HUT65880A - Process for preparation of ophtalmological medicaments containing pyridine derivatives usefules for treatment of ocular hypertension - Google Patents

Description

^iridin-származékoX^a-MtalmaBáaa·-(Szemészeti készítményekben j) okuláris hipertenzió kezelésére

ALLERGAN INC., Irvine, California, AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

Feltalálók:

WOLDE MUSSIE Elizabeth,

CHEN June,

RUIZ Guadalupe,

Costa Mesa,

San Juan Capistrano,

Corona, /alifornia California California

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A bejelentés napja: 1991. 11. 13.

Elsőbbsége:

1990. 11. 29.

(620,841)

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A nemzetközi bejelentés száma: PCT/US91/08484

A nemzetközi közzététel száma: WO 92/09280

77298-5021/SL

A találmány bizonyos piridin-származékoknak az okuláris hipertenzió kezelésére történő alkalmazására vonatkozik.

Az okuláris hipertenziós szereket különböző okuláris hipertenziós állapotok, igy a sebészeti beavatkozás vagy lézeres trabekulektomiát követő okuláris hipertenziós állapotok, glaukoma és műtétre való felkészítés során alkalmazzák.

A glaukoma olyan szembetegség, amelyre a fokozott intraokuláris nyomás jellemző. Etiológiája alapján a glaukoma primer vagy szekunder glaukomára osztható. így például a primer glaukoma jellemzője felnőtteknél a nyílt szemzug vagy az akut vagy krónikusan zárt szemzug. A szekunder glaukoma korábbi szembetegségekből, igy uvea gyulladásból, intraokuláris tumorból vagy kiterjedt szürkehályogból származik.

A primer nyílt szemzug glaukoma a látóideg betegsége, ami az intraokuláris nyomás (IOP) növekedésével jár. Ennek oka, hogy csökkena a csarnokviz kiáramlása a gerendahálózaton keresztül (Johnson D.H. és Brubaker R.F.: Glaucoma: An overview. Mayo Clin. Proc., Gl: 59-67 (1986)).

A krónikus nyílt szemzug glaukomában az elülső kamra és ennek anatómiai felépítése normálisnak tűnik, de a csarnokviz elvezetése gátolva van. Akut vagy krónikus zárt szemzug glaukománál az elülső csarnok lapos, a szűrési szög beszűkül, és az Írisz eldugaszolja a gerendahálózatot a Schlemm csatorna belépésénél. A pupilla kitágulásának következtében az írisz gyökere nekinyomódik a szemzugnak, ami pupilláris blokkolást, és igy akut rohamot válthat ki. Az • · ····· ···· * · · · · ·· ·· • ···«··· ···· ··· · « ·· · ·

- 3 elülső csarnoknál keskeny szemzuggal rendelkező szemnél erős hajlam tapasztalható a különböző sulyosságu akut, zárt szemzug glaukomás rohamra.

A szekunder glaukoma oka, hogy zavar támad a csarnokvíznek a hátsó szemcsarnokból az elülső csarnokba, és onnan a Schlemm csatornába történő áramlásában. Az elülső szegmens gyulladásos megbetegedése gátolja a folyadék áramlást, mivel teljes hátulsó összenövést eredményez az írisz bombában, ami elzárja a váladékok kivezető csatornáját. További általános okként említhető az intraokuláris tumor, a kiterjedt szürkehályog, a központi retina véna elzáródása, trauma, műtéti beavatkozás és intraokuláris vérzékenység.

Az összes típust együttvéve a glaukoma a 40 év feletti népesség mintegy 2 %-ánál jelentkezik, és több éves tünetmentesség után a látás gyors romlását okozhatja.

A glaukoma kezelésére mintegy 100 éve használják a pilokarpin nevű hatóanyagot [(3S,4R)-3-etil-4-{(1-metil-lH-imidazol-5-il)-metil}-3,4-dihidro-2(3H)-furanon]. A pilokarpin egy muszkarin agonista, ami a sugárizom összehúzódásával, és igy ^a gerendahálózat szétválasztásával megnöveli a csarnokviz kiáramlását (Bárány E.H.: Invest. Ophthalmol. 1, 712-727 (1962); Kaufman P.L. és Bárány E.H.: Invest. Ophthalmol. 15. 793-807 (1976)). Bár a pilokarpin egy biztonságos és hatékony gyógyszer, nemkívánatos mellékhatásokkal is jár, amelyre példaként említhető az Írisz záróizmok összehúzódásával járó pupilla szűkület (a pupilla méretének csökkenése) . További hátránya, hogy a hatás ideje rövid, ezért ·· · ·« ·· ·· • · · · * ···· • ···« ·· ·· naponta négyszer kell adagolni, ami a betegnek kellemetlenségeket okoz. Ezek a káros tulajdonságok korlátozták a pilokarpin és más muszkarin-félék alkalmazását, és ezért az utóbbi időben más hatásmechanizmusú, például a csarnokviz képződését gátló hatóanyagokat alkalmaztak.

A csarnokviz képződését gátló közismert hatóanyag például az epinefrin (más néven adrenalin), amelynek legismertebb kémiai neve a 4-[l-hidroxi-2-(metil-amino)-etil]-1,2-benzol-diol. 1-formája adrenerg tulajdonságokkal rendelkezik, és dipivalát-észter származékával, a propinnal együtt klinikailag hasznos glaukoma elleni hatóanyag. Ezek a vegyületek azonban adagolás után felesleges mértékben tágítják a beteg pupilláját.

Néhány eikazonid és származékai okuláris hipotenziv hatékonysággal rendelkeznek, és igy a glaukoma kezelésére felhasználhatók. Az eikazonid-származékok közé több, biológiailag fontos vegyület tartozik, igy a prosztaglandinok és származékaik.

A 259 621, 296 721 és 316 718 számú európai közrebocsátás! iratok szerkezetileg a muszkarin agonista arekolinhoz [1,2,5,6-tetrahidro-l-metil-3-piridin-karbonsav-metil-észter] hasonlító vegyületeket ismertetnek, amelyek kognitív zavarok, vigy Alzheimer kór kezelésére használhatók.

A muszkarin agonisták vizsgálata során ászt találtuk, hogy a vegyületek egy csoportja hatékonyan csökkenti a szem belső nyomását, de lényegében mentes a pilokarpinhoz és analógjaihoz társuló nemkívánatos mellékhatásoktól. A ··♦ • · • · ·· vegyületek említett csoportja az (I) általános képlettel ábrázolható, a képletben

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport,

Hét jelentése öttagú heterociklikus gyűrű, amely kettő vagy három heteroatomként nitrogénatomot, oxigénatomot és/vagy kénatomot tartalmaz, és amely adott esetben legfeljebb 10 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoporttal, 3-6 szénatomos aliciklikus szénhidrogéncsoporttal vagy -OR^ általános képletű csoporttal szubsztituálva lehet, ahol

R1 jelentése 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport .

A fenti vegyületeket szerkezetileg rokon egyéb vegyületekkel együtt mint a kolinerg agonista arekolin szerkezeti analógjait ismertetik a 296 721, 316 718 és 259 621 számú európai közrebocsátási iratok. Az irodalom szerint ezek a vegyületek potenciális acetilkolin hatékonysággal rendelkeznek, és igy felhasználhatók például az agyban az acetilkolin csökkent funkciója következtében kialakuló betegségek, igy az Alzheimer kór kezelésére. Az ismert hatás alapján az okuláris hipotenziv hatékonyság meglepőnek minősül.

A találmány tárgya tehát eljárás okuláris hipertenzió kezelésére, amelynek értelmében a szemet hatékony mennyiségben (I) általános képletű vegyülettel vagy ennek farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sójával kezeljük.

A találmány tárgya továbbá szemészeti oldat okuláris

··· hipertenzió kezelésére, amely hatékony mennyiségben (I) általános képletű vegyületet vagy ennek farmakológiailag al kalmazható savaddíciós sóját tartalmazza nemtoxikus, szemészetben alkalmazható folyékony hordozóanyag mellett szabályozott adagolást biztositó tartóedényben.

A találmány tárgya továbbá gyógyászati termék, amely szabályozott adagolást biztositó tartóedényből és fenti szemészeti oldatból áll.

Az 1. ábra a pilokarpin hatását mutatja nyulak intraokuláris nyomására (IOP) , ahol a négyzet a 20 μΐ térfogatban adagolt 10 gg mennyiségű pilokarpin, és a kör a sóoldat hatását ábrázolja az idő függvényében, ahol a hatóanyagot közvetlenül a csarnokba fecskendezzük.

A 2. ábra a piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioát hatását mutatja nyulak IOP értékére. A 10 μφ hatóanyagot 20 μΐ térfogatban (zárt kör), illetve a sóoldatot (nyitott kör) közvetlenül a csarnokba fecskendezzük, és az IOP értékét a megadott időpontokban mérjük.

A 3. ábra a pilokarpin hatását mutatja majom IOP értékére. A 200 μg pilokarpint (négyszög) 10 μΐ térfogatban topikálisan adagoljuk, a kontroll állatok sóoldatot (kör) kapnak.

A 4. ábra a vizsgált hatóanyag hatását mutatja majom IOP értékére. A 200 μg vizsgált hatóanyagot (zárt kör) 10 μΐ térfogatban topikálisan adagoljuk, a kontroll állatok sóoldatot (nyitott kör) kapnak.

Az 5. ábra az atropin hatását mutatja nyulak vizsgált hatóanyaggal csökkentett IOP értékére. Az 5 μ-g atropint 2 0 μΐ térfogatban 10 gg vizsgált hatóanyaggal együtt adagoljuk (négyszög), és mérjük az IOP értékét. A mért adatokat az önmagában adagolt vizsgált hatóanyag (zárt kör) vagy sóoldat (nyitott kör) esetén kapott értékekkel hasonlítjuk össze.

A 6. ábra az atropin hatását mutatja majmok vizsgált hatóanyaggal csökkentett IOP értékére. Az 5 vg atropint (négyszög) 10 μΐ térfogatban helyileg adagoljuk. A mérési eredményeket 10 μ1 térfogatban önmagában adagolt 200 Mg vizsgált hatóanyag (zárt kör) vagy sóoldat (nyitott kör) esetén kapott értékekkel hasonlítjuk össze.

A 7. ábra a pupilla méretének csökkenését mutatja 20 μ1 térfogatban közvetlenül a csarnokba adagolt 10 Mg pilokarpin (négyszög) hatására. A kontroll állatok sóoldatot (nyitott kör) kapnak.

A 8. ábra a pupilla méretének csökkenését mutatja nyulaknál 20 μ1 térfogatban közvetlenül a csarnokba adagolt 10 Mg vizsgált hatóanyag hatására (zárt kör). A kontroll állatok sóoldatot kapnak (nyitott kör).

A 9. ábra a pilokarpin hatását mutatja majmok pupillájának méretére. A pilokarpint 200 μg mennyiségben helyileg adagoljuk (négyszög). A kontroll állatok sóoldatot kapnak (nyitott kör).

A 10. ábra a vizsgált hatóanyag hatását mutatja majmok pupilla méretére. A vizsgált hatóanyagot 200 Mg mennyiségben 10 μ1 térfogatban helyileg adagoljuk (zárt kör). A kontroll állatok sóoldatot kapnak (nyitott kör).

• ·· ·

A 11. ábra az atropin hatását mutatja nyulak vizsgált hatóanyaggal kiváltott pupilla szűkületére. A pupilla átmérőjét a megadott időpontban mérjük 10 ng vizsgált hatóanyag (négyszög) vagy vizsgált hatóanyag és 5 gg atropin (zárt kör) 20 μΐ térfogatban közvetlenül a csarnokba történő befecskendezése után. A kontroll állatok sóoldatot kapnak (nyitott kör).

A 12. ábra az atropin hatását mutatja majmok vizsgált hatóanyaggal kiváltott pupilla szűkületére. Az 5 μg atropint 10 μΐ térfogatban helyileg adagoljuk (négyszög). A mérési adatokat az önmagában adagolt vizsgált hatóanyag (zárt kör) vagy sóoldat (nyitott kör) esetén kapott értékekkel hasonlítjuk össze.

A 13. ábra a vizsgált hatóanyag hatását mutatja macska sugárizom (négyszög) vagy írisz záróizom (zárt kör) összehúzódására.

A 14. ábra az atropin hatását mutatja (nyitott jelek) macska sugárizom vagy írisz záróizom vizsgált hatóanyaggal kiváltott összehúzódására. A szöveteket 10 nmól/1 atropinnal inkubáljuk a példákban megadott módon. A vizsgált hatóanyaggal kiváltott összehúzódást a zárt jelek mutatják.

A találmány tehát azon a váratlan felismerésen alapul, hogy a muszkarin agonista arekolin egyes analógjai csökkentik az intraokuláris nyomást, és emellett minimális hatást gyakorolnak a pupilla méretére, de hatásuk időtartama hosszú.

A találmány értelmében alkalmazott vegyületek (I) álta• « ·

lános képletében

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport,

Hét jelentése öttagú heterociklikus gyűrű, amely kettő vagy három heteroatomként nitrogénatomot, oxigénatomot és/vagy kénatomot tartalmaz, és amely adott esetben legfeljebb 10 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoporttal, 3-6 szénatomos aliciklikus szénhidrogéncsoporttal vagy -ORi általános képletű csoporttal szubsztituálva lehet, ahol

R·^ jelentése 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport.

A fenti értelmezésben a Hét jelentésében megadott öttagú heterociklikus gyűrű egy vagy két kettős kötést tartalmazhat. Hét előnyös jelentése (a), (b), (c), (d) vagy (e) képletű csoport.

A fenti értelmezésben az aciklikus szénhidrogéncsoport telitett vagy telítetlen, egyenes vagy elágazó szénláncu szénhidrogéncsoportot jelent, amire példaként említhető az egyenes vagy elágazó szénláncu alkilcsoport, alkenilcsoport és alkinilcsoport. Ezen belül előnyösek az alkilesöpörtök, elsősorban az 1-6 szénatomos alkilcsoport, igy a metilcsoport, etilcsoport, n- és izopropilcsoport, n- és terc-butilcsoport, n- és izopentilcsoport, valamint az n- és izohexilcsoport. R előnyös jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport, elsősorban 1 vagy 2 szénatomos alkilcsoport. Különösen előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek,

··· ·♦ ·· ·· ··

- 10 amelyek képletében R jelentése metilcsoport. R₃ jelentésében előnyösek a legfeljebb 4 szénatomos, aciklikus szénhidrogéncsoportok.

Az aliciklikus szénhidrogéncsoport kifejezés telitett vagy telítetlen 3-6 szénatomos ciklikus szénhidrogéncsoportot jelent, példaként említhető a ciklopropilcsoport, ciklopentilcsoport, ciklopentenilcsoport, ciklohexilcsoport és ciklohexenilcsoport.

Különösen előnyösek azok a vegyületek, amelyek képletében Hét jelentése jelentése izoxazolilcsoport, tiazolilcsoport, 1,2,4-oxadiazolilcsoport, 1,3,4-tiadiazolilcsoport vagy 1,2,5-tiadiazolilcsoport.

Az (I) általános képletű vegyületek közül külön kiemeljük az alábbi vegyületeket, és ezek farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sóit:

piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-butil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-heptil) -1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-propi1-1,2,4-oxadiazol-5-il)-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metoxi-l,3,4-tiadiazol-5-il)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metil-4-tiazolil)-1-metil-etán-dioát, ·· ···

- 11 piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-metoxi-l,2,5-tiadiazol-4-il)-1-metil-etán-dioát.

Az (I) általános képletű vegyületek farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sói olyan aniont tartalmaznak, amely a szokásos terápiás dózisban nem toxikus. Az előnyös savaddíciós sókra példaként említhető a hidroklorid, hidrobromid, szulfát, acetát, foszfát, nitrát, metán-szulfonát, etán-szulfonát, laktat, citrát, valamint tartarát só. A farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sók képzésére alkalmas további savként említhető a fumársav, benzoésav, szukcinsav, palmitinsav és benzol-szulfonsav.

Az (I) általános képletű vegyületek ismertek a fent említett európai közrebocsátási iratokból, vagy ismert vegyietekből a szerves kémia általánosan ismert eljárásaival előállíthatok.

Az (I) általános képletű vegyületek értékes gyógyászati tulajdonságokkal rendelkeznek. Közelebbről, ezek a vegyületek potenciális glaukoma elleni szerek, amelyek lényegében mentesek a jelenlegi klinikai gyakorlatban glaukoma elleni szerként ismert muszkarin agonisták, igy a pilokarpin nemkívánatos mellékhatásaitól. Emellett, ezek a vegyületek lényegesen hosszabb hatást biztosítanak.

A gyógyszerkészítmények előállításához legalább egy (I) általános képletű vegyület vagy annak farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sója terápiásán hatékony mennyiségét a szokásos gyógyszerészeti hordozóanyagokkal és segédanyagokkal kombináljuk. A terápiásán hatékony mennyiség általá·· ·· ··· ·· «· • · ·« ·· ···· bán 0,1-5 vegyes% folyékony készítményben.

A szemészeti felhasználáshoz előnyösen fő hordozóanyagként fiziológiás sóoldatot tartalmazó oldatot használunk. Az ilyen szemészeti oldat pH-értékét megfelelő puffer-rendszerrel 6,5-7,2 között tartjuk. A készítmény kívánt esetben további komponensként a szokásos, gyógyszerészeti segédanyagokat, igy tartósítószereket és stabilizátorokat tartalmaz .

Tartósítószerként előnyösen alkalmazható például a benzalkónium-klorid, klór-butanol, timerozál, fenil-higany-acetát és fenil-higany-nitrát. Hordozóanyagként előnyösen alkalmazható például a poli(vinil-alkohol) , povidon, hidroxi-propil-metil-cellulóz, poloxamer, karboxi-metil-cellulóz, hidroxi-etil-cellulóz és tisztított viz.

A tónus beállításához a szokásos segédanyagokat alkalmazzuk, amelyre példaként említhetők a különböző sók, igy nátrium-klorid, kálium-klorid, mannitol és glicerin.

A pH-érték beállítására bármely olyan puffer felhasználható, amely a szemészetben alkalmazható. Ezekre példaként említhetők az acetát-pufferek, citrát-pufferek, foszfát-pufferek és borát-pufferek. A pH-érték beállítására kívánt esetben alkalmazhatók savak vagy bázisok is.

A szemészetileg alkalmazható antioxidánsokra példaként említhető a nátrium-metabiszulfit, nátrium-tioszulfát, acetil-cisztein, butil-hidroxi-anizol és butil-hidroxi-toluol.

További komponensként alkalmazhatók például kelátképző szerek, igy dinátrium-edetát A találmány szerinti kés hatóanyag tartósítószer hordozóanyag tónusbeállitószer puffér pH beállító anyag antioxídáns tisztított víz itmények előnyös összetétele: mintegy 0,5-1 vegyes% 0-0,10 vegyes% 0-40 vegyes% 0-10 vegyes% 0,01-10 vegyes% kívánt mennyiség (pH = 4,5-7,5) kívánt mennyiség ad 100 vegyes%.

A találmány tárgyát közelebbről az alábbi példákkal mutatjuk be anélkül, hogy az oltalmi kör a példákra korláto zódna .

1. példa

Az intraokuláris nyomás csökkentésének in vivő vizsgálata

Piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil) -1-metil-etán-dioátot (vizsgált hatóanyag) vagy pilokarpint adagolunk majmok esetében helyileg (200 ^g 10 μΐ térfogatban) vagy nyulak esetében közvetlenül a csarnokba fecskendezve (10 Mg 20 μΐ térfogatban). A kontroll állatokat sóoldattal kezeljük. A pupilla átmérőjét és az IOP értéket 0-6 órán keresztül mérjük. Az IOP érték méréséhez pneumatométert (Digilab/Biorad) és a pupilla átmérőjének méréséhez optikai ·♦ · ·» «··· «···· ···· • · ··· ···· • ··«·'·· *··· ··· ·· ···· mérőrudat (Allergan) alkalmazunk. A vizsgálathoz normál intraokuláris nyomást mutató állatokat használunk.

A muszkarin hatékonyság meghatározásához atropint (muszkarin antagonistát) adagolunk. Nyulak esetében a vizsgált hatóanyaggal együtt 5 μg atropint fecskendezünk be, mig majmok esetében 5 pg atropint 10 μΐ térfogatban alkalmazunk 30 perccel a vizsgált hatóanyaggal végzett kezelés előtt.

Az intraokuláris nyomást (Hgmm) és a pupilla átmérőjét (mm) a 0 időpontban mért értékhez viszonyított változásban adjuk meg.

A muszkarin agonisták, igy a pilokarpin legfeljebb kismértékű változást okoz a normál tenziós nyulak vagy emberek IOP értékében (Miichi H. és Nagataki S.: J. ophthalmol. 26. 425-436 (1982); Naveh-Floman és munkatársai: Ophthalmic Rés. 18, 34-37 (1986)). A majom azon fajták egyike, amelyekre a pilokarpin hatást gyakorol (Lamble és munkatársai: Invest Ophthalmol. 15, 848-851 (1976)).

Az 1. ábrán bemutatott eredmények igazolják a pilokarpinnak a nyulra gyakorolt fent említett hatását. A közvetlenül a csarnokba befecskendezett pilokarpin (10 μg/20 μΐ) hipotenziv hatást nem vált ki. Mint az 1. ábráról látható, a gyakorlatban enyhe hipertenziv hatás észlelhető.

A vizsgálatok szerint a vizsgált hatóanyag eltér a pilokarpintól az IOP értékre gyakorolt hatásban. Közvetlenül a csarnokba befecskendezve a vizsgált hatóanyag 6 Hgmm értékkel növeli az IOP-t 5 órával az adagolás után (2. ábra). A ·· · ·· ·· ·· ····· · · · · « · ··· ·· ·· • ······« ···♦ ··· ·· ·· *·

- 15 hatás hosszabb, mint a kísérleti periódus végét jelentő 6 óra. Ez azt jelenti, hogy a vizsgált hatóanyag nemcsak csökkenti az IOP értékét, hanem hatástartama hosszabb.

Mint fent említettük, a majom a normál tenziós állatok azon csoportjába tartozik, amelyre hatást gyakorol a pilokarpin. Mint várható volt, a pilokarpin az IOP értéket mintegy 3 Hgmm-rel csökkentette 3 órával az adagolás után (3. ábra).

A vizsgált hatóanyag szintén csökkenti az IOP értéket, ahol a maximális csökkenés az adagolás követő 5 és 6 órában 4 Hgmm (4. ábra). A hatás a nyulakhoz hasonlóan itt is hoszszabb, mint a kísérleti periódust felölelő 6 óra, ami arra utal, hogy a vizsgált hatóanyag hatástartama hosszabb, mint a pilokarpin hatástartama.

Ilyen tipusu hatást muszkarin agonisták esetében először mutatunk be, elsősorban normál tenziós nyulakra vonatkozóan. Ezért a következő kérdés az volt, hogy a vizsgált hatóanyag az IOP értéket a muszkarin receptorok aktiválásával csökkenti-e. Ennek vizsgálatához az állatokat először muszkarin antagonista atropinnal kezeljük. Nyulaknál a vizsgált hatóanyaggal együtt befecskendezett atropin csak részlegesen gátolja az IOP hatást (5. ábra). A 2 óránként helyileg alkalmazott 0,5 %-os atropin oldat gátló hatást nem fejt ki. Ezzel összhangban, 5 Mg/10 μΐ atropin helyi adagolása majmoknál nem gátolja a vizsgált hatóanyag IOP csökkentő hatását (6. ábra). Hangsúlyozzuk, hogy az atropin alkalmazott koncentrációja több nagyságrenddel nagyobb, mint a muszkarin receptorok hatásának teljes gátlásához szükséges mennyiség. Ez arra utal, hogy a vizsgált hatóanyag hatásmechanizmusa az IOP érték csökkentésében nem a muszkarin receptorokon keresztül következik be.

A pilokarpin és a vizsgált hatóanyag nyulaknál pupilla szűkületet okoz, de a pilokarpin hatása nagyobb, mint a vizsgált hatóanyagé (7. és 8. ábra). Mindkét esetben maximális válasz 0,5 óra időpontban mérhető, amit a vizsgálat maradék idejében regenerálódás követ.

A pilokarpin pupilla szűkítő hatása nagyobb a majmoknál, amelynek következtében a pupilla több, mint 24 órán keresztül teljes egészében záródik (9. ábra). A vizsgált hatóanyag pupilla szűkítő hatása azonban sokkan enyhébb, értéke 1 óra elteltével 48 %, ami 3-6 óra alatt 15 %-ra csökken (10. ábra). A vizsgált hatóanyag pupilla szűkítő hatását az atropin mindkét esetben teljes egészében gátolja (11. és 12. ábra). Ez arra utal, hogy a hatásmechanizmusban részt vesznek az írisz záróizmok muszkarin receptorai.

2. példa

In vitro vizsgálatok

Frissen eltávolított macskaszemből kivágjuk az írisz záró- és sugárizmait. A szöveteket Tyrode oldatot tartalmazó szerv fürdőbe (összetétel: NaCl 137 mmól/1, KC1 2,7 mmól/1, CaC12 1,8 mmól/1, MgC12 1,05 mmól/1, NaHC0₃ 11,9 mmól/1, NaH2PO4 0,42 mmól/1, D-glukóz 5,6 mmól/1) helyezzük 37 °C hőmérsékleten, és 95 % oxigénből és 5 % széndioxidból álló eleggyel levegőztetjük. A szövetek egyik részét a fürdőben egy kampón rögzítjük, és a másik végét poligráfhoz csatlakoztatott mérőeszközhöz kötjük. A szöveteket 60 percen keresztül 100-200 mg tenzió mellett hagyjuk pihenni. A pihenő periódus után az optimálisnál kisebb koncentrációjú (10-30 Mmól/l) betaneholt adagolunk többször egymás után a szövetek szoktatása érdekében. Ezután növekvő koncentrációban (0,1-1000 Mmól/l) vizsgált hatóanyagot adunk a fürdőhöz a kumulatív dózis/hatás görbe felvételéhez. A muszkarin antagonista hatásának vizsgálatához a szöveteket 10 nmól/1 atropinnal inkubáljuk 30 perccel a vizsgált hatóanyaggal történő kezelés előtt.

Az agonista hatást Εϋςθ értékben (a kumulatív dózis/válasz görbén mért maximális összehúzódás 50 %-át kiváltó koncentráció) fejezzük ki. A legalább három párhuzamos kísérlet eredményeit átlag ± szórásban adjuk meg.

A vizsgálat sorn kvantitatív módon mérjük a piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioát (vizsgált hatóanyag) hatékonyságát a sugárizomra és az Írisz záróizmaira, ami elősegíti a vegyület hatásmechanizmusának megértését. Az előzetes vizsgálatok szerint a muszkarin agonisták a sugárizmok összehúzásával csökkentik az IOP értéket (Kaufman P.L. és Bárány E.H.: Invest. Ophthalmol. 15. 793-807 (1976)). Az írisz záróizmaira gyakorolt hatás következtében pupilla szűküket következik be, ami nemkívánatos mellékhatás. Az elvégzett vizsgálatban a vizsgált ♦» f ·· ·· ·« ♦ · ·· · ···· • » *·« «· ·· • ···«··· «··· ·«» ·« «· ·«

- 18 hatóanyag koncentrációtól függő összehúzódást vált ki a sugárizmokban és az írisz záróizmokban, ahol az ED5Q érték 30 Mmól/, illetve 20 gmól/l. A vizsgált hatóanyag ilyen irányú hatása tehát kisebb, mint a pilokarpin hatása, ahol az ED5Q érték mindkét szövetre nézve 4 μιηόΐ/ΐ (13. ábra). Az atropin kompétitiv módon gátolja az összehúzódást, ami arra utal, hogy ez a vegyület aktiválja a szövetek muszkarin receptorait (14. és 15. ábra). Az atropin hatása azonban

2,5-szörös az írisz esetében, mint a sugárizmok esetében. Ez összhangban van az 1. példa szerinti in vivő vizsgálatok eredményeivel, ahol az atropin a pupilla szűkületet teljes egészében, az IOP értéket részlegesen befolyásolta.

Az 1. és 2. példában megadott eredmények egyértelműen igazolják, hogy a vizsgált hatóanyag mindkét állatnál, vagyis nyulaknál és majmoknál csökkenti az IOP értéket. Bár ezt a hatást muszkarin szerek esetében majmoknál korábban bemutatták (Lamble J.W. és Lamble A.P.: Invest. Ophthalmol. 15. 848-851 (1976)), ez az első alkalom, hogy ugyanezt nyulaknál is kimutattuk. A glaukoma terápiában alkalmazható hatóanyagokat főként nyulakon vizsgáljuk. Ezért az a tény, hogy a vizsgált hatóanyag és analógjai nyulaknál csökkentik az IOP értéket, egy további előny a pilokarpinhoz képest. A vizsgált hatóanyag hatásosabb továbbá a majmok IOP értékének csökkentésében, bár az in vitro vizsgálatok szerint kevésbé hatásos, mint a pilokarpin. Az in vitro vizsgálatokból látható, hogy ezek a vegyületek atropin érzékeny receptoron

- 19 keresztül kiválthatják a sugárizmok összehúzódását. Az IOP csökkentő hatás azonban nagy dózisu atropinnal sem gátolható teljesen, ami arra utal, hogy ezek a hatóanyagok az IOP csökkentése során más mechanizmussal hatnak. A hatóanyagok nem muszkarin jellegű hatékonyságát korábban nem Írták le.

Az említett vegyületek tehát jelentős mértékben csökkentik az IOP értéket, hatástartamuk hosszú, és az IOP csökkentése mellett csak kismértékben vagy rövid ideig okoznak pupilla szűkületet, ezért előnyösen alkalmazhatók a glaukoma kezelésére.

A leírás részletesen ismerteti a készítmény összetételét, előállítását és alkalmazását, ami lehetővé teszi a találmány gyakorlati megvalósítását. A szemészeti készítmény összetételére megadott speciális ismeretek és az okuláris hipertenzió kezelésére történő alkalmazására megadott speciális instrukciók alapján a területen jártas szakember képes a készítmények előállítására, az esetleg szükséges módosítások megvalósítására és az adott helyzethez történő adaptálására. Mindez azonban a fenti részletes kitanitás ismeretében nem jelenti az oltalmi kör korlátozását.

Claims (18)

1. Eljárás okuláris hipertenzió kezelésére, azzal jellemezve, hogy a szemet megfelelő mennyiségben (I) általános képletű vegyülettel vagy annak farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sójával kezeljük, a képletben

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport,

Hét jelentése öttagú heterociklikus gyűrű, amely kettő vagy három heteroatomként nitrogénatomot, oxigénatomot és/vagy kénatomot tartalmaz, és amely adott esetben legfeljebb 10 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoporttal, 3-6 szénatomos aliciklikus szénhidrogéncsoporttal vagy -OR^ általános képletű csoporttal szubsztituálva lehet, ahol

R1 jelentése 1-6 szénatomos aciklikus szénhidrogéncsoport .

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése öttagú heterociklikus gyűrű, amely heteroatomként oxigénatomot és nitrogénatomot vagy kénatomot és nitrogénatomot tartalmaz.

3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése izoxazolilcsoport, tiazolilcsoport, 1,2,4«· ···· • ·9 « ί »9» «»««

-oxadiazolilcsoport, 1,3,4-tiadiazolilcsoport vagy

1,2,5-tiadiazolilcsoport.

4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

R jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport.

5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

R jelentése metilesöpört.

6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése heterociklikus gyűrű, amely adott esetben

1-8 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva lehet.

7. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése 1-6 szénatomos alkoxicsoporttal szubsztituált heterociklikus gyűrű.

8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal szubsztituált heterociklikus gyűrű.

9. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, ·· -ϊ .·· ·· ♦♦ *·♦·» ··«· • · ··« ♦· ·· • ··*···· ··*· ··· ·4 ·· ·· amelynek képletében . R jelentése hidrogénatom.

10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében

Hét jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált heterociklikus gyűrű.

11. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű vegyületként az alábbi vegyületek egyikét vagy ezek farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sóját alkalmazzuk:

piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil) -1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-butil) -1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-heptil) -1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-propil-l, 2,4-oxadiazol-5-il)-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metoxi-l, 3,4-tiadiazol-5-il)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metil-4-tiazolil)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-metoxi-l,2,5-tiadiazol-4-il)-1-metil-etán-dioát.

12. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű vegyületként piridin-1,2,3,6- ·· • · · ·· ···· ·· f ·· ·· ♦♦ ♦ » ·· · ···· ~ - ·· • · ·· vagy ennek farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sóját alkalmazzuk.

13. Okuláris hipertenzió kezelésére alkalmas szemészeti oldat, azzal jellemezve, hogy hatékony mennyiségben 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet vagy annak farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sóját tartalmazza nem toxikus, szemészetben alkalmazható folyékony hordozóanyag mellett, szabályozott adagolást biztositó tartóedényben.

14. A 13. igénypont szerinti szemészeti oldat, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű vegyületként az alábbi vegyületek egyikét vagy ezek farmakológiailag alkalmazható savaddíciós sóját tartalmazza:

piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil) -1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-butil) -1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-heptil) -1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-propil-l, 2,4-oxadiazol-5-il)-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metoxi-l,3,4-tiadiazol-5-il)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metil-4-tiazolil)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-metoxi-l,2,5-tiadiazol-4-il)-1-metil-etán-dioát.

44» 4 ·4 44·· • · 44 4 4 · 4· • · 4·· 4·4*

15. A 14. igénypont szerinti szemészeti oldat, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű vegyületként piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioátot vagy farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sóját tartalmazza.

16. Gyógyászati termék, azzal jellemezve, hogy béltartalmának szabályozott adagolására alkalmas tartóedényből, és 13. igénypont szerinti szemészeti oldatból áll.

17. A 16. igénypont szerinti gyógyászati termék, azzal jellemezve, hogy olyan szemészeti oldatból áll, amely (I) általános képletű vegyületként az alábbi vegyületek egyikét vagy ezek farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sóját tartalmazza:

piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-butil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-[3-(n-heptil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-propil-l,2,4-oxadiazol-5-il)-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metoxi-l,3,4-tiadiazol-5-il)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(2-metil-4-tiazolil)-1-metil-etán-dioát, piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(3-metoxi-l,2,5-tiadiazol-4-il)-1-metil-etán-dioát.

- 25 ···· ·· • ·· ··· ··

18. A 17. igénypont szerinti gyógyászati termék, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű vegyületként piridin-1,2,3,6-tetrahidro-5-(5-izoxazolil)-1-metil-etán-dioátot vagy ennek farmakológiailag alkalmazható savaddiciós sóját tartalmazza.