HRP20010075A2 - Methods and compositions for treating gastro-esophageal reflux disease - Google Patents

Description

Ova prijava je nastavak dijela prijave broj 08/905,941, podnesene 5. kolovoza, 1997 koji je dio prijave broj 08/684,753, podnesene 19. srpnja, 1996, sada US Patent broj 5,739,151.

Polje izuma

Predmetni izum govori o postupcima i sastavu za liječenje poremećaja središnjeg živčanog sistema (SŽS), povraćanja, i poremećaja povezanih sa disfunkcijom gastrointestinalnog motiliteta. U drugom aspektu, ovaj izum govori o metabolitima cisaprida i optičkim izomerima takvih metabolita.

STEREOKEMIJSKA POVEZANOST I LJEKOVITO DJELOVANJE

Mnogi organski spojevi postoje u optički aktivnom obliku, to jest, oni imaju sposobnost da rotiraju ravninu ravninski-polarizirane svjetlosti. Kod opisivanja optički aktivnog spoja, prefiks D i L ili R i S koriste se da označe apsolutnu konfiguraciju molekule oko njezinog kiralnog centra. Prefiks d i l ili (+) i (-) se koriste da odrede predznak rotacije ravninski-polarizirane svjetlosti sa spojem, (-) ili l znači da spoj ima lijevu rotaciju. Prefiks (+) ili d govori da spoj ima desnu rotaciju. Za dane kemijske strukture, ovi spojevi, zvani stereoizomeri, su identični osim u njihovim zrcalnim odrazima. Specifični stereoizomeri mogu se također odnositi kao i enantiomeri, i mješavine takvih izomera se obično nazivaju enantiomerske ili racemske mješavine.

Stereokemijska čistoća je izrazito važna na polju farmaceutike, gdje mnogi od prepisanih lijekova pokazuju kiralnost. U slučaju kod davanja beta adrenergičkih blokatora, propranolola, gdje je poznato da je S-enatiomer 100 puta djelotvorniji od R-enatiomera. Obično djelotvornost nije jedina briga na polju farmaceutike.

FARMAKOLOŠKO DJELOVANJE

United States Patent serijskog broja 4,962,115, 5,057,525 i 5,137,896 (zajednički «Van Daele») otkrivaju N-(3-hidroksi-4-piperidinil)benzamide uključujući i cisapride. Za te spojeve je navedeno da stimuliraju mobilnost gastrointestinalnog sustava. Izjave Van Daele govore o cis i trans diastereomerskim racematima tih spojeva koji se mogu dobiti zasebno konvencionalnim postupcima, i da se ti cis i trans diastereomerski racemati mogu dalje rastopiti u njihove optičke izomere.

Cisapridi su jedna vrsta spojeva poznatih kao derivati benzamida. (Vidi: Schapira i sur., Acta Gastroenterolog. Belg. LIII: 446-457, 1990). Kao vrsta, ti derivati benzamida imaju nekoliko značajnih farmakoloških djelovanja. Značajna farmakološka aktivnost derivata benzamida očituje se kroz njihove učinke na živčani sustav koji su modulirani sa neurotransmiterom serotoninom. Uloga serotonina, pa stoga i farmakologija derivata benzamida, je široko primjenjiva kod različitih stanja već duži niz godina (vidi Phillis, J. W. «The Pharmacology of Synapses», Pergamon Press, Monograph 43, 1970; Frazer, A. i sur., Annual Rev. of Pharmacology and Therapeutics 30: 307-348, 1990). Stoga su istraživanja bila fokusirana na lociranje mjesta proizvodnje i pohranjivanja serotonina kao i na lociranje serotoninskih receptora u ljudskom organizmu na način da se odredi veza između tih mjesta i različitih bolesnih stanja ili uvjeta.

U ovoj izjavi, otkriveno je da je najveće mjesto za proizvodnju i pohranjivanje serotonina u enterokromafinskim stanicama u mukozi gastrointestinalnog sustava. Također je otkriveno i to da serotonin ima snažno stimulirajuće djelovanje na motilitet crijeva pomoću stimuliranja glatke crijevne muskulature, ubrzavajući pasažu tvari u crijevima, i smanjujući vrijeme apsorpcije crijevnog sadržaja, i uzrokovanje proljeva. Stimulatorno djelovanje također je povezano sa povraćanjem i mučninom.

S obzirom na modulaciju serotonina u živčanom sustavu i u gastrointestinalnom traktu, mnogi od derivata benzamida se susreću kao učinkovita antiemetička sredstva i redovito se rabe kod kontrole povraćanja za vrijeme kemoterapija ili radioterapija kod raznih kancerogenih stanja, a posebno se koriste kao visoko emetogenski spojevi kao što je cisplatin (vidi: Costall i sur., Neuropharmacology 26: 1321-1326, 1987). Ovo djelovanje je skoro uvijek rezultat sposobnosti spojeva da blokiraju djelovanje serotonina (5HT) na specifičnim mjestima djelovanja, kao što su 5HT3 receptori, koji su klasificirani i opisani u znanstvenoj literaturi kao serotoninski M-receptori (vidi: Clarke i sur., Trends in Pharmacological Sciences 10: 385-386, 1989). Kemo i radio terapija može uzrokovati mučnine i povraćanje koje nastaje zbog oslobađanja serotonina iz oštećenih enterokromafinskih stanica u gastrointestinalnom traktu. Oslobađanje neurotransmitera serotonina stimulira oba aferentna dijela nervusa vagusa (zbog toga dolazi do refleksa povraćanja) i serotoninske receptore u zoni kemoreceptorskih okidača u dijelu mozga koji se naziva postrema. Anatomsko mjesto za djelovanje derivata benzamida, i za bilo koje slično djelovanje u središnjem živčanom sustavu (SŽS), ili periferno, ili u njegovoj kombinaciji, ostaje nepoznanica (vidi: Barnes i sur., J. Pharm. Pharmacol. 40: 586-588, 1988).

Drugo značajno djelovanje derivata benzamida je u povećanju aktivnosti glatke muskulature u gastrointestinalnom traktu od jednjaka do proksimalnog dijela tankog crijeva, te stoga dolazi do ubrzanja pasaže sadržaja od jednjaka pa sve do tankog crijeva kao i posljedično ubrzano pražnjenje želuca i povećanje smanjenja tonusa sfinktera jednjaka (vidi: Decktor i sur., Eur. J. Pharmacol. 147: 313-316, 1988). Nadalje derivati benzamida nisu agonisti kolinergičkih receptora, prije spomenuti učinak na glatku muskulaturu se može blokirati sa sredstvima koja blokiraju muskarinske receptore kao što je atropin ili inhibitori neuronskih transmitora kao što je tetrodotoksin tip koji blokira kanale natrija (vidi: Fernandez i Massingham, Life Sci. 26: 1-14, 1985). Slično blokirajuće djelovanje je već bilo viđeno kao kontaktilni učinak serotonina na tanko crijevo (vidi: Craig i Clark, Brit. J. Pharmacol. 96: strana 247, 1989). Vjeruje se da je primarni učinak na glatku muskulaturu derivata benzamida posljedica rezultata agonističkog djelovanja na vrstu serotoninskih receptora označenih kao 5HT4 receptori koji su locirani na interneuronima u mienterijskom pleksusu crijevne stjenke (vidi: Clarke i sur., Trends in Pharmacological Sciences 10: 385-386, 1989 i Dumuis i sur., N. S. Arch. Pharmacol. 340: 403-410, 1989). Aktiviranje tih receptora nadalje pospješuje otpuštanje acetilkolina iz parasimpatičkih nervnih završetaka koji su smješteni i okruženi sa vlaknima glatke muskulature. To je kombinacija acetilkolina sa njegovim receptorima na membrani glatke muskulature koja je trenutni okidač za kontrakciju mišića.

Cisapridi posjeduju slična svojstva kao i metoklopramidi osim u tome da njihov nedostatak blokira djelovanje dopaminskih receptora (vidi: Reyntjens i sur., Curr. Therap. Res. 36: 1045-1046, 1984) i pospješuje motilitet u debelom crijevu kao i u gornjim dijelovima probavnog sustava (vidi: Milo, Curr. Therap. Res. 36: 1053-1062, 1984). Kolonski učinak se, kao i obično, ne može u potpunosti blokirati sa atropinom i može predstavljati, najmanjim dijelom, direktan učinak lijeka (vidi: Schuurkes i sur., J. Pharmacol Exp. Ther. 234: 775-783, 1985). Korištenjem kultiviranih kolikularnih neurona mišjih embrija i cAMP generacijom kao krajnjom točkom za određivanje 5HT4 aktivnosti, EC50 koncentracija racemskih cisaprida je 7 x 10-8 M (vidi: Dumuis i sur., N. S. Arch. Pharmacol. 340: 403-410, 1989). Lijekovi ove vrste ne djeluju na sekreciju želučane kiseline i imaju promjenjive učinke na motilitet kolona (vidi Reyntjens i sur., Curr. Therap. Res. 36: 1045-1046, 1984 i Milo, Curr. Therap. Res. 36: 1053-1062, 1984).

Racemski cisapridi se koriste primarno u liječenju bolesti gastro-ezofagealnog refluksa, koja je karakterizirana sa vraćanjem sadržaja želuca u jednjak. Cisapridi su dostupni jedino kao 1:1 racemsaka mješavina optičkih izomera, zvanih enentiomeri, to jest, kao mješavina cis (-) i cis (+) cisaprida poznatih kao «Prepulsid».

Zapaženo je da ti cisapridi ulaze u središnji živčani sustav i spajaju se na 5HT4 receptore indicirajući da cisapridi mogu imati centralno-posredovani učinak. Kako je pokazao Dumuis i sur., N. S. Arch. Pharmacol. 340: 403-410, 1989, cisapridi su učinkoviti ligandi na 5HT4 receptorima, a ti receptori su locirani u nekoliko područja u središnjem živčanom sustavu. Modulacija serotonergijskog sustava može doprinijeti različitim učincima na ponašanje.

Zbog svoje aktivnosti kao prokinetičko sredstvo, cisapridi također mogu biti korisni u liječenju dispepsije, gastropareze, začepa, post operativnog ileusa, i intestinalnih pseudo opstrukcija.

Dispepsija je stanje karakterizirano sa slabljenjem snage funkcije probave tako da nastaju simptomi primarne gastrointestinalne disfunkcije ili komplikacije kroz ostale poremećaje kao što su upala slijepog crijeva, disturbancije žučne vrećice, ili čak neprobavljanje hrane. Gastropareza je paraliza želuca praćena sa poremećajima motorike ili sa komplikacijama i bolestima kao što je dijabetes, progresivna sistemska skleroza, anoreksija, nervoza ili miotonička distrofija. Konstipacija ili začep je stanje koje je karakterizirano sa neredovitim pražnjenjem sadržaja debelog crijeva i evakuacijom fecesa a rezultat je stanja koje prati nedostatak tonusa intestinalnih mišića ili spastičnost intestinalnih mišića. Post operativni ileus je opstrukcija tankog crijeva nakon koje može doći do prekida crijevne stjenke nakon operacije. Intestinalna pseudo opstrukcija je stanje koje je karakterizirano sa začepom, količnom boli, i povraćanjem, ali bez dokaza fizičke opstrukcije.

Zajedničko davanje racemskih cisaprida sa drugim ljekovitim sredstvima uzrokuje inhibitorne probleme metabolizma cisaprida u jetri. Na primjer, ketokonazol ima naglašeni učinak na kinetiku cisaprida koja rezultira inhibicijom metaboličke eliminacije cisaprida koje vodi do 8 puta smanjenja u nivou plazme. (Vidi: Lavrijsen, K. i sur., «The Role of CYP3A4 in the In-vitro Metabolism of Cisapride in the Human Liver Microsomes and In-vitro and In-vivo Interactions of Cisapride with Co-administered Drugs», Department of Pharmacokinetics and Drug Metabolism, Janssen Research Foundation, Beerse, Belgium). Interakcija racemskog cisaprida i drugog ljekovitog sredstva može također potencirati kardiovaskularne popratne pojave, kao što je na primjer kardiotoksicitet. To potenciranje nalazimo, kada drugi lijek prisutan u tijelu pacijenta interferira sa metabolizmom racemskog cisaprida, i otuda dolazi do ugradnje racemskog cisaprida u organizam. Te interakcije su značajne posljedice upotrebe racemskih cisaprida, naročito, zbog toga što se racemski cisapridi često koriste prije, za vrijeme ili neposredno poslije drugog ljekovitog sredstva.

Nadalje, nađeno je da davanje cisaprida ljudima uzrokuje štetne učinke uključujući, tahikardiju, djelovanje na središnji živčani sustav (SŽS), povećanje sistoličkog tlaka, interakciju sa drugim lijekovima, dijareju, abdominalne grčeve, i srčanu depresiju. Dalje, izvještavano je da intravenozno davanje racemskog cisaprida pokazuje slučajeve dodatnih štetnih popratnih pojava koji nisu zabilježeni poslije oralnog davanja racemskih cisaprida. (Vidi: stacher i sur. Digestive Diseases and Sciences 32 (11): 1223-1230 (1987)).

Cisapridi se skoro u potpunosti apsorbiraju nakon oralnog davanja ljudima, ali bioprihvatljivost glavnog spoja je samo 40-50%, zbog brzog prvog prolaska kroz metabolizam u jetri (vidi: Van peer i sur., in Progress in the Tretment of Gastrointestinal Motility Disorders: The Role of Cisapride. Predstavljeno na simpoziju u Frankfurtu, studeni 1986. Johnson A. G. i Lux, G. eds. Experta Medica, Amsterdam, strane 23-29 (1988)). Više od 90% doze cisaprida je metabolizirano uglavnom sa oksidativnom N-dealkilacijom na piperidinskom dušiku ili sa aromatskom hidroksilacijom nađenom na oba 4-fluorfenoksi ili benzamidnom prstena. To je piperidinilbenzamidna grupa metaboliziranog cisaprida koja je dokazana kao norcisaprid. (Vidi: Meuldermans, W. i sur., Drug Metab. Dispos. 16 (3): 410-419, 1988 i Meuldermans, W. i sur., Drug Metab. Dispos. 16 (3): 403-409, 1988). Metabolizam cisparida do norciprasida se vjeruje da se javlja kako slijedi:

[image]

Norcisapridi su glavni urinarni metaboliti koji sadržava 50-80% ljekovite tvari nađene u urinu 72 sata poslije doziranja. (Vidi: Meuldermans, W. i sur., Drug Metab. Dispos. 16 (3): 410-419, 1988). Kratko trajanje djelovanja, koje je viđeno kod cisaprida, može obično biti povezano sa lutajućim farmakološkim učincima nakon oralnog davanja spojeva.

Stoga, bit će naročito poželjno da se nađe spoj sa prednostima cisaprida koji neće imati prije navedene nedostatke.

Bit izuma

Predmetni izum govori o novom sastavu tvari koja sadrži optički čisti (+) norcisaprid koji se koristi u liječenju poremećaja SŽS. Nadalje je otkriveno da se takvo liječenje može ostvariti tek dok se stvarno ne reduciraju popratne pojave povezane sa davanjem racemskih cisaprida, uključujući ali ne ograničavajući dijareju, abdominalne grčeve, srčanu depresiju i povišenje krvnog tlaka i ubrzanje srčanog ritma.

Također je otkriveno da je optički čisti (+) norcisaprid učinkovit i kao sredstvo protiv povraćanja, koristan kao pomoćna terapija kod liječenja tumora na način da se izbjegne mučnina i povraćanje uzrokovano kemo ili radio terapijom. Nadalje, optički čisti (+) norcisaprid se može koristiti za liječenje povraćanja i za liječenje popratnih pojava uzrokovanih davanjem racemskih cisaprida.

Također je otkriveno da se novi sastav tvari koji sadrži optički čiste (+) norcisapride može koristiti u liječenju bolesti gastro ezofagelanog refluksa i sličnih stanja koja su povezana sa aktivnošću (+) norcisaprida kao prokinetičkog sredstva, na primjer, dispepsije, gastropareze, konstipacije, post operativnog ileusa i intestinalne pseudo opstrukcije. Nadalje, optički čisti (+) norcisaprid se može koristiti za liječenje stanja koja su povezana uz davanje racemske mješavine cisaprida na način da se smanje neželjena svojstva koja pri tome nastaju.

Stoga, predmetni izum uključuje postupke za liječenje gore opisanih stanja kod ljudi pomoću davanja optički čistog (+) norciprasida navedenim ljudima. Predmetni izum također uključuje postupke i sastav koji pokazuje poboljšanu bioaktivnost u odnosu na racemske cisapride bez obzira na način davanja. Nadalje, predmetni izum također uključuje postupke i sastav za liječenje bolesti kod ljudi imajući pri tome neočekivanu korist prilikom davanja oba optički čista (+) norcisaprida i drugih ljekovitih tvari bez inhibitornog učinka koji se obično javljao prilikom paralelnog davanja cisaprida i nekog drugog ljekovitog sredstva, na primjer, štetnih interakcija među lijekovima.

Za upotrebu optički čistog (+) norcisaprida je nađeno da je puno bolja od racemskog cisaprida ili racemskog norcisaprida u liječenju prije navedenih bolesti i stanja.

Detaljni opis izuma

Ovaj izum govori o novom sastavu tvari koja sadrži optički čisti (+) norcisaprid. Taj sastav posjeduje aktivnost za liječenje povraćanja. Nadalje, ovaj novi sastav tvari sadrži optički čisti (+) norcisaprid koji se može upotrijebiti za liječenje ostalih stanja koja mogu biti povezana sa aktivnošću (+) norcisaprida kao prokinetičkog sredstva, uključujući ali ne ograničavajući stanja koja obuhvaćaju dispepsiju, gastroparezu, konstipaciju (začep), i intestinalnu pseudo opstrukciju. Štoviše, optički čisti (+) norcisaprid se može koristiti u liječenju tih stanja sve dok se ne reducira ili izbjegne štetni učinak povezan sa davanjem racemskih cisaprida.

Dalje, predmetni izum obuhvaća upotrebu (+) norcisaprida, potpuno slobodnog od svojeg (-) izomera, za liječenje poremećaja u središnjem živčanom sustavu (SŽS) uključujući, na primjer, ali ne ograničavajući stanja kao što su depresija, manija, bipolarni afektivni poremećaji, anksioznost ili poremećaji vezani uz nastup panike. Također otkriveni su i postupci za liječenje gore opisanih stanja kod ljudi uz stvarno reduciranje štetnih učinaka koji su vezani uz davanje cisaprida, uključujući ali ne ograničavajući stanja koja obuhvaćaju dijareju, abdominalne grčeve, srčanu depresiju i povišenje krvnog tlaka i ubrzanje srčanog ritma, davanjem (+) izomera norcisaprida, potpuno slobodnog od svojeg (-) izomera, ljudima kojima je potrebno takvo liječenje. Nadalje, u skladu sa predmetnim izumom, optički čisti (+) norcisaprid se može koristiti za liječenje poremećaja vezanih uz SŽS uz potpuno izbjegavanje ili reduciranje štetnog učinka povezanog sa davanjem lijekova koji služe za liječenje poremećaja vezanih uz SŽS, na primjer, kao što je benzodiazepini. Dalje su otkriveni postupci za liječenje različitih stanja bolesti kod ljudi sa paralelnim davanjem optički čistog (+) norcisaprida i drugih ljekovitih sredstva, uz neočekivano izbjegavanje štetnog učinka koji je vezan uz davanje cisaprida sa nekim drugim ljekovitim sredstvom.

Aktivi spoj tog sastava i postupaka je optički čisti izomer metaboličkog derivata cisaprida, čiji metabolički derivat je opisan u Meuldermans, W. i sur., Drug Metab. Dispos. 16 (3): 410-419, 1988 i Mauldermans, W, i sur.,Drug Metab. Dispos. 16 (3): 403-409, 1988.

Kemijski, aktivni spoj, sada otkrivenog sastava i postupaka, je (+) izomer metaboličkog derivata cis-4-amino-5-kloro-N-[1-[3-84-fluorofenoksi propil]-3-metoksi-4-piperidinil]-2-metoksibenzamid (ovdje naveden kao «cisaprid»), poznat kao 4-amino-5-kloro-N-(3-metoksi-4-piperidinil)-2 metoksibenzamid ovdje naveden kao «(+) norcisaprid». Izrazi «(+) izomer norcisaprid» i naročito izraz «(+) norcisaprid» obuhvaćaju optički čisti i stvarno optički čisti (+) norcisaprid. Isto tako, kako je korišteno ovdje, izrazi »racemski cisaprid» , «racemski norcisaprid» ili «racemska mješavina cisaprida» ili «racemska mješavina norcisaprida» ukazuju na cis diastereomerske racemate.

Predmetni izum obuhvaća postupak za liječenje poremećaja SŽS kod ljudi, i postupke za liječenje poremećaja SŽS kod ljudi te potpuno reduciranje koje prate obavezni štetni učinci koji su povezani sa davanjem racemskih cisaprida, koji obuhvaćaju davanje ljudima kojima je potrebna takva vrsta liječenja, terapeutski efektivnog iznosa (+) norcisaprida, ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, potpuno slobodnih od njegovog (-) stereoizomera, naročito, (+) norcisaprid može biti koristan u liječenju različitih poremećaja SŽS uključujući ali ne ograničavajući (1) kongenitivne poremećaje kao što je Alzheimerova bolest, senilna demencija; (2) poremećaje ponašanja kao što je shizofrenija, manija, opsesivno-kompulsivni poremećaji i poremećaji psihoaktivnog sadržaja; (3) poremećaji psihe kao što su depresija, bipolarni afektivni poremećaj, anksioznost i panika; (4) poremećaje kontrole autonomne funkcije kao što je hipertenzija i poremećaji spavanja; (5) neuropsihijatrijski poremećaji, kao što su Gilles de la Tourette sindrom, i Huntingtonova bolest. Ti ostali srodni poremećaji su dobro poznati stručnjacima; stoga, bit će jasno stručnjacima područja bazirano na ovom otkriću koje ostale poremećaje mogu liječiti sa (+) norcisapridom u skladu sa ovim izumom.

U poželjnom ostvarenju izuma, (+) norcisaprid se koristi u liječenju poremećaja raspoloženja kao što su depresija, bipolarni afektivni poremećaji, anksioznost i panični poremećaji, poremećaji u ponašanju, kao što je shizofrenija, manija, i još poželjnije, poremećaje raspoloženja.

Predmetnim izumom je također obuhvaćen i farmakološki sastav za liječenje ljudi koji pate od poremećaja SŽS, koji obuhvaćaju terapeutski efektivni iznos (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od svojeg (-) stereoizomera.

Predmetnim izum je nadalje obuhvaćen postupak kojim je iznesen antiemetički učinak kod ljudi koji obuhvaća davanje spoja ljudima kojima je potrebna antiemetska terapija, terapeutski efektivnog iznosa (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) steroizomera.

Nadalje, predmetnim izumom je obuhvaćen antiemetski sastav za liječenje ljudima kojima je potrebna antiemetska terapija, koja sadrži (+) norcisaprid, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) steroizomera.

Drugi aspekt predmetnog izuma uključuje postupak za liječenje stanja uzrokovanih disfunkcijom gastrointestinalnog motiliteta kod ljudi koji sadrži davanje spoja ljudima kojima je potrebna terapija za disfunkciju gastrointestinalnog motiliteta, terapeutskog efektivnog iznosa (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) steroizomera. Stanja uzrokovana sa disfunkcijom gastrointestinalnog motiliteta kod ljudi uključuju stanja, ali ne ograničavaju, bolest gastro ezofagealnog refluksa, dispepsiju, gastroparezu, konstipaciju, post operativni ileus, i intestinalnu pseudo opstrukciju.

Nadalje, predmetnim izumom je uključen farmaceutski sastav za liječenje stanja uzrokovanih disfunkcijom gastrointestinalnog motiliteta kod ljudi, koji sadrži (+) norcisaprid, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od svojeg (-) steroizomera.

Dalje, ovaj novi sastav se može koristiti za liječenje raznih poremećaja, koji su ovdje opisani, te u potpunosti uklanjanja štetne učinke koji su uzrokovani davanjem racemskih cisaprida. Ovaj novi sastav može izborno sadržavati farmaceutski prihvatljive nosače, ekscipiente ili njihovu kombinaciju kako je opisano niže.

Povećanje bioprihvatljivosti omogućuje veći efektivni farmakodinamički profil u odnosu na racemske cisapride ili racemske norcisapride i još učinkovitije djelovanje na bolest koju liječimo. Na primjer, još učinkovitije djelovanje na poremećaje može biti postignuto sa davanjem (+) norcisaprida, uz smanjenje učestalosti davanja. To će omogućiti, na primjer, noćni tretman dok pacijent spava. Slično, manja frekvencija doziranja bit će lakša kada se (+) norcisaprid koristi profilaktički ili kao tretman protiv povraćanja kod pacijenta koji boluju od raka.

Izumom je također obuhvaćeno smanjenje štetnih učinaka na srce koji su potencirani sa paralelnim davanjem cisaprida sa nekim drugim ljekovitim sredstvom. To može biti jedna interakcija između racemskog cisaprida i nekog drugog ljekovitog sredstva. Na primjer, terapeutiku koji interferira sa metabolizmom racemskog cisaprida, uzrokujući to da se cisaprid ugrađuju u organizam. To ugrađivanje može uzrokovati pospješenje štetnih kardiovaskularnih učinaka za koje je poznato da su povezani sa racemskim cisapridom kao što je kardiotoksičnost. Stoga, prisutnost takvih terapeutika zajedno sa paralelnim davanjem ili davanjem prije ili poslije racemskog cisaprida može uzrokovati pospješenje štetnih učinaka racemskih cisaprida. Upotreba (+) norcisaprida neočekivano smanjuje štetne popratne pojave. Vjeruje se da oba (+) norcisaprida smanjuju štetne interakcije među lijekovima koje se događaju prilikom aplikacije racemskih norcisaprida i stoga indirektno reduciraju štetne učinke kao i štetne učinke samih racemskih cisaprida. Stoga, se (+) norcisaprid može paralelno davati sa lijekovima kao što je ketokonazol, sredstvo za koje se zna da inhibira citokrom P450 sustav koji je odgovoran za metabolizam cisaprida, bez posljedičnog povećanja štetnih kardiovaskularnih nuz pojava racemskog cisaprida.

Stoga je predmetnim izumom obuhvaćen postupak za liječenje gore opisanih poremećaja kod ljudi, koji obuhvaća davanje ljudima (a) terapeutski efektivnog iznosa (+) norcisaprida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) stereoizomera, i (b) drugog ljekovitog sredstva. Inhibitorni problemi koji nastaju prilikom paralelnog davanja, povezani su sa davanjem cisaprida i nekog drugog ljekovitog sredstva, mogu se izbjeći davanjem optički čistog (+) norcisaprida u kombinaciji sa ljekovitim sredstvom. Stoga doktori ne trebaju biti zabrinuti u vezi karditoksičnog popratnog efekta racemskih cisaprida kada daju (+) norcisaprid sa drugim lijekom.

Ostala ljekovita sredstva se mogu upotrijebiti u kombinaciji sa ili za vrijeme liječenja uz davanje (+) norcisaprida uključuju, ali ne ograničavaju upotrebu, antigljivičnih, antivirusnih, antibakterijskih, antitumorskih ili antihistaminskih sredstava ili selektivnih serotoninskih inhibitora. Primjer antigljivičnih sredstava obuhvaćaju, ali ne ograničavaju ketokonazol, intrakonazol i amfotericin B. Primjeri antibakterijskih sredstava obuhvaćaju, ali ne ograničavaju temafloksicin, lomefloksicin, cefadroksil i eritromicin. Primjeri antivirusnih sredstva obuhvaćaju, ali ne ograničavaju ribavirin, rifampicin, AZT, DDI, aciklovir i ganciklovir. Primjeri antitumorskih sredstava obuhvaćaju, ali ne ograničavaju doksorubicin i cisplatin. Ostala sredstva koja se mogu paralelno davati sa (+) norcisapridom obuhvaćaju, ali ne ograničavaju digoksin, diazepam, etanol, acenokumarol, fluoksetin, ranitidin, paracetamol, terfenadin, astemizol, propranolol i ostala sredstva za koje se zna da inhibiraju citokrom P450 sustav.

Korištenjem potpuno optički čistog ili optički čistog izomera (+) norcisaprida rezultira čistijim dozama povezanim sa efikasnosti, smanjenjem nuz pojava, i u skladu s tim, poboljšanje terapeutskog indeksa. Takva upotreba također omogućuje liječenje različitih stana bolesti kod ljudi sa oba optički čista (+) norcisaprida i nekim drugim ljekovitim sredstvom.

Izrazi «štetne nuz pojave» obuhvaćaju, ali ne ograničavaju, gastrointestinalne poremećaje kao što su dijareja, abdominalni grčevi, kruljenje želuca i crijeva, pospanost, glavobolja; srčana depresija, povišen sistolički tlak, ubrzani rad srca, neurološki i SŽS efekti, i štetne nuz pojave koje su rezultat interakcije cisaprida sa nekim drugim lijekom koji inhibira metabolizam cisaprida na citokrom P450 sustavu uključujući ali ne ograničavajući ketokonazol, digoksin, diazepam, etanol, acenokumarol, cimetidin, ranitidin, paracetamol, fluoksetin, terfenadin, astemizol i propranolol.

Izraz «potpuno slobodan od njegovog (-) stereoizomera» kako se koristi ovdje znači da sastav sadrži najmanje 90% težine (+) norcisaprida i oko 10% i manje težine (-) norcisaprida. U još poželjnijem ostvarenju izraz «potpuno slobodan od njegovog (-) stereoizomera» znači da sastav sadrži najmanje 95% težine (+) norcisaprida, i oko 5% i manje (-) norcisaprida. U najpoželjnijem ostvarenju izuma, izraz «potpuno slobodan od njegovog (-) stereoizomera» koji se koristi ovdje označava sastav koji sadrži 99% težine (+) norcisaprida. Ovi postoci su bazirani na ukupnom iznosu norcisaprida u sastavu. Izrazi «potpuno optički čisti (+) izomer norcisaprida» ili «potpuno optički čisti (+) norcisaprid» i «optički čisti (+) izomer norcisaprida» i «optički čisti (+) norcisaprid» su obuhvaćeni sa prije opisanim nazivima.

Izrazi «povećava antiemetički učinak» i «antiemetička terapija» koji se koriste ovdje znače da omogućavaju smanjenje ili prevenciju simptoma mučnine i povraćanja induciranih spontano ili povezanih sa emetogenskom kancerogenom kemoterapijom ili radijacijskom terapijom.

Izraz «liječenje stanja uzrokovanih sa gastrointestinalnom disfunkcijom motiliteta» koji se koristi ovdje označava liječenje simptoma i stanja povezanih sa tim poremećajem koja obuhvaćaju, ali ne ograničavaju, bolest gastro-ezofagelanog refluksa, gastroparezu, konstipaciju, postoperativni ileus, i intestinalnu pseudo opstrukciju.

Izraz «prokinetik» koji se koristi ovdje označava pospješenje peristaltike i stoga i brže kretanje sadržaja kroz cijeli gastrointestinalni trakt.

Izraz «bolest gastro-ezopfagealnog refluksa» koji se ovdje koristi označava stanje karakterizirano sa vračanjem sadržaja iz želuca u jednjak.

Izraz «dispepsija»koji se koristi ovdje označava stanje karakterizirano sa slabljenjem snage funkcije probave koje se očituje simptomom primarne gastrointestinalne disfunkcije ili kao komplikacija zbog ostalih poremećaja kao što su upala slijepog crijeva, disturbancije žučne vrećice ili loša prehrana.

Izraz «gastropareza» koji se koristi ovdje označava paralizu želuca praćenu sa motornom abnormalnošću želuca ili kao komplikacija bolesti kao što su dijabetes, progresivna sistemska skleroza, anoreksija nervoza, ili miotonska distrofija.

Izraz «konstipacija» koji se koristi ovdje označava stanje karakterizirano sa neredovitim pražnjenjem fecesa koje je rezultat stanja kao što je smanjen intestinalni tonus mišića ili intestinalna spastičnost.

Izraz «post operativni ileus» koji se koristi ovdje označava stanje opstrukcije intestinuma zbog prekida mišićnog tonusa za vrijeme i nakon operacije.

Izraz «intestinalna pseudo opstrukcija» koji se koristi ovdje označava stanje karakterizirano sa konstipacijom, količnom boli, povraćanjem, ali bez dokaza o fizičkoj opstrukciji.

Izraz «paralelno davanje» koji se koristi ovdje označava davanje dva ljekovita sredstva zajedno simultano, konkurentno ili posebno ali bez specificiranih vremenskih ograničenja, tako da se oba ljekovita sredstva nalaze u tijelu u isto vrijeme.

Racemska mješavina cisaprida se može sintetizirati po postupku opisanom u Europskoj patentnoj prijavi broj 0,076,530 A2 objavljenoj 13, travnja 1983, US Patent serijski broj 4,962,115, 5,057,525 i 5,137,896 i Van Daele i sur., Drug Development Res. 8: 225-232 (1986), koje su otkrivene i inkorporirane ovdje sa referencama: Metabolizam cisaprida do norcisaprida je opisao Meuldermans, W. i sur., Drug Metab. Dispos. 16 (3): 410-419, 1988 i Mauldermans, W, i sur.,Drug Metab. Dispos. 16 (3): 403-409, 1988, otkriće koju su inkorporirana ovdje sa referencama. Norcisapride se mogu sintetizirati od poznatog komercijalnog početnog materijala u skladu sa standardnim organsko kemijskim tehnikama. Osobe koje su stručnjaci područja će sintetizirati cisaprid ili norcisaprid sa tehnikama opisanim u EP 0,076,530 A2 i U.S. patent broj 5,137,896 od Van Daele.

(+) izomer norcisaprida se može dobiti iz njegove racemske mješavine sa rezolucijom enatiomera uz korištenje konvencionalnih sredstva kao što su optički aktivne otopljene kiseline. Vidi, na primjer, «Enantiomers, Racemates and Resolutions» od J. Jacques, A. Collet, i S. H. Wilen, (Wiley-Intenscience, New York, 1981); S. H. Wielen, A. Collet, i J. Jacques, Tetrahedron, 33, 2725 (1977); i «Sterochemistry of Carbon Compounds», od E. L. Eliel (McGraw-Hill, NY, 1962) i S. H. Wilen, strana 268, u «Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions» (E. L. Eliel, Ed. Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972).

Veličina profilaktičke ili terapeutske doze (+) norcisaprida u akutnom ili kroničnom djelovanju kod bolesti ili poremećaja koji su ovdje opisani će vrlo varirati s obzirom na stanja koja treba liječiti, te na način davanja lijeka. Doza, ili možda više doza, će varirati također u sladu sa starosnom dobi, tjelesnom težinom i individualnim odgovorom pacijenta. Prikladni režim doziranja će biti odabran od stručnjaka područja zbog brige na prije navedene faktore. Općenito, ukupna dnevna doza (+) norcisaprida, za stanja koja su opisan ovdje je od otprilike 0,5 mg do 500 mg u jednoj ili više podijeljenih doza. Poželjni dnevni opseg doza treba bi biti između 1 mg do 250 mg u jednoj ili više podijeljenih doza, a još poželjnije je da dnevni opseg doze između 5 mg do 100 mg u jednoj ili više podijeljenih doza. Poželjno je da se doze daju od jedan do četiri puta dnevno.

Kod nadgledanja pacijenta, terapija će započeti sa nižom dozom, možda od 5 mg do 10 mg, te će rasti sve do 50 mg ili više što će ovisiti o općenitom odgovoru pacijenta na lijek. Nadalje je preporučeno da djeca, i pacijenti preko 65 godina, i oni sa slabijom renalnom i jetrenom funkcijom, inicijalno dobiju nižu dozu, koja će zatim biti titrirana i koja će se zasnivati na individualnom odgovoru i nivou u krvi. Možda će biti neophodno da se napravi doziranje koje je izvan ovog raspona i koje će odrediti stručnjak područja. Dalje, važno je napomenuti da će klinički ili drugi doktor koji liječi znati kada treba prekinuti, podesiti ili potpuno ukinuti terapiju koja je u skladu sa individualnim odgovorom pacijenta.

Bilo koji prikladni način davanja se može koristiti na način da se pacijentu osigura efektivni iznos doze norcisaprida. Na primjer, oralni, rektalni, parenteralni (supkutani, intramuskularni, intravenozni), transdermalni i slični oblici davanja koji se također mogu upotrijebiti. Oblik doza uključuje tablete, disperzije, suspenzije, otopine, kapsule, meke elastične želatinozne kapsule, flastere i slične.

Farmaceutski sastav predmetnog izuma sadrži (+) norcisaprid kao aktivni sastojak, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, i također može sadržavati farmaceutski prihvatljive nosače i izborno, ostala ljekovita sredstva.

Izraz «farmaceutski prihvatljive soli» ili «njegova farmaceutski prihvatljiva sol» govore o solima dobivenim od farmaceutski prihvatljivih netoksičnih kiselina ili baza uključujući anorganske kiseline i baze i organske kiseline i baze. Otkada je spoj u predmetnom izumu osnovni, soli se mogu dobiti iz farmaceutski prihvatljivih ne-toksičnih kiselina. Prikladne farmaceutski prihvatljive kiseline i dobivene soli koje se koriste za spoj u predmetnom izumu uključuju octenu, benzensulfonsku (besilat), benzoevu, kamforsulfonsku, limunsku, etensulfonsku, fumarinska, glukonsku, glutaminsku, hidrobromnu, hidroklornu, izetionsku, mliječnu, maleinsku, malonsku, mandelinsku, metansulfonsku, mucisnu, dušičnu, pamoinsku, pantotensku, fosfornu, sukcinsku, sumpornu, tartarnu kiselinu, p-toluensulfonsku, i slične. Poželjne kiseline za dobivanje soli su kloridna i sulfatna. U naj poželjnijem ostvarenju, (+) norcisapridi se daju kao slobodne baze.

Sastav predmetnog izuma uključuje oblike lijekova kao što suspenzije, otopine i eliksiri, aerosoli; ili nosače kao što je škrob, šećer, mikrokristalična celuloza, otapala, granulirajuća sredstva, lubrikante, sredstva za vezanje, dezintegrirajuća sredstva, i slične, u slučajevima oralnog davanja čvrstih pripravaka (kao što su prašci, kapsule i tablete) oni su poželjniji nego davanje oralnih tekućih preparata. Poželjan oblik lijeka za oralno davanje je kapsula. Još poželjniji oblik lijeka za oralno davanje je tableta.

Farmaceutski sastav predmetnog izuma prikladan za oralno davanje može se prezentirati kao jedna doza u obliku kao što su kapsule, meko elastične želatinozne kapsule ili tablete, ili aerosol sprej, od kojih svaki sadrži prije određeni iznos aktivne supstance, ili kao prašak ili granule, ili kao otopina ili suspenzija u razrjeđenoj tekućini, ne razrijeđene otopine, emulzije ulja u vodi, tekuće emulzije vode u ulju. Takvi sastavi mogu se dobiti po bilo kojem postupku poznatom u farmaciji, ali svi postupci uključuju korak unošenja aktivne supstance i nosača koji se sastoji od jednog ili više neophodnih sastojaka. Općenito sastav se dobiva uniformnim i bliskim miješanjem aktivne supstance sa tekućim nosačem ili na kraju podijeljenim čvrstim nosačem i zatim, ako je neophodno, oblikovanjem produkta u željeni oblik.

Na primjer, tablete se mogu dobiti pomoću kompresije ili stavljanja u kalupe, izborno, sa jednim ili više dodatnih sastojaka. Komprimirane tablete mogu se dobiti kompresijom u prikladnom stroju u kojem aktivna supstanca dolazi u slobodnom obliku kao što je prašak ili granule, izborno se miješa sa sredstvom za vezanje, lubrikantom, inertnim razrjeđivačem, površinski aktivnim ili disperznim sredstvom. Tablete dobivene u kalupima prave se u prikladnim strojevima u kojima se mješavina praškastog spoja vlaži sa inertnim tekućim diluentom. Želja je da svaka pojedina doza, kao što je tableta ili meko elastična želatinozna kapsula, sadrži od 0,5 mg do 250 mg aktivne supstance, a poželjnije je da sadrži od 1 mg do 100 mg aktivne supstance, a još je poželjnije da sadrži od 5 mg do 50 mg aktivne supstance. Za tablete, kašete ili kapsule potrebno je da pojedinačna doza bude formulirana tako da sadrži jednu ili nekoliko doza, na primjer, sa 5 mg, sa 10 mg, ili sa 25 mg aktivne supstance.

Zbog njihovog lakog davanja, tablete i kapsule predstavljaju naj prikladniji oblik za oralno davanje u slučaju da su upotrijebljeni čvrsti farmaceutski nosači. Ukoliko je poželjno, tablete se mogu omotati sa standardnim razrijeđenim ili ne razrijeđenim tehnikama, i mogu se formulirati tako da se postigne kontinuirano otpuštanje aktivne supstance koristeći tehnike i postupke koji su dobro poznati u znanosti.

Farmaceutski sastav predmetnog izuma može biti formuliran i kao meko elastična želatinozna kapsula u obliku jedne doze uz korištenje konvencionalnih postupaka, dobro znanih u znanosti (vidi, na primjer, Ebert, Pharm. Tech., 1 (5): 44-50 (1977)). Meko elastične želatinozne kapsule imaju mekanu, želatinoznu stjenku tanju nego kod tvrdih želatinoznih kapsula, u kojima je želatina plastificirana sa dodatkom glicerina, sorbitola, ili nekog sličnog poliola. Tvrdoća stjenke kapsule može se mijenjati i varirati ovisno o vrsti želatine i o količini plastifikatora i vode. Meka želatinozna stjenka može sadržavati konzervanse da se prevenira rast gljivica, a to mogu biti metil i propilparabens i sorbna kiselina. Aktivna supstanca može biti otopljena ili suspendirana u tekućem sredstvu ili nosaču, kao što je jestivo ulje ili mineralno ulje, glikoli kao što su polietilen glikol i propilen glikol, trigliceridi, površinski aktivne tvari kao što su polisorbati, ili njihova kombinacija.

U dodatku uobičajenim oblicima doza koje su naznačene ranije, spojevi u predmetnom izumu se također mogu dati pomoću sredstva sa kontroliranim otpuštanjem i/ili napravama za isporučivanje lijeka kao što su one opisane u U.S. Patent serijski broj: 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809; 3,598,123; i 4,008,719, čija su otkrića ovdje inkorporirana sa referencama.

Izum je dalje definiran sa referencama i slijedećim primjerima, u detalje je opisano dobivanje spoja i sastava predmetnog izuma, kao i njihova upotreba. Bit će jasno stručnjacima područja da postoje mnoge modifikacije, kako materijala tako i postupaka, koji se mogu prakticirati bez smanjenja namjere i interesa ovog izuma.

PRIMJERI

PRIMJER 1

Antiemetski učinak

Povezane aktivnosti optički čistog i racemskog cisaprida kao antiemetičkih sredstava su određene pomoću farmakoloških studija na afričkim tvorovima. Procjena ovih spojeva je bazirana na njihovom povezanom potencijalu u testu za mjerenje antiemeze.

Ženke afričkog tvora (kastrirane, linijski srodne, 1,0 – 2,0 kg) su nabavljene iz Triple F Farms (Sayre, PA). Smještene su četiri u kavez sa 12 satnim svjetlosnim ciklusom i hranjene su ad libidum sa Ralston Purina Cat Chow. Svaka ženka afričkog tvora je korištena sita za pokus poslije najmanje 24 sata aklimatizacije u životinjskoj nastambi.

Pripremanje afričkih tvorica. Svaka ženka je anestezirana sa mješavinom 5% izofluran-O2 gdje je smještena kroz 2-5 min. u komori za anesteziju. Anestetik je uklonjen pomoću crijeva sa ispuhom pod vakuumom. Životinje su zatim maknute i procijenjene. Injekcije studijskog spoja ili nosača su dane u dorzalni dio na prednjoj nozi (vena cefalika) koristeći se povezom i 1 ml tuberkulinskom špricom sa 25 G iglom a za to vrijeme životinje su održavane pod anestezijom koristeći se malim nosnim tubusom za isporuku 5% izofluran-O2. Svaka prednja noga je obrijana za lakše pronalaženje i lociranje vene. Vrijeme oporavka nakon anestezije je bilo od 5-8 min.

Pripravljanje lijeka. Morfin sulfat (15 mg/kg) je dobiven komercijalno i razrijeđen je na 1 mg/ml u normalnoj fiziološkoj otopini za svaki pokus. Većina Cisplatin praška je vagnuta i otopljena u normalnoj fiziološkoj otopini uz grijanje do 75°C da se dobije otopina 5 mg/ml (90 mg stavljeno u scintilacijsku bočicu i qs sa 18 ml fiziološke otopine). Otopina je miješana sa štapićem za miješanje te je potom stavljena u inkubator na 40°C sve do injeciranja. Otopina je čiste svjetlo žute boje. Studijski spoj, ako je topiv u vodi, je otopljen u normalnoj fiziološkoj otopini na sobnoj temperaturi (10 mg baze/10 ml) da se dobije 1 mg/ml otopine kao baza. Za doze od 3,0 i 10,0 mg/kg, pripravljena je otopina od 5 mg/ml. Za doze od 0,001 mg/kg, pripravljena je otopina od 0,01 mg/ml.

Pokus. Morfinski emetički model: Eksperiment se sastoji od doziranja pet ženki sa dozom studijskog spoja i jednoj ženki će se aplicirati sredstvo kao kontrola (na primjer fiziološka otopina). Studijski spoj ili fiziološka otopina (0,5 ml) je injeciran i.v. u početno vrijeme nula. Pet minuta kasnije, dan je morfin sulfat 0,3 mg/kg u stražnji dio vrata. Promatranje je bilježeno kroz 30 min period poslije davanja injekcije morfina.

Cisplatin model: Cisplatin 10 mg/ml je injeciran i.v. u svaku anesteziranu ženku u početno vrijeme nula. Normalna fiziološka otopina (0,5 ml) ili studijski spoj je injeciran nakon 30 min grupi od šest ženki tvora (C = 1; test = 5). Promatranje je bilježeno kroz vremenski period od četiri sata.

Početna doza studijskog spoja u oba pokusa je bila 1,0 mg/kg. Doze su povećavane ili smanjivane sa polovicom povećanja logaritma. Namjera je bila da se napravi test sa najmanje tri doze tako da postotak smanjivanja morfinski induciranog povraćanja ili cisplatin induciranog povraćanja bude 70% ili veći sa jednom dozom, približno 50% sa jednom dozom, i manje od 50% sa jednom dozom. Te tri doze i njihovi učinci su korišteni u stvaranju ED 50 vrijednosti.

Eksperimentalno promatranje i prikupljanje podataka. Držač za kavez za šest ženki je modificiran sa vratima od pleksiglasa i dnom koji se mogao podizati za svaki pregled, a ženke su smještene u individualne kaveze. Broj epizoda povraćanja i pokušaja povraćanja, te vrijeme za koje su nastupile te epizode je bilježeno kroz trideset minuta počevši od trenutka injeciranja lijeka (morfinski model). Broj epizoda povraćanja i pokušaja povraćanja , i vrijeme za koje je počelo je bilježeno kroz period od četiri sata počevši sa vremenom od cisplatinske injekcije (cisplatin model). Emetička epizoda je označena kao izbacivanje krutog ili tekućeg sadržaja, ili pokušaj povraćanja je rezultirao otvaranjem usta ali bez izbacivanja sadržaja iz želuca. Pokušaj povraćanja je označen kao ritmička kretnja mišića prsnog koša. Ukupni broj epizoda povraćanja i pokušaja povraćanja je procijenjen za svaku skupinu od pet ženki tvora i učinak liječenja je izračunat kao postotak redukcije epizoda povraćanja uspoređen sa kontrolnim vrijednostima prema formuli:

[image]

Prosječni % zaštićenih točaka podataka je korišten za dobivanje ED 50 vrijednosti korištenjem vjerojatnosti analiza i RS-1 statističkih vrijednosti.

PRIMJER 2

Bioprihvatljivost

Jednostruka doza testirane supstance ili sredstva je dana ženkama beagle pasmine intravenozno kao bolus kroz jednu minutu koristeći se 23 ga iglom u venu safenu, ili kao jednostruka doza preko usnog otvora s pomoću pumpice. 2,0 ml pune krvi je uzeto svakom psu prije i u intervalima od 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 3, 4, 6, 12, i 24 sata nakon intravenoznog odnosno oralnog davanja optičkih izomera ili racemske mješavine cisaprida ili norcisaprida. Psi su smješteni te su vezani remenima prije davanja testirane supstance i potom su premješteni u metaboličke kaveze nakon uzimanja krvnog uzorka u 0,083 sata. Svi uzorci krvi su uzeti pomoću angiokatetera smještenog u venu cefaliku koji je apliciran u jutro uoči eksperimenta.

Krv je usisana u šprice od 3 ml. Prvih 1,0-2,0 ml je uklonjeno. Slijedećih 2,0 ml pune krvi je premješteno u heparinske epruvete. Heparinske epruvete su držane na ledu dok u njih nije stavljena krv. Poslije dodavanja krvi u epruvete, sadržaj epruvete je miješan i centrifugiran da dobijemo plazmu. Plazma je pažljivo dekantirana i premještena u testne epruvete označene sa: brojem životinje, danom dozom testirane supstance, načinom aplikacije doze, datumom davanja, i vremenom kada je uzet uzorak krvi. Epruvete su pohranjene na –20°C sve do početka analiza.

Analize koncentracija optičkih izomera ili racemata ili norcisaprida u svakom uzorku plazme su određene pomoću tekuće kromatografije sa visokim performansama. Za svaku testiranu supstancu, plazma koncentracija nasuprot vrijeme uzorka je ucrtano za svaki način doziranja. Oralna bioprihvatljivost za svaku testiranu supstancu je određena kompariranjem Cmax i AUC za oralni način doziranja nasuprot intravenoznom načinu doziranja. T1⁄2 za svaku testiranu supstancu, na oba načina davanja, je izračunat kao indikator trajanja djelovanja.

PRIMJER 3

Receptorska aktivnost 5HT1A

Korištena je receptorska selekcija i tehnologija pojačanja (R-SAT) (Receptor Technologies Inc., Winooski, VT) da se odredi potencijal agonističke i/ili antagonističke aktivnosti racemskih norcisaprida, cisaprida i njihovih enantiomera na kloniranim ljudskim serotoninskim 5-HT1A receptorskim podtipovima ekspresioniranim na NIH 3T3 stanicama (Burstein i sur., J. Biol Chem., 270: 3141-3146 (1995); i Messier i sur., Pharmacol. Toxicol., 76 (5): 308-311 (1995)).

U pokus je uključena ko-ekspresija enzimskog markera, ß-galaktosidaze, sa serotoninskim receptorom od interesa. Ligandi stimuliraju proliferaciju stanica tako da se to ekspresionira na receptore, i posljedično tome, na marker. Ligand-inducirani efekti se mogu odrediti pomoću pokusa sa markerima.

NIH 3T3 stanice su inkubirane, smještene u posudice, i zatim transfektirane uz korištenje ljudskog 5-HT1A serotoninskog receptora, pSV-ß-galaktosidaze, i DNA sperme lososa. Medij je promijenjen jedan dan kasnije, i poslije dva dana, a jednaki dijelovi tripsiniziranih stanica su smješteni u posude koje imaju 96 jamica. Poslije pet dana u kulturi uz prisutnost liganda, mjeren je nivo ß-galaktosidaze. Stanice su potom isprane i inkubirane sa supstratom, o-nitrofenilom ß-D-galaktopiranozide. Poslije 16 sati, posudice su očitane na 405 nm čitaču za posudice. Svaki spoj je testiran na aktivnost triplikata u sedam različitih koncentracija (10, 2,5, 0,625, 0,156, 0,039, 0,0098, i 0,0024 nM).

Niti jedan od testiranih spojeva nije pokazao aktivnost prema ljudskim 5-HT1A serotoninskim receptorima. Podaci za antagonističku aktivnost spojeva su složeni u jednadžbi:

[image]

IC50 vrijednost (koncentracija koja je potrebna da inhibira 50% specifičnog spajanja) je izračunata za antagonističku aktivnost nasuprot koncentraciji od 2 μM 5-HT upotrebom nelinearne metode najmanjih kvadrata KaleidaGraph, rezultati su prikazani kao četvrti po redu u tabelama 1 i 2.

Receptorska aktivnost 5HT2

Korištena je receptorska selekcija i tehnologija pojačanja (R-SAT) (Receptor Technologies Inc., Winooski, VT) da se odredi potencijal agonističke i/ili antagonističke aktivnosti racemskih norcisaprida, cisaprida i njihovih enantiomera na kloniranim ljudskim serotoninskim 5-HT1A receptorskim podtipovima ekspresioniranim na NIH 3T3 stanicama (Burstein i sur., J. Biol Chem., 270: 3141-3146 (1995); i Messier i sur., Pharmacol. Toxicol., 76 (5): 308-311 (1995)).

U pokus je uključena ko-ekspresija enzimskog markera, ß-galaktosidaze, sa serotoninskim receptorom od interesa. Ligandi stimuliraju proliferaciju stanica tako da se to ekspresioniran na receptore, i posljedično tome, na marker. Ligand-inducirani efekti se mogu odrediti pomoću pokusa sa markerima.

NIH 3T3 stanice su inkubirane, smještene u posudice, i zatim transfektirane uz korištenje ljudskog 5-HT1A serotoninskog receptora, pSV-ß-galaktosidaze, i DNA sperme lososa. Medij je promijenjen jedan dan kasnije, i poslije dva dana, a jednaki dijelovi tripsiniziranih stanica su smješteni u posude koje imaju 96 jamica. Poslije pet dana u kulturi uz prisutnost liganda, mjeren je nivo ß-galaktosidaze. Stanice su potom isprane i inkubirane sa supstratom, o-nitrofenilom ß-D-galaktopiranozide. Poslije 16 sati, posudice su očitane na 405 nm čitaču za posudice. Svaki spoj je testiran na aktivnost triplikata u sedam različitih koncentracija (10, 2,5, 0,625, 0,156, 0,039, 0,0098, i 0,0024 nM).

Niti jedan od testiranih spojeva nije pokazao aktivnost prema ljudskim 5-HT1A serotoninskim receptorima. Podaci za antagonističku aktivnost spojeva su složeni u jednadžbi:

[image]

IC50 vrijednost (koncentracija koja je potrebna da inhibira 50% specifičnog spajanja) je izračunata za antagonističku aktivnost nasuprot koncentraciji od 2 μM 5-HT upotrebom nelinearne metode najmanjih kvadrata KaleidaGrapha, rezultati su prikazani kao četvrti po redu u tabelama 1 i 2.

TABELA 1

Izračunate IC50 vrijednosti (μM) na 5-HT1A i 5-HT2 receptorima

[image]

TABELA 2

Izračunate IC50 vrijednosti (μM) na 5-HT1A i 5-HT2 receptorima

[image]

PRIMJER 4

5HT3 receptorsko spajanje

Racemski norcisaprid, racemski cisaprid i njihovi (+)- i (-)- enantiomeri su testirani (Cerep, Celle l`Evescault, France) na spajanje na 5HT3 receptorskim podtipom izvedenim iz N1E-115 stanica.

Nakon inkubacije sa odgovarajućim ligandima, preparati su brzo filtrirani pod vakuumom kroz GF/B filtrom sa staklenim vlaknima i isprani sa ledenim puferom koristeći se Brandel ili Packard staničnim sakupljanjem. Vezana radioaktivnost je određena na brojaču sa tekućim scintilacijskim puferom (LS 6000, Beckman) koristeći se tekućim scintilacijskim koktelom (Formula 989).

Specifično radioligandno spajanje na receptore je određeno kao razlika između ukupnog spajanja i nespecifičnog spajanja određenog uz prisutnost viška neobilježenog liganda. Rezultati su izraženi kao postotak inhibicije specifičnog spajanja dobivenog uz prisutnost spoja. IC50 je određen korištenjem koncentracije rangirane od 3 x 10-10 do 10-5 M da dobijemo potpunu kompeticijsku krivulju koja je izračunata pomoću ne-linearnih regresijskih analiza. Rezultati su prikazani u tabelama 3 i 4 niže.

5HT4 receptor

Racemski norcisaprid, racemski cisaprid i njihovi (+)- i (-)- enantiomeri su testirani (Cerep, Celle l`Evescault, France) na spajanje na 5HT3 receptorskim podtipom izveden iz corpus striatum na guinea svinji .

Nakon inkubacije sa odgovarajućim ligandima, preparati su brzo filtrirani pod vakuumom kroz GF/B filtrom sa staklenim vlaknima i isprani sa ledenim puferom koristeći se Brandel ili Packard staničnim sakupljanjem. Vezana radioaktivnost je određena na brojaču sa tekućim scintilacijskim puferom (LS 6000, Beckman) koristeći se tekućim scintilacijskim koktelom (Formula 989).

Specifično radioligandno spajanje na receptore je određeno kao razlika između ukupnog spajanja i nespecifičnog spajanja određenog uz prisutnost viška neobilježenog liganda. Rezultati su izraženi kao postotak inhibicije specifičnog spajanja dobivenog uz prisutnost spoja. IC50 je određen korištenjem koncentracije rangirane od 3 x 10-10 do 10-5 M da dobijemo potpunu kompeticijsku krivulju koja je izračunata pomoću ne-linearnih regresijskih analiza. Rezultati su prikazani u tabelama 3 i 4 niže.

TABELA 3

IC50 vrijednosti za spajanje na 5-HT3 i 5-HT4 mjesta

[image]

TABELA 4

IC50 vrijednosti za spajanje na 5-HT3 i 5-HT4 mjesta

[image]

Agonistička aktivnost na 5HT4 receptorskim mjestima može također biti procijenjena korištenjem pokusa baziranog na sposobnosti aktivnog spoja da poveća cikličku AMP produkciju na kolokuli neuronima u mišjem embriju koji rastu na kulturi tkiva (vidi: Dumuis i sur., N. S. Arch. Pharmacol. 340: 403-410, 1989).

PRIMJER 5

Određivanje kardiovaskularnih efekata

Upotrijebljeni su ne anestezirani normotenzivni ili spontano hipertenzivni štakori (SHR). Krvni tlak je bilježen indirektno u temperaturno-kontroliranom okružju prije, i 1, 2, i 4 sata nakon, testirana supstanca je dana na adekvatan način. Testirane supstance su racemski, (+) i (-) cisaprid i racemski, (+) i (-) norcisaprid. Promjene u sistoličkom tlaku su veće od 10% (>10) na bilo koja dva od tri prije navedena uzastopna mjerenja koja se smatraju signifikantna. Također je promatrana tahikardija. Kod istih normotenzivnih ili spontano hipertenzivnih štakora, srčani ritam je bilježen sa kardiografom neposredno poslije bilježenja krvnog tlaka. Ubrzanje srčanog ritma veće od 20 posto (>20) u odnosu na očitane permanentne kontrole se smatra signifikantnim.

Slične studije se mogu izvesti korištenjem guinea svinja i praščića.

PRIMJER 6

Učinci na središnji živčani sustav

Učinci racemskih i optički čistih izomera norcisaprida i cisaprida na pamćenje mogu se testirati korištenjem postupka koji je opisao Forester i sur., Drug development research, 11: 97-106 (1987). Kod te tehnike, farmakološki učinci lijekova na pamćenje kod miševa se testiraju pomoću primjera «različitih izlaza». Grupa miševa je označena na sredstvo i ljekoviti tretman, svaki miš je treniran da uđe u ispravni dio T-labirinta da bi izbjegao 0,8 mA strujni šok koji je ugrađen u podu aparata. Miševi su dozirani sa sredstvom ili testiranim spojem za vrijeme trajanja perioda treninga.

Miševima je inicijalno dana sklonost da ulaze u zatvoreni dio T-labirinta što bi znalo rezultirati električnim šokom, ali su oni trenirani da izbjegnu šok preko suprotnog dijela koji im je u potpunosti naklonjen. Miševi su trenirani («minimalni trening») sve dok nisu naučili kriterije dva uzastopna ispravna izbora.

Tjedan dana poslije obuke, svi miševi su testirani na pamćenje razlikovanja. Mjerenje pamćenja je postotak od ispravnih izbora, na primjer, oni miševi koji su ušli u krivi dio labirinta pretopili su strujni šok. Pamćenje razlikovanja je uspoređeno sa skupinom miševa koja je dozirana, pojedinačno, sa (+) norcisaprida, (-) norcisaprida, racemskih norcisparida, (+) cisaprida, (-) cisaprida, racemskih cisaprida i sredstva.

Učinci racemskih i optički čistih enantiomera norcisaprida ili cisaprida na spavanje mogu se testirati upotrebom elektroencefalograma. Grupi štakora ili pasa koji su pripremljeni za elektroencefalografsko očitavanje implantirane su kranijalne elektrode pod općom anestezijom, i zatim su te elektrode povezane sa elektroencefalografom, uređajem koji snima moždane valove. Ti snimci su napravljeni kontinuitetno, te su korišteni za klasificiranje stanja spavanja kod životinje. Stanja sna su klasificirana kao «budan», «spori-valovi sna», ili «REM san». Postotak svakog od tih stanja sna nakon davanja placeba, izomera norcisaprida ili racemata, ili izomera cisaprida ili racemata, je uspoređen sa procjenom učinka testiranog lijeka na regulirani-san.

Blokada stanja izbjegavanja odgovora (CAR) se može upotrijebiti da se pokaže sposobnost racemskih i optički čistih norcisaprida ili cisaprida u liječenju simptoma shizofrenije. Prilikom testnog postupka korišteni su štakori koji su trenirani da izbjegavaju strujni šok pritiskom na polugu na startu testnog perioda. Početak testnog perioda je signaliziran sa ne-noksijskim stimulansom (svijetlo ili zvono). Životinje koje su u potpunosti trenirane za taj postupak će izbjeći strujni šok u više od 90% slučajeva. Spoj koji je djelotvorni antipsihotik će blokirati stanje izbjegavanja odgovora. Stoga (-), (+), i racemski norcisaprid i cisaprid su testirani davanjem testirane fiksne doze i referentnog spoja treniranim štakorima i zatim određivanja njihovog povezanog učinka na stanje izbjegavanja.

Racemske i optički čist cisaprid i norcisaprid je testiran na antidepresijsku aktivnost korištenjem testa suspenzije mišjeg repa (Steru i sur., Psychopharmacology 85: 367-370, 1985). Fiksna doza (-), (+) ili racemskog norcisaprida, ili (-), (+) ili racemskog cisaprida ili referentni lijek je dana miševima, i miševi su zatim držani 15 cm u visinu od stola pomoću kuke koja je zalijepljena na rep. Pokreti životinje su bilježeni na poligrafu. Miševi su se tipično otimali kroz nekoliko minuta, a zatim su svi pokreti bili prekidani sa periodima nepomičnosti («ponašanje - gubitak nade »). Smanjenje ukupnog vremena trajanja nepomičnosti za vrijeme trajanja testiranja signifikantno prikazuje potencijalnu antidepresijsku aktivnost testiranog spoja.

Racemski i optički čisti norcisapridi i cisapridi su testirani na učinke psihoaktivne supstance koja se koristi pri poremećajima pri davanju testnog ili referentnog spoja laboratorijskim životinjama, na primjer, štakorima, koji su trenirani da pritisnu polugu uz anticipaciju primanja jedne ili više psihoaktivnih supstanci «samo-davanje lijeka»). Različite životinje su trenirane da same-dobivaju kokain, alkohol i morfin koji je korišten u ovoj studiji. Fiksirani odnosi i progresivni odnosi su korišteni za podešavanje iznosa pritiska na polugu koji je bio zahtjevan da bi životinja primila supstancu. (-), (+), i racemski norcisaprid ili cisaprid su dani u fiksnoj dozi prije standardnog samo-davanja. Smanjenje broja samo-davanja ili redukcija u odnosu pritisak poluge – nagrada pokazuje da je testirani spoj sposoban liječiti psihoaktivne supstance kod poremećaja.

PRIMJER 7

Oralna formulacija

Tablete

[image]

Aktivna supstanca, (+) norcisaprida, je prosijana kroz prikladno sito i pomiješana je sa laktozom dok nije postignuta ujednačena masa. Dodan je prikladni volumen vode i prašak je potom granuliran. Poslije sušenja, granule su potom prosijane i pomiješane sa preostalim ekscipientom. Rezutirajuće granule su potom komprimirane u tablete željenog oblika. Tablete različitih jačina mogu biti dobivene sa promjenom odnosa aktivne supstance prema ekscipientima ili kompresijskoj težini.

Bit će jasno stručnjacima područja da modifikacije i varijacije predmetnog izuma su moguće u svjetlu gornjeg otkrića. Jasno je to, da takve modifikacije moraju biti u sadržaju i opsegu zaštite izuma, koje su ograničene i definirane jedino sa priloženim zahtjevima.

Claims (24)

1. Postupak za liječenje ili prevenciju poremećaja uzrokovanih disfunkcijom gastrointestinalnog motiliteta kod ljudi naznačen time da sadrži davanje ljudima terapeutski djelatne količine (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) stereoizomera.

2. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni poremećaj bolest gastro-ezofagelanog refluksa.

3. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni poremećaj dispepsija.

4. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni poremećaj gastropareza.

5. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni poremećaj konstipacija (začep).

6. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni poremećaj pseudo opstrukcija.

7. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid dan oralno.

8. Postupak iz zahtjeva 7, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid dan kao tableta.

9. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid dan parenteralno.

10. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni iznos (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, između 0,5 do 500 mg na dan.

11. Postupak iz zahtjeva 10, naznačen time da je navedeni iznos od 1 mg do 250 mg na dan.

12. Postupak iz zahtjeva 11, naznačen time da je navedeni iznos od 5 mg do 100 mg na dan.

13. Postupak iz zahtjeva 10, naznačen time da je navedeni iznos dan u jednakim dozama od jedan do četiri puta dnevno.

14. Postupak iz zahtjeva 1, naznačen time da je navedeni iznos (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, je najmanje 90% težine od ukupne težine norcisaprida.

15. Postupak iznošenja prokinetičkog učinka kod ljudi za liječenje bolesti gastro-ezofagealnog refluksa kod navedenih ljudi naznačen time da sadrži davanje navedenim ljudima terapeutski efektivnog iznosa (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, potpuno slobodne od njegovog (-) stereoizomera.

16. Postupak iz zahtjeva 15, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid dan parenteralno ili oralno kao tableta, kapsula ili tekuća suspenzija.

17. Postupak iz zahtjeva 16, naznačen time da je navedeni iznos (+) norcisaprida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, dan od 0,5 do 500mg na dan.

18. Postupak iz zahtjeva 17, naznačen time da je iznos davanja od 1 mg do 250 mg na dan.

19. Postupak iz zahtjeva 18, naznačen time da je iznos davanja od 5 mg do 100 mg na dan.

20. Postupak iz zahtjeva 16, naznačen time da je navedeni iznos dan podijeljen u doze od jedan do četiri puta na dan.

21. Postupak iz zahtjeva 15, naznačen time da je navedeni iznos (+) norcisaprida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, je najmanje 90% težine od ukupne težine norcisaprida.

22. Postupak iz zahtjeva 15, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, potpuno slobodna od njegovog (-) stereoizomera dana sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

23. Postupak iz zahtjeva 15, naznačen time da je navedeni (+) norcisaprid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, potpuno slobodna od njegovog (-) stereoizomera dana sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

24. Farmaceutski pripravak prikladan za davanje ljudima naznačen time da sadrži (+) norcisaprid, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, potpuno slobodnu od njegovog (-) steroizomera; i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipient.