HU211896A9 - Chicken anaemia agent vaccine - Google Patents
Chicken anaemia agent vaccine Download PDFInfo
- Publication number
- HU211896A9 HU211896A9 HU95P/P00564P HU9500564P HU211896A9 HU 211896 A9 HU211896 A9 HU 211896A9 HU 9500564 P HU9500564 P HU 9500564P HU 211896 A9 HU211896 A9 HU 211896A9
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- caa
- virus
- vaccine
- viruses
- strain
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 61
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 title claims description 53
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 title claims description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 106
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 claims description 52
- 241000271566 Aves Species 0.000 claims description 38
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 24
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 14
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 13
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 7
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 2
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 claims 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 64
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 25
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 14
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 14
- 230000034994 death Effects 0.000 description 10
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 9
- 208000009701 Embryo Loss Diseases 0.000 description 8
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 5
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 5
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 5
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 2
- 241000701047 Gallid alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 2
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 description 2
- 241000702626 Infectious bursal disease virus Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000711955 Turkey rhinotracheitis virus Species 0.000 description 2
- 241000282485 Vulpes vulpes Species 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000008807 pathological lesion Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- -1 ultracentrifugation Substances 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 201000008197 Laryngitis Diseases 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000006758 Marek Disease Diseases 0.000 description 1
- 241001502481 Meleagrid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 1
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 101100024330 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) MSB1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229910000316 alkaline earth metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- OXJUJQDEISSCTB-UHFFFAOYSA-N but-3-en-2-imine Chemical compound CC(=N)C=C OXJUJQDEISSCTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002941 microtiter virus yield reduction assay Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical class O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N sulfurothioic S-acid Chemical compound OS(O)(=O)=S DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2720/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsRNA viruses
- C12N2720/00011—Details
- C12N2720/12011—Reoviridae
- C12N2720/12211—Orthoreovirus, e.g. mammalian orthoreovirus
- C12N2720/12234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/10011—Circoviridae
- C12N2750/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/816—Viral vaccine for avian species, e.g. poultry or other birds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
A találmány élő vagy inaktivált, baromfiakat csirke anémia ágens (CAA) ellen védő' vakcinára, ilyen vakcina előállítására, CAA vírus termék előállítására, valamint mikrobiológiailag tiszta összetételű CAA vírusokra vonatkozik.
A csirke anémia ágens (CAA) szárnyasok fertőző anémiájának kiváltója, amelyet először Yuasa és munkatársai írtak le 1979-ben [Avian Diseases 23, 366-385 (1979)]. Fiatal fogékony csirkékben a CAA kifejezett vérszegénységet okoz, csontvelő apláziával/hipopláziával és timusz sorvadással. A csirkékben életkorral járó ellenállás fejlődik ki a CAA hatására a kísérletesen kiváltott betegséggel szemben. Ez két hetes korban gyakorlatilag kialakul, de idősebb csirkék is fogékonyak lehetnek a fertőzésre [Yuasa N. és munkatársai (1979) lásd fent; Yuasa N. és munkatársai, Avian Diseases 24, 202-209 (1980)]. Ha azonban a csirkéket egyszerre fertőzzük CAA-val és kezeljük egy immunszupresszív anyaggal (IBDV, MDV stb.), a betegséggel szembeni, korral járó ellenállás késleltetett lesz [Yuasa N. és munkatársai (1979) és (1980) lásd fent, Bülow von V. és munkatársai, J. Veterinary Medicine 33, 93116 (1986)]. A CAA-val fertőzött csirkék morbiditása és mortalitása szigorúan arányos a fertőzéshez használt CAA dózisával, azaz minél nagyobb a dózis, annál súlyosabb a betegség [Yuasa N. és munkatársai (1979) lásd fent],
A CAA nem szaporodik a különböző csirke és csirkeembrió szövet eredetű standard egyrétegű sejtkultúrákban, mint pl. a csirkeembrió fibroblasztok (CEF), csirkeembrió agyvelősejtek, csirkeembrió májsejtek, továbbá vese, timusz, Fabriciusz-tömlő, csontvelő vagy fehérvérsejt eredetű csirke sejtek tenyészetén [Yuasa N. és munkatársai (1979) lásd fent; Yuasa N., Natl. Inst. Anim. Health Q., 23, 13-20 (1989)], nem szaporodik különböző általánosan használt emlős sejtvonalakon sem, mint pl. VERŐ, CRFK, MDCK és A-72 sejteken [Rosenberger J. K. és Cloud S. S., Avian Diseases 33, 707-713 (1989)].
A CAA szaporodik viszont néhány, a Marek-féle betegségből és limfoid leukózis limfómából származó limfoblasztszerű sejtvonalon, különösen az MDCCMSB1 sejttenyészeten [Yuasa N. (1983) lásd fent]. Hátrányos azonban, hogy a CAA aránylag alacsony titereket eredményez MDCC-MSB1 sejtekben. Csupán 105 θ-106 θ TCID50/0,1 ml titerek érhetők el az MDCCMSB1 sejtekben. Azt találták továbbá, hogy a CAA csak kb. a beoltott dózis tízszeresére szaporodott az MDCC-MSB1 sejtekben [Yuasa N. (1983) lásd fent; Bülow von V. és munkatársai, Zentralblatt Vet. Med. 32, 679-693 (1985)].
Csirkéken kívül a CAA csirkeembriókban is szaporítható [Yuasa N. és Yosida I., Natl. Inst. Anim. Health Q. 23, 99-100 (1983); Bülow von V. és Witt M., J. Vet. Med. 33, 664-669 (1986)]. Nem láthatók azonban letális vagy patológiás hatások ezeknél az embrióknál, jelezve, hogy a CAA nem szaporodik a tojásembriókban olyan mértékben, ami elégséges lenne az embriók károsításához. A teljes embriókból kapható legmagasabb CAA titerek 105·0 és 106·5 TCID50/ml között változtak, amint azt MDCC-MSB1 sejteken vizsgálták, ami megegyezik a kísérletesen fertőzött csirkék májkivonatából kapott titerekkel.
Bülow von V. és Witt M. (lásd fent) tanulmányozták a virulens CAA tojásembriókban való tenyésztését élő vakcinák termelése céljából, amely a vírusok attenuálása nélkül beadható a szülőállománynak. Megemlítik azonban, hogy a vírusok attenuálódását meg kell akadályozni, mert ez az immunogenitás elvesztéséhez vezethet [Bülow von V. és Fuchs B., J. Vet. Med. 33, 568-573 (1986)].
Bülow és Fuchs [J. Vet. Med. 33, 568-573 (1986)] arról számolnak be, hogy a Cux-1 CAA törzs patogenitása csökkent MDCC-MSB1 sejteken való 12-szeres passzálás után, bár nem közöltek adatot ezeknek a kevésbé patogén törzseknek az immunogenitására vonatkozólag. Gyakorlatilag, Bülow és Fuchs a patogenitás csökkenésével párhuzamosan az immunizáló képesség csökkenését várják.
Sem Yuasa (1983 lásd fent), sem Goryo és munkatársai [Avian Pathology 16, 149-163 (1987)], semOtaki és munkatársai [Avian Pathology 17, 333-347 (1988)] nem találtak bizonyítékot MDCC-MSB1 sejteken való attenuálódásra a Gifu-1 törzs 19, a TK-5803 törzs 40, illetve a CAAB2-2 törzs 40 passzálása után.
Vielitz E. és munkatársai [J. Vet. Med. 34, 533-557 (1987)] beszámolnak egy Cux-1 törzsből kapott élő CAA vakcina értékeléséről. Ebben azonban nem használtak fel attenuált CAA törzset. Ezt a virulens CAA-t tartalmazó vakcinát 9-15 hetes csirkéknek adták be, és így nem bizonyult kórokozónak a beoltott madarakban. A CAA-val kísérletesen kiváltott betegséggel szemben a korral kifejlődő rezisztencia szempontjából, amely gyakorlatilag 2 hetes korra kialakul, az élő vakcina vírus attenuáltságának szintje a beoltott madarak számára kevésbé fontos ebben az esetben. Azonban annak érdekében, hogy megelőzzük az élő CAA vakcinával való kezelés utáni patológiás tünetek kialakulását fiatal csirkékben, az élő CAA vakcinát jelentősen attenuálni kell.
Az élő CAA vakcina helyett alkalmazható lenne egy inaktivált, adjuvált vakcina. Egy ilyen inaktivált vakcina a meglévő immunitás emlékeztetésére is használható lenne csirkékben. Azonban mindeddig nem írtak le inaktivált CAA vakcinát, mivel ezt a megközelítést bonyolítja, hogy a CAA vírust jelenleg nem tudjuk magas titerrel in vitro szaporítani [Mc Nulty, M. S., Avian Pathology 20, 187-203 (1991)].
Ennek megfelelően, a találmány tárgya egyrészt magas titerben in vitro szaporítható CAA vírusok.
A találmány tárgya továbbá egy CAA vírus törzs eredetű CAA vakcina, amely jelentősen csökkent patogenitást mutat fiatal csirkékben a mezei izolátumokhoz képest, de azok immunogenitásával rendelkezik.
Emellett a találmány tárgya egy inaktivált CAA vakcina, amely elégséges mennyiségű CAA antigént tartalmaz ahhoz, hogy csirkékben a vakcinázás után immunválaszt váltson ki.
Ezenkívül a találmány tárgya egy a CAA vírus törzsek attenuálására szolgáló általános eljárás.
HU 211 896 A9
A találmány új CAA vírusokra vonatkozik, vagyis olyan CAA vírusokra, amelyek csirke embriókban károsodást képesek előidézni. A CAA okozta károsodás lehet elhullás, sápadt embriók és bevérzések, különösen a fejen. Ezek a CAA vírus fajták több előnyös tulajdonságot mutatnak. A találmány szerinti CAA vírusok egyik legelőnyösebb tulajdonsága, hogy in vitro magas titerben szaporíthatok, amint azt az alábbiakban részletezzük.
Az említett CAA vírusok további előnye, hogy bár a mezei CAA vírusokkal összehasonlítva sokkal virulensebbek csirke-embriókra, csökkent patogenitást mutatnak napos csirkékre nézve, azonban rendelkeznek azok immunogén sajátságaival.
A találmány előnyösen a Pasteur Intézet CNCMben elhelyezett 1-1141 jelű CAA vírus törzsre vonatkozik (19. passzálási fok). Ezek a vírusok embrionált tojásokban legalább 108·4 TCID50/ml titerig szaporíthatok, ráadásul kevésbé patogének napos csirkékre nézve, mint a szülő mezei törzs, emellett éppolyan immunogének, mint a szülő törzs.
A CAA vírusok új típusát megkaphatjuk bármely rendelkezésre álló CAA vírus embrionált tojásokban való passzázsával az alábbiakban és a példákban leírtak szerint.
A baromfiakat CAA ellen védő új vakcina olyan CAA vírusokat tartalmaz, amelyek csirkeembriókban képesek károsodást előidézni. Ezeket a vírusokat előnyösen embrionált tojásokban való passzálással nyerjük.
Miután a rendelkezésre álló CAA törzset csirke szövetből, pl. a májból izoláltuk a szövethomogenizátum felhasználható egy több lépéses attenuálási eljárásban. A CAA vírust kívánt esetben először a CAA számára alkalmas szövet vagy sejtkultúrában, például MDCC-MSB1 sejtekben passzálhatjuk és szaporíthatjuk, mielőtt tojásokba oltjuk eket. Ezt a vírus törzstenyészetet használhatjuk fel azután embrionált tojások fertőzésére, és ezt követően a vírusok szaporítására és passzálására embrionált tojásokban, a technika állása szerint erre a célra ismeretes módszerek felhasználásával. Közelebbről, a tojásokat egyenként legalább 104·5 TCID5q CAA-val fertőzzük a sziktömlőn keresztül, standard eljárások szerint. A beoltás után kb. 13 nappal a fertőzött embriókat összegyűjtjük, homogenizáljuk, és pl. 2,5% (1:20 térfogatarányú) triptózzal hígítjuk. Ezután friss, embrionált tojásokat oltunk be, tojásonként 0,2 ml homogenizátummal minden egyes tojáspasszálási lépésben. Az utolsó passzálást követően a vírust felszaporítjuk, majd összegyűjtjük, és CAA fertőzés ellen immunizáló aktivitással rendelkező vakcinává alakítjuk. Az utolsó passzálásból nyert vírus felszaporítható embrionált tojásban vagy CAA-ra fogékony sejt- vagy szövettenyészetben, mint pl. MDCCMSB1 sejtekben. Embrionált tojások esetében az embriókat és/vagy a membránokat és/vagy az allantoisz folyadékot gyűjtjük össze.
A kívánt növekedési és attenuáltsági sajátságokkal rendelkező CAA vírusok nyeréséhez szükséges tojáspasszálások száma többek között függ az adott CAA törzstől és az attenuáltsági foktól és/vagy a kívánt in vitro titertöl.
A CAA vírusok összes tojás-passzálásainak tipikus száma - amely a találmány szerinti élő vakcina előállításához megfelelő, jelentősen csökkent patogenitással rendelkező vírusokat eredményezi - 18 vagy több, előnyös esetben 34 vagy több.
Közelebbről a találmány szerinti vakcina a 26P4 jelű Intervet CAA törzs vírusaiból származik. Ezt a törzset eredetileg anémiában szenvedő (mezei) csirkék májából izolálták. Az izolálást követően a törzset ötször MDCC-MSB1 sejtekben, ezután 19-szer embrionált tojásokban passzáltuk. A törzs egy mintáját Franciaországban, Párizsban, a Pasteur Intézet „Collection Nationale de Cultures de Microorganismes” (CNCM) gyűjteményében helyeztük letétbe, 1-1141 nyilvántartási szám alatt. Természetesen, nemcsak a 19. passzálásból származó CAA vírusok használhatók a találmány szerinti vakcina előállítására, ennek a törzsnek a későbbi passzálási fokaiból származó vírusok ugyancsak megfelelnek.
Ez az attenuált törzs jelentősen csökkent patogenitást mutat a törzs nem tojáshoz adaptált vírusaihoz képest, míg a törzs immunogén sajátságai változatlanok, amint azt vírusneutralizációs (VN) teszttel megállapítottuk.
A fent leírt eljárás szerint nyerhető új, élő CAA vírusok több megkülönböztető tulajdonsággal rendelkeznek, közelebbről: a CAA vírusok CAA-ra specifikus károsodásokat hoznak létre, beleértve a máig megismert [Yuasa N. és munkatársai (1979) lásd fent; Yuasa N. és Yoshida I. (1983) lásd fent; Bülow von V. és Witt M. (1986) lásd fent] összes CAA törzs esetében kimutatott, az embriókban okozott letális és/vagy patológiás hatásokat.
Más előnyös sajátságaik:
- a CAA vírusok attenuáltak, vagyis egy napos SPF csirkéknek beadva szignifikánsan kevesebb patológiás tünetet hoznak létre, mint a mezei CAA izolátumok;
- a CAA vírusok embrionált tojásokban magas titerig való szaporodáshoz adaptálódtak.
A találmány szerinti élő, attenuált CAA-t tartalmazó vakcina előállítható és forgalmazható szuszpenzió formájában vagy ismert módon liofilizált termékként.
Elő vakcinák esetében az egy csirkére eső dózis 1O1’0 és 1O7’° TCID50 attenuált vírus között alakulhat.
Előnyös stabilizátort adni a vakcinához, főként, ha liofilezéssel száraz készítményt állítunk elő. Alkalmas stabilizátorok pl. az SPGA [Bovarnik és munkatársai, J. Bacteriology 59, 509 (1950)], szénhidrátok (mint pl. a szorbit, mannit, keményítő, szacharóz, dextrán vagy glükóz), proteinek (mint pl. az albumin vagy kazein) vagy ezek degradációs termékei, valamint a pufferek (mint pl. az alkáliföldfém-foszfátok). Kívánt esetben egy vagy több, adjuváns aktivitással rendelkező összetevő is hozzáadható. Erre a célra alkalmas összetevők, pl. az E-vitamin-acetát olaj-a-vízben emulzió, alumínium-hidroxid, -foszfát vagy -oxid, ásványi olaj [mint pl. a Bayol F®, Marcol 52'R\] és a szaponinok.
A találmány tárgya továbbá eljárás inaktivált CAA vakcina alkalmazására csirkéknek az ezen patogén ál3
HU 211 896 A9 tál okozott betegség elleni megvédésére. Mindeddig nem volt lehetséges olyan inaktivált CAA vakcina előállítása, amely immunválaszt váltott ki a vakcinázott csirkékben.
A találmány értelmében elő'ször állítunk elő' inaktivált CAA vakcinát, amely a CAA vírus hatékony mennyiségét tartalmazza, és amely alkalmas arra, hogy vakcinázás után a csirkékben CAA vírus neutralizáló antitestek képzó'dését váltsa ki.
Közelebbről, az inaktivált vakcinát a találmány szerinti új CAA vírusból készítjük.
A találmány szerinti inaktivált CAA vakcina előnyösen egy vagy több inaktivált CAA izolátumot tartalmaz, amelyeket a fent leírtak szerint embrionált tojásokban való sorozatos passzázsokkal attenuáltunk. Kívánt esetben a tojáshoz adaptált CAA-t az inaktiválási folyamat előtt fogékony sejt- vagy szövetkultúrában, például MDCC-MSB1 sejtekben szaporíthatjuk fel.
A találmány szerinti inaktivált vakcina előnyösen annyi CAA-t tartalmaz, amelynek titere az inaktiválás előtt legalább 107·5 TCID50/dózis, előnyösebben legalább 1O8·0 TCID50/dózis, még előnyösebben 1O9·0 TCID50/dózis MDCC-MSB1 sejteken vizsgálva.
Az inaktivált CAA felülúszó a számos rendelkezésre álló technika bármelyikével koncentrálható, így például Amicon koncentráló eszközzel, precipitációs technikákkal, pl. polietilén-glikollal, ultracentrifugálással való koncentrálással vagy adjuváns koncentrációs technikákkal.
A CAA vírusok inaktiválásának célja, hogy a vírus szaporodását megakadályozzuk. Ez általában kémiai vagy fizikai eszközökkel érhető el. A kémiai inaktiválást, pl. a vírusok enzimmel, formaldehiddel, béta-propiolaktonnal, etilén-iminnel vagy ezek származékával való kezelésével végezhetjük. Kívánt esetben az inaktiváló vegyületet utólag neutralizálhatjuk; a formaldehiddel inaktivált anyag pl. tioszulfáttal neutralizálható. A fizikai inaktiválást előnyösen úgy végezhetjük, hogy a vírusokat nagy energiájú sugárzásnak, pl. UV-fénynek, röntgen-sugárzásnak vagy gamma-sugárzásnak tesszük ki. Kívánt esetben a kezelés után a pH-t kb. 7-es értékre állíthatjuk vissza.
Rendszerint egy adjuvánst (például amelyeket fent említettünk) és kívánt esetben egy vagy több emulgeálószert, például Tween1 Rl-t vagy SpanlRl-t is adagolhatunk az inaktivált anyaghoz.
A találmány szerinti vakcinát a vírus hatásos dózisát tartalmazó mennyiségben adjuk be, tehát azt a vírusmennyiséget, amely a csirkékben CAA ellen immunválaszt vált ki.
A találmány szerinti vakcinát beadhatjuk levegőben porlasztva, szemcseppben, orrcseppben, szájon át (pl. ivóvízzel) vagy izomba vagy bőrbe adott injekcióval, bármely korban.
A találmány szerinti élő vagy inaktivált vakcina bármely rendelkezésre álló vagy ezzel a kórokozóval fertőzött csirkéből származó CAA törzsből előállítható. Számos CAA izolátumot leírtak már a szakirodalomban, pl. a Cux-1 törzset [Bülow von V., és munkatársai, J. Veterinary Medicine 30, 742-750 (1983)], a
Gifu-1 törzset (Yuasa N., és munkatársai, 1979, lásd fent), a TK-5803 törzset (Goryo M., és munkatársai, 1987, lásd fent) és a CAAB2-2 törzset (Otaki és munkatársai, 1988, lásd fent).
A találmány szerinti élő vagy inaktivált vakcina az 1-1141 nyilvántartási szám alatt a CNCM-ben letétbe helyezett 26P4 Intervet CAA törzsből származik.
A találmány szerinti vakcinák, előnyösen az inaktivált CAA-t tartalmazó vakcina, tartalmazhatja a CAA komponenst és egy vagy több azzal nem rokon madár vírust, előnyösen baromfi pestis vírust (Newcastle-betegség vírus/NDV), fertőző bronchitis vírust (IBV), Gumboro betegség vírust (IBDV), Marek-féle betegség vírust (MDV), pulykák herpesz vírusát (HVT), fertőző' gégelégcső' gyulladás vírust vagy más madár herpesz vírust, Reo vírust, EDS (Egg Drop Syndrome) vírust, madár agyveló'gyulladás vírust, reticuloendotelium gyulladás vírust, leukózis vírust, baromfi himlő vírust, pulyka rhinotracheitis vírust (TRTV) vagy Adeno vírust.
A találmány tárgya továbbá a CAA vírus termék előállítására szolgáló új termelési rendszer. Az így kapott vírus termék felhasználható baromfiak CAA fertőzésének leküzdésére alkalmas vakcina készítmény előállítására. A találmány megalkotása eló'tt az in vitro elszaporítással elérhető maximális titerek kb. 1O6·0 és 1O7,0 TCID50/ml között változtak. Ez idáig még nem sikerült leküzdeni azt a problémát, hogy a jelenlegi előállítási rendszerekkel elégséges szintű CAA antigént elfogadható áron nem tudtak nyerni. Továbbá, az a tény, hogy a CAA vírust nem lehetett magas titerig szaporítani, mindmáig megakadályozta egy magas antigén-koncentrációt igénylő inaktivált CAA vakcina előállítását.
A találmány szerinti, CAA vírus termék előállítására szolgáló módszer a következő lépéseket tartalmazza: fogékony szubsztrátot olyan CAA vírusokkal oltunk be, amelyek csirkeembriókban károsodást képesek előidézni, különösen olyan CAA vírusokkal, amelyeket embrionált tojásokban attenuáltunk, majd a CAA-t felszaporítjuk, és a CAA-tartalmú anyagot összegyűjtjük.
A CAA vírusok felszaporítására használt szubsztrát eló'nyösen SPF embrionált tojásokban végezzük. Az embrionált tojásokat pl. 0,2 ml, tojásonként legalább 104·5 TCID5q CAA-t tartalmazó szuszpenzióval vagy homogenizátummal oltjuk be. A tojásokat eló'nyösen kb. 1O6·0 TCID50-nel oltjuk be, majd 13 napig 38 °C hó'mérsékleten inkubáljuk. 13 nap elteltével a CAA vírus terméket az embriók és/vagy a membránok és/vagy az allantoisz folyadék összegyűjtésével és a kapott anyag megfelelő homogenizálásával kinyerjük. A homogenizátumot ezután 10 percig 2500 g-n centrifugálhatjuk, majd a felülúszót szűrőn (100 pm) leszűrhetjük.
Eljárhatunk úgy is, hogy a fent említett CAA vírusokat fogékony sejtkultúrába, pl. MDCC-MSB1 sejtekbe oltjuk, ezt követó'en a sejteket tenyésztjük, és a felszaporodott vírusokat összegyűjtjük.
A beoltás után 10-18 nappal, eló'nyösen 13 nappal az elérhető vírustiter legalább 108·0 TCID50/ml, rendszerint legalább 108·4, MDCC-MSB1 sejteken vizsgál4
HU 211 896 A9 va. Az összegyűjtött folyadékot, amint azt korábban ismertettük, a végső termék ampullázása és/vagy tömegben lefagyasztása vagy fagyasztva-szárítása előtt vírus stabilizátorral keverhetjük.
Eljárhatunk úgy is, hogy az összegyűjtött folyadé- 5 kot inaktiváljuk. A CAA-tartalmú folyadékok számos inaktiváló anyaggal inaktiválhatók, így pl. 0,1-0,5%-os koncentrációban használt dietilén-iminnel, acetil-etilén-iminnel, β-propiolaktonnal. Az inaktiváló anyagot a homogenizátumba vagy ennek szűrletében található 10 vírushoz adhatjuk.
Amennyiben β-propiolaktont adunk a vírustartalmú folyadékhoz, a pH savas irányba való eltolódását nátrium-hidroxiddal vagy nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal állíthatjuk vissza. Az inaktiváló anyagot 15 és a vírust tartalmazó folyadék keverékét 4-37 °C-on inkubáljuk. 1-72 órás inkubációs időt alkalmazhatunk.
A találmány tárgya továbbá eljárás baromfiak CAA fertőzésének leküzdésére, amely abban áll, hogy a ba- 20 romfiaknak embrionált tojásokban attenuált CAA törzsből származó vírusokból előállított vakcinát adagolunk. Az eljárásban élő vagy inaktivált vakcinát adagolhatunk.
1. példa
CAA attenuálása embrionált tojásokban
Az eredeti 26P4 Intervet törzset anémiában szenvedő csirkék májából izoláltuk terepen (exp. VIM-CA89-4-153). Az izolálás után a törzset ötször MDCC- 30 MSB1 sejteken passzáltuk, mielőtt tojásokba oltottuk.
A tojások sziktömlójébe 0,2 ml 26P4 vagy Gifu CAA törzset oltottunk [Yuasa N. és munkatársai, Avian Diseases 23, 366-385 (1979)]. Miután 13 napig 38 °C-on inkubáltuk (relatív páratartalom 55%), az embri- 35 ókat összegyűjtöttük és homogenizáltuk. A homogenizátumot 10 percig 2500 g-n centrifugáltuk. A felülúszót összegyűjtöttük, és egy 100 μ ni pórusnagyságú szűrőn átszűrtük. A homogenizátumot 1:20 arányban 2,5%-os triptózzal hígítottuk, és ebből az egyes tojásokba 0,2 40 ml-t oltottunk. Ily módon több, mint 19-szer passzáltuk a 26P4 törzset. Ennek a törzsnek a 19. tojás-passzálásból származó mintáját helyeztük letétbe 1-1141 nyilvántartási szám alatt a Pasteur Intézet CNCM-ben (Párizs, Franciaország). 45
A Gifu törzset tojásembriókban való 14-szeri passzálással attenuáltuk.
2. példa
Két magas és alacsony tojás-passzálási fokú CAA vírus növekedési sajátságainak összehasonlítása embrionált tojásokban
30-60 SPF tojás sziktömlőjébe különböző passzálási fokú vírusokat oltottunk be. Miután 7 napig 38 °C-on inkubáltuk (relatív páratartalom 55%), a tojásokat lámpáztuk, és az elhalt embriókat tartalmazó, valamint a nem termékenyült tojásokat kidobtuk.
A tojásokat a beoltás utáni 7. naptól fogva naponta lámpáztuk, és az embriók elhalását feljegyeztük.
A CAA okozta embrióelhalás a beoltás után tíz nappal kezdődött, vagyis all. napon.
A beoltás utáni 13. napon az embriókat összegyűjtöttük, homogenizáltuk és 2500 g-n 10 percig centrifugáltuk. A felülúszót összegyűjtöttük és MDCC-MSB1 sejteken titráltuk a vírus fertőzőképcsségérc nézve.
Az alábbi 1. és 2. táblázatok azt mutatják, hogy a magas tojás-passzálási fokú CAA vírusok, amelyek embriókárosodást és/vagy elhalást képesek kiváltani, in vitro magas titerig felszaporíthatók, összehasonlítva az alacsony tojás-passzálási fokú vírusokkal.
1. táblázat
A 26P4 törzs növekedési sajátságai embrionált tojásokban
| Tojás- passzálás | Végső titer lóg TCID50/ml | CAA okozta embrióelhalás | CAA okozta embrióelhalás % | |
| 11. nap | 14. nap | |||
| 3 | 7,6 | 1 | 0 | 3,3 |
| 10 | 7,4 | N.V. | N.V. | N.V. |
| 14 | 8,0 | N.V. | N.V. | N.V. |
| 17 | 8,6 | 6 | 2 | 26,6 |
| 19 | 8,4 | N.V. | N.V. | N.V. |
| 24 | 8,4 | N.V. | N.V. | N.V. |
| 33 | 9,3 | 7 | 6 | 21,7 |
N.V. = nem vizsgáltuk.
Az embriókat a beoltás után a 13. napon összegyűjtöttük. A 26P4 törzs 3. tojás-passzálásával beoltott embriók nem mutattak embriókárosodást. A 17. tojáspasszálással beoltott embriók sápadtak voltak, és néhány embrió (különösen az elhaltak) a fejen bevérzéseket mutatott.
2. táblázat
A Gifu törzs növekedési sajátságai embrionált tojásokban
| Tojás- passzálás | Végső titer TCID50/ml lóg | CAA okozta embrióelhalás nap | CAA okozta embriókárosodás | CAA okozta embrióelhalás és embriókárosodás % | |||
| 11. | 12. | 13. | 14. | ||||
| 2 | N.V. | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 3 | 7,0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 | 3,3 |
| 4 | 7,3 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 3,3 |
| 5 | 7,6 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | 6,6 |
HU 211 896 A9
| Tojás- passzálás | Végső titer TCID50/ml lóg | CAA okozta embrióelhalás nap | CAA okozta embriókárosodás | CAA okozta embrióelhalás és embriókárosodás % | |||
| 11. | 12. | 13. | 14. | ||||
| 6 | 76 | 0 | 0 | 0 | 2 | 0 | 6,6 |
| 7 | 7,6 | 0 | 0 | 0 | 0 | 3 | 10,0 |
| 8 | 80 | 0 | 0 | 0 | 0 | 4 | 13,3 |
| 9 | 7,4 | 1 | 2 | 0 | 0 | 4 | 11,6 |
| 10 | 8,5 | 0 | 1 | 0 | 1 | 6 | 13,3 |
| 11 | 7,8 | 0 | 0 | 2 | 0 | 5 | 11,6 |
| 12 | 7,8 | 1 | 2 | 0 | 1 | 10 | 23,3 |
| 13 | 8,3 | 3 | 3 | 5 | 0 | 7 | 30,0 |
| 14 | 8,3 | 0 | 3 | 0 | 6 | 11 | 33,3 |
N.V. = nem vizsgáltuk
3. példa
Kísérletes vakcinázás élő CAA vakcinával
Kísérleteket végeztünk azzal a céllal, hogy meghatározzuk a CAA vírusok attenuáltságának a fokát és azt, hogy az immunogenitási képesség milyen mérték- 25 ben maradt meg az embrionált tojásokban való passzálások során.
Elő CAA vakcinákpatogenitása
Az 1. kísérletben az Intervet törzs következő' paszszálási fokait használtuk fel:
- 1. tojás-passzálási fok (alacsony tojás-passzálási fok),
- 18. tojás-passzálási fok (magas tojás-passzálási fok),
- nem fertó'zött embrionált SPF tojásokból származó embrió homogenizátum (13 napos inkubálás).
A 2. kísérletben az Intervet törzs következő' passzálási fokait használtuk fel:
- 4. tojás-passzálási fok (alacsony tojás-passzálási fok),
- 19. tojás-passzálási fok (magas tojás-passzálási fok) - a 19. tojás-passzálási fokból származó CAA vírust tettük el, mint „Master” törzset,
- nem fertó'zött SPF embrionált tojásokból származó embrió homogenizátum (13 napos inkubálás).
A vírusokat oly módon hígítottuk, hogy a CAA törzs hígításának 0,2 milliliteré kb. IO6·0 TCID50-t tartalmazott. Egynapos SPF csirkéket oltottunk 0,2 milliliter vakcinával, izomba adva.
A 3. kísérletben a Gifu törzs következő passzálási fokait használtuk fel:
- 1. tojás-passzálás,
- 14. tojás-passzálás.
107 darab egynapos csirkét három, egyenként 35-36 madarat számláló csoportra osztottunk (lásd fent). A harmadik csoportot nem vakcináztuk (kontroll csoport).
A vakcinázást követő 10. és 14. napokon csoportonként 10 madarat kivettünk az elkülönítőbői hematokrit vizsgálat és boncolás céljára.
héttel a vakcinázás után a madarakat elvéreztettük, és a szérumokat CAA-antitestek jelenlétére vizsgáltuk indirekt immunfluoreszcenciás módszerrel (IIFT).
A vakcinázást az 1. és 2. kísérletben ismertetettek szerint végeztük.
Az 1. és 2. kísérletben 150 darab egynapos SPF csirkét három, egyenként 50 madarat számláló csoportra osztottunk, és mindegyik csoportot negatív nyomású elkülönítőbe helyeztük.
Csoportonként 40 csirkét a fent említett vírusok egyikével vakcináztunk, csoportonként 10 csirkét nem vakcináztunk, az utóbbiak szolgáltak kontakt kontrollként.
A vakcinázás után a 10., 14. és 21. napokon csoportonként 4 vagy 8 madarat kivettünk az elkülönítőből hematokrit vizsgálat és boncolás céljára.
A vakcinázás után 5 héttel a madarakat elvéreztettük, és a szérumokat CAA-antitestek jelenlétére vizsgáltuk (vírusneutralizációs) VN-módszerrel.
Vírustitrálás
A vírusokat MDCC-MSB1 sejteken titráltuk, 96 rekeszű (szövettenyésztő minőségű) mikrolemezek felhasználásával. A vírusokból 10-es léptékű hígítási sort készítettünk 10% borjúszérummal és antibiotikumokkal kiegészített RPMI 1640 tápfolyadékban.
A 96 rekeszű mikrolemez 10 rekeszébe egyenként 100 μΙ-t adtunk minden egyes vírus hígításból, majd hozzáadtunk 100 μΐ MDCC-MSB1 sejtet (6 x 105 sejt/ml végkoncentráció).
A sejteket minden 2-3 napban passzáltuk, és a végpontot a 10. passzálás után olvastuk le. A fertőzóTsépességi titert Reed és Muench szerint számítottuk [Reed L. J. és Muench H., Am. J. Hyg. 27,493^197 (1938)].
Szerológiai vizsgálat
A CAA ellenes ellenanyagokat VN módszerrel vizsgáltuk, 96 rekeszű mikrolemezeken, MDCCMSB1 sejteket és a szokásos, állandó vírus - változó szérum módszert alkalmazva [Kunitoshi I. és Yuasa N., Jpn. J. Vet. Sci. 52, 873-875 (1990)].
HU 211 896 A9
IIFT-t végeztünk ismert módszerek szerint [Yuasa N. és munkatársai, Avian Pathology 14, 521-530 (1985)].
Hematokrit értékek
A szárnyvénából heparinozott kapilláris csövekbe vért vettünk. A hematokrit értéket (%) 12 000 rpm-en való 5 perces centrifugálás után olvastuk le. A csirkéket anémiásnak tekintettük 27,0% alatti hematokrit értéknél [Yuasa N. és munkatársai (1979) lásd fent].
Az 1-3 kísérletekben szereplő SPF csirkékben kiváltott fő patológiás károsodásokat a 3-5. táblázatokban foglaltuk össze.
3. táblázat
Egynapos SPF csirkéken végzett patogenitási kísérletek (26P4 törzs)
| Passzálási fok | Összes elhullás (%) | |||
| Elhullás1' | TA2’ | PB3’ | Ht (alacsony)4^ | |
| 1. tojás-passzálás | 33 | 80 | 65 | 40 |
| 8. tojás-passzálás | 4 | 40 | 40 | 21 |
| kontakt kontrollok 1. tojás-passzálás | 0 | 0 | 0 | 0 |
| kontakt kontrollok 18. tojás-passzálás | 0 | 0 | 0 | 0 |
| kontrollok | 0 | 0 | 0 | 0 |
1) A beoltást követő 14 21 napon, a CAA fertőzés következtében bekövetkezett elhullás
2) Timuszsorvadásban szenvedő madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%
3) Sápadt, elzsírosodott csontvelejű madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%
4) 27%-nál alacsonyabb Ht értékkel rendelkező madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%.
4. táblázat
Egy napos SPF csirkéken végzett patogenitási kísérlet (26P4 törzs)
| Passzálási fok | Összes elhullás (%) | |||
| Elhullás1’ | TA2’ | PB3’ | Ht (alacsony)4) | |
| 4. tojás-passzálás | 13 | 70 | 61 | 87 |
| 19. tojás-passzálás | 0 | 33 | 31 | 35 |
| kontakt kontrollok 4. tojás-passzálás | 0 | 0 | 0 | 0 |
| kontakt kontrollok 19. tojás-passzálás | 0 | 0 | 0 | 0 |
| kontrollok | 0 | 0 | 0 | 0 |
1) A beoltást követő 14-21 napon a CAA fertőzés következtében bekövetkezett elhullás
2) Timuszsorvadásban szenvedő madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%
3) Sápadt, elzsírosodott csontvelejű madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%
4) 27%-nál alacsonyabb Ht értékkel rendelkező madarak száma/vizsgált madarak száma X 100%.
5. táblázat
Patogenitási kísérlet egynapos korú SPY csirkékben (Gifu törzs)
| Passzálási fok | Összes elhullás (%) | Szerológiai titer5) | |||
| Elhullás1’ | TA2’ | PB3’ | Ht (ala- csony) 4, | ||
| 1. passzálás | 44 | 100 | 85 | 85 | 8,3 ± 1,2 |
| 14. paszszálás | 0 | 70 | 60 | 60 | 8,2 ± 1,4 |
| kontrollok | 0 | 0 | 0 | 0 | <4,0 ±0,0 |
1)4) lásd 3. táblázat
5) 2-es alapú logaritmus, standard eltéréssel
Jelentős különbség figyelhető meg a két CAA izolátum alacsony és magas passzálási fokú vírusai által okozott patológiás változások között, nem csak az érintett madarak számát, hanem a patológiás elváltozások súlyossági fokát illetó'en is, amint azt a Ht középértékek különbségei mutatják.
A magas paszálási fokú vírusok által kiváltott kiterjedt csontvelő'- és timuszkárosodások is kevésbé súlyosak, mint az alacsony tojás-passzálási fokú vírusok által okozott elváltozások.
Az élő CAA vakcina immunogenitása
A 25. táblázat azt mutatja, hogy a Gifu törzs immunogenitását nem befolyásolta hátrányosan a CAA vírusok attenuálása.
A 6. táblázat az 1. és 2. kísérlet szerológiai eredményeit mutatja. A magas tojás-passzálási fokú vírusok patogenitási sajátságaiban bekövetkezett csökkenés ellenére nem volt észrevehető' csökkenés ezen vírusok immunogenitásában.
6. táblázat
A vírus-neutra/izációs vizsgálat eredményei 5 héttel a beoltás után
| Passzálási szint | VN titer középérték1 | |
| vakcináit | kontakt kontrollok | |
| 1. tojás-passzálás | 8,7 ±0,9 | 8,5 ± 1,4 |
| 18. tojás-passzálás | 8,2 ± 1,3 | 7,6 ± 1,5 |
| kontrollok | <4 | |
| 4. tojás-passzálás | >10,2 ±0,6 | >10,0 ±0,8 |
| 19. tojás-passzálás | 9,2 ±0,9 | >10,3 ±0,6 |
| kontrollok | <4 |
1 2-es alapú logaritmusban kifejezve, standard eltéréssel
4. példa
Vakcinázás élő, kombinált vakcinával
Reo vírus vakcina: kereskedelmileg hozzáférhető (Intervet International Β .V., Hollandia) Nobilis® élő Reo vírus vakcina (016901 gyártási számú tétel). A vakcinát az oldószerben a gyártó előírása szerint hígítottuk.
HU 211 896 A9
CAA vakcina: az Intervet törzs 19. tojás-passzálási fokából származó élő CAA vírusokat oly módon hígítottuk az oldószerben, hogy az egy madárra eső dózis (0,2 ml) IO2,6 TCID50-t tartalmazott.
Négyhetes SPF csirkéket vakcináztunk izomba adva
- 1 madár-dózis élő Reo vakcinával;
- 1 madár-dózis élő CAA vakcinával; vagy
- 1 madár-dózis élő, kombinált Reo és CAA vakcinával. A vakcinázás után négy és hat héttel vérmintákat vettünk, és a szérumokat vírusneutralizációs módszerrel CAA és Reo vírusok elleni ellenanyagok jelenlétére vizsgáltuk (7. táblázat).
7. táblázat
A vírus-neutralizációs vizsgálat eredményei
| Vakcina | VN titer középérték1 | |||
| CAA | Reo vírus | |||
| vakcinálás után | vakcinálás után | |||
| 4 héttel | 6 héttel | 4 héttel | 6 héttel | |
| Reo vakcina | <4,0 ± 0,0 | <4,0 ± 0,0 | 2,3 ± 2,0 | 2,3 ± 1,4 |
| CAA vakcina | >9,6 ±0,8 | >9,5 ± 1,2 | <1,0 ±0,0 | <1,0 ±0,0 |
| kombinált vakcina | >9,1 ± 1,1 | >9,8 ± 1,1 | 3,4 ± 1,8 | 1,5 ± 1,8 |
| kontrollok | <4,0 ± 0,0 | <4,0 ± 0,0 | <1,0 ±0,0 | <1,0 ±0,0 |
12-e·, alapú logaritmusban kifejezve, standard eltéréssel.
A fenti táblázatból kiderül, hogy bár a kombinált vakcina mindkét vírus típust élő formában tartalmazza, immunogenitásukban nem volt megfigyelhető kedvezőtlen kölcsönhatás.
5. példa
Kísérleti vakcinázás inaktivált CAA vakcinával
Négyhetes SPF csirkéket vakcináztunk izomba adott inaktivált CAA vakcinával, víz-olaj emulzió formájában (v/o). A vakcinát a 19. passzálási szintű Intervet törzs embrió-homogenizátumából készítettük. A vírust 0,5% béta-propiolaktonnal inaktiváltuk 3 óra hosszat 37 °C-on. A v/o emulziót 50% inaktivált CAA-tojás alapanyag és 50% ásványi olaj emulziójából készítettük.
A fertőző titer alapján az egyes csirkéket 107·5 * TCID5q vírus antigént tartalmazó 0,5 ml v/o emulzióval oltottuk, izomba adva. A vakcinázás után 8 héttel a madarakat ugyanazzal az inaktivált vakcinával egy második vakcinázásban részesítettük, izomba adva. Az első és a második vakcinázás után különböző időpontokban vérmintákat vettünk, és a szérumokat VN módszerrel CAA-ellenanyagok jelenlétére vizsgáltuk (8. táblázat). Kimutattuk, hogy a fertőző dózis alapján 107·5 TCID5q vírus antigént tartalmazó inaktivált vakcina képes immunválaszt kiváltani a beoltott állatban.
A többi vakcinázási kísérletben ugyanazt a fent ismertetett eljárást követtük, kivéve, hogy a vakcina dózisa 1 ml olaj-víz emulzióban IO8·0 és IO9·0 TCID50 voltak (9. táblázat).
8. táblázat
A vírus-neutralizációs vizsgálat eredményei
| VN titer1 | ||||||
| vakcinázás utáni hetek; | megerősítés utáni hetek | |||||
| csirke | 4 hét | 6 hét | 8 hét | 2 hét | 4 hét | 6 hét |
| 801/802 | <4 | <4 | <4 | 6 | 6 | 7 |
| 803/804 | 8 | 7 | N.V. | 9 | 8 | 8 |
| 805/806 | 5 | 4 | 6 | 6 | 6 | 4 |
| 807/808 | 6 | 8 | 9 | 10 | >11 | >11 |
| 809/810 | 6 | 5 | 4 | 7 | N.V. | 6 |
| 811/812 | 4 | <4 | 4 | 4 | 4 | 4 |
| 813/814 | 4 | <4 | <4 | <4 | <4 | <4 |
| 815/816 | 4 | 4 | 4 | 6 | 6 | 5 |
| 817/818 | <4 | <4 | <4 | 4 | 4 | N.V. |
| 819/820 | <4 | 5 | <4 | 6 | 5 | N.V. |
| 821/822 | <4 | <4 | <4 | 6 | 7 | 6 |
| 823/824 | 6 | 7 | 6 | 8 | 7 | 7 |
| kontakt | N.V. | N.V. | <4 | <4 | <4 | <4 |
| kontrollok | N.V. | N.V. | <4 | <4 | <4 | <4 |
| N.V. | N.V. | <4 | <4 | N.V. | N.V. |
12-e·, alapú logaritmusban kifejezve N.V. - nem vizsgáltuk.
9. táblázat
A vírus-neutralizációs vizsgálat eredményei
| VN titer1 | |||||||
| vakcinázás utáni | megerősítés utáni | ||||||
| hetek | hetek | ||||||
| Cso- port | Dózis (TCID50) | Csirkék | 4 | 6 | 2 | 4 | 6 |
| 510 | 10».° | vakc inázott | 3,9 | 4,1 | 7,9 | 8,3 | 8,3 |
| kontrollok | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | ||
| 515 | IO9,0 | vakcinázott | 5,0 | 5,3 | 9,2 | 10,4 | 9,6 |
| kontrollok | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 |
ö 2-es alapú logaritmusban kifejezve
Claims (19)
1. Csirke anémia ágens (CAA) vírus, azzal jellemezve, hogy károsodást képes kiváltani csirke embriókban.
2. Az 1. igénypont szerinti CAA vírus, azzal jellemezve, hogy a Pasteur Intézet CNCM-ben letétbe helyezett 1-1141 törzs.
3. Mikrobiológiailag tiszta kompozíció, azzal jellemezve, hogy az 1. vagy 2. igénypont szerinti, attenuált vagy inaktivált CAA vírusokat tartalmaz.
4. A 3. igénypont szerinti mikrobiológiailag tiszta
HU 211 896 A9 kompozíció, azzal jellemezve, hogy milliliterenként legalább 1O8·0 TCID50-et tartalmaz.
5. Elő, attenuált CAA vírusokat tartalmazó, baromfiakat CAA ellen védó' vakcina, azzal jellemezve, hogy az 1. vagy 2. igénypont szerinti CAA vírusokat tartalmaz.
6. Az 5. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy tojásembriókban attenuált CAA vírusokat tartalmaz.
7. Baromfiakat CAA ellen védő vakcina, azzal jellemezve, hogy hatásos mennyiségű inaktivált CAA vírust tartalmaz és vakcinázást követően képes CAA vírus elleni neutralizáló ellenanyagok termelését kiváltani csirkében.
8. A 7. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy a CAA vírusok inaktiválás előtti dózisa legalább 107·5 TCID50.
9. A 8. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy az inaktiválás előtti vírustartalma dózisonként legalább 1O8·0 TCID50, előnyösen legalább 1O9·0 tcid50.
10. Az 5-9. igénypontok bármelyike szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy az 1. vagy 2. igénypont szerinti CAA vírusokat tartalmaz.
11. A 7-10. igénypontok bármelyike szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy egy adjuvánst is tartalmaz.
12. Az 5. vagy 7. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy egy vagy több, CAA-val rokonságot nem mutató madár kórokozó antigénjeit is tartalmazza.
13. Eljárás CAA vírus termék előállítására, azzal jellemezve, hogy
a) fogékony szubsztrátot az 1. vagy 2. igénypont szerinti CAA vírussal oltunk be,
b) a CAA vírusokat felszaporítjuk, és
c) a CAA vírustartalmú anyagot összegyűjtjük.
14. A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szubsztrátként tojásembriót alkalmazunk.
15. Új vírus, lényegében véve ahogyan itt ismertettük.
16. Új kompozíció, lényegében véve ahogyan itt ismertettük.
17. Új vakcina, lényegében véve ahogyan itt ismertettük.
18. Anyag vagy kompozíció új alkalmazásra olyan kezelési eljárásban, amelyet lényegébén véve itt ismertettünk.
19. Új eljárás vírus termék előállítására, lényegében véve ahogyan itt ismertettük.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP91202452 | 1991-09-20 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU211896A9 true HU211896A9 (en) | 1995-12-28 |
Family
ID=8207891
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9202976A HU217214B (hu) | 1991-09-20 | 1992-09-18 | Eljárás csirkeanémia-ágens vakcina előállítására |
| HU95P/P00564P HU211896A9 (en) | 1991-09-20 | 1995-06-29 | Chicken anaemia agent vaccine |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9202976A HU217214B (hu) | 1991-09-20 | 1992-09-18 | Eljárás csirkeanémia-ágens vakcina előállítására |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5728569A (hu) |
| EP (1) | EP0533294B1 (hu) |
| JP (2) | JP3945830B2 (hu) |
| KR (1) | KR100221710B1 (hu) |
| CN (1) | CN1050302C (hu) |
| AT (1) | ATE147632T1 (hu) |
| AU (1) | AU659490B2 (hu) |
| CA (1) | CA2078605C (hu) |
| DE (1) | DE69216732T2 (hu) |
| DK (1) | DK0533294T3 (hu) |
| ES (1) | ES2099200T3 (hu) |
| GR (1) | GR3022755T3 (hu) |
| HU (2) | HU217214B (hu) |
| MX (1) | MX9205336A (hu) |
| NZ (1) | NZ244361A (hu) |
| TW (1) | TW340873B (hu) |
| ZA (1) | ZA927014B (hu) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6162461A (en) | 1990-09-12 | 2000-12-19 | Leadd B.V. | Chicken anemia virus mutants and vaccines and uses based on the viral proteins VP1, VP2 and VP3 or sequences of that virus coding therefor |
| NL9301272A (nl) * | 1993-07-20 | 1995-02-16 | Aesculaap Bv | Chicken Anemia Virus mutanten en vaccins en toepassingen gebaseerd op de virale eiwitten VP1, VP2 en VP3 of daarvoor coderende sequenties van dat virus. |
| US6217870B1 (en) | 1990-09-12 | 2001-04-17 | Leadd, Bv | Chicken anemia virus mutants and vaccines and uses based on the viral proteins VP1 VP2 and VP3 or sequences of that virus coding therefor |
| US6071520A (en) * | 1990-09-12 | 2000-06-06 | Leadd Bv | Chicken anemia virus mutants and vaccines and uses based on the viral proteins VP1, VP2 and VP3 or sequences of that virus coding therefor |
| US5981502A (en) * | 1990-09-12 | 1999-11-09 | Leadd B.V. | Methods and compositions for inducing apoptosis in tumor cells |
| GB9414888D0 (en) * | 1994-07-23 | 1994-09-14 | Univ Belfast | Method and composition |
| DE69615656T2 (de) * | 1995-01-06 | 2002-08-01 | Akzo Nobel Nv | Aviären infektiösen anämie mastgeflügel impfstoff |
| ZA978434B (en) * | 1996-09-27 | 1998-03-26 | Akzo Nobel Nv | Inactivated vaccines. |
| US6159472A (en) * | 1998-11-16 | 2000-12-12 | Akzo Nobel N.V. | Intradermal Avian immunization with inactivated vaccines |
| JP2001275664A (ja) * | 2000-02-29 | 2001-10-09 | Akzo Nobel Nv | 低い病原性のニワトリ貧血ウイルス |
| US6593134B1 (en) | 2000-03-10 | 2003-07-15 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method of propagating chicken infectious anemia virus |
| EP1436001A4 (en) * | 2001-09-05 | 2006-01-11 | Biomune | VACCINE AGAINST INFECTIOUS CHICKEN ANEMIA VIRUS MANUFACTURED FROM A CELL LINE |
| MXPA06010131A (es) * | 2004-03-05 | 2007-04-12 | Biomune Company | Vacuna para el virus de la anemia aviar de la linea celular. |
| EP1848541A4 (en) * | 2005-02-07 | 2013-01-16 | Pharmalight Inc | METHOD AND DEVICE FOR OPHTHALMIC DELIVERY OF PHARMACEUTICALLY ACTIVE INGREDIENTS |
| WO2016183423A1 (en) | 2015-05-14 | 2016-11-17 | Merial Inc. | Method for porcine circovirus production and pcv2 vaccines |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3616262A (en) * | 1967-06-09 | 1971-10-26 | Merck & Co Inc | Apparatus and method for propagating viruses i in the extra-embryonic fluids of eggs |
| BE853923A (fr) * | 1977-04-25 | 1977-10-25 | Rit Rech Ind Therapeut | Nouveau vaccin vivant ameliore contre le pseudopeste aviaire et son procede de preparation |
| US4530831A (en) * | 1982-11-02 | 1985-07-23 | Akzo N.V. | Infectious Bursal Disease vaccine |
-
1992
- 1992-09-14 ZA ZA927014A patent/ZA927014B/xx unknown
- 1992-09-16 NZ NZ244361A patent/NZ244361A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-09-18 AU AU25217/92A patent/AU659490B2/en not_active Expired
- 1992-09-18 CA CA002078605A patent/CA2078605C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-18 AT AT92202864T patent/ATE147632T1/de active
- 1992-09-18 HU HU9202976A patent/HU217214B/hu unknown
- 1992-09-18 EP EP92202864A patent/EP0533294B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-18 DK DK92202864.2T patent/DK0533294T3/da active
- 1992-09-18 MX MX9205336A patent/MX9205336A/es unknown
- 1992-09-18 DE DE69216732T patent/DE69216732T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-18 ES ES92202864T patent/ES2099200T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-19 CN CN92112284A patent/CN1050302C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-19 KR KR1019920017163A patent/KR100221710B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-09-21 JP JP25137492A patent/JP3945830B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-19 TW TW081108361A patent/TW340873B/zh not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-09-02 US US08/300,688 patent/US5728569A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-06-29 HU HU95P/P00564P patent/HU211896A9/hu unknown
-
1997
- 1997-03-07 GR GR970400434T patent/GR3022755T3/el unknown
-
2007
- 2007-02-05 JP JP2007025127A patent/JP4148980B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05260962A (ja) | 1993-10-12 |
| ATE147632T1 (de) | 1997-02-15 |
| HU9202976D0 (en) | 1992-11-30 |
| HUT65367A (en) | 1994-05-02 |
| US5728569A (en) | 1998-03-17 |
| HU217214B (hu) | 1999-12-28 |
| EP0533294A1 (en) | 1993-03-24 |
| CN1050302C (zh) | 2000-03-15 |
| MX9205336A (es) | 1993-07-01 |
| GR3022755T3 (en) | 1997-06-30 |
| ES2099200T3 (es) | 1997-05-16 |
| JP3945830B2 (ja) | 2007-07-18 |
| DE69216732T2 (de) | 1997-06-12 |
| AU659490B2 (en) | 1995-05-18 |
| DE69216732D1 (de) | 1997-02-27 |
| NZ244361A (en) | 1995-06-27 |
| AU2521792A (en) | 1993-03-25 |
| JP4148980B2 (ja) | 2008-09-10 |
| EP0533294B1 (en) | 1997-01-15 |
| KR100221710B1 (ko) | 1999-10-01 |
| ZA927014B (en) | 1993-03-19 |
| TW340873B (en) | 1998-09-21 |
| JP2007125039A (ja) | 2007-05-24 |
| CA2078605C (en) | 2003-06-17 |
| CN1073879A (zh) | 1993-07-07 |
| CA2078605A1 (en) | 1993-03-21 |
| DK0533294T3 (da) | 1997-07-07 |
| KR930006150A (ko) | 1993-04-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4148980B2 (ja) | ニワトリ貧血因子ワクチン | |
| USRE32283E (en) | Vaccines | |
| US6086892A (en) | Poultry vaccine | |
| US4302444A (en) | Vaccines for immunizing egg-laying birds against Egg Drop disease, preparation of said vaccines, and method of use of said vaccines | |
| US4751079A (en) | Infectious bronchitis vaccines | |
| EP0760394B1 (en) | Mild Newcastle disease virus vaccine | |
| US5686077A (en) | Methods of immunization of poultry with vaccines against chicken anemia agent (CAA) | |
| US20080317776A1 (en) | Vaccines Containing Viruses Involved in Avian Malabsorption Syndrome and Methods of Administration Therefor | |
| AU5179101A (en) | IBDV strain for in ovo administration | |
| MXPA96003124A (en) | Vaccine against the newcastle beni disease virus | |
| HU205265B (en) | Process for producing living vaccine combinations againstvirus infections of fowls | |
| HU225801B1 (en) | Chicken anaemia viruses of low pathogenicity | |
| RU2283136C2 (ru) | Инактивированная сорбированная вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц | |
| EP1161953A2 (en) | IBDV strain for in OVO administration | |
| RU2127602C1 (ru) | Штамм "бг" вируса инфекционной бурсальной болезни птиц и вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц | |
| RU2283137C2 (ru) | Инактивированная эмульсионная вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц |