JP2000053582A - 血管炎治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 トロンビンによるプロテインＣの活性化を促
進する作用を有し、かつ配列番号１の１９−１４０のア
ミノ酸配列を有しているペプチドを有効成分とする血管
炎治療剤。 【効果】 有効な血管炎治療剤が提供できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、トロンビンによるプロ
テインＣの活性化を促進する作用を有し、かつそのアミ
ノ酸配列中に配列番号１に記載のアミノ酸配列を有して
いるペプチドを有効成分とする血管炎治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】トロンビンと特異的に結合し、トロンビ
ンによるプロテインＣの活性化を著しく促進する作用を
有するペプチドは、トロンボモジュリンとして知られて
いる（以下、このペプチドをトロンボモジュリンと記す
ることがある）。一方、プロテインＣは、血液凝固線溶
系において重要な役割を演じているビタミンＫ依存性の
たん白質であり、トロンビンの作用により活性化され、
活性型プロテインＣとなる。この活性型プロテインＣ
は、生体内で血液凝固系因子の活性型第五因子、および
活性型第八因子を失活させ、また血栓溶解作用を有する
プラスミノーゲンアクチベーターの産生に関与している
ことが知られている［鈴木宏治、医学のあゆみ、第１２
５巻、９０１頁（１９８３年）］。

【０００３】したがって、トロンボモジュリンは、この
トロンビンによるプロテインＣの活性化を促進して抗血
液凝固作用と血栓溶解作用を示す活性型プロテインＣを
大量に生産せしめるものであり、抗血液凝固剤又は血栓
溶解剤として有用であるとされている。従来、トロンボ
モジュリンは、ヒトを始めとする種々の動物種の血管内
皮細胞上に発現している糖たん白質として発見取得され
たが、発明者らのグループは、初めてヒトトロンボモジ
ュリンのクローニングに成功した。即ち、遺伝子工学的
手法を用いてヒト肺ｃＤＮＡライブラリーから、シグナ
ルペプチドを含むヒトトロンボモジュリン前駆体の遺伝
子をクローニングし、そしてトロンボモジュリンの全遺
伝子配列を解析し、１８アミノ酸残基のシグナルペプチ
ドを含む５７５残基のアミノ酸配列が明らかにされてい
る［特開平１−６２１９号公報］。シグナルペプチドが
切断されたマチュアなトロンボモジュリンは、そのマチ
ュアなペプチドのＮ末端側よりＮ末端領域（１−２２６
番目）、６つのＥＧＦ様構造をもつ領域（２２７−４６
２番目）、Ｏ型糖鎖付加領域（４６３−４９８番目）、
膜貫通領域（４９９−５２１）、そして細胞質内領域
（５２２−５５７番目）の５つの領域から構成されてお
り、そして全長のトロンボモジュリンと同じ活性を有す
る部分（即ち、最小活性単位）は、６つのＥＧＦ様構造
をもつ領域のうちＮ末端側から４、５、６番目のＥＧＦ
様構造からなる部分（以下、ＴＭＥ４５６と略すことが
ある）であることが知られている［Ｍ．Ｚｕｓｈｉら、
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４６，１０３５１−１０
３５３（１９８９）］。

【０００４】少なくとも、膜貫通領域を含有しないよう
に調製されたトロンボモジュリンにおいては、界面活性
剤の非存在下でも綺麗に溶解することができる性質（以
下、可溶性ということがある）を有し、例えば、Ｎ末端
領域と６つのＥＧＦ様構造をもつ領域とＯ型糖鎖付加領
域の３つの領域からなる（即ち、配列番号２の１９〜５
１６位のアミノ酸配列からなる）トロンボモジュリン
（以下、ＴＭＤ１２３と略することがある）は、組換え
技術の応用により取得できること、そしてその組換え体
トロンボモジュリンは、天然のトロンボモジュリンの活
性を有していることが確認されている［特開平１−６２
１９号公報］。

【０００５】因みに、遺伝子においては、自然の変異ま
たは取得時の変異により、多くのケースで認められる通
り、ヒトにおいても多形性の変異が見つけられており、
上述の５７５残基のアミノ酸配列からなるヒトトロンボ
モジュリン前駆体の第４７３位のアミノ酸においてＶａ
ｌであるものと、Ａｌａであるものが現在確認されてい
る。このアミノ酸をコードする塩基配列においては、第
１４１８位において、それぞれＴとＣとの変異に相当す
る［Ｗｅｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２６：４３
５０−４３５７（１９８７）］。しかし、活性及び物性
においては、全く相違なく、両者は実質的に同一と考え
ることができる。したがって、上述の配列番号２のアミ
ノ酸配列からなるトロンボモジュリンは、配列番号３の
アミノ酸配列からなるトロンボモジュリンの多形性のペ
プチドであり、実質的に同一と判断できる。

【０００６】トロンボモジュリンは、従来血栓症および
ＤＩＣなどの凝固亢進を伴う疾患の治療、予防に有効で
あることが動物実験により証明されている［Ｋ．Ｇｏｍ
ｉら，Ｂｌｏｏｄ，７５：１３９６−１３９９（１９９
０）］。また、血栓症やＤＩＣなどの凝固亢進を伴う疾
患以外の疾患に対する適用として、肝臓障害［特開平８
−３０６５号広報］、吸収性骨疾患［特開平８−３０３
７８６号広報］、創傷治癒［特開平９−２０６７７号広
報］などが挙げられる。しかし、血管炎に効果のあるこ
とについては記載がない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】従来より、より有効な
血管炎治療剤の提供が求められていた。

【０００８】

【課題を解決するための手段】血管炎は、血管壁自体を
炎症の場とし、血管壁の炎症と壊死を主な病変とする疾
患であり、単一の疾患ではなく病因学的にも病態学的に
も多様な疾患群であり、必ずしも十分な治療法が確立さ
れていなかった。近年、血管炎は、宿主の免疫異常によ
る自己免疫を基盤とするＩＩ，ＩＩＩあるいはＩＶ型ア
レルギーにより発症すると考えられ、血管炎の分類とそ
れぞれの発症機序の関連性が示唆されている［宮崎龍彦
ら，臨床科学，３３：１４４１−１４４９（１９９
７）］。

【０００９】本発明における血管炎としては、代表的に
は、アレルギー性肉芽腫性血管炎、顕微鏡的多発動脈
炎、ベーチェット病、抗リン脂質抗体症候群、全身性エ
リテマトーデス等が挙げられ、その他に、高安動脈炎、
炎症性腹部大動脈瘤、側頭動脈炎、結節性多発動脈炎、
川崎病、Ｗｅｇｅｎｅｒ肉芽腫症、Ｃｈｕｒｇ−Ｓｔｒ
ａｕｓｓ症候群、過敏性血管炎、Ｓｃｈｏｎｌｅｉｎ−
Ｈｅｎｏｃｈ紫斑病などが例示される。

【００１０】これらの血管炎の治療には、ステロイドや
免疫抑制剤が優先的に用いられる。血管炎治療の主たる
薬剤であるステロイド剤は、病状が初期の場合や免疫抑
制剤を併用することによって病状が軽減され寛解するこ
とがある。しかし、ステロイド剤の投薬中止直後あるい
は一定期間後に病状が再燃することが多く、その場合ス
テロイド剤の大量投与や長期投与が行われるようにな
る。ステロイド剤の長期投与は、高脂血症や高血圧さら
に血管の線維化を惹起し、虚血性心疾患を生ずる例が増
加している［北本清，別冊 日本臨床，領域別症候群１
５：１８５−１８７（１９９３）］。また、免疫抑制剤
では、貧血、白血球および血小板減少や肝機能障害、感
染症などの副作用が報告されている。これらのことから
副作用を伴わずに血管炎を寛解させる薬剤が臨床現場で
必要とされている。

【００１１】本発明者らは血管炎の治療方法を鋭意種々
検討した結果、驚くべきことに、配列番号１の１９−１
４０のアミノ酸配列を含むトロンボモジュリンが、血管
炎の治療剤として有効であることを見出し、本発明を完
成するに至った。即ち、本発明は、トロンビンによるプ
ロテインＣの活性化を促進する作用を有し、かつ配列番
号１の１９−１４０のアミノ酸配列を有しているペプチ
ドを有効成分とする血管炎治療剤である。

【００１２】前述の通り、本発明でトロンボモジュリン
とは、トロンビンに結合し、トロンビンによるプロテイ
ンＣの活性化を促進する作用を有する物質であり、本発
明の血管炎治療剤として用いることのできるトロンボモ
ジュリンとしては、上記のトロンボモジュリンとしての
活性を有し、かつそのアミノ酸配列中に配列番号１の１
９−１４０のアミノ酸配列を有していれば特に限定され
ない。さらに好ましくは、可溶性トロンボモジュリンで
ある。可溶性トロンボモジュリンとしては、上記のトロ
ンボモジュリンとしての活性を有し、界面活性剤の非存
在下でも容易に溶解し得る物質であり、例えば、注射用
蒸留水に対して、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ、好ましくは
３ｍｇ／ｍｌの溶解性が得られるものが好ましい。

【００１３】また、トロンビンによるプロテインＣの活
性化を促進する作用を示すためには、例えば、ヒト型の
トロンボモジュリンにおいてこの作用の中心部位として
知られている配列番号８の１９−１３２のアミノ酸配列
を該ペプチド中に包含していることが好ましく、この配
列番号８の１９−１３２のアミノ酸配列は、トロンビン
によるプロテインＣの活性化を促進する作用を有する限
り自然または人工的に変異していてもよく、すなわち配
列番号８の１９−１３２のアミノ酸配列の１つまたは複
数のアミノ酸が置換、欠失、付加していても良い。許容
される変異の程度は、活性を有するか否かであり特に限
定されないが、例えばアミノ酸として５０％、好ましく
は７０％、特に好ましくは８０％、さらに好ましくは９
０％または９５％以上であることが例示される。後述の
通り、これらの変異については通常の遺伝子操作技術を
用いれば容易に取得可能である。配列番号１の１９−１
４０のアミノ酸配列のＣ末端に、上述の配列番号８の１
９−１３２のアミノ酸配列またはその変異したアミノ酸
配列が結合していることが好ましい。例えば、配列番号
１０の１９−２５４のアミノ酸配列、又は配列番号１２
の１９−２５４のアミノ酸配列が好ましい例として挙げ
られる。

【００１４】また、本発明に用いることのできるトロン
ボモジュリンとしては、例えば、配列番号３または配列
番号５のアミノ酸配列をコードするＤＮＡをベクターに
より宿主細胞にトランスフェクトして調製された形質転
換細胞により取得されるペプチドが挙げられる。この形
質転換細胞により取得されるペプチドとしては、配列番
号３の１９−５１６位のアミノ酸配列からなるペプチド
が好ましい例として挙げられる。その他に宿主細胞によ
っては、シグナル部分がそのままや、前記配列番号３の
１７−５１６位のアミノ酸配列からなるペプチド、又は
それらの混合物であってもよい。勿論これらのペプチド
は極めて溶解性が高いもので、前述の溶解性を十分に有
するものである。本発明において、上記の配列番号３お
よび配列番号５の１９−５１６位のアミノ酸配列からな
るペプチドは特に好ましい。またその他に、配列番号２
および配列番号３の２４５−４８０位のアミノ酸配列か
らなるペプチドも例示される。

【００１５】さらに、これらのペプチドは、前記のアミ
ノ酸配列を有すればよいのであって、糖鎖が付いていて
も、又付いていなくともよく、特に限定されるものでは
ない。また、宿主細胞の種類により、糖鎖の種類や、付
加位置や付加の程度は相違するものであり、いずれも用
いることができる。前述の通り、遺伝子操作により取得
することに特定されるものではないが、遺伝子操作によ
り取得する場合には、発現に際して用いることができる
シグナル配列としては、上述の配列番号８の１−１８の
アミノ酸配列からなる塩基配列や、配列番号８の１−１
６のアミノ酸配列からなる塩基配列、その他公知のシグ
ナル配列、例えば、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因
子（ｔＰＡ）のシグナル配列を利用することができる
（国際公開８８／９８１１号公報）。

【００１６】これらのペプチドを製造するに際して用い
ることのできる宿主細胞としては、チャイニーズハムス
ター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ−１細胞、ＣＯＳ−７
細胞、ＶＥＲＯ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−８１）細胞、ＢＨ
Ｋ細胞、イヌ腎由来ＭＤＣＫ細胞、ハムスターＡＶ−１
２−６６４細胞等が、またヒト由来細胞としてＨｅＬａ
細胞、ＷＩ３８細胞、ヒト２９３細胞等が挙げられる。
ＣＨＯ細胞においては、ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞がさらに
好ましい。

【００１７】また、遺伝子操作の過程やペプチドの製造
過程において、大腸菌等の微生物も多く使われ、それぞ
れに適した宿主−ベクター系を使用することが好まし
く、上述の宿主細胞においても、適宜のベクター系を選
択することができる。遺伝子組換え技術に用いるトロン
ボモジュリンの遺伝子は、クローニングされており、そ
してトロンボモジュリンの遺伝子組換え技術を用いた製
造例が開示されており、さらにはその精製品を得るため
の精製方法も知られている［特開平１−６２１９，特開
平２−２５５６９９，特開平５−２１３９９８，特開平
５−３１０７８７，特開平７−１５５１７６，Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４：１０３５１−１０３５３
（１９８９）］。したがって本発明のトロンボモジュリ
ンは、上記の報告に記載されている方法を用いることに
より、あるいはそれらに記載の方法に準じることにより
製造することができる。例えば特開平１−６２１９号で
は、全長のトロンボモジュリンをコードするＤＮＡを含
むプラスミドｐｓＶ２ＴＭＪ２を含む、Ｅｓｃｈｅｒｉ
ｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｋ−１２ ｓｔｒａｉｎ ＤＨ５
（ＡＴＣＣ 寄託番号６７２８３号）を開示している
が、出願人らは、再度、同じ菌株（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈ
ｉａ ｃｏｌｉ ＤＨ５／ｐｓＶ２ＴＭＪ２）を生命研
に寄託した（ＦＥＲＭ ＢＰ−５５７０）。この全長の
トロンボモジュリンをコードするＤＮＡを原料として、
公知の遺伝子操作技術によって、本発明のトロンボモジ
ュリンを調製することができる。

【００１８】本発明に用いられる可溶性トロンボモジュ
リンは、従来公知の方法またはそれに準じて調製すれば
よいが、例えば、前記山本らの方法［特開平１−６２１
９号実施例参照］、または特開平５−２１３９９８号公
報を参考にすることができる。すなわちヒト由来のトロ
ンボモジュリン遺伝子を遺伝子操作技術により、例え
ば、配列番号３のアミノ酸配列をコードするＤＮＡとな
し、さらに必要に応じた改変を行うことも可能である。
この改変としては、例えば、配列番号５のアミノ酸配列
をコードするＤＮＡとなすために、配列番号３のアミノ
酸配列の第４７３位のアミノ酸をコードするコドン（特
に、第１４１８位の塩基）に、メソッドイン エンザイ
モロジー［Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇ
ｙ，１００：４６８（１９８３年），アカデミックプレ
ス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）］に記載の方法に
従って、部位特異的変異を行う。例えば、配列番号４の
塩基配列を含むＤＮＡ断片および配列番号７に示された
塩基配列を有する変異用合成ＤＮＡを用い、上記部位特
異的変異を行い、配列番号５のアミノ酸配列をコードす
るＤＮＡ（具体的には、配列番号６の塩基配列よりな
る）となすことができる。このようにして、調製したＤ
ＮＡを、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）
細胞に組み込んで、形質転換細胞とし、適宜選択し、こ
の細胞を培養して得た培養液から、公知の方法により精
製された可溶性トロンボモジュリンが製造できる。前述
の通り配列番号３のアミノ酸配列をコードするＤＮＡを
前記宿主細胞にトランスフェクトすることが好ましい。
本発明に用いられるトロンボモジュリンの生産方法は、
上記の方法に限定されるものではなく、すなわち、尿や
血液、その他体液等から抽出精製することでも可能であ
るし、またトロンボモジュリンを生産する組織またはこ
れら組織培養液等から抽出精製することも、また必要に
よりさらに蛋白分解酵素により切断処理することも可能
である。

【００１９】次いで上記により取得された培養上清、ま
たは培養物からのトロンボモジュリンの単離精製方法
は、公知の手法［堀尾武一編集；蛋白質・酵素の基礎実
験法］に準じて行なうことができる。例えば、トロンボ
モジュリンと逆の電荷を持つ官能基を固定化したクロマ
トグラフィー担体と、トロンボモジュリンの間の相互作
用を利用したイオン交換クロマトグラフィーの使用も好
ましい。また、トロンボモジュリンとの特異的親和性を
利用したアフィニティークロマトグラフィーも好ましい
例として挙げられる。吸着体の好ましい例として、トロ
ンボモジュリンのリガンドであるトロンビンやトロンボ
モジュリンの抗体を利用する例が挙げられる。これらの
抗体としては、適宜の性質、或いは適宜のエピトープを
認識するトロンボモジュリンの抗体を利用することがで
き、例えば、特公平５−４２９２０号公報、特開昭６４
−４５３９８号公報、特開平６−２０５６９２号公報な
どに記載された例が挙げられる。また、トロンボモジュ
リンの分子量サイズを利用した、ゲル濾過クロマトグラ
フィーや限外濾過が挙げられる。そしてまた、疎水性基
を固定化したクロマトグラフィー担体と、トロンボモジ
ュリンのもつ疎水性部位との間の疎水結合を利用した疎
水性クロマトグラフィーが挙げられる。これらの手法は
適宜組み合わせることができる。精製の程度は、使用目
的等により選択できるが、例えば電気泳動、好ましくは
ＳＤＳ−ＰＡＧＥの結果が単一バンドとして得られる
か、もしくは単離精製品のゲル濾過ＨＰＬＣまたは逆相
ＨＰＬＣの結果が単一のピークになるまで純粋化するこ
とが望ましい。

【００２０】精製法を具体的に例示すれば、トロンボモ
ジュリン活性を指標に精製する方法が挙げられ、例えば
イオン交換カラムのＱ−セファロースＦＦで培養上清ま
たは培養物を粗精製しトロンボモジュリン活性を有する
画分を回収し、ついでアフィニティーカラムのＤＩＰ−
ＴＢ（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｔ
ｈｒｏｍｂｉｎ ａｇａｒｏｓｅ）で主精製しトロンボ
モジュリン活性が強い画分を回収し、回収画分を濃縮
し、ゲルろ過にかけトロンボモジュリン活性画分を純品
として取得する精製方法［五味ら；Ｂｌｏｏｄ、７５、
１３９６−１３９９、１９９０］が挙げられる。指標と
するトロンボモジュリン活性としては、例えばトロンビ
ンによるプロテインＣ活性化の促進活性が挙げられる。
その他に、好ましい精製法を例示すると以下の通りであ
る。

【００２１】トロンボモジュリンと良好な吸着条件を有
する適当なイオン交換樹脂を選定し、イオン交換クロマ
ト精製を行なう。特に好ましい例としては、０．１８Ｍ
ＮａＣｌを含む０．０２Ｍトリス塩緩衝液（ｐＨ７．
４）で平衡化したＱ−セファロースＦＦを用いる方法で
ある。適宜洗浄後、例えば０．３Ｍ ＮａＣｌ含む０．
０２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶出し粗精製
品のトロンボモジュリンを得ることができる。

【００２２】次に、例えばトロンボモジュリンと特異的
親和性を持つ物質を樹脂に固定化しアフィニティークロ
マト精製を行なうことができる。好ましい例としてＤＩ
Ｐ−トロンビン−アガロースカラムの例と、抗トロンボ
モジュリンモノクローナル抗体カラムの例が挙げられ
る。ＤＩＰ−トロンビン−アガロースカラムは、予め、
例えば、１００ｍＭ ＮａＣｌおよび０．５ｍＭ塩化カ
ルシウムを含む２０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ７．４）で
平衡化せしめ、上記の粗精製品をチャージして、適宜の
洗浄を行い、例えば、１．０Ｍ ＮａＣｌ及び０．５ｍ
Ｍ塩化カルシウムを含む２０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ
７．４）で溶出し精製品のトロンボモジュリンを取得す
ることができる。また抗トロンボモジュリンモノクロー
ナル抗体カラムにおいては、予めＣＮＢｒにより活性化
したセファロース４Ｂ（ファルマシア社）に、抗トロン
ボモジュリンモノクローナル抗体を溶解した０．５ＭＮ
ａＣｌ含有０．１ＭＮａＨＣＯ３緩衝液（ｐＨ８．３）
に接触させ、セファロース４Ｂに抗トロンボモジュリン
モノクローナル抗体をカップリングさせた樹脂を充填し
たカラムを、予め例えば１．０Ｍ ＮａＣｌ含む２０ｍ
Ｍリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．３）で平衡化し、適宜の洗
浄の後、例えば、０．３Ｍ ＮａＣｌ含む１００ｍＭグ
リシン塩酸緩衝液（ｐＨ３．０）にて溶出せしめる方法
が例示される。溶出液は適当な緩衝液で中和し、高純度
精製品として取得することもできる。これらは、限外濾
過により濃縮することが好ましい。

【００２３】さらに、ゲル濾過による緩衝液交換を行な
うことも好ましい。例えば、５０ｍＭ ＮａＣｌを含む
２０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．３）で平衡化せしめ
たＳｅｐａｈｃｒｙｌ Ｓ−３００カラムもしくはＳ−
２００カラムに、限外濾過により濃縮した高純度精製品
をチャージし、５０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭリン
酸塩緩衝液（ｐＨ７．３）で展開分画し、トロンビンに
よるプロテインＣの活性化の促進活性の確認を行ない活
性画分を回収し緩衝液交換した高純度精製品を取得する
ことができる。

【００２４】かくして取得された精製された可溶性トロ
ンボモジュリンを、塩化水銀を投与して白血球破壊性血
管炎を発症させたＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットに投
与したところ、腸に対する障害を抑制し、さらに抗好中
球細胞質抗体（以下、ＡＮＣＡと略することがある）の
１つである抗ミエロパーオキダーゼ抗体（以下、ＭＰＯ
−ＡＮＣＡと略することがある）の増加を抑制した。

【００２５】近年、ＡＮＣＡの血管炎における病因的意
義が示唆されている。ＡＮＣＡには、プロテイナーゼ−
３を対応抗原とし、細胞質がびまん性に染色されるｃｙ
ｔｏｐｌａｓｍｉｃ ＡＮＣＡ（以下、ｃ−ＡＮＣＡと
略することがある）とミエロパーオキシダーゼを対応抗
原とし、核の周辺のみが染色されるｐｅｒｉｎｕｃｌｅ
ａｒ ＡＮＣＡ（以下、ｐ−ＡＮＣＡと略することがあ
る）の２つのサブタイプに分類されている。

【００２６】ｃ−ＡＮＣＡは、Ｗｅｇｅｎｅｒ肉芽腫症
の病因に関わっているとともに、ｃ−ＡＮＣＡの検出が
診断に有用であることが知られている［矢野哲朗ら，臨
床科学，３３，１３９５−１４０４（１９９７）］。一
方、ｐ−ＡＮＣＡは、顕微鏡的多発動脈炎、壊死性半月
体形成性腎炎、アレルギー性肉芽腫性血管炎、悪性リウ
マチ、血管ベーチェット病、白血球破壊性皮膚血管炎に
おいて高頻度に陽性となることが知られている［宮崎龍
彦ら，臨床科学，３３，１４４１−１４４９（１９９
７）］。

【００２７】ｐ−ＡＮＣＡのうち、ミエロパーオキシダ
ーゼ（以下、ＭＰＯと略することがある）を抗原とする
ＭＰＯ−ＡＮＣＡは、特に顕微鏡的多発動脈炎で高率に
検出されており、同抗体の早期診断の必要性と疾患活動
の指標としての有用性が確立している。さらに、顕微鏡
的多発動脈炎では、腹部臓器における血管炎が観察さ
れ、しばしば重篤であることが報告されている［竹内健
ら，臨床科学，３３，１３８８−１３９４（１９９
７）］。

【００２８】塩化水銀を投与したＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗ
ａｙラットは、ポリクローナルにＢ細胞が活性化される
ため、抗糸球体基底膜抗体、抗ＤＮＡ抗体を産生する自
己免疫病モデルとして知られていた。最近、塩化水銀を
投与したＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットは、腸管など
腹部臓器で壊死性血管炎を発症し、さらに血管炎で高率
に検出されるｐ−ＡＮＣＡを産生することが報告された
［Ｖ．Ｌ．Ｍ．Ｅｓｎａｕｌｔら，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓ
ｔ．，６７，１１４−１２０（１９９２）］。従って、
本モデルは、壊死性血管炎に分類される顕微鏡的多発動
脈炎やアレルギー性肉芽腫性血管炎の病態を示している
といえる。

【００２９】さらに、可溶性トロンボモジュリンをＭＲ
Ｌ／ｌｐｒマウスに投与したところ、血管炎の指標とな
る尿蛋白および抗二本鎖ＤＮＡ（以下、抗ｄｓ−ＤＮＡ
と略することがある）抗体価の上昇を有意に抑制した。
ＭＲＬ／ｌｐｒマウスは、遺伝的な欠損によりヒトの全
身性エリテマトーデスに類似した病態像を自然発症す
る。その病態像は、ＣＤ４＋ Ｔ細胞とＭａｃ−２＋活
性化マクロファージの病変局所への集簇を特徴とする肉
芽腫性動脈炎であり、マクロファージの浸潤に伴う外弾
性板の破壊と中膜変性が観察される。その結果、局所に
抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体などの免疫複合体が沈着し、免疫複
合体型腎炎を発症する［伊藤美津子ら，日本臨床，５
２，２４−２８（１９９４）］。ＭＲＬ／ｌｐｒが示す
蛋白尿および抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体陽性は、全身性エリテ
マトーデスの分類基準［Ｅ．Ｍ．Ｔａｎら，Ａｒｔｈｒ
ｉｔｉｓ． Ｒｈｅｕｍ．，２５，１２７１−１２７７
（１９８２）］に挙げられていることから、ＭＲＬ／ｌ
ｐｒマウスが全身性エリテマトーデスを発症するモデル
動物であるといえる。

【００３０】これらのモデル動物に対する効果から、本
発明の改善剤は血管炎の治療剤として有用であることが
確認された。本発明の血管炎治療剤を製造するに際して
は、有効量のトロンボモジュリンを医薬上許容される担
体と混合する公知の方法により調製すればよい。担体と
しては、水溶性の担体が好ましく、例えば、ショ糖、グ
リセリン等や、その他の無機塩のｐＨ調整剤等を添加剤
として加えて調製することができる。さらに必要に応じ
て、特開平６−３２１８０５号公報、特開平１−６２１
９号公報等に開示される通り、アミノ酸、塩類、糖質、
界面活性剤、アルブミン、ゼラチン等を添加しても良い
し、また、防腐剤を添加することも好ましく、例えば、
パラ安息香酸エステル類が好ましい例として挙げられ、
パラ安息香酸メチルが特に好ましい例として挙げられ
る。防腐剤の添加量は、通常０．０１〜１．０％が例示
され、好ましくは０．１〜０．３％が挙げられる。

【００３１】これらの添加方法は特に限定されないが、
凍結乾燥とする場合には、通常予想される通り、例え
ば、添加物を直接トロンボモジュリン含有溶液に添加し
たり、またはあらかじめ添加物を水、注射用蒸留水ある
いは適当な緩衝液に溶解して互いに添加混合する方法に
て溶液を調製し、凍結乾燥する方法が挙げられる。本発
明の血管炎治療剤としては、注射液の形態で提供されて
も、また凍結乾燥製剤を使用時に溶解して使用する形態
で提供されてもよい。

【００３２】また、例えば製剤化工程においては、アン
プルまたはバイアルに、水、注射用蒸留水あるいは適当
な緩衝液１ｍｌあたり０．０５〜１５ｍｇ、好適には
０．１〜５ｍｇのトロンボモジュリン及び上記添加物を
含有する溶液を、例えば０．５〜１０ｍｌ充填し、凍結
乾燥するか、またはそのままに水溶液注射用製剤として
調製できる。このような製剤は、例えば１日１〜３回投
与として０．０１〜１００ｍｇ含有した注射用水溶液と
して得ればよい。

【００３３】本発明の血管炎治療剤は、非経口投与法、
例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与などによって
投与することが望ましい。また経口投与、直腸内投与、
鼻内投与、舌下投与なども可能である。本発明の血管炎
治療剤の投与量は、患者の年齢、体重、疾患の程度、投
与経路などによっても異なるが、一般的に０．００１〜
２０ｍｇ／ｋｇの範囲であり、一日あたり一回または必
要に応じて数回投与する。投与間隔は、２日に１回、３
日に１回とすることも可能である。

【００３４】このトロンボモジュリンの急性毒性を調べ
たところ、各群５匹の雌雄ＳＤラットを用いて、トロン
ボモジュリン量として１８０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内
投与しても死亡例は１例も見られなかった。

【００３５】

【実施例】以下、実施例および参考例により本発明を具
体的に説明するが、本発明は何らこれらによって限定さ
れるものではない。

【００３６】

【参考例１】本実施例で用いる可溶性トロンボモジュリ
ンの生産 実施例に用いる可溶性トロンボモジュリンは、前記山本
らの方法（特開平１−６２１９号の実施例１０に記載の
方法）に従って行った。すなわち配列番号３のアミノ酸
配列をコードするＤＮＡ（具体的には、配列番号４の塩
基配列よりなる）を、チャイニーズハムスター卵巣（Ｃ
ＨＯ）細胞にトランスフェクションして、この形質転換
細胞の培養液より定法の精製法にて、精製された可溶性
トロンボモジュリンＴＭＤ１２３を取得した。同様に、
配列番号１のアミノ酸配列をコードするＤＮＡ（具体的
には、配列番号２の塩基配列よりなる）を用いることに
より配列番号１の１９−１２２のアミノ酸を少なくとも
有するペプチド（以下、ＴＭＥ１２３と略すことがあ
る）を取得した。同様に、配列番号８のアミノ酸配列を
コードするＤＮＡ（具体的には、配列番号９の塩基配列
よりなる）を用いることにより、配列番号８のアミノ酸
配列の１９−１３２のアミノ酸を少なくとも有するペプ
チド（以下、ＴＭＥ４５６と略することがある）を、さ
らに配列番号１のアミノ酸配列のＣ末端に配列番号８の
１９−１３２のアミノ酸を結合したペプチド（具体的に
は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる）をコードす
るＤＮＡ（具体的には、配列番号１１の塩基配列よりな
る）を用いて配列番号１０のアミノ酸配列の１９−２５
４のアミノ酸を少なくとも有するペプチド（以下、ＴＭ
Ｄ２と略することがある）を取得した。

【００３７】また、配列番号１１の塩基配列を含むＤＮ
Ａ断片および配列番号７に示された塩基配列を有する変
異用合成ＤＮＡを用いて前述の部位特異的変異を行い、
配列番号１２のアミノ酸配列をコードするＤＮＡ（具体
的には、配列番号１３の塩基配列よりなる）を取得し
た。このＤＮＡ配列をＣＨＯ細胞にトランスフェクショ
ンし、上述の方法にて配列番号１２のアミノ酸配列の１
９−２５４のアミノ酸を少なくとも有するペプチド（以
下、ＴＭＤ２Ｍと略すことがある）を取得した。

【００３８】

【実施例１】塩化水銀投与Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラ
ットにおける効果 １０週齢のＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット（Ｃｈａｒ
ｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）を７群に分け、第１群には生理食
塩水、第２群には１ｍｇ／ｍｌのＴＭＤ１２３、第３群
には２．５ｍｇ／ｍｌのＴＭＥ１２３、第４群には２．
５ｍｇ／ｍｌのＴＭＥ４５６、第５群には５ｍｇ／ｍｌ
のＴＭＤ２、第６群には５ｍｇ／ｍｌのＴＭＤ２Ｍ投与
群とした。ＴＭＤ１２３は１週間に１回、それ以外の可
溶性トロンボモジュリンは１日に１回の皮下投与とし、
それぞれ１回あたり２ｍｌ／ｋｇの用量で２週間投与し
た。さらに第１群、第２群、第３群、第４群、第５群お
よび第６群は、塩化水銀［ＨｇＣｌ２］（和光純薬工業
製）を１ｍｇ／ｍｌとなるように蒸留水で調製した溶液
を、１回あたり１ｍｇ／ｋｇの用量で薬物投与開始日か
ら２日に１回、２週間皮下投与した。第７群は無処置コ
ントロール群とした。

【００３９】塩化水銀溶液の投与を開始してから１４日
後、塩化水銀投与による白血球破壊性血管炎に対するＴ
Ｍの効果を病理組織学的検査により検討した。すなわ
ち、投与翌日に摘出した小腸および大腸を１０％ホルマ
リン溶液で固定した後、常法に従いパラフィン包埋、薄
切、ヘマトキシリン・エオジン染色後検鏡した。Ｑａｓ
ｉｍら［Ｆ．Ｊ．Ｑａｓｉｍら，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓ
ｔ．，７２，１８３−１９０（１９９５）］による、塩
化水銀投与Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットの消化管組
織における血管炎の分類に従い、５段階［ｓｃｏｒｅ
０：正常、ｓｃｏｒｅ１：血管周辺への好中球の浸潤、
ｓｃｏｒｅ２：軽度の血管炎、ｓｃｏｒｅ３：壊死性血
管炎、ｓｃｏｒｅ４：白血球破壊性血管炎］に評価し
た。各個体の小腸および大腸における血管炎のｓｃｏｒ
ｅを合計し、各群で比較した。

【００４０】また、臓器摘出直前に採血を行い、血清中
のＭＰＯ−ＡＮＣＡ抗体価をＥＬＩＳＡ法［Ｆ．Ｊ．Ｑ
ａｓｉｍら，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．，７２，１８３−
１９０（１９９５）］に準じて測定した。９６穴プレー
ト（Ｎｕｎｃ製）に、０．１Ｍほう酸緩衝液（ｐＨ８．
５）を用いて５μｇ／ｍｌとなるように溶解して調製し
たＭＰＯ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ製）を０．０５ｍｌず
つ各ウェルに加え、４℃で一晩放置してコーティングし
た。Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｂｕ
ｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ（以下、ＰＢＳと略するこ
とがある）（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ製）にＴｗｅｅｎ２０
（Ｓｉｇｍａ製）を０．１％含む溶液で洗浄後、ウシ胎
児血清アルブミン（以下、ＢＳＡと略することがある）
を２％含むＰＢＳを０．１ｍｌずつ各ウェルに加え、３
７℃で２時間放置してさらにコーティングした。０．１
％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、０．１％Ｔｗ
ｅｅｎ２０および１％ＢＳＡを含むＰＢＳで２０倍に希
釈した各群のラット血清を０．０５ｍｌずつ加え、３７
℃で２時間放置することにより血清中の抗ＭＰＯ抗体を
結合させた。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗
浄後、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで希釈した
アルカリフォスファターゼ標識ヒツジ抗ラットイムノグ
ロブリン抗体（ベーリンガー・マンハイム製）を０．１
ｍｌずつ加え、３７℃で２時間放置した。０．１％Ｔｗ
ｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、ｐ−Ｎｉｔｒｏｐｈ
ｅｎｙｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ｐＮＰＰ） Ｌｉｑｕ
ｉｄＳｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｓｉｇｍａ
製）を０．１ｍｌずつ各ウェルに加えて３７℃で保温し
た。０．０５ｍｌの３Ｎ水酸化ナトリウム溶液を加えて
発色反応を停止させた後、マイクロプレートリーダー
（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ製）で４０５ｎｍ
の吸光度を測定し、血清無添加のウェルで得られた吸光
度をバックグラウンドとして差し引いた値をＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡ抗体価とした。

【００４１】結果は表１に示される通り、ＴＭＤ１２３
投与群、ＴＭＤ２投与群およびＴＭＤ２Ｍ投与群では血
管炎ｓｃｏｒｅの有意な改善が認められた。ＴＭＥ４５
６投与群では血管炎ｓｃｏｒｅの改善傾向が観察された
が有意なものではなく、ＴＭＥ１２３投与群は、生理食
塩水投与群と差がなかった。また、表２に示される通
り、塩化水銀の投与によりＭＰＯ−ＡＮＣＡ産生が認め
られるが、ＴＭＤ１２３投与群、ＴＭＤ２投与群および
ＴＭＤ２Ｍ投与群におけるＭＰＯ−ＡＮＣ抗体価は、生
理食塩水投与群と比較して有意に抑制された。ＴＭＥ４
５６投与群およびＴＭＥ１２３投与群ではＭＰＯ−ＡＮ
ＣＡ抗体価の抑制効果は観察されなかった。プロテイン
Ｃ活性化を促進するトロンボモジュリンとしての活性を
有するＴＭＥ４５６に配列番号１のアミノ酸配列を付加
することにより、消化管組織における血管炎ｓｃｏｒｅ
の上昇を有意に抑制しことから、本発明の改善剤が血管
炎の治療剤として有用であることが確認された。また、
本モデルは、上述の通りｐ−ＡＮＣＡが高値を示すアレ
ルギー性肉芽腫性血管炎および顕微鏡的多発動脈炎のモ
デルと考えることもできるため、ＴＭがアレルギー性肉
芽腫性血管炎、顕微鏡的多発動脈炎に対する治療剤とし
て有用であることを明示するものである。

【００４２】

【実施例２】ＭＲＬ−１／ｌｐｒマウスにおける効果 ６週齢の雌性ＭＲＬ−１／ｌｐｒマウス（日本ＳＬＣ）
を７群に分け、第１群には生理食塩水、第２群には０．
２ｍｇ／ｍｌのＴＭＤ１２３、第３群には０．５ｍｇ／
ｍｌのＴＭＥ１２３、第４群には０．５ｍｇ／ｍｌのＴ
ＭＥ４５６、第５群には１ｍｇ／ｍｌのＴＭＤ２、第６
群には１ｍｇ／ｍｌのＴＭＤ２Ｍ投与群とした。ＴＭＤ
１２３は１週間に１回、それ以外の可溶性トロンボモジ
ュリンは１日に１回の皮下投与とし、それぞれ１回あた
り１０ｍｌ／ｋｇの用量で１４週間投与した。第７群は
無処置コントロール群とした。

【００４３】薬物投与開始１４週間後に採尿を行い、尿
中の蛋白量をエームス尿検査試験紙（Ｎ−マルティステ
ィックスＳＧ−Ｌ，バイエル・三共製）を用いて測定し
た。試験紙の呈色を添付の比色表と比較することによ
り、グレード０（検出限界以下），１（−３０ｍｇ／ｄ
ｌ），２（３０−１００ｍｇ／ｄｌ），３（１００−３
００ｍｇ／ｄｌ），４（３００−１０００mg／ｄｌ），
５（１０００ｍｇ／ｄｌ以上）の６段階で評価し、グレ
ード２以上を陽性と判定した。

【００４４】また薬物投与開始時と１４週間後に採血を
行い、血清中の抗ｄｓＤＮＡ抗体価をＥＬＩＳＡ法
［Ｚ．Ａｍｏｕｒａら，Ａｒｔｈｒｉｓ．Ｒｈｅｕ
ｍ．，３７巻，１６８４ー１６８８頁，１９９４年］を
用いて測定した。ポリ−Ｌ−リジンプレコート９６穴プ
レート（セルタイトＰＬ，住友ベークライト製）に、Ｐ
ＢＳを用いて３．７５ｕｇ／ｍｌとなるように溶解して
調製したラムダファージ二本鎖ＤＮＡ（Ｓｉｇｍａ製）
を０．１ｍｌずつ各ウェルに加え、３７℃で２時間放置
後、４℃で一晩放置してコーティングした。０．１％Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、ウシ胎児血清を１
０％含むＰＢＳを０．１ｍｌずつ各ウェルに加え、３７
℃で２時間放置してさらにコーティングした。０．１％
Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、０．１％Ｔｗｅ
ｅｎ２０を含むＰＢＳで１００倍に希釈した各群のマウ
ス血清を０．１ｍｌずつ加え、３７℃で２時間放置する
ことにより血清中の抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体を結合させた。
０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、０．１
％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで１００倍に希釈したペ
ルオキシダーゼ標識ヤギ抗ｇａｍｍａ抗血清（Ｓｉｇｍ
ａ製）を０．１ｍｌずつ加え、３７℃で２時間放置し
た。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで洗浄後、Ａ
ＴＢＳ緩衝液（ベーリンガー・マンハイム製）で１ｍｇ
／ｍｌとなるようにＡＴＢＳタブレット（ベーリンガー
・マンハイム製）を溶解して調製した発色溶液を０．１
ｍｌずつ各ウェルに加えて３７℃で保温した。０．０５
ｍｌの０．０５％アジ化ナトリウム溶液を加えて発色反
応を停止させた後、マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ製）で４０５ｎｍの吸光度
を測定し、血清無添加のウェルで得られた吸光度をバッ
クグラウンドとして差し引いた値を抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体
価とした。

【００４５】結果は表３に示される通り、ＴＭＤ１２３
投与群、ＴＭＤ２投与群およびＴＭＤ２Ｍ投与群では尿
蛋白量が有意に減少した。ＴＭＥ４５６投与群では尿蛋
白量の減少傾向が観察されたが有意なものではなく、Ｔ
ＭＥ１２３投与群では尿蛋白量の減少は観察されなかっ
た。また、表４に示される通り、ＭＲＬ／ｌｐｒマウス
は、抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体の産生が認められるが、ＴＭＤ
１２３投与群、ＴＭＤ２投与群およびＴＭＤ２Ｍ投与群
における抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体価は、有意に抑制された。
ＴＭＥ４５６投与群およびＴＭＥ１２３投与群では抗ｄ
ｓ−ＤＮＡ抗体価の抑制効果は観察されなかった。プロ
テインＣ活性化を促進するトロンボモジュリンとしての
活性を有するＴＭＥ４５６に配列番号１のアミノ酸配列
を付加することにより、血管炎の指標となる尿蛋白およ
び抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体価の上昇を有意に抑制しことか
ら、本発明の改善剤が血管炎の治療剤として有用である
ことが確認された。また、本モデルは、前述の通り全身
性エリテマトーデスのモデルと考えることもできるた
め、ＴＭが全身性エリテマトーデスに対する治療剤とし
て有用であることも明示するものである。

【００４６】

【表１】

【００４７】

【表２】

【００４８】

【表３】

【００４９】

【表４】

【００５０】

【発明の効果】本発明によれば、血管炎に対する有用な
治療剤が提供できる。

【００５１】

【配列表】 <110> 旭化成工業株式会社 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha <120> 血管炎治療剤 Kekkan-enchiryozai <130> X10-00908 <160> 13 <210> 1 <211> 140 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 1 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Cys Ser Val Glu Asn Gly Gly Cys Glu His Ala Cys Asn Ala 20 25 30 Ile Pro Gly Ala Pro Arg Cys Gln Cys Pro Ala Gly Ala Ala Leu Gln 35 40 45 Ala Asp Gly Arg Ser Cys Thr Ala Ser Ala Thr Gln Ser Cys Asn Asp 50 55 60 Leu Cys Glu His Phe Cys Val Pro Asn Pro Asp Gln Pro Gly Ser Tyr 65 70 75 80 Ser Cys Met Cys Glu Thr Gly Tyr Arg Leu Ala Ala Asp Gln His Arg 85 90 95 Cys Glu Asp Val Asp Asp Cys Ile Leu Glu Pro Ser Pro Cys Pro Gln 100 105 110 Arg Cys Val Asn Thr Gln Gly Gly Phe Glu Cys His Cys Tyr Pro Asn 115 120 125 Tyr Asp Leu Val Asp Gly Glu Cys Val Glu Pro Val 130 135 140 <210> 2 <211> 420 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 2 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt cccctgcagc 60 gtggagaacg gcggctgcga gcacgcgtgc aatgcgatcc ctggggctcc ccgctgccag 120 tgcccagccg gcgccgccct gcaggcagac gggcgctcct gcaccgcatc cgcgacgcag 180 tcctgcaacg acctctgcga gcacttctgc gttcccaacc ccgaccagcc gggctcctac 240 tcgtgcatgt gcgagaccgg ctaccggctg gcggccgacc aacaccggtg cgaggacgtg 300 gatgactgca tactggagcc cagtccgtgt ccgcagcgct gtgtcaacac acagggtggc 360 ttcgagtgcc actgctaccc taactacgac ctggtggacg gcgagtgtgt ggagcccgtg 420

【００５２】 <210> 3 <211> 516 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 3 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Ala Pro Ala Glu Pro Gln Pro Gly Gly Ser Gln Cys Val Glu 20 25 30 His Asp Cys Phe Ala Leu Tyr Pro Gly Pro Ala Thr Phe Leu Asn Ala 35 40 45 Ser Gln Ile Cys Asp Gly Leu Arg Gly His Leu Met Thr Val Arg Ser 50 55 60 Ser Val Ala Ala Asp Val Ile Ser Leu Leu Leu Asn Gly Asp Gly Gly 65 70 75 80 Val Gly Arg Arg Arg Leu Trp Ile Gly Leu Gln Leu Pro Pro Gly Cys 85 90 95 Gly Asp Pro Lys Arg Leu Gly Pro Leu Arg Gly Phe Gln Trp Val Thr 100 105 110 Gly Asp Asn Asn Thr Ser Tyr Ser Arg Trp Ala Arg Leu Asp Leu Asn 115 120 125 Gly Ala Pro Leu Cys Gly Pro Leu Cys Val Ala Val Ser Ala Ala Glu 130 135 140 Ala Thr Val Pro Ser Glu Pro Ile Trp Glu Glu Gln Gln Cys Glu Val 145 150 155 160 Lys Ala Asp Gly Phe Leu Cys Glu Phe His Phe Pro Ala Thr Cys Arg 165 170 175 Pro Leu Ala Val Glu Pro Gly Ala Ala Ala Ala Ala Val Ser Ile Thr 180 185 190 Tyr Gly Thr Pro Phe Ala Ala Arg Gly Ala Asp Phe Gln Ala Leu Pro 195 200 205 Val Gly Ser Ser Ala Ala Val Ala Pro Leu Gly Leu Gln Leu Met Cys 210 215 220 Thr Ala Pro Pro Gly Ala Val Gln Gly His Trp Ala Arg Glu Ala Pro 225 230 235 240 Gly Ala Trp Asp Cys Ser Val Glu Asn Gly Gly Cys Glu His Ala Cys 245 250 255 Asn Ala Ile Pro Gly Ala Pro Arg Cys Gln Cys Pro Ala Gly Ala Ala 260 265 270 Leu Gln Ala Asp Gly Arg Ser Cys Thr Ala Ser Ala Thr Gln Ser Cys 275 280 285 Asn Asp Leu Cys Glu His Phe Cys Val Pro Asn Pro Asp Gln Pro Gly 290 295 300 Ser Tyr Ser Cys Met Cys Glu Thr Gly Tyr Arg Leu Ala Ala Asp Gln 305 310 315 320 His Arg Cys Glu Asp Val Asp Asp Cys Ile Leu Glu Pro Ser Pro Cys 325 330 335 Pro Gln Arg Cys Val Asn Thr Gln Gly Gly Phe Glu Cys His Cys Tyr 340 345 350 Pro Asn Tyr Asp Leu Val Asp Gly Glu Cys Val Glu Pro Val Asp Pro 355 360 365 Cys Phe Arg Ala Asn Cys Glu Tyr Gln Cys Gln Pro Leu Asn Gln Thr 370 375 380 Ser Tyr Leu Cys Val Cys Ala Glu Gly Phe Ala Pro Ile Pro His Glu 385 390 395 400 Pro His Arg Cys Gln Met Phe Cys Asn Gln Thr Ala Cys Pro Ala Asp 405 410 415 Cys Asp Pro Asn Thr Gln Ala Ser Cys Glu Cys Pro Glu Gly Tyr Ile 420 425 430 Leu Asp Asp Gly Phe Ile Cys Thr Asp Ile Asp Glu Cys Glu Asn Gly 435 440 445 Gly Phe Cys Ser Gly Val Cys His Asn Leu Pro Gly Thr Phe Glu Cys 450 455 460 Ile Cys Gly Pro Asp Ser Ala Leu Val Arg His Ile Gly Thr Asp Cys 465 470 475 480 Asp Ser Gly Lys Val Asp Gly Gly Asp Ser Gly Ser Gly Glu Pro Pro 485 490 495 Pro Ser Pro Thr Pro Gly Ser Thr Leu Thr Pro Pro Ala Val Gly Leu 500 505 510 Val His Ser Gly 515

【００５３】 <210> 4 <211> 1548 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 4 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt ccccgcaccc 60 gcagagccgc agccgggtgg cagccagtgc gtcgagcacg actgcttcgc gctctacccg 120 ggccccgcga ccttcctcaa tgccagtcag atctgcgacg gactgcgggg ccacctaatg 180 acagtgcgct cctcggtggc tgccgatgtc atttccttgc tactgaacgg cgacggcggc 240 gttggccgcc ggcgcctctg gatcggcctg cagctgccac ccggctgcgg cgaccccaag 300 cgcctcgggc ccctgcgcgg cttccagtgg gttacgggag acaacaacac cagctatagc 360 aggtgggcac ggctcgacct caatggggct cccctctgcg gcccgttgtg cgtcgctgtc 420 tccgctgctg aggccactgt gcccagcgag ccgatctggg aggagcagca gtgcgaagtg 480 aaggccgatg gcttcctctg cgagttccac ttcccagcca cctgcaggcc actggctgtg 540 gagcccggcg ccgcggctgc cgccgtctcg atcacctacg gcaccccgtt cgcggcccgc 600 ggagcggact tccaggcgct gccggtgggc agctccgccg cggtggctcc cctcggctta 660 cagctaatgt gcaccgcgcc gcccggagcg gtccaggggc actgggccag ggaggcgccg 720 ggcgcttggg actgcagcgt ggagaacggc ggctgcgagc acgcgtgcaa tgcgatccct 780 ggggctcccc gctgccagtg cccagccggc gccgccctgc aggcagacgg gcgctcctgc 840 accgcatccg cgacgcagtc ctgcaacgac ctctgcgagc acttctgcgt tcccaacccc 900 gaccagccgg gctcctactc gtgcatgtgc gagaccggct accggctggc ggccgaccaa 960 caccggtgcg aggacgtgga tgactgcata ctggagccca gtccgtgtcc gcagcgctgt 1020 gtcaacacac agggtggctt cgagtgccac tgctacccta actacgacct ggtggacggc 1080 gagtgtgtgg agcccgtgga cccgtgcttc agagccaact gcgagtacca gtgccagccc 1140 ctgaaccaaa ctagctacct ctgcgtctgc gccgagggct tcgcgcccat tccccacgag 1200 ccgcacaggt gccagatgtt ttgcaaccag actgcctgtc cagccgactg cgaccccaac 1260 acccaggcta gctgtgagtg ccctgaaggc tacatcctgg acgacggttt catctgcacg 1320 gacatcgacg agtgcgaaaa cggcggcttc tgctccgggg tgtgccacaa cctccccggt 1380 accttcgagt gcatctgcgg gcccgactcg gcccttgtcc gccacattgg caccgactgt 1440 gactccggca aggtggacgg tggcgacagc ggctctggcg agcccccgcc cagcccgacg 1500 cccggctcca ccttgactcc tccggccgtg gggctcgtgc attcgggc 1548 <210> 5 <211> 516 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 5 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Ala Pro Ala Glu Pro Gln Pro Gly Gly Ser Gln Cys Val Glu 20 25 30 His Asp Cys Phe Ala Leu Tyr Pro Gly Pro Ala Thr Phe Leu Asn Ala 35 40 45 Ser Gln Ile Cys Asp Gly Leu Arg Gly His Leu Met Thr Val Arg Ser 50 55 60 Ser Val Ala Ala Asp Val Ile Ser Leu Leu Leu Asn Gly Asp Gly Gly 65 70 75 80 Val Gly Arg Arg Arg Leu Trp Ile Gly Leu Gln Leu Pro Pro Gly Cys 85 90 95 Gly Asp Pro Lys Arg Leu Gly Pro Leu Arg Gly Phe Gln Trp Val Thr 100 105 110 Gly Asp Asn Asn Thr Ser Tyr Ser Arg Trp Ala Arg Leu Asp Leu Asn 115 120 125 Gly Ala Pro Leu Cys Gly Pro Leu Cys Val Ala Val Ser Ala Ala Glu 130 135 140 Ala Thr Val Pro Ser Glu Pro Ile Trp Glu Glu Gln Gln Cys Glu Val 145 150 155 160 Lys Ala Asp Gly Phe Leu Cys Glu Phe His Phe Pro Ala Thr Cys Arg 165 170 175 Pro Leu Ala Val Glu Pro Gly Ala Ala Ala Ala Ala Val Ser Ile Thr 180 185 190 Tyr Gly Thr Pro Phe Ala Ala Arg Gly Ala Asp Phe Gln Ala Leu Pro 195 200 205 Val Gly Ser Ser Ala Ala Val Ala Pro Leu Gly Leu Gln Leu Met Cys 210 215 220 Thr Ala Pro Pro Gly Ala Val Gln Gly His Trp Ala Arg Glu Ala Pro 225 230 235 240 Gly Ala Trp Asp Cys Ser Val Glu Asn Gly Gly Cys Glu His Ala Cys 245 250 255 Asn Ala Ile Pro Gly Ala Pro Arg Cys Gln Cys Pro Ala Gly Ala Ala 260 265 270 Leu Gln Ala Asp Gly Arg Ser Cys Thr Ala Ser Ala Thr Gln Ser Cys 275 280 285 Asn Asp Leu Cys Glu His Phe Cys Val Pro Asn Pro Asp Gln Pro Gly 290 295 300 Ser Tyr Ser Cys Met Cys Glu Thr Gly Tyr Arg Leu Ala Ala Asp Gln 305 310 315 320 His Arg Cys Glu Asp Val Asp Asp Cys Ile Leu Glu Pro Ser Pro Cys 325 330 335 Pro Gln Arg Cys Val Asn Thr Gln Gly Gly Phe Glu Cys His Cys Tyr 340 345 350 Pro Asn Tyr Asp Leu Val Asp Gly Glu Cys Val Glu Pro Val Asp Pro 355 360 365 Cys Phe Arg Ala Asn Cys Glu Tyr Gln Cys Gln Pro Leu Asn Gln Thr 370 375 380 Ser Tyr Leu Cys Val Cys Ala Glu Gly Phe Ala Pro Ile Pro His Glu 385 390 395 400 Pro His Arg Cys Gln Met Phe Cys Asn Gln Thr Ala Cys Pro Ala Asp 405 410 415 Cys Asp Pro Asn Thr Gln Ala Ser Cys Glu Cys Pro Glu Gly Tyr Ile 420 425 430 Leu Asp Asp Gly Phe Ile Cys Thr Asp Ile Asp Glu Cys Glu Asn Gly 435 440 445 Gly Phe Cys Ser Gly Val Cys His Asn Leu Pro Gly Thr Phe Glu Cys 450 455 460 Ile Cys Gly Pro Asp Ser Ala Leu Ala Arg His Ile Gly Thr Asp Cys 465 470 475 480 Asp Ser Gly Lys Val Asp Gly Gly Asp Ser Gly Ser Gly Glu Pro Pro 485 490 495 Pro Ser Pro Thr Pro Gly Ser Thr Leu Thr Pro Pro Ala Val Gly Leu 500 505 510 Val His Ser Gly 515

【００５４】 <210> 6 <211> 1548 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 6 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt ccccgcaccc 60 gcagagccgc agccgggtgg cagccagtgc gtcgagcacg actgcttcgc gctctacccg 120 ggccccgcga ccttcctcaa tgccagtcag atctgcgacg gactgcgggg ccacctaatg 180 acagtgcgct cctcggtggc tgccgatgtc atttccttgc tactgaacgg cgacggcggc 240 gttggccgcc ggcgcctctg gatcggcctg cagctgccac ccggctgcgg cgaccccaag 300 cgcctcgggc ccctgcgcgg cttccagtgg gttacgggag acaacaacac cagctatagc 360 aggtgggcac ggctcgacct caatggggct cccctctgcg gcccgttgtg cgtcgctgtc 420 tccgctgctg aggccactgt gcccagcgag ccgatctggg aggagcagca gtgcgaagtg 480 aaggccgatg gcttcctctg cgagttccac ttcccagcca cctgcaggcc actggctgtg 540 gagcccggcg ccgcggctgc cgccgtctcg atcacctacg gcaccccgtt cgcggcccgc 600 ggagcggact tccaggcgct gccggtgggc agctccgccg cggtggctcc cctcggctta 660 cagctaatgt gcaccgcgcc gcccggagcg gtccaggggc actgggccag ggaggcgccg 720 ggcgcttggg actgcagcgt ggagaacggc ggctgcgagc acgcgtgcaa tgcgatccct 780 ggggctcccc gctgccagtg cccagccggc gccgccctgc aggcagacgg gcgctcctgc 840 accgcatccg cgacgcagtc ctgcaacgac ctctgcgagc acttctgcgt tcccaacccc 900 gaccagccgg gctcctactc gtgcatgtgc gagaccggct accggctggc ggccgaccaa 960 caccggtgcg aggacgtgga tgactgcata ctggagccca gtccgtgtcc gcagcgctgt 1020 gtcaacacac agggtggctt cgagtgccac tgctacccta actacgacct ggtggacggc 1080 gagtgtgtgg agcccgtgga cccgtgcttc agagccaact gcgagtacca gtgccagccc 1140 ctgaaccaaa ctagctacct ctgcgtctgc gccgagggct tcgcgcccat tccccacgag 1200 ccgcacaggt gccagatgtt ttgcaaccag actgcctgtc cagccgactg cgaccccaac 1260 acccaggcta gctgtgagtg ccctgaaggc tacatcctgg acgacggttt catctgcacg 1320 gacatcgacg agtgcgaaaa cggcggcttc tgctccgggg tgtgccacaa cctccccggt 1380 accttcgagt gcatctgcgg gcccgactcg gcccttgccc gccacattgg caccgactgt 1440 gactccggca aggtggacgg tggcgacagc ggctctggcg agcccccgcc cagcccgacg 1500 cccggctcca ccttgactcc tccggccgtg gggctcgtgc attcgggc 1548 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 変異用の合成ＤＮＡ <400> 7 aatgtggcgg gcaagggccg a 21 <210> 8 <211> 132 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 8 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Asp Pro Cys Phe Arg Ala Asn Cys Glu Tyr Gln Cys Gln Pro 20 25 30 Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Leu Cys Val Cys Ala Glu Gly Phe Ala Pro 35 40 45 Ile Pro His Glu Pro His Arg Cys Gln Met Phe Cys Asn Gln Thr Ala 50 55 60 Cys Pro Ala Asp Cys Asp Pro Asn Thr Gln Ala Ser Cys Glu Cys Pro 65 70 75 80 Glu Gly Tyr Ile Leu Asp Asp Gly Phe Ile Cys Thr Asp Ile Asp Glu 85 90 95 Cys Glu Asn Gly Gly Phe Cys Ser Gly Val Cys His Asn Leu Pro Gly 100 105 110 Thr Phe Glu Cys Ile Cys Gly Pro Asp Ser Ala Leu Val Arg His Ile 115 120 125 Gly Thr Asp Cys 130

【００５５】 <210> 9 <211> 396 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 9 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt ccccgacccg 60 tgcttcagag ccaactgcga gtaccagtgc cagcccctga accaaactag ctacctctgc 120 gtctgcgccg agggcttcgc gcccattccc cacgagccgc acaggtgcca gatgttttgc 180 aaccagactg cctgtccagc cgactgcgac cccaacaccc aggctagctg tgagtgccct 240 gaaggctaca tcctggacga cggtttcatc tgcacggaca tcgacgagtg cgaaaacggc 300 ggcttctgct ccggggtgtg ccacaacctc cccggtacct tcgagtgcat ctgcgggccc 360 gactcggccc ttgtccgcca cattggcacc gactgt 396 <210> 10 <211> 254 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 10 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Cys Ser Val Glu Asn Gly Gly Cys Glu His Ala Cys Asn Ala 20 25 30 Ile Pro Gly Ala Pro Arg Cys Gln Cys Pro Ala Gly Ala Ala Leu Gln 35 40 45 Ala Asp Gly Arg Ser Cys Thr Ala Ser Ala Thr Gln Ser Cys Asn Asp 50 55 60 Leu Cys Glu His Phe Cys Val Pro Asn Pro Asp Gln Pro Gly Ser Tyr 65 70 75 80 Ser Cys Met Cys Glu Thr Gly Tyr Arg Leu Ala Ala Asp Gln His Arg 85 90 95 Cys Glu Asp Val Asp Asp Cys Ile Leu Glu Pro Ser Pro Cys Pro Gln 100 105 110 Arg Cys Val Asn Thr Gln Gly Gly Phe Glu Cys His Cys Tyr Pro Asn 115 120 125 Tyr Asp Leu Val Asp Gly Glu Cys Val Glu Pro Val Asp Pro Cys Phe 130 135 140 Arg Ala Asn Cys Glu Tyr Gln Cys Gln Pro Leu Asn Gln Thr Ser Tyr 145 150 155 160 Leu Cys Val Cys Ala Glu Gly Phe Ala Pro Ile Pro His Glu Pro His 165 170 175 Arg Cys Gln Met Phe Cys Asn Gln Thr Ala Cys Pro Ala Asp Cys Asp 180 185 190 Pro Asn Thr Gln Ala Ser Cys Glu Cys Pro Glu Gly Tyr Ile Leu Asp 195 200 205 Asp Gly Phe Ile Cys Thr Asp Ile Asp Glu Cys Glu Asn Gly Gly Phe 210 215 220 Cys Ser Gly Val Cys His Asn Leu Pro Gly Thr Phe Glu Cys Ile Cys 225 230 235 240 Gly Pro Asp Ser Ala Leu Val Arg His Ile Gly Thr Asp Cys 245 250 <210> 11 <211> 762 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 11 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt cccctgcagc 60 gtggagaacg gcggctgcga gcacgcgtgc aatgcgatcc ctggggctcc ccgctgccag 120 tgcccagccg gcgccgccct gcaggcagac gggcgctcct gcaccgcatc cgcgacgcag 180 tcctgcaacg acctctgcga gcacttctgc gttcccaacc ccgaccagcc gggctcctac 240 tcgtgcatgt gcgagaccgg ctaccggctg gcggccgacc aacaccggtg cgaggacgtg 300 gatgactgca tactggagcc cagtccgtgt ccgcagcgct gtgtcaacac acagggtggc 360 ttcgagtgcc actgctaccc taactacgac ctggtggacg gcgagtgtgt ggagcccgtg 420 gacccgtgct tcagagccaa ctgcgagtac cagtgccagc ccctgaacca aactagctac 480 ctctgcgtct gcgccgaggg cttcgcgccc attccccacg agccgcacag gtgccagatg 540 ttttgcaacc agactgcctg tccagccgac tgcgacccca acacccaggc tagctgtgag 600 tgccctgaag gctacatcct ggacgacggt ttcatctgca cggacatcga cgagtgcgaa 660 aacggcggct tctgctccgg ggtgtgccac aacctccccg gtaccttcga gtgcatctgc 720 gggcccgact cggcccttgt ccgccacatt ggcaccgact gt 762

【００５６】 <210> 12 <211> 254 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリンの部分的なアミノ酸配列 <400> 12 Met Leu Gly Val Leu Val Leu Gly Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Gly 1 5 10 15 Phe Pro Cys Ser Val Glu Asn Gly Gly Cys Glu His Ala Cys Asn Ala 20 25 30 Ile Pro Gly Ala Pro Arg Cys Gln Cys Pro Ala Gly Ala Ala Leu Gln 35 40 45 Ala Asp Gly Arg Ser Cys Thr Ala Ser Ala Thr Gln Ser Cys Asn Asp 50 55 60 Leu Cys Glu His Phe Cys Val Pro Asn Pro Asp Gln Pro Gly Ser Tyr 65 70 75 80 Ser Cys Met Cys Glu Thr Gly Tyr Arg Leu Ala Ala Asp Gln His Arg 85 90 95 Cys Glu Asp Val Asp Asp Cys Ile Leu Glu Pro Ser Pro Cys Pro Gln 100 105 110 Arg Cys Val Asn Thr Gln Gly Gly Phe Glu Cys His Cys Tyr Pro Asn 115 120 125 Tyr Asp Leu Val Asp Gly Glu Cys Val Glu Pro Val Asp Pro Cys Phe 130 135 140 Arg Ala Asn Cys Glu Tyr Gln Cys Gln Pro Leu Asn Gln Thr Ser Tyr 145 150 155 160 Leu Cys Val Cys Ala Glu Gly Phe Ala Pro Ile Pro His Glu Pro His 165 170 175 Arg Cys Gln Met Phe Cys Asn Gln Thr Ala Cys Pro Ala Asp Cys Asp 180 185 190 Pro Asn Thr Gln Ala Ser Cys Glu Cys Pro Glu Gly Tyr Ile Leu Asp 195 200 205 Asp Gly Phe Ile Cys Thr Asp Ile Asp Glu Cys Glu Asn Gly Gly Phe 210 215 220 Cys Ser Gly Val Cys His Asn Leu Pro Gly Thr Phe Glu Cys Ile Cys 225 230 235 240 Gly Pro Asp Ser Ala Leu Ala Arg His Ile Gly Thr Asp Cys 245 250 <210> 13 <211> 762 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ヒトトロンボモジュリン遺伝子の部分的な塩基配列 <400> 13 atgcttgggg tcctggtcct tggcgcgctg gccctggccg gcctggggtt cccctgcagc 60 gtggagaacg gcggctgcga gcacgcgtgc aatgcgatcc ctggggctcc ccgctgccag 120 tgcccagccg gcgccgccct gcaggcagac gggcgctcct gcaccgcatc cgcgacgcag 180 tcctgcaacg acctctgcga gcacttctgc gttcccaacc ccgaccagcc gggctcctac 240 tcgtgcatgt gcgagaccgg ctaccggctg gcggccgacc aacaccggtg cgaggacgtg 300 gatgactgca tactggagcc cagtccgtgt ccgcagcgct gtgtcaacac acagggtggc 360 ttcgagtgcc actgctaccc taactacgac ctggtggacg gcgagtgtgt ggagcccgtg 420 gacccgtgct tcagagccaa ctgcgagtac cagtgccagc ccctgaacca aactagctac 480 ctctgcgtct gcgccgaggg cttcgcgccc attccccacg agccgcacag gtgccagatg 540 ttttgcaacc agactgcctg tccagccgac tgcgacccca acacccaggc tagctgtgag 600 tgccctgaag gctacatcct ggacgacggt ttcatctgca cggacatcga cgagtgcgaa 660 aacggcggct tctgctccgg ggtgtgccac aacctccccg gtaccttcga gtgcatctgc 720 gggcccgact cggcccttgc ccgccacatt ggcaccgact gt 762

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） // Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA80 DA02 GA11 GA18 HA01 4C084 AA02 BA01 BA21 BA22 DC50 MA01 NA14 ZA362 ZA892 ZB052 ZB112 ZB132 ZC542 4H045 AA30 BA10 CA40 DA20 DA89 EA22 EA23 FA74 HA31

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 トロンビンによるプロテインＣの活性化
   を促進する作用を有し、かつ配列番号１の１９−１４０
   のアミノ酸配列を有しているペプチドを有効成分とする
   血管炎治療剤。
2. 【請求項２】 該ペプチドが、配列番号１の１９−１４
   ０のアミノ酸配列を有し、ｉ）配列番号８の１９−１３
   ２のアミノ酸配列を含むか、または、ｉｉ）上記配列番
   号８の１９−１３２のアミノ酸配列の１つまたは複数の
   アミノ酸が置換、欠失、または付加されたアミノ酸配列
   を含み、かつ該ペプチドがトロンビンによるプロテイン
   Ｃの活性化を促進する作用を有する、の何れかのペプチ
   ドである請求項１に記載の治療剤。
3. 【請求項３】 該ペプチドが、界面活性剤の非存在下で
   可溶性であるペプチドである請求項１に記載の治療剤。
4. 【請求項４】 該ペプチドが、配列番号３または配列番
   号５に記載のアミノ酸配列をコードするＤＮＡを宿主細
   胞にトランスフェクトして調製された形質転換細胞によ
   り取得される可溶性ペプチドである請求項１〜３のいず
   れかに記載の治療剤。
5. 【請求項５】 該ペプチドが、配列番号３の１９−５１
   ６のアミノ酸配列または配列番号５の１９−５１６のア
   ミノ酸配列からなるペプチドである請求項１〜４のいず
   れかに記載の治療剤。
6. 【請求項６】 血管炎が、アレルギー性肉芽腫性血管
   炎、顕微鏡的多発動脈炎、ベーチェット病、抗リン脂質
   抗体症候群、または全身性エリテマトーデスのいずれか
   である請求項１〜５のいずれかに記載の治療剤。