IT201900006038A1 - Composizioni farmaceutiche comprendenti statine e derivati dell’acido ialuronico - Google Patents

Composizioni farmaceutiche comprendenti statine e derivati dell’acido ialuronico Download PDF

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Andrea Pastorello
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Fidia Farm Spa
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Description

Descrizione del brevetto per invenzione industriale avente per titolo:
“COMPOSIZIONI FARMACEUTICHE COMPRENDENTI STATINE E DERIVATI DELL’ACIDO IALURONICO”
La presente invenzione ha per oggetto composizioni farmaceutiche comprendenti miscele di una statina e un derivato ammidico dell’acido ialuronico utili nel trattamento dell’infiammazione e della degradazione della cartilagine articolare osteoartrosica, in particolare dell’osteoartrosi posttraumatica, dell’osteoartrosi da invecchiamento fisiologico dell’articolazione o nel trattamento di altre patologie articolari, quali ad esempio l’artrite reumatoide.
Stato della tecnica
L’osteoartrosi è la più comune forma di artrosi e rappresenta uno dei maggiori unmet clinical need tra le patologie muscoloscheletriche. Sebbene tradizionalmente considerata una patologia “wear and tear” che porta alla distruzione della cartilagine, l’OA è oggi vista come una patologia complessa alla quale partecipano componenti infiammatorie rilasciate dalla cartilagine, dalla sinovia e dall’osso.
L’utilizzo di statine come potenziale trattamento per l’osteoartrosi è stato evidenziato a livello clinico da studi osservazionali (Kadam 2013; Clockaerts 2012) in pazienti sottoposti a terapia di controllo del colesterolo con questa classe di farmaci. Esiste inoltre letteratura riguardante l’efficacia delle statine, in vitro e in vivo, nel ridurre i principali effetti infiammatori osservati nell’osteoartrosi e nell’artrite reumatoide. In particolare si ricordano Dombrecht 2007 e Yudoh 2010 per la simvastatina, Simopopulou 2009 e Pathak 2014 per la atorvastatina, Baker 2012 per la pravastatina.
I benefici derivanti dall’utilizzo orale delle statine sono tuttavia limitati dalla necessità di ricorrere a dosi terapeutiche elevate per ottenere effetti terapeutici a livello articolare.
Inoltre, la biodisponibilità delle statine è limitata dal loro legame alle proteine plasmatiche e dal metabolismo epatico: diversi studi in vitro hanno dimostrato che l’efficacia delle statine in modelli preclinici di osteoartrosi viene ottenuta a concentrazioni nel range micromolare, mentre la concentrazione plasmatica delle statine in pazienti trattati per via orale è nel range nanomolare (Dulak et al., 2005). Ad esempio, i livelli plasmatici di atorvastatina in pazienti ai quali sono prescritte dosi di 10-80 mg/giorno per os sono compresi tra 2 e 200 nmol/litro, mentre l’effetto anti-infiammatorio delle statine sembra essere raggiunto a concentrazioni micromolari. Questo solleva il problema relativo al raggiungimento della dose efficace da somministrare al fine di ottenere un beneficio terapeutico in pazienti con osteoartrosi, senza che aumenti in maniera preoccupante il rischio di effetti collaterali, che comprendono cefalea, dolori muscolari, iperglicemia e aumentato rischio di diabete.
Sono stati fatti alcuni tentativi di somministrare la statina direttamente per via intra-articolare, da sola (Dinc 2012, Akasaki 2009) o associata ad altri componenti, allo scopo di migliorarne l’efficacia, la stabilità e le caratteristiche in generale. Per esempio, EP 2446884 associa le statine ad acido ialuronico lineare così da aumentare le note proprietà anti-infiammatorie di quest’ultimo e migliorarne la performance soprattutto nel trattamento dell’artrite reumatoide; Goto 2017 ha sperimentato in un modello animale l’efficacia di una singola somministrazione di fluvastatina caricata in microsfere di PLGA.
Descrizione dell’invenzione
Si è ora sorprendentemente trovato che gli effetti anti-infiammatori e condroprottetivi tipici delle statine possono essere sinergicamente amplificati, sia rispetto alle sole statine sia rispetto all’associazione con acido ialuronico (HA) lineare, associando le statine a derivati ammidici dell’acido ialuronico.
L’invenzione ha pertanto per oggetto composizioni farmaceutiche comprendenti una statina e un derivato ammidico dell’acido ialuronico: le composizioni, in forma di gel, sono somministrabili per via locale o loco regionale direttamente in cavità articolare, in area periarticolare e/o periossea.
I derivati ammidici di HA utilizzati secondo l’invenzione, caratterizzati da un legame ammidico tra il carbossile di HA lineare ed il gruppo amminico di ammine della serie alifatica, arilalifatica, cicloalifatica, aromatica, ciclica ed eterociclica, con grado di ammidazione da 0,1 al 50%, sono noti da EP1095064 ed EP1853279.
Sono preferiti i derivati ammidici della serie alifatica, in particolare le ammidi esadecilica, octadecilica o dodecilica, più preferibilmente l’ammide esadecilica preparata da un HA con peso molecolare medio ponderale compreso tra 500 kDa e 730 kDa, ed avente un grado medio di ammidazione compreso tra 0,1% e 10% molare, preferibilmente compreso tra 1% e 3% molare, rilevato mediante HPLC dopo idrolisi dell’ammide e coniugazione dell’esadecilammina liberatasi con una sostanza fluorofora. L’ammide esadecilica avente le caratteristiche sopra enunciate e grado medio di derivatizzazione compreso tra 1% e 3% molare è descritta in EP1853279 ed è disponibile con la denominazione di HYADD®-4.
Per peso molecolare medio si intende il peso molecolare medio ponderale calcolato col metodo della “intrinsic viscosity” (Terbojevich et al., Carbohydr Res, 1986, 363-377).
Le statine impiegabili sono preferibilmente simvastatina, mevastatina, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, fluvastatina, rosuvastatina. Statine preferite sono atorvastatina, simvastatina e fluvastatina.
Le composizioni dell’invenzione possono essere preparate sospendendo la statina in una soluzione acquosa tamponata a pH vicino alla neutralità, ad esempio PBS. Alla sospensione ottenuta si aggiunge il derivato ammidico di HA. Il gel ottenuto viene quindi filtrato e sterilizzato con tecniche convenzionali, ad esempio in autoclave.
Quando il derivato ammidico è HYADD®-4, la sua concentrazione varia tra 5 e 15 mg/mL e preferibilmente è 8 mg/mL. La concentrazione della statina varia tra 0,1 e 15 mg/mL, preferibilmente tra 0,5 e 10 mg/mL.
La sterilizzazione della miscela avviene in autoclave quando la statina impiegata è termostabile; in caso di statine non termostabili (per esempio, simvastatina) si può procedere in diversi modi. Ad esempio, si può miscelare in sterile l’idrogel di HYADD®-4 con la polvere di attivo precedentemente sterilizzata a raggi gamma; in alternativa alla polvere, il principio attivo può essere in forma di compressa o cake liofilizzato, di dimensioni ridotte, preparati sempre a partire dalla polvere sterilizzata. In alternativa, si può allestire un kit con doppia siringa, contenenti l’una l’idrogel di HYADD®-4 sterilizzato in autoclave e l’altra la polvere di attivo sterilizzata a raggi gamma. In questo caso, al momento dell’uso si miscela omogeneamente il contenuto delle due siringhe.
Le composizioni dell’invenzione costituiscono un sistema di rilascio controllato liberando gradualmente la statina nel tempo in conseguenza di interazioni idrofobiche con la catena idrocarburica del derivato ammidico dell’acido ialuronico.
La somministrazione per via locale e/o locoregionale, in particolare intra-articolare, aumenta l’efficacia nel sito di interesse, permettendo l’impiego di dosi di attivi molto basse ed evitando così i comuni problemi derivanti dalla somministrazione sistemica (scarsa distribuzione nel distretto anatomico di interesse) e l’insorgenza di effetti collaterali indesiderati legati all’alto dosaggio.
La composizione è inoltre del tutto biocompatibile e bioriassorbibile, dato che è costituita da un derivato di HA già impiegato nella terapia viscosupplementante dell’osteoartrosi e ha un tempo di residenza elevato, visto che l’ammide di HA forma idrogel compatti, a differenza di HA lineare.
La sinergia dell’associazione tra un derivato ammidico di HA, in particolare HYADD®-4, ed una statina è stata evidenziata misurando la liberazione di collagene e di MMP-13 da colture di cartilagine espiantata da bovino. I risultati sono riportai negli esempi e nelle figure allegate.
Le composizioni sono quindi in grado di proteggere la cartilagine articolare da un danno infiammatorio, che può essere indotto da traumi, dal progressivo invecchiamento della struttura articolare stessa o da malattie e possono essere impiegate con successo nella terapia locale e/o locoregionale, in particolare intra-articolare, dell’osteoartrosi in senso generale, in particolare dell’osteoartrosi post-traumatica, dell’osteoartrosi da invecchiamento fisiologico dell’articolazione e dell’artrite reumatoide.
Breve descrizione delle figure
Figura 1: effetto della simvastatina (SIM) in associazione o meno con acido ialuronico lineare (HA) o HYADD®-4 nel ridurre il rilascio di collagene.
Figura 2: effetto della simvastatina (SIM) in associazione o meno con acido ialuronico lineare (HA) o HYADD®-4 nel ridurre la produzione di MMP-13.
Figura 3: confronto fra l’efficacia delle statine simvastatina (SIM), atorvastatina (ATO) e lovastatina (LOV).
L’invenzione è illustrata in dettaglio nei seguenti esempi.
Esempio 1: Preparazione di un gel di HYADD®-4 (8 mg/mL) e atorvastatina (5 mg/mL)
In un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore vengono versati 30 mL di PBS 10 mM, pH 7,4 ± 0,1; si aggiungono quindi 0,5 g di atorvastatina e si mantiene in agitazione per 1 ora al fine di consentire la dispersione uniforme della polvere nella soluzione; si aggiungono 70 ml PBS pH 7,4 ± 0,1 e mantenendo l’agitazione si aggiungono 0,8 g di HYADD®-4; si lascia in agitazione per 3 ore, e poi a riposo per almeno 3 ore. La sospensione gelificata (100 mL) così ottenuta viene mescolata per 30 minuti, filtrata su filtro in acciaio inox con porosità 105 µm, e nuovamente mescolata per almeno 10 minuti. La sospensione viene ripartita in siringhe e sterilizzata in autoclave.
Esempio 2: Preparazione di un gel di HYADD®-4 (8 mg/mL) e atorvastatina (1 mg/mL)
In un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore vengono versati 30 mL di PBS 10 mM, pH 7,4 ± 0,1; si aggiungono quindi 0,1 g di atorvastatina e si mantiene in agitazione per 1 ora per consentire la dispersione uniforme della polvere nella soluzione; si aggiungono 70 ml PBS pH 7,4 ± 0,1 e mantenendo l’agitazione si aggiungono 0,8 g di HYADD®-4; si lascia in agitazione per 3 ore, e poi si lascia riposare per almeno 3 ore. La sospensione gelificata (100 mL) così ottenuta viene mescolata per 30 minuti, filtrata su filtro in acciaio inox con porosità 105 µm, e nuovamente mescolata per almeno 10 minuti. La sospensione viene ripartita in siringhe e sterilizzata in autoclave.
Esempio 3: Preparazione di un gel di HYADD®-4 (8 mg/mL) e simvastatina (5 mg/mL) con miscelazione degli ingredienti presterilizzati.
In un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore vengono versati 100 ml di PBS 4 mM, pH 7,0 ± 0,1; si versano nel reattore, sotto agitazione, 0,8 g di HYADD®-4; l’agitazione viene mantenuta per circa un’ora, e poi si lascia riposare per almeno 3 ore. Il gel ottenuto (100 mL) viene mescolato per almeno 10 minuti, filtrato su filtro in acciaio inox con porosità 105 µm, e nuovamente mescolato per almeno altri 10 minuti. Il gel viene poi sterilizzato in autoclave.
Sotto cappa a flusso laminare (in condizioni asettiche), in un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore e sterilizzato, vengono versati 100 mL del gel contenente 8 mg/mL di HYADD®-4 ottenuto e sterilizzato come sopra descritto; si aggiungono quindi 0,5 g di simvastatina polvere sterilizzata a raggi gamma e si mantiene in agitazione per 3 ore per consentire la dispersione uniforme della polvere nel gel. La sospensione sterile ottenuta viene ripartita in siringhe.
Esempio 4: Preparazione di un gel di HYADD®-4 (8 mg/mL) e simvastatina (5 mg/mL) in kit con doppia siringa.
In un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore vengono versati 100 ml di PBS 4 mM, pH 7,0 ± 0,1; nel reattore, sotto agitazione si aggiungono 0,8 g di HYADD®-4; l’agitazione viene mantenuta per circa un’ora, e poi si lascia riposare per almeno 3 ore. Il gel così ottenuto (100 mL) viene mescolato per almeno 10 minuti, filtrato su filtro in acciaio inox con porosità 105 µm, e nuovamente mescolato per almeno altri 10 minuti.
A questo punto il gel viene ripartito in siringhe da 5 mL con 3 ml di gel ciascuna e le siringhe (tipo A) vengono sterilizzate in autoclave.
In siringhe di capacità 5 mL vengono introdotti 15 mg di simvastatina polvere e le siringhe così riempite (tipo B) vengono sterilizzate mediante irraggiamento con raggi gamma.
Al momento dell’utilizzo la siringa Tipo A viene connessa alla siringa tipo B con connettore luer-look (femmina-femmina). Il contenuto della siringa A viene travasato nella siringa B e nuovamente dalla B alla A. Si ripete questa operazione per 4 volte, ottenendo una sospensione sterile di simvastatina omogeneamente dispersa nel gel a base di HYADD®-4.
Esempio 5: Preparazione di un gel di HYADD®-4 (8 mg/mL) e atorvastatina (5 mg/mL) in kit con doppia siringa.
In un reattore della capacità di 200 mL munito di agitatore vengono versati 100 ml di PBS 4 mM, pH 7,0 ± 0,1; nel reattore, sotto agitazione si aggiungono 0,8 g di HYADD®-4; l’agitazione viene mantenuta per circa un’ora, e poi si lascia riposare per almeno 3 ore. Il gel così ottenuto (100 mL) viene mescolato per almeno 10 minuti, filtrato su filtro in acciaio inox con porosità 105 µm e nuovamente mescolato per almeno altri 10 minuti.
Il gel viene infine ripartito in siringhe da 5 mL con 3 ml di gel ciascuna e le siringhe (tipo A) vengono sterilizzate in autoclave.
In siringhe di capacità 5 mL vengono introdotti 15 mg di atorvastatina polvere e le siringhe così riempite (tipo B) vengono sterilizzate mediante irraggiamento con raggi gamma.
Al momento dell’utilizzo la siringa tipo A viene connessa alla siringa Tipo B con connettore luer-look (femmina-femmina). Il contenuto della siringa A viene travasato nella siringa B e nuovamente dalla B alla A. Si ripete questa operazione per 4 volte, ottenendo una sospensione sterile di atorvastatina omogeneamente dispersa nel gel a base di HYADD®-4.
Esempio 6: Test degradazione della cartilagine ex vivo
L’efficacia del coniugato è stata valutata tramite un modello ex vivo di infiammazione cartilaginea descritto in Chang 2014. La cartilagine è stata raccolta dal solco patello-femorale e dai condili femorali provenienti dal femore di un bovino adulto e sono state effettuate delle biopsie di cartilagine (Ø = 3 mm) utilizzando un apposito punch in acciaio. Le biopsie sono state coltivate in una Multiwell 48-wells (BD Falcon, cat. n. 353078, Italy) a 37°C 5% CO2 per 24 ore in DMEM/F-12 (1:1) (Life Technologies, cat. n. 11320074, Italy) contenente siero fetale bovino 2% (Life Technologies, cat. n. 10270106, Italy). Trascorsa l'incubazione, le biopsie sono state lavate con PBS 1X (Euroclone, cat. n. ECB4004L) e sono state divise in gruppi:
1) un gruppo di controllo, nel quale le biopsie non sono state trattate o stimolate;
2) un gruppo esposto alle citochine pro-infiammatorie OSM e IL-1 (10 ng/mL ciascuna);
3) un gruppo esposto a OSM e IL-1 e trattato con HYADD®-4 (0,1 mg/mL);
4) un gruppo esposto a OSM e IL-1 e trattato con HA lineare 700 kDa (0,1 mg/mL);
5) un gruppo esposto a OSM e IL-1 e trattato con simvastatina (10 µM); 6) un gruppo esposto a OSM e IL-1 e trattato con HA lineare 700 kDa in associazione con Simvastatina 10 µM;
7) un gruppo esposto a OSM e IL-1 e trattato con HYADD®-4 in associazione con simvastatina 10 µM.
Ai tempi 7, 14 e 21 giorni, il medium di coltura delle biopsie è stato aspirato e sostituito con medium di coltura fresco contenente le citochine infiammatorie e i composti oggetto dello studio. Dopo 21 giorni di incubazione, il medium delle biopsie viene raccolto e il collagene solubile rilasciato viene misurato tramite il saggio colorimetrico Sircol collagen assay kit (Biocolor, cat. n. S1000, UK), seguendo le indicazioni fornite dal produttore. Come è possibile osservare in Figura 1, le biopsie del gruppo trattato con OSM e IL-1 rilasciano una quantità significativamente più elevata di collagene solubile nel medium di coltura rispetto al controllo. La simvastatina da sola è in grado di diminuire in maniera significativa il rilascio di collagene da biopsie trattate con stimolo infiammatorio. Anche HA lineare mostra un effetto di riduzione del rilascio di collagene nel medium, decisamente più marcato nelle cellule trattate con il solo HYADD®-4. L'utilizzo combinato di HA in associazione con Simvastatina inibisce il rilascio di collagene in maniera significativa rispetto al controllo positivo (IL-1/OSM), ma in maniera non sostanzialmente differente rispetto all'effetto della simvastatina da sola. L'utilizzo combinato di HYADD®-4 e simvastatina mostra invece un sorprendente effetto di marcata riduzione del rilascio di collagene da parte delle biopsie trattate: tale valore è significativamente superiore rispetto a simvastatina e HYADD®-4 utilizzati da soli alle stesse concentrazioni.
Esempio 7: Test di valutazione dell’espressione di MMP-13
La concentrazione di MMP-13 nei surnatanti ottenuti dalle prove di efficacia sul rilascio del collagene sopra descritte è stata determinata attraverso l’utilizzo di un saggio ELISA (Mybiosource, cat. n. MBS2880297, USA), in accordo con le indicazioni fornite dal produttore del kit, al fine di quantificare la presenza nei campioni del principale enzima responsabile della degradazione della cartilagine. I risultati riportati in Figura 2 mostrano che, come atteso, il trattamento dei campioni con le citochine infiammatorie OSM e IL-1 aumenta in maniera significativa la concentrazione di MMP-13 nel surnatante. La simvastatina da sola è in grado di annullare l'effetto indotto dallo stimolo infiammatorio, riportando le concentrazioni di MMP-13 a valori uguali a quelli misurati nel controllo (CTRL). HA da solo non è in grado di ridurre il rilascio di MMP-13 in maniera significativa rispetto al controllo; al contrario, HYADD®-4 inibisce in maniera significativa il rilascio di MMP-13 nel medium di coltura delle biopsie. Per quanto riguarda le miscele, concentrazioni di MMP-13 non significativamente differenti rispetto alla simvastatina da sola sono stati osservati nei surnatanti delle biopsie trattate con la miscela HA 0,1 mg/mL-simvastatina.
La miscela HYADD®-4-simvastatina è risultata invece straordinariamente efficace nel diminuire la produzione di MMP-13, portando i valori a livelli nettamente inferiori rispetto a quanto osservato per Hymovis da solo.
Ciò conferma che la miscela HYADD®-4-simvastatina esercita un effetto sinergico sulla riduzione della produzione di MMP-13, che è la principale metallo proteasi responsabile della degradazione cartilaginea.
Esempio 8: Confronto di efficacia tra statine
È stata valutata l’efficacia di simvastatina, atorvastatina, lovastatina nella riduzione degli effetti infiammatori indotti dall’esposizione di biopsie di cartilagine bovina alle citochine IL-1 e OSM. A tale scopo, sono state raccolte biopsie di cartilagine dal solco patello-femorale e dai condili femorali provenienti dal femore di 1 bovino adulto (15-18 mesi). I siti dei prelievi non presentavano segni di degradazione o swelling all’ispezione visiva. Le biopsie (Ø = 3 mm) sono state raccolte utilizzando un apposito punch in acciaio.
Le biopsie sono state trasferite ciascuna in un pozzetto di una MW 48-wells e lavate 2 volte con 500 µL PBS 1X (Euroclone, cat. n. ECB4004L, Italy). Sono quindi stati aggiunti ai pozzetti 500 µL DMEM/F-12 (Life Technologies, cat. n. 11320074, Italy) 2% FBS (Life Technologies, cat. n.
10270106, Italia). Le biopsie sono state incubate 24 h a 37°C 5% CO2. Trascorsa l'incubazione, le biopsie sono state lavate con 500 µL PBS 1X e sono stati aggiunti a tutti i pozzetti 500 µL DMEM/F-12 2% FBS contenenti la diluizione del composto da testare. Ciascuna statina è stata impiegata alle concentrazioni 10 µM e 2,5 µM. Per ciascuna condizione sono state usate 4 biopsie. Ai tempi 7, 14 e 21 giorni, il medium di coltura delle biopsie è stato aspirato e rimpiazzato con 500 µL di medium di coltura fresco contenente le appropriate concentrazioni di citochine pro-infiammatorie (IL-1 e OSM, 10 ng/mL) e principi attivi da testare. Il medium di coltura delle biopsie è stato raccolto dopo 21 giorni e utilizzato per determinare il contenuto in collagene solubile. Il saggio Sircol è stato eseguito seguendo le indicazioni fornite dal produttore e la quantificazione è stata effettuata tramite lettura spettrofotometrica a 555 nm.
In Figura 3 è possibile osservare che la simvastatina è in grado di diminuire in maniera significativa il rilascio di collagene da biopsie trattate con stimolo infiammatorio. Anche l'utilizzo della lovastatina ha portato, alla concentrazione 10 µM, a una significativa riduzione del rilascio di collagene indotto dal trattamento con IL-1 e OSM; diminuendo la concentrazione di lovastatina (2,5 µM), si osserva un aumento del rilascio di collagene, con valori che sono paragonabili a quelli del controllo non trattato. Al pari della simvastatina, il trattamento delle biopsie con atorvastatina 10 e 2,5 µM ha portato a una riduzione significativa del rilascio di collagene.
Sulla base dei dati ottenuti è possibile concludere che tutte le statine utilizzate nel saggio sono in grado di ridurre la perdita di collagene da espianti di cartilagine bovina trattati con stimolo infiammatorio; simvastatina e atorvastatina sembrano essere più efficaci anche a concentrazioni inferiori (2,5 µM) rispetto a lovastatina.

Claims (14)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Composizioni farmaceutiche in forma di gel comprendenti una statina e un derivato ammidico dell’acido ialuronico.
  2. 2. Composizioni secondo la rivendicazione 1 in cui il derivato ammidico dell’acido ialuronico è l’ammide esadecilica, octadecilica o dodecilica.
  3. 3. Composizioni secondo la rivendicazione 2 in cui il derivato ammidico dell’acido ialuronico è l’ammide esadecilica.
  4. 4. Composizioni secondo la rivendicazione 3 in cui il derivato ammidico dell’acido ialuronico è l’ammide esadecilica preparata da un acido ialuronico con peso molecolare medio ponderale compreso tra 500 kDa e 730 kDa, ed ha un grado medio di ammidazione compreso tra 0,1% e 10% molare, preferibilmente compreso tra 1% e 3% molare.
  5. 5. Composizioni secondo una o più delle rivendicazioni da 1 a 4 in cui la concentrazione del derivato ammidico di acido ialuronico varia tra 5 e 15 mg/mL e la concentrazione della statina varia tra 0,1 e 15 mg/mL, e preferibilmente tra 0,5 e 10 mg/mL.
  6. 6. Composizioni secondo una o più delle rivendicazioni da 1 a 5 in cui la statina è scelta fra simvastatina, mevastatina, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, fluvastatina
  7. 7. Composizioni secondo la rivendicazione 6 in cui la statina è atorvastatina, simvastatina, fluvastatina.
  8. 8. Composizioni secondo la rivendicazione 4 e 7 in cui l’ammide esadecilica di acido ialuronico con grado medio di ammidazione compreso tra 1% e 3% molare è presente in concentrazione di 8 mg/mL.
  9. 9. Composizioni secondo la rivendicazione 8 in cui la statina è atorvastatina in concentrazione compresa tra 0,5 e 10 mg/mL.
  10. 10. Composizioni secondo la rivendicazione 8 in cui la statina è simvastatina in concentrazione compresa tra 0,5 e 10 mg/mL.
  11. 11. Composizioni secondo la rivendicazione 8 in cui la statina è fluvastatina in concentrazione compresa tra 0,5 e 10 mg/mL.
  12. 12. Composizioni secondo una o più delle rivendicazioni da 1 a 11 per somministrazione locale, locoregionale, periossea, periarticolare, intra-articolare.
  13. 13. Composizioni delle rivendicazioni 1-12 per uso nel trattamento dell’infiammazione e della degradazione della cartilagine osteoartrosica.
  14. 14. Composizioni per uso secondo la rivendicazione 13 per il trattamento dell’osteoartrosi post-traumatica, dell’osteoartrosi da invecchiamento fisiologico dell’articolazione o dell’artrite reumatoide.
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