HU198513B - Process for producing peptides with anticoagulant effect and pharmaceutical compositions comprising same - Google Patents
Process for producing peptides with anticoagulant effect and pharmaceutical compositions comprising same Download PDFInfo
- Publication number
- HU198513B HU198513B HU882616A HU261688A HU198513B HU 198513 B HU198513 B HU 198513B HU 882616 A HU882616 A HU 882616A HU 261688 A HU261688 A HU 261688A HU 198513 B HU198513 B HU 198513B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- glu
- peptide
- pro
- resin
- preparation
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/815—Protease inhibitors from leeches, e.g. hirudin, eglin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás új, H-Gly-Asp-PheGLu-DCys-He-Pro-X-Glu-Tyr-Leu-GlnOH (I) általános képletíí peptidek, dimerjeik, valamint a monomert és a dimet tartalmazó elegyek előállítására.
A találmány olyan új, ciklikus peptidek előállítására vonatkozik, amelyek antikoaguláns hatással rendelkeznek.
Az antikoaguláns szerek alkalmas terápiás hatóanyagok például akut mélyvénás trombózis, tüdőembólia, akut artériás embólia, szívizom infarktus és elszórt éren belüli koaguláció gyógyszerészeti kezelésére. Az antikoaguláns szerek megelőző alkalmazása lehetővé teszí a reumatikus vagy érelmeszesedéses szívbetegségekben szenvedő betegek esetében az embólia visszatérésének megakadályozását és megakadályozza sebészeti beavatkozások során bizonyos thrombus-embólia kialakulását. Antikoagulánsok adagolása történik szívkoszorú verőér és agyérrendszeri betegségben szenvedők kezelése esetében is. Az artériás trombózis, különösen a szívizmot és az agyat ellátó artériák esetében az elhalálozás egyik fő oka.
A hirudin egy 65 egységből álló polipeptid, amelyet pióca ínyálmirigyből izoláltak. Ez egy olyan antikoaguláns, amely thrombin specifikus inhibitor hatással rendelkezik. A hirudin ugyan Igen jó hatékonyságú, de a pióca nyálmirigyéből izolált anyagnak klinikai alkalmazása mennyiségénél fogva limitált. Ezen túlmenően az izolált anyag drága és alkalmazását, mint minden ilyen méretű fehérje adagolását allergiás reakciók követik.
A szerzők felfedezték, hogy a hirudin egy spcifikus részlete felelős, legalább részben, antikoaguláns hatásáért. A részlet molekulát kémiai úton előállítottuk, és ennek bizonyos ciklusos analógjairól kitűnt, hogy a thrombin felismerési helyére kötődnek, de nem kötődnek az ettől térben elkülönülő thrombin enzimatikus hasítási helyre. A szintetikus peptidek kötődése tökéletesen meggátolja a flbrínogjín megkötődését a thrombin felismerési helyekre, ami előfeltétele a fibrin keletkezésnek és a vérrög képződésnek.
A találmány szerinti eljárással előállított peptidek jelentős antikoaguláns aktivitással rendelkeznek és az a szokatlan jellemzőjük, hogy csak a thrombin felismerési helyhez kötődnek és nem kötődnek a thrombin enzimatikus hasítási helyéhez, lehetővé teszi egy tudományosan érdekes és terápiásán jelentős antikoaguláns gyógyítási eljárás megvalósítását.
A találmány tárgya eljárás
H-Gly-Asp-Phe-Glu-DCys-Ile-Pro-X-Glu-Leu-Gln-OH (I) általános képletű peptid és (H-Gly-Asp-Phe-Glu-DCysIle-Pro-X-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH)j (II) (II) általános képletű dlmer és ezek elegyének előállítására, ahol az általános képletekben
X jelentése Cys vagy Pen csoport.
A leírásban az aminosavak rövidítésére az alábbi jelöléseket használjuk:
Gly- glicin Leu-leucin He- izoleucin Pro- prolin Phe- fenil-alanin Cys- cisztéin Tyr- tirozin Gin- glutamin
Asp- aszparginsav Glu- glutaminsav
Pen- penicillamin (béta,béta-dimetil-cisztein)
DCys- D-ciszteln,
A glicin, a leucin, az izoleucin, a fenil-alanin, a tirozin, a cisztéin, a prolin az aszparginsav, a glutaminsav és a glutamin természetesen előforduló aminosavak.
A Tyr, Phe, Leu, Ile és Pro lipofil aminosavak.
A természetesen előforduló aminosavak a glicin kivételével királis szénatomot tartalmaznak. Hacsak másképp nem jelezzük, a megadott optikailag aktív aminosavak alatt ezek Lkonfigurációját értjük.
A dimer elnevezés alatt olyan peptideket értünk, amelyeket két lineáris pepiidnek a B csoporton keresztül történő kötésével a találmány szerinti eljárás ciklizációs művelete során nyerünk. Az így keletkezett termék molekulaképlete pontosan a kétszerese a monomer képletének.
A jelen leírásban, hacsak másképp nem jelöljük, a dlmer elnevezésbe mindig beleértendők a dimerek és ezek keverékei Is. A ciklizációs lépésben keletkező monomer és dimer keveréke azonban jól ismert eljárásokkal könnyen elválaszthatók egymástól, de elválasztás nélkül is alkalmazhatók thrombin ellenes hatású anyagként.
A szóbanforgó peptideket szilárd fázisú szekvenciális eljárással, automata peptid szintetizátor alkalmazásával állítjuk elő. Ebben az esetben az alfa-aminocsoporton védett aminosavat kötjük a gyanta hordozóhoz. Az alkalmazott gyanta hordozó lehet bármely polipeptid szilárd fázisú előállításban szokásosan alkalmazott gyanta, és előnyösen polisztlrol, amely körülbelül 0.5-3% divinil-benzol keresztkötéseket tartalmaz, és amely vagy klórmetilezett vagy hidroximetilezett, amely funkciós csoportok alkalmasak a kezdetben bevezetett α-aminocsoporton védett aminosavval való észterkötés létrehozására.
Egy hidroxil-metil-gyantát írt Bodanszky és csoeChem.Ind. (London), 38, 1597-98 (1966.) közyében. Egy klór metilezett gyanta kerericedelemben kapható, a Bio Rád Laboratories, Richmond, California terméke. A klór-metilezett gyanta előállítási eljárást közölték Stewart és mtsai. Solid Phase Paptide Synthesis (Freeman and Co., San Francisco 1969), Chapter 1, pp. 106 közleményükben. A védett aminosavat a gyantához Gisin, Helv. Chim. Acta, 56, 1476 (1973) közleményében leírt eljárása szerint kapcsolhatjuk. Számos gyantához kötött védett aminosav kereskedelemben kapható. Például egy olyan polipeptid találmány szerinti előállítása során, amelyben a karboxil terminális aminosav egy t-butoxi-karbonll-csoporttal (Boc) védett, kötünk egy benzilezett, hidroxilmetilezett fenll-acetamido-metil gyantához (PAM), amely gyanta kereskedelemben kapható.
Miután az α-aminocsoporton védett aminosavat a gyanta hordozóhoz kötöttük, alkalmas eljárással, például diklórmetánban trifluor-ecetsavat alkalmazva, tiszta trifluor-ecetsavat alkalmazva, vagy dloxános sósavat alkalmazva, a védőcsoportot eltávolítjuk. A védőcsoport eltávolítását körülbelül 0 ’C-szobahőmérséklat közötti hőmérsékleten végezzük. Más speciális a,aminosav védőcsoport eltávolításra alkalmas tanárad hasítási eljárások is alkalmazhatók. Miután α-amlnocsoport védőcsoportot eltávolítottuk, a többi aminocsoporton védett aminosav a kfvánt sorrendben kapcsolható a molekulához. Más eljárás szerint több amlnosavból álló fragmenseket állítunk elő oldatbanl kapcsolási eljárással és ezt kapcsoljuk a gyantához kötött aminosav szekvenciához.
A polipeptid szekvenciába bevezetett egyes a-aminocsoporton védett amínosavak esetében az alkalmazott aminocsoport védőcsoport bármely ilyen, a szakirodalomban ismert védőcsoport lehet. Az alkalmazható α-aminocsoport védőcsoportok az alábbiak lehetnek: (1) acil típusú védőcsoportok, mint például formll-csoport, trlfluor-acetll-csoport, ftalil-csoport, toluolszulfoníl-csoport (tozilcsoport), benzolszulfonil-csoport, nitro-fenil-szulfenil-csoport, tritil-szulfeníl-csoport, (2) aromás uretán típusú védőcsoportok, mint például benziloxi-karbonll-csoport, szubsztituált benzífoxi-karbonil-csoportok, mint például p-klór-benzil-oxi-karbonil-csoport, p-nitro-benziloxi-karbonil-csoport, p-bróm-benziloxi-karbonil-csoport, p-metoxi-benziloxi-karbonil-csoport, 1 -(p-bifenil)-! -metil-etoxí-karbonil-csoport, a a-dimetil-3,5-dimetoxi-benziloxi-karbonil-csoport, és benzhidríloxí-karbonil-csoport, (3) alifás uretán típusú védőcsoportok, mint például t-butoxi-karboníl-csoport (Boc), diizopropíl-metoxi-karbonil-csoport, izopropoxi-karbonil-csoport, etoxi-karboníl-csoport, és alliloxi-karbonil-csoport, (4) cikloalkil-reután típusú védőcsoportok, mint például ciklopentiloxi-karbonil-csoport, adamantiloxi-karbonil-csoport, és ciklohexiloxi-karbonil-csoport (Chx), (5) tiouretán típusú védőcsoportok, mint például feniltío-karboníl-csoport, (6) alkil típusú védőcsoportok, mint például trifenil-metil-csoport (tritil-csoport) és benzilcsoport, és (7) trielkil-szilil-csoportok, mint például trimetil-szilil-csoport. Az előnyösen alkalmazható a-aminocsoport védőcsoport a t-butoxi-karbonil-csoport.
A megfelelő kapcsol2 reagens kiválasztása a szakember előtt ismert. Különösen alkalmas kapcsoló reagensek, amennyiben a kapcsolt aminosav Gin, az Ν,Ν’-diizopropil-karbodiimid és az 1-hidroxi-benzo-triazol. Ezeknek a reagenseknek az alkalmazásával elkerülhető a laktam és nitril melléktermékek keletkezése. Más kapcsoló reagensek: (1) a karbodiimidek (például az N,N-diciklohexil-karbodiimid, (2) a ciánamidok (például az N,N-dibenzíl-ciánamid), (3) a keténlminek, (4) az izoxazólium sók (például az N-etil-5-fenil-izoxazólium-3'-szulfonát), (5) monociklusos aromás jellegű nitrogén tartalmú vegyületek, amelyek 1—4 nitrogénatomot tartalmazhatnak, mint például imidazolidek, pirazolidok, és 1,2,4-triazolidok. Például alkalmas heterociklusos amidok, az N,N’-karbonií-diimidazol, és az N,N-karbonil-di-(l ,2,4-triazol), (6) alkoxilezett acetilének (mint például etoxi-acetilén), (7) az aminosav karboxilcsoportjával vegyes anhldridet képző reagensek (mint például etil-klór-formiát, és izobutil-klór-formiát), vagy a kapcsolandó aminosav szimmetrikus anhidridjei (pélául Boc-Ala-O-Ala-Boc), és (8) nitrogéntartalmú heterociklusos vegyületek, amelyek a gyűrű nitrígénatomon hidroxilcsoportot tartalmaznak, mint az N-hidroxl-ftálimld, az N-hidroxi-szukcinimid és az 1-hidroxi-benzotriazol. Más aktiváló peptid kapcsoló reagensket írt le közleményében Kapoor, J. Pharm. Sci. 59, pp 1-27 (1970). Az előnyösen alkalmazható kapcsoló reagensek, az Arg, Asn és Gin amínosavak kivételével, a szimmetrikus anhidridek.
Valamennyi védett aminosavat vagy aminosav szekvenciát 4-5-szörös feleslegben visszük a szilárd fázisú reaktorba és a kapcsolást dimetil-formamid: diklórmetán (1:1) elegyben, vagy tiszta dimetil-formamidban vagy előnyösen tiszta diklór-metánban hajtjuk végre. Amennyiben a kapcsolás nem teljesen történik meg, a kapcsolási eljárást megismételjük mielőtt az α-amino-védőcsoportot eltávolítjuk és a következő aminosavat a szilárd fázisú reaktorba visszük. A kapcsolási reakció végbemenetelét a szintézis minden egyes lépésében ninhidrin tesztvizsgálattal ellenőrizzük, Kaiser és mtsai. által az Analyt Biochem., 34. 595 (1970) közleményében leírt eljárásnak megfelelően.
Miután a kívánt aminosav szekvenciát előállítottuk, a pepiidet eltávolítjuk a gyantáról. Ezt hidrolízis segítségével végezhetjük és például a gyantához kötött polipeptidet dimetil-szulfld, p-krezol vagy tíokrezol híg vizes hidrogénfluoridos oldatával kezeljük.
Mint a szilárd fázisú szintézis szakirodalomban ismert számos aminosav olyan funkciós csoportokat tartalmaz, amelyeket a peptid lánc előállítása során védőcsoporttal kell ellátni. A megfelelő védőcsoport kiválasztása, alkalmazása, a szakember előtt ismert és a védőcsoporttal ellátandó aminosav minőségétől, valamint a pepiidben jelenlévő egyéb védőcsoporttal ellátott amínosavak minőségétől függ. Az ilyen oldalláncbani védőcsoportok megválasztása döntő befolyású, mert ezek olyanok kell legyenek, amelyek nem hasadnak le az α-aminocsoport védőcsoportok eltávolítása során.
A ciklikus peptideket a megfelelő lineáris származékból állítjuk elő a lineáris peptid szilárd fázisról való lehasítása tuán ismert oxidatív kapcsolási eljárással, például a lineáris pepiidet káliumferricianiddal oxidálva, például Stewart és mtsai. Solíd Phase Pepiidé Synthesis (Freeman and Co, San Francisco 1969), Chapter 1, 95. oldalának közleményében leírt eljárása szerint.
A találmány szerinti eljárással előállított peptid-származék antikoaguláns dózisa 0,2 mg/kg — 250 mg/kg testsúly/nap, amely függ a kezelt betegtől és az alkalmazott peptidtől. Az adott beteg esetében a •.szükséges dózist egyideig kell meghatározni. Előnyösen 1-4 napi dózist adagolunk jellemzően 5 mg 100 mg/dózis aktív hatóanyag alkalmazásával.
A jelzett antikoaguláns terápia számos trombózis megelőzésére alkalmas, és különösen alkalmas a szívkoszorúér és agyi érrendszeri betegségek kezelésére. A szakember számára egyértelmű az ilyen jellegű betegségek köre, amelyek ilyen kezelést igényelnek. A beteg elnevezés alatt emlősöket, mint például főemlősöket, példuál embert, juhot, lovat, szarvasmarhát,sertést kutyát, macskát, patkányt és egeret értünk.
Ugyan néhány peptid származék stabil marad orálisan adagolva is, azonban a nem orális úton történő adagolás, például a szubkután, az intravénás, az intramuszkuláris vagy intraperitoneális adagolás alkalmazandó előnyösen, a tároló injekció, beültetett injekció, vagy nyálkahártyán keresztüli alkalmazás, mint például on, torok és tüdő hörgőkön keresztüli alkalmazás előnyös, ami lehet például aeroszol formált alak, amely a találmány szerinti peptid származékot permet vagy száraz por formában tartalmazza.
Parenterális adagolás céljára a találmány szerinti vegyületek injektálható dózisokban oldat vagy szuszpenzió formában adagolhatók fiziológiásán elfogad-31
198.5( 3 ható hígítóanyagban, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagokkal együtt, amelyek lehetnek steril folyadékok, mint például víz vagy olajok, és a formált 5 alakban kívánt esetben más felületaktív anyagokat és más gyógyszerészetileg elfogadható adalékanyagokat Is alkalmazhatunk. Alkalmazandó olajok például ásványolaj, amely állati növényi vagy szintetikus eredetű lehet és lehet például földimogyoróolaj, szójaolaj, és ásványi olaj. Folyékony hordozóanyagként különö- * θ sen injektálható formált alak esetében előnyösen víz, fiziológiás sóoldat, dectróz oldat és hasonló cukoroldatok, etanol és glikolok, mint például propllén-glikol vagy polietilén-glikol alkalmazhatók.
A találmány szerinti vegyületek mint tartalék in- -jg jekcló, vagy mint beültetett készítmény adagolhatók és olyan formában készítendők, amely lehetővé teszi az aktív hatóanyag fenntartott kibocsátását. Az aktív hatóanyag labdacsokká vagy kis hengerekké préselhető és szubkután vagy intramuszkulárisan beültethető, mint tartalék injekció vagy beültetett hatóa- 20 nyag. A beültetett formált alakban inért anyagokat, mint például biológiailag lebontható polimereket vagy szintetikus szilikonokat, például Silastic-ot (egy szilikon gumi, amelyet a Dow-Croning Corporation állít elő) alkalmazhatunk.
A találmány szerinti eljárást az alábbi példákon 25 részletesen bemutatjuk. Kitermelés (monomer+dimer) > 90t%.
I. példa ,-r
H-Gly-Asp-Phe-Glu-DCysEe-Pro-Cys-Glu-Tyr-Leu- _Λ
-Gln-OH előállítása
A peptidet, szilárd fázisú eljárással O.l mmól 0.66 mmól/g Boc-Gln-Pam gyanta alkalmazásával állitjuk elő. Kétszeres szimmetrikus anhidridet alkalmazó kapcsolást hajtunk végre 2.0 mmól Na-Boc-aminosav (Peptldes International) alkalmazásával, kivéve hogy a 35 Boc-Gln esetében DCC/HOBT módszert alkalmazunk a kapcsolásra. Az oldallánban alkalmazott védőcsoportok az alábbiak: Asp(Chx), Cys(pMeBzl), Glu(Bzl), Tyr(2-BrZ).
Miután a szintézis befejeződött a Na-Boc védőcsoportot 50%-os diklórmetános trifiuor-ecetsav segítsé- 40 gével távolítjuk el. A gyantát háromszor diklórmetánnal mossuk, háromszoros 10%-os díizopropil-etil-aminos diklórmetános oldattal történő mosással semlegesítjük, majd háromszor diklórmetánnal mossuk. Ezután N-acetil-imidazollal diklórmetánban acetilezzük, majd háromszor diklórmetánnal mossuk és vákuum- 45 bán megszárítjuk. '
A peptidet a gyantáról lehasítjuk és egyben a védőcsoportokat eltávolítjuk. Ezt a művetetlet a víz és kis mennyiségű 30%-os vizes ecetsav alkalmazásával végezzük. Az extraktumot vízzel 2 l térfogatra hígítjuk és pH értékét ammóniumhidroxiddal 8.5 értékre állítjuk be. Ezután káliumferrícianidot adunk az oldathoz (0.01 n), amíg a sárga szín állandóvá nem válik. Az oldatot 30 percig keveijük, majd a pH értéket ecetsavval 4—5 értékre állítjuk be. Ezután az elegyet BioRad AG3-X4A ioncserélő gyantával keveijük 2 órá-ig. A keveréket' leszűrjük és a szűrletet liofilizáljuk.
A kapott elegyet, mely tartalmazza a cím szerinti monomert és annak dimerjét is, 92 x 2,6 cm Sephadex G-15 oszlopon 5%-os ecetsawal történő átfolyatással semlegesítjük, majd liofilizáljuk. A monomert és dimer szétválasztását reverz fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás (HPLC) eljárással végezzük C1* Vydac 218TP1010 (250 x 10 mm) oszlopon, 0,1% vizes trlfluorecetsavban készült acetonitril eluens és 5 ml/perc sebesség alkalmazásával. A főkomponenst, mely a cim szerinti monomer, gyűjtök és liofilizáljuk, és igy 24 mg terméket kapunk. A később eluálódó folt a dlmer, melyet szintén gyűjtünk és liofilizálunk, miáltal 14,2 g 2. példa szerinti terméket állítunk elő. A termékek homogenitását HPLC és VRK analízissel határozzuk meg. HPLC Vydac 218TP54 (250 x 4,6 mm) C18 oszlop, 2 ml/perc, tQ = 1,8 perc: elúciós idő 25-50% acetonitril tartalmazd 0,1%-os trifluorecetsav alkalmazásával lineáris gradiens mellett, amely 1%/perc (HPLC) 9,3 perc. FAB-MS(m+H) — 1414 ± 1 mikron (számított 1413). Aminosav analízis: (6n sósavas hidrolízis, 24 óra ‘Időtartamig, 106 °C hőmérsékleten), lásd a táblázatot.
2. példa (H-Gly-Asp-Phe-Glu-DCys-Ile-Pro-Cys-Glu-Tyr-Leu-GlnOHjj | | f f
Ugyanilyen eljárással állitjuk elő a 3. és 4. példa szerinti peptideket.
3. példa
H-Gly-Asp-Phe-Glu-DCys-Ile-Pro-Pen-Glu-Tyr-LeuGln-OH 1 I
4. példa (A-Gly-Asp-Phe-Glu-DCys-Ile-Pro-Pen-Glu-Tyr-LeuGln-0H)i | |
S S
I I
Az 14. példában előállított peptidek jellemzői az alábbiak.
Példa Aminosav analízis (6n HCl hidrolízis: 24 óra, 106°C)
| szám | Asp | Glu | Pro | Gly · | llex | Leu | Tyr | Phe |
| 1. | 1.03(1) | 3.08 (3) | 0.91 (1) | 1.01(1) | 0.72(1) | 0.98(1) | 0.95(1) | 1.04(1) |
| 2. | 1.00 (1) | 3.10(3) | 0.97 (1) | 0.99(1) | 0.91 (1) | 1.01(1) | 0.88(1) | 0.94(1) |
| 3. | 1.00(1) | 3.00 (3) | 0.83 (1) | 1.01(1) | 0.68(1) | 1.01 (1) | 1.00(1) | 0.99(1) |
| 4. | . 1.01 (Ο | 2.94 (3) | 0.98(1) | 1.02(1) | 0.85(1) | 1.02 (1) | 1.02 (1) | 1.01 (1) |
x Az allo-Ile-vé átalakult részt a hidrolízis során nem mértük mennyiségileg.
198.513
| Példa szám | Fizikai jellemzők | |
| HPLC tr (perc) | FAB-MS (M+H) | |
| 1. | 9.3 | 1414 |
| 2, | 12.8 | 2826 |
| 3. | 9.2 | 1445 |
| 4. | 13.6 | 2883 |
Claims (2)
- Szabadalmi Igénypontok1. Eljárás az J “ l H-GluÁsp-Phe-Glu-DCys-Ile-Pro-X-Glu-Tyr-Leu-Gln-OH(I)I) általános képletű peptid, és aH-GÍu-Asp-Phe-Glu-DCys-IÍe-Pro-X-Glu-TyT-Leu-GlnOlí)j(ll) | |S sI ι (II) általános képletű dimer és ezek elegyének előállítására, az általános képletekben X jelentése Cys-vagy Pen-csoport, azzal jellemezve, hogy a védett 1. amlnosavat egjr aktivált gyanta hordozóval kondenzáljuk, ezután a növekvő peptidlánc terminális amlnocsoportjához sorrendben hozzákapcsoljuk a védett 2-10 amlnosavakat, a peptid-láncról a védőcsoportokat és a gyantát eltávolítjuk, majd a kapott lineráls peptidet oxidatív kapcsolásnak vetjük alá, és kívánt esetbén áz így előállított, a monomert és a dimert tartalmazó elegyből, célszerűen nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással, a két komponenst egymástól elválasztjuk.
- 2. Eljárás vér koagulációjának csökkentésére szolgáló gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve·, hogy az I. igénypont szerinti eljárással előállított (I) és,vagy (II) általános képletű peptidet — ahol X jelentése az 1. igénypontban megadott mint hatóanyagot a gyógyszerkészítésben szokásos hordozó- és adott esetben adalékanyagokkal összekeverjük és gyógyszerkészítménnyé feldolgozzuk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US5316987A | 1987-05-21 | 1987-05-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT46933A HUT46933A (en) | 1988-12-28 |
| HU198513B true HU198513B (en) | 1989-10-30 |
Family
ID=21982364
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU882616A HU198513B (en) | 1987-05-21 | 1988-05-20 | Process for producing peptides with anticoagulant effect and pharmaceutical compositions comprising same |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0291982B1 (hu) |
| JP (1) | JP2858249B2 (hu) |
| KR (1) | KR970010926B1 (hu) |
| CN (1) | CN88103015A (hu) |
| AT (1) | ATE91490T1 (hu) |
| AU (1) | AU613627B2 (hu) |
| CA (1) | CA1340646C (hu) |
| DE (1) | DE3882279T2 (hu) |
| DK (1) | DK278488A (hu) |
| ES (1) | ES2058176T3 (hu) |
| FI (1) | FI89063C (hu) |
| HU (1) | HU198513B (hu) |
| IL (1) | IL86438A (hu) |
| NO (1) | NO882238L (hu) |
| NZ (1) | NZ224678A (hu) |
| PT (1) | PT87536B (hu) |
| ZA (1) | ZA883443B (hu) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5236898A (en) * | 1987-05-21 | 1993-08-17 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Cyclic anticoagulant peptides |
| US5192745A (en) * | 1987-05-21 | 1993-03-09 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Cyclic anticoagulant peptides |
| NZ228995A (en) * | 1988-05-10 | 1992-03-26 | Merrell Dow Pharma | Hirudin peptide derivatives and pharmaceutical compositions |
| US5196404B1 (en) * | 1989-08-18 | 1996-09-10 | Biogen Inc | Inhibitors of thrombin |
| US5240913A (en) * | 1989-08-18 | 1993-08-31 | Biogen, Inc. | Inhibitors of thrombin |
| US5192747A (en) * | 1989-10-03 | 1993-03-09 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Anticoagulant peptides |
| CA2026377A1 (en) * | 1989-10-03 | 1991-04-04 | John L. Krstenansky | Radiolabeled anticoagulant peptides |
| AU641215B2 (en) * | 1990-02-13 | 1993-09-16 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Stabilized sulfonate, sulfate, phosphonate and phosphate derivatives of hirudin |
| US6060451A (en) * | 1990-06-15 | 2000-05-09 | The National Research Council Of Canada | Thrombin inhibitors based on the amino acid sequence of hirudin |
| FR2667071A1 (fr) * | 1990-09-26 | 1992-03-27 | Adir | Nouveaux derives de peptides et de pseudopeptides therapeutiquement actifs dans la cascade de coagulation sanguine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
| US5242810A (en) * | 1990-12-07 | 1993-09-07 | Biogen, Inc. | Bifunctional inhibitors of thrombin and platelet activation |
| SE468628B (sv) * | 1991-11-26 | 1993-02-22 | Flaekt Ab | Saett att reglera stroempulsmatningen till en elektrostatisk stoftavskiljare |
| GB9303275D0 (en) * | 1993-02-18 | 1993-04-07 | Ciba Geigy Ag | Pharmaceutical compositions |
| CA2144523A1 (en) * | 1993-08-04 | 1995-02-16 | Hugo Grossenbacher | High molecular weight desulphatohirudin |
| US6057314A (en) * | 1995-12-21 | 2000-05-02 | Biochem Pharma Inc. | Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3445532A1 (de) * | 1984-12-13 | 1986-06-19 | Plantorgan Werk Heinrich G.E. Christensen, KG, 2903 Bad Zwischenahn | Hirudin-pa, desulfatohirudine-pa, verfahren zur herstellung und pharmazeutische mittel, die diese wirkstoffe enthalten |
-
1988
- 1988-05-16 CA CA000566916A patent/CA1340646C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-16 ZA ZA883443A patent/ZA883443B/xx unknown
- 1988-05-17 AU AU16342/88A patent/AU613627B2/en not_active Ceased
- 1988-05-18 NZ NZ224678A patent/NZ224678A/xx unknown
- 1988-05-19 KR KR1019880005870A patent/KR970010926B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-05-19 PT PT87536A patent/PT87536B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-05-19 AT AT88108048T patent/ATE91490T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-05-19 IL IL86438A patent/IL86438A/xx unknown
- 1988-05-19 EP EP88108048A patent/EP0291982B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-05-19 ES ES88108048T patent/ES2058176T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-05-19 FI FI882358A patent/FI89063C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-05-19 DE DE88108048T patent/DE3882279T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-20 DK DK278488A patent/DK278488A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-05-20 NO NO882238A patent/NO882238L/no unknown
- 1988-05-20 JP JP63122188A patent/JP2858249B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-20 HU HU882616A patent/HU198513B/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-05-21 CN CN198888103015A patent/CN88103015A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3882279T2 (de) | 1993-10-28 |
| JPS63303996A (ja) | 1988-12-12 |
| AU1634288A (en) | 1988-11-24 |
| HUT46933A (en) | 1988-12-28 |
| IL86438A0 (en) | 1988-11-15 |
| EP0291982A2 (en) | 1988-11-23 |
| JP2858249B2 (ja) | 1999-02-17 |
| DK278488A (da) | 1988-11-22 |
| FI882358A (fi) | 1988-11-22 |
| ZA883443B (en) | 1988-11-16 |
| ES2058176T3 (es) | 1994-11-01 |
| CA1340646C (en) | 1999-07-13 |
| NZ224678A (en) | 1990-08-28 |
| PT87536A (pt) | 1989-05-31 |
| FI89063B (fi) | 1993-04-30 |
| ATE91490T1 (de) | 1993-07-15 |
| CN88103015A (zh) | 1988-12-21 |
| FI89063C (fi) | 1993-08-10 |
| EP0291982A3 (en) | 1990-07-11 |
| IL86438A (en) | 1992-11-15 |
| KR970010926B1 (ko) | 1997-07-02 |
| DK278488D0 (da) | 1988-05-20 |
| DE3882279D1 (de) | 1993-08-19 |
| NO882238D0 (no) | 1988-05-20 |
| KR880013976A (ko) | 1988-12-22 |
| NO882238L (no) | 1988-11-22 |
| EP0291982B1 (en) | 1993-07-14 |
| AU613627B2 (en) | 1991-08-08 |
| FI882358A0 (fi) | 1988-05-19 |
| PT87536B (pt) | 1992-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU601801B2 (en) | Anticoagulant peptides | |
| DE69021000T2 (de) | Radiomarkierte Peptide mit Antikoagulanswirkung. | |
| HU198513B (en) | Process for producing peptides with anticoagulant effect and pharmaceutical compositions comprising same | |
| HU198512B (en) | Process for producing peptide with anticoagulant effect and pharmaceutical composition comprising same | |
| KR0154528B1 (ko) | 항응고성 펩티드 | |
| KR0131378B1 (ko) | 항응고성 펩티드 알코올 | |
| AU630132B2 (en) | Anticoagulant peptides | |
| KR100195424B1 (ko) | 항응고성 펩티드 | |
| JPH04211097A (ja) | 安定化されたヒルディンのスルホネ−ト、サルフェ−ト、ホスホネ−ト、及びホスフェ−ト誘導体 | |
| DE69120158T2 (de) | Hirudin-Analoge mit Antiblutplättchen-Aktivität | |
| US5236898A (en) | Cyclic anticoagulant peptides | |
| US5192745A (en) | Cyclic anticoagulant peptides | |
| US5789540A (en) | Anticoagulant peptides | |
| US5574012A (en) | Analogs of hirudin having anti-platelet activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |