HRP980171A2 - Therapeutic naphthalene derivatives - Google Patents

Description

Ovaj izum se odnosi na novu klasu kemijskih spojeva i na njihovo korištenje u medicini. Još preciznije, ovaj izum se odnosi na nove naftalenske derivate, na postupke za njihovo dobivanje, na farmaceutske preparate koji ih sadrže i na njihovu primjenu kao selektivnih agonista na netipične �-adrenoreceptore (koji su također poznati kao �-3-adrenoreceptori). Takvi receptori opisani su na primjer, od strane J. R. S. Arch, i dr.: "Nature", 309, 163-165, (1984.); C. Wilson, i dr.: "Eur. J. Pharmacol.", 100, 309-319, (1984.); L. J. Emorine: "Science", 245, 1118-1121, (1989.); i A. Bianchetti, i dr.: Br. "J. Pharmacol.", 100, 831-839, (1990.). Fenetanol-aminski derivati koji imaju aktivnost netipičnih �-adrenoreceptora opisani su u, na primjer, Evropskim patentnim prijavama EP-A-0455006 i EP-A-0543662.

Netipični �-adrenoreceptori pripadaju familiji adrenorecptora koji uvjetuju fiziološka djelovanja hormona adrenalina i noradrenalina. Subtipovi adrenoreceptora, �1-, �2-, �1- , �2- i �3-(netipični) mogu identificirati na bazi njihovih farmakoloških osobina i fizioloških efekata. Kemijski agensi koji stimuliraju ili blokiraju ove receptore (ali ne i �3) široko su primjenjivani u kliničkoj medicini. Od nedavno, pažnja je usmjerena na specifičnu receptorsku selektivnost u cilju reduciranja sporednih efekata koji su izazvani putem interakcija sa drugim receptorima.

Netipični �-adrenoreceptori poznato je da se javljaju u adiposnom tkivu i u gastrointestinalnom traktu.

Agonisti netipičnih �-adrenoreceptora nađeno je da su naročito primjenjivi kao termogena sredstva protiv ugojenosti i kao antidiabetska sredstva. Spojevi koja posjeduju agonsitičku aktivnost netipičnog �-adrenoreceptora također su primjenjivi u tretiranju hiperglikemije, kao promotori animalnog rasta, kao inhibitori agregacije krvnih pločica, kao pozitivna inotropična sredstva i kao antiaterosklerotična sredstva, i primjenjivi su u tretiranju glaukoma.

Izum stoga opisuje, u prvom aspektu, spojeve formule I:

[image]

gdje

grupe N(R3) i R4 su razdvojene sa bar 4 ugljična atoma prstena;

R1 predstavlja fenil, naftil, fenoksi metil, tiazolil, piridil ili pirimidil grupu koja je po izboru supstituirana sa jednim ili više supstituenata odabranih iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil, trifluoro metil, NR6R7 i NHSO2R6;

R2 predstavlja vodik ili C1-6 alkil;

R3 predstavlja vodik ili C1-4 alkil;

R4 predstavlja CO2R6 ili SO3H;

R5 predstavlja jednu ili više grupa koje se svaka nezavisno bira iz grupe koja obuhvaća vodik, C1-6 alkil, halogen, trifluoro metil i C1-6 alkoksi;

n predstavlja cijeli broj od 1 do 6;

R6 i R7 svaki nezavisno predstavlja vodik ili C1-4 alkil;

ili njihove farmaceutski prihvatljive derivate.

Poželjna subklasa spojeva formule I predstavljena je pomoću spoja formule Ia:

[image]

gdje

grupe N(R3) i R4 su razdvojene sa bar 4 ugljična atoma prstena;

R1 predstavlja fenil, naftil, piridil ili pirimidil grupu koja je po izboru supstituirana sa jednim ili više supstituenata odabranih iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil, trifluoro metil, NR6R7 i NHSO2R6;

R2 predstavlja vodik ili C1-6 alkil;

R3 predstavlja vodik ili C1-4 alkil;

R4 predstavlja CO2R6 ili SO3H;

R5 predstavlja jednu ili više grupa koje se svaka nezavisno bira iz grupe koja obuhvaća vodik, C1-6 alkil, halogen, trifluoro metil i C1-6 alkoksi;

n predstavlja cijeli broj od 1 do 6;

R6 i R7 svaki nezavisno predstavlja vodik ili C1-4 alkil;

ili njihovim farmaceutski prihvatljivim derivatima.

Sa obzirom na opću formulu I, termin "alkil" kako je korišteno ovdje sadrži odgovarajuće naznačeni broj atoma ugljika i odgovarajuće uključuje alkil grupe normalnog lanca, na primjer, metil i etil grupe i propil i butil grupe normalnog i razgranatog lanca. Slično, termin "alkoksi" uključuje grupe normalnog, ali i grupe razgranatog lanca.

S obzirom na opću formulu (I), halogen uključuje, fluor, klor, brom i jod.

Prikladno R1 predstavlja fenil koji je po izboru supstituiran sa 1 do 3 supstituenta koji se biraju iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil i trifluoro metil. Poželjno R1 predstavlja fenil supstituiran sa atomom klora, fluora, broma ili sa grupom metil ili trifluorometil, gdje je ovaj atom ili grupa poželjno locirana u meta položaju. Još poželjnije, R1 predstavlja fenil supstituiran sa atomom klora koji je lociran u meta položaju.

R2 je prikladno vodik ili metil;

R3 je prikladno vodik ili metil. R3 je poželjno vodik.

R4 je prikladno CO2H ili SO3H. Poželjno R4 je CO2H.

R5 je prikladno vodik.

Daljnja poželjna subklasa spojeva formule I predstavljena je sa spojem formule Ib:

[image]

gdje

naftil amino grupa i grupa R4 su razdvojene sa bar 4 ugljična atoma prstena;

R2 predstavlja vodik ili C1-6 alkil;

R4 predstavlja CO2H ili SO3H;

ili njihovim farmaceutski prihvatljivim derivatima.

Ovdje se podrazumijeva da se daljnja spominjanja spojeva formule I podjednako odnose i na spojeve formula Ia i Ib.

Sasvim je razumljivo da gornji spojevi formule I mogu sadržavati optički aktivne centre. Individualni, izolirani izomeri i njihove smjese uključujući i racemate, u obimu su zaštite opisanog izuma. Obično se mogu dobiti smjese diastereomera spojeva formule I koje su obogaćene sa ili sadrže više od 80 masenih % jednog diastereomera. Naročito poželjni spojevi formule I su oni u kojima asimetrični atomi ugljika u grupama CH(OH)- i -CH(R2)- su oba u (R)-konfiguraciji.

Poželjni spojevi formule I opisanog izuma obuhvaćaju slijedeće spojeve:

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-1-sulfonska kiselina

7-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

5-{2-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-etil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-1-karboksilna kiselina

5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina

Metil 5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]}-naftoat

Metil 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]}-naftoat;

i njihove farmaceutski prihvatljive derivate.

Poželjni spojevi izuma obuhvaćaju i slijedeće spojeve:

5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina;

i njene farmaceutski prihvatljive derivate.

Pod terminom "farmaceutski prihvatljivi derivat" podrazumijeva se neka farmaceutski prihvatljiva sol, ester ili sol takvog estera spoja formule I ili neki drugi spoj, koje posle primjene kod recipienta može osigurati (direktno ili indirektno) spoj formule I ili njegov metabolit ili ostatak.

Stručnjak u ovoj oblasti razumjeti će da se spojevi formule I mogu modificirati na nekoj od svojih funkcionalnih grupa, radi dobivanja njihovih farmaceutski prihvatljivih derivata. Od posebnog su interesa u ovom slučaju spojevi koji su modificirani na karboksilnoj funkciji, na hidroksilnim funkcijama ili na amino grupama.

Stručnjaku u ovoj oblasti biti će jasno da farmaceutski prihvatljivi derivati spojeva formule I mogu biti derivatizirani na više (ne samo na jednom) položaja.

Poželjni farmaceutski prihvatljivi derivati spojeva formule I su njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Farmaceutski prihvatljive soli spojeva formule I uključuju one soli koje su izvedene iz farmaceutski prihvatljivih neorganskih i organskih kiselina i baza. Primjeri prikladnih kiselina uključuju klorovodičnu, bromovodičnu, sumpornu, dušičnu, perklornu, fumarnu, maleinsku, fosfornu, glikolnu, mliječnu, salicilnu, sukcinsku, toluen-p-sulfonsku, vinsku, octenu, limunsku, metansulfonsku, mravlju, benzoevu, malonsku, naftalen-2-sulfonsku i benzensulfonsku kiselinu. Druge takve kiseline kao što su oksalna, koje same nisu farmaceutski prihvatljive, mogu se koristiti u dobivanju soli koje su primjenljive kao intermedijeri u dobivanju spojeva izuma i njihovih farmaceutski prihvatljivih adicijskih soli sa kiselinama.

Soli izvedene iz odgovarajućih baza uključuju soli alkalnih metala (na primjer soli natrija), zemno alkalnih metala (na primjer soli magnezija), soli amonija i NR4+ (gdje R je C1-4 alkil).

Spojevi formule I djeluju kao agonisti na netipične �-adrenoreceptore i kao takvi su primjenjivi u tretiranju kliničkih stanja koja su podložna poboljšavanju pri primjeni agonsita netipičnih �-adrenoreceptora. Takva stanja obuhvaćaju slijedeća stanja: hiperglikemija, ugojenost, hiperlipemija, sindrom iritiranja bešike i sa tim vezani bolovi, disfunkcija pokretljivosti, suvišna trbušna sekrecija, nespecifična diaroeja, neurogena inflamacija, regulacija intraokularnog tlaka, trigliceridemija, diabetis, na primjer, neinsulinski zavisni diabetis mellitus (NIDDM ili Tip II), takvi kao ugojenost NIDDM ili neugojenost NIDDM, komplikacije diabeta takve kao što su retinopatija, nefropatija, neuropatija, katarakte, koronarna srčana oboljenja i areterioskleroza, osteoporoza i gastrointestinalni poremećaji, naročito inflamatorni gastrointestinalni poremećaji. Ova spojevi su također primjenjivi za povećanje koncentracije lipoproteinskog (HDL) holesterola visoke gustoće (HDL) i smanjenje koncentracije triglicerida u krvnom serumu, naročito u ljudskom krvnom serumu, i stoga su potencijalno primjenjivi u tretiranju i/ili profilaksi ateroskleroze. Ovi spojevi također mogu biti primjenjivi u tretiranju hiperinslulinemije, depresije, gubitka mišića i urinarne inkontinence.

Stoga, opisani izum osigurava, kao dalji aspekt, postupak za tretiranje sisavaca, uključujući i čovjeka koji pati od stanja koje podleže poboljšanju pri primjeni netipičnog �-adrenoreceptorskog agonista, koji obuhvaća primjenu kod takvog subjekta efikasne količine spoja opće formule I ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.

Reference u ovoj specifikaciji za tretiranje uključuju profilaktički tretman, isto kao i ublaživanje simptoma.

U daljnjem aspektu, izum osigurava korištenje spoja opće formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, za proizvodnju medikamenta za tretiranje stanja koje je podložno poboljšanju pri korištenju agonista netipičnog �-adrenoreceptora.

Mada je moguće da, za primjenu u terapiji, spoj izuma bude primijenjen u obliku sirove kemikalije, poželjno je da bude primijenjen u obliku aktivnog sastojka u farmaceutskoj formulaciji.

Tako izum dalje osigurava farmaceutsku formulaciju koja obuhvaća spoj formule I ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i, po izboru, zajedno sa drugim terapeutskim i/ili profilaktičkim sastojcima. Nosač(i) ili ekscipinet(i) mora biti "primjenljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i da ne bude štetan za svog recipienta.

Tako, spojevi za primjenu prema opisanom izumu mogu biti formulirani za oralnu, bukalnu, parenteralnu, rektalnu ili transdermalnu primjenu, ili u obliku za primjenu pomoću inhalacije ili insuflacije (bilo preko usta ili nosa).

Za oralnu primjenu, farmaceutski preparati mogu biti u obliku, na primjer, tableta ili kapsula koje se dobivaju na uobičajen način sa farmaceutski prihvatljivim ekscipientima takvim kao što su vezujuća sredstva (na primjer pregelirani kukuruzni škrob, polivinil pirolidon ili hidroksi propil metil celuloza); punila (na primjer laktoza, mikrokristalna celuloza ili kalcij bisfosfat); maziva (na primjer magnezij stearat, talk ili silicij dioksid); dizintegranti (na primjer krumpirni škrob ili natrij škrobni glikolat); ili kvašljiva sredstva (na primjer natrij lauril sulfat). Tablete mogu biti presvučene pomoću postupaka koji su dobro poznati u tehnici. Tekući preparati za oralnu primjenu mogu biti, na primjer, u obliku otopina, sirupa ili suspenzija, ili mogu biti prisutni u obliku suhog proizvoda za pripremu sa vodom ili sa drugim prikladnim nosačem prije primjene. Takvi tekući preparati mogu se dobiti na uobičajeni način sa farmaceutski prihvatljivim aditivima, takvim kao što su suspendirajuća sredstva (na primjer sorbitol sirup, derivati celuloze ili hidrogenizirane jestive masti); emulgirajuća sredstva (na primjer lecitin ili akacia); nevodeni nosači (na primjer bademovo ulje, uljni esteri, etil alkohol ili frakcionirana biljna ulja); i konzervansi (na primjer metil ili propil-p-hidroksibenzoati ili sorbinska kiselina). Ovi preparati mogu također sadržavati odgovarajuće puferske soli, aromatična i zaslađivačka sredstva, te sredstva za bojenje.

Preparati za oralnu primjenu mogu biti prikladno formulirani radi osiguravanja kontroliranog oslobađanja aktivnog spoja.

Za bukalnu primjenu preparati mogu biti u obliku tableta ili lozengi koji se formuliraju na uobičajeni način.

Spojevi prema opisanom izumu mogu biti formulirana za parenteralnu primjenu pomoću injekcije, na primjer pomoću velike injekcije ili neprekidne infuzije. Formulacije za injekciju mogu biti prisutne u jediničnom doznom obliku, na primjer u ampuli ili u multidoznim kontejnerima, sa dodatnim konzervansom. Preparati mogu biti prisutni u takvom obliku kao što su suspenzije, otopine ili emulzije u uljnim ili vodenim nosačima, i mogu sadržavati formulacijska sredstva, takva kao što su suspendirajuća, stabilizirajuća i/ili dispergirajuća sredstva. Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku praha za miješanje sa prikladnim nosačem, tj. sa vodom bez pirogena, prije primjene.

Spojevi prema opisanom izumu mogu također biti formulirani u rektalne preperate, takve kao što su supozitorije ili retencijski klistiri, to jest one koji sadrže uobičajene supozitorijske baze, takve kao što su kakaov putar ili drugi gliceridi.

Dodatno za formulacije koje su opisane naprijed, spojevi mogu također biti formulirani u obliku depo preparata. Takve dugo djelujuće formulacije mogu biti primjenjivane i putem implatacije (na primjer subkatanozno, transkatanozno ili intramuskularno) ili putem intramuskularne injekcije. Tako, na primjer, spojevi prema opisanom izumu mogu biti formulirani sa prikladnim polimernim ili hidrofobnim materijalima (na primjer kao emulzija ili prihvatljivo ulje) ili iono-izmjenjivačkim smolama ili kao slabo otopljivi derivati, na primjer kao slabo otopljiva sol.

Prikladni terapeutski sastojci koji mogu biti formulirani sa spojevima izuma, zajedno sa jednim ili više farmaceutskih nosača ili ekscipijenata, uključuju sastojke koji se mogu koristiti u istim kliničkim stanjima kao ona koja su navedena ovdje za netipične �-adrenoreceptorske agoniste. Takvi sastojci mogu uključivati, na primjer (-PRAR agoniste.

Predložena doza spojeva prema opisanom izumu za primjenu kod ljudi (tjelesne mase od oko 70 kg) je 0,1 mg do 1 g, poželjno od 1 mg do 100 mg aktivnog sastojka po jediničnoj dozi, izraženo kao masa slobodne baze. Jedinična doza može se primijeniti, na primjer, 1 do 4 puta dnevno. Doza će zavisiti od načina primjene. Jasno je da je potrebno načiniti rutinske varijacije doze, zavisno od starosti i mase pacijenta, isto kao i od ozbiljnosti stanja koje se tretira.

Precizna doza i način primjene isključivo će biti diskrecijsko pravo ljekara ili veterinara.

Spojevi opisanog izuma mogu se dobiti pomoću postupaka koji su poznati u tehnici za dobivanje sličnih spojeva. Na primjer, prema prvom postupku (A), gdje R1, R2, R3, R5 i n su kao što je definirano za formulu I, spojevi formule I mogu se dobiti iz spojeva formule II:

[image]

gdje P1 i P2 su prikladne zaštitne grupe za kisikove i dušične grupe respektivno, R4 je CO2R6 ili SO3H i R6 je C1-6 alkil, pomoću uklanjanje zaštita P1 i P2 pod prikladnim uvjetima, takvim kao što je tretiranje sa kiselinom, na primjer, sa vodenom otopinom klorovodične kiseline u prikladnom otapalu, takvom kao što je dioksan.

Prema slijedećem postupku (B), spojevi formule I mogu se dobiti iz drugih spojeva formule I. Na primjer, spoj formule I gdje R6 je H, može se dobiti iz spoja formule I gdje R6 je C1-6 alkil, putem hidrolize, na primjer bazna hidroloza sa reagensom takvim kao što je litij hidroksid, u otapalu takvom kao što je tetrahidrofuran.

Spojevi formule II mogu se dobiti pomoću reakcije spoja formule III sa spojem formule IV:

[image]

gdje P1 i P2 su prikladne zaštitne grupe za kisikove i dušične grupe respektivno, R4 je CO2R6 ili SO3H i R6 je C1-6 alkil u prisustvu redukcijskog sredstva.

Prema slijedećem postupku (C) dobivanje spojeva formule II, kao što je definirano naprijed, praćeno sa stupnjem (A), može se vršiti bez pročišćavanja intermedijernih proizvoda.

Spojevi formule III opisani su u WO95/33724, i kao što je opisano ovdje.

Spojevi formule IV poznati su spojevi, ili se mogu dobiti pomoću standardnih postupaka.

Na primjer, kada spoj formule IV je 5-amino-2-naftoat ester, ovaj se može dobiti iz spoja formule V:

[image]

gdje R5 i n su kao što je definirano naprijed i R6 je C1-4 alkil, pomoću reakcije sa benzilaminom i cezij karbonatom u prisustvu prikladnog katalizatora (ili više katalizatora), na primjer (R)-(+)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil i tris(dibenziliden aceton) dipaladij (0), što je dalje praćeno prikladnom redukcijom, na primjer, sa hidrogenizacijom benzil grupe.

Spojevi formule V su poznati spojevi ili se mogu dobiti pomoću standardnih postupaka, na primjer vidi "Aust. J. Chem.", 18, 1351-64, (1965.).

Alternativno, spoj formule IV koji je 5-amino-naftoat ester može se dobiti iz spoja formule VI:

[image]

gdje R5 i n su kao što je definirano naprijed, a P3 predstavlja prikladnu primarnu dušičnu zaštitnu grupu, na primjer izoindol, pomoću reakcije sa ugljičnim monoksidom, pod tlakom i na povišenoj temperaturi, na primjer 100 °C, u prisustvu prikladnog katalizatora ili više katalizatora, takvih kao što su paladij (II) acetat i 1,1'-bis(difenilfosfino)-ferocen i litij klorid, u prikladnom otapalu, takvom kao što su trietilamin i metanol, što je dalje praćeno sa uklanjanjem zaštite amino zaštitne grupe pod prikladnim uvjetima, na primjer hidarzin u metanolu na povišenoj temperaturi.

Spoj formule VI može se dobiti iz odgovarajućeg 5-amino-2-naftola pomoću sekvencijske reakcije sa prikladnim reagensom, takvim kao što je ftalni anhidrid u prikladnom otapalu, takvom kao što je N,N-dimetilacetamid što je dalje praćeno reakcijom sa trifluorometan sulfonskim anhidridom i treietil aminom u prikladnom otapalu, takvom kao što je diklorometan.

Prikladna redukcijska sredstva za korištenje u reakcijama uključuju vodik u prisustvu katalizatora, takvog kao što je katalizatorski plemeniti metal, na primjer paladij, platina ili platina oksid, Raney-nikl ili hidridna redukcijska sredstva, takva kao što su borohidridi, na primjer natrij borohidrid, natrij triacetoksi borohidrid ili natrij ciano borohidrid. Prikladni reakcijski uvjeti biti će sasvim poznati stručnjaku u ovoj oblasti i dalje su ilustrirani u priloženim primjerima.

Zaštitne grupe koje su korištene u dobivanju spojeva formule I mogu se koristiti na uobičajeni način. Vidi na primjer J. F. W. McOmie: "Protective Groups in Organic Chemistry", izdanje Plenum Press, (1973.); ili Teodora W Greene i P. M. G. Wuts: "Protective Groups in Organig Synthesis", izdanje John Wiley and Sons, (1991.).

Uobičajene amino zaštitne grupe mogu uključiti, na primjer, takve grupe kao što su benzil, difenilmetil ili trifenilmetil grupe; i acil grupe takve kao što su benziloksikarbonil i t-butoksikarbonil.

Uobičajene kisikove zaštitne grupe mogu uključiti, na primjer, alkil silil grupe, takve kao što su trimetilsilil i terc-butildimetilsilil; alkiletre takve kao što su tetrahidropiranil ili terc-butil; ili estere, takve kao što je acetat.

Uklanjanje neke prisutne zaštitne grupe može se izvršiti pomoću uobičajenih procedura.

Netipični �-adrenoreceptorski agonisti su spojevi koja pokazuju farmakološki odgovor razvijen na netipične �-adrenoreceptore. Ova aktivnost je mjerena kao sposobnost za stimuliranje lipolize pomoću adipocita štakora pri submikromolarnim koncentracijama, u odgovoru koji je rezistentan na blokadu pomoću standardnih blokirajućih lijekova �-adrenoreceptora, takvih kao što je propranolol.

Drugi primjenjiv način za identificiranje netipičnog �-adrenoreceptorskog agonist obuhvaća mjerenje agonističke aktivnosti na netipične �-adrenoreceptore u izoliranom esofagusu štakora. Tipično u ovom ispitivanju, spoj opće formule I za primjenu prema opisanom izumu ima ekvipotenetni molarni odnos (EPMR) u odnosu na izoprenalin manji od 30. Ispitivanje esofagusa štakora bazirano je na načinu opisanom od strane Ford, i dr.: "Br. J. Pharmacol.", 105 (dopuna). str. 235, (1992.).

Naročito primjenjiv način za određivanje agonističke aktivnosti na ljudske netipične �-adrenoreceptore obuhvaća korištenje stanica jajnika kineskog hrčka (Chinese hamster) (CHO) koje su bile inficirane sa ljudskim �-3-adrenoreceptorom prema postupku 1. Stanične linije također mogu biti inficirane sa ljudskim �-2 adrenoreceptorom na sličan način, radi osiguravanja postupka za određivanje selekltivnosti spojeva izuma na sva tri receptora.

Postupak 1

Praćena su opća uputstva za staničnu kulturu (Fershney R. A.: "Culture of animal cells; A manual of basic technique", izdanje Wiley-Liss, Inc., N.Y., (1987.)). Korišten je standardni inkubator za staničnu kulturu (37°C, 5 % CO2 u zraku, 95 % relativna vlažnost). H �3 CHO stanice odgajane su u DMEM/F12 sredini (koja sadrži piroksidin HCl, 15 mM HEPES, L-glutamin), koja je dopunjena sa 10 % toplinski-neaktivnog FBS-a, 500 µg/ml G418, 2mM L-glutamina, 100 jedinica penicilina G i 100 g streptomicin sulfata. U gornju sredinu pri koncentraciji od 30-40000 stanica/100 ul tripsinirana je i resuspendirana jedna ulijevajuća boca stanica, pa je nanesena na dno okana ploča sa 96 okaca. Stanice se tada koriste za ispitivanje tokom 18-24 sata.

Esperimentalni postupak

Sredina se usisa iz svakog okca i zamijeni se sa 180 :l DMEM/F12 sredine koja sadrži 500 mM IBMX. U ovom stupnju dodaju se antagonisti, ako je zahtjevano. Ploča se tada vrati natrag u inkubator na 30 minuta. U okna se tada dodaju lijekovi (20 µl, 100 × zahtjevana konačna koncentracija) tokom 60 minuta. Odgovori se određuju pomoću mjerenja cAMP nivoa 20 ul uzorka ekstra stanične sredine uz korištenje scintilacijske okoline bazirano na radio-imunološkom ispitivanju (NEN Flashplates).

CHO-6CRE-luciferasne stanične linije koje stabilno vrše ekspresiju h�3 receptora, posijane su pri koncentraciji od 30000 stanica/oknu tokom 24 sata u DMEM/F12 koja sadrži 10 % FBS. Sredina se odvoji od ćelija i zamijeni sa DMEM/F12 puferom (180 µl) koji sadrži 300 mM IBMX i 1 mM askorbinske kiseline na 30 minuta prije dodatka spoja. Nosač ili agonist (20 µl) se doda i inkubira na 37 °C tokom 60 minuta. Pri kraju inkubacijskog perioda, uzmu se uzorci ekstra stanične sredine radi direktnog ispitivanja u cAMP Flashplates (NEN).

Relativna sposobnost svakog testiranog agonista (EPMR) uspoređuje se sa onom za isoprenalin na slijedeći način:

[image] .

Uz korištenje isoprenalina kao agonista neselektivnog �-adrenoreceptora kao referentnog agonista, spojevi selektivni za netipične �-adrenoreceptore trebaju poželjno biti minimalno 10-30 puta manje sposobni od isoprenalina na �1 ili �2-adrenoreceptore, i još poželjnije 300-1000 puta manje sposobni od isoprenalina na �1 ili �2-adrenoreceptore. Dodatno po svojoj aktivnosti na netipični �-adrenoreceptor, za spojeve opisanog izuma pokazano je da su vrlo selektivni za �-adrenoreceptor za razliku od svoje selektivnosti za �1- ili �2-adrenoreceptore.

Izum je dalje ilustriran pomoću slijedećih intermedijera i primjera. Sve temperature su date u stupnjevima Celzijusa (°C).

HPLC karakterizacija izvršena je uz korištenje Dynamax-60A C18 83-201-C, 25cm × 4,6mm kolone, koja se eluira sa 5-40 % smjesom CH3CN u vodi sa 0,1 % TFA puferom, sa vremenskim programiranjem na 30,0 minuta i brzinom toka od 1,5 ml/min). Retencijska vremena izražavana su kao tr u minutama.

Vrijednosti optičke rotacije izražavane su kao [�]D vrijednosti.

Maseni spektri dobiveni su uz korištenje elktrosprejne analize (pozitivan ili negativan ion).

Intermedijer 1

Metil ester (R)-(3-kloro-fenil)-hidroksi-octene kiseline

Otopina (R)-(3-kloro-fenil)-hidroksi-octene kiseline (19,98 g) u metanolu (250 ml) koji sadrži koncentriranu sumpornu kiselinu (1 ml) zagrijava se pod refluksom tokom 6,5 sati. Otopina se ohladi, neutralizira se sa vodenom otopinom natrij karbonata i koncentrira se. Otopina se rastvori u etil acetatu, ispere se sa vodenom otopinom natrij bikarbonata, osuši se i ispari, radi dobivanja spoja iz naslova (21,13 g) u obliku blago žutog ulja.

[�]D= -104 ° (c 1,00 MeOH).

Intermedijer 2

Metil ester (R)-(3-kloro-fenil)-(terc-butil-dimetil-silanoksi)-octene kiseline

Otopina metil estera (R)-(3-kloro-fenil)-hidroksi-octene kiseline (21,0 g) u imidazolu (14,25 g) i terc-butildimetilsilil klorida (25,0 g) u N,N-dimetilformamidu (250 ml) miješa se na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Smjesa se sipa u vodu i ekstrahira se sa etil acetatom. Sjedinjeni ekstrakti se isperu sa vodom i sa zasićenom slanom otopinom, osuše se i koncentriraju. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije uz eluiranje sa smjesom cikloheksan : etil acetat (9:1) radi dobivanja spoja iz naslova (32,63 g) u obliku bezbojnog ulja.

[�]D= -55,4 ° (c 1,21 MeOH).

Intermedijer 3

(R)-(3-kloro-fenil)-(terc-butil-dimetil-silanoksi)-acetaldehid

U otopinu metil estera (R)-(3-kloro-fenil)-(terc-butil-dimetil-silanoksi)-octene kiseline (4,0 g) u anhidriranom eteru (10 ml) koji se održava na temperaturi nižoj od -60 °C, doda se ukapavanjem 1,5 M otopina di-izobutilaluminij hidrida u toluenu (10 ml). Kada se dodavanje završi otopina se miješa na -65 °C tokom slijedećih 1 sat, a tada se radi zaustavljanja reakcije tretira sa etanolom (100 ml). Smjesa se ostavi da dostigne sobnu temperaturu, absorbira se na silicij dioksidu i pročišćava se pomoću kromatografije uz eluiranje sa smjesom cikloheksan : etil acetat (9:1), radi dobivanja spoja iz naslova (3,09 g) u obliku bezbojne tekučine.

[�]D= -45,3 ° (c 1,50 MeOH).

Intermedijer 4

Metil ester 5-amino-2-naftalen karboksilne kiseline (i)

Otopina metil-2-naftoata (10,00 g) u octenoj kiselini (54 ml) miješa se na 0 °C i doda se nitronij tetrafluoroborat (7,13 g). Otopina se miješa na 0 °C tokom 1 sata i tada tokom 3 sata na sobnoj temperaturi. Smjesa se razblaži sa vodom i tada se ekstrahira sa kloroformom. Organski sloj se ispere sa zasićenom vodenom otopinom natrij bikarbonata, osuši se sa MgSO4, profiltrira se i ispari. Ostatak se kromatografira na silikagelu, eluira se sa smjesom etil acetat : heksan (1:9) radi dobivanja smjese metil estera nitro-naftalen-2-karboksilne kiseline. Smjesa se suspendira u metanol (365 ml) i miješa se uz dodavanje 10 % paladija na ugljiku (1,05 g). Dobivena smjesa se miješa pod atmosferom vodika tokom 18 sati i tada se profiltrira kroz Celite umetak i ispari. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu uz eluiranje sa smjesom cikloheksan : etil acetat (1:4), i tada se rekristalizira iz metanola radi dobivanja spoja iz naslova (1,005 g).

Nađeno ispitivanjem: C 71,72; H 5,58; N 6,97.

C12H11NO2 zahtjeva: C 71,63; H 5,51; N 6,96 %.

Intermedijer 5

2-(6-hidroksi-1-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-dion

Otopina 5-amino-2-naftola (25,24 g) i ftalnog anhidrida (24,66 g) u N,N-dimetil acetamidu (200 ml) miješa se na 172 °C pod duškom tokom 3,5 sata. Reakcijska smjesa se tada koncentrira na 50 °C i 0,3 tora, a u dobiveni tamno crveni ostatak doda se metanol (600 ml). Smjesa se tretira ultrazvučno i zagrijava, što dovodi do formiranja kristalne čvrste supstance. Smjesa se tada ohladi na 0 °C i kristalna čvrsta supstanca se izolira pomoću filtriranja, i ispire se sa metanolom (50 ml). Tada se osuši pod vakuumom radi dobivanja spoja iz naslova u obliku bezbojne čvrste supstance (18,96 g). Filtrat se koncentrira i tada se spraši sa metanolom (200 ml), radi dobivanja drugog prinosa posle filtriranja i sušenja pod vakuumom (18,56 g).

Nađeno ispitivanjem: C 74,44; H 3,94; N 4,96.

C18H11NO3 zahtjeva: C 74,73; H 3,83; N 4,84 %.

Slično se dobivaju:

Intermedijer 6

2-(6-bromo-2-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-dion u obliku bezbojne kristalne čvrste supstance (10,81 g).

Nađeno ispitivanjem: C 61,30; H 3,09; N 3,93,

C18H10NO2Br zahtjeva: C 61,39; H 2,86; N 3,98 %,

iz 6-bromo-2-naftalen amina (9,50 g) ("Journal of Organic Chemistry", 25, 214, (1960.)).

Intermedijer 7

2-(5-hidroksi-2-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-dion u obliku crvene čvrste supstance kontaminirane sa N,N-dimetil acetamidom (1,10 g).

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+H) 290,

iz 6-amino-1-naftola (4,20 g).

Intermedijer 8

5-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftil trifluorometansulfonat

Trifluorometansulfonski anhidrid (10,09 ml) doda se ukapavanjem pod duškom u suspenziju 2-(6-hidroksi-1-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-diona (14,46 g) u diklorometanu (200 ml) koji sadrži trietilamin (13,9 ml) na -78 °C. Posle 2 sata doda se 1N klorovodična kiselina (100 ml). Smjesa se ostavi da se zagrije do sobne temperature i razdvoje se dvije faze. Žuta vodena faza se ekstrahira sa diklorometanom i ekstrakti se sjedine sa organskim slojem. Sjedinjena organska faza se tada ispere sa 1N klorovodičnom kiselinom (50 ml), ispere se sa zatim sa zasićenom vodenom otopinom natrij klorida (50 ml). Otopina se osuši (magnezij sulfat), obezboji se pomoću aktivnog ugljika i profiltrira se kroz silicij dioksidni sloj uz eluiranje sa smjesom heksan/etil acetat (4:1). Filtrat se tada koncentrira radi dobivanja spoj iz naslova u obliku blago ružičaste čvrste kristalne supstance (19,71 g). Analitički uzorak se dobiva putem rekristalizacije iz smjese heksan/etil acetat (4:1).

Nađeno ispitivanjem: C 54,07; H 2,37; N 3,28; S 7,58.

C19H10NO5SF zahtjeva: C 54,16; H 2,39; N 3,32; S 7,61 %.

Slično se dobivaju:

Intermedijer 9

6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-1-naftil u obliku bezbojne kristalne čvrste supstance (481 mg).

1H n.m.r. (CDCl3): � vrijednosti uključuju 7,54(s); 7,54-7,60(m); 7,78(dd); 7,81-7,87(m); 7,94(dd), 8,00-8,04(m); 8,08(d); 8,21(d),

iz 2-(5-hidroksi-2-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-diona (950 mg).

Intermedijer 10

Metil 5-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftoat u obliku bezbojne kristalne čvrste supstance (240 mg).

Nađeno ispitivanjem: C 72,34; H 3,95; N 4,17,

C20H13NO4 zahtjeva: C 72,50; H 3,95; N 4,23 %,

iz 5-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftil trifluorometansulfonata (313 mg).

Intermedijer 11

Metil 6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftoat

Otopina 2-(6-bromo-2-naftil)-1H-izoindol-1,3(2H)-diona (3,52 g), paladij (II) acetata (111 mg), 1,1'bis (difenilfosfino) - ferocena (554 mg), litij klorida (1,271 g), trietilamina (6,97 ml) i metanola (8,10 ml) u N,N-dimetilformamidu (50 ml), miješa se u Parr-ovoj bombi na 100 °C pod 2,0685 bara (30 psi) ugljičnog monoksida tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, bomba se provjetri i sadržaji se raspodijele između etil acetat (800 ml) i 1N otopine klorovodične kiseline (400 ml). Vodeni sloj i neotopljena čvrsta supstanca se tada ekstrahira sa etil acetatom. Ovi ekstrakti se sjedine sa organskim slojem, isperu se sa 1N otopinom klorovodične kiseline i sa zasićenom vodenom otopinom natrij klorida i osuše se (magnezij sulfat). Filtriranje kroz Celite umetak i koncentriranje pod vakuumom daje crnu čvrstu supstancu koja se kromatografira na silikagelu i eluira sa smjesom heksan/etil acetat (4:1 do 1:2). Proizvod se tada rekristalizira iz etil acetata radi dobivanja spoja iz naslova (1,82 g) u obliku bezbojnih kristala.

Nađeno ispitivanjem: C 72,39; H 4,02; N 4,18.

C20H13NO4 zahtjeva: C 72,50; H 3,95; N 4,23 %.

Slično se dobiva:

Intermedijer 12

Metil 6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-1-naftoat u obliku bezbojne kristalne čvrste supstance (73 mg).

Elektrosprejni MS (pozitivan ion) (M+H) 332,

iz 6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-1-naftil trifluorometansulfonata (290 mg).

Intermedijer 13

Metil ester 5-benzilamino-naftalen-2-karboksilne kiseline

Cezij karbonat (15,48 g) doda se u otopinu metil estera 5-bromo-naftalen-2-karboksilne kiseline (9,0 g) ("Aust. J. Chem.", 18, 1351-64, (1965.)) i benzilamina 94,46 ml) u toluenu (100 ml) i smjesa se deplinira. Dodaju se (R)-(+)-2,2'-bis-(difenilfosfino)-1,1'-binaftil (315,2 mg) i tris (dibenzilenaceton) dipaladij(0) (154,4 mg) i reakcijska smjesa se zagrijava na 81 °C tokom 16 sati. Metil ester 5-benzilamino-naftalen-karboksilne kiseline dobiva se pomoću prikupljanja dobivene žute čvrste supstance (4,86 g) i ispere se sa tetrahidrofuranom. Dodatni proizvod (2,40 g) se dobiva pomoću ispiranja filtrata sa vodom, koncentriranja i isprašivanja ostatka sa dietil eterom.

1H n.m.r. (DMSO-d6): � vrijednosti uključuju 3,88(d); 6,45-6,49(m); 7,11(t); 7,16-7,24(m); 7,28(t); 7,37(d); 7,86(dd); 8,34(d); 8,42(s).

Intermedijer 14

Metil ester 5-amino-2-naftalen karboksilne kiseline (ii)

Suspenzija metil 5-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftoata 93,24 g) u metanolu (100 ml) zagrijava se na refluksu. Tada se doda hidrazin (313 :l) i reakcijska smjesa se miješa. Smjesa se ohladi posle 3 sata i isparljive komponente se uklone pod vakuumom. Preostala žuta čvrsta supstanca suspendira se u vodi (100 ml) koja sadrži 1M otopinu klorovodične kiseline (12,25 ml) i zagrijava se na 55 °C tokom 15 minuta. Smjesa se tada ohladi do sobne temperature i profiltrira se radi uklanjanja istaložene čvrste supstance. Filterski sloj se ekstrahira sa smjesom etil acetat/metanol (10:1). Ovi ekstrakti se sjedine i isperu sa zasićenom vodenom otopinom natrij bikarbonata. Istaložena čvrsta supstanca odlije se sa vodenim slojem. Tada se pH filtrata podesi na vrijednost oko 8 sa 1M vodenom otopinom natrij hidroksida i dobivena mutna smjesa se ekstrahira sa etil acetatom. Ekstrakti se sjedine sa onim iz filterskog sloja, osuše se (magnezij sulfat) i koncentriraju radi dobivanja spoja iz naslova (1,62 g).

Slično se dobivaju:

Intermedijer 15

Metil 6-amino-2-naftoat u obliku blago ružičaste čvrste supstance (335 mg).

Nađeno ispitivanjem: C 71,63; H 5,51; N 6,96,

C12H11NO2 zahtjeva: C 71,44; H 5,58; N 6,90 %,

iz 6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-2-naftoata (994 mg).

Intermedijer 16

Metil 6-amino-1-naftoat u obliku bezbojnog ulja (83 mg),

iz 6-(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)-1-naftoata (168 mg).

Elektrosprejni MS (pozitivan ion) (M+H) 202.

Intermedijer 17

Metil ester 5-amino-2-naftalen karboksilne kiseline (iii)

U otopinu metil estera 5-benzilamino-naftalen-karboksilne kiseline (8,2 g) u tetrahidrofuranu (115 ml) doda se 10 % paladij na ugljiku (2,5 g). Reakcijska posuda se evakuira i propuše sa duškom, a zatim sa vodikom. Smjesa se tada miješa pod vodikom (1 bar) tokom 4 sata. Reakcijska smjesa se profiltrira kroz Celite umetak i koncentrira, radi dobivanja spoja iz naslova (5,47 g) u obliku žute čvrste supstance.

Intermedijer 18

Metil (2S)-2-[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil]-oksi-2-(3-klorofenil) etil] amino propanoat

Otopina (2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-2-(3-klorofenil) etanola (5,0 g) u diklorometanu miješa se u prisustvu 4A molekulskog sita (oko 50 kuglica) tokom 5 minuta. Doda se metil ester L-alanina (2,45 g) i smjesa se miješa tokom dodatnih 5 minuta. Doda se natrij triacetoksi borohidrid (5,6 g) i mutna smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakcijska smjesa se tada razblaži sa zasićenom vodenom otopinom natrij bikarbonata (200 ml) i ekstrahira se sa dikloro-metanom (3 × 150 ml). Sjedinjeni organski slojevi se isperu sa zasićenom vodenom otopinom natrij klorida (150 ml), osuše se (magnezij sulfat) i koncentriraju se pod vakuumom, radi dobivanja žutog ulja (5,0 g) koje se kromatografira na silikagelu. Eluiranje sa smjesom heksan/etil acetat (9:1) daje spoj iz naslova u obliku blago žutog ulja (4,0 g).

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+H) 372.

Intermedijer 19

Metil (2S)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil]-oksi-2-(3-klorofenil) etil] amino propanoat

Di-terc-butil dikarbonat (2,05 g) doda se u metil (2S)-2-[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-2-(3-kloro fenil) etil]-amino propanoat (3,50 g) i smjesa se zagrijava na 95 °C pod duškom tokom 10 minuta. Otopina se ohladi do sobne temperature i kromatografira se na silikagelu uz eluiranje sa smjesom ehksan/etil acetat (95:5). Spoj iz naslova (4,15 g) dobiva se u obliku bezbojnog ulja.

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+Na) 494/496.

Intermedijer 20

{2S-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil dimeti lsilanoksi)-2-(3-kloro fenil)-etil]-amino}propion aldehid

Diizobutil amonij hidrid (4 ml, 1,5M u toluenu) doda se ukapavanjem pod duškom u otopinu metil (2S)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-2-(3-kloro fenil)etil]-amino propanoata (1,28 g) u toluenu (20 ml) na -78 °C. Dobivena bezbojna otopina se miješa na ovoj temperaturi tokom 90 minuta prije nego što se ukapavanjem doda zasićena vodena otopina Rochelle-ove soli (20 ml). Dobivena smjesa se ostavi da se zagrije do sobne temperature i tada se profiltrira kroz Celite umetak, ispere se sa vodom (50 ml) i sa etil acetatom. Filtrat se razdvoji na svoja dva sloja i vodeni sloj se ekstrahira sa etil acetatom. Ekstrakti se sjedine sa organskim slojem filtrata, isperu se sa zasićenom vodenom otopinom natrij klorida (20 ml), osuše se (magnezij sulfat) i koncentriraju, radi dobivanja spoja iz naslova u obliku bezbojnog ulja (1,08 g).

1H n.m.r. (CDCl3): � vrijednosti uključuju 0,00; 0,03 i 0.07(3s); 0,22 i 0,24(2s); 1,06(s), 1,46 i 1,51(2d); 1,62 i 1,65(2s); 5,11 i 5,27 (2m); 7,36-7,60(m); 9,76 i 9,83 (2s).

Intermedijer 21

Metil 6-[((2R)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi)-2-(3-kloro fenil) etil] amino propil) amino]- 2-naftoat

Metil 6-amino-2-naftoat (201 mg) otopi se u 0,14 M otopini {2R-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil dimetil silanoksi)-2-(3-kloro fenil)-etil]-amino}propion aldehida u 1,2-dikloroetanu (12,0 ml) pod duškom. Dodaju se octena kiselina (87 :l) i 4A molekulsko sito (4 kuglice) i smjesa se miješa tokom 25 minuta. Tada se doda natrij triacetoksi borohidrid (636 mg) i smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 17 sati, prije nego što se razblaži sa etil acetatom (30 ml) i sa zasićenom vodenom otopinom Rochelle-ove soli (15 ml). Smjesa se profiltrira kroz Celite umetak, ispere se sa etil acetatom (30 ml) i dva sloja se razdvoje. Vodena faza se ekstrahira sa etil acetatom. Ekstrakti se tada sjedine sa organskom fazom, osuše se (magnezij sulfat) i koncentriraju do žutog ulja. Silikagel kromatografije uz eluiranje sa smjesom heksan/etil acetat (10:1) daje sirovi spoj iz naslova (804 mg) koji se koristi u slijedećem stupnju bez daljnjeg pročišćavanja.

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+H) 627/629.

Slično se dobivaju

Intermedijer 22

Metil 6-[((2R)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi)-2-(3-kloro fenil) etil] amino propil) amino]- 1-naftoat u obliku žutog ulja (260 mg).

MS niske rezolucije (ES+) 627/629,

iz metil 6-amino-1-naftoata (85 mg) i {2R-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil dimetil silanoksi)-2-(3-kloro fenil)- etil]- amino} propion aldehida u 1,2-dikloroetanu (6,0 ml, 0,83 mmola aldehida).

Intermedijer 23

Metil 5-[((2S)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi)-2-(3-kloro fenil) etil]amino propil) amino]-2-naftoat u obliku blago žutog ulja (720 mg).

MS niske rezolucije (ES+) 627/629,

iz metil 5-amino-2-naftoata (328 mg) i {2S-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil dimetil silanoksi)-2-(3-kloro fenil)-etil]-amino} propion aldehida (1,08 g).

Primjer 1

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

Suspenzija 6-amino-2-naftalen sulfonske kiseline (0,505 g) i {2R-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc- butil-dimetil- silanoksi)- 2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino}-propion aldehida (0,500 g) u N,N-dimetilformamidu (8 ml) miješa se tokom 10 minuta, prije dodavanja natrij triacetoksi borohidrida (0,479 g). Smjesa se miješa tokom 18 sati. Doda se 15 % vodena otopina Rochelle-ove soli i smjesa se miješa tokom 1 sata. Smjesa se ekstrahira sa toluenom. Organski sloj se osuši sa magnezij sulfatom, koncentrira se i ispari do dobivanja tamnog ulja koje se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda (60:30:4) radi dobivanja blokiranog spoja u obliku ulja (0,38 g). Ovo ulje se otopi u terahidrofuranu (4 ml) i doda se 6N otopina klorovodične kiseline. Smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Otopina se neutralizira sa amonij hidroksidom i ispari se. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na koloni na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda/amonij hidroksid (60:30:2:2) radi dobivanja spoja iz naslova u obliku ulja. Uzorak se očvršćuje sa smjesom etanol/voda radi dobivanja spoja iz naslova u obliku mrko žutog ulja (87,1 mg).

1H NMR (DMSO-d6): � vrijednosti uključuju 1,29(d); 3,09(br m); 3,24(br m); 3,50(br m); 4,97(d); 6,23(br m); 6,30(d); 6,82(s); 6,98(m); 7,37(m); 7,48(m); 8,62(br s).

HPLC: tr=16,2 min (t0=1,6 min).

Primjer 2

5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

Suspenzija 5-amino-2-naftalen sulfonske kiseline (0,118 g) i {2R-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil-dimetil-silanoksi)- 2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino}-propion aldehida (0,115 g) u N,N-dimetilformamidu (1,9 ml) miješa se tokom 10 minuta, prije dodavanja natrij triacetoksi borohidrida (0,113 g). Smjesa se miješa tokom 18 sati. Doda se 15 % vodena otopina Rochelle-ove soli i smjesa se miješa tokom 1 sata. Smjesa se ekstrahira sa toluenom. Organski sloj se osuši sa magnezij sulfatom, koncentrira se i ispari do dobivanja tamnog ulja. Ostatak se otopi u diklorometanu (10 ml), doda se trifluorooctena kiselina (1 ml) i dobivena otopina se miješa na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, prije nego što se koncentrira. Ostatak se otopi u 1,4-dioksanu (3,3 ml) i doda se 6N otopina klorovodične kiseline. Smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, kada se koncentrira radi dobivanja ljubičaste čvrste supstance, koja se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol /voda/amonij hidroksid (60:30:2:2). Koncentrirani ekstrakti suspendiraju se sa etanolom radi dobivanja spoja iz naslova u obliku blijedo žutog praha (21,5 mg).

1H NMR (DMSO-d6): � vrijednosti uključuju 1,36(d); 3,15(br m); 3,26(m, 1); 3,43(br m); 3,62(br m); 4,97(d); 6,35(br m); 6,66(d); 7,28-7,16(m); 7,40-7,30(m); 7,42(m); 7,54(s); 7,66(d); 8,02(s); 8,13(d); 8,61(br s).

HPLC: tr=19,4 min (t0=1,6 min).

Primjer 3

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-1-sulfonska kiselina

Suspenzija 6-amino-1-naftalen sulfonske kiseline (0,118 g) i {2R-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil- dimetil- silanoksi)- 2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino}-propion aldehida (0,115 g) u N,N-dimetilformamidu (1,9 ml) miješa se tokom 10 minuta, prije dodavanja natrij triacetoksi borohidrida (0,113 g). Smjesa se miješa tokom 18 sati. Doda se 15 % vodena otopina Rochelle-ove soli i smjesa se miješa tokom 30 minuta. Smjesa se ekstrahira sa toluenom i organski sloj se osuši sa magnezij sulfatom, koncentrira se i ispari do dobivanja tamnog ulja, koje se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda (60:30:4) radi dobivanja blokiranog spoja u obliku ulja (0,105 g). Ulje se otopi u 1,4-dioksanu (4 ml) i doda se 4N otopina klorovodične kiseline. Dobivena smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Otopina se tada neutralizira sa amonij hidroksidom i ispari se. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na koloni na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/ voda/amonij hidroksid (60:30:2:2) radi dobivanja spoja iz naslova u obliku tamno žutog praha (26 mg).

1H NMR (DMSO-d6): � vrijednosti uključuju 1,35(d); 3,13(br m); 3,36(br m, preklapa H2O); 3,54(br m); 4,98(d); 6,13(br m); 6,36(d); 6,87(s); 7,02(dd); 6,27(m); 7,42(m); 7,62-7,50(m); 8.62(d).

C21H23ClN2O4S: MH+ 435,1148 (greška oko 0,3 ppm).

Primjer 4

7-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

Suspenzija natrijeve soli 7-amino-1-naftalen sulfonske kiseline (0,554 g) i {2R-(terc-butoksi karbonil)- [2R- terc- butil-dimetil-silanoksi)-2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino}-propion aldehida (0,500 g) u N,N-dimetilformamidu (8,1 ml) miješa se tokom 10 minuta, prije dodavanja natrij triacetoksi borohidrida (0,479 g). Smjesa se miješa tokom 18 sati. Doda se 15 % vodena otopina Rochelle-ove soli i smjesa se miješa tokom 1 sata. Smjesa se tada ekstrahira sa toluenom. Organski sloj se osuši sa magnezij sulfatom, profiltrira se i ispari do dobivanja tamnog ulja koje se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda (60:30:4) radi dobivanja blokiranog spoja u obliku ulja (0,46 g). Ulje se otopi u tetrahidrofuranu (4 ml) i doda se 6N otopina klorovodične kiseline. Dobivena smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Otopina se tada neutralizira sa amonij hidroksidom i ispari se. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na koloni na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda/amonij hidroksid (60:30:2:2) radi dobivanja spoja iz naslova u obliku ulja. Uzorak se očvršćuje sa smjesom etanol/voda radi dobivanja tamno žutog praha (63,9 mg).

HPLC: tr=17,54 min (t0=1,6 min).

C21H23ClN2O4S: MH+ 435,1163 (greška oko 1,8 ppm).

Primjer 5

5-{2-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-etil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina

Otopina {2-(terc-butoksi karbonil)-[2R-(terc-butil-dimetil-silanoksi)-2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino}-acetaldehida (0,32 g) i 5-amino-2-naftalen sulfonske kiseline (0,335 g) u N,N-dimetilformamidu (5,4 ml) miješa se tokom 10 minuta, prije dodavanja natrij triacetoksi borohidrida (0,318 g). Dobivena smjesa se miješa tokom 18 sati. Doda se 15 % vodena otopina Rochelle-ove soli i smjesa se miješa tokom još 1 sata. Smjesa se tada ekstrahira sa toluenom. Organski sloj se osuši sa magnezij sulfatom, profiltrira se i ispari. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda (60:30:4) radi dobivanja blokiranog proizvoda (0,56 g), koji se otopi u tetrahidrofuranu (5 ml). Posle dodavanja 6N otopine klorovodične kiseline, smjesa se miješa na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, prije nego što se ispari. Ostatak se pročišćava pomoću kromatografije na koloni na silikagelu sa smjesom kloroform/metanol/voda/amonij hidroksid (60:30:2:2) radi dobivanja spoja iz naslova u obliku tamno žutog praha (73,7 mg).

HPLC: tr=17,8 min (t0=1,8 min).

C20H21ClN2O4S: MH+ 421,0999 (greška oko 1,1 ppm).

Primjer 6

Metil 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etilamino}-naftoat dihidroklorid

Metil 5-[((2S)-2-(terc-butoksi karbonil)-[(2R)-2-[terc-butil (dimetil)-silil] oksi-2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino propil) amino]-2-naftoat (1,21 g) uvede se u 4N otopinu klorovodične kiseline (9 ml). Smjesa se miješa tokom 2 sata i doda se dietil eter (30 ml). Dobiveni talog se prikuplja pomoću usisnog filtriranja i osuši se na vakuumu radi dobivanja spoja iz naslova (807 mg) u obliku svjetlo zelenog praha.

1H NMR (DMSO-d6): � vrijednosti uključuju 1,51(d); 3,99(s); 5,02(dd); 6,88(d); 8,01(d); 8,20(d); 8,53(s).

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+H) 413,2.

Slično se dobivaju:

Primjer 7

Metil 5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino}-naftoat dihidroklorid

Elektrosprejni ms (negativan ion) 413/415,

iz metil 5-[((2S)-2-(terc-butoksi karbonil)-[(2R)-2-[terc-butil (dimetil)-silil] oksi-2-(3-kloro-fenil)-etil]-amino propil) amino]-2-naftoata (580 mg).

Primjer 8

5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina

Otopina dihidroklorida metil estera 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino}-naftalen-2-karboksilne kiseline (1,55 g) i litij hidroksid monohidrata (852 mg) u 3:1 smjesi metanol/voda (20 ml), miješa se tokom 16 sati. Smjesa se koncentrira radi dobivanja ostatka koji se pročišćava pomoću silikagel kromatografije uz eluiranje sa smjesom kloroform/metanol/amonij hidroksid radi dobivanja, posle koncentriranja odgovarajućih frakcija, žutog praha. Isprašivanje sa vodom i sušenje pod vakuumom daje spoj iz naslova (946 mg) u obliku svijetlo žutog praha.

Nađeno ispitivanjem: C 65,53; H 5,89; N 6,91.

C22H23N2O3ClŽ0.25H2O zahtjeva: C 65,50; H 5,87; N 6,94 %.

Elektrosprejni ms (pozitivan ion) (M+H) 399,3.

Slično se dobiva:

Primjer 9

5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina (114 mg)

Nađeno ispitivanjem: C 66,48; H 5,96; N 6,79; Cl 8,72.

C22H23N2O3Cl zahtjeva: C 66,24; H 5,81; N 7,02; Cl 8,89 %.

Elektrosprejni ms (negativan ion) (M-H) 399/401,

iz metil 5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino}-2-naftoata dihidroklorida

Primjer 10

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil] amino propil) amino]-naftalen-2-karboksilna kiselina

Otopina metil 6-[((2R)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2S)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-2-(3-kloro fenil) etil] amino propil) amino]-2-naftoata (804 mg) u 4N otopini klorovodične kiseline u dioksanu (7ml), miješa se tokom 5,5 sati pod duškom. Isparljive komponente se tada uklone pod vakuumom uz zaostajanje gumaste ljubičaste čvrste supstance koja se ponovo otopi u smjesi dioksan/voda (10 ml, 5:1). Tada se doda litij hidroksid monohidrat (378 mg) i ružičasta otopina se miješa tokom 16 sati. Isparljive komponente se tada uklone pod vakuumom. Porcije metanola se izdestiliraju pod vakuumom radi uklanjanja vode, a narančasta guma koja zaostaje se kromatografira na silikagelu uz eluiranje sa smjesom kloroform/metanol/amonij hidroksid (80:15:2). Porcije etanola se izdestiliraju pod vakuumom radi dobivanja bezbojne čvrste supstance. Dobiveni materijal se ispraši u vodi (5 ml) i osuši se pod vakuumom radi dobivanja spoja iz naslova (141 mg) u obliku bijelog praha.

Nađeno ispitivanjem: C 65,18; H 5,99; N 6,85; Cl 8,67.

C22H23N2O3Cl•0,04 H2O•0,2 C2H6O zahtjeva: C 65,81; H 5,99; N 6,85; Cl 8,67 %.

t.t.: 206-207 °C (razlaže se).

Slično se dobiva:

Primjer 11

6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil] amino propil) amino]-naftalen-1-karboksilna kiselina (98 mg)

Nađeno ispitivanjem: C 64,41; H 6,00; N 6,58; Cl 8,66.

C22H23N2O3Cl•0,06 H2O•0,6 C2H6O zahtjeva: C 64,41; H 6,00; N 6,79; Cl 8,60 %.

t.t.: 224-226 °C (razlaže se),

iz metil 6-[((2R)-2-(terc-butoksi karbonil)[(2R)-2-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-2-(3-kloro fenil) etil] amino propil) amino]-2-naftoata (260 mg).

TABLETE ZA ORALNU PRIMJENU

Tablete se mogu dobiti pomoću uobičajenih postupaka, takvih kao što su direktno prešanje ili vlažna granulacija.

Tablete se mogu presvući filmom sa prikladnim materijalom za formiranje filma, takvim kao što je hidroksi propil metil celuloza uz korištenje standardnih tehnika. Alternativno, tablete se mogu presvući sa šećerom.

Direktno prešane tablete

i)

[image]

* kvaliteta prikladna za direktno prešanje. ;Aktivni sastojak prosije se kroz sito od 60 okana, izmiješa se sa kalcij bifosfatom, natrij kroskarmelozom i magnezij stearatom. Dobivena smjesa se preša u tablete uz korištenje Manesty F3 stroja za tabletiranje koji je snabdjeven sa 5,5 mm probojcima sa ravnim bridovima. ;ii) ;[image] ;Aktivni sastojak prosije se kroz sito od 60 okana, izmiješa se sa laktozom, pregilarnim škrobom i magnezij searatom. Dobivena smjesa se preša u tablete uz korištenje Manesty F3 stroja za tabletiranje koji je snabdjeven sa 7,5 mm normalno konkavnim probojcima. ;Sirup ;U sirupu može biti ili ne biti prisutna saharoza. ;A. ;[image] ;Aktivni sastojak, pufer, aromatično sredstvo, sredstvo za bojenje i konzervans, otope se u nešto vode i doda se glicerin. Preostala voda se zagrije do otapanja saharoze i tada se ohladi. Obje otopine se sjedine, podese se na željni volumen i tada se promiješaju. Sirup se načini bistrim pomoću filtriranja. ;B. ;[image] ;Hidroksi propil metil celuloza disperzira se u toploj vodi, ohladi se i tada izmiješa sa vodenom otopinom koja sadrži aktivni sastojak i druge komponente formulacije. Dobivena otopina se podesi do željenog volumena i izmiješa se. Sirup se načini bistrim pomoću filtriranja. ;Injekcija za intravensku primjenu ;(i) ;[image] ;Aktivni sastojak se otopi u prikladnom volumenu injekcijskog natrij klorida BP, pH dobivene otopine se podesi na pH = 3,5 sa razblaženom klorovodičnom kiselinom BP, tada se volumen otopine podesi sa injekcijskim natrij kloridom BP i dobro se izmiješa. Otopina se unese u prozirne ampule od 5 ml Tipa I, koje su zabrtvljene pod zrakom pomoću fuzije stakla, i tada se sterilizira pomoću autoklaviranja na 120 °C tokom ne manje od 15 minuta. ;(ii) ;[image] ;Natrij klorid se može dodati radi podešavanja toničnosti otopine, a pH se može podesiti uz korištenje kiseline ili alkalije, do optimalne stabilnosti i/ili kapaciteta aktivnog sastojka. Alternativno, mogu se koristiti prikladne puferne soli. ;Otopina se pripremi, izbistri i unese u ampule odgovarajuće veličine, koje se zabrtvljuju fuzijom stakla. Injekcija se sterilizira pomoću zagrijavanja u autoklavu uz korištenje jednog od prihvatljivih ciklusa. Alternativno, otopina može biti sterilizirana pomoću filtriranja i unesena u sterilizirane ampule pod aseptičnim uvjetima. Otopina može biti pakirana pod inertnom atmosferom duška ili nekog drugog prikladnog plina. ;Supozitorija za rektalnu primjenu ;[image] ;* zadovoljavajućeg kvaliteta Adeps Solidus Ph. Eur.

Suspenzija aktivnog sastojka u otopljenom Witepsol-u pripremi se i unese uz korištenje prikladnog stroja u supozitorijske kalupe veličine 1 g.

BIOLOŠKI REZULTATI

Spojevi primjera testirani su na �-3-adrenoreceptorsku aktivnost uz korištenje naprijed opisanog postupka sa slijedećim rezultatima:

[image]

Claims (16)

1. Spoj formule I: [image] naznačen time što grupe N(R3) i R4 su razdvojene sa bar 4 ugljična atoma prstena; R1 predstavlja fenil, naftil, fenoksi metil, tiazolil, piridil ili pirimidil grupu koja je po izboru supstituirana sa jednim ili više supstituenata odabranih iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil, trifluoro metil, NR6R7 i NHSO2R6; R2 predstavlja vodik ili C1-6 alkil; R3 predstavlja vodik ili C1-4 alkil; R4 predstavlja CO2R6 ili SO3H; R5 predstavlja jednu ili više grupa koja se svaka nezavisno bira iz grupe koja obuhvaća vodik, C1-6 alkil, halogen, trifluoro metil i C1-6 alkoksi; n predstavlja cijeli broj od 1 do 6; R6 i R7 svaki nezavisno predstavlja vodik ili C1-4 alkil; ili njegovi farmaceutski prihvatljivi derivati.

2. Spoj prema zahtjevu 1 formule Ia: [image] naznačen time što grupe N(R3) i R4 su razdvojene sa bar 4 ugljična atoma prstena; R1 predstavlja fenil, naftil, piridil ili pirimidil grupu koja je po izboru supstituirana sa jednim ili više supstituenata odabranih iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil, trifluoro metil, NR6R7 i NHSO2R6; R2 predstavlja vodik ili C1-6 alkil; R3 predstavlja vodik ili C1-4 alkil; R4 predstavlja CO2R6 ili SO3H; R5 predstavlja jednu ili više grupa koje se svaka nezavisno bira iz grupe koja obuhvaća vodik, C1-6 alkil, halogen, trifluoro metil i C1-6 alkoksi; n predstavlja cijeli broj od 1 do 6; R6 i R7 svaki nezavisno predstavlja vodik ili C1-4 alkil; ili njegovi farmaceutski prihvatljivi derivati.

3. Spoj prema zahtjevu 1 ili 2, naznačen time što R1 predstavlja fenil koji je po izboru supstituiran sa 1 do 3 supstituenta koji se biraju iz grupe koja obuhvaća halogen, hidroksi, C1-6 alkoksi, C1-6 alkil, nitro, ciano, hidroksi metil i trifluoro metil.

4. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do3, naznačen time što R1 predstavlja fenil grupu supstituiranu sa atomom klora lociranim u meta položaju.

5. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do 4, naznačen time što R2 predstavlja metil ili vodik.

6. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do 5, naznačen time što R3 predstavlja vodik.

7. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do6, naznačen time što R4 predstavlja CO2H.

8. Spoj prema zahtjevu 1 predstavljen formulom Ib: [image] naznačen time što R2 predstavlja vodik ili metil; R4 predstavlja CO2H ili SO3H; ili njegovi farmaceutski prihvatljivi derivati.

9. Spoj naznačen time što je odabran iz grupe koja obuhvaća slijedeće spojeve: 6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina; 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina; 6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-1-sulfonska kiselina; 7-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina; 5-{2-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-etil amino}-naftalen-2-sulfonska kiselina; 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina; 6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina; 6-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-1-karboksilna kiselina; 5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino]-propil amino}-naftalen-2-karboksilna kiselina; Metil 5-{2S-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino}-naftoat; Metil 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)-2R-hidroksi-etil amino}-naftoat; i njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati.

10. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time što se odnosi na 5-{2R-[2-(3-kloro-fenil)- 2R- hidroksi- etilamino]- propil amino}-naftalen-2-karboksilnu kiselinu, i njegove farmaceutski prihvatljive derivate.

11. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do10, naznačen time što se primjenjuje u terapiji.

12. Postupak za tretiranje sisavaca, uključujući i čovjeka, koji pati do stanja koje podleže poboljšanju pri primjeni netipičnog �-adrenoreceptorskog agonista, naznačen time što obuhvaća primjenu efikasne količine spoja prema nekom od zahtjeva 1 do 10 ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.

13. Spoj prema nekom od zahtjeva 1 do 10 ili njegov farmaceutski prihvatljivi detivat, naznačen time što se koristi za proizvodnju medikamenta za tretiranje stanja koje je podložno poboljšanju pri korištenju agonista netipičnog �-adrenoreceptora.

14. Farmaceutski preparat, naznačen time što obuhvaća spoj prema nekom od zahtjeva 1 do 10 ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

15. Farmaceutski preparat, naznačen time što obuhvaća spoj prema nekom od zahtjeva 1 do 10 i nesteroidni anti-inflamatorni lijek zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

16. Postupak za dobivanje spoja prema zahtjevu 1 ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, naznačen time što obuhvaća (A) reakciju spoja formule II: [image] gdje P1 i P2 su prikladne zaštitne grupe za kisikove i dušične grupe respektivno, R4 je CO2R6 ili SO3H i R6 je C1-6 alkil, radi uklanjanja zaštitnih P1 i P2 pod prikladnih uvjetima; ili (B) reakciju spoja formule I radi dobivanja drugog spoja formule (I); ili (C) reakciju spoja formule III sa spojem formule IV: [image] gdje P1 i P2 su podesne zaštitne grupe za kisikove i dušične grupe respektivno, R4 je CO2R6 ili SO3H i R6 je C1-6 alkil koja je praćena deprotekcijom zaštićenih grupa, bez pročišćavanja intermedijernog proizvoda.