HUT73489A - Chelators of type xn1s1x' braked with twovalent calcogene atom for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therpeutical uses, and pharmaceutical compositions containing them, and process for producing them - Google Patents

Chelators of type xn1s1x' braked with twovalent calcogene atom for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therpeutical uses, and pharmaceutical compositions containing them, and process for producing them Download PDF

Info

Publication number
HUT73489A
HUT73489A HU9502869A HU9502869A HUT73489A HU T73489 A HUT73489 A HU T73489A HU 9502869 A HU9502869 A HU 9502869A HU 9502869 A HU9502869 A HU 9502869A HU T73489 A HUT73489 A HU T73489A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
cys
ile
asp
leu
ser
Prior art date
Application number
HU9502869A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9502869D0 (en
Inventor
Ludger Dinkelborg
Christoph-Stephan Hilger
Wolfgang Kramp
Hans-Martin Schier
Original Assignee
Diagnostikforschung Inst
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Diagnostikforschung Inst filed Critical Diagnostikforschung Inst
Publication of HU9502869D0 publication Critical patent/HU9502869D0/hu
Publication of HUT73489A publication Critical patent/HUT73489A/hu

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/57536Endothelin, vasoactive intestinal contractor [VIC]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04Organic compounds
    • A61K51/0474Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
    • A61K51/0478Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group complexes from non-cyclic ligands, e.g. EDTA, MAG3
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04Organic compounds
    • A61K51/08Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/57Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C323/58Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton
    • C07C323/59Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton with acylated amino groups bound to the carbon skeleton
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F13/00Compounds containing elements of Groups 7 or 17 of the Periodic Table
    • C07F13/005Compounds without a metal-carbon linkage
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00Preparations for use in therapy
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2123/00Preparations for testing in vivo
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Kétértékű kalkogénatommal megszakított XN^X' típusú kelátképzők radioaktív izotópokhoz, ezek fémkomplexei, valamint alkalmazásuk a diagnosztikában és a gyógyászatban és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás ezek előállítására
A találmány tárgya új kétértékű kalkogénatommal megszakított kelátképző szerek, a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények, alkalmazásuk a radiodiagnosztikában és radioterápiában, valamint eljárás ezen vegyületek és készítmények előállítására.
Régóta ismeretes komplexképzők alkalmazása a radioaktív izotópokhoz, illetve radioaktív fémekkel képzett komplexei a radiodiagnosztikában és radioterápiában, a radiodiagnosztikában leggyakrabban a radionuklid technécium-99m-et használják, amely kedvező fizikai tulajdonságai alapján (nincs korpuszkuláris sugárzás, a felezési idő igen csekély, 6,02 óra, 140 KeV γ-sugárzása jól kimutatható) és mivel a biológiai felezési idő igen csekély, és egyszerűen hozzáférhető, igen alkalmas in vivő felhasználásra.
Aktaszám: 82425-731 9-KY/KmO • ·
A technécium-99m-komplexek képzéséhez először pertechnátot nyernek egy nuklid generátorból, és megfelelő redukálószerek, például SnCI2, S2O42’ felhasználásával alacsony oxidációs fokozatúvá alakítják, és ezt ezt követően megfelelő kelátorral stabilizálják. Minthogy a technécium számos oxidációs fokon (+ 7 -1) előfordulhat, melyek a komplex töltésének változásával erősen megváltoztathatják a farmakológiai tulajdonságokat, szükséges olyan kelátorok, illetve komplex ligandumok előállítása a technécium 99m-hez, amelyek a technéciumot biztosan szilárdan és stabilan megkötik egy definiált oxidációs fokon, és ezzel megakadályozzák, hogy ezáltal in vivő lejátszódó redox folyamatok, illetve technécium felszabadulása megfelelő radiodiagnosztikumból egy nemkívánatos biodisztribuciót hozzon létre, amely megfelelő betegségek biztos diagnosztikáját megnehezíti.
A technécium és rénium izotópokhoz megfelelő komplexképzőnek számítanak például a ciklusos aminok [Troutner, D. E. és munkatársai, J. Nucl. Med. 21. 443 (1980)] melyeknek azonban az a hátránya, hogy először pH 9-nél nagyobb értéknél vannak abban a helyzetben, hogy jó termeléssel megkössék a technécium 99m-t.
Az N2O2 rendszerek [Pillái, M.R.A., Troutner, D.E. és munkatársai, Inorg. Chem. 29. 1850 (1990)] klinikai alkalmazás alatt vannak. Nemciklusos N4-rendszerek, mint például a HMPAO, azzal a nagy hátránnyal rendelkeznek, hogy csekély komplex stabilitásuk van. Instabilitása miatt a Tc-99m-HMPAO-t [Ballinger, J. R. és munkatársai, Appl. Radiat. Isot. 42. 315 (1991), Billinghurst, M. W. és munkatársai, Appl. Radiat Isot.
• · · ·
- 3 42, 607 (1991)] instabilitása miatt azonnal a jelzés után fel kell használni, hogy alacsonyan lehessen tartani a bomlástermékek arányát, melyek más farmakokinetikával és kiválasztással rendelkeznek. Az ilyen radiokémiái szennyeződések megnehezítik a diagnosztizálandó betegségek felismerését. Ezen kelátok, illetve kelátképzök összekapcsolása más szelektív betegség gócokban dús anyagokkal nem mindig megoldható egyszerű szerekkel úgy, hogy ezek általában nem specifikusan oszoljanak el a szervezetben.
Az N2S2 kelátorok [Bormans, G. és munkatársai, Nucl. Med. Biok, 17, 499 (1990)], mint például az etilén-dicisztein [EC; Verbruggen, A. M. és munkatársai, J. Nucl. Med. 33, 551 (1992)] bár teljesítik a megfelelő technécium-99m-komplex megfelelő stabilitása iránti igényt, de a komplexáló közegnek csak pH 9 fölötti értékétől képeznek 69 %-nál nagyobb tisztaságú radiodiagnosztikumokat. Az N3S rendszerek [Fritzburg, A.; EPA 0 173 424 és EPA 0 250 013] bár stabil technécium-99m-komplexeket képeznek, a radioizotóp beépítéséhez azonban körülbelül 100 °C-ra kell ezeket melegíteni.
Az N2S2 és N3S rendszerek további hátránya abból áll, hogy részben gyorsan a szervezet specifikus dúsítása nélkül választódnak ki, úgy hogy csak vese működés diagnosztikumként alkalmazhatók a klinikumban, és ezért alkalmazhatóságuk korlátozott. Az utóbbi években megnőtt az igény a megbetegedett szövetekben gazdag specifikus radiodiagnosztikumok iránt. Ezt úgy lehet elérni, hogyha a komplexképzök könnyen kapcsolhatók a szelektív dúsított anyagokhoz, és ezáltal nem veszítik el kedvező komplexképző tulaj • · · ·
- 4 donságaikat. Minthogy azonban gyakran bekövetkezik, hogy a komplex stabilitás gyengülése figyelhető meg, ha egy komplexképzőt egy reakcióképes csoportja alkalmazása közben egy ilyen molekulához kapcsolunk, kevésbé tűnnek kielégítőnek az eddigi alapanyagok a komplexképzők kapcsolására szelektív dúsított anyagokhoz, mert egy diagnosztikailag nem tolerálható izotóp hányad szabadul fel in vivő a konjugátumból [Brechbiel,
M. W. és munkatársai, Inorg. Chem. 25, 2772 (1986)]. Ezért szükséges olyan kétértékű komplexképzők előállítása, melyek mind a funkcionális csoportokat hordozzák a kívánt fémion megkötéséhez, mind a szelektív dúsuló molekula megkötéséhez egy másik vagy több funkcionális csoportot hordoznak. Az ilyen kétértékű ligandumok teszik lehetővé a technécium vagy rénium-izotópok specifikus kémiailag definiált kötődését különböző biológiai anyagokhoz akkor is, ha úgynevezett elő-jelzést hajtunk végre. Néhány kelátképzőt leírtak, amelyek monoklonális antitestekhez kapcsolódnak (például 0 247 866 számú európai és 0 188 256 számú európai szabadalmi bejelentés), vagy zsírsavakhoz (0 200 492 számú európai szabadalmi bejelentés). Kelátképzőként azonban a már említett N2S2 rendszereket használják, amelyek kevéssé alkalmasak csekély stabilitásuk miatt. Minthogy mind a szelektív dús anyagok tulajdonságaikban, valamint mechanizmusaikban, melyek alapján a dúsulás történik, igen különböző, továbbra is szükséges a kapcsolásra alkalmas kelátképzők variálása azért, hogy a kapcsolási partnerrel szemben támasztott fiziológiai követelményeknek a lipo- és hidrofilia membrán permeabilitás, illetve impermeabilitás szempontjából meg lehessen felelni.
A találmány célkitűzése tehát az volt, hogy olyan stabil komplex vegyületeket állítsunk elő, amelyek összekapcsoltak vagy összekapcsolásra képesek különböző módon szelektív dúsuló vegyületekkel, valamint olyan kapcsolható kelátorokat vagy komplexeket állítsunk elő, melyek a szubsztituensek tág kémiai variációjával rendelkezzenek, hogy meg tudjunk felelni a fent említett követelményeknek.
A találmány további célkitűzése az volt, hogy ilyen vegyületeket és ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítményeket állítsunk elő, valamint kidolgozzuk ezek előállítását.
Meglepő módon a találmány szerint megoldjuk ezt a feladatot azáltal, hogy az új, szokatlan, kétértékű kalkogénatommal megszakított kelátképzők és ezek kapcsolási termékei kiválóan megfelelnek specifikusan dúsított vegyületekkel a radiodiagnosztikumok, illetve radioterápeutikumok előállításának.
A találmány tárgya (Γ) általános képletű vegyületek - ahol
M-L (I')
M jelentése Te vagy Re radioizotóp,
L jelentése (I) általános képletű ligandum,
B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 (I) ahol
A, A' jelentése azonos vagy különböző, és kalkogénatomként oxigént, ként vagy szeléniumot jelent,
- 6 R1, R2, R3, R4, R5 és R6 azonos vagy különböző és lehet hidrogénatom és/vagy egyenes vagy elágazó láncú 1 - 6 szénatomos alkilcsoport,
B jelentése -NH-(CR7R8)-(CR9R10)n=i,2-S-R11 ahol
R7 és R8 azonos vagy különböző, és jelentése hidrogénatom vagy egyenes vagy elágazó láncú ciklusos vagy policiklusos 1-60 szénatomos alki I-, alkenil-, polialkeniI-, alkinil-, polialkinil-, aril-, alkil-aril- vagy aril-alkil-csoport, amely adott esetben helyettesítve lehet karboxil-, amino-karbonil-, alkoxi-karbonil-, amino-, aldehid-, hidroxil-, oxo-, oxi- vagy alkoxicsoporttal, melyek legfeljebb 20 szénatomosak, és adott esetben egy vagy több heteroatommal, mégpedig oxigén-, nitrogén-, kén-, foszfor, arzén vagy szeléniumatommal lehetnek megszakítva és/vagy szubsztituálva,
R9 és R10 azonos vagy különböző és jelentésük hidrogénatom és/vagy egyenes vagy elágazó láncú 1 - 6 szénatomos alkilcsoport,
R11 jelentése hidrogénatom, kénatomot védő csoport, és az R7 vagy R8 jelentésében lévő csoportok, és
R7 és R11 adott esetben a kapcsolódó csoportokkal egy adott esetben hidroxil-, oxo-, oxi- vagy alkoxicsoporttal, melyek legfeljebb 6 szénatomosak lehetnek szubsztituált 4-8 tagú gyűrűt képezhetnek,
R12 jelentése hidrogénatom vagy kalkogén védöcsoport.
- 7 Előnyös (Γ) általános képletú vegyületek azok, ahol A és A' jelentése kénatom, R12 hidrogénatom vagy kénatomot védő csoport.
Különösen előnyös (Γ) általános képletú vegyületek továbbá azok, ahol R7 és R8 egymástól eltérőek, R8, R9 és R10 pedig hidrogénatom.
A találmány további tárgya új (I) általános képletú B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 (I) kétértékű kalkogénatommal megszakított ligandumok, ahol R1, R2, R3, R4, R5, R6, A, A' és B jelentése a fenti.
Előnyös (I) általános képletú találmány szerinti vegyületek azok, ahol A és A' jelentése kénatom és R12 hidrogénatom vagy kénatomot védő csoport.
Különösen előnyösek azok az (I) általános képletú vegyületek, ahol R7, R8 egymástól különbözőek, R8, R9 és R10 pedig hidrogénatomot jelent.
További tárgya a találmánynak az (I') és/vagy (I) általános képletú vegyületet tartalmazó konjugátum, amely szelektív megbetegedett szövetben dús anyagot tartalmaz, miközben ezek között kovalens kötés van, és ezek karboxil- vagy aminocsoportokat tartalmazó anyagok esetében, mint amilyenek a peptidek, proteinek, antitestek vagy ezek fragmentumai, amidszerűen vagy a hidroxilcsoportot tartalmazó anyagok, például zsíralkoholok esetében észterszerúen, vagy az aldehid csoportot tartalmazó anyagok esetében imidszerüen fordulnak elő.
Különösen előnyös találmány szerinti konjugátumok azok, ahol a beteg szövetekben dús anyagok például peptidek, pél- 8 • ·· · dául endotelinek, endotelin rész szekvenciák, vagy endotelin analógok, endotelin származékok vagy endotelin antagonisták.
A további találmány szerint előnyös konjugátumok esetében a peptidek az alábbi szekvenciákkal vagy ezek részével rendelkeznek:
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, • · · · • ·
Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyrt
Tyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Alá-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Alá-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, ir
Cys-Ser-Cys-Asn-Ser-Trp-leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, i--- ~ i
Cys-Ser-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-AsnPhe-Cys-His-Gin-Asp-Val-Ile-Trp i1
Alá-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
I---------------------------------------------------------J
Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
N-Acetyl-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-HisLeu-Asp-Ile-Ile-Trp;.
részszekvencia
His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp vagy a ciklusos aminosavszekvencia:
• ·· · ·· · • · · · •·· ·· ·
- 10 ciklo-(DT rp-DAsp-Pro-DVal-Leu), ciklo-(DGIu-Ala-alloDlle-Leu-DTrp).
A találmány szerinti (I1) általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy technécium-99m-t vagy réniumot pertechnetát vagy perrenát formájában redukálószer jelenlétében és adott esetben egy segédligandum jelenlétében (I) általános képletű vegyülettel
B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 (I) ahol R1, R2, R3, R4, R5, R6, A, A' és B jelentése a fenti, reagáltatunk.
Az (I) általános képletű találmány szerinti ligandumokat úgy állítjuk elő, hogy egy (II) általános képletű vegyületet (III) általános képletű vegyülettel reagáltatunk az 1. reakcióvázlat szerint.
1. reakcióvázlat
X-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12(II) + NH2-CR7R8-(CR9R10)n=i,2-5-R11(III)
->B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12(I)
Az 1. reakcióvázlatban
X jelentése kilépő csoport,
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, A, A' és B jelentése a fenti.
Ezeket a reakciókat végezhetjük poláros vagy apoláros, aprotikus oldószerben, például diklór-metánban, tetrahidrofuránban, kloroformban, 1,4-dioxánban, dimetil-formamidban vagy dimetil-szulfoxidban, -30 °C és +100 °C közötti hőmérsékleten a felszabaduló savak megkötésére segédbázis hozzáadása mellett. Ilyen bázisként használhatunk terei- 11 • »··· ·' f a • · · · · · · • ··· ·· ·· *· • · · · ···· · ··· ··· ♦, # er-amint, alkáli- vagy alkáliföldfém-hidroxidot, alkáli- vagy alkáliföldfém-karbonátot.
A találmány további tárgya egy kit radiofarmakonok előállítására, mely egy (I) általános képletű vegyületből vagy találmány szerinti (Γ) és/vagy (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó konjugátumból és szelektív szövetekben dúsított anyagokból, redukálószerböl és adott esetben segéd ligandumból áll, amely utóbbi száraz állapotban vagy oldatban fordul elő, és kiterjed a találmány a használati utasításra is, amely a reakció előírását tartalmazza a leírt vegyületek technécium-99m-mel vagy Re-rel történő reagáltatására pertechnát-oldat vagy perrenát-oldat formájában.
A találmány tárgya továbbá egy radiogyógyászati összetétel receptorok és receptor tartalmú szövetek és/vagy atheroszklerotikus plakkok nem invazív in vivő ábrázolására, ez az összetétel egy (Γ) általános képletű vegyületet vagy egy találmány szerinti (Γ) és/vagy (I) általános képletű vegyületből álló konjugátumot és szelektív szövetekben dús anyagokat tartalmaz adott esetben a galenikumban szokásos adalékokkal együtt, miközben a vegyületet technécium-99m-mel vagy réniummal egy kit-ben állítjuk elő pertechnetát oldat vagy perrenát-oldat formájában.
A találmány további tárgya radiodiagnosztikus vizsgálat végrehajtásához szolgáló módszer, ahol a radiogyógyászati készítményt 0,1 - 30 mCi, előnyösen 0,5 - 10 mCi adagban adagoljuk egy 70 kg-os súlyú paciensnek, és feljegyezzük a paciens által leadott sugárzást.
····
- 12 Meglepő módon sok szintetizált és Tc-99m-mel vagy Re-vel jelzett kelát nagyobb stabilitást mutat, mint az összehasonlító N2S2 és N3S rendszerek, melyek az irodalomban szerepelnek, így például a találmány szerinti 3a. és 3b. példa szerinti anyagnál, amely egy zsíralkohollal kapcsolódik, nem lehetett 26 óra múlva bomlásterméket megfigyelni. Az összehasonlító kísérleteknél az is megállapítható volt, hogy a találmány szerint leírt Tc-99m vagy Re kelátorok jobban képeznek komplexet, mint az összehasonlító N2S2, N3S és propilén-aminoxin rendszerek. A találmány szerinti leírt kelátok és kelátképzők ezáltal egyértelműen jobban megfelelők diagnosztikai és gyógyászati célokra, mint az eddig ismert rendszerek. A találmány szerinti kelátképzök egy különös előnye abban áll, hogy szintézisüket két védőcsoportok alkalmazása nélkül lehet végrehajtani. Ez a szintézist egyszerűvé teszi, és ezen túlmenően az ilyen találmány szerinti leírt vegyületek azzal az előnnyel rendelkeznek, hogy radiokémiái jelzés után további idegen molekulákat nem tartalmaznak a radiodiagnosztikában, illetve radioterápiában, például intravénásán alkalmazandó oldatokban, melyek gyakran zavarják a radiofarmakon biodisztribucióját, és ezáltal a diagnosztikai információtartalmat hátrányosan befolyásolhatják. Ezen kívül az ilyen ligandumokat, illetve ezek kapcsolási termékein a jelzéseket a szelektív megbetegedett szövetekben dús anyagokban igen enyhe körülmények között lehet elvégezni. így a találmány szerinti ligandumok, ezek kapcsolási termékei jelzése a szelektív megbetegedett szövetekben gazdag anyagokban szobahőmérsékleten és fiziológiai pH-értéken sikerül, anélkül, hogy előzőleg bázissal, savval vagy más, szakember számára
- 13 **·*«»· ·« • · · « · ··· ·· · · ·· • · · ·«« · ··♦ ·· · » .
segédanyaggal le kellene hasítani a védöcsoportokat. Ez biztosítja, hogy az ilyen segédanyagok által gyakran igen érzékeny szelektív megbetegedett szövetekben dús anyagok nem változnak meg kémiailag, ami gyakran csökkenti ezek szelektív dúsulását a megbetegedett szövetben, és ezáltal befolyásolná hátrányosan a radiodiagnosztikum információs tartalmát.
Itt is alkalmazhatók természetesen kén védöcsoportok, hogyha az éppen felvázolt hátrányokat is figyelembe lehet venni. Ilyenkor a védöcsoportok kénatomon történő kialakítása, illetve azok lehasítása szakember számára ismert módon történik. A szelektív megbetegedett szövetben dúsított anyagokra történő kapcsolás szintén szakember számára ismert módszerrel történik, például Fritzberg és munkatársai, J. Nucl. Med. 26., 7 (1987) szakirodalmi helyen leírtak szerint, például úgy, hogy a komplex ligandum elektrofil csoportjait a szelektív megbetegedett szövetekben dús anyagok nukleofil centrumaival reagáltatjuk. Különösen a kelátképzők nukleofil csoportjait kapcsoljuk össze a szelektív megbetegedett szövetekben dús anyagok elektrofil csoportjaival.
Az összekapcsolási partnerek többek között különböző biomolekulák lehetnek, ligandumok, amelyek specifikus receptorokra kötődnek, és így a receptor sűrűségében megváltozott szövetet fel tudják ismerni, ide tartoznak többek között a peptidek és szteroid hormonok, növekedés faktorok, és neuroátvivök. Ligandumokkal szteroid hormon receptorokhoz lehetőség nyílt egy jobb diagnosztikára emlős prosztata karcinómák esetében [S. J. Brandes és J. A. Katzenellenbogen, Nucl. Med. Bioi. 15. 53 (1988)].
• V«»4 »«
- 14 Különbözőképpen mutatnak a tumorsejtek megváltozott receptor sűrűséget peptid hormonoknál vagy növekedési faktoroknál, például epidermal growth factor (EgF) esetében. A koncentrációs különbségeket ki lehetett használni a citosztatikumok szelektív feldúsításához tumor sejtekben [E. Aboud-Pirak és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci, USA 86; 3778, (1989) ]. Többszörösen lehetett alkalmazni a pozitronokat kibocsátó izotópokkal jelzett neuroreceptor ligandumokat különböző agyi megbetegedések diagnosztizálásához [J. J. Forst, Trends in Pharmacol. Sci., 7, 490 (1989)]. További biomolekulák a sejtek metabolizmusába bevihető metabolitok, amelyek felismerhetővé teszik az anyagcsere megváltozását, ide tartoznak például a zsírsavak, szacharidok, peptidek és aminosavak. Az instabil N2S2-kelátképzőkre kondenzált zsírsavakat az EPA 0 200 492-ben írták le. Más anyagcsere termékeket, mint például szacharidokat, dezoxidglükózt, laktátot, piruvátot és aminosavakat, mint például leucint, metil-metionint és glicint a PET-technika segítségével alkalmaztak a megváltozott anyagcsere folyamatok képi ábrázolására [R. Weinreich, Swiss Med., 8, 10 (1986)]. Nem biológiai anyagokat, mint például mizonidazolt és ennek származékait, melyek a szövetekben, illetve szövetrészekben csökkentett oxigén koncentráció mellett irreverzibilisen kötődnek a sejt komponensekhez, alkalmazhatunk radioaktív izotópok specifikus dúsításához, és ezáltal tumorok vagy ischémiás régiók képi ábrázolásához [Μ. E. Shelton, J. Nucl. Med. 30, 351 (1989)]. Végül lehetséges a kétértékű kelátképzök kapcsolása is monoklonális antitestekre, illetve ezek fragmentumaira. Különösen kedvezőnek mutatkoznak a találmány sze ·««· «4 ·
- 15 rinti kelátorok, illetve ezek technécium -99m vagy Re komplexeinek zsíralkoholokkal, zsíralkohol származékokkal vagy zsíraminokkal, illetve ezek származékaival, vagy endotelinnel vagy endotelin rész szekvenciákkal, endotelin analógokkal, endotelin származékokkal vagy endotelin antagonistákkal képezett kondenzációs termékei atheroszklerotikus ér megbetegedések kimutatására. A származékokat WHHL-házinyulakon alkalmaztuk, melyek az LDL receptorok genetikai folytán magas LDL koncentrációt mutatnak a vérben, és így atheroszklerotikus sérüléseket mutatnak. Mintegy 4-5 órával a származékok WHHL-nyulakon történő alkalmazása után ki lehetett mutatni a dúsulási kvócienst a nem károsodott szövettel összevetve, ez az arány az ateromás (faggyúdaganatos) plakkokban 3 - 40. Ezzel az atheroszklerotikus értartományok a radiodiagnosztikában szokásos módszerekkel, például gamma-szcintillációs kamerával kimutathatók. Eddig csak igen késői stádiumban lehetett az atherogenezist invazív eljárással, például arteriográfiával diagnosztizálni. A találmány szerinti anyagok ezért azt az előnyt nyújtják, hogy az atheroszklerózist sokkal korábbi stádiumban nem invazív eljárással lehet diagnosztizálni.
Nem döntő, hogy a kelátképzők jelzése Tc-99m vagy rénium izotóppal a szelektív dúsuló molekulára történő kapcsolás előtt vagy után megy végbe. A szelektív dúsuló molekulára történő kapcsolásnak komplexképzés után azonban az a feltétele, hogy a radioaktív komplex és a dúsuló vegyület reakciója gyorsan menjen végbe, kímélő körülmények között és közel kvantitatív termeléssel úgy, hogy ne legyen szükséges további tisztítás.
• 9
- 16 A találmány szerinti gyógyszerkészítmények előállítása ismert módon történik, mégpedig úgy, hogy a találmány szerinti komplexképzőket redukálószer, előnyösen ón(ll)sók, például klorid vagy tartarát, és adott esetben a galenikumban szokásos adalékok hozzáadása mellett vizes közegben feloldjuk, és utána sterilen leszűrjük. Megfelelő adalék például a fiziológiailag elfogadható pufferek, például trometamin, továbbá kis mennyiségű elektrolit, például nátrium-klorid, stabilizátor, például glükonát, foszfát vagy foszfonát. A találmány szerinti gyógyszerkészítmény oldat vagy liofilizált formában fordul elő, és röviddel az alkalmazás előtt Tc-99m-pertechnát oldattal (kereskedelmi forgalomban kapható generátorból eluálva) vagy perrenát-oldattal elegyítjük.
A nukleár gyógyászati in vivő adagolásnál a találmány szerinti készítményeket 1 x 10'5 - 5x104 nmol/testsúly kg, előnyösen 1 x 10'3 - 5 x 1 02 nmol/testsúly kg dózisban adagoljuk. Egy 70 kg-os átlagos testsúlyból kiindulva a diagnosztikai alkalmazáshoz szükséges radioaktivitás mennyiség 0,05 és 50 mCi, előnyösen 5 - 30 mCi között van egyszeri alkalmazásnál. A gyógyászati alkalmazásnál 5 - 500 mCi-t, előnyösen 10 - 350 mCi-t alkalmazunk. Az adagolás rendszerint intravénás, intraarteriáIis, peritoneális vagy intratumorális injekcióval történik, mégpedig 0,1 - 2 ml találmány szerinti szer oldatát adagoljuk. Előnyös az intravénás adagolás.
A találmány további részleteit a következő példákkal világítjuk meg.
• ···· ··· <·«' ··;· , ·
a. példa
2,5-Ditia-ciklohexanon ml, 1,6 mól 1,2-dimerkapto-etán és 168 ml, 1,2 mól trietil-amin 600 ml vízmentes diklór-metánnal készített kevert oldatához jeges hűtés közben 48 ml, 0,6 mól klór-acetil-kloridot csepegtetünk 300 ml vízmentes diklór-metánban oldva. Ezt követően 3 óra hosszat keverjük szobahőmérsékleten, majd a trietil-amin hidrokloridot leszűrjük, és a szerves fázist vízzel mossuk. Magnézium-szulfát felett szárítva az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékot vákuumban desztilláljuk [J. Larsen és munkatársai, Synthesis, 1 34, (1989)] alapján. Kitermelés: 52 g (65 %) sárgás olaj
Elemanal ízis:
Számított: C % = 35,80; H % = 4,51; O% = 11,92; S % = 47,76; Talált: C % = 35,63; H % = 4,68; S % = 47,49.
b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(metoxi-karbonil)-eti l)-merkapto-ecetsavam id
17,16 g, 0,1 mól cisztein-metil-észter-hidroklorid és 10,12 g, 0,1 mól trietil-amin 500 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatához argon atmoszférában 13,42 g, 0,1 mól 2,5-ditia-ciklohexanont csepegtetünk 250 ml vízmentes diklór-metánban oldva. A reakcióelegyet egész éjjel keverjük szobahőmérsékleten, majd 3x2 %-os vizes citromsavval, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk. Az olajos maradékot dietiI-éterrel eldörzsölve kristályosítjuk.
• · · · · » · • ··· ♦ · · I» · ·
- 18 Kitermelés: 21,32 g (79,1 %) fehér por.
Elemanalízis:
Számított: C% = 35,67; H% = 5,61; N% = 5,20; 0% = 17,82; S% = 35,70; Talált: C% = 35,48; H% = 5,72; N% = 4,97; S% = 35,43.
c. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1-(metoxi-karbonil)-etil)-merkapto-ecetsavamid, technétium-99m-komplex mg 1. példa szerinti ligandumot feloldunk 1 ml 0,5 molos pH 7,5 értékű foszfát-pufferban. 50 μΙ kapott ligandum oldatot 250 μΙ foszfát-pufferrel, melynek pH-értéke 7,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldatta I (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(ll)-klorid oldattal (5 mg/ml 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnát oldattal (400-90 μϋΐ) elegyítünk. A reakcióelegyet 10 perces inkubációs idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a képződött Tc-komplex tisztaságát: Hamilton PROPIONIL-1 oszlop 5 pmól 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás 100 % A 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH 7,4, (75/25); 2,0 ml/perc. A radiokémiái tisztaság > 98 %.
a. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(hidroxi-karbonil)-etil)-merkapto-ecetsavamid
2,69 g, 10 mmol 1 b. példa szerint előállított ligandumot 200 ml 2 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal oldunk argon atmoszférában. 2 órás keverés után szobahőmérsékleten argonnal telített koncentrált sósavval a pH-t 3-ra állítjuk, és a kivált olajat kielégítően extraháljuk etil-acetáttal.
• · · · · • · · · ·· • · · ····· ·
- 19 Nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, és az olajos maradékot dietil-éterrel eldörzsölve kristályosítjuk.
Kitermelés: 732 mg (28,7 %), fehér por.
Elemanalízis:
Számított: C% = 32,92; H% = 5,13; N % = 5,49; O% = 18,80; S% = 37,66;
Talált: C% = 32,73; H % = 5,38; N% = 5,30; S% = 37,41.
2 b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(hidroxi-karbonil)-etil)-merkapto-ecetsavamid, technécium-99m-komplex mg 2 a. példa szerint előállított ligandumot feloldunk 1 ml 0,5 m pH 7,5 értékű foszfát-pufferban. 50 μΙ ligandum oldatot 250 μΙ foszfát-pufferrel pH 7,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldattal (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(ll)-klorid oldattal (5 mg/ml, 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnátoldattal (400 - 900 pCi) elegyítünk. A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után megvizsgáljuk HPLC-vel a keletkezett Tc-komplex tisztasága szempontjából: Hamilton PRP-1 oszlop, 5 pm, 125 x 4,6 mm; gradienseluálás 100 % A 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát, 0,005 mól, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH 7,4 (75/25); 2 ml/perc. Radiokémiái tisztaság: >98 %.
a. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(deci loxi-karboni I)-eti l)-merkapto-ecetsavamid
29,79 g, 0,1 mól cisztein-decilészter-hidroklorid és 10,12 g,
0,1 mól trietil-amin 500 ml vízmentes diklór-metánnal készített • · ·
- 20 oldatához argon atmoszférában 13,42 g, 0,1 mól 2,5-ditia-ciklohexanont csepegtetünk 250 ml vízmentes diklór-metánban oldva. A reakcióelegyet egész éjjel szobahőmérsékleten keverjük, majd 3x2 %-os vizes citromsavval, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk. Az olajos maradékot dietil-éterrel eldörzsölve kristályosítjuk.
Kitermelés: 31,45 g (79,5 %) fehér por.
Elemanalízis:
Számított: C% = 51,61; H % = 8,41; N% = 3,54; O% = 12,13; S% = 24,31;
Talált: C% = 51,48; H% = 8,52; N% = 3,40; S% = 24,05.
3 b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(deciloxi-karbonil)-etil)-merkaptoecetsav, technécium-99m-komplex mg 3 a. példában leírt módon előállított ligandumot feloldunk 1 ml etanolban és elegyítünk 50 μΙ fenti ligandum oldatot 250 μΙ foszfát-pufferrel, melynek pH-értéke 8,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldattal (50 pg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(lI)-kIőrid-oIdattaI (5 mg/ml, 0,05 N HCI) és 100 μΙ pertechnát-oldattal (400 - 900 μθΐ). A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a keletkezett Tc-komplex tisztaságára: Hamilton PRP-1 oszlop, 5 μιτι, 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás 100 % A 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát, 0,005 M, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát: 0,005 M, pH 7,4 (75/25); 2,0 ml/perc. A radiokémiái tisztaság >95%.
a. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(2-metoxi-karbonil)-etil)-merkapto -ecetsava mid
2,69 g (10 mmol) 1 b. példa szerint leírt ligandumot 190 mg (1 mmol) toluol-szulfonsav-hidrát jelenlétében argon atmoszférában melegítünk 250 ml vízmentes etilén-glikol-monometil-éterben, visszafolyató hűtő alatt 6 óra hosszat. Ezt követően az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, és az olajos maradékot diklór-metánban felvesszük. A diklór-metán oldatot 3 x 2 %-os vizes citromsavval, majd telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, és az olajat kovasavgélen kromatografáljuk. Eluálószer: diklór-metán és metanol 8:2 arányú elegye. Ezt követően diétiI-éterböI kristályosítjuk.
Kitermelés: 632 mg, 22,2 % fehér por.
Elemanalízis:
Számított: C% = 38,32; H%=6,11; N% = 4,47; 0% = 20,42; S% = 30,68; Talált: C% = 38,14; H% = 6,37; N% = 4,18; S% = 30,41.
b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(2-metoxi-etoxi-karboni I )-eti l)-merkapto-ecetsavamid, technécium-99m-komplex mg 4 a. példa szerint előállított ligandumot feloldunk 1 ml etanolban, 50 pl ligandum oldatot elegyítünk 250 μΙ pH 8,5 értékű foszfátpufferrel, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oIdattaI (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(lI)-kIorid-οIdattaI (5 mg/ml, 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnát-oldattal (400 - 900
pCi). A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a képződő Tc-komplex tisztaságára. Hamilton PRP-1 oszlop, 5 pm, 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás: 100 % A-val 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 m, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril:nátrium-hidrogén-foszfát: 0,005 m, pH 7,4, (75:25); 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
a. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(oktil-amino-karboni l)-etil)-merkapto-ecetsavamid
2,69 g, 10 mmol 1 b. példa szerint előállított ligandum 30 ml etanollal készített oldatához hozzáadunk 70 ml n-oktil-amint, és a reakcióelegyet 6 óra hosszat forrásig melegítjük argon atmoszférában. Ezt követően finom vákuumban bepároljuk, a maradékot 200 ml 2 %-os vizes citromsavval és 200 ml diklór-metánnal elegyítjük argon atmoszférában. Az elegyet 15 percig hevesen keverjük, a diklór-metán fázist elválasztjuk, és 3 x 2 %-os vizes citromsavval, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószer csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékot kovasavgélen kromatografáljuk. Eluálószerként diklór-metán és metanol 95:5 arányú elegyét használjuk. Ezt követően dietil-éterből átkristályosítjuk.
Kitermelés: 548 mg (14,9 %) fehér por.
• ·
- 23 • · · · · ··· · · · · ·· ·· ····· ·
Elemanalízis:
Számított: C% = 49,15; H% = 8,25; N% = 7,64; O% = 8,73; S% = 26,24;
Talált: C% = 49,08; H% = 8,31; N% = 7,66; S% = 26,02.
5 b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(oktil-amino-karboni l)-eti l)-merkapto-ecetsavamid, technécium-99m-komplex mg 5 a. példa szerint előállított ligandumot feloldunk 1 ml etanolban. Hozzáadunk 50 μΙ ilyen ligandum oldathoz 250 μΙ foszfát-puffért, pH 8,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldatot (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(lI)-kIorid-οIdatot (5 mg/ml, 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnát-oldatot (400 - 900 μθί). A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a keletkezett Tc-komplex tisztaságára: Hamilton PRP-1 oszlop, 5 μω, 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás: 100 % A-val 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 m, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril:nátrium-hidrogén-foszfát: 0,005 m, pH 7,4, (75:25); 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
a. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(2,3-dihidroxi-propi I-ami no-karboni l)-etil)-merkapto-ecetsavamid
2,69 g, 10 mmol 1 b. példa szerint előállított ligandumot 30 ml etanolban és 30 ml amino-propán-diolban melegítünk 7 óra hosszat argon atmoszférában forrásig. Ezt követően csökkentett nyomáson az etanolt ledesztilláljuk, a maradékot argonnal telített vízzel elegyítjük, majd ezt követően argonnal telített koncentrált sósavval a pH-t 7-re állítjuk. A sárgás oldatot fagyaszt- • · • ··· ·« · · ·· • ·· ····· «·«··· ·· · ·♦
- 24 va szárítjuk, és a maradékot kovasavgél RP 18-on kromatografáljuk (eluálószer: víz, tetrahiperofurán 0-50 % elegyét használjuk. Az oldószert lepárolva színtelen üveget kapunk.
Kitermelés: 378 mg (10 %), színtelen üveg. Elemanalízis a vízmentes anyagra vonatkoztatva: Számított: C% = 36,57; H%=6,14; N% = 8,53; O% = 19,48; S% = 29,28;
Talált: C% = 36,31; H% = 6,47; N% = 8,34; S% = 29,01.
b példa
S-82-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(2,3-dihidroxi-propil-amino-karbonil)-etil)-merkaptoecetsavamid, technécium-99m-komplex mg 6 a. példa szerint előállított ligandumot feloldunk 1 ml etanolban. Hozzáadunk 50 μΙ ilyen ligandum oldathoz 250 μΙ foszfát-puffért, pH 8,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldatot (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(l I)-ki o ri d-ο I d a tót (5 mg/ml, 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnát-oldatot (400 - 900 μθί). A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a keletkezett Tc-komplex tisztaságára: Hamilton PRP-1 oszlop, 5 pm, 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás: 100 % A-val 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 m, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril:nátrium-hidrogén-foszfát: 0,005 m, pH 7,4, (75:25); 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
• ·
a. példa S-(2-IVIerkapto-etil)-N-(2-merkapto-1-(karbonil-His-Leu-Asp-lle-lle-Trp)-etil)-merkaptoecetsav-amid
900 mg (1 mmol) NH2-Cys-His-Leu-Asl-lle-lle-Trp (előállítás: Bárány és Merrifield analógiájára, The Peptides: Analysis, Biology, Academic Press, New York, 1980; Stewart and Young, Solid Phase Peptides Syntheses, 2. kiadás, Pierce Chemical W., Rockford, II, 1984) és 304 mg, 3 mmol trietil-amin 100 vízmentes dimetil-formamiddal készített oldatához argon atmoszférában hozzáadunk 134 mg (1 mmol) 1 a. példa szerinti
2,5-ditia-ciklohexanont és a kapott reakcióelegyet 13 óra hoszszat szobahőmérsékleten keverjük. A reakció befejezése után leszűrjük, az oldószert csökkentett nyomáson leszívatjuk. A visszamaradó olajat háromszor elegyítjük 50 ml dimetil-formamiddal és bepároljuk. A maradékot 100 ml vízmentes dietil-éterben elkeverjük. Ezáltal fehér szilárd anyag válik ki, amelyet leszűrünk. A tisztításhoz dimetil-formamid és dietil-éter elegyéből átkristályosítjuk.
Kitermelés: 423 mg (40,9 %), fehér por. Analízis a vízmentes anyagra vonatkoztatva: Számított: C% = 53,47; H% = 6,63; N% = 13,56; O% = 17,03; S%=9,31;
Talált: C% = 53,19; H% = 6,92; N% = 13,28; S% = 8,97.
b. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(karbonil-His-Leu-As p-lle-lle-Trp)-éti I-merkapto-ecetsa várni d, technécium-99m-komplex mg 7 a. példa szerint előállított ligandumot feloldunk 1 ml etanolban. 50 pl kapott ligandum oldatot elegyítünk 250 μΙ
- 26 foszfát-pufferrel, melynek pH-értéke 8,5, 50 μΙ dezoxigénezett vizes citrát-oldattal (50 mg/ml), 2,5 μΙ dezoxigénezett vizes ón(l l)-kl őri d-ol dattal (5 mg/ml, 0,05 n sósav) és 100 μΙ pertechnát-oldattal (400 - 900 μθΐ). A reakcióelegyet 10 perc inkubálási idő után HPLC-vel megvizsgáljuk a keletkezett Tc-komplex tisztaságára: Hamilton PRP-1 oszlop, 5 μιτι, 125 x 4,6 mm; gradiens eluálás: 100 % A-val 100 % B után 7,5 perc alatt (A eluálószer: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 mól, pH 7,4; B eluálószer: acetonitril:nátrium-hidrogén-foszfát: 0,005 M, pH 7,4, (75:25); 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság 95 % feletti.
8. példa
S-(2-Merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(deciloxi-karbonil)-eti l)-merkapto-ecetsavamid dúsítása technécium-99m-komplex atheroszklerotikus WHHL nyulak érsérüléseiben
A 3a. példa szerint előállított S-(2-merkapto-etil)-N-(2-merkapto-1 -(deci loxi-karbon il)-etil)-merkaptoecetsava mid jelzése a 3 b. példában leírt módon történik.
99,9 Gbq (2,7 mCi) 3 b. példa szerint jelzett anyagot foszfátpufferezett fiziológiás sóoldattal hígítunk 1 ml-re, és egy narkotizált WHHL-nyúlra alkalmazzuk Rompun/Ketavet 1:2 egy fül vénán keresztül. 5 órával az alkalmazás után leöljük a nyulat, és mind az aorta autoradiográfiáját, mind egy Sudan-lll színezést végzünk az atheroszklerotikus plakk kimutatására (1 ábra). A normális és atheroszklerotikus fal tartományok dúsulási tényezője a plakk képződés után 3 és 8 között van.

Claims (7)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. (I) általános képletű vegyületek - ahol B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 (i)
    A, A' jelentése azonos vagy különböző, és kalkogénatomként oxigént, ként vagy szeléniumot jelent,
    R1, R2, R3, R4, R5 és R6 azonos vagy különböző és lehet hidrogénatom és/vagy egyenes vagy elágazó láncú 1-6 szénatomos alkilcsoport,
    B jelentése -NH-(CR7R8)-(CR9R10)n=i,2-S-R11 ahol
    R7 és R8 azonos vagy különböző, és jelentése hidrogénatom vagy egyenes vagy elágazó láncú ciklusos vagy policiklusos 1 - 60 szénatomos alk.il-, alkeniI-, poIiaIkeniI-, alkinil-, polialkinil-, aril-, alkil-aril- vagy aril-alkil-csoport, amely adott esetben helyettesítve lehet karboxil-, amino-karbonil-, alkoxi-karbonil-, amino-, aldehid-, hidroxil-, oxo-, oxi- vagy alkoxicsoporttal, melyek legfeljebb 20 szénatomosak, és adott esetben egy vagy több heteroatommal, mégpedig oxigén-, nitrogén-, kén-, foszfor, arzén vagy szeléniumatommal lehetnek megszakítva és/vagy szubsztituálva,
    R9 és R10 azonos vagy különböző és jelentésük hidrogénatom és/vagy egyenes vagy elágazó láncú 1-6 szénatomos alkilcsoport,
    R11 jelentése hidrogénatom, kénatomot védő csoport, és az R7 vagy R8 jelentésében lévő csoportok, és
    - 28 • ···« ·» · ·· • · · » · · · • ··· «· ·· ·· * · · ····· · ····*« ·· · · «
    R7 és R11 adott esetben a kapcsolódó csoportokkal egy adott esetben hidroxil-, oxo-, oxi- vagy alkoxicsoporttal, melyek legfeljebb 6 szénatomosak lehetnek szubsztituált 4 - 8 tagú gyűrűt képezhetnek,
    R12 jelentése hidrogénatom vagy kalkogén védőcsoport, továbbá az (I) általános képletű vegyületet tartalmazó konjugátum, amely szelektív megbetegedett szövetben dús anyagot tartalmaz, miközben ezek között kovalens kötés van, és ezek karboxil- vagy aminocsoportokat tartalmazó anyagok esetében, mint amilyenek a peptidek, proteinek, antitestek vagy ezek fragmentumai, amid- vagy a hidroxilcsoportot tartalmazó anyagok, például zsíralkoholok esetében észterszerúek, vagy az aldehid csoportot tartalmazó anyagok esetében imidszerűek, és ezek Te vagy Re radioizotópokkal képezett komplexei.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy A és A' jelentése kénatom és R12 jelentése hidrogénatom vagy kén védőcsoport.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R7 és R8 különbözőek, és R8, R9 és R10 jelentése hidrogénatom.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy a megbetegedett szövetekben dús anyagok peptidek, például endotelinek, endotelin rész szekvenciák, endotelin analógok, endotelin-származékok vagy endotelin antagonisták.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, ahol a peptidek az alábbi szekvenciákat vagy részeit mutatják:
    l ---]
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr11
    Tyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr11
    Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    I 'I
    Cys-Ser-Cys-Asn-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, |I
    Cys-Ser-Cys-Lys-Asp-Me t-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-AsnPhe-Cys-His-Gin-Asp-Val-Ile-Trp,
    I '’ I
    Ala-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    - 30 ♦ • ··
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    I--------------------------------------------------------------------1
    Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    N-Acetyl-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-AlaHis-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, részszekvencia
    His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp vagy a ciklusos aminosavszekvencia:
    ciklo-(DTrp-DAsp-Pro-DVal-Leu), ciklo-(DGIu-Ala-alloDlle-Leu-DTrp).
  6. 6. Eljárás az 1. igénypont szerinti vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű vegyületet (III) általános képletű vegyülettel reagáltatunk az alábbiak szerint:
    • ·· ··,
    X-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 + NH2-CR7R8-(CR9R10)n=i.2-5-R11
    ->B-CO-CR1R2-A-CR3R4-CR5R6-A'-R12 (II) (III) (I) ahol
    X jelentése kilépő csoport, és
    R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, A, A' és B jelentése az
    1. igénypont szerinti, és adott esetben az előállított vegyületeket megbetegedett szövettel vagy tumorral szelektív dúsított anyaggal konjugáljuk, az ezek között létrejött kovalens kötés aminocsoportokat tartalmazó anyagok, például peptidek, proteinek, és antitestek esetében amid- vagy hidroxilcsoportokat tartalmazó anyagok, például alkohol esetében észter- vagy aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetében imid-szerüen keletkezik, és az így kapott vegyületeket és konjugátumokat technecium-99m-mel vagy réniummal reagáltatunk pertechnetát vagy perrenát formájában redukálószer és adott esetben segéd-ligandum jelenlétében.
  7. 7. Radiogyógyászati készítmény receptorok és receptortartalmú szövet és/vagy atheroszklerotikus plakkok nem invazív in vivő ábrázolására, azzal jellemezve, hogy egy 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy konjugátumot és adott esetben a galenikumban szokásos adalékot tartalmaz.
HU9502869A 1993-03-31 1994-03-29 Chelators of type xn1s1x' braked with twovalent calcogene atom for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therpeutical uses, and pharmaceutical compositions containing them, and process for producing them HUT73489A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4310999A DE4310999C2 (de) 1993-03-31 1993-03-31 Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner vom Typ XN¶1¶S¶1¶X' für radioaktive Isotope und deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9502869D0 HU9502869D0 (en) 1995-11-28
HUT73489A true HUT73489A (en) 1996-08-28

Family

ID=6484671

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9502869A HUT73489A (en) 1993-03-31 1994-03-29 Chelators of type xn1s1x' braked with twovalent calcogene atom for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therpeutical uses, and pharmaceutical compositions containing them, and process for producing them

Country Status (12)

Country Link
US (1) US5961954A (hu)
EP (1) EP0692981B1 (hu)
JP (1) JPH08511237A (hu)
KR (1) KR960700762A (hu)
AT (1) ATE179078T1 (hu)
AU (1) AU692154B2 (hu)
CA (1) CA2156619A1 (hu)
DE (2) DE4310999C2 (hu)
HU (1) HUT73489A (hu)
NO (1) NO953868L (hu)
NZ (1) NZ263795A (hu)
WO (1) WO1994022493A1 (hu)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4311022C2 (de) * 1993-03-31 1996-07-11 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner vom Typ S¶3¶N¶2¶ für radioaktive Isotope und deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel
DE19536781A1 (de) * 1995-09-21 1997-03-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ XSNS für radioaktive Isotope
DE19536785A1 (de) * 1995-09-21 1997-03-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ S¶2¶NY für radioaktive Isotope
DE19652374A1 (de) * 1996-12-04 1998-06-10 Schering Ag Verwendung von Endothelin-Konjugaten in der Therapie, neue Endothelin-Konjugate, diese enthaltende Mittel, sowie Verfahren zu deren Herstellung
CN100528241C (zh) * 2002-05-06 2009-08-19 恩多塞特公司 维生素-定向的显象剂
US20080058674A1 (en) * 2006-08-29 2008-03-06 Lex Jansen Tissue extraction device and method of using the same

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0063946A1 (en) * 1981-04-21 1982-11-03 AMERSHAM INTERNATIONAL plc Diagnosis of kidney function
EP0089143A1 (en) * 1982-03-16 1983-09-21 AMERSHAM INTERNATIONAL plc Diagnosis of kidney function
US4980147A (en) * 1984-06-25 1990-12-25 University Of Utah Research Foundation Radiolabeled technetium chelates for use in renal function determinations
ATE66469T1 (de) * 1985-01-14 1991-09-15 Neorx Corp Metall-radionuklid markiertes protein fuer diagnose und therapie.
DE3762624D1 (de) * 1986-05-28 1990-06-13 Mallinckrodt Inc Technetiumchelate fuer die bestimmung der nierenfunktion.
US4861869A (en) * 1986-05-29 1989-08-29 Mallinckrodt, Inc. Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins
WO1989000557A1 (en) * 1987-07-16 1989-01-26 Cockbain, Julian, Roderick, Michaelson Aminopolycarboxylic acids and derivatives thereof
AU1995392A (en) * 1991-05-08 1992-12-21 Mallinckrodt Medical, Inc. Technetium chelates to be used for determining the renal function
JPH0570484A (ja) * 1991-09-12 1993-03-23 Hitachi Chem Co Ltd ペプチドおよびその塩
DE69332470D1 (de) * 1992-02-06 2002-12-12 Biosynthema Inc Liganden zur verbesserung der metallchelatbildungskinetik
DE4311023C2 (de) * 1993-03-31 1996-05-02 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner von Typ XN¶1¶S¶1¶O¶1¶ für radioaktive Isotope, deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel
DE4311021A1 (de) * 1993-03-31 1994-10-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle Chelatbildner, deren Technetium- und Rhenium-Komplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Mittel
DE4311022C2 (de) * 1993-03-31 1996-07-11 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner vom Typ S¶3¶N¶2¶ für radioaktive Isotope und deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel

Also Published As

Publication number Publication date
AU692154B2 (en) 1998-06-04
ATE179078T1 (de) 1999-05-15
HU9502869D0 (en) 1995-11-28
NZ263795A (en) 1997-01-29
DE4310999C2 (de) 1996-07-18
CA2156619A1 (en) 1994-10-13
DE59408144D1 (de) 1999-05-27
NO953868L (no) 1995-11-23
KR960700762A (ko) 1996-02-24
DE4310999A1 (de) 1994-10-06
JPH08511237A (ja) 1996-11-26
WO1994022493A1 (de) 1994-10-13
NO953868D0 (no) 1995-09-29
AU6501894A (en) 1994-10-24
EP0692981B1 (de) 1999-04-21
US5961954A (en) 1999-10-05
EP0692981A1 (de) 1996-01-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100235137B1 (ko) 모노아민, 다아민, 티올-함유 금속 킬레이트제
US7674886B2 (en) Bridged aromatic substituted amine ligands with donor atoms
EP0329481A2 (en) Anchimeric radiometal chelating compounds
IL95547A (en) Diamine compounds crystallize methods for their preparation and pharmaceutical and diagnostic preparations containing them
HU225487B1 (en) Method for the preparation of facial metal tricarbonyl compounds and their use in the labelling of biologically active substrates
AU691806B2 (en) Chelating agents of the type XN1S1O1 for radioactive isotopes, metal complexes thereof, and their use in diagnosis and therapy
CN116194155A (zh) 用于前列腺癌放射疗法和成像的靶向psma的基于脲的配体
CA2232340A1 (en) Bifunctional nicotinamide-chelating agents such as n2s2 for radioactive isotopes
CA2232391A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as xsns for radioactive isotypes
HUT73489A (en) Chelators of type xn1s1x&#39; braked with twovalent calcogene atom for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therpeutical uses, and pharmaceutical compositions containing them, and process for producing them
US6488909B1 (en) Chelating agents as well as their tricarbonyl complexes with technetium and rhenium
CA2232315A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as s2 ny for radioactive isotopes
IE920761A1 (en) Chelates, their metal complexes as well as their use in¹diagnosis and treatment
AU692153B2 (en) Type S3N2 chelators for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therapeutical use
WO2003027148A1 (en) Disulfide-reduced neogalactosyl serum albumin and use of radiolabeled derivative thereof for liver imaging
CA2194561A1 (en) Technetium-sulphonamide complexes, their use, pharmaceutical agents containing them, and process for producing the complexes and agents
JP4478486B2 (ja) ビスホスホン酸誘導体及びその塩並びに放射性骨診断剤
CA2232620A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as xsny for radioactive isotopes
JPH11505852A (ja) 隔離された画像診断剤
Ahn et al. MAG {sub 2} GABA-biocytin synthesized with new intermediates for radiolabelling {sup 99m} Tc and {sup 188} Re
WO1996007629A1 (en) Technetium chelates to be used for determining the renal function

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee