。

【００３５】この出願の前記(15)の変異遺伝子は、前記
(1)の遺伝子の１以上の塩基を、公知の方法で欠失、置
換、付加するなどすることによって作製することができ
る。また、前記(16)の変異ｃＤＮＡも、前記(4)のｃＤ
ＮＡに対する同様の操作によって作製することができ
る。これらによって、例えば分子認識の特異性を変化さ
せることができ、これらの変異遺伝子または変異ｃＤＮ
Ａをイネをはじめとする各種の植物に導入することによ
って、従来にない遺伝形質を有する遺伝子導入植物［こ
の出願の発明(23)(24)］を作出することができる。

【００３６】さらに、前記発明(17)〜(19)の遺伝子導入
植物は、例えば前記(1)の遺伝子と他の遺伝子および／
または遺伝子制御配列とを同一ベクターまたは別個のベ
クターに組込み、Agrobacterium等を介してイネを初め
とする各種植物を形質転換することによって作出するこ
とができる。このような遺伝子導入植物においては、新
たに導入する遺伝子の種類に応じて、各種の抵抗性反応
を制御した状態で必要なだけ導入遺伝子を発現させるこ
とも可能となる。例えば、抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂに対応
するいもち病菌の非病原性遺伝子arvＰｉ−ｂを単離し
て、適当な制御配列とともに遺伝子Ｐｉ−ｂとこのarv
Ｐｉ−ｂを導入することによって、任意のレベルで全身
獲得抵抗性を発現させることが可能となる。そして、こ
のような遺伝子導入イネの場合には、病原体のタイプに
依存しない防御反応が発現するので、抵抗性の崩壊等の
危険はほとんどないことが期待される。また、将来的に
は、他のいもち病抵抗性遺伝子が数種類得られた場合に
は、任意の品種にそれぞれの抵抗性遺伝子を１つづつ組
み込んだマルチライン型の抵抗性イネ品種を１セット作
製することが可能となる。このセットの遺伝子を２〜３
年おきに交代で用いることによって、あるいは混合して
用いることによって、単独遺伝子を導入した場合よりも
はるかに抵抗性崩壊を生じにくい品種を作出することも
可能となる。

【００３７】この出願の前記発明(25)の遺伝子は、前記
発明(1)の遺伝子との構造上の相同性に基づき、公知の
ホモロジー検索やハイブリダイゼーション法により単離
される遺伝子である。例えば他の抵抗性遺伝子や分子認
識機能を有する遺伝子、シグナル伝達系遺伝子等であ
る。この出願の前記(26)のタンパク質分子は、前記発明
(1)の遺伝子または前記発明(4)のｃＤＮＡを適当な発現
ベクターに組み込み、このベクターを宿主細胞に導入
し、この細胞から公知の方法によって単離精製すること
ができる。このタンパク質は、arvＰｉ−ｂ産物の認識
活性が予想され、例えば植物における分子認識系の機構
解明の材料として有用である。

【００３８】この出願の前記発明(27)の植物遺伝子は、
前記発明(26)のタンパク質分子と相互作用するタンパク
質分子を発現する遺伝子であり、ツーハイブリッドシス
テム法等により単離することができる。例えば、病原体
感染の認識に係わるシグナル伝達系のカスケードを構成
するタンパク質分子をコードする遺伝子群等である。こ
の出願の前記発明(28)のいもち病抵抗性関連遺伝子は、
前記発明(1)のいもち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂと同様の
方法により、抵抗性イネ品種ＢＬ−１から単離された遺
伝子であって、配列番号４の塩基配列を有する遺伝子で
ある。すなわち、前記（ａ）と同様の方法により近傍マ
ーカーを特定し、前記（ｂ）により作製したＢＡＣライ
ブラリーから近傍マーカーをプローブとしてＢＡＣ１４
５Ｇ７クローン（約１８０ｋＢ）を単離した。次いで、
前記（ｄ）と同様の方法によりＢＡＣ１４５Ｇ７特異的
濃縮ｃＤＮＡライブラリーを作製し、このライブラリー
から前記（ｅ）（ｆ）と同様にしてクローンｐＢＩＧＲ
Ｚ４−１を単離した。このクローンのゲノム断片を解析
した結果、このイネいもち病抵抗性関連遺伝子は、ＬＲ
Ｒからなるセリンスレオニン型プロテインカイネースの
構造を有しており、その塩基配列は配列番号４、遺伝子
構造は図１１のとおりであった。また、このイネいもち
病抵抗性関連遺伝子は、従来既知のトマトの斑葉細菌病
抵抗性遺伝子（Pto）と高い相同性を示した。

【００３９】この出願の前記発明(29)のｃＤＮＡ（配列
番号５）は、前記発明(4)と同様に取得し、同様に利用
することができる。また、前記発明(30)のタンパク質分
子（配列番号６）は、前記発明（26）と同様に取得し、
利用することができる。特にこのタンパク質分子は、カ
イネース活性を有しているため、例えば植物におけるシ
グナル伝達系の機構解明の材料等として有用である。

【００４０】

【実施例】以下、実施例を示してこの出願の発明につい
てさらに詳細かつ具体的に説明するが、この出願の発明
は以下の例によって限定されるものではない。 実施例１ 配列番号１の塩基配列を含むイネ品種ＢＬ−１のゲノム
断片約２０ｋＢをバイナリーベクターｐＢＩＧＲＺ（特
願平８−２５５１８４号）に組み込み、この組換えベク
ターによってAgrobacterium ＥＨＡ１０１株を形質転換
した。この形質転換菌を、いもち病感受性イネ品種「日
本晴」由来の胚盤カルスと２５℃で培地上で３日間共培
養したのち、ハイグロマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を含
む培地で形質転換カルスを選択し、カルスを個体へと発
生させて、遺伝子導入イネを作出した。

【００４１】この遺伝子導入イネに対し、イネいもち病
菌株１３７または００７を２〜３×１０⁵分生子／ｍｌ
の濃度で噴霧接種し、８〜１０日後に感染の程度を観察
した。その結果、この遺伝子導入イネでは、いもち病特
有の病斑は、遺伝子Ｐｉ−ｂが由来するＢＬ−１と同
様、ほとんど認められなかった。なお、他の遺伝子を含
むゲノム断片を導入したイネでは、元の「日本晴」と同
等の感受性反応を示した。 実施例２ 配列番号１の塩基配列を含むＤＮＡ断片約１１ｋＢと３
５ｋＢをバイナリーベクターｐＢＩＧＲＺ（特願平８−
２５５１８４号）に組み込み、この組換えベクターによ
ってAgrobacterium ＥＨＡ１０１株を形質転換した。こ
の形質転換菌と、いもち病感受性イネ品種「キヌヒカ
リ」の胚盤カルスとを実施例１と同様に共培養したの
ち、カルスを個体へと発生させて、遺伝子導入イネを作
出した。

【００４２】この遺伝子導入イネに対し、イネいもち病
菌株１３７または００７を２〜３×１０⁵分生子／ｍｌ
の濃度で噴霧接種し、８〜１０日後に感染の程度を観察
した。その結果、この遺伝子導入イネでは、いもち病特
有の病斑はほとんど認められなかった。

【００４３】

【発明の効果】以上詳しく説明したとおり、この出願に
よって、いもち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂおよびいもち病
抵抗性関連遺伝子が提供される。これらの遺伝子の作用
機構を解析することにより、抵抗性が崩壊しにくい新た
な抵抗性遺伝子のデザインが可能となる。また、対応す
る非病原性遺伝子と組み合わせることにより、より広い
植物で、より広い範囲の病原体に対して抵抗性を誘導す
るシステムの構築が可能となる。さらに、この遺伝子と
の相同性、あるいは遺伝子産物との相互作用に基づき、
新たな遺伝子が単離される。

【００４４】さらにまた、この出願によって、遺伝子導
入により抵抗性形質を獲得したイネ品種が提供される。
このイネ品種によって、農薬の散布量を大幅に低減する
ことが可能となる。また、在来育種による遺伝子の導入
とは異なり、形質転換前の圃場抵抗性を含む全ての性質
が明らかであるため、いもち病菌の変異による抵抗性の
崩壊が生じた時も、対処方法を事前に設定することがで
きる。コシヒカリのように、交配に敏感な優良食味品質
等も安定して保持することができる。

【００４５】

【配列表】 <110> 科学技術振興事業団 農林水産省農業生物資源研究所長 <120> イネいもち病抵抗性遺伝子および関連遺伝子 <160> 6 <170> PatentIn Ver. 2.0 <210> 1 <211> 7295 <212> DNA <213> Oryza sativa <220> <221> CDS <222> (1176)..(2189) <220> <221> CDS <222> (3530)..(4285) <220> <221> CDS <222> (4594)..(6579) <400> 1 aagcttgcgg gctctgcgac caccctctca tagtcatagg ccacagaagg tgtagtagta 60 cttcatacat ttcgagcagt ttctttcaga ttgtttgttt ttgagcttct aattttggga 120 tgcattagat agtgatgaaa gcctgaatta ttggaatttt ggtgttggta ctcacactct 180 cacagtcaga acatactcct atatattttg cagcacattt gccttgtgcg tgctgttcgt 240 ctgttccact cgtgaacatc agacgcgaag attatagatt cacccctgtt cacagattca 300 ggtactgcca attgcctgga tgaacaccag tccatttgct ctctttcgcc ttacaatttt 360 tctctgcatt gtactagcag ccgtagctcg aaagcctcga atatgattcc ttttcaagat 420 tttatattta tggaatataa ttcactttta agatgccttg atggtgaaat agtagacatg 480 tgagactcca aatctcgtcc taaaagagca tggaggtaaa aaaagaaaaa ggtagacatc 540 gctattgtag acatggagag ctggaatacg attactttca agatattata ttcaatgagc 600 attcattctt acacatatgc cacaaaggta 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250 255 260 aat gga tgt gtg aat gat agg aag tgt cta att gtg ctt aat gac cta 2009 Asn Gly Cys Val Asn Asp Arg Lys Cys Leu Ile Val Leu Asn Asp Leu 265 270 275 tcc acc att gaa gag tgg gac cag att aag aaa tgc ttc caa aaa tgc 2057 Ser Thr Ile Glu Glu Trp Asp Gln Ile Lys Lys Cys Phe Gln Lys Cys 280 285 290 agg aaa gga agc cga atc ata gtg tca agc act caa gtt gaa gtt gca 2105 Arg Lys Gly Ser Arg Ile Ile Val Ser Ser Thr Gln Val Glu Val Ala 295 300 305 310 agc tta tgt gct ggg caa gaa agc caa gcc tca gag cta aag caa ttg 2153 Ser Leu Cys Ala Gly Gln Glu Ser Gln Ala Ser Glu Leu Lys Gln Leu 315 320 325 tct gct gat cag acc ctt tac gca ttc tac gac aag gtaatatact 2199 Ser Ala Asp Gln Thr Leu Tyr Ala Phe Tyr Asp Lys 330 335 tgctcttcaa gcatacctct cgatatcatt tttaattcag ttatgccttt agtaatttct 2259 aattcaattg tgtataggct agttgaagtg cgtgggagtt accattccat tagaaacaca 2319 tgacctaatg caactaacaa gtgctcctcc tgttctctct catttgcctt ttgggaatgc 2379 atgcactcaa cattttaaga ttacagccaa aatatatgta tttggatttg tcaaaacaaa 2439 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ctttggatta aatgtagtgt acttatccca ttattttaaa gttaaattaa tacatatttt 3339 attgaacagt cagatatacg tttttcaaaa taggatccaa aactaaggtt tatactagac 3399 tgcaaattaa tgaaaggaat tatcattatt gttttgtata ctttcatgac cgaaaacaag 3459 gctaaacact atccatgtat gaaaatttaa ggctaaaagt tgttcttaat cattgctccc 3519 ttttgtttag ggt tcc caa att ata gag gat tca gtg aag cca gtg tct 3568 Gly Ser Gln Ile Ile Glu Asp Ser Val Lys Pro Val Ser 340 345 350 atc tcg gat gtg gcc atc aca agt aca aac aat cat aca gtg gcc cat 3616 Ile Ser Asp Val Ala Ile Thr Ser Thr Asn Asn His Thr Val Ala His 355 360 365 ggt gag att ata gat gat caa tca atg gat gct gat gag aag aag gtg 3664 Gly Glu Ile Ile Asp Asp Gln Ser Met Asp Ala Asp Glu Lys Lys Val 370 375 380 gct aga aag agt ctt act cgc att agg aca agt gtt ggt gct tcg gag 3712 Ala Arg Lys Ser Leu Thr Arg Ile Arg Thr Ser Val Gly Ala Ser Glu 385 390 395 gaa tca caa ctt att ggg cga gag aaa gaa ata tct gaa ata aca cac 3760 Glu Ser Gln Leu Ile Gly Arg Glu Lys Glu Ile Ser Glu Ile Thr His 400 405 410 415 tta att tta aac aat gat agc cag cag gtt cag gtg atc tct gtg tgg 3808 Leu Ile Leu Asn Asn Asp Ser Gln Gln Val Gln Val Ile Ser Val Trp 420 425 430 gga atg ggt ggc ctt gga aaa acc acc cta gta agc ggt gtt tat caa 3856 Gly Met Gly Gly Leu Gly Lys Thr Thr Leu Val Ser Gly Val Tyr Gln 435 440 445 agc cca agg ctg agt gat aag ttt gac aag tat gtt ttt gtc aca atc 3904 Ser Pro Arg Leu Ser Asp Lys Phe Asp Lys Tyr Val Phe Val Thr Ile 450 455 460 atg cgt cct ttc att ctt gta gag ctc ctt agg agt ttg gct gag caa 3952 Met Arg Pro Phe Ile Leu Val Glu Leu Leu Arg Ser Leu Ala Glu Gln 465 470 475 cta cat aaa gga tct tct aag aag gaa gaa ctg tta gaa aat aga gtc 4000 Leu His Lys Gly Ser Ser Lys Lys Glu Glu Leu Leu Glu Asn Arg Val 480 485 490 495 agc agt aag aaa tca cta gca tcg atg gag gat acc gag ttg act ggg 4048 Ser Ser Lys Lys Ser Leu Ala Ser Met Glu Asp Thr Glu Leu Thr Gly 500 505 510 cag ttg aaa agg ctt tta gaa aag aaa agt tgc ttg att gtt cta gat 4096 Gln Leu Lys Arg Leu Leu Glu Lys Lys Ser Cys Leu Ile Val Leu Asp 515 520 525 gat ttc tca gat acc tca gaa tgg gac cag ata aaa cca acg tta ttc 4144 Asp Phe Ser Asp Thr Ser Glu Trp Asp Gln Ile Lys Pro Thr Leu Phe 530 535 540 ccc ctg ttg gaa aag aca agc cga ata att gtg act aca aga aaa gag 4192 Pro Leu Leu Glu Lys Thr Ser Arg Ile Ile Val Thr Thr Arg Lys Glu 545 550 555 aat att gcc aac cat tgc tca ggg aaa aat gga aat gtg cac aac ctt 4240 Asn Ile Ala Asn His Cys Ser Gly Lys Asn Gly Asn Val His Asn Leu 560 565 570 575 aaa gtt ctt aaa cat aat gat gca ttg tgc ctc ttg agt gag aag 4285 Lys Val Leu Lys His Asn Asp Ala Leu Cys Leu Leu Ser Glu Lys 580 585 590 gtaatataag tgtgctccat ttttcttggt ttgatattct tttaatcatt tgagtaatcc 4345 aatcaagatg atatttgtgc atgcagaaat agcatatact agattcatat acaacttaat 4405 ctgttctcac aacaatagca atgcagttcc taaaatgacc tgcattggat ggacgttaga 4465 tgtgactttg tttttgtatg taatggtggc cttcattcct tagttttaat agtaaagacg 4525 tatttctaaa tttaattttt tttgttttac tttagagcac aataaagctt aaattgtatc 4585 aatgtcag gta ttt gag gag gct aca tat ttg gat gat 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920 cgt aag gtg gga tgt ata tgt gca aca tgt tgc ctc cct ctt ctt tgc 5643 Arg Lys Val Gly Cys Ile Cys Ala Thr Cys Cys Leu Pro Leu Leu Cys 925 930 935 940 gaa atg tat ggc cct ctc cat aag gcc cta gcc cgg cgt gat gcg tgg 5691 Glu Met Tyr Gly Pro Leu His Lys Ala Leu Ala Arg Arg Asp Ala Trp 945 950 955 act ttc gct tgc tgc gtg aaa ttc cca tct atc atg acg gga gta cat 5739 Thr Phe Ala Cys Cys Val Lys Phe Pro Ser Ile Met Thr Gly Val His 960 965 970 gaa gag gaa ggc gct atg gtg cca agt ggg att aga aaa ctg aaa gac 5787 Glu Glu Glu Gly Ala Met Val Pro Ser Gly Ile Arg Lys Leu Lys Asp 975 980 985 ttg cac aca cta agg aac ata aat gtc gga agg gga aat gcc atc cta 5835 Leu His Thr Leu Arg Asn Ile Asn Val Gly Arg Gly Asn Ala Ile Leu 990 995 1000 cga gat atc gga atg ctc aca gga tta cac aag tta gga gtg gct ggc 5883 Arg Asp Ile Gly Met Leu Thr Gly Leu His Lys Leu Gly Val Ala Gly 1005 1010 1015 1020 atc aac aag aag aat gga cga gcg ttt cgc ttg gcc att tcc aac ctc 5931 Ile Asn Lys Lys Asn Gly Arg Ala Phe Arg Leu Ala Ile Ser Asn Leu 1025 1030 1035 aac aag ctg gaa tca ctg tct gtg agt tca gca ggg atg ccg ggc ttg 5979 Asn Lys Leu Glu Ser Leu Ser Val Ser Ser Ala Gly Met Pro Gly Leu 1040 1045 1050 tgt ggt tgc ttg gat gat ata tcc tcg cct ccg gaa aac cta cag agc 6027 Cys Gly Cys Leu Asp Asp Ile Ser Ser Pro Pro Glu Asn Leu Gln Ser 1055 1060 1065 ctc aag ctg tac ggc agt ttg aaa acg ttg ccg gaa tgg atc aag gag 6075 Leu Lys Leu Tyr Gly Ser Leu Lys Thr Leu Pro Glu Trp Ile Lys Glu 1070 1075 1080 ctc cag cat ctc gtg aag tta aaa cta gtg agt act agg cta ttg gag 6123 Leu Gln His Leu Val Lys Leu Lys Leu Val Ser Thr Arg Leu Leu Glu 1085 1090 1095 1100 cac gac gtt gct atg gaa ttc ctt ggg gaa cta ccg aag gtg gaa att 6171 His Asp Val Ala Met Glu Phe Leu Gly Glu Leu Pro Lys Val Glu Ile 1105 1110 1115 cta gtt att tca ccg ttt aag agt gaa gaa att cat ttc aag cct ccg 6219 Leu Val Ile Ser Pro Phe Lys Ser Glu Glu Ile His Phe Lys Pro Pro 1120 1125 1130 cag act ggg act gct ttt gta agc ctc agg gtg ctc aag ctt gca gga 6267 Gln Thr Gly Thr Ala Phe Val Ser Leu Arg Val Leu Lys Leu Ala Gly 1135 1140 1145 tta tgg ggc atc aaa tca gtg aag ttt gag gaa gga aca atg ccc aaa 6315 Leu Trp Gly Ile Lys Ser Val Lys Phe Glu Glu Gly Thr Met Pro Lys 1150 1155 1160 ctt gag agg ctg cag gtc caa ggg cga ata gaa aat gaa att ggc ttt 6363 Leu Glu Arg Leu Gln Val Gln Gly Arg Ile Glu Asn Glu Ile Gly Phe 1165 1170 1175 1180 tct ggg tta gag ttt ctc caa aac atc aac gaa gtc cag ctc agt gtt 6411 Ser Gly Leu Glu Phe Leu Gln Asn Ile Asn Glu Val Gln Leu Ser Val 1185 1190 1195 tgg ttt ccc acg gat cat gat agg ata aga gcc gcg cgc gcc gcg ggc 6459 Trp Phe Pro Thr Asp His Asp Arg Ile Arg Ala Ala Arg Ala Ala Gly 1200 1205 1210 gct gat tat gag act gcc tgg gag gaa gag gta cag gaa gca agg cgc 6507 Ala Asp Tyr Glu Thr Ala Trp Glu Glu Glu Val Gln Glu Ala Arg Arg 1215 1220 1225 aag gga ggt gaa ctg aag agg aaa atc cga gaa cag ctt gct cgg aat 6555 Lys Gly Gly Glu Leu Lys Arg Lys Ile Arg Glu Gln Leu Ala Arg Asn 1230 1235 1240 cca aac caa ccc atc att acc tga gctcctttgg agttactttg ccgtgctcca 6609 Pro Asn Gln Pro Ile Ile Thr 1245 1250 tactatccta caagtgagat cctctgcagt actgcatgct cactgacatg tggacccgag 6669 gggctgtggg gcccacatgt cagtgagcag tactgtgcag tactgcagag gacctgcatc 6729 cactatccta tattataatg gattgtacta tcgatccaac tattcagatt aactctatac 6789 tagtgaactt attttttttt gccgggccgg caaatagctg gtcgatgtat attaagaata 6849 agaaagggaa tgtacaagat agcgcggtgc gtcaatgcac caccattaca gacgtaaaag 6909 gaaagctaaa atctcacaga atgagttgct acagagtgac acatggggct aacaagacct 6969 gcagctatcc aagtctccca ttcatccccc atggcagaac agaactgggg aaccgttgcc 7029 gcgatccctt caaacaccct tgcgtttcgc tctttcgaaa tcaaccaggt tacaaggatc 7089 acccttgcat cgaacgtttt gcggtcaacc ttagcaacag atttccgggc tgcaagccac 7149 caatcagcaa aatcagccga cgatgaggag cacgaaagga ccaggcgtgt gcgcacctga 7209 cctcaaatct cctgggtgta agagcagccc acgaagatgt gctggcaggt ttccccgtca 7269 ttggagcaga aatagcacac cggagc 7295 <210> 2 <211> 4514 <212> DNA <213> Oryza sativa <220> <221> CDS <222> (43)..(3798)

【００４６】 <400> 2 atcaactctg ccacaaaatc cattcaaaaa tagaacagag ca atg gag gcg acg 54 Met Glu Ala Thr 1 gcg ctg agt gtg ggc aaa tcc gtg ctg aat gga gcg ctt ggc tac gca 102 Ala Leu Ser Val Gly Lys Ser Val Leu Asn Gly Ala Leu Gly Tyr Ala 5 10 15 20 aaa tct gca ttt gct gag gag gtg gcc ttg cag ctt ggt atc cag aaa 150 Lys Ser Ala Phe Ala Glu Glu Val Ala Leu Gln Leu Gly Ile Gln Lys 25 30 35 gac cac aca ttt gtt gca gat gag ctt gag atg atg agg tct ttc atg 198 Asp His Thr Phe Val Ala Asp Glu Leu Glu Met Met Arg Ser Phe Met 40 45 50 atg gag gcg cac gag gag caa gat aac agc aag gtg gtc aag act tgg 246 Met Glu Ala His Glu Glu Gln Asp Asn Ser Lys Val Val Lys Thr Trp 55 60 65 gtg aag caa gtc cgt gac act gcc tat gat gtt gag gac agc ctc cag 294 Val Lys Gln Val Arg Asp Thr Ala Tyr Asp Val Glu Asp Ser Leu Gln 70 75 80 gat ttc gct gtt cat ctt aag agg cca tcc tgg tgg cga ttt cct cgt 342 Asp Phe Ala Val His Leu Lys Arg Pro Ser Trp Trp Arg Phe Pro Arg 85 90 95 100 acg ctg ctc gag cgg cac cgt gtg gcc aag cag atg aag gag ctt agg 390 Thr Leu Leu Glu Arg His Arg Val Ala Lys Gln Met Lys Glu Leu Arg 105 110 115 aac aag gtc gag gat gtc agc cag agg aat gtg cgg tac cac ctc atc 438 Asn Lys Val Glu Asp Val Ser Gln Arg Asn Val Arg Tyr His Leu Ile 120 125 130 aag ggc tct gcc aag gcc acc atc aat tcc act gag caa tct agc gtt 486 Lys Gly Ser Ala Lys Ala Thr Ile Asn Ser Thr Glu Gln Ser Ser Val 135 140 145 att gct aca gcc ata ttc ggc att gac gat gca agg cgt gcc gca aag 534 Ile Ala Thr Ala Ile Phe Gly Ile Asp Asp Ala Arg Arg Ala Ala Lys 150 155 160 cag gac aat cag aga gtg gat ctt gtc caa cta atc aac agt gag gat 582 Gln Asp Asn Gln Arg Val Asp Leu Val Gln Leu Ile Asn Ser Glu Asp 165 170 175 180 cag gac cta aaa gtg atc gcg gtc tgg gga aca agt ggt gat atg ggc 630 Gln Asp Leu Lys Val Ile Ala Val Trp Gly Thr Ser Gly Asp Met Gly 185 190 195 caa aca aca ata atc agg atg gct tat gag aac cca gat gtc caa atc 678 Gln Thr Thr Ile Ile Arg Met Ala Tyr Glu Asn Pro Asp Val Gln Ile 200 205 210 aga ttc cca tgc cgt gca tgg gta agg gtg atg cat cct ttc agt cca 726 Arg Phe Pro Cys Arg Ala Trp Val Arg Val Met His Pro Phe Ser Pro 215 220 225 aga gac ttt gtc cag agc ttg gtg aat cag ctt cat gca acc caa ggg 774 Arg Asp Phe Val Gln Ser Leu Val Asn Gln Leu His Ala Thr Gln Gly 230 235 240 gtt gaa gct ctg ttg gag aaa gag aag aca gaa caa gat tta gct aag 822 Val Glu Ala Leu Leu Glu Lys Glu Lys Thr Glu Gln Asp Leu Ala Lys 245 250 255 260 aaa ttc aat gga tgt gtg aat gat agg aag tgt cta att gtg ctt aat 870 Lys Phe Asn Gly Cys Val Asn Asp Arg Lys Cys Leu Ile Val Leu Asn 265 270 275 gac cta tcc acc att gaa gag tgg gac cag att aag aaa tgc ttc caa 918 Asp Leu Ser Thr Ile Glu Glu Trp Asp Gln Ile Lys Lys Cys Phe Gln 280 285 290 aaa tgc agg aaa gga agc cga atc ata gtg tca agc act caa gtt gaa 966 Lys Cys Arg Lys Gly Ser Arg Ile Ile Val Ser Ser Thr Gln Val Glu 295 300 305 gtt gca agc tta tgt gct ggg caa gaa agc caa gcc tca gag cta aag 1014 Val Ala Ser Leu Cys Ala Gly Gln Glu Ser Gln Ala Ser Glu Leu Lys 310 315 320 caa ttg tct gct gat cag acc ctt tac gca ttc tac gac aag ggt tcc 1062 Gln Leu Ser Ala Asp Gln Thr Leu Tyr Ala Phe Tyr Asp Lys Gly Ser 325 330 335 340 caa att ata gag gat tca gtg aag cca gtg tct atc tcg gat gtg gcc 1110 Gln Ile Ile Glu Asp Ser Val Lys Pro Val Ser Ile Ser Asp Val Ala 345 350 355 atc aca agt aca aac aat cat aca gtg gcc cat ggt gag att ata gat 1158 Ile Thr Ser Thr Asn Asn His Thr Val Ala His Gly Glu Ile Ile Asp 360 365 370 gat caa tca atg gat gct gat gag aag aag gtg gct aga aag agt ctt 1206 Asp Gln Ser Met Asp Ala Asp Glu Lys Lys Val Ala Arg Lys Ser Leu 375 380 385 act cgc att agg aca agt gtt ggt gct tcg gag gaa tca caa ctt att 1254 Thr Arg Ile Arg Thr Ser Val Gly Ala Ser Glu Glu Ser Gln Leu Ile 390 395 400 ggg cga gag aaa gaa ata tct gaa ata aca cac tta att tta aac aat 1302 Gly Arg Glu Lys Glu Ile Ser Glu Ile Thr His Leu Ile Leu Asn Asn 405 410 415 420 gat agc cag cag gtt cag gtg atc tct gtg tgg gga atg ggt ggc ctt 1350 Asp Ser Gln Gln Val Gln Val Ile Ser Val Trp Gly Met Gly Gly Leu 425 430 435 gga aaa acc acc cta gta agc ggt gtt tat caa agc cca agg ctg agt 1398 Gly Lys Thr Thr Leu Val Ser Gly Val Tyr Gln Ser Pro Arg Leu Ser 440 445 450 gat aag ttt gac aag tat gtt ttt gtc aca atc atg cgt cct ttc att 1446 Asp Lys Phe Asp Lys Tyr Val Phe Val Thr Ile Met Arg Pro Phe Ile 455 460 465 ctt gta gag ctc ctt agg agt ttg gct gag caa cta cat aaa gga tct 1494 Leu Val Glu Leu Leu Arg Ser Leu Ala Glu Gln Leu His Lys Gly Ser 470 475 480 tct aag aag gaa gaa ctg tta gaa aat aga gtc agc agt aag aaa tca 1542 Ser Lys Lys Glu Glu Leu Leu Glu Asn Arg Val Ser Ser Lys Lys Ser 485 490 495 500 cta gca tcg atg gag gat acc gag ttg act ggg cag ttg aaa agg ctt 1590 Leu Ala Ser Met Glu Asp Thr Glu Leu Thr Gly Gln Leu Lys Arg Leu 505 510 515 tta gaa aag aaa agt tgc ttg att gtt cta gat gat ttc tca gat acc 1638 Leu Glu Lys Lys Ser Cys Leu Ile Val Leu Asp Asp Phe Ser Asp Thr 520 525 530 tca gaa tgg gac cag ata aaa cca acg tta ttc ccc ctg ttg gaa aag 1686 Ser Glu Trp Asp Gln Ile Lys Pro Thr Leu Phe Pro Leu Leu Glu Lys 535 540 545 aca agc cga ata att gtg act aca aga aaa gag aat att gcc aac cat 1734 Thr Ser Arg Ile Ile Val Thr Thr Arg Lys Glu Asn Ile Ala Asn His 550 555 560 tgc tca ggg aaa aat gga aat gtg cac aac ctt aaa gtt ctt aaa cat 1782 Cys Ser Gly Lys Asn Gly Asn Val His Asn Leu Lys Val Leu Lys His 565 570 575 580 aat gat gca ttg tgc ctc ttg agt gag aag gta ttt gag gag gct aca 1830 Asn Asp Ala Leu Cys Leu Leu Ser Glu Lys Val Phe Glu Glu Ala Thr 585 590 595 tat ttg gat gat cag aac aat cca gag ttg gtt aaa gaa gca aaa caa 1878 Tyr Leu Asp Asp Gln Asn Asn Pro Glu Leu Val Lys Glu Ala Lys Gln 600 605 610 atc cta aag aag tgc gat gga ctg ccc ctt gca ata gtt gtc ata ggt 1926 Ile Leu Lys Lys Cys Asp Gly Leu Pro Leu Ala Ile Val Val Ile Gly 615 620 625 gga ttc ttg gca aac cga cca aag acc cca gaa gag tgg aga aaa ttg 1974 Gly Phe Leu Ala Asn Arg Pro Lys Thr Pro Glu Glu Trp Arg Lys Leu 630 635 640 aac gag aat atc aat gct gag ttg gaa atg aat cca gag ctt gga atg 2022 Asn Glu Asn Ile Asn Ala Glu Leu Glu Met Asn Pro Glu Leu Gly Met 645 650 655 660 ata aga acc gtc ctt gaa aaa agc tat gat ggt tta cca tac cat ctc 2070 Ile Arg Thr Val Leu Glu Lys Ser Tyr Asp Gly Leu Pro Tyr His Leu 665 670 675 aag tca tgt ttt tta tat ctg tcc att ttc cct gaa gac cag atc att 2118 Lys Ser Cys Phe Leu Tyr Leu Ser Ile Phe Pro Glu Asp Gln Ile Ile 680 685 690 agt cga agg cgt ttg gtg cat cgt tgg gca gca gaa ggt tac tca act 2166 Ser Arg Arg Arg Leu Val His Arg Trp Ala Ala Glu Gly Tyr Ser Thr 695 700 705 gca gca cat ggg aaa tct gcc att gaa ata gct aac ggc tac ttc atg 2214 Ala Ala His Gly Lys Ser Ala Ile Glu Ile Ala Asn Gly Tyr Phe Met 710 715 720 gaa ctc aag aat aga agc atg att tta cca ttc cag caa tca ggt agc 2262 Glu Leu Lys Asn Arg Ser Met Ile Leu Pro Phe Gln Gln Ser Gly Ser 725 730 735 740 agc agg aaa tca att gac tct tgc aaa gtc cat gat ctc atg cgt gac 2310 Ser Arg Lys Ser Ile Asp Ser Cys Lys Val His Asp Leu Met Arg Asp 745 750 755 atc gcc atc tca aag tca acg gag gaa aac ctt gtt ttt agg gtg gag 2358 Ile Ala Ile Ser Lys Ser Thr Glu Glu Asn Leu Val Phe Arg Val Glu 760 765 770 gaa ggc tgc agc gcg tac ata cat ggt gca att cgt cat ctt gct ata 2406 Glu Gly Cys Ser Ala Tyr Ile His Gly Ala Ile Arg His Leu Ala Ile 775 780 785 agt agc aac tgg aag gga gat aag agt gaa ttc gag ggc ata gtg gac 2454 Ser Ser Asn Trp Lys Gly Asp Lys Ser Glu Phe Glu Gly Ile Val Asp 790 795 800 ctg tcc cga ata cga tcg tta tct ctg ttt ggg gat tgg aag cca ttt 2502 Leu Ser Arg Ile Arg Ser Leu Ser Leu Phe Gly Asp Trp Lys Pro Phe 805 810 815 820 ttt gtt tat ggc aag atg agg ttt ata cga gtg ctt gac ttt gaa ggg 2550 Phe Val Tyr Gly Lys Met Arg Phe Ile Arg Val Leu Asp Phe Glu Gly 825 830 835 act aga ggt cta gaa tat cat cac ctt gat cag att tgg aag ctt aat 2598 Thr Arg Gly Leu Glu Tyr His His Leu Asp Gln Ile Trp Lys Leu Asn 840 845 850 cac cta aaa ttc ctt tct cta cga gga tgc tat cgt att gat cta ctg 2646 His Leu Lys Phe Leu Ser Leu Arg Gly Cys Tyr Arg Ile Asp Leu Leu 855 860 865 cca gat tta ctg ggc aac ctg agg caa ctc cag atg cta gac atc aga 2694 Pro Asp Leu Leu Gly Asn Leu Arg Gln Leu Gln Met Leu Asp Ile Arg 870 875 880 ggt aca tat gta aag gct ttg cca aaa acc atc atc aag ctt cag aag 2742 Gly Thr Tyr Val Lys Ala Leu Pro Lys Thr Ile Ile Lys Leu Gln Lys 885 890 895 900 cta cag tac att cat gct ggg cgc aaa aca gac tat gta tgg gag gaa 2790 Leu Gln Tyr Ile His Ala Gly Arg Lys Thr Asp Tyr Val Trp Glu Glu 905 910 915 aag cat agt tta atg cag agg tgt cgt aag gtg gga tgt ata tgt gca 2838 Lys His Ser Leu Met Gln Arg Cys Arg Lys Val Gly Cys Ile Cys Ala 920 925 930 aca tgt tgc ctc cct ctt ctt tgc gaa atg tat ggc cct ctc cat aag 2886 Thr Cys Cys Leu Pro Leu Leu Cys Glu Met Tyr Gly Pro Leu His Lys 935 940 945 gcc cta gcc cgg cgt gat gcg tgg act ttc gct tgc tgc gtg aaa ttc 2934 Ala Leu Ala Arg Arg Asp Ala Trp Thr Phe Ala Cys Cys Val Lys Phe 950 955 960 cca tct atc atg acg gga gta cat gaa gag gaa ggc gct atg gtg cca 2982 Pro Ser Ile Met Thr Gly Val His Glu Glu Glu Gly Ala Met Val Pro 965 970 975 980 agt ggg att aga aaa ctg aaa gac ttg cac aca cta agg aac ata aat 3030 Ser Gly Ile Arg Lys Leu Lys Asp Leu His Thr Leu Arg Asn Ile Asn 985 990 995 gtc gga agg gga aat gcc atc cta cga gat atc gga atg ctc aca gga 3078 Val Gly Arg Gly Asn Ala Ile Leu Arg Asp Ile Gly Met Leu Thr Gly 1000 1005 1010 tta cac aag tta gga gtg gct ggc atc aac aag aag aat gga cga gcg 3126 Leu His Lys Leu Gly Val Ala Gly Ile Asn Lys Lys Asn Gly Arg Ala 1015 1020 1025 ttt cgc ttg gcc att tcc aac ctc aac aag ctg gaa tca ctg tct gtg 3174 Phe Arg Leu Ala Ile Ser Asn Leu Asn Lys Leu Glu Ser Leu Ser Val 1030 1035 1040 agt tca gca ggg atg ccg ggc ttg tgt ggt tgc ttg gat gat ata tcc 3222 Ser Ser Ala Gly Met Pro Gly Leu Cys Gly Cys Leu Asp Asp Ile Ser 1045 1050 1055 1060 tcg cct ccg gaa aac cta cag agc ctc aag ctg tac ggc agt ttg aaa 3270 Ser Pro Pro Glu Asn Leu Gln Ser Leu Lys Leu Tyr Gly Ser Leu Lys 1065 1070 1075 acg ttg ccg gaa tgg atc aag gag ctc cag cat ctc gtg aag tta aaa 3318 Thr Leu Pro Glu Trp Ile Lys Glu Leu Gln His Leu Val Lys Leu Lys 1080 1085 1090 cta gtg agt act agg cta ttg gag cac gac gtt gct atg gaa ttc ctt 3366 Leu Val Ser Thr Arg Leu Leu Glu His Asp Val Ala Met Glu Phe Leu 1095 1100 1105 ggg gaa cta ccg aag gtg gaa att cta gtt att tca ccg ttt aag agt 3414 Gly Glu Leu Pro Lys Val Glu Ile Leu Val Ile Ser Pro Phe Lys Ser 1110 1115 1120 gaa gaa att cat ttc aag cct ccg cag act ggg act gct ttt gta agc 3462 Glu Glu Ile His Phe Lys Pro Pro Gln Thr Gly Thr Ala Phe Val Ser 1125 1130 1135 1140 ctc agg gtg ctc aag ctt gca gga tta tgg ggc atc aaa tca gtg aag 3510 Leu Arg Val Leu Lys Leu Ala Gly Leu Trp Gly Ile Lys Ser Val Lys 1145 1150 1155 ttt gag gaa gga aca atg ccc aaa ctt gag agg ctg cag gtc caa ggg 3558 Phe Glu Glu Gly Thr Met Pro Lys Leu Glu Arg Leu Gln Val Gln Gly 1160 1165 1170 cga ata gaa aat gaa att ggc ttt tct ggg tta gag ttt ctc caa aac 3606 Arg Ile Glu Asn Glu Ile Gly Phe Ser Gly Leu Glu Phe Leu Gln Asn 1175 1180 1185 atc aac gaa gtc cag ctc agt gtt tgg ttt ccc acg gat cat gat agg 3654 Ile Asn Glu Val Gln Leu Ser Val Trp Phe Pro Thr Asp His Asp Arg 1190 1195 1200 ata aga gcc gcg cgc gcc gcg ggc gct gat tat gag act gcc tgg gag 3702 Ile Arg Ala Ala Arg Ala Ala Gly Ala Asp Tyr Glu Thr Ala Trp Glu 1205 1210 1215 1220 gaa gag gta cag gaa gca agg cgc aag gga ggt gaa ctg aag agg aaa 3750 Glu Glu Val Gln Glu Ala Arg Arg Lys Gly Gly Glu Leu Lys Arg Lys 1225 1230 1235 atc cga gaa cag ctt gct cgg aat cca aac caa ccc atc att acc tga 3798 Ile Arg Glu Gln Leu Ala Arg Asn Pro Asn Gln Pro Ile Ile Thr 1240 1245 1250 gctcctttgg agttactttg ccgtgctcca tactatccta caagtgagat cctctgcagt 3858 actgcatgct cactgacatg tggacccgag gggctgtggg gcccacatgt cagtgagcag 3918 tactgtgcag tactgcagag gacctgcatc cactatccta tattataatg gattgtacta 3978 tcgatccaac tattcagatt aactctatac tagtgaactt attttttttt gccgggccgg 4038 caaatagctg gtcgatgtat attaagaata agaaagggaa tgtacaagat agcgcggtgc 4098 gtcaatgcac caccattaca gacgtaaaag gaaagctaaa atctcacaga atgagttgct 4158 acagagtgac acatggggct aacaagacct gcagctatcc aagtctccca ttcatccccc 4218 atggcagaac agaactgggg aaccgttgcc gcgatccctt caaacaccct tgcgtttcgc 4278 tctttcgaaa tcaaccaggt tacaaggatc acccttgcat cgaacgtttt gcggtcaacc 4338 ttagcaacag atttccgggc tgcaagccac caatcagcaa aatcagccga cgatgaggag 4398 cacgaaagga ccaggcgtgt gcgcacctga cctcaaatct cctgggtgta agagcagccc 4458 acgaagatgt gctggcaggt ttccccgtca ttggagcaga aatagcacac cggagc 4514 <210> ３ <211> 1251 <212> PRT <213> Oryza sativa <400> 3 Met Glu Ala Thr Ala Leu Ser Val Gly Lys Ser Val Leu Asn Gly Ala 1 5 10 15 Leu Gly Tyr Ala Lys Ser Ala Phe Ala Glu Glu Val Ala Leu Gln Leu 20 25 30 Gly Ile Gln Lys Asp His Thr Phe Val Ala Asp Glu Leu Glu Met Met 35 40 45 Arg Ser Phe Met Met Glu Ala His Glu Glu Gln Asp Asn Ser Lys Val 50 55 60 Val Lys Thr Trp Val Lys Gln Val Arg Asp Thr Ala Tyr Asp Val Glu 65 70 75 80 Asp Ser Leu Gln Asp Phe Ala Val His Leu Lys Arg Pro Ser Trp Trp 85 90 95 Arg Phe Pro Arg Thr Leu Leu Glu Arg His Arg Val Ala Lys Gln Met 100 105 110 Lys Glu Leu Arg Asn Lys Val Glu Asp Val Ser Gln Arg Asn Val Arg 115 120 125 Tyr His Leu Ile Lys Gly Ser Ala Lys Ala Thr Ile Asn Ser Thr Glu 130 135 140 Gln Ser Ser Val Ile Ala Thr Ala Ile Phe Gly Ile Asp Asp Ala Arg 145 150 155 160 Arg Ala Ala Lys Gln Asp Asn Gln Arg Val Asp Leu Val Gln Leu Ile 165 170 175 Asn Ser Glu Asp Gln Asp Leu Lys Val Ile Ala Val Trp Gly Thr Ser 180 185 190 Gly Asp Met Gly Gln Thr Thr Ile Ile Arg Met Ala Tyr Glu Asn Pro 195 200 205 Asp Val Gln Ile Arg Phe Pro Cys Arg Ala Trp Val Arg Val Met His 210 215 220 Pro Phe Ser Pro Arg Asp Phe Val Gln Ser Leu Val Asn Gln Leu His 225 230 235 240 Ala Thr Gln Gly Val Glu Ala Leu Leu Glu Lys Glu Lys Thr Glu Gln 245 250 255 Asp Leu Ala Lys Lys Phe Asn Gly Cys Val Asn Asp Arg Lys Cys Leu 260 265 270 Ile Val Leu Asn Asp Leu Ser Thr Ile Glu Glu Trp Asp Gln Ile Lys 275 280 285 Lys Cys Phe Gln Lys Cys Arg Lys Gly Ser Arg Ile Ile Val Ser Ser 290 295 300 Thr Gln Val Glu Val Ala Ser Leu Cys Ala Gly Gln Glu Ser Gln Ala 305 310 315 320 Ser Glu Leu Lys Gln Leu Ser Ala Asp Gln Thr Leu Tyr Ala Phe Tyr 325 330 335 Asp Lys Gly Ser Gln Ile Ile Glu Asp Ser Val Lys Pro Val Ser Ile 340 345 350 Ser Asp Val Ala Ile Thr Ser Thr Asn Asn His Thr Val Ala His Gly 355 360 365 Glu Ile Ile Asp Asp Gln Ser Met Asp Ala Asp Glu Lys Lys Val Ala 370 375 380 Arg Lys Ser Leu Thr Arg Ile Arg Thr Ser Val Gly Ala Ser Glu Glu 385 390 395 400 Ser Gln Leu Ile Gly Arg Glu Lys Glu Ile Ser Glu Ile Thr His Leu 405 410 415 Ile Leu Asn Asn Asp Ser Gln Gln Val Gln Val Ile Ser Val Trp Gly 420 425 430 Met Gly Gly Leu Gly Lys Thr Thr Leu Val Ser Gly Val Tyr Gln Ser 435 440 445 Pro Arg Leu Ser Asp Lys Phe Asp Lys Tyr Val Phe Val Thr Ile Met 450 455 460 Arg Pro Phe Ile Leu Val Glu Leu Leu Arg Ser Leu Ala Glu Gln Leu 465 470 475 480 His Lys Gly Ser Ser Lys Lys Glu Glu Leu Leu Glu Asn Arg Val Ser 485 490 495 Ser Lys Lys Ser Leu Ala Ser Met Glu Asp Thr Glu Leu Thr Gly Gln 500 505 510 Leu Lys Arg Leu Leu Glu Lys Lys Ser Cys Leu Ile Val Leu Asp Asp 515 520 525 Phe Ser Asp Thr Ser Glu Trp Asp Gln Ile Lys Pro Thr Leu Phe Pro 530 535 540 Leu Leu Glu Lys Thr Ser Arg Ile Ile Val Thr Thr Arg Lys Glu Asn 545 550 555 560 Ile Ala Asn His Cys Ser Gly Lys Asn Gly Asn Val His Asn Leu Lys 565 570 575 Val Leu Lys His Asn Asp Ala Leu Cys Leu Leu Ser Glu Lys Val Phe 580 585 590 Glu Glu Ala Thr Tyr Leu Asp Asp Gln Asn Asn Pro Glu Leu Val Lys 595 600 605 Glu Ala Lys Gln Ile Leu Lys Lys Cys Asp Gly Leu Pro Leu Ala Ile 610 615 620 Val Val Ile Gly Gly Phe Leu Ala Asn Arg Pro Lys Thr Pro Glu Glu 625 630 635 640 Trp Arg Lys Leu Asn Glu Asn Ile Asn Ala Glu Leu Glu Met Asn Pro 645 650 655 Glu Leu Gly Met Ile Arg Thr Val Leu Glu Lys Ser Tyr Asp Gly Leu 660 665 670 Pro Tyr His Leu Lys Ser Cys Phe Leu Tyr Leu Ser Ile Phe Pro Glu 675 680 685 Asp Gln Ile Ile Ser Arg Arg Arg Leu Val His Arg Trp Ala Ala Glu 690 695 700 Gly Tyr Ser Thr Ala Ala His Gly Lys Ser Ala Ile Glu Ile Ala Asn 705 710 715 720 Gly Tyr Phe Met Glu Leu Lys Asn Arg Ser Met Ile Leu Pro Phe Gln 725 730 735 Gln Ser Gly Ser Ser Arg Lys Ser Ile Asp Ser Cys Lys Val His Asp 740 745 750 Leu Met Arg Asp Ile Ala Ile Ser Lys Ser Thr Glu Glu Asn Leu Val 755 760 765 Phe Arg Val Glu Glu Gly Cys Ser Ala Tyr Ile His Gly Ala Ile Arg 770 775 780 His Leu Ala Ile Ser Ser Asn Trp Lys Gly Asp Lys Ser Glu Phe Glu 785 790 795 800 Gly Ile Val Asp Leu Ser Arg Ile Arg Ser Leu Ser Leu Phe Gly Asp 805 810 815 Trp Lys Pro Phe Phe Val Tyr Gly Lys Met Arg Phe Ile Arg Val Leu 820 825 830 Asp Phe Glu Gly Thr Arg Gly Leu Glu Tyr His His Leu Asp Gln Ile 835 840 845 Trp Lys Leu Asn His Leu Lys Phe Leu Ser Leu Arg Gly Cys Tyr Arg 850 855 860 Ile Asp Leu Leu Pro Asp Leu Leu Gly Asn Leu Arg Gln Leu Gln Met 865 870 875 880 Leu Asp Ile Arg Gly Thr Tyr Val Lys Ala Leu Pro Lys Thr Ile Ile 885 890 895 Lys Leu Gln Lys Leu Gln Tyr Ile His Ala Gly Arg Lys Thr Asp Tyr 900 905 910 Val Trp Glu Glu Lys His Ser Leu Met Gln Arg Cys Arg Lys Val Gly 915 920 925 Cys Ile Cys Ala Thr Cys Cys Leu Pro Leu Leu Cys Glu Met Tyr Gly 930 935 940 Pro Leu His Lys Ala Leu Ala Arg Arg Asp Ala Trp Thr Phe Ala Cys 945 950 955 960 Cys Val Lys Phe Pro Ser Ile Met Thr Gly Val His Glu Glu Glu Gly 965 970 975 Ala Met Val Pro Ser Gly Ile Arg Lys Leu Lys Asp Leu His Thr Leu 980 985 990 Arg Asn Ile Asn Val Gly Arg Gly Asn Ala Ile Leu Arg Asp Ile Gly 995 1000 1005 Met Leu Thr Gly Leu His Lys Leu Gly Val Ala Gly Ile Asn Lys Lys 1010 1015 1020 Asn Gly Arg Ala Phe Arg Leu Ala Ile Ser Asn Leu Asn Lys Leu Glu 025 1030 1035 1040 Ser Leu Ser Val Ser Ser Ala Gly Met Pro Gly Leu Cys Gly Cys Leu 1045 1050 1055 Asp Asp Ile Ser Ser Pro Pro Glu Asn Leu Gln Ser Leu Lys Leu Tyr 1060 1065 1070 Gly Ser Leu Lys Thr Leu Pro Glu Trp Ile Lys Glu Leu Gln His Leu 1075 1080 1085 Val Lys Leu Lys Leu Val Ser Thr Arg Leu Leu Glu His Asp Val Ala 1090 1095 1100 Met Glu Phe Leu Gly Glu Leu Pro Lys Val Glu Ile Leu Val Ile Ser 105 1110 1115 1120 Pro Phe Lys Ser Glu Glu Ile His Phe Lys Pro Pro Gln Thr Gly Thr 1125 1130 1135 Ala Phe Val Ser Leu Arg Val Leu Lys Leu Ala Gly Leu Trp Gly Ile 1140 1145 1150 Lys Ser Val Lys Phe Glu Glu Gly Thr Met Pro Lys Leu Glu Arg Leu 1155 1160 1165 Gln Val Gln Gly Arg Ile Glu Asn Glu Ile Gly Phe Ser Gly Leu Glu 1170 1175 1180 Phe Leu Gln Asn Ile Asn Glu Val Gln Leu Ser Val Trp Phe Pro Thr 185 1190 1195 1200 Asp His Asp Arg Ile Arg Ala Ala Arg Ala Ala Gly Ala Asp Tyr Glu 1205 1210 1215 Thr Ala Trp Glu Glu Glu Val Gln Glu Ala Arg Arg Lys Gly Gly Glu 1220 1225 1230 Leu Lys Arg Lys Ile Arg Glu Gln Leu Ala Arg Asn Pro Asn Gln Pro 1235 1240 1245 Ile Ile Thr 1250 <210> 4 <211> 5040 <212> DNA <213> Oryza sativa <220> <221> CDS <222> (2170)..(2547) <220> <221> CDS <222> (2879)..(3139) <220> <221> CDS <222> (3305)..(3430) <220> <221> CDS <222> (4078)..(4593)

【００４７】 <400> 4 agtgcagtac cataggggcc ataaccatgc gcactttttt tgagaaaaaa aatgaagcta 60 gtcatatcaa ccttaaagcg gtatgtatac tccagtgagt ttttggacaa aggggcacac 120 caaaacgcag ttattatagt tggggtagtt gtttggtgag ccaggcaact tctttgcttt 180 cctaatcctc accaaccgac gaaaaagcta gttattgttt ttctaattct aaaataaaca 240 gaattgtgat caatttaaac taatgcttgg aaaacagaga aatatactaa aaataaaaaa 300 ctgtatttag aaacaatcga gtttaatttt ctgctttgct cgtcatcact catcaggtca 360 ccagtctaaa gtccagtctt cttcctttca ggcttccatg ttgttcacaa gtgaaagaga 420 aagacaaaga attcttctcc aatctcgatg caatcgtcat aaccttaaac aaaaacgaag 480 caaaatataa tactagtatt attccttcta gaataagagt gcaaactgct taatagtgat 540 atttcgtttt agatttcttg tcattctaag tttctcctaa gtcaaacata actatttttg 600 tccattaatt tttaaaattc cgtagagttt aacaacatat aaattataat aaaactattt 660 tcttttaatg gatttaaaaa tattaacagt taaaaattat acttgactta ggtttagact 720 tataataaac taattaaaac gatatgtaag ttaaaattaa aaatatattt aaaaatgttc 780 agtaggtgtg tgtgacaggt cctgttcgtt tccactacag atgaattttg gattttcgtg 840 gcatgctttt taaaccgcta aacggtgtgt ttcatgcgaa aaatttatat ataaaagtta 900 ttccaaaata tcagattaat ccatttttca agtttgtaat aattaaaact caattaatca 960 catgttatta gtacctcgtt ttgcgtgaaa cacttcatct tcatatacgt tttcatcttc 1020 gtcttcagaa gattcaaaca attaatacta ataaactaaa acgataagta agttaaaatt 1080 aaaaaaatat taaaaaaata tcagtaggtg tgtgtgacag tgtgagtgtg agagagaaag 1140 gggagaacct gagactgatg agagggagag ggagaaaaca aatcaatatg aggcgaagct 1200 cccaactttg actgctgctt agcccaagtc caagtctttc ttcctcctcc gacctccccc 1260 catctccatc tccgtgctca tctgccttct tctctcccct ttccccgtcg cttcctgcct 1320 ggatcgcaca cacaaagaga tccctcgcag gcggagtggt gcttcccctc tcggatcatc 1380 ttcgcctctg caagattggc aaggtatcat cttttctttt ccatctcttt tctttttttt 1440 ttttggttga gatgttgtgt atgtatgcta actagggtag gtgataactg tacttgttct 1500 tgttgcgttt tgcgttcgag agtgttttga ctttggaatc gtacatcttg ccatgttttt 1560 tccttcctga tttgttgtca ggaatagcgg tagttttggt aggattaagg ttggttgatg 1620 attcggttta attaacgcta gttgcggtat gtatgactgt atggtttcat caggcctggt 1680 gctatttcgc cctcgtcatg ctgttttccc caatcttgag cttaggcatg tttgcattta 1740 cagaattctc tcagcactca atttctgtcc ctggggtgta aaggcccagt ttttgtccta 1800 cttcctgttg attgttgctg taattggatc ctggaacagt aaaaatgctt gtttttttag 1860 atttgatata cttgtcagtt catgataaga tcttcccttc acacatgtta gctggtggca 1920 ttttgcataa ttcaggctcc aaagtttttt ctgtccttat ttcagtacta aaattattgc 1980 ttgaagcaag ggaaagcatt tcctagtcag gaaacttaag aaagtaattg atagttttat 2040 acctgttcta attcacagta gttagcagcc attcctaat g gatcttctcg gtccaattct 2100 ctatttgtgt ttgtgttgca tggaggaagc atgaattagc tcctaatttg ttcccactgc 2160 attgcagca atg agg tgc ctg cct ttc ttg cat gga gat tcc aaa gag gag 2211 Met Arg Cys Leu Pro Phe Leu His Gly Asp Ser Lys Glu Glu 1 5 10 gat ccc gtc aac aag tcg gct tct gtc cgg tcg ttg agc aca aca tcg 2259 Asp Pro Val Asn Lys Ser Ala Ser Val Arg Ser Leu Ser Thr Thr Ser 15 20 25 30 acg gag cgg gat gtc cgg tcc ggc tcc gac ttc aac tcc ttg aac gtc 2307 Thr Glu Arg Asp Val Arg Ser Gly Ser Asp Phe Asn Ser Leu Asn Val 35 40 45 tct gac atg agt gcc gaa tca ata cgg agg aca cag tat ccc agc ttc 2355 Ser Asp Met Ser Ala Glu Ser Ile Arg Arg Thr Gln Tyr Pro Ser Phe 50 55 60 act gat cgg ccc agt aac ctc agg gtg ttc tct ttc tct gag ctg aag 2403 Thr Asp Arg Pro Ser Asn Leu Arg Val Phe Ser Phe Ser Glu Leu Lys 65 70 75 aat gcc act cgc aat ttt agc cgg tct ctt atg gtt ggt gag ggt ggg 2451 Asn Ala Thr Arg Asn Phe Ser Arg Ser Leu Met Val Gly Glu Gly Gly 80 85 90 ttt gga tgt gtg tat agg ggt gtc atc aag aat tcc gat gaa cca act 2499 Phe Gly Cys Val Tyr Arg Gly Val Ile Lys Asn Ser Asp Glu Pro Thr 95 100 105 110 gag cgc acc gag att gct gtt aaa cag ctg aat cgc aaa gga ctt cag 2547 Glu Arg Thr Glu Ile Ala Val Lys Gln Leu Asn Arg Lys Gly Leu Gln 115 120 125 gcaagttatt tctcgtctga actgtaccga ttacaagctt tcaatgcaca tagcaacttc 2607 cttctacttg tactgcatat cttacattat gttttttttc ccacattaaa agagcgaaaa 2667 taaaccagca tttcctagtc accagttcta ttttcttcag aaaagaaacc attactttat 2727 tcaggaaacc cgcacgacaa tttacagtca agcatggcat aagaaattcc tctcaagtgc 2787 accttgcttg atgaatcctt tttaagtcac ttatgcagga atctagcctt atcctctaat 2847 ttgggttcta ataaattatc atgtttttca g ggg cag aaa gaa tgg tta aca 2899 Gly Gln Lys Glu Trp Leu Thr 130 gaa ctg aat gtg ctt ggg att gta gag cat cca aac ctc gtc aaa cta 2947 Glu Leu Asn Val Leu Gly Ile Val Glu His Pro Asn Leu Val Lys Leu 135 140 145 att ggc tac tgc gct gaa gat gat gaa agg ggc gta cag cgt ctc cta 2995 Ile Gly Tyr Cys Ala Glu Asp Asp Glu Arg Gly Val Gln Arg Leu Leu 150 155 160 165 gta tac gaa tac atg cct aat gga agc gtg gat gat cac ttg tca agt 3043 Val Tyr Glu Tyr Met Pro Asn Gly Ser Val Asp Asp His Leu Ser Ser 170 175 180 agg tca aat tca act cta tca tgg cca atg aga cta aaa gta gct ctg 3091 Arg Ser Asn Ser Thr Leu Ser Trp Pro Met Arg Leu Lys Val Ala Leu 185 190 195 gac gct gct cgg gga ctg aag tat ctg cat gaa gag atg gaa ttt cag 3139 Asp Ala Ala Arg Gly Leu Lys Tyr Leu His Glu Glu Met Glu Phe Gln 200 205 210 gtaactcttt tgctctctga tgatgaaaac tgctaccagt tgtacctgaa acagttgtgc 3199 aatgttgcat cacttcctat ctgcaatgaa atgttgaaag atgcacttct ttaggttttt 3259 tttgtctgct atatctatgg tgctaaactt aatatataca tgcag gtt atc ttc cgt 3316 Val Ile Phe Arg 215 gac cta aaa aca tct aac att ctg tta gat gag aac tgg aat gca aag 3364 Asp Leu Lys Thr Ser Asn Ile Leu Leu Asp Glu Asn Trp Asn Ala Lys 220 225 230 tta tct gac ttt gga ttg gct agg cat gga cca tca gaa ggc ctg acc 3412 Leu Ser Asp Phe Gly Leu Ala Arg His Gly Pro Ser Glu Gly Leu Thr 235 240 245 cat gtc tct aca gcg gta tgtgcattga tataccaaga accattttac 3460 His Val Ser Thr Ala Val 250 255 actgcccaca ttttttttaa aaaaatagag aaccattttg cactttcgta ttgtgactgg 3520 attttctgcc cccagagtct ttaacttggt gtattgggaa aaaaaatgca tgatgaccta 3580 agagaaatta agataaagaa aatctcgatg ataattgatg ggtatgtgca tttagtaagt 3640 tggttctgtt tcacatctat aacaggatcc attttttata ccaacgaagt tggacactca 3700 gttgctccac aaccaattgt agaattgcct tggacacata attgatctct gatttatgta 3760 tcatagtttc tgaagcagtc aaaaagcact agcatctagg aatgcagcat tcatatattt 3820 aaccaaaata aaagggaaaa tggacccatc actcgtttac aaaaagccaa caccatgtag 3880 tgaaagttca gtttaaagtg ttgatgctaa gcatgcttta taatattaca aatgatataa 3940 tatatagatt ctccctgcac taaatttcca agtagattct ccctgcacta aatttccaag 4000 tagattctcc ctgtactaaa tttcaaagcc tcacttcttt gttctttcac tgaactaaca 4060 tctgaaattc acaggtc gtg gga act ctt ggg tat gca gct ccg gag tac 4110 Val Gly Thr Leu Gly Tyr Ala Ala Pro Glu Tyr 260 265 atg cag acc gga cgc ctc act gcc aag agt gac ata tgg ggc tat ggt 4158 Met Gln Thr Gly Arg Leu Thr Ala Lys Ser Asp Ile Trp Gly Tyr Gly 270 275 280 gtg ctc ctt tat gag ctc atc acc ggc cgc cgt ccc att gac cgg aac 4206 Val Leu Leu Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Arg Pro Ile Asp Arg Asn 285 290 295 cgc cca aag ggt gag cag aag ctc ctg gat tgg gtg aaa cca tac ata 4254 Arg Pro Lys Gly Glu Gln Lys Leu Leu Asp Trp Val Lys Pro Tyr Ile 300 305 310 tct gat atc aag cgg ttc ccc atc atc ata gac cca cgg cta gag ggg 4302 Ser Asp Ile Lys Arg Phe Pro Ile Ile Ile Asp Pro Arg Leu Glu Gly 315 320 325 330 cac tac aac ctc aag tcc atg aca aag ctg gct agt gtg gcg aac cgc 4350 His Tyr Asn Leu Lys Ser Met Thr Lys Leu Ala Ser Val Ala Asn Arg 335 340 345 tgt ctc gtc cgg cta cca aag tcg cgc cca aag atg agt gag gtg tat 4398 Cys Leu Val Arg Leu Pro Lys Ser Arg Pro Lys Met Ser Glu Val Tyr 350 355 360 gag atg gtt cag aag att gtg gcc agc att gag acc ggc aca cca cag 4446 Glu Met Val Gln Lys Ile Val Ala Ser Ile Glu Thr Gly Thr Pro Gln 365 370 375 cct cct ctg cac tac cat ggg tcg gtt tct gaa ccg ggc tca aag cgg 4494 Pro Pro Leu His Tyr His Gly Ser Val Ser Glu Pro Gly Ser Lys Arg 380 385 390 cca aag aag ggg tca ctg aag aga agg ttc caa gaa ttc aaa ttc ggt 4542 Pro Lys Lys Gly Ser Leu Lys Arg Arg Phe Gln Glu Phe Lys Phe Gly 395 400 405 410 tgc cgg cag att gta tgg cgg ggc tgg aag cct gag atc ata aag act 4590 Cys Arg Gln Ile Val Trp Arg Gly Trp Lys Pro Glu Ile Ile Lys Thr 415 420 425 tgc tgagagaata cagtagcttc ctgcctgtaa gtatatagct aagttgttca 4643 Cys tagggataaa gctcttcttc ctctgtatgc ttcctgtcct tggggtgatc tgagcccatt 4703 tcgggcacac agttgagtac ttgagttgca gtgtgaagct ttttatctta tagggttctg 4763 tgtgatgcat cttgaggttg tagattccat gtgttttcag tataatccct gtggctttcc 4823 tcatcatgta atatagatct tgtttgtgca tatgaaagaa aaaaaaaaga tgagctttct 4883 tgtatgaaag aaaaggggat tggattgctg gggatgattc agattgaggc aagatgtgac 4943 ctgaatgatg gatttgccgc cggccaatcg gaatattgta gcttaactca acctcgattt 5003 cagaacgatc cgatggccgg cgttacatgc tagccat 5040 <210> 5 <211> 1810 <212> DNA <213> Oryza sativa <220> <221> CDS <222> (197)..(1477) <400> 5 gactgctgct tagcccaagt ccaagtcttt cttcctcctc cgacctcccc ccatctccat 60 ctccgtgctc atctgccttc ttctctcccc tttccccgtc gcttcctgcc tggatcgcac 120 acacaaagag atccctcgca ggcggagtgg tgcttcccct ctcggatcat cttcgcctct 180 gcaagattgg caagca atg agg tgc ctg cct ttc ttg cat gga gat tcc aaa 232 Met Arg Cys Leu Pro Phe Leu His Gly Asp Ser Lys 1 5 10 gag gag gat ccc gtc aac aag tcg gct tct gtc cgg tcg ttg agc aca 280 Glu Glu Asp Pro Val Asn Lys Ser Ala Ser Val Arg Ser Leu Ser Thr 15 20 25 aca tcg acg gag cgg gat gtc cgg tcc ggc tcc gac ttc aac tcc ttg 328 Thr Ser Thr Glu Arg Asp Val Arg Ser Gly Ser Asp Phe Asn Ser Leu 30 35 40 aac gtc tct gac atg agt gcc gaa tca ata cgg agg aca cag tat ccc 376 Asn Val Ser Asp Met Ser Ala Glu Ser Ile Arg Arg Thr Gln Tyr Pro 45 50 55 60 agc ttc act gat cgg ccc agt aac ctc agg gtg ttc tct ttc tct gag 424 Ser Phe Thr Asp Arg Pro Ser Asn Leu Arg Val Phe Ser Phe Ser Glu 65 70 75 ctg aag aat gcc act cgc aat ttt agc cgg tct ctt atg gtt ggt gag 472 Leu Lys Asn Ala Thr Arg Asn Phe Ser Arg Ser Leu Met Val Gly Glu 80 85 90 ggt ggg ttt gga tgt gtg tat agg ggt gtc atc aag aat tcc gat gaa 520 Gly Gly Phe Gly Cys Val Tyr Arg Gly Val Ile Lys Asn Ser Asp Glu 95 100 105 cca act gag cgc acc gag att gct gtt aaa cag ctg aat cgc aaa gga 568 Pro Thr Glu Arg Thr Glu Ile Ala Val Lys Gln Leu Asn Arg Lys Gly 110 115 120 ctt cag ggg cag aaa gaa tgg tta aca gaa ctg aat gtg ctt ggg att 616 Leu Gln Gly Gln Lys Glu Trp Leu Thr Glu Leu Asn Val Leu Gly Ile 125 130 135 140 gta gag cat cca aac ctc gtc aaa cta att ggc tac tgc gct gaa gat 664 Val Glu His Pro Asn Leu Val Lys Leu Ile Gly Tyr Cys Ala Glu Asp 145 150 155 gat gaa agg ggc gta cag cgt ctc cta gta tac gaa tac atg cct aat 712 Asp Glu Arg Gly Val Gln Arg Leu Leu Val Tyr Glu Tyr Met Pro Asn 160 165 170 gga agc gtg gat gat cac ttg tca agt agg tca aat tca act cta tca 760 Gly Ser Val Asp Asp His Leu Ser Ser Arg Ser Asn Ser Thr Leu Ser 175 180 185 tgg cca atg aga cta aaa gta gct ctg gac gct gct cgg gga ctg aag 808 Trp Pro Met Arg Leu Lys Val Ala Leu Asp Ala Ala Arg Gly Leu Lys 190 195 200 tat ctg cat gaa gag atg gaa ttt cag gtt atc ttc cgt gac cta aaa 856 Tyr Leu His Glu Glu Met Glu Phe Gln Val Ile Phe Arg Asp Leu Lys 205 210 215 220 aca tct aac att ctg tta gat gag aac tgg aat gca aag tta tct gac 904 Thr Ser Asn Ile Leu Leu Asp Glu Asn Trp Asn Ala Lys Leu Ser Asp 225 230 235 ttt gga ttg gct agg cat gga cca tca gaa ggc ctg acc cat gtc tct 952 Phe Gly Leu Ala Arg His Gly Pro Ser Glu Gly Leu Thr His Val Ser 240 245 250 aca gcg gtc gtg gga act ctt ggg tat gca gct ccg gag tac atg cag 1000 Thr Ala Val Val Gly Thr Leu Gly Tyr Ala Ala Pro Glu Tyr Met Gln 255 260 265 acc gga cgc ctc act gcc aag agt gac ata tgg ggc tat ggt gtg ctc 1048 Thr Gly Arg Leu Thr Ala Lys Ser Asp Ile Trp Gly Tyr Gly Val Leu 270 275 280 ctt tat gag ctc atc acc ggc cgc cgt ccc att gac cgg aac cgc cca 1096 Leu Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Arg Pro Ile Asp Arg Asn Arg Pro 285 290 295 300 aag ggt gag cag aag ctc ctg gat tgg gtg aaa cca tac ata tct gat 1144 Lys Gly Glu Gln Lys Leu Leu Asp Trp Val Lys Pro Tyr Ile Ser Asp 305 310 315 atc aag cgg ttc ccc atc atc ata gac cca cgg cta gag ggg cac tac 1192 Ile Lys Arg Phe Pro Ile Ile Ile Asp Pro Arg Leu Glu Gly His Tyr 320 325 330 aac ctc aag tcc atg aca aag ctg gct agt gtg gcg aac cgc tgt ctc 1240 Asn Leu Lys Ser Met Thr Lys Leu Ala Ser Val Ala Asn Arg Cys Leu 335 340 345 gtc cgg cta cca aag tcg cgc cca aag atg agt gag gtg tat gag atg 1288 Val Arg Leu Pro Lys Ser Arg Pro Lys Met Ser Glu Val Tyr Glu Met 350 355 360 gtt cag aag att gtg gcc agc att gag acc ggc aca cca cag cct cct 1336 Val Gln Lys Ile Val Ala Ser Ile Glu Thr Gly Thr Pro Gln Pro Pro 365 370 375 380 ctg cac tac cat ggg tcg gtt tct gaa ccg ggc tca aag cgg cca aag 1384 Leu His Tyr His Gly Ser Val Ser Glu Pro Gly Ser Lys Arg Pro Lys 385 390 395 aag ggg tca ctg aag aga agg ttc caa gaa ttc aaa ttc ggt tgc cgg 1432 Lys Gly Ser Leu Lys Arg Arg Phe Gln Glu Phe Lys Phe Gly Cys Arg 400 405 410 cag att gta tgg cgg ggc tgg aag cct gag atc ata aag act tgc 1477 Gln Ile Val Trp Arg Gly Trp Lys Pro Glu Ile Ile Lys Thr Cys 415 420 425 tgagagaata cagtagcttc ctgcctgtaa gtatatagct aagttgttca tagggataaa 1537 gctcttcttc ctctgtatgc ttcctgtcct tggggtgatc tgagcccatt tcgggcacac 1597 agttgagtac ttgagttgca gtgtgaagct ttttatctta tagggttctg tgtgatgcat 1657 cttgaggttg tagattccat gtgttttcag tataatccct gtggctttcc tcatcatgta 1717 atatagatct tgtttgtgca tatgaaagaa aaaaaaaaga tgagctttct tgtatgaaaa 1777 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa gaa 1810 <210> 6 <211> 427 <212> PRT <213> Oryza sativa

【００４８】 <400> 6 Met Arg Cys Leu Pro Phe Leu His Gly Asp Ser Lys Glu Glu Asp Pro 1 5 10 15 Val Asn Lys Ser Ala Ser Val Arg Ser Leu Ser Thr Thr Ser Thr Glu 20 25 30 Arg Asp Val Arg Ser Gly Ser Asp Phe Asn Ser Leu Asn Val Ser Asp 35 40 45 Met Ser Ala Glu Ser Ile Arg Arg Thr Gln Tyr Pro Ser Phe Thr Asp 50 55 60 Arg Pro Ser Asn Leu Arg Val Phe Ser Phe Ser Glu Leu Lys Asn Ala 65 70 75 80 Thr Arg Asn Phe Ser Arg Ser Leu Met Val Gly Glu Gly Gly Phe Gly 85 90 95 Cys Val Tyr Arg Gly Val Ile Lys Asn Ser Asp Glu Pro Thr Glu Arg 100 105 110 Thr Glu Ile Ala Val Lys Gln Leu Asn Arg Lys Gly Leu Gln Gly Gln 115 120 125 Lys Glu Trp Leu Thr Glu Leu Asn Val Leu Gly Ile Val Glu His Pro 130 135 140 Asn Leu Val Lys Leu Ile Gly Tyr Cys Ala Glu Asp Asp Glu Arg Gly 145 150 155 160 Val Gln Arg Leu Leu Val Tyr Glu Tyr Met Pro Asn Gly Ser Val Asp 165 170 175 Asp His Leu Ser Ser Arg Ser Asn Ser Thr Leu Ser Trp Pro Met Arg 180 185 190 Leu Lys Val Ala Leu Asp Ala Ala Arg Gly Leu Lys Tyr Leu His Glu 195 200 205 Glu Met Glu Phe Gln Val Ile Phe Arg Asp Leu Lys Thr Ser Asn Ile 210 215 220 Leu Leu Asp Glu Asn Trp Asn Ala Lys Leu Ser Asp Phe Gly Leu Ala 225 230 235 240 Arg His Gly Pro Ser Glu Gly Leu Thr His Val Ser Thr Ala Val Val 245 250 255 Gly Thr Leu Gly Tyr Ala Ala Pro Glu Tyr Met Gln Thr Gly Arg Leu 260 265 270 Thr Ala Lys Ser Asp Ile Trp Gly Tyr Gly Val Leu Leu Tyr Glu Leu 275 280 285 Ile Thr Gly Arg Arg Pro Ile Asp Arg Asn Arg Pro Lys Gly Glu Gln 290 295 300 Lys Leu Leu Asp Trp Val Lys Pro Tyr Ile Ser Asp Ile Lys Arg Phe 305 310 315 320 Pro Ile Ile Ile Asp Pro Arg Leu Glu Gly His Tyr Asn Leu Lys Ser 325 330 335 Met Thr Lys Leu Ala Ser Val Ala Asn Arg Cys Leu Val Arg Leu Pro 340 345 350 Lys Ser Arg Pro Lys Met Ser Glu Val Tyr Glu Met Val Gln Lys Ile 355 360 365 Val Ala Ser Ile Glu Thr Gly Thr Pro Gln Pro Pro Leu His Tyr His 370 375 380 Gly Ser Val Ser Glu Pro Gly Ser Lys Arg Pro Lys Lys Gly Ser Leu 385 390 395 400 Lys Arg Arg Phe Gln Glu Phe Lys Phe Gly Cys Arg Gln Ile Val Trp 405 410 415 Arg Gly Trp Lys Pro Glu Ile Ile Lys Thr Cys 420 425

【００４９】

【図面の簡単な説明】

【図１】いもち病抵抗性遺伝子Ｐｉ−ｂを持つイネの系
統である。下線が抵抗性品種であり、インドネシア産と
マレーシア産とに大別される。

【図２】イネいもち病Ｐｉ−ｂ近傍の核酸マーカーの遺
伝学的地図と、これらのマーカーによりイネのゲノムラ
イブラリーから選択されたＢＡＣクローンで構成された
遺伝子近傍のcontigによる物理的地図である。太線は、
遺伝学的に最終的に決定された遺伝子Ｐｉ−ｂの存在範
囲であるＢＡＣ１４５Ｇ７クローンの範囲を示す。

【図３】ＢＡＣを用いて作製したイネ（品種：シモキ
タ）のゲノムライブラリーのインサートＤＮＡのサイズ
の分布を示すグラフ図である。

【図４】イネの約１ゲノム分に相当する3,072個のＢＡ
Ｃライブラリーのクローンを整列転写した１枚のマイク
ロプレートサイズのナイロンメンブレンの状態を示す。
矢印は、プローブによるコロニーハイブリダイゼーショ
ンによって同定したＢＡＣクローンを示す。マトリクス
内に規則的に濃く見えているクローンはｐＢＲ３２２に
よるマーカーである。

【図５】大容量バイナリーベクターｐＢＩＧＲＺにより
作製されたＢＡＣ１４５Ｇ７のサブクローンによるパイ
ロットcontigの物理的地図の一部である。Ｐｉ−ｂ遺伝
子とそのホモログＰｉ−ｂ’の位置を示す。

【図６】図５に連続するパイロットcontigの物理的地図
である。

【図７】抵抗性品種ＢＬ−１由来のゲノムライブラリー
のサブクローンによるＢＡＣ１４５Ｇ７領域をカバーす
るcontigの物理的地図の一部である。抵抗性関連遺伝子
（Pto like Ser/Thr protein kinase）の位置を示す。

【図８】図７に連続するcontigの物理的地図である。

【図９】抵抗性遺伝子を含むクローンＮ７−１を導入さ
れた感受性イネ品種日本晴と、コントロールの日本晴に
おけるいもち病菌接種後の検定結果である。クローンＮ
７−１以外のｐＢＩＧＲＺクローンの導入による形質転
換体は全て日本晴と同程度の感受性を示した。

【図１０】この発明のイネいもち病抵抗性遺伝子の構造
を示す模式図である。

【図１１】この発明のイネいもち病抵抗性関連遺伝子の
構造を示す模式図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 中村 信吾 岩手県盛岡市下厨川字赤平４ ＲＣ２−16

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 配列番号１の塩基配列を有するイネいも
   ち病抵抗性遺伝子。
2. 【請求項２】 イネ品種ＢＬ−１から単離された遺伝子
   である請求項１のイネいもち病抵抗性遺伝子。
3. 【請求項３】 配列番号１の一部配列からなるＤＮＡ断
   片。
4. 【請求項４】 請求項１の遺伝子のｃＤＮＡであって、
   配列番号２の塩基配列を有するｃＤＮＡ。
5. 【請求項５】 配列番号２の部分配列からなるＤＮＡ断
   片。
6. 【請求項６】 請求項１の遺伝子を保有する組換えベク
   ター。
7. 【請求項７】 請求項３のＤＮＡ断片を保有する組換え
   ベクター。
8. 【請求項８】 請求項４のｃＤＮＡを保有する組換えベ
   クター。
9. 【請求項９】 請求項１の遺伝子をいもち病感受性イネ
   に導入することによって作出されたいもち病抵抗性イ
   ネ。
10. 【請求項１０】 請求項３のＤＮＡ断片をいもち病感受
    性イネに導入することによって作出されたいもち病抵抗
    性イネ。
11. 【請求項１１】 請求項４のｃＤＮＡをいもち病感受性
    イネに導入することによって作出されたいもち病抵抗性
    イネ。
12. 【請求項１２】 請求項１の遺伝子と他の遺伝子および
    ／または遺伝子制御配列とからなる融合遺伝子または組
    み合わせ遺伝子。
13. 【請求項１３】 請求項３のＤＮＡ断片と他の遺伝子お
    よび／または遺伝子制御配列とからなる融合遺伝子また
    は組み合わせ遺伝子。
14. 【請求項１４】 請求項４のｃＤＮＡと他の遺伝子およ
    び／または遺伝子制御配列とからなる融合遺伝子または
    組み合わせ遺伝子。
15. 【請求項１５】 配列番号１における１以上の塩基を人
    為的に欠失、置換もしくは付加した塩基配列からなる変
    異遺伝子。
16. 【請求項１６】 配列番号２における１以上の塩基を人
    為的に欠失、置換もしくは付加した塩基配列からなる変
    異ｃＤＮＡ。
17. 【請求項１７】 請求項１の遺伝子と他の遺伝子および
    ／または遺伝子制御配列を植物に導入することによって
    作出された遺伝子導入植物。
18. 【請求項１８】 請求項３のＤＮＡ断片と他の遺伝子お
    よび／または遺伝子制御配列を植物に導入することによ
    って作出された遺伝子導入植物。
19. 【請求項１９】 請求項４のｃＤＮＡと他の遺伝子およ
    び／または遺伝子制御配列を植物に導入することによっ
    て作出された遺伝子導入植物。
20. 【請求項２０】 請求項１２の融合遺伝子または組み合
    わせ遺伝子を植物に導入することによって作出された遺
    伝子導入植物。
21. 【請求項２１】 請求項１３の融合遺伝子または組み合
    わせ遺伝子を植物に導入することによって作出された遺
    伝子導入植物。
22. 【請求項２２】 請求項１４の融合遺伝子または組み合
    わせ遺伝子を植物に導入することによって作出された遺
    伝子導入植物。
23. 【請求項２３】 請求項１５の変異遺伝子を植物に導入
    することによって作出された遺伝子導入植物。
24. 【請求項２４】 請求項１６の変異ｃＤＮＡを植物に導
    入することによって作出された遺伝子導入植物。
25. 【請求項２５】 配列番号１の塩基配列との相同性に基
    づいて単離された遺伝子。
26. 【請求項２６】 請求項１の遺伝子が発現するタンパク
    質分子であって、配列番号３のアミノ酸配列を有するタ
    ンパク質分子。
27. 【請求項２７】 請求項２７のタンパク質分子と相互作
    用するタンパク質分子をコードする遺伝子。
28. 【請求項２８】 請求項１のイネいもち病抵抗性遺伝子
    の関連遺伝子であって、配列番号４の塩基配列を有する
    イネいもち病抵抗性関連遺伝子。
29. 【請求項２９】 請求項２８の遺伝子のｃＤＮＡであっ
    て、配列番号５の塩基配列を有するｃＤＮＡ。
30. 【請求項３０】 請求項２８の遺伝子の発現するタンパ
    ク質分子であって、配列番号６のアミノ酸配列を有する
    タンパク質分子。