HU208083B - Process for producing composition suitable for inactivating or removing deleterious materials from blood or other extracellular liquid - Google Patents

Process for producing composition suitable for inactivating or removing deleterious materials from blood or other extracellular liquid Download PDF

Info

Publication number
HU208083B
HU208083B HU906647A HU664790A HU208083B HU 208083 B HU208083 B HU 208083B HU 906647 A HU906647 A HU 906647A HU 664790 A HU664790 A HU 664790A HU 208083 B HU208083 B HU 208083B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
crown ether
dextran
crown
compounds
process according
Prior art date
Application number
HU906647A
Other languages
English (en)
Other versions
HU906647D0 (en
HUT59011A (en
Inventor
Henry Marinus Christensen
Hans Berg Andreasen
Original Assignee
Christensen Henry M
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Christensen Henry M filed Critical Christensen Henry M
Publication of HU906647D0 publication Critical patent/HU906647D0/hu
Publication of HUT59011A publication Critical patent/HUT59011A/hu
Publication of HU208083B publication Critical patent/HU208083B/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
    • C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/0005—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
    • A61L2/0082—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using chemical substances
    • A61L2/0088—Liquid substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
    • B01J20/3212—Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3253—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure not containing any of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. aromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3255—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/40—Aspects relating to the composition of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/48—Sorbents characterised by the starting material used for their preparation
    • B01J2220/4812—Sorbents characterised by the starting material used for their preparation the starting material being of organic character
    • B01J2220/4825—Polysaccharides or cellulose materials, e.g. starch, chitin, sawdust, wood, straw, cotton

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás káros komponensek, a vírusokat is beleértve, eltávolítására vagy inaktiválására alkalmas készítmény előállítására, amely vérben vagy más extracelluláris testnedvekben alkalmazható emberekben vagy állatokban. A készítmény hatóanyagként dextránhoz kötött (2) általános képletű koronaéter vegyületet tartalmaz, amely alkalmas a fenti komponensek megkötésére. A „koronaéter vegyiilet” elnevezés alatt koronand vegyületeket értünk, amelyek az elnevezés legszélesebb körét magukba foglalják. A koronand vegyületek leírása megtalálható a Merck-Schuchardts közleményben: E. Weber „Phase Transfer Catalysts” és az ott idézett irodalomban, illetve referenciaként megadott irodalomban.
Ezen típusú vegyületek további leírása található az alábbi közleményekben: E Vögtle, E. Weber and U. Élben, Kontakté 2, (1980), old. 36 ff, E. Weber, Kontakté 1 (1982), old. 24 ff, Kontakté 1 (1983), old. 38 ff, továbbá Kontakté 1 (1984), old. 26 ff, amelyek címe minden esetben a következő „Process in Crown Ether Chemistry”.
A fent idézett irodalmi utalásokat referenciaként adjuk meg.
Az első alkalommal szintetizált 18-koronaéter-6 típusú vegyületek az (1) képlettel jellemezhető gyűrűt tartalmazzák, azonban az utóbbi időben más hasonló típusú vegyületeket is szintetizáltak, amelyek közül néhány nagyobb mennyiségű, mások pedig kisebb mennyiségű heteroatomot tartalmaznak.
A szakirodalomban javasolták, hogy a „koronaéter” elnevezést olyan koronand vegyületekre alkalmazzák kizárólagosan, amelyekben valamennyi heteroatom oxigénatom. Azonban a jelen leírásban és a csatolt szabadalmi igénypontokban a koronaéter elnevezés alatt - mint fent leírtuk - a szokásosan széles körben alkalmazott jelentést értjük, azaz valamennyi koronand-vegyületet, amelyekben a heteroatom oxigénatom, továbbá amelyekben az oxigénatomokat teljesen vagy részben kénatomokkal, nitrogénatomokkal vagy foszforatomokkal helyettesítették. Az elnevezésbe beleértjük továbbá azokat a vegyületeket is, amelyekben különféle más szerkezetek és összetételek atomjait helyettesítették vagy a gyűrűhöz kondenzálták.
A koronaéter vegyületek felhasználására a szakirodalomban számos eljárást írtak le.
A legtöbb javasolt eljárás esetében ez az alkalmazás _ azon alapult, hogy az adott vegyület jellemzó'itől függően, amelyek például a gyűrűk méretei és az üregek méretei, a vegyületek alkalmasak arra, hogy esetenként nagy szelektivitással megkössenek nemcsak kationokat, hanem anionokat és töltéssel nem rendelkező szerves molekulákat is. Számos javasolt alkalmazási terület ezen vegyületek esetében a fenti jellemzők alkalmazása kémiai szintetikus eljárásokban, amelyekben ezen a vegyületek katalitikus hatással rendelkezhetnek. Az ilyen alkalmazások esetében javasolták, hogy a koronaéter vegyületeket rögzítsük úgy, hogy ezeket polimer gyantákhoz kötjük, amelyek például lehetnek polisztirol gyanták, azért mert így minimálisra csökkenthető a viszonylag drága koronaéter vegyületek felhasználása.
A szakirodalomban ezen túlmenően számos más alkalmazást is leírtak.
Ezek között például leírták, hogy a benzo-koronaéterek, mint például a benzo-15-korona-5-éter származékok és a dibenzo-30-korona-10 vegyület coccidium ellenes aktivitással rendelkezik sejttenyészeti tesztvizsgálatokban (George R. Brown and Allan J. Foubister: J. Med. Chem. 1983, 26, 590-592). Azonban ebben az esetben nem mutattak ki in vivő hatást, amennyiben a vegyületeket takarmányban baromfi tenyészetben adagolták.
Továbbá a 3 997 565 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban leírták, hogy bizonyos koronaéterek in vitro vírusellenes hatást mutatnak, emiatt a vegyületeket javasolták egyebek között fertőtlenítő szerként való alkalmazásra, azonban terápiás felhasználást nem említenek.
A fent idézett közlemények között első alkalommal E. Weber megállapította, hogy az egyes koronaéter vegyületek baktérium-ellenes és vírus-ellenes hatása amiatt jelentkezik, mivel képesek fémeket komplexálni, de ugyanebben a közleményben azt is leírta, hogy a valódi alkalmazása ezen vegyületeknek fiziológiai-farmakológiai területen még nem megoldott.
A 187 360 számú magyar szabadalmi leírás bizonyos ciklodextrin-koronaéter származékok előállítására szolgáló eljárást ismertet. Eszerint ha a ciklodextrin molekulákat és a koronaéter molekulákat egymáshoz kapcsolják egy aminocsoportot vagy karbonilcsoportot tartalmazó oldalláncon keresztül, a kapott molekula képes sószerű szerves vegyületek komplexálására, mivel komplex kötés keletkezik, a kationnal és a szerves anion apoláros csoportjával is. A szabadalmi igénypontokban leírták, hogy a komplex vegyület alkalmazható farmakokinetikus jellemzők megváltoztatása céljára szerves molekulák esetében, amelyek ionos kötéssel rendelkeznek. Nem írtak le javaslatot arra, hogy a ciklodextrin-koronaéter származékok önmagukban alkalmazhatók gyógyszerészeti hatóanyagként, és nincs említés arról sem, hogy ezek az emberi testtel kompatibilisek lennének.
A WO 89/01476 számon közzétett PCT szabadalmi bejelentés szerint speciális koronaéter vegyületek, amelyek tetraaza-vegyületek, valamint ezek fémkomplexei, alkalmasak arra, hogy diagnosztikai célra alkalmazzák, vagy hogy citotoxikus hatást érjenek el előnyösen úgy, hogy ezeket radioaktív atomokkal komplexálják. Ezen koronaéter vegyületek kapcsolását más molekulákhoz, mint például fehérjékhez, különösen antitestekhez, peptidekhez vagy szénhidrátokhoz, megemlítik mint elvi lehetőséget, azonban nem bizonyítják. Nem írják le, milyen előnyök származhatnak az ilyen tisztán hipotetikus kapcsolásból, kivéve az ilyen kapcsolás antitestekhez történő elvégzését. Mivel az egyedüli említett terápiás hatás a citotoxikus hatás, az alább adott magyarázat következtében nyilvánvaló, hogy a szénhidrátokhoz való kapcsolás csakis kis molekulatömegű szénhidrátok esetében jöhet számításba. Például poliszacharidokhoz történő kötéssel létrehozott termék a jelen isme2
HU 208 083 Β retek szerint nem vagy csak igen kis citotoxikus hatással rendelkezik egyebek között.
A koronaétereket jelenleg a gyógyászatban terápiásán nem alkalmazzák, mivel a szabad koronaéterek rendkívül toxikusak. Vizsgálataink során azt találtuk, hogy a koronaéterek toxieitása jelentősen csökkenthető, amennyiben ezeket poliszacharidokhoz, nevezetesen dextránhoz kapcsoljuk, miközben ezek esetenként igen specifikus kation-, anion- vagy töltéssel nem rendelkező molekula-megkötő képessége fennmarad.
Továbbá kimutattuk, hogy lehetséges olyan koronaéter-poliszacharid vegyüiet kondenzációs termékek előállítása, amelyek intravénásán adagolhatok vagy amelyek testen kívüli módon adagolhatok a véráramba úgy, hogy nem merül fel a veszélye annak, hogy koronaéter vegyületek szabadulnak ki, amelyek toxikus szabad koronaéter anyagok.
A találmány tárgya tehát eljárás káros anyagok inaktiválására vagy eltávolítására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására, mely készítmény hatóanyaga dextránhoz kötött (2) általános képletű koronaéter vegyület, ahol a képletben
Q jelentése 1-20 szénatomos szénhidrogén lánc,
A1 és A2 jelentése (3), (4) vagy (5) képletű csoport, n1 és n2 jelentése 1-20 közötti egész szám;
Y jelentése -0-, -S-, -N(H)~ vagy -P(H)csoport.
A szóbanforgó készítmény hatóanyagának megválasztásánál figyelembe vehetjük azt a tényt, hogy a koronaéter vegyületek nagy szelektivitást mutatnak bizonyos vegyületek megkötésében. A vegyületekről szerzett szerkezetükkel, méretükkel és egyéb tulajdonságokkal kapcsolatos ismeretek alapján, illetve egyes esetekben a vérből vagy más extracelluláris testnedvekből eltávolítandó vegyületek jellemzői alapján, továbbá esetenként egyszerű tesztek alapján is alkalmas koronaéter vegyületet választhatunk vagy szintetizálhatunk abból a célból, hogy a fenti megadott vegyületekre vonatkozóan kötő képességgel rendelkező anyagot nyerjünk.
A találmány szerinti eljárással előállított készítmény alkalmas emberek vagy állatok esetében például az alábbi fertőzések kezelésére: Rhinovírus 1A, 2, 14 vagy más típusok, polio-2, Coxsackie-A21, Coccidia, influenza vagy sertésherpesz kezelésére. Ezen túlmenően a vegyületek alkalmasak ammónium ionok, továbbá elsőrendű, másodrendű és harmadrendű aminok, valamint ezekből származó vegyületek eltávolítására testnedvekből, amennyiben a természetes eltávolítás szervi megbetegedés következtében nem történik meg. A találmány szerinti készítmények továbbá alkalmasak mérgezések kezelésére annak révén, hogy megkötik és előnyösen eltávolítják az ionokat, amelyek lehetnek például az alábbi fémionok: Pb, Ag, Hg, Au, Cd, Cu, Zn, Na, K és radioaktív Cs.
A találmány szerinti eljárással előállított készítményben a koronaéter vegyüiet dextránhoz kötött. Az előnyösen alkalmazható készítmény azzal jellemezhető, hogy a poliszacharid egy 1000-120 000 molekulatömegű dextrán. Az ilyen készítmény vízben oldható és intravénás úton adagolható.
A vesék normális működése esetében a dextrán-koronaéter vegyüiet változatlan formában néhány óra múlva a testből kiürül azokkal a komponensekkel együtt, amelyeket a koronaéter vegyüiet megköt, amennyiben ezek az extracelluláris folyadékban jelen voltak.
A koronaéter-vegyület azáltal, hogy poliszacharidokhoz kötött, jelentősen veszít toxicitásából, és feltételezhetően lényeges az is, hogy a koronaéter-poliszacharid vegyüiet a test extracelluláris folyadékában marad és a szabad koronaéter vegyületekkel ellentétben nem befolyásolja az idegrendszer és szervek azon részeit, ahol különösen jelentős károkat okozhat a koronaéterek ionmegkötő készsége.
Ennek alapján megálapítható és nyilvánvaló, hogy a jelen találmányban alkalmazott poliszacharid származékok más típusúak, mint a fent idézett WO 89/01476 számú szabadalmi bejelentésben leírt citotoxikus vegyületek, mivel feltételezhetően ezek a fenti vegyületek a sejtekbe jutnak a sejtfalon keresztül az extracelluláris folyadékból, és így fejtik ki citotoxikus aktivitásukat.
A találmány szerinti eljárással előállított, intravénás úton alkalmazott készítmény, ahogy azt már említettük, poliszacharidként dextránt tartalmaz. Ez nemcsak annak a következménye, hogy korábban jelentős számú vizsgálatot végeztünk a dextrán veséken keresztüli kiürítésére, viszkozitási jellemzőire, stb. vonatkozóan, hanem amiatt is, hogy a koronaéterekkel szubsztituált vegyületek előállításának lehetőségét különösen dextrán alkalmazásával vizsgáltuk.
A találmány szerinti vízoldható készítmények felhasználhatók testen kívüli kezelésre is a véráramnak úgy, hogy egy membránt építünk be a véráram és a találmány szerinti vízoldható készítmény közé, amely membrán az alkalmazott körülmények között alkalmas arra, hogy lehetővé tegye a véráramból a káros komponensek eltávolítását anélkül, hogy a koronaéter vegyüiet a véráramba kerülne.
A véráramnak testen kívüli kezelése úgy is végrehajtható, hogy a találmány szerinti készítmény vízben oldhatatlan formáját alkalmazzuk előnyösen úgy, hogy a dextránt vízben oldhatatlanná alakítjuk keresztkötések létrehozásával és a koronaétert ehhez a dextránhoz kapcsoljuk. Az ilyen oldhatatlan készítményt a vérárammal érintkeztetjük, és így a káros komponenseket ebből kivonjuk anélkül, hogy a koronaéter vegyüiet a vérbe kerülne.
A találmány szerinti eljárással előállított készítmény előnyösen alkalmazható ha abban a szubsztituált dextrán mennyiségére számítva a koronaéter vegyüiet max. 25 tömeg% mennyiségű. Előnyös továbbá ha a (2) képletben n'+n2 jelentése 2.
Vizsgálataink szerint a (7) képletű O-karbonil-benzo-18-korona-6-csoporttal szubsztituált dextrán-vegyületek nem mutatnak semmilyen jelentős toxieitást például egereken vizsgálva. Továbbá a vegyületek vízben oldhatóak megfelelő koncentrációban úgy, hogy az ol3
HU 208 083 Β dat viszkozitása intravénás infúziós adagolás céljára is megfelelő.
Ugyancsak előnyösen alkalmazhatók a (8) képletű O-hidroxi-etil-benzo-18-korona-6-csoporttal szubsztituált dextránok is.
A koronaéterek képessége arra, hogy ionokhoz vagy nem töltött molekulákhoz kötődjenek, speciális molekulaszerkezetükből adódik. Erre vonatkozóan referenciaként megadjuk a fent idézett E. Weber által közzétett közleményeket, illetve az ott megadott referenciákat.
A koronaéterek gyűrűikbe vagy üregeikbe pontosan beillő molekulákat, nemcsak ionokat képesek megkötni, továbbá megkötnek olyan molekulákat is, amelyek egyes részletei pontosan megfelelnek a kérdéses koronaéter méreteinek, és az is lehetséges, hogy olyan szerkezetek keletkezzenek, amelyekben a koronaéter csoportok rétegenként rendeződnek el, és ezen rétegek között nagyobb molekulák tarthatók megkötve.
Annak révén, hogy a megfelelő gyűrű-méretű koronaétereket válszthatjuk ki, továbbá megfelelő szubsztitúciót vagy fúziót alkalmazhatunk azért, hogy kívánt méreteket állíthassunk elő a gyűrűk és láncok vonatkozásában ezek merevségét figyelembe véve, a szakember számára lehetséges bizonyos célok esetében igen specifikus hatású koronaéterek előállítása. így például az olyan poliszacharidok, amelyeken benzo-18-korona-6-szubsztituens található, hatásosak a polio-2 és a Coxsackie-A21 vírus inhibiálásában vagy eltávolításában, míg az olyan poliszacharidok, amelyek benzo-15korona-5-szubsztituenst tartalmaznak, alkalmasak az ammóniumion eltávolítására vagy inaktiválására.
Az a tény, hogy a jelen találmány szerinti eljárással előállított készítményben a koronaéterek egy poliszacharidra szubsztituáltak, bizonyos esetekben azt eredményezheti, hogy a koronaéterek kötési vagy abszorpciós készsége sztérikus okok miatt kis mértékben csökkent. Azonban ezt a hatáscsökkenést elkerülhetjük úgy, hogy Q távtartó csoportokat alkalmazunk, amelyek adott hosszúságúak és így a koronaéter szerkezet és a poliszacharid váz között távolságot hozunk létre.
A koronaétereket a poliszacharidokhoz szubsztitúciós eljárásokkal kapcsolhatjuk, amelyeket kémiai reakciókkal végezhetünk.
Abból a célból, hogy olyan koronaétereket nyerjünk, amelyek a poliszacharidok hidroxilcsoportjával reagálhatnak a 4'-helyzetében a benzo-18-korona-6-vegyületeknek, többek között az alábbi csoportokat vezethetjük be: COCl, -COOH, -CH2Br, -CH2C1, -CH3, -CH=CH2, (9) képletű csoport, -CO-CH3, -CH(OH)CH2Br, -CH(OH)-CH3.
Számos koronaéter vegyület kereskedelemben kapható vagy ezek a vegyületek a fent idézett szakirodalom eljárásainak megfelelően előállíthatók.
Az előnyös koronaéter vegyületek közül, amelyek a találmány szerinti készítményben alkalmazhatók, különösen előnyösek a benzo-19-korona-6-vegyületek és a benzo-15-korona-5-vegyüIetek, amelyek például alkalmasak olyan vegyületek előállítására, amelyek ammóniumion eltávolítására alkalmasak vérből, valamint a benzo-12-korona-4-vegyületek. A reaktív csoportot tartalmazó koronaéter vegyületek és a poliszacharid közötti reakciót előnyösen oldószerben hajtjuk végre, amely lehet például piridin és/vagy dimetilformamid.
A találmány szerinti eljárással előállított készítmény tartalmazhatja csak a dextrán-koronaéter tennéket, de tartalmazhatja a gyógyszerészeti gyakorlatban alkalmazott szokásos adalékokkal együtt, amelyeket injekció vagy infúzió céljára használnak.
A találmány szerinti eljárással előállított készítményt célszerűen porként hozzuk forgalomba, mely felhasználás előtt fiziológiás sóoldatban oldható vagy folyékony injektálható formává alakítható.
Az egyes esetekben alkalmazott dózis mennyiségét az orvos vagy az állatorvos határozza meg, és ez függ a betegség jellegétől és súlyosságától és a beteg állapotától, stb.
A találmány szerinti eljárást a koronaéter-dextrán vegyületek előállítására az alábbi példákon részletesen bemutatjuk. A példákban a szintézis és analízis módszerei a Forsogsanlaeg Riso, Roskilde (Dánia) eljárásának megfelelőek. A példákban megadottak a találmány oltalmi körére nem korlátozó jellegűek.
1. példa
Dextmn-O-karboiiil-benz.o-18-korona-6 vegyület előállítása
4'-klór-karbonil-benzo-18-korona-6 vegyületet állítunk elő Bourgain, Wong, Hűi és Smid, J. Am. Chem. Soc. 97:12 (1975), 3462-67 közleményének megfelelően. A kitermelés kvantitatív, a számítottnak megfelelő.
g dextránt (T40, azaz átlagosan 40 000-es molekulatömegű), amely 0,22 mól (glükóz) monomernek felel meg, szuszpendálunk 250 ml piridinben. Keverés közben és olajfürdő segítségével 65-70 °C hőmérsékletre melegítve az elegyhez 22,1 g 4'-klór-karbonilbenzo-18-korona-6 vegyületet adunk, amely megfelel 0,06 mól mennyiségnek és amelyet előzetesen 75 ml piridinben oldunk. A reakcióelegyet lehűtjük és acetonból csapadékot választunk le. A leválasztott szirupos anyagot vízben oldjuk, majd még egyszer aceton segítségével leválasztjuk. A csapadékot újra vízben oldjuk és egy napon keresztül dializáljuk. A dializált terméket liofilizáljuk. 34 g, 61% termelés terméket kapunk.
A tennéket tömegspektroszkópia, NMR spektroszkópia és HPLC analízis segítségével azonosítjuk.
A termékben található kémiailag kötött koronaéter vegyület mennyisége 17,4%, a szabad koronaéter mennyiség 0,3% (az UV-analízis alapján számítva).
Hasonló eljárással olyan terméket állítunk elő, amely körülbelül 8% mennyiségű dextránhoz csatolt koronaéter vegyületet tartalmaz.
2. példa
Dextrán-hidroxi-etil-benzo-18-korona-6 vegyület előállítása
N-bróm-acetamiddal dioxánban végzett reakció segítségével 4'-(2-bróm- l-hidroxi-etil)-benzo-18-korona-6 vegyületet állítunk elő 4'-vinil-benzi-18-korona-6 vegyületből kiindulva. A nyers termék termelése 90%.
HU 208 083 Β
Három oldatot képezünk:
I: 5 g dextránt (T20, azaz átlagos 20 000 molekulatömegű dextrán) oldunk, amely 0,03 mól monomernek (glükóz) felel meg körülbelül 10 ml vízben.
II: 3,5 g 4'-(2-bróm-l-hidroxi-etil)-19-korona-6 vegyületet, amely 0,008 mól mennyiségnek felel meg, oldunk 10 ml vízben.
111:4,3 g nátriumhidroxidot, amely 0,011 mól mennyiségnek felel meg, oldunk 10 ml vízben.
Az I oldatot 60 °C hőmérsékletre melegítjük, majd a II oldat egyharmadát és a ΙΠ oldat egyharmadát adjuk hozzá. Az elegyet 15 percen át 60 °C hőmérsékleten melegítjük, majd ezt követően mindenegyes eredeti II és ΙΠ oldat újabb egyharmadát adagoljuk hozzá. További 15 perc keverés után a két oldat maradék egyharmad mennyiségét is az elegyhez adagoljuk. A hőmérsékletet 70 °C hőmérsékletre emeljük, majd a reakcióelegyet további körülbelül 2 órán át keverjük. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre hűtjük, majd aceton segítségével csapadékot választunk le. A leválasztott szirupot vízben oldjuk, majd ismét csapadékot választunk le aceton segítségével. A szirupot újra vízben oldjuk, majd az oldatot 2 n sósavval 4,5 pH értékre savanyítjuk és ezután alkohol alkalmazásával csapadékot választunk le. A leválasztott terméket vízben újra oldjuk, majd 24 órán át dializáljuk és végül liofilizáljuk.
3,5 g terméket nyerünk, amely 45% elvi termelés. A terméket HPLC analízis segítségével vizsgáljuk. A dextránhoz kapcsolt koronaéter mennyisége 1,45%, a szabad koronaéter vegyület mennyiség 0,12%. Tisztaság: 96,5%.
Találmány szerinti készítmény tesztvizsgálata Toxicitás és ellminációs készség
T40-dextrán-O-karbonil-benzo-18-korona-6 vegyületet állítunk elő az 1. példa szerinti eljárással és így különböző szubsztituáltságú termékeket nyerünk. Az (A) termékben a szubsztituáltság foka 8%. A termékben a szabad koronaéter vegyület tartalmat nem analizáltuk. A másik (B) termék szubsztituáltsági foka 15% és szabad, kémiailag nem kötött koronaéter tartalma 0,3%.
Az (A) terméket 1% koncentrációban intravénásán egerekbe adagoljuk, amely állatok 0,4 ml megfelelő 32x10® g koronaéter dózist is kaptak. Az egerek nem mutatnak semmilyen betegség jelet. A vizeletet gyűjtjük és UV spektroszkópiai analízisnek vetjük alá, amely azt mutatja, hogy a dextrán-O-karbonil-benzo18-koronaéter-6 vegyület lényegében teljesen eltávozik 3-5 órán belül.
A (B) terméket hasonlóan vizsgáljuk, azonban ebben a vizsgálatban 10% koncentrációt alkalmazunk. A dózis ebben az esetben 0,4 ml; megfelelő 6,0x10® g koronaéter vegyület. A dózisban a szabad koronaéter vegyület mennyisége 1,2x10® g. Számos állat ebben a tesztvizsgálatban levertnek mutatkozott és körülbelül 30 percen át szőrét borzolta, de ezután nem mutatott semmilyen szimptómát.
Két sorozat összehasonlító vizsgálatot végzünk a koronaéter monomer alkalmazásával.
Az első tesztvizsgálatban 0,8% koncentrációjú,
0,4 ml dózisú benzo-18-koronaéter-6 vegyületet adagolunk vizes oldatban állatonként, amely megfelel 32x10® g koronaéternek. Az állatok az injekció beadagolása után közvetlenül elpusztulnak.
A másik összehasonlító tesztvizsgálatban 0,08% koncentrációjú benzo-18-koronaéter-6 vegyületet adagolunk, ez ugyancsak 0,4 ml dózisban adagolt és így megfelel 3,2x10® g koronaéter mennyiségnek. Ebben az esetben igen erős görcsök mutatkoznak, amelyek 15 percen át tartanak, azonban az állatok a kezelést túlélik.
A (B) termék adagolása során tapasztalt jelenség valószínűleg annak a következménye, hogy a termék szabad koronaéter tartalmú és ez elkerülhető úgy, hogy a terméket alaposabban tisztítjuk.
Tiszta vegyületként 3,2x10® g benzo-18-koronaéter-6 adagolásával jelentősen súlyosabb reakciót válthatunk ki, mint amelyet a fent leírt (B) tesztvizsgálati vegyülettel nyertünk, amely esetben az azonos vegyület nem kötött mennyisége, 1,2x10® g volt és ez szennyezésként szerepelt. Ez alátámasztja azt a feltevést, hogy a (B) termékkel tapasztalt reakció nem a dextránhoz kötött koronaéter következménye, hanem a kémiailag nem kötött szennyezésből ered.
Vírusfertőzés ellenes hatás
A Statens veterinaere Institut fór Virusforskining, Lindholm, Denmark által végzett tesztvizsgálat.
1. tesztvizsgálat
A tesztvizsgálatot láb és száj betegséget okozó A típusú vírusok esetében végezték fiatal egereken (3-4 naposak). A vírusokból két azonos hígítást képeztek, amelyek az 1 és 2 hígítási sorozat, és amelyekben a hígítások 10®—10’8 közöttiek. Mielőtt az egerekben inokulálták volna, minden egyes hígítási mintát egyenlő térfogatban az alábbi oldatok egyikével elegyítették:
1, foszfát puffer (vírus kontroll) - 1 széria
2. az 1. példa szerinti eljárással előállított dextrán-koronaéter vegyület 5%-os vizes oldata, amely 17,4% kötött koronaétert tartalmaz - 2 széria
Minden egyes elegyet intraperitoneális módon adagoltunk 8 fiatal egérbe. A dózis 0,2 ml/egér volt. A tesztvizsgálati eljárást kétszer megismételjük úgy, hogy két különféle vírus preparátumot alkalmazunk, amelyek (l/486)xlO® és (l/63)xl0® preparátumok, amik megfelelnek 1 és 8 egér-patogén egységnek (A sorozat és B sorozat; sorrendben).
A tesztvizsgálatban az alábbi eredményeket nyerjük (vírus titerek):
A sorozat B sorozat
1. vírus kontroll 7,5 6,5
2. vírus+dextránkoronaéter 7,0 5,0
A titert, amely a fertőző vírus koncentrációját fejezi ki az elegyben, negatív logaritmusként adjuk meg, amely azon vírus hígítás negatív logaritmusa, ami az inokulált egerekben 50%-os mortalitást eredményez. Az eljárás megbízhatósága általában körülbelül ±0,5.
HU 208 083 Β
Ez azt jelenti, hogy a titerek közötti különbség 1-nél nagyobb kell legyen ahhoz, hogy az eltérést jelentősnek értékeljük. Ennélfogva az A sorozatban az (1) víruskontroll és a (3) vírus + dextrán-koronaéter között az eltérés nem jelentős. Ezzel szemben a B sorozatban azt tapasztaljuk, hogy a dextrán-koronaéter vegyület lecsökkenti a vírus aktivitást.
2. tesztvizsgálat tengerimalacot inokulálunk párhuzamosan láb és száj betegséget okozó A típusú holland vírussal. Az inokulálást úgy végezzük, hogy a vírus szuszpenziót bőr felhámba adott injekcióval vezetjük be a talpba. Minden egyes tengerimalac körülbelül 500 fertőző (tengerimalac) egységet kapott.
Az inokulált tengerimalacokat két 20 állatot tartalmazó csoportra osztjuk. Három egymást követő napon az inokulálás napján kezdve az egyik csoportnak fiziológiás sóoldatot adagolunk, míg a másik csoportnak 5 tömeg% dextrán-koronaéter vegyület-oldatot adunk (amelyet az 1. példa szerinti eljárással állítunk elő; 17,4 tömeg% koronaéter).
Minden egyes napon minden állatnak két szubkután injekciót adagolunk, amely injekciók térfogata egyenként 1 ml.
Az állatokat az inokulálás után a harmadik, negyedik és ötödik napon ellenőrizzük és a betegség kifejlődését értékeljük a három talpon kialakuló hólyag alapján, amely három talp nem kapott injekciót. A vírusellenes hatást a hólyagszám csökkentésében kifejtett hatással értékeljük.
Az alábbi eredményeket nyerjük:
A maximális szám százalékában kifejezett hólyagok száma:
3. nap 4. nap 5. nap
fiziológiás sóoldat 25 66 100
dextrán-koro- naéter 15 43 86
A fenti eredményekből kitűnik, hogy a hólyagok számában csökkenést nyerünk, amennyiben dextránkoronaéter vegyületet injektálunk az állatokba. A dextrán-koronaéter vegyület vesén keresztül történő kiürítési sebességének ismeretében valószínűbb, hogy hatásos vírusellenes hatást tudunk kifejteni, amennyiben a kezelést a harmadik napon túl is folytatjuk.
3. tesztvizsgálat tengerimalacot párhuzamosan inokulálunk láb és száj betegség C típusú Turup vírussal. Az inokulálást úgy végezzük, hogy a vírus szuszpenziót felhámon keresztül a talpba injektáljuk. Valamennyi tengerimalac körülbelül 500 fertőző (tengerimalac) egységet kapott.
Az inokulált tengerimalacokat 20 főből álló két csoportra osztjuk. Az egyik csoport fiziológiás sóoldat kezelést kapott, míg a másik csoport 3,75.tömeg% oldat dextrán-koronaéter fiziológiás injekcióban részesült. Az 1. példa szerinti eljárással előállított dextránkoronaéter vegyület 17,4 tömeg% kötött koronaétert tartalmazott.
A kezelést az alábbi eljárás szerint hajtjuk végre:
Az inokulálás napján, valamint az inokulálás után első, második és harmadik napon minden egyes tengerimalacnak 0,5 ml folyékony szívbeni és 2x2 ml szubkután injekciót adagolunk. Az injekciókat 9 órakor, délben és délután 3 órakor adagoljuk.
Az állatokat naponta ellenőrizzük a betegség kialakulásának vonatkozásában és a nem injekcióval kezelt talpakon keletkezett hólyagok számát számláljuk.
Az alábbi eredményeket nyerjük:
Az inokulálás utáni különböző napokon számlált hólyagok száma a maximális számolt hólyag százalékában az alábbi:
3. nap 5. nap 6. nap
fiziológiás sóoldat 0 8 100
dextrán-koronaéter (3,75%) 0 2 90
A fenti eredmények azt mutatják, hogy a dextránkoronaéter vegyület vírusellenes hatást fejt ki mindhárom nap során, amely időtartam alatt a betegség kifejlődését értékeltük.
A fenti tesztvizsgálat alapján továbbá megállapíthatjuk, hogy valószínűleg amennyiben a kezelést több mint az első három napon át folytatnánk, jelentősen alacsonyabb számú hólyag kifejlődését tapasztalnánk, sőt lehetségesen a teljes gyógyulást tapasztalnánk az 5. vagy 6. napon azon állatok esetében, amelyek dextránkoronaéter vegyülettel kezeltek.
Komplexképző képesség
A: Diffúziós tesztvizsgálatban az 1. példa szerinti eljárással előállított dextrán-benzo-18-koronaéter-6terméket tartalmazó membránt alkalmazunk, amely esetében vizes alkohol tartalmú oldatban a membrán egyik oldalán a fenti anyag van jelen, és így megállapítottuk, hogy a fém komplexáló készsége az anyagnak, amely például nátriumionokra vonatkozik és amely jellemző a szabad koronaéter vegyületre, megmarad a koronaéter termékben is, amelyet dextránra szubsztituáltunk.
B: Forsogsanlaeg Riso, Roskilde, Dánia által végzett tesztvizsgálat
A fenti 2. példa eljárása szerint előállított 2,5 g dextrán-hidroxi-etil-benzo-18-koronaéter-6 vegyületet 50 ml vizes céziumtartalmú oldatban oldjuk, amely 10 μg Cs134/ml tartalmú.
A kapott oldatot dialízis tömlőbe helyezzük, amelynek pórus átmérője körülbelül 1,5 nm. A tömlőt osztott üvegedénybe helyezzük, amely 150 ml vizes oldatot tartalmaz, az oldat 10 μg Cs134/ml tartalmú és az üvegedényt mágneses keverővei látjuk el.
A dialízis tömlőbe 2 ml oldatot adunk, amely 10 μg Csl34/ml + nyomnyi Cs137 (körülbelül 20 000 Bq) oldatot adunk. 12 óra elteltével a dialízis tömlő belsejében található folyadékból valamint az üvegen kívül találha6
HU 208 083 Β tó folyadékból külön-külön mintákat veszünk, majd a minták radioaktivitás tartalmát gamma számlálóval 0,66 MeV érték mellett meghatározzuk. így meghatározzuk a dialízis tömlőn belüli cézium és a dialízis tömlőn kívüli cézium koncentrációt. A meghatározások alapján a két folyadékban található cézium mennyiségét számítjuk. Az eredményeket az alábbi táblázatban ismertetjük:
Cs koncentráció a tömlőn belül / Cs koncentráció a folyadékban
Cs koncentráció a tömlőn kívül a tömlőn belül a tömlőn kívül
Kezdetben 1 520 pg 1500 pg
12 óra múlva 1,2 658 pg 1362 pg
A fenti eredmények azt mutatják, hogy a vizsgált dextrán-koronaéter vegyűlet jelentős céziumion megkötő képességű és befogóképességű. Nem ellenőriztük, hogy 12 óra múlva egyensúlyi állapotot értünk-e el vagy még további meggyőző ionmegkötés eredményt tapasztalhatnánk abban az esetben, ha a tesztvizsgálatot 12 óránál hosszabb ideig végezhetnénk.
C.F7 eltávolítása vérből
A tesztvizsgálatot a Forsgspstation Risp, Department of Healt, Roskilde, Dánia intézetben hajtottuk végre abból a célból, hogy megvizsgáljuk a találmány szerinti dextrán-koronaéter vegyületek képességét az egér véréből történő radioaktív cézium Cs137 ion eltávolítás szempontjából.
Egyenként 5-5 egér alkalmazásával 3 tesztvizsgálatot végzünk.
Injekciós folyadék alapoldatként vagy készítmény alapoldatként vizes 0,9%-os nátriumklorid oldatot alkalmazunk, amely 3000 Bq/ml mennyiségnek megfelelő Cs137 iont tartalmaz.
Az egyes tesztvizsgálatokban az egereket ketrecben tartottuk, amely ketrec alja hálóval ellátott volt és a ketrec aljából az egér vizeletét csővezeték segítségével gyűjtöttük. Minden egyes vizeletgyűjtés után a ketrec alját vízzel öblítettük és a gyűjtött vizeletet valamint az öblítővizet együtt gyűjtöttük, majd vízzel hígítottuk összesen 20 ml térfogatra, mielőtt radioaktivitását Geiger számláló segítségével meghatároztuk.
1. tesztvizsgálat
A vizsgálat során minden egyes egérnek 0,1 ml alapoldat injekciót adunk, amelyek így 300 Bq Cs137 anyagot kaptak. Az injektálás ideje, amint az alábbiakban leírjuk, ίθ 11:30 volt.
óra elteltével minden egyes egérnek 0,4 ml 6 tömeg/tf%-os 1. példa szerinti eljárással előállított dextrán-O-karbonil-benzi-18-koronaéter-6 termék oldatot injektálunk, amely megfelel egerenként 24 mg ilyen anyag adagolásának.
A vizelet gyűjtését és az ezt követő radioaktivitás meghatározását a t0 idő után 1 óra 24 perccel, amely 1,35 órának felel meg, végezzük és az alábbi I. táblázatban megadott időpontokban hajtjuk végre.
t0 időpont után 47,81 óra elteltével újabb 0,5 ml 6%-os dextrán-koronaéter oldatot adagolunk minden egyes egérnek, és a vizeletgyűjtést valamint radioaktivitás meghatározást folytatjuk.
Az eredményeket az I. táblázatban közöljük.
I. táblázat
Idő/dátum t0 után eltelt idő (óra) Radioaktivitás (számlált érték) vizelet + mosóvíz együttesében
12:54 19.6.90 1.35 6 978
16:20 19.6.90 4.83 . 3 684
20:23 19.6.90 8.88 8 280
7:34 20.6.90 20.07 17 001
8:25 21.6.90 44.92 17 368
11:17 21.6.90 47.78 2213
Az újabb dextrán-koronaéter injektálás után, amely esetben az új 11:34,21.6.90.
15:58 21.6.90 4.63 3533
20:00 21.6.90 8.67 2937
9:37 22.6.90. 22.28 6391
A fenti eredményeket a radioaktivitás akkumulát értékeiben kifejezve az alábbi 4. táblázatban jelezzük és az ábrán bemutatjuk.
2. tesztvizsgálat
A tesztvizsgálatban az injektált oldat 2 ml fenti Cs137 tartalmú oldat és 8 ml 1. tesztvizsgálatban alkalmazott dextrán-koronaéter oldat keveréke.
Minden egyes egérnek 0,5 ml keveréket injektálunk és így az állatok 300 Bq Cs137 és 24 mg dextrán-koronaéter anyagot kaptak. A vizelet gyűjtését valamint további újabb koronaéter injektálást (0,5 ml 6%-os oldat) végzünk, az 1. tesztvizsgálati eljárásnak megfelelően, és így a II. táblázatban leírt adatokat nyerjük.
11. táblázat
Idő/dátum t0 után eltelt idő (óra) Radioaktivitás (számlált érték) vizelet + mosóvíz együttesében
12:56 19.6.90 0.87 4 498
16:25 19.6.90 4.62 11 634
20:27 19.6.90 8.65 8 566
7:37 20.6.90 19.82 16 805
8:27 21.6.90 44.65 12 901
11:20 21.6.90 47.53 2 728
HU 208 083 Β
A további dextrán-koronaéter injektálás után az új t<) időpont 11:40,21.6.90.
16:00 21.6.90 4.33 3659
20:04 21.6.90 8.40 3222
9:40 22.6.90 22.08 4966
3. tesztvizsgálat
Az alábbi összehasonlító tesztvizsgálatban az injektált oldat 2 ml fenti alapoldat, amely 3000 Bq/ml Cs137 anyagot tartalmaz és 8 ml vizes 0,9 tömeg% nátriumklorid oldat elegye volt. Minden egyes egérnek 0,2 ml oldatot injektálunk, és így ezek 300 Bq Cs137 anyagot kaptak.
A vizelet gyűjtését az alábbi táblázatban leírtak szerint végezzük:
III. táblázat t0= 12:00, 19.6.90
Idő/dátum t0 után eltelt idő (óra) Radioaktivitás (számlált értek) vizelet + mosóvíz együttesében
13:18 19.6.90 1.30 11 355
16:29 19.6.90 4.48 3612
20:32 19.6.90 8.53 2 542
7:40 20.6.90 19.66 17414
8:30 21.6.90 44.50 14 592
16:03 21.6.90 52.05 3 324
20:06 21.6.90 56.10 2 522
8:42 22.6.90 69.70 3 455
A IV. táblázatban az alábbiakban összefoglaljuk akkumulált módon az 1., 2. és 3. tesztvizsgálatok eredményeit.
IV. táblázat
1. tesztvizsgálat 2. tesztvizsgálat 3. tesztvizsgálat
Idő, számlált Összes érték Idő, számlált Összes érték Idő, számlált Összes érték
1.35 6978 0.87 4498 1.30 11355
4.83 10662 4.62 16132 4.48 14967
8.88 . 18942 8.65 24698 8.53 17509
20.07 35943 19.82 41503 19.66 34923
44.92 53311 44.65 54411 44.50 49515
47.78 55525 47.53 57139 52.05 52839
52.41 59057 51.86 60798 56.10 55361
56.45 61994 55.93 64020 69.70 58816
67.06 68385 69.53 68986
A IV. táblázat összesített eredményeit az 1. ábrán mutatjuk be, amely az idő függvényében az összesített radioaktivitás számlált értékeit mutatja.
Óvatos értékelés és az 1., 2. valamint 3. tesztvizsgálatok eredményeinek összehasonlítása alapján megállapítható, hogy az első injekció után következő 5-8 óra folyamán az elimináció sebessége jelentősen megnövekszik a dextrán-koronaéter vegyület adagolásának következtében.
Ugyancsak megállapítható, hogy a 2. injekció után kissé megnövelt kiválasztást tapasztalunk körülbelül 8 órán belül, majd ezt követően a kiválasztás sebessége a 3. tesztvizsgálat szintjére csökken.
A tesztvizsgálat eredményeiből továbbá kitűnik, hogy a 70 óra alatt, amely időtartamig körülbelül a vizsgálatokat végeztük, az 1. és 2. tesztvizsgálatú egerekben, amelyek dextrán koronaéter injekcióban részesültek, körülbelül 17%-kal nagyobb mennyiségű radioaktív Cs kiválasztás történik, mint a 3. tesztvizsgálat szerinti összehasonlító egerekben.

Claims (8)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás káros anyagoknak, beleértve a vírusokat is, emberi vagy állati vérből vagy más extracelluláris folyadékból történő eltávolítására vagy inaktiválására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy a hatóanyagot, mely dextránhoz kötött (2) általános képletű koronaéter vegyület, ahol a képletben
    Q jelentése 1-20 szénatomos szénhidrogén lánc,
    A1 és A2 jelentése (3), (4) vagy (5) képletű csoport, n1 és n2 jelentése 1-20 közötti egész szám, y jelentése -0-, -S-, -N(H)- vagy —P(H)csoport, megfelelő vivőanyaggal és adott esetben adalékanyagokkal elegyítve gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás vízoldható, előnyösen intravénás adagolásra alkalmas készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy olyan hatóanyagot alkalmazunk, amelyben a dextrán 1000-120 000, előnyösen 40 000-110 000 molekulatömegű.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy keresztkötésekkel vízoldhatatlan formává alakított dextránt tartalmazó hatóanyagot alkalmazunk.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan hatóanyagot alkalmazunk, amelyben a koronaéterrel szubsztituált dextrán tömegére számítva 25 tömeg% mennyiségű a koronaéter vegyület.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként (7) képletű O-karbonil-benzo-18-koronaéter-6-csoporttal szubsztituált dextránt alkalmazunk.
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként (8) képletű O-hidroxi-etil-benzo-18-koronaéter-6-csoporttal szubsztituált dextránt alkalmazunk.
  7. 7. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy piridin/dimetilformamid oldószerben dextrán és 4'-klór-karbonil-benzo-18-koronaéter-6-vegyület reakciójával előállított hatóanyagot alkalmazunk.
  8. 8. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vizes bázisos közegben dextrán és 4'-(2-bróml-hidroxi-etil)-18-koronaéter-6-vegyület reakciójával előállított hatóanyagot alkalmazunk.
HU906647A 1989-06-14 1990-06-14 Process for producing composition suitable for inactivating or removing deleterious materials from blood or other extracellular liquid HU208083B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK291389A DK169306B1 (da) 1989-06-14 1989-06-14 Middel til fjernelse eller inaktivering af uønskede komponenter i blod eller andre ekstracellulære legemsvæsker samt fremgangsmåde til fremstilling af dextran-O-carbonyl-benzo-18-crown-6 og af dextran-hydroxyethylbenzo-18-crown-6

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU906647D0 HU906647D0 (en) 1992-02-28
HUT59011A HUT59011A (en) 1992-04-28
HU208083B true HU208083B (en) 1993-08-30

Family

ID=8117054

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU906647A HU208083B (en) 1989-06-14 1990-06-14 Process for producing composition suitable for inactivating or removing deleterious materials from blood or other extracellular liquid

Country Status (21)

Country Link
US (2) US5314878A (hu)
EP (1) EP0481013B1 (hu)
JP (1) JPH04506211A (hu)
KR (1) KR920702624A (hu)
AT (1) ATE111739T1 (hu)
AU (1) AU635464B2 (hu)
BG (1) BG60089A3 (hu)
CA (1) CA2058442A1 (hu)
DE (1) DE69012818T2 (hu)
DK (2) DK169306B1 (hu)
ES (1) ES2062571T3 (hu)
FI (1) FI95139C (hu)
HU (1) HU208083B (hu)
IE (1) IE62998B1 (hu)
IL (1) IL94712A (hu)
MD (1) MD950010A (hu)
NO (1) NO914854L (hu)
NZ (1) NZ234034A (hu)
OA (1) OA09646A (hu)
WO (1) WO1990015610A1 (hu)
ZA (1) ZA904546B (hu)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU623901B2 (en) * 1988-01-26 1992-05-28 Nycomed As Paramagnetic compounds comprising chelating moiety, linker group macro molecule and paramagnetic metal
US6335160B1 (en) 1995-02-17 2002-01-01 Maxygen, Inc. Methods and compositions for polypeptide engineering
DE102008060549A1 (de) 2008-12-04 2010-06-10 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Wirkstoff-Peptid-Konstrukt zur extrazellulären Anreicherung
GB201506663D0 (en) * 2015-04-20 2015-06-03 Komplexis S R L In-vivo delivery of ion chelating ligands for therapy

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4113739A (en) * 1974-01-28 1978-09-12 The Dow Chemical Company Process for preparation of (poly)cyclic polyethers
US3965116A (en) * 1974-09-12 1976-06-22 The Regents Of The University Of California Multioxymacrocycles
US3997565A (en) * 1975-09-19 1976-12-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company Acylcrownether oximes and oxime ethers
US4024158A (en) * 1975-09-19 1977-05-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Aroylcrownethers
US4474963A (en) * 1980-11-03 1984-10-02 W. R. Grace & Co. Crown ether compositions with sidearms affording enhanced cation binding
US4562272A (en) * 1981-03-27 1985-12-31 Union Carbide Corporation Process for preparing cyclic polyethers
HU187360B (en) * 1981-09-22 1985-12-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Komplex-forming cyclodextrine-crown-ether derivatives and process for producing them
US4436923A (en) * 1982-06-07 1984-03-13 The President And Trustees Of The Miami University Trifluoromethyl-substituted chromogenic crown ethers and methods of using same
JPS595180A (ja) * 1982-06-30 1984-01-12 Toshiyuki Shono ビスクラウンエ−テル誘導体とその用途
US4631119A (en) * 1983-11-23 1986-12-23 W. R. Grace & Co. Reversible, electrochemically-switched lariat ethers
US4767614A (en) * 1984-02-29 1988-08-30 Wm. Wrigley Jr. Company Modified dextrans in a dental health method deactivating glucosyltransferase enzymes
US4570004A (en) * 1984-04-06 1986-02-11 The Board Of Regents, University Of Texas System Perfluoro crown ethers
US4794000A (en) * 1987-01-08 1988-12-27 Synthetic Blood Corporation Coacervate-based oral delivery system for medically useful compositions
US4777270A (en) * 1985-01-25 1988-10-11 Pfizer Inc. Macrocyclic polyether carboxylic acids
GB8613688D0 (en) * 1986-06-05 1986-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
IT1214708B (it) * 1986-08-01 1990-01-18 Medosan Ind Biochimi Impiego del dietilaminoetil-destrano (deae-d) come farmaco antidiabetico (diabete tipo i-ii-iii) e regolatore del metabolismo glucidico
GB8702569D0 (en) * 1987-02-05 1987-03-11 Nat Res Dev Moiety for selective separation
EP0285357A3 (en) * 1987-03-31 1989-10-25 Kabushiki Kaisha Ueno Seiyaku Oyo Kenkyujo Control of retroviruses
GB8719042D0 (en) * 1987-08-12 1987-09-16 Parker D Conjugate compounds
US5077198A (en) * 1988-04-14 1991-12-31 Eastman Kodak Company Diagnostic kit and method for rapid detection of antibodies
US5089479A (en) * 1988-11-28 1992-02-18 Krivan Howard C Adhesion of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma hominus to sulfatide
US5008116A (en) * 1988-11-14 1991-04-16 Frederick Cahn Immunostimulatory microsphere

Also Published As

Publication number Publication date
HU906647D0 (en) 1992-02-28
IL94712A0 (en) 1991-04-15
FI95139C (fi) 1995-12-27
DK0481013T3 (da) 1995-04-10
BG60089A3 (en) 1993-10-15
DK291389A (da) 1990-12-15
DK291389D0 (da) 1989-06-14
IL94712A (en) 1994-11-28
FI915888A0 (fi) 1991-12-13
US5314878A (en) 1994-05-24
DE69012818D1 (de) 1994-10-27
NO914854D0 (no) 1991-12-10
DE69012818T2 (de) 1995-03-30
AU5940190A (en) 1991-01-08
IE902131L (en) 1990-12-14
ES2062571T3 (es) 1994-12-16
EP0481013A1 (en) 1992-04-22
MD950010A (ro) 1996-05-31
IE62998B1 (en) 1995-03-08
WO1990015610A1 (en) 1990-12-27
OA09646A (en) 1993-04-30
KR920702624A (ko) 1992-10-06
NO914854L (no) 1991-12-10
HUT59011A (en) 1992-04-28
US5514668A (en) 1996-05-07
CA2058442A1 (en) 1990-12-15
EP0481013B1 (en) 1994-09-21
ZA904546B (en) 1991-04-24
AU635464B2 (en) 1993-03-18
ATE111739T1 (de) 1994-10-15
IE902131A1 (en) 1991-01-02
DK169306B1 (da) 1994-10-10
NZ234034A (en) 1991-11-26
FI95139B (fi) 1995-09-15
JPH04506211A (ja) 1992-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4877778A (en) Method of enhancing lipophile transport using cyclodextrin derivatives
EP0600347B1 (de) Verfahren zur selektiven Elimination von anorganischem Phosphat aus Flüssigkeiten mittels mit polynuklearen Metalloxidhydroxiden modifizierten Adsorptionsmaterialien
RU2099354C1 (ru) Очищенное производное циклодекстрина, клатратный комплекс очищенного производного циклодекстрина с лекарственным средством, фармацевтическая композиция
JP3471363B2 (ja) 鉄−デキストラン製剤
EP0304183A1 (en) Stabilization of deferoxamine to chelate free ions in physiological fluid
EP0019403B1 (en) Hydroxyalkyl-starch drug carrier
US7208479B2 (en) Peritoneal dialysis solution containing modified icodextrins
Enriquez et al. Conjugation of adenine arabinoside 5'-monophosphate to arabinogalactan: synthesis, characterization, and antiviral activity
RU2118531C1 (ru) Фармацевтическая композиция для перитонеального диализа
HU208083B (en) Process for producing composition suitable for inactivating or removing deleterious materials from blood or other extracellular liquid
JP4366081B2 (ja) 高度に精製されたアンチエンドトキシン化合物
US5258175A (en) Treatment of poisoning and compositions for use therein
FI100534B (fi) Menetelmä valmistaa farmaseuttisissa seoksissa käytettävää dekstriinij ohdannaista
JPS6130620B2 (hu)
US20070148090A1 (en) Per (3,6-anhydro) cyclodextrin derivatives, preparation thereof and use thereof for transporting metal elements to biological targets or for decontaminating biological targets of fluids
JPS59116221A (ja) 白金またはパラジウム錯体
JPH0812597A (ja) 局所投与放射線治療剤
Rosati et al. Pharmacologic properties of a new oral contrast medium for cholecystography
JPH0364153B2 (hu)

Legal Events

Date Code Title Description
HPC4 Succession in title of patentee

Owner name: A/S AF 18. JUNI 1990, DK

HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee