HRP20041007A2 - Process for preparing conjugated linoleic acid - Google Patents
Process for preparing conjugated linoleic acidInfo
- Publication number
- HRP20041007A2 HRP20041007A2 HRP20041007A HRP20041007A2 HR P20041007 A2 HRP20041007 A2 HR P20041007A2 HR P20041007 A HRP20041007 A HR P20041007A HR P20041007 A2 HRP20041007 A2 HR P20041007A2
- Authority
- HR
- Croatia
- Prior art keywords
- linoleic acid
- cla
- oats
- conjugated linoleic
- isomerization
- Prior art date
Links
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 title claims description 185
- JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 9-cis,11-trans-octadecadienoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 0.000 title claims description 123
- 229940108924 conjugated linoleic acid Drugs 0.000 title claims description 120
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 21
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 claims description 69
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 claims description 65
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 claims description 65
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 claims description 63
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 43
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 claims description 33
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 26
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 25
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 claims description 24
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 claims description 24
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 claims description 14
- 241000186428 Propionibacterium freudenreichii Species 0.000 claims description 13
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 13
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 11
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 claims description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- 241000209761 Avena Species 0.000 claims 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims 2
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 40
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 20
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 20
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 20
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 20
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 7
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 6
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 5
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 4
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 4
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 4
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 3
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940038580 oat bran Drugs 0.000 description 3
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000605900 Butyrivibrio fibrisolvens Species 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 2
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 description 2
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000030538 Thecla Species 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 2
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N heptadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004890 malting Methods 0.000 description 2
- HUEBIMLTDXKIPR-UHFFFAOYSA-N methyl heptadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC HUEBIMLTDXKIPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- ARSRBNBHOADGJU-UHFFFAOYSA-N 7,12-dimethyltetraphene Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(C=CC=C1)C1=C2C ARSRBNBHOADGJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000004165 Methyl ester of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 101100192881 Neosartorya fumigata (strain ATCC MYA-4609 / Af293 / CBS 101355 / FGSC A1100) pyr8 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 description 1
- 241000186334 Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N beta-glycerol phosphate Natural products OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 235000020186 condensed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 235000015220 hamburgers Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000016046 other dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021018 plums Nutrition 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000029219 regulation of pH Effects 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
- C12P7/6431—Linoleic acids [18:2[n-6]]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
Područje izuma
Izum se odnosi na postupak za pripremanje konjugirane linolne kiseline. Potanko, izum otkriva postupak za pripremu konjugirane linolne kiseline i napose njenog cis-9,trans-11 izomera iz žitarica upotrebom korisnih bakterija.
Pozadina izuma
CLA je generički naziv za različite izomere konjugirane linolne kiseline, od kojih su nađena samo dva biološki aktivna izomera (cis-9,trans-11 izomer, tj. goveđa kiselina, i trans-10,cis-12 izomer). Sintetski CLA proizvodi su komercijalno dostupni, ali uglavnom obuhvaćaju sve različite CLA izomere i samo 40% c9,t11 izomera, npr. mliječna CLA sadrži 80% c9,t11-18:2 izomera.
Nekoliko je studija pokazalo da životinjske masti obuhvaćaju masne kiseline koje spriječavaju rak kod pokusnih životinja, djelujući na faktore rasta a mogu i regulirati količinu masnog tkiva u tijelu. Istražujući odreske hamburgera, Michael Pariza je našao da oni sadrže masnu kiselinu, za koju je analizom ustanovljeno da je konjugirana linolna kiselina (CLA). U studiji provedenoj na pokusnim životinjama, nađeno je smanjeno javljanje raka dojke, želuca i debelog crijeva u grupi hranjenoj hranom koja je sadržavala CLA u odnosu na kontrolnu grupu [Pariza, M.W., Loretz, L.J., Storkson, J.M. i Holland, N.C., Mutagens and modulator of mutagenesis in fried ground beef, Cancer Res. (Suppl.) 43: 2444-2446 (1983), i Pariza, M.W., i Hargraves, W.A. A beef derived mutagenesis modulator inhibits initiation of mouse epidermal tumors by 7,12-dimethylbenzanthracene, Carcinogenesis 6: 591-593 (1985)]. CLA je, također, sposobna inhibirati razvoj kanceroznih stanica u kulturama tkiva ljudskih stanica. Način djelovanja je još nepoznat, ali otkriveno je da CLA ima utjecaj na različite razvojne stadije tumora, kao i na nekoliko faktora rasta, a vjerovatno također na metabolizam karcinogenih supstanci u jetri. Sugerira se, također, da bi CLA mogla djelovati kao jedan antioksidans [Ip, C., Chin, S.F., Scimeca, J.A., I Pariza, M.W., Mammary cancer prevention by conjugated dienoic derivatives of linoleic acid, Cancer Res. 51: 6118-6124 (1991)], u kojem slučaju bi spoj štitio stanične membrane od nepoželjnih djelovanja slobodnih radikala. Dodatno, proučavano je i djelovanje spoja na razinu kolesterola, pri čemu je uočeno da se razina ukupnog kolesterola snižava, dok spoj ne smanjuje količinu dobrog HDL kolesterola kako to lijekovi uobičajeno čine [Lee, K.N., Kritchevsky, D., i Pariza, M.W., Conjugated linoleic acid and atherosclerosis in rabbits, Atherosclerosis 108: 19-25 (1994)]. CLA može također pomoći čuvati težinu, budući je nađeno da spoj razgrađuje masno tkivo [Park, i dr. Changes in Body Composition in Mice During Feeding and Withdrowal of Conjugated Linoleic Acid, Lipids 34: 243-248 (1999)].
Za nekonjugiranu linolnu kiselinu, nađeno je da ima neželjena djelovanja, poput stimulirajućeg djelovanja na rak dojke. Također je općenito poznat i antimikrobni učinak nekonjugirane linolne kiseline.
CLA može biti pripremljen kemijski ili enzimatski izomerizacijom linolne kiseline. Prirodna CLA nastaje iz poli-nezasićenih masnih kiselina kao rezultat djelovanja bakterije Butyrivibrio fibrisolvens u buragu preživača, odakle se secernira u mlijeko i meso, za koje je nađeno da su najbolji izvori CLA.
Zapaženo je da se količina CLA dobivena iz hrane značajno smanjila u proteklom desetljeću. Izračunato je u analizama sastojaka hrane da je 70-tih prosječna prehrana sadržavala oko 0.45 g CLA/danu. Kako se upotreba mlijeka i mliječnih proizvoda smanjivala, prosječni unos je danas svega 0.25 g CLA/danu. Povećanje količine prirodne CLA u hrani je vrlo važno u pogledu javnog zdravstva budući da bi udvostručavanje unosa CLA, prema istraživanjima, smanjilo npr. rizik od raka.
Što se tiče prehrambenih proizvoda, važnost mlijeka kao izvora CLA bila je naglašena u nekoliko studija. Na primjer, prema Finskoj demografskoj studiji (Knekt i dr., usmena komunikacija), upotreba mlijeka smanjuje rizik od karcinoma dojke. Danas sadržaj CLA u mliječnoj masti varira periodično do značajnih razmjera (2.4 - 28.1 mg/g masti) ovisno o kvaliteti hrane.
Otkriveno je da korisni crijevni mikrobi stvaraju CLA. Potanko, Butyrivibrio fibrisolvens bakterija iz buraga i njen izomerazni enzim su proučavani. Međutim, ova bakterija je anaerobna do tog stupnja da je proizvodnja CLA uz njezinu upotrebu neizvediva u industrijskim razmjerima budući da je teško i neekonomično stvarati striktno anaerobne uvjete potrebne ovom soju (US 5,856,149, Pariza i dr.).
Nađeno je da vrsta Propionibacterium agnes također stvara CLA, ali ovaj patogeni soj također stvara enzim reduktazu, koji reducira stvorenu CLA u druge masne kiseline [Verhulst i dr., System. Appl. Microbiol. 9: 12-15 (1987)].
Nadalje je općenito poznato da stanovite bakterije propionske kiseline mogu pretvoriti linolnu kiselinu u njezin konjugirani cis-9,trans-11 oblik. Nadalje, također se zna da je pretvorba slobodne linolne kiseline u CLA puno djelotvornija od pretvorbe masne kiseline iz triglicerida. Međutim, slobodna linolna kiselina ima inhibirajuće djelovanje na rast bakterija propionske kiseline već kod relativno niskih koncentracija, što je do sada spriječavalo proizvodnju velikih razmjera konjugirane linolne kiseline i posebno cis-9,trans-11 njezinog oblika.
US patent 5,856,149, Pariza i Yang, opisuje postupak proizvodnje cis-9,trans-11 masne kiseline pretvorbom nekonjugirane nezasićene (dvostruka veza na poziciji 9 i 12) masne kiseline uz pomoć soja Lactobacillus reuterii, bolje L. reuterii PYR8 soj. Publikacija opisuje izolaciju soja koji proizvodi CLA i navodi da je samo 4 od 45 izoliranih sojeva imalo željenu sposobnost izomerizacije linolne kiseline, tj. imali su sposobnost proizvodnje CLA iz linolne kiseline. Publikacija ne spominje inhibirajući učinak slobodne linolne kiseline na rast bakterija niti da li je podešena jakost otopine kako bi se izbjegao ovaj problem.
Jiang, i dr. [Jiang, J. Björck, L i Fonden, R., Production of conjugated linoleic acid by daily starter cultures, J.Appl. Microbiol. 85: 95-102 (1998)], opisuju sposobnost bakterija propionske kiseline da pretvaraju linolnu kiselinu u CLA. Primjetivši da zreli sirevi sadrže veće količine CLA od drugih mliječnih proizvoda, Jiang, i suradnici proučavali su sposobnost 19 različitih starter-bakterija da pretvore linolnu kiselinu u CLA dodavanjem mediju za kultiviranje. Oni su proučavali sposobnost 7 sojeva laktobacila, 4 soja laktokoka, 2 soja streptokoka i 6 bakterija propionske kiseline da proizvedu CLA iz linolne kiseline na MRS, mlijeku, i Na-laktat kultivirajućem mediju. Nadalje, različite koncentracije linolne kiseline su proučavane dodavanjem linolne kiseline u MRS bujon (mesnu juhu) u vodenoj otopini deterdženta Tween 80. Samo je nekolicina bakterija propionske kiseline od analiziranih bakterija pokazala sposobnost biokonverzijske aktivnosti; tri od šest sojeva pokazalo je aktivnost, tj. Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii PFF i PFF6 i P. freudenreichii ssp. shermanii PFS. Najveća proizvodnja od 265 μg/ml CLA iz početne koncentracije linolne kiseline 750 μg/ml je dobivena sa sojem PFF6. Proizvedena CLA sadržavala je 70 do 90% biološki aktivnog c9,t11 izomera. Niti jedan od sojeva laktobacila, laktokoka, ili streptokoka nije pokazao sposobnost proizvodnje CLA.
Najbolja bakterija propionske kiseline, soj PFF6, bio je tako sposoban pretvoriti samo 35% dodane linolne kiseline u CLA metodom opisanom od Jianga i suradnika. Istraživači su utvrdili da proizvodnja CLA uz pomoć bakterija propionske kiseline pozitivno korelira s njihovom tolerancijom slobodne linolne kiseline. Posljedično ta je studija potvrdila opće poznatu činjenicu da linolna kiselina ima antimikrobni učinak koji inhibira bakterijski rast. Publikacija navodi da učinak antimikrobnih masnih kiselina može biti smanjen upotrebom površinski-aktivnih tvari, poput deterdženata, npr. Tween 80, ili proteina. Međutim, takve studije nisu provedene i ova publikacija ne otkriva izvedive, korisne tehnike.
WO 99/29886, J. Jiang, L. Björck i R Fonden, je djelomično baziran na istraživačkim rezultatima opisanim u gore spomenutom članku. Zahtjev se odnosi na upotrebu određenih bakterija korisnih u prehrambeno - proizvodnim primjenama u in vitro proizvodnji CLA. Kao dodatak Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii i P. freudenreichii ssp. Shermanii, Bifidobacterium breve je također spomenuta kao prikladna bakterija. Prema publikaciji, fermentacija može biti provedena uz prisustvo emulgirajućeg sredstva, poput Tween 80 i lecitina. Primjeri iz ove publikacije ne opisuju upotrebu niti jednog emulgirajućeg sredstva, i rezultat prikazan kao najbolji rezultat je isti kao u gore spomenutom članku: 246.4 μg/ml biološki aktivnog c9,t11 izomera je dobiveno iz početne koncentracije linolne kiseline 750 μg/ml uz korištenje PFF6 soja. Tako je prinos bio ispod 33%.
Finski patent 88856 opisuje postupak pripreme fermentiranog prehrambenog proizvoda koji sadržava žive mikroorganizme i uglavnom se bazira na zobenim mekinjama. Zobene mekinje su fermentirane bilo kao takve ili nakon toplinske obrade, i bakterije mliječne kiseline, preciznije Lactobacillus acidophilus, su korišteni kao mikroorganizmi. Cilj izuma, opisanog u publikaciji, je da koristi visoki sadržaj vlakana zobi u novom tipu prehrambenog proizvoda. Kao jedan primjer publikacija daje laki obrok tipa jogurta. Publikacija ne spominje linolnu kiselinu ili konjugiranu linolnu kiselinu proizvedenu iz nje.
Posljedično, postoji jasna potreba za novim postupcima za proizvodnju konjugirane linolne kiseline. Kada je CLA proizvedena uz pomoć mikrobioloških postupaka, osnovno je pitanje kako problemi povezani sa toksičnošću i antimikrobnim učinkom vanjske linolne kiseline mogu biti minimalizirani ili izbjegnuti. Postupci u kojima novi sirovi materijali mogu biti korišteni za proizvodnju CLA su također vrlo dobrodošli.
Bit izuma
Sadašnji izum se zasniva na korištenju žitarica kao izvora linolne kiseline. Što se tiče različitih vrsta žitarica, zob se smatra najpoželjnijim izvorom linolne kiseline.
Izum se tako odnosi na postupak za pripremu konjugirane linolne kiseline (CLA) iz linolne kiseline, postupak korištenja linolne kiseline iz žitarica kao izvora linolne kiseline.
Postupak iz izuma najradije obuhvaća dva koraka, u kojima se mast iz žitarica prvo hidrolizira kako bi se iz nje oslobodila linolna kiselina te zatim izomerizaciju oslobođene linolne kiseline u konjugiranu linolnu kiselinu uz pomoć mikroba.
Izum se također odnosi na upotrebu žitarica u pripremanju konjugirane linolne kiseline.
Izum se nadalje odnosi na proizvode pripremljene postupkom iz izuma kao i na njihovu upotrebu kao takvih ili u pripremi funkcionalnih supstanci.
Detaljan opis izuma
Postupak iz izuma za pripremu konjugirane linolne kiseline uz pomoć mikroorganizma je karakteriziran time da se mast žitarica koja sadržava linolnu kiselinu hidrolizira i linolna kiselina oslobođena procesom hidrolize se izomerizira u konjugiranu linolnu kiselinu uz pomoć mikroorganizama.
Izum se tako zasniva na upotrebi žitarica kao izvora linolne kiseline. Prema izumu, linolna kiselina je oslobođena iz žitarica uz pomoć reakcije hidrolize masti. U vezi sa sadašnjim izumom iznenađujuće je otkriveno da kada se kao izvor linolne kiseline koristi materijal žitarica, kao što je opisano u zahtjevu, linolna kiselina ne inhibira reakciju izomerizacije. Kada su žitarice, posebno zob korištene kao početni materijal, možemo biti sigurni da će linolna kiselina biti dostupna mikrobima za vrijeme cijelog trajanja izomerizacije, a bez spriječavanja bakterija da djeluju.
Žitarice korištene kao izvorni materijal mogu biti sve žitarice koje sadržavaju linolnu kiselinu i prikladne su za korištenje kao početni materijal jednog jestivog proizvoda. Zob, ječam, raž, pšenica i sladovi pripremljeni od njih mogu se spomenuti kao primjeri. Prikladni sirovi materijali obuhvaćaju neobrađene ili obrađene žitarice i od njih pripremljene frakcije.
Prema sadašnjem izumu, zob je najbolji početni materijal. Sadržaj linolne kiseline u zobi je oko 2 do 4% suhe tvari, i većina linolne kiseline je vezana u bigliceridima i trigliceridima. Zob također sadrži enzim lipazu koji razgrađuje bigliceride i trigliceride na slobodne masne kiseline. Uzevši u obzir cilj izuma, zob je jedan povoljan sirovi materijal zbog svog visokog sadržaja linolne kiseline i prirodne lipazne aktivnosti.
Prirodna lipazna aktivnost žitarica, posebno zobi, može biti korištena u reakciji hidrolize masti. Enzimska aktivnost, potrebna za reakciju, može biti dodana izvana. Prinos CLA može biti poboljšan, i u slučaju zobi a posebno u slučaju drugih žitarica, dodavanjem enzima lipaze u reakciju prema potrebi.
Enzimatska hidroliza masti zobi ili drugih žitarica može biti također olakšana pred-postupkom. Jedan povoljan pred-postupak je postupak pripremanja slada, koji može biti korišten za poticanje lipazne aktivnosti u žitarici. Drugi prikladni pred-postupci uključuju drobljenje, mljevenje, pulveriziranje, i otapanje u prikladnom otapalu, posebno u vodi ili drugom tekućem mediju.
Lipoliza zobi, na primjer, može biti potaknuta drobljenjem zobenih zrna i dodavanjem vode u zdrobljenu zob. Slobodna linolna kiselina stvorena lipolizom djelomično se veže na druge sastojke zobi, što smanjuje količinu linolne kiseline dostupne reakciji izomerizacije, i što stoga treba biti izbjegnuto.
Problem se može smanjiti ili čak ukloniti odabirom prikladnih uvjeta reakcije. U odabiru uvjeta, najvažnije je spriječiti karakterističan pad pH vrijednosti zobenog materijala održavanjem pH na dovoljno visokoj razini za vrijeme koraka izomerizacije linolne kiseline. Prikladan pH je na primjer 6.5 do 9.0. Bolje je pH podesiti na razinu oko 7.0 do 9.0, najradije na razinu oko 8.0 do oko 8.5. Ovo reguliranje pH spriječava vezanje linolne kiseline na zobeni materijal, što se čini kao povoljan učinak na reakciju izomerizacije. Važno je da pH pad u izomerizacijskoj smjesi ne bude posljedica fermentacije već zbog samog zobenog materijala. Tako reakcija izomerizacije ne zahtjeva uobičajenu fermentaciju, tj. zakiseljavanje, već uključuje biokonverziju. Većina CLA stvorene u reakciji izomerizacije je cis-9,trans-11 izomer.
Linolna kiselina oslobođena prema izumu (iz zobi) korištena je u proizvodnji CLA. Reakcija izomerizacije, na primjer, može biti provedena kemijski, enzimatski ili mikrobiološki. Pretvorba linolne kiseline u CLA je najrađe provedena mikrobiološki. U biokonverziji, bilo koja bakterija koja ima sposobnost pretvaranja linolne kiseline u CLA može biti korištena, kao što su bakterije spomenute ranije u opisu pozadine izuma. Međutim, izomerizacija se najrađe provodi upotrebom korisnih bakterija prikladnih za korištenje u prehrambenim primjenama, napose, pomoću bakterija propionske kiseline. Na primjer, prikladni su sojevi koji pripadaju vrsti Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii i P. freudenreichii ssp. shermanii.
Izomerizacija je provedena na način poznat sam po sebi. Sastojci i uvjeti izomerizacijske smjese su odabrani prema zahtjevima korištenog soja kako bi se dobio optimalan prinos CLA. Nakon publiciranja sadašnjeg izuma, odabir prikladnih reakcijskih parametara biti će dio iskustva stručnih osoba.
Koraci hidrolize masti i izomerizacije mogu biti provedeni paralelno, tj. istovremeno ili postepeno, u različitim posudama ili u istoj posudi. Istovremeno izvođenje koraka u jednoj posudi smatra se povoljnijom varijantom, zbog jednostavnosti postupka.
U posebno poželjnom postupku, korisne bakterije, najradije bakterije propionske kiseline su dodane mljevenoj zobi, u kojem slučaju bi linolna kiselina oslobođena u lipolizi direktno reagirala sa korisnim bakterijama, koje izomeriziraju linolnu kiselinu u konjugiranu linolnu kiselinu. Podešavanjem uvjeta postupka da odgovaraju lipolizi i reakciji izomerizacije, može se u smjesi dobiti stvaranje značajnih količina CLA. Voda ili drugi prikladni medij, posebno tekući medij, može se koristiti kako bi se olakšalo miješanje. U vezi sa sadašnjim izumom, korištena je, na primjer, voda kao medij tako da je sadržaj suhe krute tvari u zobenoj mješavini bio 5%, u kojem slučaju je bila postignuta proizvodnja CLA od otprilike 1% od zobene suhe tvari i oko 10% od zobene masti.
Kombiniranjem svojstava žitarica sa korištenjem bakterija sposobnih da izomeriziraju, kao katalizatora u reakciji izomerizacije, dva najveća problema povezana sa proizvodnjom CLA mogu biti izbjegnuta: toksičnost linolne kiseline kao i njezina slaba topljivost u vodi. Sposobnost sojeva da proizvode CLA se najradije kombinira sa materijalom koji sadrži linolnu kiselinu i lipazu i koji u mljevenom obliku osigurava linolnu kiselinu za proizvodnju CLA bez ikakvih drugih dodataka. Takav materijal među žitaricama je zob. Kada se koristi materijal bez lipazne aktivnosti, poput pšenice, izvana se može dodati lipazna aktivnost ili stvoriti kroz postupak stvaranja slada. Prema sadašnjem izumu, upotreba deterdženata, potrebnih da otope vanjsku linolnu kiselinu, ili drugih štetnih dodataka može biti izbjegnuta.
CLA, pripremljena prema izumu, koja sadržava smjesu (zobi) bakterija može biti korištena kao takva, ili može biti dodana i korištena u pripremanju prehrambenih proizvoda i sličnih funkcionalni proizvoda iz kojih mogu biti izolirane i različite frakcije koje sadržavaju CLA. Stvaranje CLA može se također dešavati istovremeno sa pripremanjem prehrambenog proizvoda. Kada se stvaraju različiti proizvodi, funkcionalna svojstva CLA, korisnih bakterija i/ili žitarica, kao što je zob, mogu biti korišteni u proizvodima na željeni način.
Postupci u kojima se konjugirana linolna kiselina izolira iz izomerizacijske smjese smatraju se poželjnim postupcima. Kada se koriste funkcionalni učinci i konjugirane linolne kiseline i bakterijskih stanica, oni mogu biti ponovo zajedno dobiveni, koncentrirani i pomogućnosti sasušeni ili liofilizirani. Kada se voda koristi kao medij, CLA može biti vezana na čvrstu tvar bakterija (zobi) snižavanjem pH. Prema izumu, konjugirana linolna kiselina može biti vezana na čvrstu tvar podešavanjem pH reakcijske smjese na oko 3 do 9, bolje na vrijednost ispod 7.0, najbolje na oko 4 do 6.
U ovom dokumentu, izraz hrana je korišten u širokom smislu pokrivajući sve jestive proizvode koji mogu biti čvrsti, želirani ili tekućeg oblika, kao i također već gotove proizvode spremne za konzumiranje ali i proizvode u koje je proizvod iz izuma dodan u vezi sa konzumacijom kao jedan dodatak ili da bude sastavni dio proizvoda. Na primjer, hrana mogu biti proizvodi mliječne industrije, industrije prerade mesa, industrije obrade hrane, industrije pića, pekarske industrije, slastičarske industrije i industrije slatkiša. Tipični proizvodi obuhvaćaju mlijeko i mliječne proizvode, poput jogurta, zgusnutog mlijeka, sira, kiselog mlijeka, sirutke i drugih fermentiranih mliječnih napitaka, nezrelih-sviježih i zrelih sireva, punjenja gotovih laganih obroka, itd., napitaka, poput napitaka od sirutke, voćnih napitaka, piva i juha. Proizvodi industrije slatkiša predstavljaju drugu važnu grupu.
Poželjne primjene uključuju liofilizirane proizvode, poput CLA i zobi koji sadržavaju bakterije propionske kiseline u obliku kapsula i prašaka, i proizvode čiji je CLA sadržaj povećan korištenjem aktivnosti bakterija propionske kiseline. Proizvodi koji obuhvaćaju i CLA i zobene sastojke, npr. β-glukan, su osobito poželjni, tj. oni proizvodi koji izražavaju funkcionalne učinke obaju sastojaka. Jedna važna dodatna prednost sadašnjeg izuma je da konjugirana linolna kiselina može biti stvorena u proizvodu od zobi, i tako njegova hranjiva vrijednost može biti povećana.
Izum će biti opisan u detalje pomoću slijedećih primjera. Tim primjerima se samo namjerava ilustrirati izum, bez ograničavanja njegovog opsega na bilo koji način.
Referenca primjer 1.
Koncentracija CLA u proizvodu baziranom na fermentiranim zobenim mekinjama
Sadržaj masnih kiselina i koncentracije oleinske kiseline, linolne kiseline i CLA u fermentiranim proizvodima opisanim u Finskom patentu 88856 su određene kako slijedi. Uzorci su uzeti iz komercijalnih proizvoda, Yosa šumski plodovi i Yosa šljiva, proizvedenih od Bioferme Oy, Finska, i masti su iz njih izolirane direktnom saponifikacijom i ekstrakcijom sa dietil-eterom i heksanom. Metilni esteri masnih kiselina priređeni su prostupkom kataliziranim sulfatnom kiselinom. Tablica A pokazuje sadržaj pojedinih masnih kiselina u uzorcima u postocima (%) od ukupnog sadržaja masnih kiselina, a Tablica B pokazuje koncentracije oleinske kiseline, linolne kiseline i CLA (c-9,t-11) kao mg/g uzorka. Ovi proizvodi (Yosa šljiva i Yosa šumski plodovi) sadrže CLA u vrlo maloj količini. Vlo mali CLA ostaci mogu biti posljedica utjecaja analitičkog postupka ili oni mogu biti izomeri linolne kiseline (C18:3) koji se eluiraju u blizini CLA u plinskoj kromatografskoj analizi.
Tablica A. Sadržaj pojedinih masnih kiselina u Yosa uzorcima, u postotku (%) od ukupne količine masnih kiselina
[image]
Tablica B. Koncentracije oleinske kiseline, linolne kiseline i CLA u Yosa uzorcima, mg/g uzorka
[image]
Primjer 1.
Proizvodnja CLA u smjesi zob/voda pomoću bakterija propionske kiseline
Da bi se dokazali učinci postupka prema izumu, proveden je test u kojem su bakterije propionske kiseline bile dodane u smjesu zobi i vode da bi se koristile kao katalizatori izomerizacije. U pokusu je korišteno grubo zobeno brašno, proizvedeno mljevenjem nerazblažene zobi (vrsta Lisbeth) kroz otvore veličine 0.5 mm. Od grubog zobenog brašna je pripremljena 5%-tna vodena smjesa (w/v), smjesa je homogenizirana pomoću Ultra Turrax aparata kroz otprilike dvije minute.
U testu su korištena dva soja bakterija propionske kiseline, i to Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii JS (PJS) i Propionibacterium freudenreichii subsp. Freudenreichii 131 (P131).
Kultiviranje PJS stanica za pokus provedeno je kako je opisano u Rainio, A., Vahvaselkä, M., Soumalainen, T., i Laakso, S., Reduction of linoleic acid inhibition in production of conjugated linoleic acid by Propionibacterium freudenreichii ssp. shermani, Can. J. Microbiol. 47: 735-740 (2001). Soj P131 je kultiviran na vodenoj otopini MRS (LabM). Stanice su centrifugirane (20 minuta na 6000 okreta/minuti) da bi ih se odvojilo i elutriralo u maloj količini otopine peptona i soli, koja je sadržavala 0.1% bakteriološkog peptona (LabM), i 0.85% NaCl. Suspenzija stanica dodana je u smjesu zobi i vode (a ́ 100 ml) kako bi se dobila koncentracija od oko 1 × 109 cfu/ml. pH smjese je podešen na 7.0 pomoću 1 M otopine NaOH, i pušteno je da se odvija hidroliza i reakcija izomerizacije na 25°C. Za vrijeme prvih 17 sati, smjesa zobi i vode ostavljena je da hidrolizira bez podešavanja pH, što rezultira padom pH vrijednosti smjese na otprilike 4.8. Nakon toga, pH smjese je podignut na 8.0 pomoću otopine NaOH i podešavanje je ponavljano otprilike svakih 1.5 do 2 sata kroz oko osam sati. Tako pH smjese ostaje otprilike između 7.5 i 8.0. Nakon toga, izomerizacija se nastavlja bez pH reguliranja sve dok ne prođe otprilike 40 sati.
Za usporedbu, proveden je pokus u kojem je u smjesu zobi i vode dodan odgovarajući volumen otopine peptona i soli umjesto suspenzija stanica PJS ili P131. Za vrijeme prvih 17 sati, pH smjese pao je na oko 5.4. Nakon toga, pH je bio podešen kao i u gore opisanom pokusu.
U pokusu je praćeno oslobađanje linolne kiseline, kao posljedica aktivnosti prirodnog enzima lipaze zobi i izomerizacije ove slobodne linolne koseline u CLA pomoću mikrobnih stanica. Uzorci od 0.5 ml su uzimani iz smjese zobi i vode, oni su hladno-sušeni prije analize masnih kiselina. Količine različitih masnih kiselina bile su određene iz uzoraka pomoću plinske kromatografije. Analiza masnih kiselina provedena je kako je opisano u Suutari, M., Liukkonen, K. i Laakso, S., Temperature adaptation in yeasts: the role of fatty acids, J. Gen. Microbiol. 136: 1469-1474 (1990). Masne kiseline sadržane u uzorcima bile su identificirane usporedbom njihovih retencijskih vremena sa retencijskim vremenima poznatih standarda masnih kiselina. Konjugirana linolna kiselina bila je identificirana uz korištenje preparata iz Sigme, koji je bio mješavina cis i trans-9,11 i cis i trans-10,12 CLA izomera. Metilni ester C17:0 masne kiseline (metilni ester heptadekanoične kiseline, Sigma) bio je korišten kao unutrašnji standard u kvantifikaciji masnih kiselina.
Uzorci od 1.5 ml, koji su bili hladno sušeni, bili su uzeti iz smjese zobi i vode za analizu lipidnih klasa pojedinih masnih kiselina. Analiza lipidnih klasa provedena je kako je opisano u Liukkonen, K.H., Montfoort, A. i Laakso, S., Water-induced lipid changes in oat processing, J. Agric. Food Chem. 40: 126-130 (1992).
Količina stvorene linolne kiseline i CLA bila je izračunata kao funkcija reakcijskog vremena po krutom uzorku. Pokus je proveden u smjesi zobi i vode uz prisustvo bakterija propionske kiseline (PAB) i bez njih. Rezultati su prikazani u Tablici 1.
Tablica 1. Količina stvorene linolne kiseline i CLA kao funkcija reakcijskog vremena izračunatog po krutom uzorku.
[image]
Za stvaranje CLA tako treba funkcioniranje bakterija propionske kiseline kao katalizatora izomerizacije u smjesi zobi i vode. Kada je korišten PJS soj, stvorene su značajne količine CLA, 7.6 mg/g suhe tvari. Ova količina predstavlja 7.3% masti sadržane u zobi.
Tablica 2 pokazuje raspodjelu linolne kiseline i CLA u različitim lipidnim klasama kada se smjesa zobi i vode inkubira zajedno sa PJS stanicama. PL = polarni lipidi, TG = trigliceridi, DG = bigliceridi i FFA = slobodne masne kiseline.
Tablica 2. Raspodjela linolne kiseline i CLA (%) među različitim klasama lipida za vrijeme pokusa.
[image]
Rezultati pokazuju da je na početku pokusa, glavnina linolne kiseline vezana u trigliceride dok je samo 4% bilo u obliku slobodne masne kiseline. Međutim, nakon 17 sati hidrolize, skoro 40% linolne kiseline je otpušteno iz triglicerida. Stvorena CLA je pretežno (skoro 90%) u obliku slobodne masne kiseline. Najmanje 80% stvorene CLA bilo je cis-9,trans-11 izomer.
Koncentracije živih stanica bakterija propionske kiseline su određene korištenjem puferiranog laktatnog agara, koji je sadržavao 0.5% triptona (LabM), 1% ekstrakta kvasca (LabM), 16.8 ml/l 50% Na laktata (Merck), 1% bi-natrijeve soli β-glicerofosfata (Merck) i 1.5% agara (LabM). Ploče su inkubirane anaerobno na 30°C kroz 6 dana. Na početku pokusa, koncentracija PJS je bila 9.0 × 109 cfu/ml, a nakon 20 sati 7.5 × 109 cfu/ml. Na osnovi rezultata može se reći da bakterije propionske kiseline nisu rasle u smjesi zobi i vode za vrijeme reakcije.
pH smjese zobi i vode težila je brzom snižavanju bez obzira na to jesu li bakterije propionske kiseline bile dodane u smjesu ili ne. Smanjene pH je uzrokovano otapanjem kiselih komponenti iz zobi u vodi. Postupak tako netreba da stanice budu sposobne fermentirati zob, budući da će stvorene organske kiseline sniziti pH.
Primjer 2
Proizvodnja CLA iz drugih vrsta žitarica pomoću bakterija propionske kiseline
Primjer 1 je ponovljen uz korištenje ječma i raži umjesto zobi. Kao bakterija propionske kiseline korištene su stanice soja Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii JS (PJS). Na osnovi rezultata, može se zaključiti da je proizvodnja CLA u smjesi ječma ili raži u vodi bila značajno slabija nego u smjesi zobi i vode; stvoreno je 0.91 mg CLA / g suhe tvari uz korištenje ječma i samo 0.83 mg /g suhe tvari u slučaju raži za vrijeme 41-satne inkubacije gdje je pH reakcijske smjese bio podešen na 8.0 između 17. i 25. sata. Slabiji rezultati su djelomično objašnjeni činjenicom da je koncentracija linolne kiseline u ovim žitaricama manja nego u zobi. Nadalje, poznato je da oni ne sadržavaju lipaznu aktivnost bez klijanja. Međutim, na osnovi rezultata je jasno da postupak prema izumu također funkcionira kad se kao materijal koriste druge vrste žitarica. Stvaranje slobodne linolne kiseline može biti povećano dodavanjem lipazne aktivnosti izvana u reakcijsku smjesu, u kojem slučaju bi se prinosi postupka mogli značajno povećati od gore navedenih vrijednosti.
Primjer 3.
Utjecaj pH na stvaranje CLA
Utjecaj pH smjese zobi i vode na stvaranje CLA je analiziran slijedećim pokusima:
- pH nije uopće podešavan
- pH je bio podešen na 8.0 između 0. i 8. sata (tako pokus ne uključuje odvojeni hidrolizni korak)
- pH je bio podešen na 7.0 između 17. i 25. sata
- pH je bio podešen na 8.0 između 17. i 25. sata
- pH je bio podešen na 8.5 između 17. i 25. sata
- pH je bio podešen na 9.0 između 17. i 25. sata.
U svim gore spomenutim pokusima PJS soj bakterija je bio dodan u smjesu zobi i vode kako je opisano u primjeru 1. Svi ostali postupci u pokusu su bili također isti.
Dodatno, pokus je provođen u fermentatoru, gdje je pH smjese zobi i vode bio držan na 8.5 za vrijeme cijelog koraka izomerizacije (između 17. i 41. sata) pomoću automatskog dodavanja otopine NaOH. U 17-satnom koraku lipolize koji je prethodio izomerizaciji, pH je pao na 4.7. Volumen smjese zobi i vode bio je 1.5 litara, temperatura 25°C i brzina mješanja 100 okreta po minuti. Koncentracija živih PJS stanica bila je 1.1 × 1010 cfu/ml na početku pokusa i 8.4 × 109 cfu/ml na kraju pokusa.
Rezultati su prikazani u Tablici 3. Prema rezultatima, može se zaključiti da je stvaranje CLA bilo uspješno kada je pH smjese zobi i vode bio podešen između 8.0 i 8.5 nakon što je enzim lipaza oslobodio linolnu kiselinu. Ovaj se postupak najbolje odvija kod pH nižih od onih potrebnih u reakciji izomerizacije. Najbrže i najveće stvaranje CLA je postignuto kada je pH smjese zobi i vode držan na 8.5 kontinuiranom regulacijom za vrijeme cijelog koraka izomerizacije. Ovo odražava važnost čak i pH vrijednosti prikladne za reakciju izomerizacije procesa.
Tablica 3. Utjecaj pH smjese zobi i vode na stvaranje CLA.
[image]
Primjer 4.
Koncentriranje proizvedene CLA na zobenoj suhoj tvari pomoću snižavanja pH.
Stvaranje CLA u smjesi zobi i vode je izvedeno po uzoru na primjer 1 upotrebom PJS stanica. Nakon toga, pH smjese zobi i vode je podešen na 8.0 pomoću otopine NaOH ili na 4.5 pomoću otopine HCL. Smjese su centrifugirane i koncentracije CLA su bile određene u supernatantima ali i u zobeno-bakterijskim masama. Raspodjela CLA bila je slijedeća: kod pH 8.0, 85% CLA je bilo u čvrstoj fazi, a 15% u tekućoj fazi; kod pH 4.5, 100% CLA je bilo u čvrstoj fazi. Rezultat osigurava postupak pomoću kojeg, koristeći pad pH vrijednosti, CLA može biti koncentrirana na čvrstoj fazi koju tvore zob i bakterijske stanice, i tako ne dolazi do njenog uklanjanja sa medijem.
Claims (20)
1. Postupak za pripremanje konjugirane linolne kiseline pomoću mikroorganizama, naznačen time, što se zobena mast hidrolizira, a linolna kiselina oslobođena iz nje reakcijom hidrolize izomerizira pomoću mikroorganizama u konjugiranu linolnu kiselinu.
2. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, da je žitarica neobrađena zob, prethodno obrađena zob ili zobena frakcija.
3. Postupak prema zahtjevu 1 ili 2, naznačen time, da je hidroliza masti uzrokovana enzimskom aktivnosti zobi.
4. Postupak prema zahtjevu 1 ili 2, naznačen time, da je hidroliza masti provedena dodavanjem enzimske aktivnosti izvana.
5. Postupak prema zahtjevima 1 do 4, naznačen time, da je izomerizacija provedena pomoću korisne bakterije (bakterija).
6. Postupak prema zahtjevu 5, naznačen time, da je korisna bakterija bakterija propionske kiseline.
7. Postupak prema zahtjevu 6, naznačen time, da je bakterija propionske kiseline soj koji pripada vrsti Propionibacterium freudenreichii, bolje soj koji pripada njihovoj podvrsti Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii ili Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii.
8. Postupak prema zahtjevu 7, naznačen time, da je bakterija propionske kiseline Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii JS, DSM 7067.
9. Postupak prema zahtjevima 1 do 8, naznačen time, da je izomerizacija provedena kod pH oko 6.5 do 9.5.
10. Postupak prema zahtjevu 9, naznačen time, da je izomerizacija bolje provedena kod pH oko 7.0 do 9.0, najbolje kod pH oko 8.0 do 8.5.
11. Postupak prema zahtjevima 1 do 10, naznačen time, da su koraci hidrolize i izomerizacije provedeni u nizu jedan za drugim.
12. Postupak prema zahtjevima 1 do 10, naznačen time, da su koraci hidrolize i izomerizacije provedeni istovremeno.
13. Postupak prema zahtjevima 1 do 12, naznačen time, da se proizvodnja konjugirane linolne kiseline odvija povezano sa proizvodnjom prehrambenog proizvoda.
14. Postupak prema zahtjevima 1 do 13, naznačen time, da se u njemu stvara uglavnom cis-9, trans-11 izomer konjugirane linolne kiseline
15. Postupak prema zahtjevima 1 do 14, naznačen time, da je konjugirana linolna kiselina vezana na čvrstu tvar podešavanjem pH reakcijske smjese na oko 3 do 9, bolje na vrijednost nižu od 7.0, najbolje na oko 4 do 6.
16. Postupak prema zahtjevima 1 do 15, naznačen time, da je konjugirana linolna kiselina izolirana iz reakcijske juhe i po mogućnosti osušena.
17. Postupak prema zahtjevima 1 do 15, naznačen time, da su konjugirana linolna kiselina, bakterijske stanice i zobeni materijal, korišten kao najdraži početni materijal, koncentrirani i pomogućnosti osušeni.
18. Postupak prema zahtjevu 17, naznačen time, da su konjugirana linolna kiselina, bakterijske stanice i zobeni materijal korišten kao početni materijal, ponovo dobiveni, koncentrirani i liofilizirani.
19. Upotreba zobi, naznačena time, da se zob koristi za pripremu konjugirane linolne kiseline.
20. Postupak za pripremanje konjugirane linolne kiseline iz linolne kiseline, naznačen time, da je zob korištena kao izvor linolne kiseline.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI20020593A FI115842B (fi) | 2002-03-27 | 2002-03-27 | Menetelmä konjugoidun linolihapon valmistamiseksi |
| PCT/FI2003/000236 WO2003080850A1 (en) | 2002-03-27 | 2003-03-27 | Process for preparing conjugated linoleic acid |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HRP20041007A2 true HRP20041007A2 (en) | 2004-12-31 |
Family
ID=8563661
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HRP20041007 HRP20041007A2 (en) | 2002-03-27 | 2004-10-26 | Process for preparing conjugated linoleic acid |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20050170477A1 (hr) |
| EP (1) | EP1495126A1 (hr) |
| JP (1) | JP2005520549A (hr) |
| KR (1) | KR20040099381A (hr) |
| CN (1) | CN1643156A (hr) |
| AU (1) | AU2003219196A1 (hr) |
| BR (1) | BR0308386A (hr) |
| CA (1) | CA2482349A1 (hr) |
| FI (1) | FI115842B (hr) |
| HR (1) | HRP20041007A2 (hr) |
| NO (1) | NO20044608L (hr) |
| NZ (1) | NZ536028A (hr) |
| PL (1) | PL372595A1 (hr) |
| RU (1) | RU2004131648A (hr) |
| WO (1) | WO2003080850A1 (hr) |
| ZA (1) | ZA200408166B (hr) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7193096B2 (en) | 2003-07-01 | 2007-03-20 | Loders Croklaan Usa Llc | Process for producing a conjugated di- or poly-unsaturated fatty acid of 12 to 24 carbon atoms or salt or ester thereof |
| FI20041240A0 (fi) * | 2004-09-27 | 2004-09-27 | Raisio Yhtymae Oyj | Menetelmä rasvahappojen esteröimiseksi |
| ES2277546B1 (es) * | 2005-11-21 | 2008-06-16 | Natraceutical, S.A. | Procedimiento microbiano de produccion de isomeros especificos de acidos linoleicos conjugados. |
| US8153391B2 (en) * | 2008-08-29 | 2012-04-10 | Bunge Oils, Inc. | Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| KR101482775B1 (ko) * | 2010-08-25 | 2015-01-16 | 이화여자대학교 산학협력단 | 운데실렌산 및/또는 공액리놀렌산을 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 조성물 |
| WO2012026663A1 (ko) * | 2010-08-25 | 2012-03-01 | 이화여자대학교 산학협력단 | 운데실렌산, 공액리놀레산 및/또는 공액리놀레산 이성질체를 포함하는 항암보조제 |
| CN102559532B (zh) * | 2010-12-13 | 2013-09-04 | 北京农业生物技术研究中心 | 一株产共轭亚油酸的菌株及其应用 |
| CN103849660B (zh) * | 2014-03-28 | 2016-01-06 | 大连医诺生物有限公司 | 一种以固定化脂肪酶为催化剂的耦联法制备共轭亚油酸的方法 |
| CN106753752A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-05-31 | 青岛嘉瑞生物技术有限公司 | 一种利于降血压的海蓬子保健油 |
| CN113061169B (zh) * | 2020-03-24 | 2022-09-27 | 江南大学 | 一种转录调控蛋白及其在共轭亚油酸生产中的应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5856149A (en) * | 1995-06-01 | 1999-01-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of producing conjugated fatty acids |
| SE9704584L (sv) * | 1997-12-05 | 1999-07-19 | Lennart Bjoerck | Framställning av konjugerad linolsyra |
| AU2015099A (en) * | 1997-12-23 | 1999-07-12 | Dcv, Inc. Doing Business As Bio-Technical Resources | Linoleate isomerase |
| FI108730B (fi) * | 1999-11-19 | 2002-03-15 | Valio Oy | Menetelmä konjugoidun linolihapon valmistamiseksi |
-
2002
- 2002-03-27 FI FI20020593A patent/FI115842B/fi not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-03-27 EP EP03714992A patent/EP1495126A1/en not_active Withdrawn
- 2003-03-27 RU RU2004131648/13A patent/RU2004131648A/ru not_active Application Discontinuation
- 2003-03-27 CN CNA038070952A patent/CN1643156A/zh active Pending
- 2003-03-27 AU AU2003219196A patent/AU2003219196A1/en not_active Abandoned
- 2003-03-27 PL PL03372595A patent/PL372595A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2003-03-27 BR BR0308386-1A patent/BR0308386A/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-03-27 US US10/508,987 patent/US20050170477A1/en not_active Abandoned
- 2003-03-27 NZ NZ536028A patent/NZ536028A/en unknown
- 2003-03-27 JP JP2003578574A patent/JP2005520549A/ja active Pending
- 2003-03-27 CA CA002482349A patent/CA2482349A1/en not_active Abandoned
- 2003-03-27 WO PCT/FI2003/000236 patent/WO2003080850A1/en not_active Application Discontinuation
- 2003-03-27 KR KR10-2004-7015526A patent/KR20040099381A/ko not_active Application Discontinuation
-
2004
- 2004-10-08 ZA ZA200408166A patent/ZA200408166B/xx unknown
- 2004-10-26 NO NO20044608A patent/NO20044608L/no unknown
- 2004-10-26 HR HRP20041007 patent/HRP20041007A2/hr not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR0308386A (pt) | 2005-01-11 |
| FI20020593A0 (fi) | 2002-03-27 |
| US20050170477A1 (en) | 2005-08-04 |
| NZ536028A (en) | 2006-12-22 |
| WO2003080850A1 (en) | 2003-10-02 |
| RU2004131648A (ru) | 2005-07-10 |
| AU2003219196A1 (en) | 2003-10-08 |
| CA2482349A1 (en) | 2003-10-02 |
| KR20040099381A (ko) | 2004-11-26 |
| PL372595A1 (en) | 2005-07-25 |
| ZA200408166B (en) | 2005-09-26 |
| NO20044608L (no) | 2004-12-22 |
| FI20020593A (fi) | 2003-09-28 |
| JP2005520549A (ja) | 2005-07-14 |
| EP1495126A1 (en) | 2005-01-12 |
| FI115842B (fi) | 2005-07-29 |
| CN1643156A (zh) | 2005-07-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11525150B2 (en) | Methods for producing polyunsaturated fatty acid and lipid containing polyunsaturated fatty acid | |
| JPH1070992A (ja) | 不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法 | |
| US9476075B2 (en) | Oil enriched with arachidonic acid of microorganisms (unicellular fungus Mortierella alpina) and method for the production thereof | |
| HRP20041007A2 (en) | Process for preparing conjugated linoleic acid | |
| EP0858501B1 (fr) | Ferments lactiques, et leur utilisation pour l'obtention de produits hypocholesterolemiants | |
| Tapia et al. | Production of conjugated linoleic acid by lactic acid bacteria: Screening and optimization | |
| RU2265664C2 (ru) | Способ получения конъюгированной линолевой кислоты | |
| Troegeler-Meynadier et al. | Effects of heating process of soybeans on ruminal production of conjugated linoleic acids and trans-octadecenoic acids in situ | |
| JP4838628B2 (ja) | γ−アミノ酪酸高含有組成物の製造方法 | |
| EP4327665A1 (en) | Solidified oil preparations | |
| Bzducha et al. | Influence of two probiotic Lactobacillus strains on CLA content in model ripening cheeses | |
| Yavarzadeh et al. | Production of glycerolamines based conjugated γ-aminobutyric acids using microbial COX and LOX as successor enzymes to GAD | |
| Vahvaselkä et al. | Esterification of conjugated linoleic acid by yeasts for increasing the value of plant materials | |
| JP4799597B2 (ja) | ビフィドバクテリウム属細菌 | |
| PIZZOLONGO et al. | Production of Butyric Acid by Different Strains of Lactobacillus Plantarum | |
| Assem et al. | Bio-production of conjugated linoleic acid (CLA) from rice bran. | |
| JP2010154788A (ja) | スフィンゴ脂質富化麹とその製造方法 | |
| BR102015018119A2 (pt) | Process of biomass rich production in pigs for use in animal nutrition and / or fish employing agricultural waste amilace |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1OB | Publication of a patent application | ||
| ARAI | Request for the grant of a patent on the basis of the submitted results of a substantive examination of a patent application | ||
| ODRP | Renewal fee for the maintenance of a patent |
Payment date: 20060310 Year of fee payment: 4 |
|
| OBST | Application withdrawn |