ITMI20061825A1 - Composizione antipediculosi provvista di attivita' di soffocamento dei pidocchi - Google Patents

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ITMI20061825A1
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Description

- 2 - Barzanò & Zanardo
DESCRIZIONE dell'invenzione industriale
a nome: GIULIANI S.p.A
di nazionalità: italiana WI2006 A 00 1 82 5 con sede in: MILANO MI
La presente invenzione si riferisce ad una
zione antipediculosi provvista di attività di soffocamento dei pidocchi.
La presente invenzione origina nei settori dei pròdotti cosmetici e dei presidi medicochirurgici/dispositivi medici ad azione antipediculosi
In particolare, la presente invenzione concerne dei preparati per l'uso esterno ad azione pediculocida, ovocita o preventiva delle infestazioni parassitiche del cuoio capelluto.
Con il termine pediculosi s'intendono le infestazioni da parte dei pidocchi (Pediculus Humanus), noti parassiti che si annidano e sviluppano solo a livello del cuoio capelluto.
Il pidocchio ha dimensioni di ca. 2-3 min, e presenta un corpo appiattito di colore giallo-marrone, dotato di sei arti alla cui estremità si trova un’unghia a forma d'uncino con la quale si fissa sul capello. L’apparato buccale è costituito da un rostro pungente
- 3 - Barzanò & Zanardo
atto alia suzione. Il rostro introdotto nella cute si fissa attraverso piccoli denti mobili.
Durante la puntura il pidocchio secerne una sostanza che ha la proprietà di anestetizzare la cute in modo da non infastidire l'organismo ospite e limitarne quindi qualsiasi reazione avversa.
II pidocchio inietta inoltre una sostanza anticoagulante che rende il sangue fluido durante la suzione consentendo una suzione protratta anche per diverse ore. La quantità di sangue succhiata è di circa 1 mg, molto elevata rispetto alla massa del parassita. Il pidocchio si nutre due volte al giorno, per tutta la durata della sua vita. La testa presenta due piccole antenne che hanno il compito di rilevare la temperatura ed orientare il parassita nell<1>individuare: il cibo ed il partner.
Il pidocchio presenta anche un rudimentale apparato visivo che probabilmente ha lo scopo di percepire soltanto le variazioni di luce, poiché la deposizione delle uova avviene al buio.
Il ciclo riproduttivo del pidocchio origina dalle lendini (uova) che tipicamente si trovano nella regione retro-auricolare e sulla nuca a cui rimangono attaccate grazie ad una sostanza adesiva che secernono.
- 4 Barzanò & Zanardo
Dopo una settimana le uova sì schiudono ed il pidocchio inizia a svilupparsi grazie all'apporto di sangue che aspira pungendo il cuoio capelluto e causando il tìpico forte prurito.
Le uova, resistenti a molti insetticidi, sono fissate alla radice dei capelli mediante una secrezione vischiosa insolubile all'acqua. La schiusa delle uova avviene dopo circa dieci giorni, il giovane pidocchio diventa riproduttivo dopo due settimane durante le quali compie tre mute. L'aspettativa di vita del pidocchio è di venti giorni per il maschio e quaranta per la femmina.
La giusta temperatura dell'organismo ospite è un fattore di vitale importanza, infatti il pidocchio abbandona immediatamente la testa in caso di forte rialzo termico. L'efficacia della presa del pidocchio sul capello è fattore d'estrema importanza per la sua sopravvivenza, perché fuori dal suo habitat non avrebbe che poche ore dì vita poiché morirebbe per fame e freddo.
Il parassita, per assicurare la sopravvivenza della specie, ha dovuto sviluppare la sua capacità riproduttiva, infatti la femmina deponendo circa dieci uova al giorno per tutta la sua esistenza, può assicurarsi oltre trecento discendenti diretti.
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In un mese ogni femmina può riprodursi in una discendenza complessiva di circa 45.000 individui, che dopo due mesi arriverebbero all'impressionante cifra di 6.750.000. Fortunatamente la realtà è diversa perché non tutti gli individui sopravvivono, altri sono eliminati con la spazzolatura o con il grattamento. Il pidocchio è una delle poche specie viventi che non ha subito contraccolpi al variare del clima e delie abitudini di vita dell'uomo.
II cuoio capelluto è infatti una piccola nicchia ecologica che ha subito solo minimi cambiamenti nel corso dei secoli; l'aumentato numero degli individui della specie umana ha costituito, per questi parassiti, un aumento sensibile opportunità di vita e riproduzione.
Le ragioni della recrudescenza di questa fastidiosa infestazione sono molteplici: la loro efficiente capacità riproduttiva; la dispersione nell'ambiente a causa di spazzolature, grattamenti, tuffi; l’uso promiscuo dì fazzoletti, poltrone, poggiatesta, cappelli, cuffie, pettini...; la capacità, se espulsi, di trovare un nuovo organismo ospite.
La probabilità di contagio viste le attuali abitudini di vita sono aumentate enormemente rispetto al passato, infatti la lunga permanenza in posti affollati, - 6 - Barzanò & Zanardo
quali gli ambienti di lavoro, le scuole, i mezzi di trasporto e le palestre non rientrava nelle abitudini dì vita dei nostri progenitori. I bambini presentano, poi, maggiori probabilità di contagio a causa dei loro giochi e della loro più intensa vita sociale.
Per il trattamento dei pidocchi sono noti antichi rimedi, quali il lavaggio dei capelli con l'aceto per staccare le uova e la rasatura del cuoio capelluto. E' altresì noto l'utilizzo di pomate al mercurio oltre che del DDT.
Attualmente sono presenti sul mercato alcuni prodotti biocìdi specifici per il trattamento delle infestazioni da pidocchi, a base di principi attivi altamente tossici quali malathìon, d-phenotrin, piretrine e piperonil butossido.
L'utilizzo di questi prodotti non è però scevro dal presentare inconvenienti di utilizzo, tra cui annoveriamo un certo grado di tossicità ed il rìschio di scatenare reazioni di tipo allergico che in molti casi determinano l'interruzione e quindi l'insuccesso del trattamento disinfestante.
Inoltre, nessun trattamento è efficace sin dalla prima applicazione, e quindi esso deve essere ripetuto a distanza di una settimana per eliminare le larve nate dalle uova superstiti.
- 7 - Barzanò & Zanardo
Inoltre, in Italia, come anche negli Stati Uniti, Inghilterra ed altri paesi, si è riscontrata una crescente resistenza dei pidocchi ai principi attivi finora impiegati, con conseguente inefficacia della cura in circa 1 bambino su 4.
Allo stato attuale si sente quindi la necessità dì poter disporre di nuovi prodotti ad azione antipediculosi.
Uno degli scopi della presente invenzione consiste quindi nel fornire una composizione antipediculosi che sia altamente efficace nel trattare le infestazioni da pidocchi, ed una bassa tossicità verso l'organismo umano.
Un altro scopo della presente invenzione consiste nel fornire una composizione antipediculosi in grado di eliminare in maniera efficace ì pidocchi e le larve anche delle forme resistenti ai prodotti biocidi attualmente presenti sul mercato.
Un ulteriore scopo della presente invenzione consiste nel fornire una preparazione per disinfestare il cuoio capelluto da pidocchi e larve il cui utilizzo comporti bassi di rischi di sviluppare reazioni di tipo allergico che possano determinare 1'interruzione del trattamento.
Alla luce di questi scopi viene fornito, in un aspet - 8 - Barzanò & Zanardo
to dell'invenzione, l'uso di butilenglìcole dicaprato-dicaprilato come pediculocìda e/o ovocida.
La richiedente ha ora individuato che il butilenglicole dicaprato-dicaprìlato, un composto oleoso che sino ad oggi veniva utilizzato come componente oleoso in formulazioni ad uso cosmetico, inaspettatamente, svolge un'efficace azione antipediculosi. Con il termine di antipediculosi si intende designare e ricomprendere sìa un'azione disinfestante diretta sui parassiti, tipicamente pidocchi, che un'azione ovocita diretta sulle larve e uova.
La richiedente ha altresì riscontrato che questa attività pediculocida/ovocita è ascrivibile principalmente ad un'azione di soffocamento e inibizione del flusso di ossigeno dovuta alla volatilità in fase gassosa ed all'effetto filmogeno del butilenglicole dicaprato-dicaprilato sugli ectoparassiti in generale ed in particolare sui più comuni generi di pidocchi che infestano la popolazione umana.
Inoltre, si è riscontrato che l'utilizzo esterno del principio attivo butilenglicole dicaprato-dicaprilato comporta dei bassi rischi di tossicità ed una ridotta incidenza di possibili effetti secondari in particolare di tipo allergico.
Secondo una forma di realizzazione della presente in- 9 - Barzanò & Zanardo
venzione viene previsto l'utilizzo di butilenglitole dicaprato-dicaprilato nel trattamento cosmetico del cuoio capelluto infestato da ectoparassiti, in particolare pidocchi e/o uova/iarve.
In accordo a questa forma di realizzazione dell/invenzione il principio attivo butilenglicole dicaprato-dicaprilato viene formulato in una preparazione contenente uno o più veicoli o eccipienti cosmeticamente accettabili.
Secondo una forma di realizzazione detta composizione cosmetica comprende urea, acido lattico ed arginine. L'azione cheratoplastica dell'urea preferibilmente presente in alta concentrazione, stabilizzata dai tampone acido lattico-argìnina, permette un effetto di ammorbidimento dei capelli e di facilitazione del distacco di ogni materiale ad essi aderente.
Secondo un'altra forma dì realizzazione è poi prevista la presenza di un 'penetration enhancer' quale, ad esempio, pentilene glicol, etìlesilglicerina, emulsionanti a catena oleilica, preferibilmente dotato di proprietà antibatteriche, che permette sia la diffusione in profondità che la solubilizzazione di eventuali ulteriori principi attivi di derivazione vegetale, quali ad esempio, anetolo, terpineolo, olio di Neem, olio dì Cannella, olio di Andiroba, olio odi - 10 - Barzanò & Zanardo
melaleuca ,
In accordo ad un altro aspetto dell'invenzione viene previsto l'utilizzo di butilengìicole dicapratodicaprilato per la produzione di un presidio medicochirurgico per il trattamento delle infestazioni da ectoparassiti e pidocchi in particolare.
La forma di emulsione estemporanea bifasica permette l'ottimizzazione del contenuto in princìpi attivi nelle due fasi separate e mantiene la estrema distribuibilità cutanea del prodotto.
In accordo ad un altro aspetto della presente invenzione viene fornita una composizione per disinfestare il cuoio capelluto da pidocchi e larve caratterizzata dal fatto di comprendere butilengìicole dicapratodicaprilato in un quantitativo efficace da un punto di vista antiparassitario.
In accordo ad una forma di realizzazione dell'invenzione il butilengìicole dicapratodicaprilato è presente in un quantitativo pari o superiore al 10% in peso, preferibilmente pari o superiore al 20 % in peso ed ancora più preferibilmente pari o superiore al 40% in peso rispetto al peso totale della composizione disinfestante.
Le composizioni per l'applicazione topica dell'invenzione possono presentarsi nella forma li- 11 - Barzanò & Zanardo
quida tipicamente come emulsioni acqua olio, oppure come soluzioni in cui la fase oleosa è altamente dispersa in quella acquosa od ancora come shampoo. Sono altresì possibili le forme semisolide come gel, o anche a consistenza maggiore come crema, unguento, pomata e maschere.
Convenientemente, le composizioni per l'applicazione locale dell'invenzione possono comprendere additivi comunemente utilizzati nelle preparazioni cosmetiche o farmaceutiche per l'uso locale, quali conservanti, stabilizzanti, emulsionanti, tamponi, coloranti ed altri eccipienti comunemente utilizzati nelle tecniche di preparazione cosmetiche / farmaceutiche.
Nel caso della formulazione liquida, i principi attivi sinergici dell'invenzione possono essere convenientemente disciolti in un veicolo liquido cosmeticamente / farmaceuticamente accettabile quale acqua, alcool, soluzione idroalcolica, glicerica ed altri tipi idonei per l'applicazione locale.
A titolo dì esempio, le composizioni dell'invenzione in forma liquida sono preparate emulsionando in acqua le componenti oleose quali il butìlenglicole dicaprato-dicaprilato ed aggiungendo gli idonei eccipienti. Tipicamente, la miscela/emulsione risultante può quindi essere tamponata per raggiungere un intervallo - 12 - Barzanò & Zanardo
dì pH convenientemente selezionato tra 5 e 7 in maniera da essere compatibile con il pH della pelle per poi essere filtrata e confezionata in idonei recipienti pronti all'uso.
Secondo una forma di realizzazione preferita la composizione dell'invenzione viene fornita come lozione bifasica acqua/olio idoneo all'applicazione spray ricorrendo ad esempio ad una cannula direzionale. Questa forma di somministrazione risulta essere particolarmente adatta in quanto facilita il soffocamento fisico dei pidocchi.
Tipicamente il tempo di posa dell'emulsione sul cuoio capelluto varia tra 5-20 minuti e preferibilmente è pari a ca. 15 minuti. Al termine dell'uso la fase oleosa è facilmente asportabile con lavaggio con un normale shampoo.
La composizione ad uso locale dell'invenzione trova utilizzo per applicazione, in un quantitativo antiparassitario efficace, direttamente su una regione del cuoio capelluto interessata dalla infestazione o più convenientemente su tutta la testa.
La composizione dell'invenzione può essere anche formulata come agente di detersione o shampoo nella cui composizione rientrano tensioattivi, agenti condizionanti idonei a facilitare l'eliminazione dei pidoc3 ~ Barzanò & Zanardo
chi, oltre che agenti lenitivi atti ad alleviare l'irritazione del cuoio capelluto e la sensazione di prurito,
La presenza di miscele dì tensioattivi è opportuna per facilitare l'eliminazione dell'olio trattante antipidocchi dell'invenzione.
Secondo una realizzazione la formulazione in shampoo contiene altresì un olio dì origine naturale (Minga Andiroba) con documentata attività repellente nei confronti dei pidocchi.
Secondo un'altra realizzazione viene prevista la presenza di aceto di mele che abbassando il pH , crea un ambiente sfavorevole all'insediamento dei pidocchi. Lo shampoo secondo questa forma di realizzazione dell'invenzione trova applicazione anche come prevenzione delle infestazioni da pidocchi in quei periodi dell'anno in cui è più diffuso il problema dell'infestazioni .
Nel caso dell'impiego di una formulazione a base solida o semisolida, quali creme, balsami per capelli, il butilenglìcole dicaprato-dicaprilato si trova in forma dispersa in veicoli cosmeticamente / farmaceuticamente accettabili, comunemente utilizzati per l'applicazione topica.
Secondo un altro aspetto dell'invenzione viene forni- 14 Barzanò & Zanardo
to un metodo di trattamento cosmetico che comprende l'applicazione locale, a livello del cuoio capelluto, di un quantitativo efficace di una composizione antipedìculosi precedentemente descritta.
In accordo ad un'altra forma di realizzazione viene fornito un metodo per disinfestare il cuoio capelluto da parassiti, in particolare pidocchi e larve comprendente l'applicazione locale di una composizione antipediculosi del tipo precedentemente descritto ad un soggetto in necessità di trattamento.
I seguenti esempi sono forniti a mero scopo illustrativo della presente invenzione e non devono essere intesi in senso limitativo dell'ambito di protezione come risulta dalle accluse rivendicazioni.
ESEMPIO 1
Viene riportata una composizione dell'invenzione in forma dì lozione bifasica acqua/olio adatta all'applicazione sul cuoio capelluto. Prima dell'uso è consigliabile agitare la formulazione al fine di ottimizzare la dispersione in acqua della componente oleosa .
Lozione antipediculosi
5 Barzanò & Zanardo
Esempio 2
Lozione antipediculosi
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Esempio 3
Shampoo oil antipediculosi
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Esempio 4
Shampoo ionico concentrato Antipediculosi
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Esempio 5
Mousse Antipediculosi
m
m
ESEMPIO 6
Una composizione in forma di lozione secondo l'esempio 1 è stato testata per valutare l'efficacia adulticida e ovicida in vitro su un pool di pidocchi appartenenti a Pediculus humanus capitis. A tale scopo adulti e uova (lendini) appartenenti al microorganismo test sono stati prelevati dal suo ospite naturale (bambini in età scolare) e sono stati - 19 - B arcano & Zanardo
trattati con la sostanza in esame tal quale per simulare le condizioni d'uso del prodotto. Come materiale di confronto sono stati utilizzati due prodotti analoghi leader del mercato, di cui uno a base di sostanze naturai i (Paranix®) e uno a base di permetrine (MiLice®, controllo positivo). Il prodotto testato sì è dimostrato efficace nell'eliminare efficacemente (mortalità >90%) gli adulti trattati già dopo un'ora dalla fine dell'esposizione dell'organismo test alla lozione Il prodotto testato si è dimostrato inoltre efficace nell'eliminare efficacemente (mortalità >65%) le uova trattate dopo 12 giorni dalla fine dell'esposizione del parassita test alla lozione in esame. Visti ì risultati dei test di efficacia in vitro su: Pediculus humanus capitis,
è possibile classificare la composizione testata come pediculcida sia nei confronti degli adulti (adulticiha) sia nei confronti delle uova (ovicida). Nel test è stato utilizzato il Pediculus humanus capitis, un microrganismo parassita obbligato che, per sopravvivere, si nutre di sangue umano e predilige le condizioni ambientali di temperatura e umidità che si trovano a livello del cuoio capelluto.
Diversi studi attualmente portati avanti in tutto il - 20 - Barzanò & Zanardo
mondo mostrano come alcuni ceppi di questo parassita stiano sviluppando una notevole resistenza ai biocidi e di come si renda quindi necessario testare non solo le nuove formulazioni, ma anche i prodotti già in commercio per valutarne l'efficacia.
Per l'esecuzione della sperimentazione in vitro è stato utilizzato come sistema di saggio Pediculus humanus capitis prelevato da indivìdui infestati e non precedentemente trattati con altri prodotti pediculicidi. La scelta del pidocchio che infesta il cuoio capelluto dell'uomo è stata falla tenendo conto che si andava testando un prodotto specifico per questo tipo di insetto.
La valutazione separata dell'efficacia ovicida è collegata al fatto che le uova di Pedicufus humanus capitis sono generalmente più difficili da eliminare e necessitano normalmente di un secondo trattamento a distanza dì alcuni giorni per essere completamente eliminate; questo spiega anche perché nel saggio, i criteri di efficacia per l'attività ovicida siano meno severi rispetto a quelli dell'attività adulticida, per la quale si richiede un'efficacia > del 90%. Il test è stato eseguito nelle condizioni d'uso WHO. RIFERIMENTI-BIBLIOGRAFICI
1. Standard Test Method for Determining thè Effec- 21 - Barzanò & Zanardo
tiveness of Liquid, Gel, Cream, or Shampoo insecticides Against Adult Human Lice. Designation A5TM: E938 - 05 2. Standard Test Method for Determinìng thè Effectiveness of Liquid, Gel, Cream, or Shampoo insecticides Against Adult Louse Ova. Designation ASTM: EI 517-99
3. WHO Model Prescribing Information. Drugs Used in Parasitic Diseases, 2nd Ed., World Health Organization, Geneva.
4. Abbott, W.S., "A Method of Computing thè Effectiveness of An lnsecticìde", 1925 5. Box, G., Hunter, 5., ,,Statistics for Experimenters",Wiley-1978.
TEST-DI-EFFICACIA-ADULTICIDA
SISTEMA-DI-SAGGIO
Per la sperimentazione sono stati utilizzati i seguenti microrganismi: Pediculus humanus capitis I pidocchi sono stati prelevati da bimbi in età scolare (4-11) anni, in seguito a segnalazione di infestazione (pediculosi) ai sistema sanitario nazionale. I pidocchi sono stati prelevati da un medico esperto e portati immediatamente in laboratorio per l'esecuzione del test. Gli organismi sono stati prelevati da capelli asciutti utilizzando pettini a den- 22 - Barzanò & Zanardo
ti fìtti, sono stati riposti in un contenitore di plastica JXIO cm (sul quale è stata registrata la data e l'ora del prelievo) e immediatamente trasportati al centro di saggio
APPARECCHIATURA E MATERIALI
Acqua di rete
- Acqua distillata
Incubatore termosfatato(31°±1°C e 7O%±10% U.R.) Cronometro
Pinzette
Test container (vassoio in plastica multi-goccia trasparente e bastoncino di plastica trasparente con schermo circolare)
- Applicatore cilindrico in legno cui sono attaccate le ciocche infestate
Nastro adesivo
Bagno termostato(31°±1°C)
Becher (100-1000 mi)
- Capsule di Petri (8,9 cm di diametro e profonde 1,3 cm)
Salviette assorbenti
Contenitori di plastica (chimicamente inerte 7xl0cm)
Pezza di tessuto scuro (4X4 cm)
Piastra riscaldante
- 23 - Barzanò & Zanardo
Pennello di pelo di cammello
Pettine a denti fitti
Struttura dello studio
Lo studio è stato effettuato usando acqua distillata come controllo negativo. La sostanza è stata testata in repliche di 3, ogni replica contenente 10 insetti.
Controllo negativo
Acqua distillata
PREPARAZIONE DEL CAMPIONE DI SAGGIO
10 mi della sostanza sostanza in esame sono stati versati in un becher da 100 mi e posti nel bagno termostatato a 31°±1°C.
Un becher da 1000 mi contenente acqua distillata {soluzione di lavaggio) è stato mantenuto nel bagno termostatato a 31°±1°C.
ESECUZIONE DEL SAGGIO
Esposizione
3 repliche da 10 pidocchi ciascuna sono state inserite sul fondo del test container e gli organismi sono stati tenuti ancorati al fondo tramite un bastoncino di plastica idoneo.
11 test container nel becher da 100 mi a 31°±1°C contenente la sostanza pediculicìda. Gli organismi sono stati lasciati a contatto con la sostanza per un tempo dì 15 minuti
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Lavaggio
Il tesi container è stato rimosso dal becher ed il liquido rimanente è stato eliminato dal test container.
Il test container è stato inserito nel becher da 1000 mi contenente l'acqua distillata a 31°±1°C e agitato. Dopo 1 minuto, è stato rimosso e i pidocchi sono stati sciacquati delicatamente sotto un getto di acqua distillata (31°±1°C) peri minuto. L'acqua in eccesso è stata rimossa
Incubazione
Ogni è stata trasferita su una pezza di tessuto scuro 4X4 e inserita in una capsula di Patri. Le capsule di Petri con i pidocchi trattati sono stati posti in un ìncubatore termostatato a 31°±1°C e 70%±5%U .R..
Per i controlli, la procedura è stata ripetuta tal quale eccetto che al prodotto in esame è stata sostituita acqua distillata (controllo negativo).
La mortalità dei pidocchi è stata valutata 15 minuti, 30 minuti, 1 ora, 3 ore, 6 ore e 24 ore dopo la fine del-trattamento .
A tale scopo, i pidocchi posti sul tessuto sono stati esposti al calore di una piastra riscaldata a 37°±1°C. I pidocchi morti o morenti non erano in gra - 25 - Barzanò & Zanardo
do di muoversi verso la sorgente di calore entro 5 minuti dall/esposizione al calore. CALCOLO-ESPRESSIONE-DEI-RISULTATI
Per ogni rilevazione, è stata valutata la mortalità cumulativa media percentuale della sostanza testata e del controllo negativo, sommando i pidocchi morenti o morti. Questo valore è stato corretto usando la for mula di Abbott.
Mortalità corretta = [(% Sopravvissuti nel Controllo negativo) - Sopravvissuti nel Test)] I (% Sopravvissuti nel Controllo negativo) X100 CRITERI DI VALIDITÀ<7>DEL SAGGIO
Per ogni tempo di contatto, considerare il test valido se la mortalità cumulativa media per il controllo negativo è inferiore al 15% e se la mortalità cumulativa media per il controllo positivo è superiore al 90% a partire da 1 ora dal trattamento. CRITERI DI ACCETTABILITA' ED EFFICACIA
Considerare la sostanza in esame pediculicida se la mortalità media corretta risulta uguale o superiore al 90% entro le 6 ore dal trattamento.
RISULTATI
La composizione dell'esempio 1 ha mostrato un'efficacia adulticida pari al 93% dopo I ora dalla fine del trattamento e pari al 100% dopo 3 ore dalla - 26 - Barzanò & Zanardo
Fine del trattamento.
La tabella qui sotto riporta 1 dati relativi alla mortalità cumulativa percentuale dei pidocchi trattati verso i materiali di confronto e il controllo negativo.
TABELLA 1: mortalità cumulativa media percentuale (%) trattamento con lozione va controllo negativo
cp-controllo positivo cn=controllo negativo
La mortalità corretta (formula di Abbott) della lozione di cui all'Esempio 1 risulta essere pari al 93% dopo una ora di incubazione e pari al 100% dopo 3 e 6 ore dì incubazione, risultano quindi Soddisfarti i criteri di efficacia.
Inoltre risultano pienamente soddisfatti i criteri di validità del saggio fino a 6h.
DEVIAZIONI
Nessuna deviazione è stata riscontrata nel corso dello studio.
- 27 - Barzanò& Zanardo
CONCLUSIONI
Il test di efficacia in vitro su Pediculus hurnanus capitis ha permesso di classificare composizione in forma di lozione di cui all/esempio 1 come adulticida,
TEST DI EFFICACIA OVICIDA
1.SISTEMA DI SAGGIO
1.1 Organismi bersaglio
Per la sperimentazione vengono utilizzati i seguenti organismi:
Pediculus-humanus-capitis (uova) Le lendini sono state prelevate da bimbi in età scolare (4-li) anni, in seguito a segnalazione di intestazione (pediculosi) al sistema sanitario nazionale. Le lendini sono state prelevate da un medico esperto e portate immediatamente in laboratorio per l'esecuzione del test. Gli organismi sono stati prelevati insieme alle ciocche dì capelli intestate e sono stati riposti in un contenitore di plastica 7X10 cm (sul quale è stata registrata la data e l'ora del prelievo) e immediatamente trasportati al centro di saggio.
2. APPARECCHIATURA E MATERIALI
- Acqua di rete
- Acqua distillata
Incubatore termostatato
- 28 - Barzanò & Zanardo
Cronometro
Pinzette
- Applicatone cilindrico in legno cui sono attaccate le ciocche infestate
Nastro adesivo
Bagno termostato
- Becher (100-1000 mi)
Capsule di Petri (8,9 cm di diametro e profonde 1,3 cm)
Salviette assorbenti
- Contenitori di plastica (chimicamente inerte 7x1Qcm)
DISEGNO SPERIMENTALE
Struttura dello studio
Lo studio è stato effettuato usando acqua distillata come controllo negativo
La sostanza è stata testata in repliche di 3, ogni replica contenente 15 uova.
Controllo negativo
Acqua distillata
Controllo positivo
Preparazione del campione di saggio:
60 mi della sostanza sostanza in esame sono stati versati in un becher da 100 mi e posti nel bagno termostatato a 31 °±1 °C. Un becher da 1000 mi contenen - 29 - Barzanò & Zanardo
te acqua distillata (soluzione di lavaggio) è stato mantenuto nel bagno termostatato a 31±1°C.
ESECUZIONE DEL SAGGIO
Esposizione
Ogni replica da 10 uova composta da 1 a 3 ciocche e contenente 10 uova è stata attaccata a un bastoncinoapplicatore di legno mediante del nastro adesivo. I campioni della sostanza in esame sono stati portati a 31+1°C in bagno termostatato. L'applicatone con Le uova è stato inserito nel becher da 100 mi a 32°C contenente la sostanza ovicida. Gli organismi sono rimasti a contatto con la sostanza per un tempo di 15 minuti (in base alle indicazioni del Committente) dopodiché 1'applicatone è stato
rimosso dal becker.
Le ciocche sono state lavate in 900 mi di acqua direte a 31+1°C e agitate mediante movimento "su e giù" dell'applicatone in modo da simulare il risciacquo in vivo.
Dopo I minuto le uova sono state sciacquate delicatamente nel becher da 1000ml per un minuto e l'acqua in eccesso è stata rimossa.
Le ciocche con le uova attaccate sono state poste in una capsula di Petri e incubate a 31,7±G,5°C e 60+10% U.R.
- 30- Barzanò & Zanardo
Per i controlli, la procedura è stata ripetuta tal quale eccetto che al prodotto in esame è stata sostituita acqua distillata (controllo negativo}.
OSSERVAZIONI
Quando tutte le uova del controllo negativo si sono schiuse (dopo circa 12 giorni), le repliche sono state esaminate al microscopio (30X) per determinare il numero di uova regolarmente schiuse e quelle che invece non sono riuscite a schiudersi. Queste ultime vengono classificate come organismi morti. Le uova parzialmente schiuse (emergenti) vengono classificate come organismi morti. CALCOLO ED ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Valutare la mortalità media percentuale della sostanza testata e del controllo negativo, sommando le uova non schiuse o parzialmente schiuse e correggere i valori di mortalità per il controllo positivo e per la sostanza in esame usando la formula di Abbott. Modalità corretta = [(3⁄4 Sopravvissuti nel Controllo negativo) — Sopravvissuti nel Test)J/(% Sopravvìssuti nel Controllo negativo) X 100.
CRITERI DI VALIDITÀ' DEL SAGGIO
Considerare il test valido se alla fine del trattamento la mortalità cumulativa media per il controllo negativo è inferiore al 15% e per il controllo posi -31 Barzanò & Zanardo
tivo è superiore al 65%.
CRITERI DI ACCETTABILITÀ ED EFFICACIA
Considerare la sostanza in esame ovicida se la mortalità media corretta risulta uguale o superiore al 65%.
RISULTATI
La lozione dell'esempio 1 ha mostrato un'efficacia ovicida> 65% dopo 12 giorni dalla fine del trattamento. Inoltre, la sostanza in esame, nelle condizioni sperimentali adottate, ha mostrato di possedere un'efficacia ovicida superiore rispetto a quella dei materiali di confronto leader del mercato. La Tabella 2 qui sotto riporta i dati relativi alla mortalità cumulativa percentuale delle uova trattate verso i materiali di confronto e il controllo negativo:
TABELLA 2: mortalità cumulativa media percentuale (%) corretta dopo trattamento con lozione vs controllo negativo e materiali di confronto.
cp=controllo positivo
cn=controIo negativo
- 32 - Barzanò & Zanardo
La mortalità corretta (formula di Abbott) della lozione antipidocchi dell'esempio 1 risulta essere superiore al 65% dopo 12 giorni di incubazione: risultano quindi soddisfatti i criteri di efficacia. Risultano anche pienamente soddisfatti i criteri di validità del saggio, in quanto a tutti i tempi di osservazione, il controllo negativo presenta una mortalità cumulativa percentuale < 15% e il controllo positivo presenta una mortalità cumulativa percentuale maggiore del 65%.
DEVIAZIONI
Nessuna deviazione è stata riscontrata nel corso di questo studio.
CONCLUSIONI
Il test di efficacia in vitro su lendini di Pediculus humanus capitis ha permesso di classificare la lozione di cui all'esempio 1 come OVICIDA.
I risultati ottenuti sono riassunti nella seguente Tabella 3
-33 - Barzanò & Zanardo
-34- Barzanò & Zanardo
Barzanò & Zanardo Milano S.p.A.

Claims (19)

  1. - 35 - Barzanò & Zanardo RIVENDICAZIONI 1. Butilenglieole dicaprato-dicaprilato per l'uso antiparassitario.
  2. 2. Uso di butilenglieole dicaprato-dicaprilato per la produzione di una composizione per il trattamento esterno delle infestazioni da ectoparassiti.
  3. 3. Uso secondo la rivendicazione 2 caratterizzato dal fatto che detta composizione è un dispositivo medico o presidio medico-chirurgico per uso umano/veterinario o una composizione cosmetica per il trattamento dei pidocchi e/o lendini.
  4. 4. Uso secondo la rivendicazione 2 o 3 in cui detto butilenglieole dìcaprato~dicaprilato è presente in un quantitativo ≥ 10% in peso in detta composizione.
  5. 5. Uso secondo la rivendicazione 4 in cui detto butilenglieole dicaprato-dicaprilato è presente in un quantitativo ≥ 20% in peso in detta composizione.
  6. 6. Uso secondo la rivendicazione 4 in cui detto butilenglieole dicaprato-dicaprilato è presente in un quantitativo ≥ 40% in peso in detta composizione.
  7. 7. Uso secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 2-6 in cui detta composizione è in forma liquida.
  8. 8. Uso secondo la rivendicazione 7 in cui detta composizione è in forma dì lozione bifasica ac - 36 - Barzanò & Zanardo qua/olio o olio/acqua.
  9. 9. Uso secondo la rivendicazioni 7 in cui detta composizione è in forma di shampoo o di mousse.
  10. 10. Uso secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 2-6 3 in cui detta composizione è in forma solida o semi-solida.
  11. 11. Uso secondo la rivendicazioni 10 in cui detta composizione è in forma di crema o pasta per capelli.
  12. 12. Uso secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-11 in cui detta composizione comprende un ulteriore principio attivo antipediculosi scelto dal gruppo di: anetolo, terpineolo, olio di Neem, urea, olio di Melaleuca, olio di Cannella, olio di Andiroba e loro miscele.
  13. 13. Composizione antipediculosi caratterizzata dal fatto di comprendere butilenglicole dicapratodicaprilato in un quantitativo efficace da un punto di vista antiparassitario ed un veicolo fisiologicamente accettabile.
  14. 14. Composizione secondo la rivendicazione 13 caratterizzata dal fatto che detto butilenglicole dicaprato-dìcaprilato è presente in un quantitativo ≥ 10% in peso.
  15. 15. Composizione secondo la rivendicazione 13 -37- Barzanò & Zanardo caratterizzata dal fatto che detto butilengìicole dìcaprato-dicaprilato è presente in un quantitativo ≥ 20% in peso, vantaggiosamente ≥ 40% in peso.
  16. 16. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 13-15 caratterizzata dal fatto di essere in forma liquida scelta tra lozione bifasica acqua/olio o olio/acqua, mousse, shampoo.
  17. 17. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 13-16 caratterizzata dal fatto di comprendere almeno un ulteriore principio attivo antipediculosi scelto dal gruppo di olio di Melaleuca, anetolo, terpineolo, olio di Neem, olio/essenza di Cannella, urea, olio dì Andiroba e/o loro miscele,
  18. 18. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 13-17 caratterizzata dal fatto di comprendere ulteriormente un penetraiion enhancer scelto tra pentilene glicol, etiìesilglicerìna, emulsionanti a catena oleilica e loro miscele.
  19. 19. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 13-17 in forma di lozione bifasica avente la seguente composizione:
    -38- Barzanò & Zanardo
    Barzanò & Zanardo Milano S.p.A.
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