HU194261B

HU194261B - Process for production of derivatives of n-substituated neuramin-acid

Info

Publication number: HU194261B
Application number: HU851658A
Authority: HU
Inventors: Shohei Shibayama; Shoji Yoshimura; Mashayoshi Ito; Yoshiyasu Shitori
Original assignee: Kanto Ishi Pharma Co Ltd
Priority date: 1984-05-01
Filing date: 1985-04-30
Publication date: 1988-01-28
Also published as: ZA853197B; FI851661L; FI851661A0; DK195685D0; FI79542C; FI79542B; DK166354C; HUT38623A; DE3578687D1; AU4180085A; ATE54666T1; EP0160925B1; AU550918B2; DK166354B; US4663443A; KR880001233B1; DK195685A; KR850008348A; JPH0570635B2; ES542745A0

Description

A találmány kiváló immunológiai hatású új, N-szubsztituált neuraminsav-származékok előállítására vonatkozik.

Az irodalomból ismert, hogy nagyon sok általában és néhány baktériumsejtfelületén találhatók N-szubsztituált neuraminsavak szialinsawal képezett komplex, így glíkoprotein, glikolipid, oligoszacharid vagy políszacharid formájában.

Újabban az N-szubsztituált neuraminsavak fontos anyagokká váltak a gyógyászatban és az idegműködéssel, rákkal, gyulladással, immunitássá, vírusos fertőzéssel, differenciálással, hormon receptorral stb. kapcsolatos gyógyszerek területén. Azonban a szialinsav komplexben lévő N-szubsztituált neuraminsavak szerepét még nem határozták meg.

Sok szerves kémikus tanulmányozta az N-szubsztituált neuraminsavakat, és ezért ezeknek sok egyszerű származékát állították elő. Ezideig azonban kiváló immunológiai hatású származékot nem találtak közöttük.

Az emberi élet átlagos hosszát megnövelte a vérképző szervek rosszindulatú daganatainak, sokfajta ráknak és kollagén betegségnek a gyógykezelésében bekövetkezett fejlődés. Ugyanakkor a gyógyszerek, például a meliékvesekéreg hormon vagy immunoszupresszáns alkalmazásának nagymértékű növekedése miatt számos nem kívánatos mellékhatás jelentkezett az immunológiai kompetencia csökkenésével együtt.

Dyen körülmények között különös figyelmet fordítottunk a szialinsavra, amely egy biológiailag elidegeníthetetlen összetevő, és kísérleteket folytattunk olyan, az immunitás szabályozására alkalmas Szerek területén, amelyeknek a kémiai változtatás következtében csak néhány mellékhatásuk van, ugyanakkor szabályozzák az immunológiai ellenőrzést. A kutatás vegyületeket, amelyek immunszabályozó hatást mutatnak oly módon, hogy az elfojtó T sejtet aktiválják, és a B sejt immunglobulin termelését visszaszorítják.

A találmány célja olyan új vegyületek előállítása, amelyek kiváló immunológiai, különösen immunszabályozó hatásúak.

A találmány szerint az új, N-szubsztituált neuraminsav-származékok az I általános képlettel jellemezhetők, amelyben

R¹ hidrogéntatom vagy acetilcsoport, és

A -NH-CHR^J-CO- általános képletű aminosav-maradék, amelynek karbonilcsoportja ι az I általános képletnek megfelelően az -NH-csoporthoz, és nitrogénatomja a benziloxi-karbonii-csoporthoz kapcsolódik, és

R^f hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport,

1—4 szénatomos hidroxi-alkilcsoport, 1-6 szénatomos tioalkil-csoport vagy fenil(l—4 szénatomos)-alkil-csoport.

A találmány szerinti olyan I általános képletű vegyieteket, amelyekben R^l jelnetése hidrogénatom, az (Aj reakcióvázlaton bemutatott eljárással állíthatjuk elő. A II képletű neuraminsav és a UI általános képletű N-(benzil-oxo-karbonil)-amlnsav-származékok kapcsolására ismertek módszerek, amelyek szerint a vegyületeket először aktív származékaikká alakítják és aztán kapcsolák. Ezek azok a módszerek, amelyekben az N-terminálist és C-terminálist aktiválják (ezek a savkloridot, savazidot, vegyesanhidridet vagy aktív észtert alalkalmazó eljárások).

Az aktiválás egy konkrét példája, amikor a II képletű és III általános képletű vegyületek elegyéhez diciklohexil-karbodiimidet adnak. Oldószerként metilén-kloridot, acetonitrilt,· dimetil-formamidot, piridint vagy tetrahidrofuránt alkalmazhatunk.

A kapcsolási reakció során fellépő racém-módosulat képződés visszaszorítására alkalmas általános eljárásként az egy edényes módszer ismert, amely szerint diciklohexil-karbodiimidet és egy N-hidroxi-vegyületet alkalmazunk karboxil-csoport-aktíváló reagensként. Dyen N-hidroxi-vegyületek az N-hidroxi-szukcinímid, l-hidroxi-benzotriazol, 3-hídroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,23-benzotriazin és N-hidroxl-5-norbomén-23-dikarboximid. A reakcióhoz Oldószerként tetrahidrofuránt és dimetil-formamidot használhatunk.

Az előbb említett N-hidroxi-vegyüIet és oldószer előnyös kombinációja a dimetil-formamid és az Nhidroxi-S-norbornén-2 3-dikarboximid.

Az R¹ helyén acetilcsoportot tartalmazó I általános képletű vegyületeket egy IV általános képletű vegyület és ecetsavanhidrid vízmentes piridinben való reakciójával állíthatjuk elő.

A II képletű vegyület hidroklorid addíciós sójának előállítását a 3.A.C.S. 99,8273/1977/ irodalmi helyen írták el.

A találmány szerint az I általános képletű vegyületek kiválóan alkalmasak az immunrendszer ellenállóképességének fokozására. Az immunrendszer erősítésére való képességüket a következő módszerrel igazolhatjuk.

Egérlép limfocita ConA-val való aktiválása elleni hatás vizsgálata

Mivel egy T sejt nem-specifikusan aktivált Con A-val, egy találmány szerinti N-szubsztituált neuraminsav-származékot adtunk a szervezethez és a hatását vizsgáltuk. Nevezetesen Con A-val és egy I általános képletű vegyületet, amelyet például a későbbiekben bemutatott példák szerint állítottunk elő, adtunk BALB/C egerekből izolált lép límfocitához (SPC, spleen lmyphocyte) és az elegyet kb, 20 órán át fermentáltuk egy mikrolemezen 5% COj hozzáadásával, 37 °C-on. Triciummal jelzett timidint és SPC-t az elegyből elkülönítettünk körülbelül 10 órás tenyésztés után.

Az SPC által felvett 3H-timidin mennyiségét szcintillációs számlálóval határozuk meg.

Egy IV általános képletű vegyülethez viszonyítva egy I általános képletű vegyület elősegítette és megerősítette a ³H-timidin felvételt, és a T sejt Con A-val való aktiválása elleni hatás is javult.

Az egérlép limfocita immunoglobulin termelése elleni hatás vizsgálata

Azoknak az N-helyettesített neuraminsav-származékoknak, amelyekre az előző kísérletben a T sejt aktiválásával kapcsolatban utaltunk, az immunoglobulin termelés elleni hatását is tanulmányoztuk a vérlemezke képző sejtek (PFC, plaque formin cells) számának mérésével.

Először bárány vörösvérsejtet és egy I általános képletű (például a későbbiekben bemutatott példa szerint előállított) vegyületet adtunk az SPC-hez, és az elegyet 37 °C-on tartottuk 5 napig. Az így kapott éizékenyltett SPC-hez SRBC-t és jelzőanyagot adtunk. Miután az említett elegyet Cunningham kamrában 37 °C-on 3 és 12 óra közötti időtartamig tenyésztettük, a PFC-t megszámoltuk,

Mivel a PFC számában csökkenést figyeltünk meg, és a sejt életképessége a kontroliéval azonos volt, azt

194.261 állapítottuk meg, hogy az immunoglobulin-termelés visszaszorítása erősödött.

A találmány szerinti vegyületek a fenti két vizsgálatban kiváló hatást mutatták. Ennek megfelelően úgy tekintjük, hogy az inimunoglobulin-termelésl a visszaszorító T sejtek aktiválása csökkenti.

Eddig az elnyomó T sejtek működésének csökkenését autoimmun betegségekben, így például a kollagén betegség esetében figyelték meg. Ennek megfelelően a találmány szerinti N-szubsztituált neuraminsav-szánnazékok, amelyek az elnyomó T sejt működését aktiválják, a gyógyászatban feltehetően hatásosan alkalmazhatók az immunrendszer védekezőképességének beállítására.

A találmányt a következő, nem korlátozó jellegű példák szemléltetik.

1. példa

Metil-[metil-5-(N-benzil-oxo-karbonil-glicil-amino)· -3,5-didezoxí-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid ]-onát

3,0 g (0,01 mól) metil-[meti!-5-amino-3,5-dídezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopranozid]-nátot (II képletü vegyület), 2,13 g (0,01 mól) N-benzil-oxi-karbonil-glicint (III általános képletü vegyület) és 3,1 g (0,015 mól) diciklohexil-karbodiimidet 350 ml vízmentes piridinben oldunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 48 órán át keverjük. A kapott szuszpenziót szűrjük és a szürletet szárazra pároljuk. A maradékot kovasavgélen kromatografáljuk, eluálószerként kloroform és metanol 5:1 arányú elegyét alkalmazzuk, így 3,92 g (80%) színtelen amorf anyagot kapunk. A színtelen amorf anyag fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 190-193 °C;

Elemi analízis a CjíHjoNíOí,-víz 1(1,3 (509,89) összegképletre:

számított: C 49,47, H 6,44, N 5,49% talált: C 49,48, H 6,63, N 5,37% ’ ír: nüKBr cm'¹: 3350 (-OH, -NH), 1740 (-COOMe), max 1655 (-C-C0-NH-);

¹ H-NMRppm MHZ (DMSO-d, + DjO, TMS):

1,58 (IH, dd, J=12,2, Hz, J=10,8

Hz, 3H._X), 2,27 (IH, dd, J=12,2 Hz, J=4y Hz, 3H . „), 3,19 (3H, s,

2-OME); 3,77 (3H s -COOMe); 5,08 (2H,s, -C_ÓH₆-CH₂-);

7,39 (5H, s, fenil-protonok).

[alfa] 20 °C -29,6⁰ (c = 1, MeOH).

D

2. pélcta

Metil-[metil-5-(N-benzil-oxi-karboníl-glicil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid]-onát

Az 1. példában leírt eljárás követjükazzal az eltéréssel, hogy 1,15 g (3,9 mmól) II képletü vegyületet, 0,082 g (3,9 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-glicint és 1,21 g (5,85 mmól) diciklohexil-karbodiimidet 35 ml vízmentes dimetil-formamidban oldunk és 1,32 g (70%) terméket kapunk. A tennék fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 190-103 °C;

IR nüKBr cm'¹: 3350 (ΌΗ, -NH-), 1740 (-COOMe), max 1700 (-NH-COO-), 1655 (-C-CO-NH-);

¹ H-NMRppm MHz (DMSO-d$+CDClj +D_aO, TMS) 60 1,59 (IH, m, 3-H.J, 2,34 (IH, m,

1-H v_v), 3,24 (3H, s, 2-OMe), 3,77 l3H, s, -COOMe), 5,08 (2H, s, CiHj-CHjO), 735 (5H, s, fenil-protonok).

3. példa

Metil-[metU-5-(N-benzil-oxi-karbonil-glicil-amíno)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid]

-onát

1,0 g (3, 39 mmól) Π képletü vegyületet és 0,71 g (3, 39.mmól) III általános képletü vegyületet 30 ml vízmentes dimetil-formamidban oldunk és 0,31 ml N-etil-morfolint és 0,79 (4,41 mmól) N-hidroxi-5-norborén-23-dikarboximidet, majd ezt követően 0,91 g (4,41 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, és az elegyet 3 órán át 0 °C-on, majd 48 órán át szobahőmérsékleten keveijük. A kapott szuszpenziót szüljük, és a szürletet szárazra pároljuk. A maradékot kovasavgélen kromatografáljuk, klorofrom és metanol 5:1 arányú elegyét használva eluálószerként. így 1,35 g (82%) színtelen amorf anyagot kapunk. A termék fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 190-193 °C

Elemi analízisa CjjHjoNjO,! (486,47) összegképletre:

számított: C 51,85,H6,22,N5,76% talált: C 51,80, H 6,21,N 5,64%

IR nüKBr cm’¹: ’ 3350 (-OH, -NH-), 1740 ( COOMe),

1700 (-NH-COO-), 1655 (-C-CO-NH-).

¹ H-NMRppm (DMS0-d₆, TMS):

90MHz 1,52 (IH, dd, >12,2, Hz, J=10,8

Hz, 3H„ ), 2,19 (IH, dd, J=12,2 Hz, J=4,f Hz, 3H . ), 3,18 (3H, s, 2-OMe), 3,71 (¾ s, -COOMe), 5,04 (2H, s, C₆H₅-CHj-O-), 7,35 (5H, s, fenil-protonok).

4, példa

Metil-[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-L-alaníl-amino ) -3,5-didezoxí-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonuloprianozid]-onát

Az 1. példában leírt eljárást követjük, azzaz az eltéréssel, hogy 1,0 g (3,39 mmól) II képletü vegyületet, 0,76 g (3,9 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-L-alanint és 0,84 g diciklohexil-karbodiimidet 100 ml vízmentes piridinben oldunk, és 1,18 g (70%) színtelen amorf terméket kapunk.

Az anyag fizikai tulajdonságai:

Ovadáspont: 74-77 °C

Bomláspont: 193-195 °C

Elemi analízis a CuHjjNiOu (500,51) összegképletre:

számított: C 52,79, H 6,44, N 5,60% talált: C 52,77, H 6,42, N 5,58%

IR nüKBr cm'¹ 3350 (-OH, -NH-); 1740 (-COOMe) max 1700 (-NH-COO-); 1600 (-C-CO-ΝΗ-).

‘H-NMRppm (DMSO-d« + CDClj + D,O, TMS): 90MHz 1,40 (3H, d, >7,07 Hz, =CH-CH₃),

1,68 (IH, dd, >13,5 Hz, >10,8 Hz, 3-H.„), 238 (IH, dd, >13,5 Hz, J=4,9 Hz, 3-H,_tv), 3,26 (3H, s, 2-OMe), 3,73 (3H?s, -COOCHj),

194.261

5,05 (2Η, s, CjHj-CHj-O-), 7,29 (5H, s, fenil-protonok).

(alfa] 20 °C -29,9° (c = I, MeOH).

D

5. pdlda

Metil-[metU-5-(N-benzd-oxi-karbonil-L-alanil-amino)·

-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonuloprianozikl-onát

A 3. példában leírt eljárást követjük azzaz az eltéréssel, hogy 0,76 g (3,39 mmól)N-benzil-oxi-karbonil-L-aianint használunk N-bezil-oxi-karbonil-glicin helyett, és így 1,40 g (83%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 198-201 °C.

6. példa

Metil-[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-L-leucil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid]-onát

A 4. példában leírt eljárást követjük azzal az eltéréssel, hogy 0,9 g (3,39 mmöl) N-bezil-oxi-karbonil-L-leucint alkalmazunk B-benzií-oxi-karbonil-L-alanin helyett és az eluáláshoz kloroform és metanol 10:1 arányú elegyét használjuk, így 1,38 g (75%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonságai:

Olvadáspont: 76—81 °C

Bomláspont 156-158 °C

Elemi analízis a CjjHjjNjOu . 0,2 HjO (546,20) összegképletre:

számított: ’ C 54,98, H 7,08, N 5,13% talált: C 54,97, H 5,95, N 5,05%.

ÍRnüKBr cm'¹: 3375 (OH, -NH-), 1740 (-COOMe), max 1700 (-NH-COO-), 1655 (-C-CO-NH-).

‘H-NMRppm (DMSO-d₄ + CDC1₃ + D₂O, TMS): 90MHz 0,94 (6H, d,J=4,9Hz, -CH(CH₃)j),

2,37 (IH, dd, J=13,5 Hz, J= 5,4 Hz,

3-H . ), 3,27 (3H, s, 2-OME), 3,7s ^V(3H, s, COOCH₃), 5,09 (2H, s, C₆H_s-O-), 7,34 (5H, s, fenil-protonok).

[alfa] 20 °C -29,3⁶ (c = 1, MeOH).

D

A cím szerinti vegyületet más módon, az 5. példában leírtak szerint is előállítjuk azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 5,39 g N-benzil-oxi-karbonil-L-leucint, és 6,0 g II képletű vegyületet, 1,86 ml N-etil-morfolint és 4,74 g N-hidtoxi-5-norbpmén-23-dikarboximidet használunk. Így 7,7 g (70%] terméket kapunk, amelynek fizikai tulajdonságai a fentebb megadottakkal azonosak.

7. példa

Metil[metil-5-N-(benzil-oxi-karbonil-L-fenil-alanil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozidj-onát

A 4. példában leírt eljárás követjük azzaz az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 1,015 g (3,39 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-L-fenil-alanint használunk, és így 1,52 g (78%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonsága:

Olvadáspont: 75-80 ”C

Bomláspont: 168-170 °C

Elemi analízis a CjtH₃₄N_aOn (576,60) összegképletre:

számított: C 58,33, H 6,29, N4,86% talált-: C 58,32, H 6,17, N 4,83%,

IR nü KBr cm'¹:3375 (-OH, -NH-), 1735 max (-COOMe), 1700 (-NH-COO-), 1655 (-C-CO-NH-).

¹ H-NMRppm (DMSO-d₆ + D»O, TMS):

90MHz 1,55 (IH, dd, W2,5 Hz, J=10,8 s, 2OCH₃), 3,74 (3^ s, -COOCH,) 4,96 (2H, 2 C₆Hj-CH₂-O-).

[alfa] 20 ’C -22,8 (c = 1, MeOH).

D

A cím szerinti vegyületet az 5. példa szerinti eljárással is előállítjuk azzal az eltéréssel, hogy N-benzil•oxi-karbonil-L-alanin helyett 6,08 g N-benzil-oxi-karbonil-L-fenil-alanint, és 6,0 g 11 képletű vegyületet, 1,86 ml N-etil-morfolint és 4,74 g N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximidet használunk. így 8,4 g (72%) terméket kapunk, amelynek fizikai tulajdonságai a fentebb megadottakkal azonosak.

8. példa

Metil[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-L-szeril-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozik]0onát

A 4. példában leírt eljárást követjük azzal az eltéréssel, hogy az N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 0,81 g N-beznil-oxi-karbönil-L-szerint használunk, és így 1,33 g (76%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonságai a következők: Olvadáspont: 71—76 °C Bomláspont: 147-151 °C

Elemi analízis a Cj₂H_3JNjOij (516,51) összeképletre:

számított: C 51,16, H6.24.N 5,42% talált: C 51,13, H 61,7, N 5,46%.

IR nü KBr cm'¹ 33,75 (-OH, -NH-), 1740 max (-COOMe), 1700 (-NH-COO-), 1655 (-C-CO-NH-).

¹ H-NMRppm (DMSO-d₆ + Dj O, TMS): .

90MHz 1,51 (IH, dd, J=12,6 Hz, Ml,25

Jz, 3-H,,), 2,21 (IH, dd, 3=12,6 Hz, J=5jTHz, 3-H u_v), 3,17 (3H, s. 2-OCH₃), 3,72 (3h, s, -COOCH₃)’ 5,04 (2H, s, CjHj-CHj-O-), 7,37 (5H, s, fenil-protonok).

[alfa] 20 °C -22,63 (c = 1, MeOH).

D

A cím szerinti vegyületet az 5, példában leírtak szerint is előállítjuk azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 4,86 g N-benzil-oxl-karbonll-L-szerlnt, és 6,0 g II képletű vegyületet, 2,42 ml N-metil-morfolint és 4,73 g N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximidet használunk. 7,4 g (70%) terméket kapunk, amelynek fizikai tulajdonságai a fentebb megadottak azonosak.

9. példa

Metil-(metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-L-valiI-amino)·

194.26!

-3,5 ^hdezoxi-béta-D-glicero-D-gaIakto-2-nonulopiranozid)-onát'

A 4. példában leírt eljárást követjük azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 0,85 g (3,39 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-L-valint, és aluálószerként kloroform: metanol 10:1 arányú elegyet használunk, így 1,43 g (80%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonságai:

Olvadáspont:78-83 °C

Bomlás: 153-154 “C

Elemi analízis a Cj₄H₃₄N_aO_nh 0,4 H_aO (535,77) összegképletre:

számított: C 53,80,116,92, N 5,23% talált: C 53,83, H 6,81 ,N 5,18%.

IR nü KBr cm'¹ 33,75 ( OH, -NH-), 1730 max (-COOCHj), 1700 (-NH-COO-),

1650 (-C-CO-NH j.

¹ H-NMRppm (DMSO-d₆ + D₂O, TMS):

90MHz' 0,87-0,90 (6H, d, J=6,6 Hz,

-CH(CH₃)₂), 1,55 (IH, dd, J=12,7 Hz, J=10,9 Hz, 3-H ), 1,73-7,10 (IH, m, -ΟΗ(ΟΗ₃)ϊ)Γ2,23 (IH, dd, J--12,7 Hz, J=4,4 Hz, 3-H . ), 3,19 (3H, s, 2-OCH₃), 3,7? (3H, s, -COOCH₃), 3,19-3,91 (8H, m, szialil-H, =CH-CH(CH₃)j), 5,05 (2H, s, C₆H,-CH,-O-), 737 (5H, s, fenil-protonok).

[alfa] 20 °C - -26,2“ (c = 1, MeOH).

D

A cím szerinti vegyületet az 5. példa szerint is előállítjuk, azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 5,62 g N-benzil-oxi-karbonil-L-valint, és 6,0 g II képletű vegyületet, 2,35 ml N-etil-morfolin és 4,73 g N-hidrqxi-5-norbomén-20-dikarboximidet használunk. így 7,84 g (73%) terméket kapunk, amelynek fizikai tulajdonságai a fentebb megadottakkal azonosak.

10. példa

Metil(metil-3-(N-benzil-oxi-karbonil-L-metiorúl-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonuloplranozidj-onát

A 4 .példában leírt eljárás követjük azzal az eltéréssel, hogy N-beznil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 0,96 g (3,39 mmól) N-beznil-oxi-karbonll-Lmetionint, és eluálószerként kloroform metanol 1-0:1 arányú elegyét használunk. Így 1,48 g (78%) terméket kapunk.

A tennék fizikai tulajdonságai:

Olvadáspont:67-72 °C

Bomláspont: 170-177 °C

Elemi analízis a Cj4H₃₆NjOnS (560,63) összegképletre:

számított:C 51,42, H 6,47, N 5,00% talált: C 51,28, H 637,N4,97%.

IR nü KBr cm'¹ 3350 (-OH, -NH-), 1730 max (-COOCHj), 1700 (-NH-COO),

1650 (-C-CO-NH-).

¹ H-NMRppm (DMSO-d, + DjO, TMS):

1,56 (IH, dd, M2,7 Hz, J=U,0 Hz, 3-H.„), 1,71-2,00 (2H, m, CH₃SCHjCHj-), 2,04 (3H. s, CHj-S-), 2,25 (IH, dd, M2.7 Hz, m, CH₃CH₃OT₂-), 3,19 (3H, s,

2- OCHj), 3,75 (3H, S, -COOCH_S), 3,19-3,85 (8H, m, szialil-H, CH₃„CH_aCH_aCH=), 5,05 (2H, s, C₆HjCH₂-O-), 7,37 (5H, s, fenilprotonok).

[alfa] 20 “C -27,5 (c Π,MeOH).

D

A cím szerinti vegyületet az-5. példában leírtak szerint is előállítjuk azzal az eltéréssel, hogy N-benziloxi-karbonil-L-alanin helyett 5,76 g N-benzil-oxi-karbonil-L-metionint, és 6,0 g H képletű vegyületet, 235 ml N-etil-morfolint és 4,73 g N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximidet használunk. Így 8,1 g (71%) terméket kapunk, amelynek a fizikai tulajdonságai a fentebb megadottakkal azonosak.

11. példa

Metil-[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-glicil-amino)-3,5-didezoxi-4,7,8,9-tetra-O-acetil-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid)-onát

0,15 g (0,31 mmól) metil-[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-glicil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozidj-onátot 3 ml vízmentes piridinben oldunk, és 3 ml ecetsavanhidridet adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A kapott elegyet szűrjük, és a szürletet szárazra pároljuk. A maradékot kovasavgélen kloröform-metanol 30:1 arányú elegyével kromatografáljuk, lg}' 0,17 g (85%) színtelen amorf anyagot kapunk. Az anyag fizikai tulajdonságai:.

Olvadáspontja: 70-74 °C

Bomláspont: 130-160 °C

IRnü KBr cm'¹ 3370 (-NH), 1740 (-COOCHj), max ¹ H-NMRppm (CDC1-,, TMS):

90MHz 1,57-2,14 (13H, m, CH₃CO3- H.Λ 2,47 (IH, dd, 3=13,0 Hz, 1=5,27 Hz, 3-H„_kv), 3,23 (311, s, 2-OCHj), 3,80 (3H, s, -COOCH₃), 5,14 (2H, s, C,H_s-CH_a-O-), 3,61-5,50 (9H, m, -NHCH₂-CO-, sziatil-H), 5,62-6,62 (2H, br.s, -NH-), 735 (5H, s, fenil-protonok).

12. példa

MetÜ-[metil-5-(N-benzil-oxi-karbonil-D-alalnil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid]-onát

Az 5. példában leírt eljárást követjük - azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-alanin helyett 0,76 g N-benzil-oxi-karbonil-D-alanint és l,0g Π képletű vegyületet, 036 ml N-etil-inorfolint és 0,79 g N-hidroxi-5-norbomén-23-dikarboximidet használunk. így 1,2 g (70%) terméket kapunk.

A termék fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 209-213 °C

Elemi analízise Ci₂H₃₂N₂0n (500,51) összegképletre :

számított: C 52,79, H 6,44,N 5,60% talált: C 52,97,H6,40,N 5,73%.

IR nü KBr cm'¹:3400 (-OH, -NH-), 1740 max (-COOCHj), 1700 (-NH-COO).

¹ H-NMRppm (DMOS-d, + D₂ O, TMS):

194.261

90MHz 1,26 (3H, d, J=7,07 Hz, =CH-CH₃), 1,52 (IH, dd, J=13,0 Hz, J-10,8 Hz, 3-H ), 2,21 (IH, dd, J=13,0 Hz, Μ,5Ήζ, 3-H,. ), 3,18 (3H, s, 2-OCH₃), 3,74 (3¾ s, -CÖOCH₃), 5,04 (2H, s, C₆H₃-CH₃-O-), 707 5H, s, fenfl-protonok).

(alfa) 22,5 °C -12,91 (c = 1, MeOH).

D

13. példa

Metil-[nietil-5-{N-beiizil-O xi~karbonil-DL-alanil-amino )-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozid]-onát

Az 5. példában leírt eljárást követjük azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-Lalanin helyett 0,76 g N-benzil-oxi-karbonil-DL-alanint, és 1,0 g II képlett! vegyületet, 006 ml N-etil-morfolint és 0,79 g N-hidioxi-5-norbórnén-20-dikarboximidet használunk. így 1,25 g (74%) terméket kapunk.

A tennék fizikai tulajdonságai: ,

Bomláspont: 192-195 °C

Elemi analízis: Ci₃H₃jNj0u (500,51) összegképletre :

számított: C 52,79, H 6,44, N 5,60% talált: C 52,88, H 600, N 5,65%.

* H-NMRppm (DMSO-d_e + D₂O, TMS):

400MHz 1,218, 1,223 (6H, d, J=7,l0 Hz, =CH-CH₃), 1,503 (IH, m, 3-Η.Λ 2,161 (IH, m, 3-H ^), 3,1%Ő 3,176 (3H, s, 2-OCHiX 4,045 4,142 (lH,m, =CH-CH₃).

IR nü KBr cm’¹ 3400 (-0H, -NH-), 1740 max (-COOCH₃), 1700 (-NH-COO-),

1660 (-C-CO-NH-).

14. példa

Metil[metil-5-(N-benzil-oxi-D-valil-amino)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulópiranozid]-onát

Az 5. példában leírt eljárás követjük azzal az eltéréssel, hogy N-benzil-oxi-karbonil-L-aianin helyett 0,43 g N-behzil-oxi-karbonil-D-valmt és 0,5 g II képletű vegyületet, 0,18 ml N-etil-morfolint és 0,40 g N-hidroxi-5-norbomén-20-dikarboximidet haszná10 lünk. így 627 mg (70%) terméket kapunk.

A tennék fizikai tulajdonságai:

Bomláspont: 229-231'*C *

Elemi analízis a Cj4H_3eN₃0u (528,56) összegképletre:

számított: C 54,54, H 6,87, N 500% talált: C54,61,H6,72,N5,44%.

IR nil KBr cní¹ 3400 ( OH, -NH-), 1740 max (-COOCHj), 1700 (-NH-COO-).

[alfa] 25,6 °C-33,8° (c = 1, DMF).

Claims

Szabadalmi igénypontok ³ 1, Eljárás a I általános képletű N-szubsztituált neuramtnsav-származékok — a képletben R^l hidrogénatom vagy acetilcsoport és A -NH-CHRí-CO- általános képletű aminosav-maradék, amelyben hidroxi-alkilcsoport, 1-6 szénato20 mos tioalkil-csoport, vagy fenil-(l-4 szénatomos)-alkil-csoport, és a csillaggal jelölt szénatom aszimetrikus-, valamint izomerjeik előállítására, azzal jellemezve, hogy olyan I általános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében R^f hidrogénatom,

25 a II képletű neuraminsavat egy III általános képletű N-(benzll-oxi-karbonil)-aminosav-származékka] - R²a fenti jelentésű - kapcsolunk, majd kívánt esetben egy így kapott I .általános képletű vegyületet acetilezzünk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal j e 1 30 Ismerve, hogy a kapcsolást diciklohexil-karbodiimid jelenlétében vízmentes- piridin vagy dimetil-fromamid oldószerben végezzük.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az acetilzést vízmentes piridinben ecetsavanhidriddel végezzük.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás olyan I általános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében az A jellel képvisel csoportban R² jelentése hidrogénatom, metil-. izopropil-, izobutil-, szek-butil-, benzil-, hidroxi-metil-, 1-hidroxi40 -etil- vagy merkapto-metil-csoport, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyűleteket reagáltatunk.