HUT61464A

HUT61464A - Preventive and curative pharmaceutical composition for curing diarrhoea and pseudomembranous colitis caused by clostridium difficile

Info

Publication number: HUT61464A
Application number: HU911188A
Authority: HU
Inventors: Nobuhiro Taguchi; Itsuki Fujita
Original assignee: Miyarisan Seibutsu Igaku Kenky
Priority date: 1990-05-07
Filing date: 1991-04-11
Publication date: 1993-01-28
Also published as: JPH0413628A; KR0149672B1; ES2091290T3; DE69122298T2; EP0456418B1; KR910019640A; EP0456418A2; EP0456418A3; HU911188D0; DE69122298D1; JP2961184B2

Description

Preventív és kúrátiv gyógyászati készítmény Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítására

Kabushiki Kaisha Miyarisan Seibutsu Igaku Kenkyusho, Tokió,

A bejelentés napja: 1991. 04. 11.

Elsőbbsége: 1990. 05. 07.

(2-117 267) JAPÁN

JAPAN
IS-Í	' j! , ; h Λ	9
	’ U y	t

Kivonat

A találmány szerinti preventív és kurativ gyógyászati készítmény, amely Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembános colitis gyógyítására alkalmas, vaj savbaktérium sejteket vagy spórákat és vankomicint tartalmaz.

A találmány tárgyköréhez tartozik továbbá eljárás Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembános colitis megelőzésére és gyógyítására.

	• .··. .··. : . KÖZZÉTÉTELI ·:·· '··:· ·’	A
	PÉLDÁNY , λ. v —	lí
Képviselő:
DANUBIA SZABADALMI ÉS VÉDJEGY IRODA KFT.	i ‘ ::
Budapest	/ 1	! tű 4

Preventív és kurativ gyógyászati készítmény Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítására

Kabushiki Kaisha Miyarisan Seibutsu Igaku

Feltalálók:

TAGUCHI Nobuhiro,

FUJITA Itsuki,

A bejelentés napja:

Elsőbbsége:

Chiba-ken

Chiba-ken,

1991. 04. 11.

1990. 05. 07. (2-117

Kenkyusho, Tokió,

JAPÁN

267) JAPÁN

72259-5422/VO

- 2 A találmány tárgya preventív és kurativ gyógyászati készítmény Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítására.

A Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis kezelésében az ezen betegségeket okozó Clostridium difficile-vel szemben erős aktivitású vankomicin (VCM) alkalmazásával végzett kemoterápia célja a hasi szimptómák, igy diarrhea gyógyításának javítása volt. A Clostridium difficile azonban a bélcsatornában spórákat képez, és a spórák baktériumellenes szerrel szemben rezisztensek, igy a vankomicin használatán alapuló hosszabb kemoterápiás kezelés ellenére sem hatástalaníthatok könnyen. Miután a terápiát túlélő Clostridium difficile spórák kicsiráznak, és újra szaporodnak, a betegben újra diagnosztizálható a betegség ismételt fellépése. Vankomicin hosszú időszakon keresztül a betegnek történő beadása azzal járhat, hogy a vankomicin baktériumokkal szembeni aktivitása zavart okoz a gazdaszervezet belében lévő mikroflórában, ami a mikroflóra zavara következtében uj gyulladásokhoz vezethet, és például növelheti kórokozó baktériumok rezisztenciáját vegyi anyagokkal szemben.

Vankomicin rövid időtartamra kiterjedő beadása esetén a túlélő spórák aránya nagy, és ennek következtében a betegség gyakori kiujulása a beteg legyengülését okozza. A tárgyalt betegség gyógyításában igény mutatkozik uj gyógyászati módszer kidolgozására, amely baktériumellenes szer, igy vankomicin rövid időtartamra kiterjedő beadásából és olyan • · • f ·· · · · • · · ···· • · · · · · ·

- 3 kezelésből áll, amely képes gyorsan kiküszöbölni a túlélő spórákat anélkül, hogy a bél mikroflórájának helyreállítását gátolná.

A találmány feladata uj preventív és kurativ gyógyászati készítmény biztosítása Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítására.

A fenti feladatot olyan, Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítására alkalmas preventív és kurativ gyógyászati készítmény teljesíti, amely vaj savbaktérium sejteket vagy spórákat és vankomicint tartalmaz.

A találmány lényege preventív és kurativ gyógyászati készítmény, amely Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembános colitis gyógyítására alkalmas gyógyászati készítmény, amely vaj savbaktérium sejteket vagy spórákat és vankomicint tartalmaz. A találmány szerinti gyógyászati készítmény beadása megelőzi vagy gyógyítja a betegséget, és csak nagyon csekély szintű toxicitással jár. Azzal a céllal, hogy meggyorsítsuk a Clostridicum difficile által okozott diarrhea és pszeudomembrános colitis gyógyítását, lerövidítsük baktériumellenes szer, igy vankomicin adagolásának idejét, és meggátoljuk a betegség kiujulását, kísérleteket végeztünk, ennek során aranyhörcsögökben diarrheát idéztünk elő Cefatrizine (a továbbiakban CFT) beadásával, amely általánosan ismert ezen betegségek elhullás! modelljeként, a vankomicinnal végzett terápia után a diarrhea tünetei alapján vizsgáltuk annak kiujulását, a • ·

- 4 kísérletbe vont hörcsögöknek a gyógyítás céljából lehetővé téve Clostridium butyricum MIYAIRI 588 (a továbbiakban CbM), a vaj savbaktériumok egyik tipusu egyedeinek orális fogyasztását.

Az alábbiakban részletesen leírjuk a találmányt eredményező kutatómunkát. Az alkalmazott kiujulási modellben, amikor az ürülék állapotában beállt javulást észlelve (3 napon keresztüli beadás után) a vankomicin adagolását befejeztük, a Clostridium difficile jelenlétére végzett vizsgálat pozitív tenyészetet eredményezett, az spórák alakjában kimutatható volt. Ezért mintegy 10 nap múlva az állatokban kifejlődött a diarrhea és elpusztultak. Az elpusztult állatok bélcsatornájának tartalmában toxikogén Clostridium difficile-t és annak toxinját mutattuk ki, ami a betegség kiujulását jelezte. Ha a vankomicin adagolását az ürülék állapotában beállt javulás után is (a teljes 10-napos időtartamon át) folytattuk, bár a Clostridium difficile jelenlétére végzett vizsgálat negatív tenyészetet eredményezett, az állatokon 5 napon belül a betegség kiujulásának észrevehető jelei jelentkeztek.

A betegség kiujulási arányának nyilvánvaló csökkenése és Clostridium difficile-mentes tenyészet volt megfigyelhető azoknak az állatoknak az esetében, amelyeknek 3 napig vancomicint adtunk be, majd 20 napig őrölt, száraz CbM-sejteket tartalmazó táplálékot adtunk olyan mennyiségben, hogy naponta 10⁸ telepképző egység (CFU) spórát vettek magukhoz, majd ezután CbM-et nem tartalmazó táplálékot adtunk. A CbM

anaerob, spóraképző baktérium, amely szokásos tápközegben anaerob viszonyok között szaporodik és képez spórákat. így 2 % kukoricakeményitőt tartalmazó húsleves táptalaj alkalmas a baktérium számára. Ezekből az eredményekből arra következtettünk, hogy a Clostridium difficile okozta diarrhea és pszeudomembrános colitis kezelésében Clostridium difficile-vel szemben erős aktivitású baktériumellenes szer, igy a vankomicin elpusztítja a rendkívül elszaporodott Clostridium difficile-t. Ezt követően hatásos a kezelés napi 10⁹ CFU őrölt száraz CbM sejt beadásával.

A gyógyászati készítmény 1 mg - 10 g, előnyösen 10 mg - 10 g közötti vankomicint tartalmaz 10⁸ CFU vajsavbaktérium sejtre vagy előnyösen 10⁶ - 10⁸ CFU vaj savbaktérium sejtet vagy spórát tartalmazó mennyiségben adják be 1 kg emberi testtömegre vonatkoztatva. A készítményt embereknek vagy állatoknak orálisan adják be szükség esetén gyógyászatilag elfogadható hordozóval egyesített alakban.

A vajsavbaktérium olyan mikroorganizmusra vonatkozik, amely anyagcseretermékeként vajsavat eredményez. A vajsavbaktérium egyéb válfajai között különösen a Clostridium butyricum alkalmas.

A találmány szerinti gyógyászati készítmény rendkívül alacsony akut és krónikus toxicitást fejt ki.

A találmányt a következőkben kiviteli példákon keresztül szemléltetjük. A kísérletekben használt Clostridium butyricum MIYAIRI 588 baktériumokat letétbe helyeztük a Fermentation Research Institute gyűjteményében FERM-BP 2789 depó • ♦

I

- 6 nálási számmal, a Clostridium difficile Ha. 16 baktériumokat FERM-BP 2877 deponálási számmal.

A találmányt a következőkben példákkal szemléltetjük.

1. példa

A Clostridium difficile okozta diarrhea kiujulás elhullás! modelljében öt (60 g testtömegü, him) aranyhörcsögnek katéterrel orálisan 0,2 cm³ tisztított vízben 4,5 mg CFT szuszpenziót adtunk be. A CFT-vel végzett kezelés után az állatokat megfigyeltük. Ha valamelyik állat ürüléke a szokásostól eltérővé vált, igy diarrhea vagy hasmenés lépett fel, annak az állatnak hat alkalommal, 12 órás időközökben 0,2 cm³ tisztított vízben 3 mg vankomicint adtunk be orálisan. Valamennyi kezelt állatot megfigyeltük. Végbélváladékukból a vizsgálati idő folyamán mintát vettünk. A mintákat CCFA tápközegben anaerob körülmények között (37 °C, 72 óra) baktériumok izolálása céljából tenyésztettük. Az izolált Clostridium difficile-t BHI tápközegbe tettük át, és ott újból tenyésztettük (37 °C, 48 óra). A kapott tenyészetben a baktériumot megvizsgáltuk toxintermelő képessége szempontjából, ehhez látex reagenst használtunk [a Clostridium difficile 500 ng/cm³ (minta) mennyiségben kimutatható] . Ezenkívül élő hörcsögök hasmenéses ürülékét és elpusztult hörcsögök bélcsatornájának tartalmát is megvizsgáltuk a toxin jelenléte vagy hiánya szempontjából.

Az 1. táblázat elpusztult hörcsögök bélcsatornájának tartalmában meghatározott Clostridium difficile toxint, a toxin egészséges hörcsögökre nézve halált okozó aktivitását • ·

- 7 mutatja, valamint azt, hogy a 2. táblázatban feltüntetett viselkedésű (Clostridium difficile Ha. 16), toxintermelő, izolált törzs jelen van-e 1,4 x 10⁸ CFU/g mennyiségben. A 3. táblázat adatai szerint 6 adag vankomicin beadása észrevehető javulást idézett elő az ürülék jellegében, azonban nem volt annyira hatékony, hogy Clostridium difficile-mentes tenyészetet eredményezett volna. A vankomicin beadás befejezését követő 6-11 nap múlva valamennyi állat elpusztult a diarrhea kiujulása következtében. A Clostridium difficile kimutatási határa ürülékből 400 CFU/g (ürülék) volt.

2. példa

Vankomicin hosszabb időtartamon keresztül történő beadását és CbM beadását vizsgáltuk meg a Clostridium difficile által okozott diarrhea kiujulásának meggátlására, és a Clostridium difficile bélcsatorna belsejéből történő gyors eltávolítására. A kísérletben öt állatot kezeltünk az 1. példában leirt módon (A csoport), öt állatnak az 1. példa szerinti kezelést követően 14 adag VCM-et adtunk be (B csoport) , és öt állatot az 1. példában leirt módon kezeltünk, majd 17 napon keresztül őrölt száraz CbM sejteket tartalmazó táplálékkal tápláltunk olyan mennyiségben, hogy naponta 1-5 x 10⁸ CFU CbM spórát vettek magukhoz, majd ezután CbM-et nem tartalmazó táplálékkal etettünk (C csoport). A kezelés után valamennyi állatot megfigyeltük. Bélürülékükből izoláltuk a Clostridium difficile-t. Az igy izolált baktériumot a D-l toxin kimutatás szempontjából megvizsgáltuk. A CbM izolálása céljából a kultúrát (37 °C, 72 óra) anaerob

- 8 körülmények között tartottuk 5 %-os lóvér BL agar tápközegben, amely dm³-enként 350 mg cikloszerint, 1 mg kanamicint, 75 Mg klindamicint és 12 mg trimetoprimet tartalmazott.

Amint a 4. táblázatban látható, a B csoport, azaz a hosszabb időtartamon keresztül vankomicint kapott csoport az A csoporttal összehasonlítva a beadás megszüntetését követő 48 óra múlva kedvező változást mutatott az ürülék állapotában, továbbá észrevehető csökkenést a Clostridium difficile észlelés arányában (öt állat közül egyben). Az összes vizsgált állat esetében a vankomicin hosszabb időn keresztül történő beadásának megszűnését követő 5-8 nap múlva a betegség kiújult. Ennak az az oka, hogy a vankomicin hosszabb időn keresztül történő adagolása következtében a bélcsatornában kialakult szubsteril viszonyok miatt a bél mikroflórája által fejlődésében meggátolt spóra kicsirázik és könnyen fejlődik. Ezért a B csoportban meghiúsult a betegségből való teljes kigyógyitás, beleértve a betegség kiujulásának meggátlását. Ezzel szemben a C csoportban, azaz a CbM beadásával kezelt csoportban az 5. táblázat adatai szerint bár az összes öt állat közül kettőben megfigyeltük a betegség kiujulását, a fennmaradó állatokban Clostridium difficile-mentes tenyészetet figyeltünk meg végül, ami 60 %-os túlélési arányt jelent. A vankomicin rövid idejű beadását és CbM folyamatos beadását tartalmazó terápia hatásos volt a bélben túlélő Clostridium difficile csírázásának és szaporodásának megfékezésében anélkül, hogy befolyásolta volna a bél mikroflóráját, és a betegség teljes gyógyítását

biztosította, beleértve a betegség kiujulásának meggátlását.

1. táblázat

Elpusztult hörcsögök béltartalma és az izolált törzs (Clostridium difficile Ha. 16) toxinja egészséges hörcsögökben

Példa^{1 *}) D-l toxin Elpusztult állatok száma/kezelt állatok száma

N-Fil	-	0/2
L-Fil	+	2/2
BHI-Fil	-	0/2
BHI,Ha.16-Fil	+	2/2

1) = Hörcsög béltartalmának háromszoros mennyiségű tisztított vízzel történő keverésével előállított szuszpenziót és egy izolált törzs tápközegének sterilizált szürletét adtuk be egészséges (70 g, him) hörcsögöknek 1,0 - 1,0 cm³ mennyiségben az állatok hasába. N-Fil (az egészséges hörcsög béltartalmának sterilizált szürlete)

L-Fil (elpusztult hörcsög béltartalmának sterilizált szürlete)

BHI-Fil (BHI tápközeg sterilizált szürlete) és

BHI, Ha. 16-Fil (izolált törzs BHI tápközegben 48 órán keresztül anaerob módon végzett tenyésztésével kapott tápközeg sterilizált szürlete)

2. táblázat

Diarrheaban szenvedő hörcsög béltartalmából izolált Ha. 16 biokémiai jellemzői

Gram-féle színezés	+	indol	—
Endospórák képződése	+	eszklin	+
Aerob növekedés	-	lecitináz	-
Mozgékonyság	+	lipáz	-
Hemolitikus kapacitás	-	cukor-hasznositó	képesség
Tej	-	fruktóz	+
Zselatin	+	glükóz	+
Nitrát	-	mannitol	+
PYG terméke		mannóz	+
ecetsav	+	xilóz	-
vajsav	+	laktőz	-
izovajsav	+	maltóz	-
valeriánsav	+	keményítő	-
izovaleriánsav	+	szukróz	-
izokaprinsav	+
tejsav	+

- 12 ·· ·· • · · ·· · • · ·· ··♦· • · · · •··· ···· in

II g

táblázat

Φ ω 'Φ -μ •Η

Ν U) 'Φ

	ι—1 Φ &
U)	Φ	Φ
'(0	UJ	C
Ό	'Φ
<0	N	ÍN
Φ	Φ	T—1
Λ	•rí
	Φ	C
g	Uh	'Φ
U	Φ	-P
>	XI	2

in in in in in o in +i o in co

	<0 «5
	4-> Ü)
	Φ '(0
	> TS
	:0 <0 r-1
	44 Φ <0
44	XI >
'Φ	44 'Φ
ι—I	in g μ
	'Φ U Ό			Γ
	Ό >			«.
:2	(0 CO	in	ιη	ιη ο	ιη
	Φ tTN·			^+1
44	Λ Φ	o	ο	•>4· σι	ο
rH	Ό C
'<0	Eh Φ 'Φ			η
Ö	ft, +J
ω	Ο p
N
Ή
>	in φ
	'Φ in
	t 'Φ
	rö n <·			rd
	φ Φ ÍN rH			κ
	XI -rí <0	in	ιη	in rH	ιη
	Φ C >	\		-^.+1	\
	Eh Uh 'Φ 'fű	ÍN	<Ν	ιη ό	ο
	\|ϊ« Φ P P			-
	U X 3 Ό			ο

	+4
	44
	10			*»
	rd			Ό
	Φ			-
				ΪΝ
	in	in	ιη	ιη	ιη
	'Φ			-— >
	rH	o	ο	ο X	ο
	Φ			Φ
	N			S —
	Φ			' rH
	44				44
ΙΟ					44 Ο
N		1		Φ 42	ο a —
Π		Φ		e 'Φ	44 Φ ÍN
Φ		>	I	I 'Φ rH	Φ C
rH		Φ	'φ	•Η Ν :2	ΓΗ ζ-
ι—1		P 44	Η 44	44 Φ Ιπ	Η 44 Φ
Φ		N Φ	1 Φ	:3	'Φ Η Ε
Ό	in c	Q 44 Φ	Φ 44	'φ 'Φ
		'φ -H	μ e	rH Φ &	44 Η Ν
P		Φ	c g 'Φ	•Η C	Η 3 10
rd		(0 Ή	φ -Η Ν	0 'Φ Ο	3> μ
'05		Φ Φ	XI 44 ιη	•η ιλ a	44 ω
&>	Λ ·π	44	U4 '3 U	Ν 0
ω		Μ Φ	'Φ C 44	Un 44	ιη φ &
N		μ ιο e	rd ·Η fO	-Η Φ CT	3 g Φ
•H		(3 44 'φ	Ο X C	Ό 44 0	Λ'Φ rH
>		•Η φ Ν	μ 0 'Φ	• b rH	rH Ν 44
		Q 43 ιη	:£> 4J ιη	υ e-	Μ ιη 'Φ
	44
4-)	μ
rH	0
Φ	Λ
N	0
Φ	in			<
w	0

w Φ 'Φ Ώ

4->	σ
Φ	•d
χ:	'fÖ
φ	•m
<—I	•Ρ
44	C 0
rd	A
0	ίο
>	Ό
+4 4J	•d Cl)
Φ	'fű
rd	rd
Φ	r-1
<44	3
44	rd
'Φ	0)
rd :3	N
Μ	rd
:3 rd σ ίο
	4J
ο	'Φ
Cm	01
Ο	'Φ
Ο	N Φ
ο	-n
Ν'	Φ
α	<44 Φ
φ	ű
η 44	44
'φ	Φ
rd	C
:□	'01
Μ	10
:3	'01
Ν	03 ni
Φ	Φ
d ω	Λ S
\oj	o
-Ρ	>
-Ρ	&
□	<Ü ·
Ε	03 -rl
•d	φ 4J
44	C
	<£> Φ
Φ	r4
rd	ol Φ
•d	rí
υ	01
•Η	ε 4J
Md	'01 'Φ
Ud	ν ε
•d	ti) '01
Ό	N
	44 in
Ε	0
Ρ	Pl 44
•Η	01 0
Ό	c &
•d	01
Μ	44 0
4J	rd
ω	'Φ -P
0	rd rd
rd	□ φ
Ο	P -P
<	rd < Φ

II II rd CN

• · · · « · · · • · · · · • ···· ···· «··· · ♦ táblázat

C
'Φ
P

:O
P
P

P
N
in
Φ
P
φ	44
44	'Φ
	r—1
C	Ό
o	Ρ
s	=3
φ
P	Ρ
P	ι—1
Φ	'Φ
P	&
ío	W
73	Ν
•H	•Η
	>
Λ
Λ
Φ
N
in
tn
0
43
S
o
>
Ή
Φ >1 C — 'Φ in β 73 II Φ p a φ —	ÍO
in c	Μ
\φ \φ	β
1—1 4->	Φ
Φ Φ	r-t
ν ιη	r—t
φ φ	Φ
44	•ι—
>ι Φ
&> W	Ρ
Ό 'Φ	Ρ
>73	'Φ
tr> Φ
φ	ω
< Λ	Ν

in	Φ
'Φ	in	Φ
73	Ό	C
Φ	N
0)	Φ	σ>
Λ	•1-1
	Φ	C
S	4-1	'Φ
O	Φ	P
>	43	3

	Ρ
Ρ	Ρ
Ρ	0
φ	&
Ν	0
Φ	ιη
	ο


		φ

ιη	ιη	ιη ο	ιη co
	•—-	^+1	·
ιη	ιη	ιη ο	ιη ω
		*>	X—
		C0


ιη	ιη	ιη η	ιη
'•χ.
ο	ο	Η η	ο



		-
		ηι
ιη	ιη	ιη	ιη
—		·	\
ο	ο	ο X	ο
		φ
		β -
		*—' »—Ι
			44
			44 0
I		φ S	ο α-
φ		β 'φ	Ρ Φ (Μ
>	I	1 'Φ 1—1	Φ £3
φ	'φ	Ρ Ν :φ	rH <—
Ρ 44	Η Ρ	44 ιη Ρ	Ρ Ρ Φ
Ν φ	1 Φ	=3	'Φ Ρ β
in c	Q Ρ Φ	Φ 44	'φ \φ
'φ Ρ	3 β	ι-Ι Φ 0	Ρ Ρ Ν
φ	13 β 'Φ	Ρ ί3	ρ 3 ιη
Φ Ρ	φ Ρ Ν	Ο 'Φ 5	3 Ρ
φ φ	43 44 Φ	η ιη fn	ρ χ— ιη
43 Ό	44	ρ 'Φ υ	Ν 0
Ρ Φ	'Φ ί3 44	Ρ Ρ	ιη φ ö
Ρ >0 β	Η ·Η <0	ρ φ &	3 Β Φ
Φ Ρ 'Φ	:3 X C	ΌΡΟ	ΡρΦ ρ
•Η φ Ν	Ρ Ο 'Φ	• 3 ι-Ι	Ρ Ν ρ
Q b ιη	:3> ρ ιη	U β -	w ιη 'Φ

CQ

Φ
φ cn 'Φ
ω	Cn
Ρ	•Η
φ	'd
Λ	Ό
φ	Ρ
r—(	e 0
JJ	Α
r-\|	*0
0	Ό
>	•Ρ
Ρ	φ
Ρ	'CÖ
φ	ι—Η
r—I	r—1
Φ	3
Ρ	χ: «-Η
44 'Φ	Φ
•-Η	Ν
:5 Ρ	ίΰ
:□	ίο
Cn	Ρ
\	'φ
Ο	U)
fa	χφ
υ	Ν Φ
ο	•η
ο	Φ
·*	Ρ φ
C φ	42
η	44
44	Φ
'φ	C
rH	'Φ
:3	W
Μ	'Φ
:3	Ό Φ
Ν	Φ
ίΐί	42
0J	S
φ	Ο
-Ρ	>
ÍÖ	Cn
Ρ	Φ
3	η
ε •Η	Φ
44	ο <Ν

Φ P

Γ—1	0J	Φ
•Η		•ΓΊ
υ	ftí
	ε	Ρ
Μ-Ι	'CÖ	'Φ
Ρ	Ν	ε
•Η	Φ	'Φ
Ό		Ν
	44	0)
ε	0
3	Λ 44
ρ	Φ	0
Ό	α	Λ
•Η		Φ
Ρ	Ρ	C
Ρ	Ρ
φ	'Φ	Ρ
0	Ρ	r—I
t—I	Ρ	Φ
Ο	Ρ	-Ρ rH
	<	φ

II II

P <N • t «« ·· ·

- 14 in II z


w	Φ	1—1 td Cu Λ <d
vd	ω	fi
Ό	'Φ
(d	N	o
Φ	Φ	r-l
Λ	•r~>
	Φ	c
a	M-l	vd
Λ	Φ	•P
O	Λ	3

r>

o

táblázat in c 'Φ P Φ ω φ rd ω vd <—i o cn rd d (β o p <d g <d >1 rH o M-l s Λ U

-H Φ >! c 'Φ ti Φ b Φ

U) 'Φ r—I

Φ N Φ 44 >1 Cn Ό σ' <

I σ' φ

44	g c
'Φ	vd
i—1	ω 4->
••3	vd 5
b	T5 rd
:3	<d Φ id
	φ ω &
P	λ a
r-d	t5 <d
vd	S N fi
σ	Λ Φ
w	D 44 >
N)
•H
>	a i r-i
	U Φ «
	> Λ Φ >

w vd σ' ω 'φ a <d 'fd n ό •ú η φ <d <d -r~i co Φ Φ ^r md Λ <4-1 c vd -P 3 'Φ rd 4-> Φ -P N «Ο Φ rd

Φ »0 rH Φ •n

P rd vd &> w

N •rd >

P P M rd 0 Φ Λ N 0 Φ V) w o in

CV in o

in o

in ro in o

I

Φ
>	1
Φ	vd
M 44	rd P
N Φ	1 rd
(0 fi	a ü s
'φ -rd	3 e
Φ	fi β vd
<d h	Φ -d N
φ Φ	43 44 10
Λ -r-l	44
Lt rd	VD fi 44
m <o e	H -d <0
<d P vd	X fi
•rd φ N	P O vd
Q Λ V)	o p tn

in π (N tt>

σ' n o

^.+1 m in

in

in o

^.+1 in n in in o \ (N CO iű vb

<N	CV
in	in	in
o ><	o X	o
rd	<d
S _n	g
*— rd
		44
		44 O
id S	44	0 £U<~
β 'Φ	rd σ>	P rd cv
l \rd rd	c	(d fi
•Η N :3	vd z	r-H *—·
44 10 P	tn u.	rd P (d
:3	vd u	vd η β
<D 44	-P	VD VQ
rd (0 σ	fÜ &lr-	-P rd N
•H C	-P O r>	rd σ U)
0 vd ö	3 rd	3 -P
•>d ΙΛ fu	S ’	P ΙΛ
w vd ü	•H 44	N 0
<44 p	44 rd 'Φ	V) <d ö
h rd σ	6 rd	3 β <d
ΌΡΟ	S vd :3	ftvd r-1
• 3 rd	b n a	rd N -P
o e -	O 10 :3	w u) vd

A túlélt napok száma a 6 adag VCM beadásának befejezésétől az elhullás időpontjáig eltelt napok számát jelenti.

CbM kimutatása az ürülékben 400 CFU/g ürülék felett volt lehetséges.

A feltüntetett adatok a CbM beadás kezdetétől eltelt 7 napot túlélő 3 állatra vonatkoznak.

Claims

Szabadalmi igénypontok

1. Preventív és kurativ gyógyászati készítmény, amely Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembános colitis gyógyítására alkalmas, azzal jellemezve, hogy vajsavbaktérium sejteket vagy spórákat és vankomicint tartalmaz.
2. Az 1. igénypont szerinti készítmény, azzal jellemezve, hogy vaj savbaktériumként Clostridium butyricum-ot tartalmaz .
3. Az 1. igénypont szerinti készítmény, azzal jellemez- ve, hogy 10⁸ telepképző egység vaj savbaktérium sejtre vagy spórára vonatkoztatva 1 mg - 10 g vankomicint tartalmaz.
4. Eljárás Clostridium difficile által okozott diarrhea és pszeudomembános colitis megelőzésére és gyógyítására, azzal jellemezve, hogy érintett embernek vagy állatnak vaj savbaktérium sejteket vagy spórákat és vankomicint tartalmazó készítményt adunk be.
5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vaj savbaktériumként Clostridium butyricum-ot alkalmazunk.
6. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 10⁸ telepképző egység vaj savbaktérium sejtre vagy spórára vonatkoztatva 1 mg - 10 g vankomicint alkalmazunk.
7. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy

1 kg emberi testtömegre vonatkoztatva 10⁶-10⁹ telepképző egység vajsavbaktérium sejtet vagy spórát alkalmazunk.
8. Javított eljárás Clostridium difficile által okozott diarr hea és • · ««
9 · ♦ • « ·

4 ··· · pszeudomembános colitis vankomicin hatásos mennyiségének beadásával történő megelőzésére és gyógyítására, azzal jellemezve, hogy egyidejűleg vajsavbaktérium sejteket vagy spórákat adunk be.

9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vaj savbaktériumként Clostridium butyricum-ot alkalmazunk.
10. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 10⁸ telepképző egység vajsavbaktérium sejtre vagy spórára vonatkoztatva 1 mg - 10 g vankomicint alkalmazunk.
11. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 1 kg emberi testtömegre vonatkoztatva 10⁶-10⁹ telepképző egység vaj savbaktérium sejtet vagy spórát alkalmazunk.