HU203919B - Diagnostic product for testing content of renal stones - Google Patents
Diagnostic product for testing content of renal stones Download PDFInfo
- Publication number
- HU203919B HU203919B HU287689A HU287689A HU203919B HU 203919 B HU203919 B HU 203919B HU 287689 A HU287689 A HU 287689A HU 287689 A HU287689 A HU 287689A HU 203919 B HU203919 B HU 203919B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- diagnostic
- diagnostic composition
- mercury
- stones
- composition
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01G—COMPOUNDS CONTAINING METALS NOT COVERED BY SUBCLASSES C01D OR C01F
- C01G13/00—Compounds of mercury
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5308—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for analytes not provided for elsewhere, e.g. nucleic acids, uric acid, worms, mites
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
A találmány vesekövek összetételének vizsgálatára alkalmas, új diagnosztikai készítményre vonatkozik. A találmány szerinti diagnosztikai készítmény a vesekőalkotók közül a 2,8-dihidroxi-adenin, az L-cisztin, a tercier kalcium-foszfátok, a kalcium-oxalát-mono- és -dihidrát (whewellit, weddelit) és a stnivit kimutatására alkalmas; a készítmény alkalmazásakor a felsorolt kőalkotók egymás mellett is jól megkülönböztethetően és diagnosztikailag értékelhetően kimutathatók. A találmány szerinti készítmény legfontosabb előnye, hogy lehetővé teszi a 2,8-dihidroxi-adenin egyszerű és megbízható kimutatását más kőalkotók, köztük a 2,8-dihidroxi-adenin kimutatását egyébként nagymértékben zavaró húgysav mellett is.
Az adenin-foszforibozil-transzferáz (APRT) enzim veleszületett, örökölhető hiánya miatt az adenin - adenilsav - inozin - húgysav folyamat első lépése blokkolt, így az élő szervezetben az adenin nem tud adenozin-5-foszfáttá alakulni. A felgyülemlő adeninből xantin-oxidáz enzim hatására 8-hidroxi-adeninen keresztül 2,8-dihidroxi-adenin (DHA) képződik, ami igen roszszul oldódó vegyület A DHA jelenlétére mintegy 15 éve figyeltek fel a kutatók (Cartier P., Hamet M. és Hamburger J.: Compt Rend de Acad. Sci. Francé 279, 883 [1974]; Written F. R. és munkatársai: J. Urol. 130, 938 [1983]).
A 2,8-dihidroxi-adenin a húgyutakban kikristályosodva már kisgyermekkorban köveket alkothat, de homokürítós szinte a születéstől kezdve lehetséges, aminek súlyos következményei lehetnek (pl. veseelégtelenség). A betegség kezelése a biztos diagnózis alapján (pL megbízható kőanalízis után) lehetséges: a xantinoxidáz bénítására a betegek allopurinolt kapnak és purinszegény diétát tartanak. így a betegség prognózisa jóKevés biztos esetet ismerünk; a betegség becsült gyakorisága 1:200 000. A tényleges gyakoriság azonban ennél jóval nagyobb, ugyanis a 2,6-dihidroxi-adenin kőalkotó felismerését megnehezíti az a tény, hogy kémiaiz reakciói nagyon hasonlítanak a búgysavéihoz, és sem a húgysav, sem a DHA nem ad röntgenámyékot A DHA éppúgy murexidpozitív, mint a húgysav, és a foszfor-molibdáttal végzett húgysav-meghatározáskor a DHA is reagál. Szakirodalmi adatok szerint (Stephens A. D.: Inherited metabolic stone disease Whitfield Η. N. és Hendry W. F. [szerk.]: Textbook of Genito-Urinary Surgery 628. oldal (Churcil Livingstone, Edinburgh, 1985); Simmonds H. A. és munkatársai: 2,8-Dihydroxy-adeninuria or when is a Uric Acid Stone nőt a Uric Acid Stone - Smith L. H„ Robertson W. G., Finlayson B. [szerk.]: Urolithiasis 125. oldal [Plenum Press, New York, 1981]) a 2,8-dihidroxi-adenin kövek a húgysavkövektől a gyakorlatban alkalmazott módszerekkel, így kolorimetriás módszerekkel, termogravimetriás analízissel vagy murexid teszttel nem különböztethetők meg megbízhatóan. A biztos azonosítás csak infravörös vagy tömegspektrofotometriás analízissel biztosítható, ezek a módszerek azonban nem mindig hozzáférhetőek. A legújabb irodalomban (Eur. Urol. 14,493 [1988]) Jung a nagynyomá2 sú folyadékkromatográfiát javasolja a DHA-kő analízisére, de ez is költséges és bonyolult módszer.
A jelenleg forgalomban lévő, vesekövek elemzésére alkalmas diagnosztikai készítmények közül csak a Harzalith B reagens alkalmas a 2,8-dihidroxi-adenin kimutatására. Ez a reagens vizes oldatban kálium-hidroxidot, kálium-bromidot és higany(II)-jodidot (nem diszszociáló komplex) tartalmaz. A Harzalith B reagenssel reagáló kőalkotók közül a húgysav barna foltot ad, amiben precipitátum található lényegében egyenletes eloszlásban, míg a 2,8-dihidroxi-adenin olyan barna foltot képez, aminek a közepén dúsul fel a precipitátum. Miqthogy a két mikroszkópos kép nagyon hasonló, a húgysav és a 2,8-dihidroxi-adenin biztonságos megkülönböztetéséhez igen nagy gyakorlat szükséges. Ha a húgysav nagy mennyiségben van jelen, vagy a minta szerves szennyezést (pl. vért) is tartalmaz, a húgysav és a 2,8-dihidroxi-adenin mikroszkópos képe lényegében nem különböztethető meg egymástól.
A találmány olyan diagnosztikai készítményre vonatkozik, amellyel több vesekőalkotó - azaz a 2,8-dihidroxi-adenin, az L-cisztin, a tercier kalcium-foszfátok, a kalcium-oxalát-mono- és -dihidrát és a struvit egymás mellett is jól megkülönböztethetően és diagnosztikailag értékelhetően kimutathatók, és amely húgysav jelenlétében is lehetővé teszi a 2,8-dihidroxiadenin megbízható kimutatását
A találmány szerinti diagnosztikai készítmény higanyvegyületet és olyan erős sav vizes oldatát tartalmazza, amelyben a higanyvegyület Hg2+ vagy Hg+ ionokra disszociálva oldódik, adott esetben segédanyagokkal együtt.
A találmány szerinti diagnosztikai készítmény erősen savas közegében a 2,8-dihidroxi-adenin feloldódik, de a jelen lévő Hg2+ vagy Hg* ionokkal kicsapható. A húgysav a találmány szerinti diagnosztikai készítménnyel nem ad mikroszkópos vizsgálattal érzékeltethető reakciót. Ugyancsak nem reagál a nátrium- és ammónium-hidrogén-urát és a xantin (az utóbbi a szükségesnél tízszer nagyobb tömegű minta esetén enyhén, de nem zavaró módon reagálhat). A találmány szerinti diagnosztikai készítménnyel az L-cisztin, a tercier kalcium-foszfátok, a kalcium-oxalát-mono- és -dihidrát és a struvit is reagál a 2,8-dihidroxi-adeninen kívül; a felsorolt kőalkotók mindegyike jellegzetes, egymástól eltérő és könnyen megkülönböztethető mikroszkópos képet ad.
A találmány szerinti diagnosztikai készítmény csak olyan erős savat tartalmazhat, amelyben a higanyvegyület Hg2+ vagy Hg+ ionokra disszociálva oldódik. Erős savakként nem használhatunk hidrogén-halogenideket, mert ezek a higanyvegyületekkel nehezen oldódó, illetve rosszul disszociáló higany-halogenideket képeznek. Erős savként különösen előnyösen használhatjuk a nem illékony kénsavat.
Kívánt esetben a diagnosztikai készítményhez egy vagy több segédanyagot, éspedig alacsony tenziójú szerves oldószert, felületaktív anyagot és/vagy színezéket is adhatunk.
Az alacsony tenziójú szerves oldószer szerepe a rea-21
HU 203 919 A gens párolgásának csökkentése. Alacsony tenziójú szerves oldószerként például glicerint, dimetil-szulfoxidot és/vagy metil-celloszolvot használhatunk.
Felületaktív anyag használata különösen akkor előnyös, ha a készítményt ultramikro elemzéshez használjuk. A felületaktív anyag szerepe a diagnosztikai készítmény szétterülésének javítása a felületi feszültség csökkentése tévén. Ha a vizsgálatokat műanyag tárgylemezen vagy speciálisan zsírtalanított üveg tárgylemezen végezzük, felületaktív anyag használatára nincs feltétlenül szükség. A találmány szerinti készítmény csak olyan felületaktív anyagot tartalmazhat, amely a készítményben oldódik, és a készítmény további komponenseivel és a vizsgálandó mintával szemben inért, azaz egyikükkel sem ad a mikroszkópos vizsgálatban érzékelhető reakciót Erre tekintettel a felületaktív anyag nem tartalmazhat kalcium- és balogenid-ionokat Felületaktív anyagokként például hosszú szénláncú zsírsavak alkálifémsóit, alkil- vagy aril-szulfonát-alkálifémsókat vagy hosszú szénláncú alkil-fenolok etilén-oxiddal képezett kondenzátumait használhatjuk.
A találmány szerinti készítmény adott esetben színezéket is tartalmazhat A színezék megkönnyíti a mikroszkópos észlelést ugyanis a vizsgálandó komponensektől élesen elütő, kontrasztos hátteret ad. A színezékkel szemben támasztott követelmény, hogy oldódjon a diagnosztikai készítményben, és a készítmény további komponenseivel szemben inért legyen. A felhasználható színezékek egy része - így például a krezol-vörös, a metil-ibolya és a brómkrezil-kék - nem reagál a kőalkotókkal. A találmány szerinti készítmény azonban olyan színezéket is tartalmazhat, amely egyes kőalkotókkal színreakció közben reagál. Az utóbbi típusba tartozik a Poirrier blau, amely az L-cisztinnel rózsaszínű foltot, a 2,8-dihidroxi-adeninnel pedig időben barnától lilán keresztül zöldesig változó színt ad; a színes foltok élesen kiemelkednek a kék háttérből.
A találmány szerinti diagnosztikai készítmények hosszú időn át változás nélkül eltarthatók. Amennyiben a színezék (például a Poirrier blau) bekeverése csökkentené a tárolási stabilitást, a készítményt célszerűen két külön oldatból, azaz vizes színezék-oldatból és a készítmény további komponenseit tartalmazó oldatból álló készlet formájában hozzuk forgalomba, és az oldatokat közvetlenül a készítmény felhasználása előtt keverjük össze.
A találmány szerinti diagnosztikai készítmények összetételére és felhasználására a következő példákat közöljük:
1. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele;
4,0 ml desztillált víz
1,0 mg krezol-vörös
50,0 mg higany(II)-acetát
1,0 ml tömény kénsav
0,8 ml glicerin
A készítményt a következőképpen állítjuk elő:
A desztillált vízben feloldjuk a krezol-vöröst, az oldatlanul maradt részt dekantálással, szűréssel vagy centrifugálással eltávolítjuk. Ezután a vizes oldathoz hozzáadjuk a glicerint és a higany(II)-acetátot, majd lassan, hűtés közben becsepegtetjük a kénsavat. A kapott reagens oldatot polietilén edényben tároljuk.
2. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
4,0 ml desztillált víz 2,0 mg metil-ibolya
50,0mghigany(II)-acetát 1,0 ml tömény kénsav 1,0 ml dimetil-szulfoxid 0,4 mg nátrium-dodecil-benzol-szulfonát
3.példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
4,0 ml desztillált víz 1,0 mg krezol-vörös
35,0 mg sárga higany(II)-oxid 20 1,0 ml tömény kénsav
1,0 ml glicerin
0,3 mg nátrium-lauril-szulfát
4. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
4,0 mg desztillált víz 1,0 mg brómkrezil-kék
45,0 mg higany(II)-acetát 1,0 ml tömény kénsav l ,0 ml metil-celloszolv
0,3 mg nonil-fenol-poliglikol-éter
5. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
„A” oldat:
1,0 ml desztillált víz 2,0 mg Poirrier-blau „B” oldat
3,0 ml desztillált víz
30,0 mg higany(II)-oxid
1,0 ml tömény kénsav 1,0 ml dimetil-szulfoxid 0,4 mg nátrium-lauril-szulfát
Felhasználás előtt az „A és „B” oldatot 1:5 térfo45 gatarányban elegyítjük. Diagnosztikai célokra a „B” oldat önállóan is felhasználható.
6. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
4,0 ml desztillált víz
40,0 mg bigany(II)-acetát
1,0 ml tömény kénsav
7. példa
A diagnosztikai készítmény összetétele:
4,0 ml desztillált víz 50,0 mg higany(ll)-acetát 1,0 ml tömény kénsav 1,0 ml dimetil-szulfoxid
HU 203 919 A
8. példa
Az 1. példa szerinti összetételű diagnosztikai készítményt a következőképpen használjuk vesekövek összetételének vizsgálatára:
Tiszta, zsírmentes, csapvíznyomokat nem tartalmazó tárgylemezre 5-20 pl diagnosztikai készítményt cseppentünk, és azt 5—10 mm átmérőjű folttá szétterítjük. A vizsgálandó kőből hegyes fém mintavevő segítségével vett 5-20 pg tömegű (szabad szemmel alig vagy éppen látható méretű) mintát a szétterített foltba ejtjük, és 30-150-szeres nagyítás mellett közönséges fénymikroszkóppal észleljük a bekövetkező változásokat, amelyek a következők:
2,8-Dihidroxi-adenin: a minta a szélénél lassan oldódni kezd, majd 5-20 másodperc múlva barna, kerek folt kezd előtűnni a minta maradéka körül, végül a minta feloldódik, és őzbama precipitációs folt marad vissza.
L-Cisztin: a minta buborékképződés közben gyorsan, másodpercek alatt feloldódik, majd durvaszemcsés, nagy piszkosbama folt jelenik meg.
Tercier kalcium-foszfátok: a mintából másodpercek alatt rövid, vékony, világosbarna színű tűs kristályok nőnek ki; karbonát-apatit esetén buborékképződést is látunk. A brushit (CaHPO4x2H2O) a reakciót nem adja, ezáltal elkülöníthető az apatitoktól.
Kalcium-oxalát-mono- vagy -dihidrát (whewellit, weddelit): a mintából lassan, 10-20 másodperc alatt hosszú, vastag, színtelen kristályok nőnek ki, végül a minta feloldódik és csak a tűs kristályok maradnak vissza.
Stnivit (MgNH4PO4x6H2O): a minta 5 másodpercen belül feloldódik.
Az 5-20 pg-os mintatömeg esetén a többi kőalkotó közül láthatóan nem reagál a húgysav, a nátrium-hidrogén-urát, az ammónium-hidrogén-urát és a xantin (utóbbi a szükségesnél tízszer nagyobb mintatömeg esetén enyhén, de nem zavaró módon reagálhat).
Claims (6)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK . 1. Diagnosztikai készítmény vesekövek összetételének vizsgálatára, azzal jellemezve, hogy higanyvegyületet és olyan erős sav vizes oldatát tartalmazza, amelyben a higanyvegyület Hg2+ vagy Hg+ ionokra disszociálva oldódik, adott esetben- alacsony tenziójú szerves oldószerrel,- a diagnosztikai készítményben oldódó, a készítmény további komponenseivel és a vizsgálandó mintával szemben inért felületaktív anyaggal, és/vagy- a diagnosztikai készítményben oldódó, a készítmény további komponenseivel szemben inért, adott esetben egyes kőalkotókkal színreakció közben reagáló színezékkel együtt
- 2. Az 1. igénypont szerinti diagnosztikai készítmény, azzal jellemezve, hogy erős savként kénsavat tartalmaz.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti diagnosztikai készítmény, azzal jellemezve, hogy higanyvegyületként higany(II)-oxidot tartalmaz.
- 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti diagnosztikai készítmény, azzal jellemezve, hogy higanyvegyületként higany(II)-acetátot tartalmaz.
- 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti diagnosztikai készítmény, azzal jellemezve, hogy 0,1-2,0 g/100 ml, előnyösen 0,3-0,9 g/100 ml higany vegyületet tartalmaz.
- 6. Az előző igénypontok bármelyike szerinti diagnosztikai készítmény, azzal jellemezve, hogy a készítmény össztérfogatára vonatkoztatva 10-25 térfogat%, előnyösen 15-17 térfogat% erős savat tartalmaz.Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU287689A HU203919B (en) | 1989-06-05 | 1989-06-05 | Diagnostic product for testing content of renal stones |
DE19904017996 DE4017996A1 (de) | 1989-06-05 | 1990-06-05 | Diagnostica zum nachweis von steinen der harnwege |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU287689A HU203919B (en) | 1989-06-05 | 1989-06-05 | Diagnostic product for testing content of renal stones |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT53966A HUT53966A (en) | 1990-12-28 |
HU203919B true HU203919B (en) | 1991-10-28 |
Family
ID=10961474
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU287689A HU203919B (en) | 1989-06-05 | 1989-06-05 | Diagnostic product for testing content of renal stones |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE4017996A1 (hu) |
HU (1) | HU203919B (hu) |
-
1989
- 1989-06-05 HU HU287689A patent/HU203919B/hu unknown
-
1990
- 1990-06-05 DE DE19904017996 patent/DE4017996A1/de not_active Withdrawn
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE4017996A1 (de) | 1990-12-13 |
HUT53966A (en) | 1990-12-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0020788B1 (en) | Test piece for measuring glucose | |
McArdle | A modified method for the microdetermination of citric acid | |
CN105002264B (zh) | 一种总胆汁酸测定试剂盒 | |
WO1980000259A1 (en) | Semi-quantitative assay of metabolic acids | |
CA1073328A (en) | Fluorimetric demonstration and determination of a reduced coenzyme or derivative in an aqueous system | |
WO1992011524A2 (en) | Reagent and methods for calcium determination | |
EP0491936B1 (en) | Very rapid detection of fungal infections | |
JP2003528623A (ja) | サンプル中の還元された補助因子の存在を検出するための試薬システムおよびその使用方法 | |
CA2494022C (en) | Agent for detecting malondialdehyde, method of making the same, and test kit for use thereof | |
HU203919B (en) | Diagnostic product for testing content of renal stones | |
EP1754062B1 (en) | Assay system with in situ formation of diazo reagent | |
Blaies et al. | A simplified method for staining mast cells with astra blue | |
JP3920110B2 (ja) | 遊離脂肪酸(nefa)の測定用液状試薬 | |
KR100255522B1 (ko) | 생체시료중 금속의 측정방법 및 측정용 시약 | |
US6632677B1 (en) | Air shutoff agent for aqueous reagent and aqueous specimen, and method for storing aqueous reagent and aqueous specimen with stability | |
CA1335251C (en) | Quantitative determination of phosphorus | |
JP3674450B2 (ja) | Gpt測定用試薬 | |
EP0950897A1 (en) | Method for stabilizing liquid reagent and reagent unit | |
JP3968374B2 (ja) | 遊離脂肪酸(nefa)の測定用液状試薬 | |
CN109916691B (zh) | 用于细胞酯酶染色的试剂 | |
Weil | Investigations in enzymic histochemistry: A micro-method for the determination of tryptic activity | |
JPH0679560B2 (ja) | 胆汁酸測定用試験紙の製造方法 | |
JPH02200199A (ja) | 血中胆汁酸の定量用組成物 | |
JPH06253899A (ja) | 尿素窒素測定用試薬組成物 | |
ANDRULEVIČIŪTĖ | BIOCHEMISTRY LABORATORY MANUAL |