HU201155B - Fluorimetric laser detector - Google Patents
Fluorimetric laser detector Download PDFInfo
- Publication number
- HU201155B HU201155B HU863578A HU357886A HU201155B HU 201155 B HU201155 B HU 201155B HU 863578 A HU863578 A HU 863578A HU 357886 A HU357886 A HU 357886A HU 201155 B HU201155 B HU 201155B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- laser
- detector
- cuvette
- fluorimetric
- rectangular
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/74—Optical detectors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/84—Systems specially adapted for particular applications
- G01N21/85—Investigating moving fluids or granular solids
Description
A találmány tárgya fluorimetrikus lézerdetektor mikro-oszlopkromatográfiához, amelyet csekély mennyiségű fluoreszcens folyadékok vizsgálatához, például mikrooszlopos folyadékkromatográfokban lehet alkalmazni.
Ismeretes egy olyan fluorimetrikus lézerdetektor, mely egymással optikailag csatolt elemeket tartalmaz, melyek a következők: egy lézer, egy fókuszáló berendezés a lézersugárhoz, egy átfolyás-küvetta és egy fluoreszcens sugárzásérzékelő. A Chem. Pharm. Bull, 1980, 28. N 4, 1337-1339. oldalakon ismertetett átfolyás-küvetta egy 1,5 mm-es átmérőjű kvarccsőből áll, amelyhez a vizsgálandó folyadék hozzávezetésére szolgáló, 0,5 mm-es belső átmérőjű cső van merőlegesen hozzáhegesztve. A küvetta felső homlokfelületébe egy száloptikai fémvezető van bevezetve, amelynek végéhez egy fókuszáló lencse van hozzáragasztva, amely a lézersugár fókuszáló berendezését képezi. A lencse valamivel magasabban van elrendezve, mint a cső kötési helye, és a lézersugárzás divergenciája a fényvezető után 5 x I0~* Gy-re csökken. A fluoreszcens gerjesztés a vizsgálandó folyadéknak a kisebb átmérőjű csőből a nagyobb átmérőjű csőbe történő átfutásának tartományában történik. A fluoreszcens sugárzást egy 0,4-0,7 mm-es blendével gyűjtik össze, mely a folyadék-bevezető csővel azonos tengelyen van elrendezve.
A szóbanforgó szerkezeti kialakításnál hátrányos, hogy a kromatográfiai frakcióknak a kisebb átmérőjű csőből a nagyobb átmérőjű (1,5 mm-es) csőhöz való derékszögű átmeneténél a kromatográfiai frakciók erős elmosódása következtében kicsi az érzékenység és a felbontóképesség.
A találmány célja a mikrooszlopos kromatográfiában használt detektor felbontásának és érzékenységének növelése.
A kitűzött célt olyan fluorimetrikus lézerdetektor kialakításával értük el, mely a következő, egymással optikailag csatolt elemekből áll: egy lézerből, egy hengeres teleszkópból, egy beállítható blendéből, egy küvettából, egy fénycsapdából, melyek közös optikai tengely mentén vannak elrendezve, és egy fluoreszcens sugárzás-érzékelőből.
A találmány szerinti megoldás lényege, hogy a detektor érzékenyéségnek és felbontásának növelése érdekében a lézersugárzás-fókuszáló berendezés hengeres teleszkóp formájában van kialakítva, és a hengeres teleszkóp, valamint a derékszögű kvarcküvetta között egy beállítható blende helyezkedik el, mely négyszögletes trapéz formájában van kialakítva és a lézersugárzás irányára merőlegesen elhelyezkedő síkban elcsúsztathatóan van elrendezve, és a trapéz alapján lévő él a derékszögű kvarcküvetta falával párhuzamosan fekszik.
Az 1. ábrán egy találmány szerinti berendezés optikai elrendezése, a 2. ábrán egy küvetta és egy blende látható.
Az elrendezés az alábbi, egymással optikailag csatolt elemekből áll: egy I lézerből, egy 2 hengeres teleszkópból, egy 3 beállítható blendéből, egy 4 derékszögű kvarcküvettából. mely egy. a vizsgálandó folyadék átfolyására szolgáló belső csatornával van ellátva, továbbá egy 5 fénycsapdából, melyek közös optikai tengelyen helyezkednek el. és egy 6 fluoreszcens sugárzás-érzékelőből, mely utóbbi a 4 de1 rékszögű kvarcküvettának a közös optikai tengelyre merőleges tengelye mentén van elhelyezve.
A kromatográf oszlop egy csavarmenetes kötés segítségével a 4 derékszögű kvarcküvetta bemenő oldali homlokoldalával van összekötve, mely egy rögzítő-, illetve tartóelemmel van ellátva. A 4 derékszögű kvarcküvetta és a mikrooszlop között egy szűrő van elrendezve.
A detektor a következőképpen működik.
A lézersugárzást a 2 hengeres teleszkóp segítségével egy függőleges csíkká alakítjuk át, amelynek szélessége egyenlő a vizsgálandó folyadék átfolyására szolgáló csatornáéval. A lézersugárzás csík hosszúságát a detektor 4 derékszögű kvarcküvettája előtt elrendezett 3 beállítható blende segítségével szabályozzuk. A továbbiakban a lézersugárzás keresztülhalad a 4 derékszögű kvarcküvettán, a vizsgálandó folyadék oszlopán és az 5 fénycsapdában kioltjuk. A fluoreszcens sugárzást egy objektív segítségével, egy a gerjesztésre merőlegesen fekvő síkban gyűjtik össze.
A 3 beállítható blende egy négyszögletes trapéz formájában oly módon van elrendezve, hogy annak az alapra merőlegesen álló éle a küvettafallal párhuzamosan helyezkedik el. A 3 beállítható blende fent említett elrendezése biztosítja a vizsgálandó folyadék oszlopában egy fluoreszcencia gerjesztését közvetlenül annak a kromatográf oszlopból való kilépése után, ezáltal a detektornak a folyadékot vezető térfogatát az oszlophoz képest minimálisra csökkentjük. A 3 beállítható blendének a vízszintes síkban történő elcsúsztatása lehetővé teszi, hogy a lézersugárzással gerjesztett folyadékoszlop magasságát meghatározott határok között fokozatmentesen tudjuk változtatni.
A találmány szerinti konstrukció előnye az ismert detektorokhoz képest a mintegy két nagyságrenddel megnövelt érzékenységben és az 1,5-2-szeresen megnövelt felbontóképességben van.
Példa
A detektor mérőküvettája egy 4 derékszögű kvarcküvetta, mely a lézersugárzás hatására nem bocsát ki fényt. A 4 derékszögű kvarcküvetta külső méretei 4 x 10 x 20 mm, a belső csatorna 0,5 x 0.5 mm nagyságú. A 2 hengeres teleszkóp lehetővé teszi a lézersugárzásnak egy 0,5 x 7 mm-es nagyságú csík formájában történő előállítását. Annak érdekében, hogy egy szigorúan négyszögletes formájú és egyenletes teljesítményeloszlású lézersugárzást állítsunk elő a felületen, a 3 beállítható blende a csík maximális hosszúságát 6 mm-re korlátozza, a csík minimális hosszúsága pedig 1 mm. A detektálandó mennyiséget tehát fokozatmentesen lehet szabályozni 0,25 és 1,5 μΐ között. A detektor térfogata az oszlophoz képest maximálisan 0.05 μΐ-t tesz ki. A fluoreszcens sugárzást 325 nm hullámhosszúsággal gerjesztjük és 550 nm-es hullámhosszúsággal regisztráljuk. A regisztráló rendszer olyan üzemmódban működik, hogy egyelektronimpulzosokat számlál.
Ilyen körülmények között és egy 0.6 x 170 mm-es mikrooszlop alkamazásával (melynek felbontóképessége az elméleti 8 x 10·’ értékű) DNS-aminosavak detektálásánál 2 x 10-16 mólos határérzékenységet értünk el egy kromatográfiai jelnél.
Claims (1)
- SZABADALMI IGÉNYPONT Fluorimetrikus lézerdetektor mikrooszlopos kromatográfiához, mely a következő, egymással optikailag csatolt elemekből áll: egy lézerből, egy hengeres teleszkópból, egy beállítható blendéből, egy küvettából, egy fénycsapdából, melyek közös optikai tengely mentén vannak elrendezve, és egy fluoreszcens sugárzás-érzékelőből, azzal jellemezve, hogy a detektor érzékenységének és felbontásának növelése érdekében a lézersugárzás-fókuszáló berendezés hengeres telesz- 10 kóp (2) formájában van kialakítva, és a hengeres teleszkóp (2), valamint a derékszögű kvarcküvetta (4) között egy beállítható blende (3) helyezkedik el, mely négyszögletes trapéz formájában van kialakítva 5 és a lézersugárzás irányára merőlegesen elhelyezkedő síkban elcsúsztathatóan van elrendezve, és a trapéz alapján lévő él a derékszögű kvarcküvetta (4) falával párhuzamosan fekszik.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU853893760A SU1376042A1 (ru) | 1985-05-12 | 1985-05-12 | Лазерный флуориметрический детектор дл микроколоночной хроматографии |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT44652A HUT44652A (en) | 1988-03-28 |
HU201155B true HU201155B (en) | 1990-09-28 |
Family
ID=21176583
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU863578A HU201155B (en) | 1985-05-12 | 1986-08-13 | Fluorimetric laser detector |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4822167A (hu) |
AT (1) | AT390841B (hu) |
CS (1) | CS268787B1 (hu) |
DD (1) | DD270643A3 (hu) |
DE (1) | DE3627448A1 (hu) |
FR (1) | FR2603106B1 (hu) |
GB (1) | GB2193571B (hu) |
HU (1) | HU201155B (hu) |
SE (1) | SE458156B (hu) |
SU (1) | SU1376042A1 (hu) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6830731B1 (en) * | 1998-01-05 | 2004-12-14 | Biosite, Inc. | Immunoassay fluorometer |
US6195214B1 (en) * | 1999-07-30 | 2001-02-27 | Etec Systems, Inc. | Microcolumn assembly using laser spot welding |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4031399A (en) * | 1975-02-24 | 1977-06-21 | Beckman Instruments, Inc. | Fluorometer |
US3999861A (en) * | 1975-06-30 | 1976-12-28 | Technicon Instruments Corporation | Flow cell |
FR2348486A1 (fr) * | 1976-04-15 | 1977-11-10 | Commissariat Energie Atomique | Procede et dispositif d'analyse d'echantillon par spectrographie d'emission utilisant un faisceau laser |
US4203670A (en) * | 1977-04-21 | 1980-05-20 | Bromberg Nathan S | System and method of fluorescence polarimetry |
US4284355A (en) * | 1979-10-29 | 1981-08-18 | Ortho Diagnostics, Inc. | Automated method for cell volume determination |
US4350892A (en) * | 1980-07-31 | 1982-09-21 | Research Corporation | X'-, Y'-, Z'- axis multidimensional slit-scan flow system |
DD159566A1 (de) * | 1981-06-10 | 1983-03-16 | Hartmut Lucht | Spektralfluorometer |
DE3208919A1 (de) * | 1982-03-12 | 1983-09-22 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Anordnung zur messung der fluoreszenzpolarisation |
US4537861A (en) * | 1983-02-03 | 1985-08-27 | Elings Virgil B | Apparatus and method for homogeneous immunoassay |
US4555177A (en) * | 1983-12-22 | 1985-11-26 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Method and apparatus for detecting singlet state resonance fluorescence |
US4643566A (en) * | 1984-07-20 | 1987-02-17 | Canon Kabushiki Kaisha | Particle analyzing apparatus |
SE455646B (sv) * | 1984-10-22 | 1988-07-25 | Radians Innova Ab | Fluorescensanordning |
-
1985
- 1985-05-12 SU SU853893760A patent/SU1376042A1/ru active
-
1986
- 1986-04-25 CS CS863008A patent/CS268787B1/cs unknown
- 1986-05-05 DD DD28988586A patent/DD270643A3/de not_active IP Right Cessation
- 1986-08-04 AT AT0209286A patent/AT390841B/de not_active IP Right Cessation
- 1986-08-07 GB GB8619282A patent/GB2193571B/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-08-13 DE DE19863627448 patent/DE3627448A1/de active Granted
- 1986-08-13 HU HU863578A patent/HU201155B/hu not_active IP Right Cessation
- 1986-08-20 FR FR8611901A patent/FR2603106B1/fr not_active Expired
- 1986-08-27 SE SE8603622A patent/SE458156B/sv not_active IP Right Cessation
- 1986-09-05 US US06/903,650 patent/US4822167A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS268787B1 (en) | 1990-04-11 |
SE8603622D0 (sv) | 1986-08-27 |
SE8603622L (sv) | 1988-02-28 |
FR2603106B1 (fr) | 1988-12-09 |
SE458156B (sv) | 1989-02-27 |
CS300886A1 (en) | 1989-06-13 |
DE3627448A1 (de) | 1988-02-18 |
SU1376042A1 (ru) | 1988-02-23 |
GB2193571A (en) | 1988-02-10 |
ATA209286A (de) | 1989-12-15 |
GB2193571B (en) | 1990-07-04 |
US4822167A (en) | 1989-04-18 |
HUT44652A (en) | 1988-03-28 |
FR2603106A1 (fr) | 1988-02-26 |
AT390841B (de) | 1990-07-10 |
GB8619282D0 (en) | 1986-09-17 |
DD270643A3 (de) | 1989-08-09 |
DE3627448C2 (hu) | 1990-02-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4501970A (en) | Fluorometer | |
Wu et al. | High-sensitivity fluorescence detector for fluorescein isothiocyanate derivatives of amino acids separated by capillary zone electrophoresis | |
US5141609A (en) | Method and device employing time-delayed integration for detecting sample components after separation | |
US4750837A (en) | Fluorometer with reference light source | |
US4802768A (en) | Two light source reference system for a fluorometer | |
Yeung et al. | Laser fluorescence detector for capillary electrophoresis | |
US6309886B1 (en) | High throughput analysis of samples in flowing liquid | |
Guthrie et al. | On-column helium cadmium laser fluorescence detector for open-tubular capillary liquid chromatography | |
US5235409A (en) | Optical detection system for capillary separation columns | |
US6661510B1 (en) | Device for detection of fluorescent species | |
Bornhop et al. | Simple nanoliter refractive index detector | |
US6361672B1 (en) | Multiple laser diode electromagnetic radiation source in multiple electrophoresis channel systems | |
Hernandez et al. | Detection and quantification of capillary electrophoresis zones by fluorescence microscopy | |
CN1167945C (zh) | 一种激光诱导荧光检测器 | |
JPH04232840A (ja) | キャピラリークロマトグラフィー用光検出器 | |
JPH0640059B2 (ja) | 浮遊微粒子測定方法及びその装置 | |
JPH0663964B2 (ja) | 微小流動セル | |
EP0241268A2 (en) | Improved pulse light system fluorometer | |
WO1981001472A1 (en) | Liquid flow photometer | |
HU201155B (en) | Fluorimetric laser detector | |
Culbertson et al. | Lowering the UV absorbance detection limit and increasing the sensitivity of capillary electrophoresis using a dual linear photodiode array detector and signal averaging | |
Peck et al. | Optical errors in a liquid chromatography absorbance cell | |
JPH03214038A (ja) | 空気中に散布されたエアロゾルと粉麈などの測定装置 | |
JP2005338100A (ja) | キャピラリアレイ電気泳動装置及び電気泳動方法 | |
DE19526943C2 (de) | Mehrfachreflexionsvorrichtung zur Erzeugung und Messung von konventionellen Signalen und Sättigungssignalen der Fluoreszenz und der Streuung |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |