HU215904B - Közvetlenül leolvasható reagenscsík - Google Patents
Közvetlenül leolvasható reagenscsík Download PDFInfo
- Publication number
- HU215904B HU215904B HU9602138A HUP9602138A HU215904B HU 215904 B HU215904 B HU 215904B HU 9602138 A HU9602138 A HU 9602138A HU P9602138 A HUP9602138 A HU P9602138A HU 215904 B HU215904 B HU 215904B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- test
- sample
- test strip
- reagent
- membrane
- Prior art date
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 153
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 70
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 75
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 75
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 75
- 230000008859 change Effects 0.000 claims abstract description 48
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 44
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 31
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 24
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 81
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 58
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 25
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 25
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 22
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 22
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 21
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 20
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 11
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 9
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 claims description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 5
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 238000004078 waterproofing Methods 0.000 claims description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 4
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 4
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 4
- 229920001169 thermoplastic Polymers 0.000 claims description 4
- 239000004416 thermosoftening plastic Substances 0.000 claims description 4
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000172 poly(styrenesulfonic acid) Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 2
- 229940005642 polystyrene sulfonic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims 1
- XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N methyl vinyl ether Chemical compound COC=C XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 239000004575 stone Substances 0.000 abstract 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 abstract 2
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 abstract 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 72
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 42
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 13
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 13
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 9
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 9
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 9
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- RUDINRUXCKIXAJ-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,14-heptacosafluorotetradecanoic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F RUDINRUXCKIXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 4
- OVBJJZOQPCKUOR-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[O-]C(=O)C[NH+](CC([O-])=O)CC[NH+](CC([O-])=O)CC([O-])=O OVBJJZOQPCKUOR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N hydron;(e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine;chloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- BRRSNXCXLSVPFC-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-Trihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1O BRRSNXCXLSVPFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWKJNIMGNUTZOO-UHFFFAOYSA-N 3,5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonic acid Chemical compound OC1=C(Cl)C=C(Cl)C=C1S(O)(=O)=O LWKJNIMGNUTZOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NEGFNJRAUMCZMY-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)benzoic acid Chemical compound CN(C)C1=CC=CC(C(O)=O)=C1 NEGFNJRAUMCZMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012790 adhesive layer Substances 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- FPAYXBWMYIMERV-UHFFFAOYSA-L disodium;5-methyl-2-[[4-(4-methyl-2-sulfonatoanilino)-9,10-dioxoanthracen-1-yl]amino]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC(C)=CC=C1NC(C=1C(=O)C2=CC=CC=C2C(=O)C=11)=CC=C1NC1=CC=C(C)C=C1S([O-])(=O)=O FPAYXBWMYIMERV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 239000001124 (E)-prop-1-ene-1,2,3-tricarboxylic acid Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N (e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine Chemical compound C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N 0.000 description 1
- KUQNCHZOCSYKOR-UHFFFAOYSA-N 1,1-dioxospiro[2,1$l^{6}-benzoxathiole-3,9'-xanthene]-3',4',5',6'-tetrol Chemical compound O1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C(O)=C1OC1=C(O)C(O)=CC=C21 KUQNCHZOCSYKOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXWOUPGDGMCKGT-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC(C=O)=C1O IXWOUPGDGMCKGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPOBTYJRKAJERX-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-n-[(3-ethyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)amino]-1,3-benzothiazol-2-imine Chemical compound S1C2=CC=CC=C2N(CC)C1=NN=C1SC2=CC=CC=C2N1CC CPOBTYJRKAJERX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MCGBIXXDQFWVDW-UHFFFAOYSA-N 4,5-dihydro-1h-pyrazole Chemical compound C1CC=NN1 MCGBIXXDQFWVDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOTGCZBEERTTDQ-UHFFFAOYSA-N 4-Methoxy-1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(OC)=CC=C(O)C2=C1 BOTGCZBEERTTDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBTNLADSUVOPPN-UHFFFAOYSA-N 5,6-diaminouracil Chemical compound NC=1NC(=O)NC(=O)C=1N BBTNLADSUVOPPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPBNQYLKHUNLQE-UHFFFAOYSA-N 8-anilinonaphthalene-1-sulfonic acid;azane Chemical compound [NH4+].C=12C(S(=O)(=O)[O-])=CC=CC2=CC=CC=1NC1=CC=CC=C1 IPBNQYLKHUNLQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-isoascorbic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical class OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical class [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940091181 aconitic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N cis-aconitic acid Chemical compound OC(=O)C\C(C(O)=O)=C\C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000019262 disodium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002526 disodium citrate Substances 0.000 description 1
- CEYULKASIQJZGP-UHFFFAOYSA-L disodium;2-(carboxymethyl)-2-hydroxybutanedioate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(C(=O)O)CC([O-])=O CEYULKASIQJZGP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 150000004675 formic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N furan-2,5-dione;methoxyethene Chemical compound COC=C.O=C1OC(=O)C=C1 UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000012209 glucono delta-lactone Nutrition 0.000 description 1
- 229960003681 gluconolactone Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K hemin Chemical compound [Cl-].[Fe+3].[N-]1C(C=C2C(=C(C)C(C=C3C(=C(C)C(=C4)[N-]3)C=C)=N2)C=C)=C(C)C(CCC(O)=O)=C1C=C1C(CCC(O)=O)=C(C)C4=N1 BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical class CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Natural products OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 1
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000010388 propyl gallate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000473 propyl gallate Substances 0.000 description 1
- 229940075579 propyl gallate Drugs 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N trans-aconitic acid Natural products OC(=O)CC(C(O)=O)=CC(O)=O GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004804 winding Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
- G01N33/526—Multi-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/66—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood sugars, e.g. galactose
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
A találmány reagenscsík diagnősztikai eszközre vőnatkőzik, amelyalkalmas valamely vizsgálandó anyag kőncentrációjának mérésére egyadőtt főlyadékban. A főlyadék mintáját egy sőr, a csík h sszán lévő,meghatárőzásra szőlgáló részen átvezetve a vizsgálandó anyag reakcióbaléphet egy alkalmas reagenssel, színváltőzást idézve elő. Minden egyesmeghatárőzásra szőlgáló rész tartalmazza a sz nreakció gátlószerét. Agátlószer kőncentrációja az egymás űtáni részekben egyre emelkedik,miáltal a színváltőzást műtató részek száma jellemző a vizsgálandóvegyület kőncentrációjára. A tesztcsík k lönösen alkalmas glükózkőncentrációjának mérésére vérben. A találmány egy előnyös kivitelialakjában a mintát egy membrán adőtt részének megváltőztatásávalkialakítőtt csatőrnában vezetik a membrán áltőzatlan szerkezetű, ameghatárőzásra szőlgáló részéhez. ŕ
Description
KIVONAT
A találmány reagenscsík diagnosztikai eszközre vonatkozik, amely alkalmas valamely vizsgálandó anyag koncentrációjának mérésére egy adott folyadékban. A folyadék mintáját egy sor, a csík hosszán lévő, meghatározásra szolgáló részen átvezetve a vizsgálandó anyag reakcióba léphet egy alkalmas reagenssel, színváltozást idézve elő. Minden egyes meghatározásra szolgáló rész tartalmazza a színreakció gátlószerét. A gátlószer koncentrációja az egymás utáni részekben egyre emelkedik, miáltal a színváltozást mutató részek száma jellemző a vizsgálandó vegyület koncentrációjára. A tesztcsík különösen alkalmas glükóz koncentrációjának mérésére vérben. A találmány egy előnyös kiviteli alakjában a mintát egy membrán adott részének megváltoztatásával kialakított csatornában vezetik a membrán változatlan szerkezetű, a meghatározásra szolgáló részéhez.
A leírás terjedelme 18 oldal (ezen belül 6 lap ábra)
HU 215 904 A
HU 215 904 A
A találmány diagnosztikai eszközre vonatkozik, valamint a száraz reagenscsík alkalmazásával egy adott meghatározandó anyag koncentrációjának mérésére valamely testfolyadékban. A találmány közelebbről olyan tesztcsíkra vonatkozik, amely a koncentrációt közvetlenül, műszer segítsége nélkül méri.
Korábban sok olyan diagnosztikai eszközt fejlesztettek ki, amelyek alkalmasak bizonyos vizsgálandó anyagok koncentrációjának mérésére testfolyadékokban. Ezek az eszközök például a glükóz, a koleszterin, a fehérje, a ketonok, a fenil-alanin, valamint enzimek koncentrációját mérik vérben, vizeletben, illetve nyálban.
A szilárd fázisú, enzimkészítmény alapú reagenscsíkokat elterjedten használják klinikai laboratóriumokban, orvosi rendelőkben, kórházakban, valamint otthon, a testfolyadékokban lévő glükóz kimutatására. Valójában ezek a reagenscsíkok mindennapos szükségletté váltak a cukorbetegek milliói számára. Mivel a cukorbetegség veszélyes rendellenességeket okozhat a vér vegyi összetételében, hozzájárulhat a látás károsodásához, a veseműködés zavarához, valamint más, komoly egészségügyi következményekhez. Annak érdekében, hogy az ilyen rendellenességek kockázatát minimalizálják, a legtöbb cukorbetegnek rendszeresen vizsgálnia kell magát, majd ennek alapján szervezetének glükózkoncentrációját be kell állítania diétával és/vagy inzulin injektálásával. Némely betegek számára akár naponta négy vagy több alkalommal is szükséges a vérükben lévő glükóz koncentrációjának mérése.
A glükóz meghatározására szolgáló gyors, pontos és olcsó reagenscsík különösen fontos azoknak a cukorbetegeknek a számára, akik kénytelenek megfelelő diétával szabályozni a cukorbevitelt, vagy pedig inzulininjekciókat adni maguknak vérük glükózkoncentrációjának gyakori mérése alapján.
Ismeretesek olyan reagenscsíkok, melyek olyan indikátort tartalmaznak, amely megváltoztatja színárnyalatát a vizsgált testfolyadék glükózkoncentrációjától függően. Bár ezeknek a csíkoknak némelyike reduktív kémiai reakciót használ, lényegesen gyakoribb az oxidálható színezékek és származékaik alkalmazása. Némely ilyen diagnosztikai eszköz enzimet, például glükóz-oxidázt tartalmaz, amely képes a glükózt glükonsavvá és hidrogén-peroxiddá oxidálni. Az ilyen reagenscsíkok oxidálható színezéket is tartalmaznak, valamint olyan peroxidáló aktivitással rendelkező anyagot, amely képes szelektíven katalizálni az oxidálható színezék oxidációját hidrogén-peroxid jelenlétében [pl. Kiser et al., US 5 306623 (1994. 04. 26.)].
Hochstrasser szabadalmában [US 3 964871 (1976. 6. 22.)] szereplő egyszer használatos indikátorcsík testfolyadékokban lévő vizsgálandó anyagok, például glükóz közvetlen mérésére alkalmas. Ez az indikátor oly módon mutatja a vizsgálandó anyag koncentrációját, hogy a benne lévő indikátorreagens oxidálódik, és színe megváltozik, midőn reagál a szóban forgó vizsgálandó anyaggal, de egyidejűleg olyan „antagonista” anyagot is tartalmaz, amely valamely módon meggátolja az oxidált indikátor felhalmozódását, amíg az teljesen fel nem használódik.
Palmer és munkatársai [EP 0317070 (1989. 5. 24.)], illetve [US 5 036000 (1991. 6. 30.)] „digitális” kvantitatív mérőrendszert ismertetnek glükóz és más vizsgálandó anyagok meghatározására. Ez a rendszer oly módon méri valamely szerves vegyület koncentrációját testfolyadékokban, hogy első lépésben az adott vegyületet szubsztrátum-specifikus oxidáz enzimmel oxidálva hidrogén-peroxidot állít elő. A rendszer egy, a hidrogén-peroxid redukciójára képes, kromogén vegyületet, valamint egy másik, nagyobb redukciós képességű, levegőn is stabil anyagot tartalmaz. A nagyobb redukciós képességű anyag mindaddig késlelteti a kromogén anyag kimutatható színváltozását, míg el nem fogy. Ilyen módon mindaddig nem tapasztalható színváltozás, amíg a mérendő hidrogén-peroxid mennyisége kevesebb, mint a légstabil peroxid reduktáns koncentrációja által eleve meghatározott szint. Mindennek eredményeképp a rendszer a koncentrációt kvantitatív módon, a színváltozás intenzitásától függetlenül méri.
Engelmann [US 4738 823 (1988. 4. 19.)] olyan tesztcsíkot ismertet vizsgálandó anyagok meghatározására, amely a minta feleslegének eltávolítására szolgáló abszorbens részt tartalmaz. Ennek a csíknak fedele is van, amelyen a minta bevezetésére alkalmas nyílás helyezkedik el.
Burkhardt és munkatársai [US 4 810470 (1989. 3. 7.)] a vizsgálandó anyagok koncentrációjának folyadékokban történő meghatározására szolgáló eszközt közölnek. Eszközük a folyadék számára át nem járható bevonattal fedett, egy vagy több nedvszívó rétegből álló anyagból áll. A nedvszívó anyag felületére juttatott minta kromatográfiásan halad befelé az anyagban. A továbbiakban a minta a vizsgálandó anyag meghatározására szolgáló reagenssel átitatott területre szívódik.
Daffern és munkatársai [US 4994238 (1991. 2. 19.)] olyan kémiai analitikai diagnosztikai eszközről tudósítanak, amely abszorbens rétegből, vízzáró gátrétegből, valamint meghatározott térfogatú reagensrétegből áll. A mintának a reagensrétegbe való jutása a felette elhelyezkedő abszorbens, illetve gátrétegben lévő lyukakon keresztül történik.
Akár otthon, akár orvosi rendelőben, akár rendelőintézetben, akár pedig kórházban történjen is a vizsgálat elvégzése, a glükózmeghatározás pontossága és reprodukálhatósága rendkívül fontos. Színjelzéses reagenscsík alkalmazása esetén kívánatos, hogy a színváltozás határozott és a testfolyadék egyéb komponenseitől független legyen. Egyrészt a vizuálisan értékelendő reagenscsík esetében különösen fontos, hogy az esetlegesen látáskárosodott cukorbetegeknek határozott, a glükózkoncentrációtól függő színváltozást mutató csík álljon rendelkezésükre, másrészt viszont az adott hullámhossznál mért abszorbancia megváltozásaként jelentkező színváltozás a műszeres leolvasás pontossága szempontjából is jelentős.
Minthogy a színváltozás előidézéséhez egy sor kémiai reakció lejátszódása szükséges, így az korántsem pillanatszerű. Emiatt a felhasználónak bizonyos ideig általában egy percig vagy ennél rövidebb ideig - várnia kell a reakció végbemenetelére. Műszeres leolvasás
HU 215 904 A esetén a készülék jelezni képes a reakció megtörténtét. Abban az esetben azonban, ha a leolvasási műszer használata nélkül, vizuálisan történik, a felhasználó alábecsülheti a szükséges időt, és a túl korai leolvasással pontatlan eredményt kaphat. Másrészről az is előfordulhat, hogy a felhasználó úgy érezheti, hogy sokáig kell várnia a csík leolvasásával, hogy biztos lehessen a reakció teljességében, ami szükségtelen késlekedéssel és a felhasználó elégedetlenségével járhat. Mindezek alapján szükség van egy „kémiai” órára, vagyis egy olyan részre a csíkon, amely nem a mintában jelen lévő glükóz (vagy más, vizsgálandó komponens) koncentrációjától függően változtatja meg a színét, hanem attól függően, hogy a mintával adott színreakció végbemeneteléhez szükséges idó eltelt-e.
A találmány szerinti hosszúkás, többrétegű, valamely vizsgálandó anyag koncentrációjának testfolyadékmintában való mérésére szolgáló reagens tesztcsík részei a következők:
a) alsó réteg keresztlyukkal, a minta befogadására;
b) membránréteg, melynek mintaoldala az alsó réteg felé néz, tesztoldala pedig az ellenkező irányba, és ez a réteg olyan reagenst tartalmaz, mely a vizsgálandó anyaggal reagálva színváltozást idéz elő, az alábbi komponensek révén:
i) első komponens, mely a vizsgálandó anyaggal reakcióba lépve hidrogén-peroxid képződését váltja ki;
ii) második komponens, mely a hidrogén-peroxiddal reakcióba lépve színváltozáson megy keresztül; és iii) harmadik komponens, mely gátolja a második komponens színváltozását;
c) közbülső réteg, mely az alsó réteg és a membránréteg között helyezkedik el;
d) adagolórendszer a minta megfelelő eloszlatására a csík hosszán, melynek elemei az alábbiak:
i) vízzáró rész a membránrétegben; és ii) folyadéklevezetó csatorna a közbülső rétegben, mely a mintát a vízzáró rész felületén egy sor, a membránréteg hosszán elhelyezkedő, különálló, nedvszívó kimutatási terület felé irányítja.
A gátlószer koncentrációja a csík elejétől előre meghatározott módon fokozatosan emelkedik, oly módon, hogy a mintában lévő vizsgálandó anyag koncentrációjának ezzel arányosan kell növekednie a színváltozás előidézéséhez. Ezáltal egy vagy több kimutatási terület változtathatja meg a színét, midőn a mintát a csíkra visszük, és a csík elejétől legtávolabbi színváltoztató terület jelzi a vizsgálandó anyag koncentrációját a mintában.
Rendeltetésszerű használat esetén a testfolyadékmintában a vizsgálandó anyag koncentrációjának mérési módszere a következő lépésekből áll:
a) a mintát reagens tesztcsíkra visszük, melynek részei az alábbiak:
i) egy sor nedvszívó kimutató terület, melyek mindegyike megváltoztatja színét, ha érintkezésbe kerül meghatározott, a csík elejéhez közelebb lévő kimutató területek színváltozását előidézőnél nagyobb mennyiségű vizsgálandó anyagot tartalmazó folyadékkal, és ii) adagolórendszer a minta megfelelő eloszlatására egy előre meghatározott vízzáró útvonal mentén minden egyes kimutató területhez;
b) megállapítjuk, hogy melyik az, a tesztcsík elejétől legtávolabbi kimutató terület, amelyik megváltoztatja színét.
A csík olyan típusú, hogy a „mintaoldalra” felvitt testfolyadékban lévő vizsgálandó anyag koncentrációjával arányos, látható jelet ad. Ez a látható jel a csík túloldalán (a „tesztoldal”-on) olvasható le.
A tesztcsík vegyi összetétele természetesen attól függ, hogy milyen testfolyadékban, milyen anyagot kívánunk mérni. A tesztcsíkok megalkothatok oly módon, hogy alkalmasak legyenek glükóz vagy más cukrok, alkohol, koleszterin, fehérjék, ketonok, húgysav, fenil-alanin, valamint enzimek mérésére testfolyadékokban, például vérben, vizeletben és nyálban éppúgy, mint vízben. A kényelem és a rövidség kedvéért a jelen találmányban részletesen ismertetett reagens tesztcsíkok a vérben lévő glükóz kimutatására szolgálnak. A szakmában jártasak számára nyilvánvaló, hogy a közölt információ alapján hasonló tesztcsík más vizsgálandó anyag/testfolyadék rendszer esetén is alkalmazható.
A jelen találmány szerinti tesztcsík lehetővé teszi a glükóz koncentrációjának viszonylag egyszerű és gyors meghatározását vérben, a felhasznált minta mennyiségétől függetlenül. A csík alsó rétegén egy lyuk található, amelyen keresztül a minta a porózus mátrix „mintaoldalára” juttatható, míg ennek túlsó oldala a „tesztoldal”. A porózus mátrix általában membrán, és ezt a két kifejezést a jelen találmányban, valamint a hozzá kapcsolódó igénypontokban azonos jelentésben használjuk. A mátrixra visszük fel a tesztreagenst, amely többé-kevésbé beszívódik a mátrix pórusaiba. Az egyszerűség kedvéért a jelen találmányban, valamint a hozzá kapcsolódó igénypontokban néha úgy hivatkozunk a mátrixon lévő reagensre, mint „bevonatra”, jóllehet tudatában vagyunk annak, hogy a reagens bevonat behatol a mátrixba.
Az alsó réteg és a mátrix között közbülső réteg helyezkedik el. A közbülső rétegen lévő rések egy vonalban vannak a membrán vízzáró részeivel, annak érdekében, hogy a mintát a csík hosszán elhelyezkedő nedvszívó kimutató területek sorára vezessék. (A jelen találmányban, valamint a hozzá kapcsolódó igénypontokban a „nedvszívó” kifejezés alatt abszorbenst kell érteni.) A közbülső rétegben, a kimutató területeket körülvevő részen található rovátkolás azt a célt szolgálja, hogy a minta áramlását ezekre a területekre kényszerítse.
Ilyen módon meghatározott térfogatú minta - rendszerint teljes vér, amely tartalmazza a vörösvértcstckct és a glükózt egyaránt - vezetődik a membrán mintaoldalán lévő kimutató területek mindegyikéhez. A találmány szerinti eszköz előnyös kiviteli alakjánál az alsó rétegen elvezetónyílások is vannak ezeken a helyeken, az azonos mértékű térfogatkitöltés elősegítése érdeké 1
HU 215 904 A ben. A mátrix porozitása lehetővé teszi, hogy a folyadék a mintaoldalról a tesztoldal felé haladjon, például a haj szálcsővesség elve alapján. Ilyen módon a tesztreagens reakcióba léphet a vérben lévő glükózzal, színváltozást idézve elő a tesztoldalon, vagy annak közelében. Mivel az erőteljes színű vörösvértestek megnehezítik a színváltozás kimutatását, előnyösen anizotrop mátrixot alkalmazunk, melynek pórusai tágabbak a mintaoldalon és szűkebbek a tesztoldalon, annak érdekében, hogy távol tartsák a vörösvértesteket a tesztoldaltól. Egy sereg anyag alkalmas arra, hogy a találmány szerinti tesztcsík különböző komponensének, valamint az időzítőnek a szerepét betöltse. Néhány ezek közül ismertetésre kerül Kiser és munkatársainak szabadalmában [US 5 306623 (1994. 4. 26.) és US 5 418142 (1995.5.23.)].
A tesztreagens tartalmaz egy olyan komponenst, amely a glükózt hidrogén-peroxiddá alakítja, amilyen például a glükóz-oxidáz; egy vagy több olyan komponenst, amely a mintában lévő glükózból keletkezett hidrogén-peroxid kimutatására szolgál; valamint egy gátlószert. A hidrogén-peroxid kimutatására szolgáló komponens lehet peroxidáz, előnyösen torma peroxidáz, valamely „indikátorral” együtt, amely megváltoztatja színét a reakció során. Az indikátor oxidálható színezék vagy ennek származéka lehet. A peroxidáz az indikátor oxidációját katalizálja hidrogén-peroxid jelenlétében. A reagens utolsó komponense egy gátlószer, amely késlelteti az indikátor színváltozással járó oxidációját.
A csík hossza mentén elhelyezkedő egyes szegmensekben a gátlószer koncentrációja eltérő. Valamennyi szegmens rendelkezik nedvszívó kimutatási területtel, mely csak abban az esetben változtatja meg a színét, ha elegendő glükóz van jelen, először is a gátlószer teljes mennyiségének elfogyasztásához, majd pedig az indikátor oxidálásához, előidézve ezáltal a jellemző színváltozást. így egy adott terület színének megváltozása azt mutatja, hogy az eredeti vérmintában a glükóz koncentrációja meghalad egy bizonyos küszöbértéket. A csík hossza mentén, meghatározott irányban, az egymást követő szegmensek egyre több gátlószert tartalmaznak, ami a glükózkoncentráció egyre emelkedő küszöbértékének felel meg. Az indikátor mennyisége valamennyi szegmensben azonos. Elvben természetesen bármely más variáció is elképzelhető a gátlószer/indikátor egyensúlyra vonatkozóan.
Ha a szegmensekben lévő gátlószer mennyisége egy adott vizsgálati mintának megfelelő tartományba esik, akkor a szomszédos kimutató területek oly módon reagálnak a vizsgálandó anyaggal, hogy az egyikük elszíneződik, a következő viszont nem. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a minta glükózkoncentrációja eléri az elszíneződő területre jellemző küszöbértéket, de kevesebb, mint a következő, elszíneződést nem mutató területre jellemző érték.
A vér glükózkoncentrációjának mérése során kívánt esetben időzítő szegmenst is alkalmazhatunk, amely a normál indikátorcsík elemeit - tesztreagenssel ellátott porózus mátrixot -, valamint glükózt tartalmaz. Száraz állapotban a glükóz nem lép reakcióba a reagenssel, de amennyiben mintát viszünk a tesztcsíkra, úgy az időzítő bevonat aktiválódik, és a glükóz - meghatározott idő elteltével - az indikátor színváltozását idézi elő. A glükóz előnyösen olyan koncentrációban van jelen az időzítőben, amely biztonsággal felülmúlja a gátlószer mennyiségét. A tesztcsík, valamint az időzítő színváltozása értékelhető közvetlenül, vizuális módon, avagy optikai mérőműszerrel, reflexiós üzemmódban.
A találmány szerinti megoldást a mellékelt ábrákon mutatjuk be.
1. ábra A találmány szerinti, közvetlenül leolvasható reagens tesztcsík perspektivikus képe.
2. ábra A találmány szerinti, közvetlenül leolvasható reagens tesztcsík „mintaoldalának” metszete alulnézetből.
3. ábra A 2. ábrán szereplő tesztcsík belső részletének nagyított, félnézet-félmetszeti perspektivikus képe.
4. ábra A 2. ábrán szereplő tesztcsíknak a 4-4 vonal mentén készült keresztmetszeti képe.
5. ábra A találmány szerinti tesztcsík alulnézeti képe.
6. ábra Az 5. ábrán szereplő tesztcsík „tesztoldalát” mutató felülnézeti kép.
7. ábra A 6. ábrán szereplő tesztcsík minta felvitele után.
A jelen találmány tárgya közvetlenül leolvasható, valamely vizsgálandó anyagnak testfolyadékokban történő mérésére szolgáló reagens tesztcsík. A tesztcsík lényege a tesztreagenssel átitatott porózus mátrix, amely színváltozáson megy keresztül, midőn a vizsgálandó anyagot tartalmazó testfolyadék mintáját a tesztcsíkra visszük.
A mátrix lehet homogén összetételű vagy bevonattal ellátott, izotrop vagy anizotrop szerkezetű. Egyik oldala a „mintaoldal” - erre visszük fel a vizsgálandó mintát - , másik oldala pedig a „tesztoldal” - ezen figyelhető meg a színváltozás. A mátrix előnyösen anizotrop membrán, még előnyösebben pedig olyan anizotrop membrán, melynek pórusai széles mérettartományban változnak. A pórusok mérete például 0,1 és 150 mikrométer között váltakozhat a membránban. A nagyméretű pórusok oldalán a pórusok előnyösen 30 és 40 mikrométer méretűek. A membránnak azon az oldalán, ahol a pórusok a legkisebbek, a holttérfogat viszonylag kicsi, és a membrán anyaga meglehetősen sűrű. Ez a réteg a membrán teljes vastagságának mintegy 20%-át teszi ki. Ebben a rétegben a pórusok mérete előnyösen 0,1 és 0,8 mikrométer közötti, a névleges pórusméret előnyösen 0,3 mikrométer. Midőn a vizsgálandó testfolyadékot a „mintaoldalra” felvisszük, a minta egyre kisebb pórusokon kell, hogy áthaladjon, amint beszívódik a membránba. Egy idő után a mintában lévő szilárd részecskék - például a vörösvértestek - eljutnak egy olyan helyre a membránban, melyen már nem képesek áthatolni. A minta többi része - mely az oldott glükózt továbbra is tartalmazza - átjuthat a „tesztoldalra”. A membrán anizotrop jellege és/vagy szeparációs komponens alkalmazása (lásd később) viszonylag gyors átfolyást tesz lehetővé a membránon, még abban az esetben is, ha a szilárd részecskék kiszűrődnek.
HU 215 904 A
Ahogy a minta keresztülhalad a mátrixon, a tesztreagenssel lejátszódó reakció során fényelnyelö színanyag keletkezik, illetve elbomlik a „tesztoldal” közelében lévő holttérben, miközben a mátrixról való fényvisszaverődés jelentős mértékben megváltozik.
A mátrix legmegfelelőbb anyagai a poliszulfonok és a poliamidok (nylon), de más, hasonló tulajdonságú polimerek is alkalmazhatók. A polimereket funkciós csoportok bevitelével módosítva, töltéssel rendelkező szerkezetet hozhatunk létre, miáltal a mátrix felszíne elektromosan semleges, pozitív vagy negatív töltésű lehet.
A mátrixot alkotó porózus anyag kialakítása előnyösen a polimer öntésével ti úté n i k. támasztó váz alkalmazása nélkül. Ilyen mátrix lehet például a kereskedelemben beszerezhető anizotrop poliszulfon membrán (Memtec Inc., Timonium, Maryland, USA). A mátrix vastagsága általában 200 mikrométernél kevesebb, előnyösen 115 és 155 mikrométer közötti. Legelőnyösebben 130 és 140 mikrométer közötti vastagságú mátrixot használunk, különösen, ha anyaga nylon vagy anizotrop poliszulfon.
A membrán kezelése a tesztreagenssel oly módon történik, hogy a szükséges komponensek elegyébe merítve telítjük. Előnyösen a telítést úgy végezzük, hogy legalább a komponensek egy részénél bizonyos sorrendiséget alkalmazunk. A reagens feleslegét mechanikai módszerrel távolítjuk el, például sűrített levegő, orvosi penge vagy üvegbot segítségével. Ezután a membránt megszárítjuk. A szárítás során a reagens a membrán kisebb pórusú (teszt) oldalán koncentrálódik.
A tesztreagens alkotóelemei a következők:
i) a glükózt hidrogén-peroxiddá alakító komponens, ii) a hidrogén-peroxid kimutatására szolgáló komponens, valamint iii) a hidrogén-peroxid kimutatására szolgáló komponens gátlószere.
A reagens továbbá kívánt esetben tartalmazhat elválasztó komponenst, amely elősegíti a szilárd részecskék - például a vörösvértestek - visszatartását a mátrixban, hatékonyan eltávolítva őket a testfolyadékból. A reagens egyéb komponenseket is tartalmazhat a továbbiakban, valamint a példákban leírtak szerint.
A glükóz hidrogén-peroxiddá alakítását végző komponens előnyösen glükóz-oxidáz enzim, mely általában Aspergillus niger vagy Penicillium eredetű. A glükózoxidáz glükózzal és oxigénnel reagálva glükonolaktont és hidrogén-peroxidot képez. Az optimális glükóz-oxidáz koncentráció az adott indikátorrendszer összetételétől függ. Abban az esetben például, ha az indikátorrendszer MBTHSB-ANS (melyet a későbbiekben ismertetünk), úgy a glükóz-oxidáz megfelelő koncentrációja 500- 10000 E/ml közötti, előnyösen 700- 2000 E/ml közötti, legelőnyösebben pedig 1000 E/ml körüli. A magasabb glükóz-oxidáz koncentráció a reakció végbemenetelét meggyorsítja, az alacsonyabb koncentráció pedig lelassítja.
Az így keletkező hidrogén-peroxid reakcióba lép a hidrogén-peroxid kimutatására szolgáló komponenssel, mely a hidrogén-peroxid és egy indikátor reakcióját katalizáló peroxidáz enzim. A peroxidáz enzim oxidánsként hidrogén-peroxidot használ a különböző szubsztrátumokról hidrogénatomok eltávolítására. Az alkalmas peroxidáz enzim tartalmazhat ferri-protoporfirint, amely növényi eredetű, vörös heminszármazék. Az állati eredetű - például állatok pajzsmirigyéből származó - peroxidázok szintén felhasználhatók. Különösen előnyös hidrogén-peroxid kimutatására szolgáló komponens a torma peroxidáz (HRPO).
A hidrogén-peroxid - előnyösen valamely peroxidáz katalízise mellett - reakcióba lépve az indikátor színezékkel, közvetlen vagy közvetett módon, meghatározott hullámhossztartományban fényelnyelő vegyület képződését vagy éppen elbomlását idézi elő. Előnyösen az indikátor színezék és a tesztreagens maximális fényelnyeléséhez tartozó hullámhossz eltérő. Az indikátor oxidált formája lehet színes vagy színtelen, miáltal színváltozást okoz a mátrix „tesztoldalán”. Ez azt jelenti, hogy a tesztreagens képes kimutatni a vizsgálandó vegyület jelenlétét a mintában, egy színes terület elszíntelenedése, vagy épp ellenkezőleg, egy színtelen terület elszíneződése alapján.
A jelen találmányban felhasználható indikátorok a következők:
a) 3-metil-2-benzotiazolinon-hidrazon-hidroklorid (MBTH) kombinációja 3-dimetil-amino-benzoesavval (DMAB);
b) MBTH kombinációja 3,5-diklór-2-hidroxibenzolszulfonsavval (DCHBS);
c) 4-amino-antipirén (4-AAP) és 5-oxo-l-(pszulfon-fenil)-2-pirazolin-3-karbonsav (OPSP);
d) 4-AAP és A-(m-tolil)-dietanol-amin (NDA);
e) 2,2’-azino-bisz(3-etil-benztiazolin)-szulfonsav (ABTS);
f) 4-AAP és 4-metoxi-naftol;
g) pirogallol vörös (PGR);
h) bróm-pirogallol vörös (BPR);
i) Acid Green 25 (AG); (Sigma Chemicals, USA)
j) [3 -metil-2-benzotiazolinon-hidrazon] -Nszulfonil-benzolszulfonsav-mononátriumsó (MBTHSB) kombinációja 8-anilino-lnaftalinszulfonsav ammóniumsó val (ANS).
Előnyösen MBTHSB-ANS indikátort használunk. Erre az indikátorra vonatkozó további információ található a 302575 számú (1994. 09. 08.) amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben.
A gátlószer a hidrogén-peroxid és az indikátor közötti reakciót késlelteti, például oly módon, hogy redukálja a hidrogén-peroxidot vagy redukálja az oxidált indikátort. Elvben a gátlószer működésére számos mechanizmus szóba jöhet. Először is, a gátlószer versenghet az indikátorral, lelassítva így az abban végbemenő színváltozást. Másodsorban a gátlószer nem kompetitív módon is működhet, ami azt jelenti, hogy teljes mennyiségének el kell használódnia, mielőtt az indikátor színváltozása megkezdődik. A gátlószer működésének más módja is lehetséges. A jelen találmány gátlószerei előnyösen nem kompetitív jellegűek.
Megfelelő gátlószer lehet a 2,3,4-trihidroxi-benzoesav; a propil-gallát; a 3,4-dihidroxi-fahéjsav; a 3,41
HU 215 904 A dihidroxi-benzaldehid; a galluszsav; az 5,6-diaminouracil; az aszkorbinsav és az izoaszkorbinsav. Előnyösen aszkorbinsavat alkalmazunk, jóllehet az aszkorbinsav oldatban oxidálódik, úgyhogy stabilizálni kell, amennyiben reagens bevonatban kívánjuk felhasználni. Stabilizálószerként előnyösen primer alkoholokat, így etil-, metil- vagy propil-alkoholt használhatunk. Legelőnyösebben etil-alkoholt alkalmazunk, lehetőleg tömény (> 50 térfogat%) oldatban.
Jóllehet a legelőnyösebbnek tartott anizotrop membrán kiszűri a vörösvértesteket, és távol tartja őket a tesztoldaltól, kívánt esetben a tesztreagens tartalmazhat elválasztó komponenst is. Az elválasztó komponensnek képesnek kell lennie arra, hogy a vörösvértesteket tartalmazó testfolyadékból - például vérből - a vörösvértesteket visszatartsa, és így viszonylag tiszta, színtelen folyadékot állítson elő. A jelen találmányban felhasználható elválasztó komponensként, a teljesség igénye nélkül, az alábbiak jöhetnek szóba: poli(etilénglikol), metil-vinil-éter-maleinsav-anhidrid kopolimer, poli(propilén-glikol), polisztirolszulfonsav, poliakrilsav, poli(vinil-alkohol), valamint polivinilszulfonsav 4,0 és 8,0 közötti pH-értéken. Ezeknek az elválasztó komponenseknek a mátrixban lévő mennyisége változhat töltésüktől és móltömegüktöl, valamint az ott jelen lévő más komponensektől, a ká n vezet pH-értékétól, a mátrix pórusméretétól, valamint a szárítás után visszamaradó nedvességtartalmától függően. Ezek a paraméterek a szakmában jártasak számára egyszerűen meghatározhatóak. Például poli(propilén-glikol)-t használva elválasztó komponensként (például PPG-410, BASF, Wyandotte, Michigan, USA) előnyösen 2- 30% (t/tf) koncentrációt, még előnyösebben 8- 10% (t/tf) koncentrációt alkalmazunk. Más elválasztó komponens esetén a koncentráció szintén 2- 30% (t/tf) lehet. A polimer elválasztó komponenst a mátrixba beitathatjuk, vagy akár a membrán készítése során anyagába keverhetjük.
Bizonyos vízoldható sók is elősegíthetik a véralkotók elválasztását. Alkalmasak ilyen célra a citrátok, a formiátok és a szulfátok, valamint egyes savak, így az aminosavak, a citromsav, a fitinsav és az almasav [US 3 552928 (1971. 01. 05.)]. Az elválasztó komponensek alkalmazása azzal az előnnyel jár, hogy a szilárd részecskéknek - például vörösvértesteknek - a testfolyadékból való eltávolítása után a tesztoldal háttérszíne világosabb, és kevésbé zavarja a tesztreagens által kiváltott színváltozást.
Egyéb komponensek is jelen lehetnek a mátrixban, a színváltozás markánsabbá tételére, a tesztcsík leolvashatóságának elősegítésére, valamint a mátrix uniformitásának és integritásának megőrzésére. A tesztreagens tartalmazhat például sókat és/vagy puffereket a színezék elválasztására a mátrixban. Ilyen lehet például a 0,01 és 1,0 M közötti, előnyösen 0,1 M koncentrációjú citrát-puffer, de más pufferek is alkalmazhatók.
A mátrix hidrofilitását, valamint stabilitását növelő adalékokat, például hidrolizált fehérjéket is alkalmazhatunk. Ilyen vegyületek például - a teljesség igénye nélkül - a marha szérumalbumin, polipeptidek és a Crotein SPA (CRODA Inc., New York, New York, USA) fantázianevű alacsony móltömegű fehérje. Ezeket a vegyületeket például 1 mg/ml és 100 mg/ml közötti koncentrációban, a Crotein esetében előnyösen 30 mg/ml koncentrációban használjuk.
Más stabilizáló- és konzerválószerek is jelen lehetnek a mátrixban. Alkalmazható például az etilén-diamino-tetraecetsav (EDTA), a dietilén-triamino-pentaecetsav (DTPA), valamint a hasonló vegyületek, 0,01 mg/ml és 10 mg/ml közötti koncentrációban. A konzerválószerek hozzáadásának célja egyebek között a gátlószer stabilizálása is.
Némely indikátor (például a BPR) hajlamos arra, hogy vándoroljon a mátrixban. Amennyiben ilyen indikátort használunk, úgy ionpárképző reagenst alkalmazunk a vándorlás megakadályozására. A kereskedelemben Polyquart (H) néven (Henkel Inc., Ambler, Pennsylvania, USA) beszerezhető pob(etilén-glikol) származék például kiválóan alkalmas az ionpárképzés elősegítésére az indikátor és a mátrix szubsztituensei között.
Mikor a vizsgálandó anyag kimutatása színképzódéssel történik (például MBTHSB-ANS indikátor alkalmazásakor), felületaktív anyagok hozzáadásával kiemelhető a szín, és hangsúlyozható a kontraszt a színtelen háttérhez képest.
A találmány kivitelezése során szerves oldószerek is felhasználásra kerülhetnek a tesztreagensnek a mátrixba való juttatása során, természetesen feltételezve, hogy ezek összeférhetóek a mátrix és a tesztreagens anyagaival. A szóba jöhető szerves oldószerek a kloroform, az aceton, az alkoholok, a diklór-metán, a dietil-éter, a petroléter, az acetonitril, valamint ezek elegyei. A találmány szerint előnyösen etanol 70 térfogat%-os vizes oldatát használjuk.
A mátrix felületére vitt vagy anyagába itatott tesztreagens nem egyenletes eloszlású a tesztcsík hosszán. Ezzel szemben a reagenst a mátrixon párhuzamos sávokban vagy szegmensekben alkalmazzuk, melyek a csíknak csak keskeny részére terjednek ki. Az egymást követő szegmensekben a gátlószer koncentrációja egyre nő. Minden egyes szegmens nedvszívó kimutatási területet tartalmaz. A tesztreagens ezeken a kimutatási területeken a vérben lévő glükózzal reagálva színváltozást idéz elő, feltéve, hogy a glükóz koncentrációja elég magas ahhoz, hogy felülmúlja az adott terület gátlószer koncentrációját. Ilyen módon minden egymást követő terület elszíneződéséhez egyre magasabb és magasabb glükózkoncentrációnak kell lennie a vizsgált mintában.
Kívánt esetben a kimutató területek egyike időzítőként szolgál, annak érdekében, hogy jelezze, kellő idő telt el a glükóz reakciójához a kimutató területek mindegyikén. A mátrix időzítő szegmensét olyan eleggyel vonjuk be vagy impregnáljuk, amely a tesztreagensen kívül glükózt is tartalmaz. Mivel a tesztreagens célja az, hogy a glükóz jelenlétére színváltozással válaszoljon, a kettő kombinálása bizonyos körültekintést kíván. Az időzítő funkcióhoz szükséges mennyiséget felülmúló gátlószernek kell jelen lennie, hogy ezt a jelenséget kompenzáljuk. Az időzítő szegmens száradási ideje, miután a glükózt hozzáadtuk, szigorúan szabályozott.
HU 215 904 A
Gyakorlatban a membránt először egy puffereket, stabilizálókat és enzimeket tartalmazó oldattal kezeljük, és ezt a bevonatot rászárítva alakítjuk ki az első réteget. Ezután visszük fel rá a második bevonatot, amely tartalmazza az indikátor, a gátlószer és a glükóz oldatát. Az olyan paramétereket, mint a haladási sebesség, a szárítási hőmérséklet, a légsebesség, valamint az oldatból visszamaradó anyagmennyiség, előre meghatározzuk, és az alkalmazott gátlószer- és/vagy glükózkoncentrációhoz igazítjuk. A második bevonat közvetlen alkalmazásának alternatívájaként - noha kevésbé előnyös elképzelhető olyan megoldás is, melynek során a második bevonatot külön membránra visszük fel és helyezzük az előzőre.
Amikor mintát viszünk a tesztcsíkra, akkor az időzítő szegmens hidratálódik, és ez lehetővé teszi az elszíneződéssel járó reakció végbemenetelét. Az időzítő szegmens színváltozásához szükséges idő a hőmérséklet és az alkalmazott tesztreagens függvénye, különös tekintettel a gátlószer koncentrációjára, a glükóz mennyiségére, valamint a hidratálódás és az oxigén-diffúzió sebességére.
Az időzítő színváltozásához szükséges idő függhet a minta glükózkoncentrációjától, avagy lehet ettől független. Amennyiben az időzítőben nagy feleslegben alkalmazzuk a glükózt, úgy az idő nem függ a minta glükózkoncentrációjától. Ha kevesebb glükózt tartalmaz az időzítő, akkor a mintában lévő glükóznak megfelelően változhat az idő: az időzítő gyorsabban változtatja meg a színét, amennyiben a minta glükózkoncentrációja magasabb. Előnyösen az időzítő glükózkoncentrációja nagyobb, mint 1500 mg/dl, ami biztosítja, hogy az időzítő működése független legyen a minta glükózkoncentrációjától a 40-400 mg/dl tartományban. Az időzítő szegmens feleslegben tartalmazza a glükózt hidrogén-peroxiddá alakító komponenst (például glükózoxidázt) és a glükózt egyaránt. Ennek megfelelően az időzítőnek legalább annyi, de inkább több gátlószert kell tartalmaznia, mint a legmagasabb szegmens, a tesztoldalon (vagyis amely a legmagasabb glükózkoncentrációnak felel meg).
Az időzítő emellett fontos minőség-ellenőrző funkciót is betölt, nyilvánvalóvá téve, ha a tesztcsíkot nedvesség érte, és emiatt károsodott. A tesztcsíknak egészen a felhasználásig száraznak kell maradnia, mivel a glükózt hidrogén-peroxiddá alakító komponensek - általában enzimek - a nedvesség hatására hajlamosak elbomlani. Emiatt, ha a csíkot időnek előtte nedvesség éri, akkor károsodhat. Ha a csík károsodása nem észlelhető a felhasználó számára, akkor felhasználja az ilyen csíkot is, és hibás eredményt kap. Abban az esetben azonban, ha a csík időzítő szegmenst is tartalmaz, az a nedvesség hatására megváltoztatja színét, ami figyelmezteti a felhasználót arra a tényre, hogy a csík károsodott, és felhasználásra alkalmatlan.
A reagenst tartalmazó mátrixon kívül, a találmány szerinti tesztcsíknak szerves része a mátrixot támasztó alsó réteg. Az alsó réteg előnyösen termoplasztikus lemez, még előnyösebben poliészter anyagú, és rés van rajta, melyen keresztül a minta a mátrix „mintaoldalára” vihető. A mintaréstöl a vérminta a mátrix teljes hosszán oszlik el. Ha az alsó réteg általában nem átlátszó, akkor egy vagy több ablak helyezkedik el rajta alkalmas távolságban a mintaréstöl, hogy a mintának az ablakban való megjelenése igazolja a megfelelő mennyiség felvitelét.
A mintának a mintaréstöl a kimutatási területekre való vezetése az alsó réteg és a membrán között lévő, kívánt esetben mindkettőhöz tapadó, közbülső réteg közreműködését feltételezi. A közbülső réteg előnyösen termoplasztikus lemez, még előnyösebben poliészter. Rések vannak rajta, melyek a mintát a csík hosszában a membrán vízzáró része mentén a kimutatási területekhez vezetik. A közbülső rétegben lévő lyukak fedésben vannak a kimutatási területekkel, úgyhogy minden egyes kimutatási terület megfelelően körül van véve a közbülső réteg falával.
A membránon lévő vízzáró útvonal szerkezete előnyösen a membrán pórusszerkezetének megszüntetésével hozható létre. Ez megvalósítható közvetlen melegítéssel vagy lézer, illetve ultrahang, előnyösen pedig nyomás alkalmazásával. A legelőnyösebb módszer mindazonáltal az összeroppantás. Eszerint a membránt a kimutatási területek kivételével mindenütt összeroppantva vízzáróvá tesszük hidrofil tulajdonságának megőrzése mellett. A találmány szerinti előnyös membránok esetében az összeroppantás előnyösen nagy nyomás, minimum 80 000 kPa - és kívánt esetben hő (minimum 110 °C) - alkalmazásával táténik. A pontos nyomás és hőmérséklet természetesen az összeroppantásra szolgáló szerkezet és a tartózkodási idő függvénye, melynek optimális értéke rutinkísérletekkel meghatározható.
A pontos mérés érdekében okvetlenül szükséges, hogy az egyes kimutatási területekre jutó vér térfogata reprodukálhatóan azonos legyen. Amennyiben a rések teljesen körülveszik a kimutatási területeket, feltételezve, hogy folyadékzáró tömítés van mind a közbülső réteg, mind pedig az alsó réteg irányában, úgy minden kimutatási területhez egy zárt (hengeres) térfogat tartozik, melynek falát a közbülső réteg adja, a végein pedig a membrán és az alsó réteg helyezkedik el. Mindazonáltal létezik egy elosztócsatorna is a csík teljes hosszán, mely mintával látja el az egyes kimutató területeket. A nagy pontosság megkívánja, hogy az elosztócsatorna meghatározott térfogatú mintát juttasson az egyes kimutatási területekre, de ennél semmivel sem többet, legalábbis a méréshez szükséges időn belül - 1 vagy 2 perc alatt. Mivel a kezdeti minta térfogata változhat, így előnyösen a membrán mindkét végén abszorbens réteg helyezkedik el, hogy az elosztócsatorna végein a minta feleslegét felszívja. A csatorna végein lévő nedvszívó réteg egyúttal a minta átszívódását is elősegíti a csík hossza mentén. A nedvszívó rétegek - a szakmában közismert - nem szőtt szerkezetűek.
A színváltozás, melyet a mintában lévő glükóz okoz, a membrán „tesztoldalán” jelenik meg. Kényelmi szempontból célszerű a membránnak ezt az oldalát befedni egy fedőréteggel, melyen a kimutatási helyeknél lyukak helyezkednek el. A lyukak lehetővé teszik a
HU 215 904 A színváltozás felismerését és az oxigén eljutását a reakció helyszínére. A fedőréteg a membránhoz például ragasztóval rögzíthető. Bármely ragasztó előnyösen oly módon alkalmazandó, hogy csupán a membrán vízzáró részét érje, hogy ne befolyásolja a glükóz kimutatására szolgáló reakciót. Abban az esetben azonban, ha a ragasztó nem zavarja a reakciót, akkor elhelyezése kevésbé lényeges.
Mivel a tesztreagenst tartalmazó kimutatási területek lassan elszínezödnek a fény és az oxigén hatására, és mivel a kívánt esetben jelen lévő időzítő szegmens érzékeny a nedvességre, a tesztcsíkokat előnyösen fény-, oxigén- és nedvességzáró anyagba, például zárt alufóliába csomagolva hozzuk forgalomba. Ha a csíkokat egyenként csomagoljuk, akkor felhasználás közben is a felnyitott csomagolásban maradhatnak.
A találmányt a továbbiakban az ábrák alapján ismertetjük. Az 1. ábra a találmány szerinti 10 mátrixot mutatja, mely egy vizsgálandó anyag testfolyadékban való kimutatására szolgál. Bár az ábrán hajlított helyzetben látható, a 10 mátrix a használat során általában vízszintes helyzetű. A mátrix tartalmazza a 12 „mintaoldalt”, amelyre a testfolyadék mintáját visszük, valamint a 14 tesztoldalt, amelyen vagy amelynek közelében bekövetkező színváltozás jelzi a vizsgálandó anyag jelenlétét. A színváltozás a vizsgálandó anyag és a 16 pórusokba itatott reagens reakciójának eredményeképp következik be. A vérben lévő glükóz koncentrációjának mérése esetén előnyösen a 12 „mintaoldalon” lévő pórusok mérete viszonylag nagy, és egyre csökken a 14 „tesztoldal” felé haladva. A pórusméret változása arra szolgál, hogy a vörösvértesteket a 12 „mintaoldal” közelében visszatartsa, és ilyen módon színük ne zavarja a vizsgálandó vegyület jelenlétét jelző színváltozás észlelését.
Három párhuzamos, a, b és c szegmens sematikusan látható. Mindegyik egymást követő szegmens valamivel több gátlószert tartalmaz, mint az előző. A találmány egy előnyös kiviteli alakjában az után, hogy az egyes szegmenseket tesztreagenssel kezeltük, a membrán szerkezetét összeroppantjuk mindenütt, kivéve a kimutatási területeket, ahol a vizsgálandó anyag kimutatására szolgáló reakció lejátszódik. A nedvszívó (egyetlen terület minden egyes párhuzamos szegmensben) és vízzáró területek mintázata látható a 2. ábrán, valamint egy adott részlet kinagyítva a 3. ábrán.
A 2. ábra a 10 membrán 12 „mintaoldalának” és a 20, valamint 22 abszorbens rétegeknek alulnézetből készült félnézet-félmetszeti képe, melyen jól látható az átfedő 24 közbülső réteg és a 26 alsó réteg. A 10 membránt, valamint a 20 és 22 abszorbens réteget támasztó felső réteg ezen az ábrán nem látható. A 20 és 22 abszorbens rétegek előnyösen a membrán végein helyezkednek el (az A és B szaggatott vonalakon túl), hogy a méréshez szükséges mennyiségen felüli vérmintát felszívják. A méréshez szükséges mintatérfogat elegendő kell legyen ahhoz, hogy ellássa az összes kimutatási területet, valamint megléte esetén az időzítő területet is. Általában a kevesebb kimutatási területtel rendelkező tesztcsík kevesebb mintát igényel, de ebben az esetben a mérhető glükózkoncentráció tartománya és/vagy a pontosság is szerényebb. A 2. ábrán kilenc nedvszívó terület látható, mely nyolc kimutatási területet (1-8 számmal jelölve), valamint egy időzítő szegmenst (T) képvisel, ami biztosítja a megfelelő mérési tartományt és pontosságot, miközben nem igényel elfogadhatatlanul nagy mennyiségű mintát. A 24 közbülső rétegben lévő 28 rés együttállásban van a 26 alsó rétegben lévő 30 mintaréssel. A 30 mintarésen keresztül juttatjuk be a mintát, mely a haj szálcső vesség révén a 24 közbülső réteg 32 központi csatornájában halad az egyes kimutatási területekhez, valamint az időzítő szegmenshez, míg a minta feleslegét a 20 és 22 abszorbens rétegek szívják fel. Kívánt esetben a minta megjelenése a 34 és 35 ablakokban igazolja, hogy a méréshez megfelelő mennyiségű mintát használtunk. A 24 közbülső réteg előnyösen szigetelő réteget képez a membrán 12 mintaoldalával, miáltal a minta nem képes például egyik kimutatási területről a másikra közvetlenül átfolyni.
A 3. ábrán a 6, 7 és 8 kimutatási területeket tartalmazó részlet nagyított képe szerepel, melyet a 26 alsó réteg alatt láthatunk. A kimutatási területeket a 24 közbülső réteg benyúló részei választják el egymástól. Kívánt esetben a 24A ragasztórétegek rögzítik a 24 közbülső réteget a 26 alsó réteghez, valamint a 10 membránhoz. A 26 rétegben lévő 40 kimeneti nyílások megkönnyítik a minta áramlását a csík belsejébe. A 36 fedőrétegben lévő rések, például a 38 rés, fedésben vannak a nedvszívó területekkel, láthatóvá téve bármely színváltozást a nedvszívó rétegben, és biztosítva a színváltozást előidéző reakcióhoz szükséges oxigén átjutását. Kívánt esetben a 36A ragasztóréteg rögzíti a 36 fedőréteget a 10 membrán tesztoldalához.
A 4. ábra a 2. ábra 4-4 vonal menti metszete, mely a 2. ábrán látható rétegeken túlmenően a 36 fedőréteget is mutatja. A 26 alsó rétegben lévő nyílások, mint például a 40 nyílás, fedésben vannak a kimutatási, valamint az időzítő területekkel, és elősegítik, hogy a minta feltöltse az ezeket körülvevő térfogatot. A feltöltendő térfogatokat a 10 membrán, a 24 közbülső réteg és a 26 alsó réteg határozza meg. Megjegyzendő, hogy a 3 kimutatási terület és a 26 alsó réteg közötti elválasztó rész mindössze 12 mikrométer vastag, de az egyértelműség céljából ennél nagyobbnak ábrázoltuk.
Az 5. ábra a találmány szerinti tesztcsík alulnézeti képe, amely a 30 mintarést mutatja, a felhasználónak szóló rajzos útmutatással, a minta felvitelére vonatkozóan. Ha a minta megjelenik a 34 és 35 átlátszó ablakokban, ez azt igazolja, hogy megfelelő mennyiségű mintát vittünk fel a csíkra.
A 6. ábra a csík 36 fedőrétegének képe, melyet a glükózkoncentrációnak megfelelően kalibráltunk.
A 7. ábra a 6. ábrán szereplő tesztcsíkot mutatja, miután mintát vittünk a 30 mintarésre (2. ábra). A minta szétterjedt a 32 központi csatorna mentén, és a benne lévő glükóz reakcióba lép a kimutatási területek anyagában lévő reagenssel. Mivel az alsó kimutatási terület anyagában van a legkevesebb gátlószer, ez a terület változtatja meg elsőként a színét. Ezután a második, majd a harmadik terület színe változik meg.
HU 215 904 A
A felső köröknél színváltozás nem tapasztalható, mert ehhez nem volt elegendő glükóz a mintában. Mivel elegendő idő telt el ahhoz, hogy a 42 időzítő szegmens színe megváltozzon, a csík leolvasható. így a 7. ábrán látható eredmény azt mutatja, hogy a minta glükózkoncentrációja legalább 120 mg/dl, de kevesebb, mint 150 mg/dl. A leolvasás bármikor elvégezhető, azt követően, hogy a 42 időzítő szegmens elszínezódött. Megjegyzendő, hogy a 7. ábrán a glükóz által kiváltott reakció fehérről színesre való változást idéz elő. Mindazonáltal, a rendszer oly módon is működhet, hogy az indikátor színezéket a glükóz által indukált oxidáció elroncsolja, és ennek megfelelően a változás színesről fehérre történik.
A találmány jobb megértése érdekében az alábbi példákkal illusztráljuk annak lényegét. Az ismertetett példák semmiképp sem jelentenek bárminemű korlátozást.
1. példa
A Memtec BTSH membrán kezelésére az alábbi oldatot használjuk:
| Desztillált víz | 83,5 g |
| Dinátrium-EDTA oldat 1% (t/t) | 23,8 g |
| Akonitinsav | 6,0 g |
| Nátrium-hidroxid | 2,2 g |
| Crotein SPA | 4,2 g |
| Imidazol | 0,6 g |
| Mannit | 3,0 g |
| Surfactol Q1 oldat 5% (t/t) | 3,0 g |
| pH-állítás 4,80 értékre | |
| Etanol | 40,0 g |
| PPG-410 | 5,6 g |
| Enzimoldat | 28,0 g |
| Az enzimoldat összetétele az alábbi: | |
| 0,2 M akonitinsav-oldat | 27,0 g |
| Glükóz-oxidáz | 165 000 E |
| HRPO (Sigma Chemicals, USA) | 340 000 E |
| A membránt a fenti oldatba merítve bevonatot alakí- | |
| tunk ki, az oldat fölöslegét üvegbottal eltávolítva. A be- | |
| vonattal ellátott membránt flotációs szárítóban, 82 °C- | |
| on, mérsékelt légáram alkalmazásával 20 másodperc | |
| alatt megszárítjuk. Az anyagot felcsévéljük a második | |
| bevonat előállításához, melyet a következő oldat fel- | |
| használásával végzünk: | |
| Aszkorbát (gátlószer) törzsoldat: | |
| Desztillált víz | 190,0 g |
| Dinátrium-EDTA 1% (t/tf) | 55,0 g |
| BPR | 0,36 g |
| PolyQuart®H | 6,0 g |
| PPG-410 | 14,2 g |
| Aszkorbinsav | 1,37 g |
| Etanol | 243,0 g |
| Hígítószer: | |
| Desztillált víz | 370,0 g |
| Dinátrium-EDTA 1% (t/tf) | 107,0 g |
| BPR | 0,71 g |
| PolyQuart®H | 11,8 g |
| PPG-410 | 27,8 g |
| Etanol | 477,0 g |
Időzítő oldat:
Hígítószer 120,0 g
Aszkorbinsav 0,885 g
Glükózoldat* 17,25 g * A glükózoldat 16,0 g/dl koncentrációjú vizes glükózoldat, melyet 24 órán át mutarotálni hagyunk, majd ezt követően hűtőszekrényben tartunk.
A törzsoldatból elkészítjük a következő térfogatarányú hígításokat: 0,0405: 1; 0,108:1; 0,236:1; 0,369: 1; 0,569:1; 1,260:1. A gátlószernek ez a fokozatos emelkedése megfelel a kimutatási területeken jelzett glükózkoncentrációnak. Ezek az oldatok, az időzítő oldattal együtt, az enzimmel kezelt membrán nagypórusú oldalán egy újabb bevonat kialakítására szolgálnak, oly módon, hogy a membrán minden egyes négyzetmilliméternyi felületén l,2x I01 ml mennyiségben maradnak vissza. Ennek érdekében az enzimbevonat készítése során alkalmazottal megegyező szárítási eljárás előtt a membránt mintegy 15 másodpercig nedvesen tartjuk. Az eredmények szerint az időzítő ezzel az eljárással körülbelül 70 másodperc elteltével lép működésbe, oly módon, hogy az esetek 95%-ában a reakcióidő 64 és 79 másodperc közötti.
2. példa
A Memtec BTS 35 membrán kezelésére az alábbi oldatot használjuk:
| Nagy tisztaságú (HPLC) víz | 1500,0 ml |
| Citromsav | 16,92 g |
| Nátrium-citrát | 20,88 g |
| Mannit | 15,0 g |
| Dinátrium-EDTA | 1,26 g |
| Gantrez S95 (gyártó: ISP, USA) | 6,75 g |
| Crotein SPA | 36,0 g |
| Glükóz-oxidáz | 1,69 ME |
| HRPO | 1,50 ME |
| Carbopol 910* | 75,0 ml |
| Dinátrium-citrát* * | 225,0 ml |
| * 11 t/tf% töménységű, acetonitrillel készült oldat. | |
| ** 0,1 M töménységű, 5,0 pH-értékü oldat. | |
| A membránt vályúban kezeljük oly | módon, hogy |
| nagypórusú oldalának felületét hozzuk | érintkezésbe a |
| fenti oldattal. A fölös mennyiségű oldatot a korábbiak- | |
| bán közöltek szerint üvegbottal távolítju | ik el. A memb- |
| rán szárítását és felcsévélését az 1. péld; | ában megadott |
| módon végezzük. A következő oldatokat | készítjük el: |
| „A” oldat (indikátor): | |
| Etanol 70%-os (tf/tf) | 2819,0 ml |
| MBTHSB | 2,98 g |
| (NH4)ANS | 25,83 g |
| „B” oldat | 205,0 ml |
| DTPA 2% (t/tf) | 51,25 ml |
| „B” oldat (nedvesítöszer): | |
| Maphos®60 A | |
| (gyártó: PDG Ind. USA) | 41,0 g |
| Etanol 70% (tf/tf) | 205,0 ml |
| „C” oldat (aszkorbát törzsoldat): | |
| Víz | 115,0 ml |
| Aszkorbinsav | 4,58 g |
| Etanol | 267,0 ml |
HU 215 904 A „D” oldat (időzítő):
Víz 53,0 ml
Aszkorbinsav 8,75 g
Etanol 123,0 ml
Az oldatot 70%-os (tf/tf) etanollal 175 ml térfogatra töltjük.
Glükózoldat 40,5 ml
Valamennyi gátlószer oldat esetében az „A” oldat mennyisége egyaránt 263 ml. A különböző kimutatási területekhez az „A” oldathoz adott 70%-os (tf/tf) etanol- „C” oldat elegy mennyisége minden esetben 87,5 ml. A 70%-os (tf/tf) etanol- „C” oldat elegy összetételét 58,9: 1 és 0,200: 1 térfogatarány szerint állítjuk be az egyes kimutatási területeknek megfelelően. Ezzel a megoldással csupán a gátlószer koncentrációját változtatjuk meg, az igények szerint. Az egyre növekvő koncentrációjú gátlószert, valamint az időzítőt („D” oldat) tartalmazó oldatokat a membrán nagypórusú oldalára visszük. A bevonatot oly módon állítjuk elő, hogy a membrán minden egyes négyzetmilliméternyi felületén mintegy 8x 10 5 ml térfogatú gátlószer oldat maradjon vissza. A membránt a korábbiakban ismertetett módon szárítjuk, azzal az eltéréssel, hogy a bevonatképzés és a szárítás közötti várakozási idő 1,6 perc. Az eredmények szerint az időzítő ezzel az eljárással körülbelül 60 másodperc elteltével lép működésbe, anélkül hogy a vér hematokritkoncentrációja a 30 és 55 (t/tf)% közötti tartományban, illetve a vér glükózkoncentrációja a 78 és 420 mg/dl tartományban számottevő hatással lenne erre az értékre.
Claims (25)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Hosszúkás, többrétegű reagens tesztcsík egy adott vizsgálandó anyag koncentrációjának mérésére valamely testfolyadék mintájában, melyet a tesztcsíkra viszünk, azzal jellemezve, hogy a következő elemekből áll:a) alsó réteg keresztlyukkal, a minta befogadására;b) membránréteg, melynek mintaoldala az alsó réteg felé néz, tesztoldala pedig az ellenkező irányba, és ez a réteg reagenst tartalmaz, mely a vizsgálandó anyaggal reagálva színváltozást idéz elő, az alábbi komponensek révén:i) első komponens, mely a vizsgálandó anyaggal reakcióba lépve hidrogén-peroxid képződését váltja ki;ii) második komponens, mely a hidrogén-peroxiddal reakcióba lépve színváltozáson megy keresztül; és iii) harmadik komponens, mely gátolja a második komponens színváltozását;c) közbülső réteg, mely az alsó réteg és a membránréteg között helyezkedik el;d) adagolórendszer a minta megfelelő eloszlatására a csík hosszán, melynek elemei az alábbiak:i) vízzáró rész a membránrétegben; és ii) folyadéklevezetö csatorna a közbülső rétegben, mely a mintát a vízzáró rész felületén egy sor, a membránréteg hosszán elhelyezkedő, különálló, nedvszívó kimutatási terület felé irányítja;és amelyben a gátlószer koncentrációja a csík elejétől előre meghatározott módon fokozatosan emelkedik oly módon, hogy a mintában lévő vizsgálandó anyag koncentrációja ezzel arányos a színváltozás előidézéséhez, ezáltal egy vagy több kimutatási terület változtathatja meg a színét, midőn a mintát a csíkra visszük, és a csík elejétől legtávolabbi színváltoztató terület jelzi a vizsgálandó anyag koncentrációját a mintában.
- 2. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a vizsgálandó anyag glükóz.
- 3. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a testfolyadék vér.
- 4. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy az alsó réteg anyaga termoplasztikus lemez.
- 5. A 4. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy az alsó réteg anyaga poliészter.
- 6. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy az alsó réteg keresztlyukak sorát tartalmazza, melyek fedésben vannak a kimutatási területekkel.
- 7. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy az alsó réteg a minta befogadására szolgáló nyílástól meghatározott távolságra átlátszó részt tartalmaz a megfelelő mennyiségű minta biztosítására.
- 8. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a membránréteg anyaga anizotrop porózus membrán, melynek pórusai a mintaoldal közelében nagyobbak, a tesztoldal közelében pedig kisebbek.
- 9. A 8. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a pórusok méretét úgy választjuk meg, hogy a teljes vér mintában lévő vörösvértesteket a membrán visszatartsa.
- 10. A 8. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a membrán anyaga poliszulfon.
- 11. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens első komponense glükózoxidáz enzim.
- 12. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens második komponense egy peroxidáz enzim, valamint egy indikátor színezék vagy annak származéka, mely oxidálódás hatására megváltoztatja színét.
- 13. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens második komponensében lévő peroxidáz enzim torma peroxidáz.
- 14. A 12. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens második komponensében lévő indikátor színezékként vagy annak származékaként MBTHSB- ANS-t tartalmaz.
- 15. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens harmadik komponense aszkorbinsav.
- 16. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a tesztreagens elválasztó komponenst is tartalmaz, mely lehet poli(etilén-glikol), metil-viniléter/maleinsav-anhidrid kopolimer, poli(propilénglikol), polisztirolszulfonsav, poliakrilsav, poli(vinil-alkohol) vagy polivinilszulfonsav.HU 215 904 A
- 17. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a közbülső réteg anyaga termoplasztikus lemez.
- 18. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a közbülső réteg anyaga poliészter.
- 19. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a nedvszívó és a vízzáró területek ép vagy összeroppantott szerkezetű membránréteg részeként vannak kialakítva.
- 20. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy fedőréteggel is rendelkezik, mely a membránréteg felületéhez kapcsolódik, és kimutatási területekkel fedésben lévő keresztréseket tartalmaz.
- 21. A 20. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a membránréteg hozzá van ragasztva a fedőréteghez.
- 22. A 21. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a membránréteg oly módon van hozzáragasztva a fedőréteghez, hogy a ragasztóanyag kizárólag a membránréteg vízzáró területeire korlátozódik.
- 23. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy a membrán két végével érintkező abszorbens rétegeket is tartalmaz.
- 24. Az 1. igénypont szerinti tesztcsík, azzal jellemezve, hogy időzítő szegmenst is tartalmaz, mely egy kimutatási terület, amely a reagensen kívül olyan mennyiségű glükózt is tartalmaz, hogy az a mintának a tesztcsíkra való felvitele után, meghatározott idő elteltével a terület színváltozását idézi elő.
- 25. Eljárás egy adott vizsgálandó anyag koncentrációjának mérésére valamely testfolyadékban, azzal jellemezve, hogya) a mintát az 1. igénypont szerinti reagens tesztcsíkra visszük, melynek részei az alábbiak:i) egy sor nedvszívó kimutató terület, melyek mindegyike megváltoztatja színét, ha érintkezésbe kerül meghatározott, a csík elejéhez közelebb lévő kimutató területek színváltozását előidézőnél nagyobb mennyiségű vizsgálandó anyagot tartalmazó folyadékkal, és ii) adagolórendszer a minta megfelelő eloszlatására egy előre meghatározott vízzáró útvonal mentén minden egyes kimutató területhez;b) megállapítjuk, hogy melyik az az 1. igénypont szerinti tesztcsík elejétől legtávolabbi kimutató terület, amelyik megváltoztatja színét.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US52851195A | 1995-08-03 | 1995-08-03 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9602138D0 HU9602138D0 (en) | 1996-09-30 |
| HUP9602138A2 HUP9602138A2 (en) | 1997-04-28 |
| HUP9602138A3 HUP9602138A3 (en) | 1997-10-28 |
| HU215904B true HU215904B (hu) | 1999-03-29 |
Family
ID=24105976
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9602138A HU215904B (hu) | 1995-08-03 | 1996-08-02 | Közvetlenül leolvasható reagenscsík |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0759555A3 (hu) |
| JP (1) | JPH09163999A (hu) |
| KR (1) | KR970011840A (hu) |
| AR (1) | AR003180A1 (hu) |
| AU (1) | AU712285B2 (hu) |
| BR (1) | BR9603273A (hu) |
| CA (1) | CA2182545A1 (hu) |
| CZ (1) | CZ228496A3 (hu) |
| HU (1) | HU215904B (hu) |
| IL (1) | IL118988A0 (hu) |
| NO (1) | NO963207L (hu) |
| NZ (1) | NZ299104A (hu) |
| PL (1) | PL315493A1 (hu) |
| RU (1) | RU2178564C2 (hu) |
| SG (1) | SG47165A1 (hu) |
| TR (1) | TR199600640A1 (hu) |
| ZA (1) | ZA966614B (hu) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6395227B1 (en) | 1989-08-28 | 2002-05-28 | Lifescan, Inc. | Test strip for measuring analyte concentration over a broad range of sample volume |
| US5843691A (en) * | 1993-05-15 | 1998-12-01 | Lifescan, Inc. | Visually-readable reagent test strip |
| US5719034A (en) * | 1995-03-27 | 1998-02-17 | Lifescan, Inc. | Chemical timer for a visual test strip |
| AU722471B2 (en) * | 1995-10-17 | 2000-08-03 | Lifescan, Inc. | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit |
| EP1579814A3 (en) | 1996-05-17 | 2006-06-14 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Methods and apparatus for sampling and analyzing body fluid |
| US20020010406A1 (en) | 1996-05-17 | 2002-01-24 | Douglas Joel S. | Methods and apparatus for expressing body fluid from an incision |
| JP3202027B2 (ja) * | 1996-10-30 | 2001-08-27 | マーキュリー ダイアグノスティックス インコーポレイテッド | 被分析物同調済み試験システム |
| US5948695A (en) | 1997-06-17 | 1999-09-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Device for determination of an analyte in a body fluid |
| DE69819775T2 (de) | 1997-12-19 | 2004-09-23 | Amira Medical, Scotts Valley | Geprägtes teststreifensystem |
| US6458326B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-01 | Home Diagnostics, Inc. | Protective test strip platform |
| JP3621617B2 (ja) * | 2000-01-21 | 2005-02-16 | ブラザー工業株式会社 | グルコース濃度測定用のキャピラリー装置、グルコース濃度の非侵襲的モニター方法及び血糖値の非侵襲的モニター方法 |
| US6583722B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-06-24 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wetness signaling device |
| US6603403B2 (en) * | 2000-12-12 | 2003-08-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Remote, wetness signaling system |
| US6525330B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-02-25 | Home Diagnostics, Inc. | Method of strip insertion detection |
| US6541266B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-04-01 | Home Diagnostics, Inc. | Method for determining concentration of an analyte in a test strip |
| US6562625B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-05-13 | Home Diagnostics, Inc. | Distinguishing test types through spectral analysis |
| EP1430303A1 (en) * | 2001-09-17 | 2004-06-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Embossed test strip system |
| US7803319B2 (en) | 2005-04-29 | 2010-09-28 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Metering technique for lateral flow assay devices |
| US9103796B2 (en) * | 2007-12-14 | 2015-08-11 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Multi-layered devices for analyte detection |
| EP2780894A4 (en) * | 2011-11-20 | 2015-12-09 | Fio Corp | METHOD, SYSTEM AND DEVICE FOR QUALITY CONTROL FOR USE WITH ORGANIC / ENVIRONMENTAL TEST EQUIPMENT FOR FAST DIAGNOSTICS |
| BR112015007673A2 (pt) * | 2012-10-08 | 2017-07-04 | Univ Colorado State Res Found | equipamentos para análise quantitativa à base de capilaridade de analito dissolvido em líquido |
| US10145854B2 (en) | 2013-03-11 | 2018-12-04 | Polymer Technology Systems, Inc. | Systems and methods for test strips with extended dynamic ranges |
| JP6950956B2 (ja) * | 2017-12-28 | 2021-10-13 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | アッセイ装置 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3964871A (en) * | 1974-12-18 | 1976-06-22 | Becton, Dickinson And Company | Method and device for detecting glucose |
| US4994238A (en) * | 1988-06-09 | 1991-02-19 | Daffern George M | Constant volume chemical analysis test device |
| US5156954A (en) * | 1989-03-08 | 1992-10-20 | Cholestech Corporation | Assay device and method using a signal-modulating compound |
| US5306623A (en) * | 1989-08-28 | 1994-04-26 | Lifescan, Inc. | Visual blood glucose concentration test strip |
| GB9002274D0 (en) * | 1990-02-01 | 1990-03-28 | Cranfield Biotech Ltd | Colorimetric analysis |
| AU706456B2 (en) * | 1995-03-27 | 1999-06-17 | Lifescan, Inc. | Chemical timer for a direct-reading reagent test strip |
| AU722471B2 (en) * | 1995-10-17 | 2000-08-03 | Lifescan, Inc. | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit |
-
1996
- 1996-07-31 NZ NZ299104A patent/NZ299104A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-07-31 IL IL11898896A patent/IL118988A0/xx unknown
- 1996-07-31 NO NO963207A patent/NO963207L/no unknown
- 1996-07-31 SG SG1996010389A patent/SG47165A1/en unknown
- 1996-08-01 AU AU60859/96A patent/AU712285B2/en not_active Ceased
- 1996-08-01 CZ CZ962284A patent/CZ228496A3/cs unknown
- 1996-08-01 CA CA002182545A patent/CA2182545A1/en not_active Abandoned
- 1996-08-02 HU HU9602138A patent/HU215904B/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-08-02 RU RU96115372/14A patent/RU2178564C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-08-02 AR ARP960103867A patent/AR003180A1/es unknown
- 1996-08-02 TR TR96/00640A patent/TR199600640A1/xx unknown
- 1996-08-02 ZA ZA9606614A patent/ZA966614B/xx unknown
- 1996-08-02 BR BR9603273A patent/BR9603273A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-08-02 PL PL96315493A patent/PL315493A1/xx unknown
- 1996-08-02 EP EP96305720A patent/EP0759555A3/en not_active Withdrawn
- 1996-08-02 JP JP8219060A patent/JPH09163999A/ja active Pending
- 1996-08-02 KR KR1019960032808A patent/KR970011840A/ko not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU9602138D0 (en) | 1996-09-30 |
| KR970011840A (ko) | 1997-03-27 |
| NZ299104A (en) | 1998-04-27 |
| HUP9602138A2 (en) | 1997-04-28 |
| EP0759555A3 (en) | 1998-07-08 |
| AU712285B2 (en) | 1999-11-04 |
| MX9603192A (es) | 1997-07-31 |
| BR9603273A (pt) | 1998-05-12 |
| IL118988A0 (en) | 1996-10-31 |
| SG47165A1 (en) | 1998-03-20 |
| NO963207D0 (no) | 1996-07-31 |
| CA2182545A1 (en) | 1997-02-04 |
| RU2178564C2 (ru) | 2002-01-20 |
| ZA966614B (en) | 1998-02-02 |
| EP0759555A2 (en) | 1997-02-26 |
| CZ228496A3 (en) | 1997-03-12 |
| JPH09163999A (ja) | 1997-06-24 |
| HUP9602138A3 (en) | 1997-10-28 |
| AR003180A1 (es) | 1998-07-08 |
| PL315493A1 (en) | 1997-02-17 |
| NO963207L (no) | 1997-02-04 |
| AU6085996A (en) | 1997-02-06 |
| TR199600640A1 (tr) | 1997-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2198406C2 (ru) | Удлиненная многослойная индикаторная тест-полоска для измерения концентрации аналита и способ измерения концентрации аналита | |
| HU215904B (hu) | Közvetlenül leolvasható reagenscsík | |
| EP0826777B1 (en) | Chemical timer for a visual test strip | |
| EP0735369B1 (en) | Chemical timer for a direct-reading reagent test strip | |
| EP0769558B1 (en) | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit | |
| EP0475692B1 (en) | Visual blood glucose concentration test strip | |
| JP3479434B2 (ja) | 容量非依存的診断試験担体および被検物質測定のためのその使用方法 | |
| JPH0695954B2 (ja) | クレアチニン又はクレアチンの測定要素及び測定方法 | |
| MXPA96003192A (en) | Reading reading reagent strips dire | |
| MXPA97009995A (en) | Reactive test strip that can be read visual | |
| MXPA97006716A (en) | Chemical time regulator for pru reagent visual strip |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |