FR3090376A1 - Extrait aqueux de fruits de Rose comme agent neuro-protecteur cutané - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’au moins un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu'agent neuro-protecteur des matières kératiniques, en particulier de la peau et/ou des lèvres. Ledit extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville® est également destiné à apaiser la peau et/ou les lèvres et/ou prévenir et/ou diminuer le phénomène de micro-inflammation chronique de la peau et/ou des lèvres, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau autrement nommés ‘inflammaging’.

Description

Description

Titre de l'invention : Extrait aqueux de fruits de Rose comme agent neuro-protecteur cutané

Domaine technique

[0001] La présente invention concerne Γutilisation d’un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu'agent neuroprotecteur cutané, en particulier de la peau et/ou des lèvres. Il est également destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une microinflammation chronique de la peau autrement nommés ‘inflammaging’. Technique antérieure

[0002] La peau est la première barrière de protection de l'organisme vis-à-vis de l'environnement.

[0003] La peau est soumise à des stress d’origine exogène ou endogène susceptibles d’induire des réactions cutanées non pathologiques inesthétiques et/ou d’inconfort pouvant conduire à une accélération du vieillissement cutané. Un stress exogène peut être d'origine chimique, par exemple xénobiotiques, antigènes, allergènes, produits cosmétiques, composés susceptibles de provoquer une irritation de la peau, peelings ; ou d'origine environnementale (température, climat, rayonnement UV, pollution atmosphérique, notamment métaux lourds, ozones, fumée de cigarette...) ou encore d'origine mécanique (frottements, rasages, nettoyage...).

[0004] Les stress endogènes et/ou exogènes sont ainsi une cause majeure de l’inflammaging (ou inflamma’ging ou inflamm’age), issu de la contraction des termes inflammation et aging. Ce process chronique et silencieux de micro-inflammation, décrypté par Franceschi C et al. en 2000 (Inflamm-aging. An evolutionary perspective on immunosenescence. Annals of the New York Academy of Sciences. 2000;908:244-254) est décrit comme une réaction naturelle de défense du système immunitaire face à un stress qui dégénère en un processus micro-inflammatoire chronique et silencieux, responsable notamment du vieillissement des matières kératiniques et en particulier de la peau. Ce phénomène peut avoir plusieurs origines telles que l'accumulation de dommages tissulaires, la défaillance du système immunitaire ou bien encore l'accumulation de cellules sénescentes et leur capacité à sécréter des cytokines proinflammatoires.

[0005] La peau est également dotée d’un système nerveux dense, essentiellement constitué de terminaisons nerveuses libres pénétrant jusqu’aux couches les plus externes de la peau, et permettant notamment à l’organisme de sentir son environnement et de s’y adapter. Ces prolongements de neurones sensitifs ou fibres nerveuses composent un réseau neuronal cutané qui joue un rôle majeur de sentinelle en contrôlant notamment le maintien de l’épaisseur de l’épiderme. Avec le temps et sous l’influence de différents stress, ce réseau nerveux cutané ne joue plus son rôle moteur sur l’épaisseur et la densité de la peau. On sait notamment que le stress psychologique est un facteur aggravant des maladies cutanées à caractère inflammatoire (dermatite atopique, psoriasis ...), et qu’il est lié à une diminution de la fonction barrière cutanée. Ces neurones sensitifs stimulés (irrités) sont capables aussi de véhiculer des signaux proinflammatoires (production notamment de neuropeptides pro-inflammatoires). Par ailleurs, avec l’âge, on observe une dégénérescence/diminution de la densité des fibres nerveuses. Le système nerveux sensitif cutané perd son rôle trophique (fonction de régénération) au profit d’un rôle plus délétère d’entretien d’un statut micro inflammatoire qui va nourrir l’inflammaging. Les prolongements ou fibres nerveuses présentent jusque dans les couches moyennes de l’épiderme sous l’effet de stress vont libérer un taux anormalement élevé de neuropeptides (substance P, CGRP) et de neuromédiateurs pro-inflammatoires capables d’engendrer la production d’autres molécules pro inflammatoires chez les cellules voisines et participer ainsi à la dégradation des fibres de collagène et d’élastine, ralentir la capacité de renouvellement cellulaire, accélérer le vieillissement cutané, menant ainsi à une perte de tonicité, d’élasticité et de fermeté avec une altération de la fonction barrière. La peau, encore plus déséquilibrée, est alors encore moins résistante aux effets du stress oxydatif. On parlera dans ce cas de « neuro-inflammaging ». Avec l’âge ou certains types de stress, en particulier les rayonnements UV ou le stress émotionnel, on observe une dégénérescence des fibres nerveuses et une diminution de leur densité avec pour effet une perte d’épaisseur de la peau et une fonction barrière altérée ; la peau est plus transparente, avec des rougeurs plus visibles, une hydratation moindre et une peau plus sensible aux stimuli irritants. Les peaux fatiguées, stressées sont ainsi plus exposées à ces réactions cutanées neuroinflammatoires, engendrés par ce stress émotionnel, qui viennent nourrir le statut proinflammatoire de la peau et participer au vieillissement de la peau à plus long terme.

[0006] Il subsiste donc le besoin de trouver des agents capables de prévenir et/ou diminuer les réactions cutanées dues à des stress exogènes et/ou endogènes et responsables des phénomènes « d’inflammaging » ou de « neuro-inflammaging »,

[0007] De manière inattendue, la Demanderesse a mis en évidence in vitro les effets apaisants et neuro-protecteurs d’un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de rose Jardin de Granville® sur des cultures de kératinocytes ou co-cultures de neurones sensitifs et kératinocytes humains. Cet extrait aqueux de fruits de rose permet notamment de diminuer la libération de médiateurs pro-inflammatoires, notamment en condition de stress et/ou de protéger les neurones sensitifs humains vis-à-vis des effets d’un stress irritant. Ces effets permettent d’envisager son utilisation pour prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané liés à l’inflammaging et/ou au neuroinflammaging.

Résumé de l’invention

[0008] Un premier objet de l’invention concerne donc l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu’agent neuro-protecteur des matières kératiniques, en particulier de la peau du visage et/ou du corps et des lèvres.

[0009] L’invention porte également sur un procédé cosmétique non thérapeutique pour prévenir et/ou diminuer les réactions d'origine non pathologiques inesthétiques et/ou d'inconfort de la peau et/ou des lèvres, notamment induites par au moins une condition choisie parmi les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements, comprenant l'application sur la peau du visage et/ou du corps et sur les lèvres, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.

[0010] L’invention porte encore sur un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, pour une utilisation pour apaiser la peau et/ou les lèvres et/ou prévenir et/ou diminuer le phénomène de micro-inflammation chronique de la peau et/ou des lèvres, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau.

[0011] Par ‘micro-inflammation chronique de la peau et/ou des lèvres’, on entend selon l’invention des processus micro-inflammatoires invisibles (silencieux) se mettant en place de façon localisée au niveau de la peau et/ou des lèvres et qui, s’ils dégénèrent ou sont mal résolus, deviennent chroniques. La micro-inflammation chronique de la peau peut notamment être liée à l’accumulation de dommages tissulaires, la défaillance du système immunitaire ou bien encore à l’accumulation de cellules sénescentes et sécrétant des cytokines pro-inflammatoires. Avec le temps, ces événements microinflammatoires à répétition contribuent au vieillissement cutané.

Brève description des dessins

[0012] Effet de composés sur des cocultures de kératinocytes et de neurones sensitifs humains en absence de capsaïcine.

[0013] [fig.lA] dénombrement des neurones sensitifs.

[0014] [fig.lB] longueur des prolongements par neurone sensitif.

[0015] [fig.lC] taux d’expression des récepteurs μ aux opiacés (MOR) par neurone sensitif.

[0016] Effet de composés sur des cocultures de kératinocytes et de neurones sensitifs humains en présence de capsaïcine.

[0017] [fig.2A] dénombrement des neurones sensitifs.

[0018] [fig.2B] longueur des prolongements par neurone sensitif.

[0019] [fig.2C] taux d’expression des MOR par neurone sensitif.

[0020] [fig-3] modulation de la mobilisation de calcium cytoplasmique dans des cocultures de kératinocytes et de neurones sensitifs humains en présence de capsaïcine.

[0021] Effet de composés sur des cocultures de kératinocytes et de neurones sensitifs humains en présence ou en absence de capsaïcine.

[0022] [fig.4A] libération de CGRP dans les surnageants en conditions basales (absence de capsaïcine).

[0023] [fig.4B] libération de CGRP dans les surnageants en présence de capsaïcine.

Description des modes de réalisation

[0024] La fonction principale assurée par le système nerveux cutané est de permettre à l’organisme de sentir son environnement et de s’y adapter. Ainsi, il répond en continu à une variété de stimuli d’origine endogène ou exogène. En retour, les neurones libèrent des informations nerveuses sous forme de neurotransmetteurs (substance P, CGRP, glutamate) au niveau de l’épiderme, épithélium constitué principalement des kératinocytes et de mélanocytes par leurs terminaisons libres. Certains de ces stimuli peuvent être perçus comme des facteurs de stress et sont susceptibles d’induire des irritations cutanées ou des réactions cutanées d'inconfort. Notamment, certaines des terminaisons libres possèdent des récepteurs TRPV1 (transient receptor potential vanilloide 1) responsables de la transmission de la douleur et des sensations de démangeaisons quand ils sont stimulés par des stress mécaniques, thermiques ou irritants (molécules allergènes, pollution atmosphérique...). Ces récepteurs sont notamment activés par la capsaïcine (molécule présente dans le piment Capsicum). On sait qu’elle est responsable de l’activation /stimulation des neurones sensitifs qui peut être mesurée par leurs capacités à mobiliser le calcium. Les opiacés sont capables de moduler ces messages nocicepteurs, on parlera de régulation de la nociception, par l’intermédiaire des récepteurs aux opiacés et notamment les récepteurs μ (MOR) qui sont colocalisés avec les récepteurs TRPV1.

[0025] Un premier objet de l’invention porte donc sur l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu’agent neuro-protecteur des matières kératiniques, en particulier de la peau (notamment du visage et/ou du corps) et/ou des lèvres.

[0026] Par « agent neuro-protecteur » des matières kératiniques selon l’invention, en particulier de la peau et/ou des lèvres, on entend un agent capable de prévenir et/ou diminuer des réactions cutanées induites par un stress d’origine exogène et/ou endogène, notamment en protégeant les neurones sensitifs cutanés humains vis-à-vis des effets d’un stress irritant.

[0027] En particulier, un agent neuro-protecteur cutané selon l’invention permet de conserver et/ou d’améliorer la pousse neuritique des neurones sensitifs humains au niveau de la peau, et/ou d’augmenter le taux d’expression des récepteurs μ aux opiacés (MOR) et/ou de diminuer la libération de neuropeptides CGRP induite par un stress irritant. On parlera aussi d’agent neuro-apaisant.

[0028] Par « matières kératiniques » on entend selon l’invention la peau et/ou ses phanères, et les lèvres. En particulier, il s’agira de la peau du visage et/ou du corps, et des lèvres.

[0029] L’invention porte donc également sur l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de fruits de rose pour prévenir et/ou traiter les réactions d'origine non pathologiques inesthétiques et/ou d'inconfort de la peau, notamment induites par au moins une condition choisie parmi les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et les frottements.

[0030] L’extrait aqueux de fruits de rose est présent dans la composition cosmétique de l’invention dans une quantité efficace pour obtenir l’effet recherché.

[0031] En particulier, il est présent en une teneur allant de 0,1% à 95%, notamment de 0,5% à 80% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un premier mode de réalisation, il est présent en une teneur allant de 50% à 95%, en particulier de 60% à 90% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un autre mode particulier de réalisation, il est présent en une teneur allant de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10%, et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Matériel végétal

[0032] Les extraits de l’invention sont des extraits aqueux de fruits de rose. On parlera indifféremment selon l’invention d’un extrait de rose, d’un extrait de rosier ou d’un extrait en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.

[0033] L’homme du métier choisira de préférence des roses sélectionnées dont les propriétés sont préservées par un environnement et un mode d’agriculture biologique. Selon un mode particulier et préféré, on utilisera un extrait aqueux de fruits de rose de la variété Evanrat ou rose ‘Jardin de Granville®’.

[0034] Le rosier ou rose ‘Jardin de Granville®’ est une variété hybride proposée exclusivement par « Roses anciennes André Eve S.A.S » et protégée par Certificat d’Obtention Végétale sous le N°20110345 avec pour espèce la dénomination Rosa L. et pour la variété la dénomination EVANRAT. Ce rosier buisson appartient au groupe des hybrides modernes, qui, de mai à octobre, se couvre de roses en permanence, montrant ainsi un excellent caractère remontant.

[0035] Ainsi, selon un mode particulier et préféré de l’invention, la composition cosmétique selon l’invention comprend un extrait aqueux de fruits de rose de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.

[0036] Les fruits de rose sont distincts des fruits de l’églantier appelés cynorrhodons.

[0037] Les fruits de rose selon l’invention sont obtenus en laissant la fleur faner sur le rosier.

On distingue trois types de fruits de rose selon leur maturité :

[0038] - les fruits ‘verts’ récoltés en octobre et issus d’une seconde floraison au mois de septembre ;

[0039] - les fruits ‘intermédiaires’ récoltés en octobre et issus d’une seconde floraison au mois d’août ; et

[0040] - les fruits ‘mûrs’ (couleur rouge-orangé) récoltés en octobre et issus d’une première floraison au mois de juin.

[0041] Selon un premier mode de réalisation, on utilisera seulement les fruits verts.

[0042] Selon un autre mode de réalisation, on utilisera seulement les fruits ‘intermédiaires’ et les fruits ‘mûrs’.

[0043] Selon un dernier mode de réalisation, on utilisera indifféremment les fruits verts et/ou les fruits intermédiaires et/ou les fruits mûrs.

[0044] Ainsi, les fruits verts, les fruits ‘intermédiaires’, et les fruits ‘mûrs’ sont nommés indifféremment dans le reste de la description ‘fruits’ de rose.

[0045] Lesdits fruits de rose sont récoltés généralement au mois d’octobre et immédiatement stockés à -20°C.

[0046] On peut utiliser les fruits entiers comprenant le chapeau, les poils et la pulpe, ou la pulpe seule.

[0047] Ces fruits de rose comprennent des sucres monosaccharides (fructose, glucose, saccharose), des acides organiques (acide citrique, acide malique), des polyphénols (catéchine), de la vitamine C, des acides aminés (majoritairement acide aspartique et acide glutamique), des minéraux (cendres, potassium, calcium), et des caroténoïdes.

[0048] En particulier, le calcium améliore la différenciation épidermique et renforce la structure de la peau, tandis que le potassium amplifie l’hydratation cutanée et booste l’assimilation de l’énergie. Les phytosucres (fructose, sucrose, saccharose) sont destinés à gorger les cellules cutanées d’énergie.

[0049] Les fruits de rose de l’invention peuvent être récoltés et directement congelés ; on parlera de fruits ‘humides’ ou fruits ‘frais’ congelés. Selon un autre mode de réalisation, les fruits de rose de l’invention peuvent être récoltés et séchés (lyophilisés) avant d’être congelés ; on parlera de fruits ‘lyophilisés’ congelés.

[0050] Selon un mode particulier et préféré, on utilisera des fruits ‘humides’ ou fruits ‘frais’ congelés, pour l’extraction.

[0051] L’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est un extrait concentré en composés naturels polaires. L’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est distinct d’une eau de rose. Il s’agit ici d’extrait de fruits de rose mettant en œuvre l’extraction de composés naturels de fruits de rose en présence de solvants aqueux (polaire) avec ou sans ajout de modificateur de pH, et une mise en œuvre, dans la formulation, sous la forme d’une solution ou concentré aqueux, le solvant du concentré pouvant être le solvant d’extraction et/ou un solvant additionnel.

[0052] Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention comprend en outre en faible proportion un extrait de fleurs de rose représentant de 0,01 à 1%, de préférence de 0,01 à 0,1% de l’extrait aqueux total de rose selon l’invention. Dans ce mode de réalisation, le matériel végétal d’origine (10% de charge totale en matériel végétal) comprend des fruits de rose et des fleurs de rose dans une proportion 0.01% fleurs pour 9,99% de fruits à 1% fleurs pour 9% de fruits.

[0053] L’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention peut être obtenu selon différents procédés connus de l’homme du métier et notamment ceux décrits ci-après.

[0054] Selon un mode particulier, on utilisera comme matériel végétal dans les procédés d’extraction adaptés à l’invention décrits ci-après, des fruits de la variété Evanrat, de préférence la rose Jardin de Granville®, de préférence des fruits frais (intermédiaires et mûrs) directement congelés à -20°C.

[0055] Selon un autre mode particulier, on utilisera comme matériel végétal dans les procédés d’extraction adaptés à l’invention décrits ci-après, des fruits de la variété Evanrat, de préférence la rose Jardin de Granville®, de préférence des fruits frais (verts) directement congelés à -20°C.

[0056] Selon un autre mode particulier, on utilisera comme matériel végétal dans les procédés d’extraction adaptés à l’invention décrits ci-après, des fruits de la variété Evanrat, de préférence la rose Jardin de Granville®, de préférence des fruits frais (verts, intermédiaires et/ou mûrs) directement congelés à -20°C.

Extrait aqueux de fruits de rose

[0057] On parlera indifféremment d’extrait aqueux ou d’extrait polaire ou d’extrait hydrophile de rose dans la description. L’extrait aqueux de fruits de rose est obtenu avantageusement au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.

[0058] Par ‘extrait aqueux de rose’ selon l’invention, on comprend notamment que les composés polaires (hydrophiles) des fruits de rose se sont solubilisés et/ou ont été extraits dans un solvant polaire.

[0059] Avantageusement, l’extrait de l’invention est obtenu par ‘Eco extraction’ basée sur la découverte et la conception de procédés d’extraction permettant de réduire la consommation énergétique, mais aussi l’utilisation de solvants alternatifs et des ressources végétales renouvelables, tout en garantissant un produit/extrait sur et de qualité. L’Eco extraction privilégie 6 grands principes (Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco-Extraction du végétal) :

[0060] - Favoriser l’innovation par la sélection variétale et l’utilisation de ressources végétales renouvelables,

[0061] - Privilégier les solvants alternatifs dits solvants verts et principalement ceux issus des agro-ressources,

[0062] - Réduire la consommation énergétique par l’assistance des technologies innovantes et favoriser la récupération d’énergie,

[0063] - Favoriser la création de coproduits au lieu de déchets pour intégrer la voie de la bio ou agro-raffinerie,

[0064] - Réduire les opérations unitaires grâce à l’innovation technologique et favoriser les procédés surs, robustes et contrôlés, et

[0065] - Privilégier un produit non dénaturé, biodégradable, sans contaminants et surtout porteur de valeurs « éco-Extrait ». On utilisera donc avantageusement comme solvant vert polaire : l’eau.

[0066] Préalablement à l’étape d’extraction elle-même, les fruits peuvent avoir été séchés et/ ou broyés. Selon un autre mode de réalisation, les fruits sont utilisés humides puis broyés.

[0067] Selon un mode particulier, les fruits sont broyés avant extraction, par exemple au moyen d’un mortier, d’un cryobroyage, d’un mixeur, d’un broyeur traditionnel ou d’un centrifugeur selon les méthodes connues de l’homme du métier.

[0068] L’extrait peut être préparé par différents procédés d’extraction connus de l’homme du métier, mettant en œuvre des étapes de broyage du matériel végétal, dispersion de la matière broyée dans un solvant polaire, séparation des phases soluble et insoluble par filtration, concentration et éventuelle remise en solution.

[0069] Selon la présente invention, l’expression « solvant polaire » signifie que le solvant a une valeur d’indice de Polarité ou paramètre de solubilité total de Hildebrand supérieur ou égal à 10. L’indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d’état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d’une molécule. A titre d’exemples, les solvants suivants ont un paramètre de solubilité total de Hildebrand de :

[0070] - 7,3 pour l’hexane (solvant apolaire),

[0071] - 11,6 pour le butylène glycol, 12,7 pour l’éthanol et 16,5 pour le glycérol (solvants polaires),

[0072] - 23,4 pour l’eau H2O (solvant polaire).

[0073] Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d’un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H. A titre de solvant polaire particulièrement préféré, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l’eau, les alcools en C1-C4, tel que l’éthanol, les glycols, tels que l’éthylène glycol, le glycérol, le butylène glycol et le propylène glycol, et leurs mélanges. Avanta geusement, on utilisera l’eau, l’éthanol ou leur mélange. Avantageusement, on utilisera l’eau comme solvant d’extraction (éco extraction).

[0074] En particulier, on extrait le matériel végétal à l’aide d’un solvant constitué d’eau, avec ou sans modificateur de pH (ex : acide organique, acide citrique, acide chlorhydrique), sans autre solvant additionnel, dans un rapport 10g de matériel végétal pour 100g d’eau (on parlera de 10% de charge en matériel végétal). La charge en matériel végétal peut aller de 5 à 30%, de préférence 10%.

[0075] L’extraction peut être menée à chaud par reflux ou bien par macération à température ambiante.

[0076] L’extraction peut être faite à l’aide de techniques physicochimiques bien connues telles que notamment les ultrasons, micro-ondes, extrusion, champ électrique pulsé, et/ ou cryo-extraction.

[0077] Dans le cas d’une extraction aux ultrasons, la durée de l’extraction pourra aller notamment de 2 à 10 minutes en particulier 5 minutes.

[0078] Dans le cas d’une extraction mettant en œuvre une autre technologie parmi celles précitées, la durée pourra aller généralement de Ih à lOh, notamment 2 à 6h, voire 4h, notamment à 60°C.

[0079] Le procédé d’extraction comprend avantageusement une étape de filtration visant à séparer la phase liquide du matériel végétal épuisé. L’homme du métier choisira des tamis de filtration adaptés, en particulier avec des diamètres de filtration de 0,1 pm à 0,5pm, notamment de 0,2 à 0,3pm.

[0080] On peut reproduire le cycle d’extraction puis filtration, plusieurs fois afin d’épuiser le matériel végétal des substances ayant une affinité pour le solvant d’extraction

[0081] Le procédé d’extraction peut en outre être complété par une étape d’élimination partielle ou totale des solvants d’extraction.

[0082] On peut avantageusement concentrer l’extrait en éliminant une partie du solvant ou du mélange du solvant d’extraction.

[0083] On peut ainsi obtenir un concentré aqueux dépourvu d’une quantité significative de solvants organiques ou bien encore, en éliminant tout le solvant d’extraction, obtenir un résidu sec.

[0084] De façon alternative, le produit de l’étape d’extraction peut être, lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d’une poudre.

[0085] Selon un mode particulièrement préféré, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est obtenu selon un procédé permettant d’augmenter le rendement d’extraction et d’enrichir l’extrait en produits hydrosolubles habituellement contenus dans les sucs de plantes, notamment des sucres, des sels minéraux, des protéines, bénéfiques pour la micro-nutrition de la peau.

[0086] Ainsi selon un mode particulier et préféré de l’invention, l’extrait aqueux de fruits de rose est obtenu selon le procédé d’extraction comprenant les étapes suivantes :

[0087] a) récolte des fruits frais, verts, intermédiaires et/ou mûrs, éventuellement stockés à 20°C,

[0088] b) broyage des fruits

[0089] c) mélange de 5 à 30%, notamment 10% de matériel végétal dans de l’eau de préférence acidifiée (ex : acide citrique) à une température allant notamment de 10 à 60°C, en particulier 30°C

[0090] d) montée progressive en température du mélange, en particulier de 30 à 100°C, notamment jusqu’à 50 à 70°C, voire jusqu’à 60°C

[0091] e) extraction éventuellement sous agitation,

[0092] f) séparation liquide/solide,

[0093] g) optionnellement ajout de conservateurs,

[0094] h) filtrations, en particulier jusqu’à 0,22pm,

[0095] i) optionnellement conditionnement, le cas échéant sous azote,

[0096] j) optionnellement stockage à +4°C.

[0097] Comme conservateurs à l’étape g), on peut citer notamment le benzoate de sodium, le sorbate de potassium, le phénoxyéthanol et leurs mélanges.

[0098] Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est un extrait aqueux de fruits de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville® obtenu selon le procédé d’extraction décrit précédemment, autrement nommé ‘Extrait aqueux de fruits de rose’ et comprend de 1 à 2 % en poids de matière sèche (matière active) d’extrait de fruits de rose, 97.5% à 98.5% d’eau.

[0099] Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention, est un extrait aqueux de fruits de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville® obtenu selon le procédé d’extraction décrit précédemment, autrement nommé ‘Extrait aqueux de fruits de rose’ dans les exemples illustratifs décrits ci-après, et comprend de 1 à 2 % en poids de matière sèche (matière active) d’extrait de fruits de rose, 97.5% à 98.5% d’eau, 0.5% d’acide citrique, et des conservateurs.

[0100] Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de fruits de rose comprend de 1 à 2 % en poids de matière sèche (matière active) d’extrait de fruits de rose et de fleurs de rose (dans un ratio massique 0,01 fleurs pour 9,99 fruits), 97.5% à 98.5% d’eau, 0.5% d’acide citrique, et des conservateurs.

[0101] Selon un mode particulier et préféré de l’invention, la composition cosmétique selon l’invention est caractérisée en ce que l’extrait aqueux de fruits de rose comprend un extrait de fruits de rose dans un solvant polaire, en particulier dans un ratio pondéral de 10 :90 (extrait végétal : solvant polaire). L’extrait aqueux de fruits rose selon l’invention, en particulier obtenu selon le procédé décrit précédemment, comprend avantageusement des micronutriments (calcium, potassium) et des macronutriments tels que les phyto sucres (glucose et fructose, et éventuellement saccharose).

[0102] Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de fruits rose selon l’invention en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, comprend une teneur totale en minéraux allant de 300 à lOOOppm, en particulier de 400 à 800 ppm et comprenant notamment du calcium et du potassium.

[0103] La Demanderesse a montré que la composition minérale (calcium + potassium) de l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention était beaucoup plus importante que celle d’un extrait aqueux de fleurs de rose ‘Cryoextrait’ décrit ci-après (610ppm vs 220 ppm).

[0104] Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de fruits rose selon l’invention, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, comprend une teneur en sucres totaux allant de 1 à 3%, et comprenant notamment du fructose et du glucose et éventuellement du saccharose.

[0105] La teneur en extrait aqueux de fruits de rose dans la composition cosmétique finale ira généralement de 0,1% à 95%, notamment de 0,5% à 80% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un premier mode de réalisation, il est présent en une teneur allant de 50% à 95%, en particulier de 60% à 90% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un autre mode particulier de réalisation, il est présent en une teneur allant de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10%, et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition.

[0106] Pour une matière première comprenant 1% en poids d’extrait sec de fruits de rose, cela équivaut à 0.001% à 0,02% en poids, notamment de 0,005% à 0,01%, et selon un mode particulier de 0,01% à 0,05% en poids de matière sèche (active) par rapport au poids total de la composition.

[0107] L’extrait aqueux de fruits de rose utilisé selon l’invention est tel que décrit ci-dessus. [0108] De préférence, on utilisera un extrait aqueux de fruits de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville® obtenu selon le procédé de cryobroyage et extraction à chaud des fruits frais de rose Jardin de Granville®; en particulier un extrait comprenant 1% de matière sèche dans 97.5% d’eau, 0.5% d’acide citrique et des conservateurs (nommé ‘Extrait aqueux de fruits de rose’ dans les exemples illustratifs).

Compositions et galénique

[0109] La composition cosmétique de l’invention peut se présenter sous toute forme galénique adaptée à une application topique sur les matières kératiniques et en particulier la peau, par exemple un sérum, une émulsion huile-dans-eau, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion multiple, un gel aqueux, un baume, un gloss ou un stick.

[0110] La composition est préférentiellement destinée à être appliquée sur la peau et/ou les lèvres et se présente par exemple sous la forme d’une lotion, d'une crème de soin, d’un sérum, d'un fluide pour le visage, d’un gel de soin pour le visage et/ou le contour des yeux, ou bien encore d’un baume, d’un gloss ou d’un stick pour les lèvres.

[0111] La phase aqueuse représente généralement de 1 à 99% en poids, par rapport au poids total de ladite composition.

[0112] Phase aqueuse

[0113] La phase aqueuse de la composition selon l'invention comprend de l'eau et éventuellement un solvant hydrosoluble.

[0114] On entend par ‘solvant hydrosoluble’ selon l’invention, un composé liquide à température ambiante et miscible à l'eau (miscibilité dans l'eau supérieure à 50 % en poids à 25 °C et pression atmosphérique). On peut citer notamment :

[0115] - les mono-alcools inférieurs en C1-C5 tels que l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges ;

[0116] - les glycols en C2-C8 tels que l'éthylène glycol, le propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le dipropylène glycol, et leurs mélanges ;

[0117] - les polyols en C2-C32 tels que les polyglycérols, les polyéthylènes glycols, et leurs mélanges,

[0118] et leurs mélanges.

[0119] Elle peut comprendre également des gélifiants hydrophiles, des antioxydants, des conservateurs et leurs mélanges.

[0120] A titre de gélifiants hydrophiles, on peut citer notamment les polymères d’acide acrylique tels que ceux de Nom INCI Carbomer ou de référence commerciale Carbopol®, les copolymères d’acides acrylique et méthacrylique, les polymères carboxy vinyliques, les épaississants associatifs de type acrylique ou polyuréthane, les gélifiants polysaccharidiques tels que les alginates, les gommes naturelles ou modifiées telles que les gommes de xanthane, les gommes de carraghénanes, les gommes d’agar, les gommes de guar, les gommes de gellane, les chitosans, les mannanes, les pullulanes, les dérivés de la cellulose, la gélatine, les pectines, les gélifiants minéraux tels que les bentones ou les silices modifiées, et leurs mélanges.

[0121] Par gomme naturelle ou modifiée on entend un polysaccharide éventuellement modifié qui s'hydrate en milieu aqueux pour former une solution visqueuse ou une dispersion. Parmi les gommes naturelles on inclut les extraits d'algues, les exsudais de plantes et les gommes extraites de graines ou de racines végétales et celles obtenues par fermentation microbiologique. Les gommes modifiées ou semi-synthétiques comprennent les dérivés de la cellulose et de l'amidon et, de façon générale, les dérivés de toutes les gommes naturelles.

[0122] Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention comprend une phase aqueuse gélifiée, notamment par la présence d’au moins un polymère acrylique, en particulier un polymère d’acide acrylique ou copolymère d’acide acrylique et mé13 thacrylique.

[0123] La teneur en gélifiant(s) hydrophile(s) dans la composition cosmétique de l’invention ira généralement de 0,5 à 5%, notamment de 0,7 à 4%, de préférence de 0,9 à 3% et de préférence encore de 1 à 2% en poids par rapport au poids total de ladite composition.

[0124] Phase grasse ou huileuse

[0125] La composition cosmétique de l’invention peut comprendre en outre une phase grasse (corps gras solides) ou huileuse.

[0126] On entend par « phase huileuse » une huile ou un mélange d'huiles miscibles entre elles. Par « huile », on entend, au sens de l'invention, un corps gras, non soluble dans l'eau, liquide à 25°C et pression atmosphérique. .Une phase huileuse selon l’invention peut comprendre des huiles hydrocarbonées, siliconées, fluorées ou non, et leurs mélanges.

[0127] Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique.

[0128] Par ‘huile hydrocarbonée’, on entend selon l’invention une huile contenant principalement des atomes d’hydrogène et de carbone.

[0129] Par ‘huile siliconée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de silicium, et notamment au moins un groupe Si-O.

[0130] Par ‘huile fluorée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de fluor.

[0131] Comme huiles non volatiles hydrocarbonées, on peut citer notamment les huiles hydrocarbonées, les huiles hydrocarbonées d’origine végétale, les éthers de synthèse en C10-C40, les esters de synthèse en C10-C40, les alcools gras en C12-C26, les acides gras supérieurs en C12-C22, et leurs mélanges.

[0132] Comme huiles non volatiles siliconées, on peut citer notamment les huiles siliconées phénylées, les huiles siliconées non phénylées, et leurs mélanges.

[0133] Les huiles pourront être présentes dans la composition de l’invention en une teneur allant de 0,01 à 95 % en poids par rapport au poids total de la composition.

[0134] La phase grasse ou huileuse peut comprendre également des gélifiants lipophiles, des polymères filmogènes, des tensioactifs, des antioxydants et leurs mélanges.

[0135] Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention ne comprend pas d’autre extrait de rose que des extraits de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville®.

[0136] Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention comprend au moins un autre extrait de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville®, choisi parmi un extrait aqueux de fleurs de rose, un extrait huileux de fleurs de rose, et leur mélange, et de préférence :

[0137] - un extrait aqueux de fleurs de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de

Granville® obtenu selon le procédé de cryo-extraction décrit dans la demande

EP0425391; en particulier un extrait comprenant 0,5% de matière sèche dans 99.5% d’un mélange d’eau/glycérol (nommé ‘Cryoextrait’ dans les exemples illustratifs) et [0138] - un extrait huileux de fleurs de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de

Granville® obtenu selon le procédé d’enfleurage dynamique tel que décrit dans la demande décrit dans la demande WO2010/112760 ; en particulier un extrait comprenant de 0,5% à 1,5% de matière sèche dans 98.5-99.5% d’huile de tournesol oléique désodorisée bio (nommé ‘Satin oil’ dans les exemples illustratifs suivants). [0139] Ingrédients additionnels

[0140] La composition de l'invention peut également comprendre tout additif usuellement utilisé en cosmétique tels que des filtres UV, des antioxydants, des parfums, des agents actifs cosmétiques, comme par exemple des agents émollients, des agents hydratants, des vitamines, des agents anti-âge, des agents éclaircissants, des agents liftants, des agents tenseurs, des agents repulpants, des agents anti-pollution, des agents revitalisants, des agents régénérants, des agents relipidants, et leurs mélanges, des charges, des nacres et leurs mélanges. Elle peut également comprendre des agents apaisants distincts de l’extrait aqueux de rose selon l’invention. Comme agents apaisants, on peut citer notamment le bisabolol, l’allantoine, les eaux thermales.

[0141] Procédé cosmétique et autres utilisations

[0142] L’invention concerne également un procédé cosmétique non thérapeutique pour prévenir et/ou diminuer les réactions d'origine non pathologiques inesthétiques et/ou d'inconfort de la peau et/ou des lèvres, notamment induites par au moins une condition choisie parmi les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements, comprenant l'application sur la peau du visage et/ou du corps et/ou sur les lèvres, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.

[0143] La composition peut être appliquée sur la peau du visage et/ou du corps, et/ou sur les lèvres. Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage et/ou du corps. Selon un autre mode particulier, la composition est appliquée sur les lèvres.

[0144] L’invention porte encore sur un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, pour une utilisation pour apaiser la peau et/ou prévenir et/ou diminuer le phénomène de micro-inflammation chronique de la peau et/ou des lèvres, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau.

[0145] En particulier, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est utilisé pour apaiser la peau et/ou les lèvres et/ou prévenir et/ou diminuer le phénomène de microinflammation chronique de la peau et/ou des lèvres, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau chez des sujets présentant une peau et/ou des lèvres fragile(s), sensible(s), irritée(s) et/ou stressée(s).

[0146] En particulier, l’extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, est présent dans la composition en une teneur allant de 0,1% à 95%, en particulier de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10% et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition.

[0147] Selon un mode particulier de l’invention, la composition est appliquée sur une peau fragile, sensible, irritée, et/ou stressée.

[0148] Selon un autre mode particulier de l’invention, la composition est appliquée sur des lèvres fragiles, sensibles, irritées et/ou stressées.

[0149] Selon un autre mode particulier et préféré, la composition comprend en outre au moins un actif cosmétique choisi parmi un agent antioxydant, un agent apaisant distinct de l’extrait aqueux de fruits de rose, un agent émollient, un agent hydratant, une vitamine, un agent éclaircissant, un agent liftant, un agent tenseur, un agent repulpant, un agent anti-âge, un agent anti-pollution, un agent anti-UV, un agent revitalisant, un agent régénérant, un agent relipidant, et leurs mélanges.

[0150] Selon un mode particulier de l’invention, la composition cosmétique est sous la forme d’une solution, d’une émulsion, d’un sérum, d’un gel notamment pour le visage, d’un baume, d’un gloss ou d’un stick notamment pour les lèvres..

[0151] De préférence, on utilisera dans le cadre de ces procédés cosmétiques une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention, seul ou en combinaison avec d’autres extraits de fleurs de rose de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville® tels que décrits précédemment.

[0152] L’invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. Les pourcentages (%) sont exprimés en poids de matière première (MP) par rapport au poids total de la composition sauf indication contraire.

Matériel et Méthodes

[0153] On utilise comme matériel végétal pour obtenir les extraits aqueux de rose illustrés dans ces exemples, des fruits de rose de la variété Evanrat, en particulier des fruits de rosier Jardin de Granville®, disponible chez les pépiniéristes.

[0154] Extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention

[0155] On utilise comme matériel végétal des fruits de rose de la variété Evanrat, en particulier des fruits de rosier Jardin de Granville® disponible chez les pépiniéristes.

[0156] L’extrait aqueux de fruits de rose est obtenu selon le procédé de cryobroyage et extraction à chaud (60°C) dans l’eau décrit ci-dessus. On obtient l’extrait aqueux de fruits de rose comprenant 2 % en poids de matière sèche (matière active), 97.5% en poids d’eau, 0.5% d’acide citrique et des conservateurs qsp 100%.

[0157] On a étudié l’impact de l’extrait aqueux de fruits de rose sur l’expression de gènes impliqués dans divers processus, en particulier la micro-inflammation chronique de la peau au niveau des kératinocytes, responsable de l’inflammaging.

[0158] Exemple 1 : Protocole d’étude de l’expression des gènes d’intérêt en culture de kératinocytes

[0159] Des kératinocytes humains normaux (KHN) sont mis en culture puis traités avec l’extrait aqueux de fruits de Rose décrit dans le paragraphe Matériels et Méthodes.

[0160] Après traitement des KHN, une étude par Taqman Low Density Array (TLDA) sur les gènes étudiés est effectuée à partir des ADNc obtenus après transcription inverse des ARN totaux extraits.

[0161] L’extrait aqueux de rose est testé à 0.15% et 0.31% en poids de matière première (excipient eau).

[0162] Culture des KHN

[0163] Les kératinocytes humains normaux sont issus d’un prélèvement cutané issu de chirurgie plastique. Les cellules sont cultivées le milieu Epilife complet à P5 avec une densité d’ensemencement de 50.000 cellules par puits, dans des plaques 12 puits. A sub-confluence, les cellules sont traitées 24 heures avec les doses d’extraits de rose décrites ci-dessus.

[0164] Technologie TLDA fTaqMan Low Density Array)

[0165] · Obtention des ARN totaux

[0166] Le milieu de culture des cellules est éliminé, et 250 pL de tampon de lyse RLT (fourni dans le kit Nucleospin RNA trace, Macherey-Nagel) sont ajoutés. Les cellules sont raclées à l’aide d’un Cell Scraper puis, le lysat cellulaire est récupéré dans une deepwell 1,2 mL (fourni dans le kit Nucleospin RNA). Les ARN totaux sont extraits selon les protocoles définis.

[0167] Les solutions d’ARN totaux obtenues sont dosées, et leur qualité vérifiée, à l'aide d'un lecteur de microplaques, le spectrostarNANO (BMG Labtech) couplé au MicrolabSTAR. Cet appareil est relié à l'ordinateur pilotant la plateforme Robotique et possède le logiciel spécifique d'analyse des résultats (logiciel MARS). La technique nécessite une micro-plaque de 384 puits (LoBase), un contrôle positif (Thermofisher) permettant de valider les pipetages réalisés par le robot ainsi que les valeurs générées par le lecteur spectrostarNANO.

[0168] · Synthèse des ADN complémentaires

[0169] Le kit de reverse transcription (RT) utilisé est le High Capacity Reverse Transcription Kit (Thermo Eisher). Il a été utilisé selon le protocole fourni. 500 ng d’ARN totaux sont dilués dans de l’eau pour un volume final de 25 pL. Ils sont ensuite incubés pendant 10 minutes à 25 °C puis 2 heures à 37 °C en présence de 25 pL de mélange ré actionnel de High Capacity Reverse Transcription Kit 2X préalablement préparé comme indiqué ci-dessous. Les différentes incubations sont faites au sein du TRobot (Biométra).

[0170] [Tableauxl]

Réactifs	RT tampon	dNTP	Primer	RNase OUT	RT	H2O
Volume	5 pL	2 pL	5 pL	0,5 pL	2,5 pL	10 pL

[0171] Tableau 1 : Mélange réactionnel High Capacity Reverse Transcription Kit 2X pour 1 réaction

[0172] · PCR-TaqMan Low Density Array

[0173] 15 pL de chaque RT sont mélangés à 60 pl d’eau puis 75 pL de TaqMan Gene Expression master mix (ThermoFisher), contenant l’ADN polymerase, sont ajoutés. Après homogénéisation, 100 pL sont déposés sur les cartes microfluidiques contenant les sondes correspondant aux gènes testés (tableau 2 ci-dessous), ces dernières sont centrifugées puis scellées. Le CD Rom correspondant au profil des gènes déposés sur les plaques est chargé dans le logiciel SDS 2.3, précisant l’emplacement de chaque gène sur la carte. Le gène contrôle (ou « endogeneous » gene) à utiliser pour la normalisation des résultats est à indiquer avant le lancement de la PCR. Cette dernière est réalisée selon le protocole fourni par Applied Biosystems dans l’appareil ABI Prism 7900HT Sequence detection system. Les étapes de la qPCR sont 2 min à 50°C, 10 min à 94,5°C puis 30s à 97°C et 1 min à 59,7°C pour 40 cycles.

[0174] Analyses statistiques

[0175] La PCR quantitative en temps réel peut être exploitée si son efficacité est comprise entre 90% et 110%. Pour chaque échantillon, le nombre de cycles auquel apparaît le signal est déterminé par le logiciel SDS 2.3. Pour un même essai, les niveaux d’expression des transcrits d’intérêt obtenus sont normalisés par rapport à la valeur obtenue pour le gène de ménage Beta-2-microglobuline. Ce gène dont l’expression est constitutive et invariante permet de s’affranchir toutes variations induites au cours de l’expérience (dosage des ARNs totaux, pipetages, étape de réverse transcription, PCR dans l’appareillage).

[0176] Dans la méthode de RT-PCR TLDA, la quantification est effectuée en utilisant la méthode comparative de AACt. Les valeurs de quantification relative (RQ) obtenues correspondent au niveau d’amplitude (x fois plus ou moins que le contrôle) de l’expression par rapport à notre contrôle ici le non irradié. Le RQ est obtenu par le calcul suivant où le contrôle est égal à 1 :

[0177] RQ = 2-AACt = 2-(ACt traité - ACt non traité)

[0178] ACt traité = Ct gène cible traité - Ct gène de ménage traité

[0179] ACt non traité Ct gène cible non traité - Ct gène de ménage non traité

[0180] Afin d’évaluer des variations d’activité transcriptionnelle statistiquement significative, nous utiliserons le test t de Student. Chaque condition est réalisée en triplicate (3 non traités et 3 traités dans les mêmes conditions). Le test-F de Fischer est tout d’abord appliqué en comparant les deux matrices de données. Lorsque la valeur est supérieure à a = 0,05 alors la variance pour le test t de Student est de 2, lorsque le test-F de Fischer est inférieur à a = 0,05 alors la variance sera égale à 3. Les variations transcriptionnelles retenues seront celles qui ont un test t de Student inférieur à a = 0,05.

[0181] Les résultats sont présentés en moyenne sur n=3. Le test t de Student a été utilisé pour comparer l’effet entre les cellules traitées et non traitées.

[0182] Les résultats sont considérés comme significatifs pour p<0,05(*) ou p<0,01(**).

[0183] En fonction des effets recherchés, l’Homme du métier déterminera quels sont les gènes pertinents à inclure dans l’étude et utilisera ses connaissances pour optimiser pour chaque gène les séquences nucléotidiques des amorces PCR à utiliser.

[0184] Exemple 2 : Effet de l’extrait aqueux de fruits de rose sur les marqueurs de la micro-inflammation cutanée

[0185] L’effet de l’extrait de fruits de rose selon l’invention sur l’expression des cytokines, récepteurs aux cytokines, ainsi que d’autres gènes impliqués dans les processus de micro-inflammation responsables de l’inflammaging en particulier au niveau de la peau a été étudié. Cette étude a été réalisée sur culture de kératinocytes en suivant le protocole détaillé dans l’exemple 1.

[0186] [Tableaux2]

Gene	Symbole	Reference TaqMan	RefSeq N° d’accession GeneBank
Interleukine 1 alpha	IL-la	Hs00174092_ml	NM_000575.4
Interleukine 1 béta	IL-IB	Hs00174097_ml	NM_000576.2
Suppressor of cytokine signaling protein 1	SOCS1	Hs00864158_gl	NM_003745.1
Tumor necrosis factor alpha	TNFa	Hs00174128_ml	NM_000594.3
Prostaglandin E2 receptor 4	PTGER 4	Hs00168761_ml	NM_000958.2
Interleukin 1 receptor, type II	IL-1R2	Hs01030389_ml	NM_004633.3

[0187] Tableau 2 : Référence des gènes étudiés [0188]

[Tableaux3]

Gène	Symbole	Extrait* 0.31%
Nuclear factor NF-kappa-B	NFKB1	-69%
Interleukine 1 alpha	IL-la	- 94.5%
Interleukine 1 béta	IL-IB	-91%
Interleukine 8	IL8	- 86%
Suppressor of cytokine signaling protein 1	SOCS1	+ 170%
Tumor necrosis factor alpha	TNFa	- 75.5%
Tumor necrosis factor superfamily member 1A	TNFRSF1A	-39%
Cytochrome c oxidase polypeptide II,	COX2	- 44.5%
Prostaglandin E2 receptor 2	PTGER 2	- 87.5%
Prostaglandin E2 receptor 4	PTGER 4	-70%

[0189] Tableau 3 : Modulation de l’expression des gènes d’intérêt après traitement par l’extrait de fruits de rose selon l’invention

[0190] *extrait aqueux de fruits de rose décrit dans le paragraphe matériels et méthodes

[0191] Les effets de l’extrait de fruits de rose selon l’invention ont également été comparés par rapport à d’autres extraits de rose sur les marqueurs de la micro-inflammation cutanée. Notamment, deux autres extraits ont été évalués dans des expériences similaires à celles décrites à l’exemple 1 :

[0192] - un extrait aqueux de fleurs de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de

Granville® obtenu selon le procédé de cryo-extraction décrit dans la demande EP0425391; en particulier un extrait comprenant 65pg/mL de matière sèche dans un mélange d’eau/glycérol,

[0193] - un extrait de bourgeons de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville® obtenu selon le procédé de cryo-extraction décrit dans la demande EP0425391; en particulier un extrait comprenant 150pg/mL de matière sèche dans un mélange d’eau/glycérol ...

[0194] L’extrait de fruits de rose ici comparé comprend pour sa part 25pg/mL de matière sèche.

[0195]

[Tableaux4]

Proteines	Symbole	Extrait* de fruits de rose 0.15% correspondan t à 25pg/mL	Extrait de fleurs de rose 1% correspondan t à 65pg/ML	Extrait de bourgeons de rose 1% correspondu nt à 150pg/mL
Granulocyte-colony stimulating factor	G-CSF	-71 %	-	-44%
Granulocyte-macrophage colonystimulating factor	GM-CSF	-65%	-	ns
Interferon alpha-2	IFNa2	-61 %	-	-49 %
Interleukine 1 alpha	IL-la	-79%	- 17 %	-
Interleukine 1 béta	IL-lb	-77 %	-32%	-70%
Interleukine 7	IL-7	- 88 %	-	ns
Interleukin 1 receptor, type II	IL-1R2	-43 %	-26%	-
Monocyte chemoattractant protein 1	MCP-1	-43 %	-	ns
Tumor necrosis factor alpha	TNFa	-42%	-30%	-37 %

[0196] Tableau 4 : Modulation de la sécrétion des cytokines d’intérêt après traitement par différents extraits de rose

[0197] *extrait aqueux de fruits de rose décrit dans le paragraphe matériels et méthodes

[0198] ns : non significatif

[0199] Ces résultats montrent que l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention inhibe des médiateurs de l’inflammation de façon encore plus efficace que les autres extraits de fleurs ou de bourgeons de rose, et ce à des teneurs en matière sèche inférieures.

[0200] De par ses effets sur l’inhibition de nombreux médiateurs de l’inflammation notamment de cytokines, de récepteurs de cytokines, l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention est avantageux pour une utilisation destinée à prévenir et/ou diminuer les effets de la micro-inflammation chronique.

[0201 ] Exemple 3 : Effet protecteur de l’extrait aqueux de fruits de rose sur le système nerveux cutané

[0202] L’effet neuroprotecteur cutané de l’extrait aqueux de fruits de rose sur un modèle de coculture cellulaire de kératinocytes et de neurones sensitifs humain a été étudié.

[0203] 3.1 Modèle de coculture de kératinocytes et de neurones sensitifs humains

[0204] Les neurones sensitifs sont dérivés de cellules hiPS (human induced Pluripotent Stem cells) elles-mêmes obtenues à partir de fibroblastes humains (Badja et al., Stem Cells Translational Medicine 2014). Les hiPS ont été ensemencées en plaques 6 puits coatées par une fine couche de Matrigel® (Corning) à raison de 250 000 cellules par puits dans un milieu de différenciation. Le milieu de différenciation est constitué de DMEM-L12 (Panbiotech) supplémenté par 10% de Knockout Serum Replacement (Life technologies), O.lpM d’acide retinoïque (Sigma), Ipg/mL d’EPO (Erythropoïétine ; Peprotech), un cocktail d’inhibiteurs des voies de différenciation centrales et 1% d’antibiotiques PS (Penicilin-Streptomycin ; Panbiotech). Les cellules ont été maintenues en culture à 37°C et 5% de CO2. Le milieu de culture a été changé tous les 2 jours.

[0205] A ce stade, les cellules ont été dissociées à l’aide de l’accutase (Sigma Aldrich) pendant 10 minutes à 37°C. La réaction a été stoppée par ajout de milieu de culture. La suspension cellulaire a été centrifugée 5 minutes à 1200rpm. La viabilité cellulaire a été établie par comptage cellulaire au bleu de trypan et les cellules ont été ensemencées en plaques 96 puits coatées par une fine couche de Matrigel® à raison de 20 000 cellules par puits en milieu de différenciation pendant 2 jours.

[0206] Après 9 jours de culture, le milieu a été changé par du milieu permettant la maturation des neurones sensitifs humains. Ce milieu est composé de DMEM-E12 supplémenté par 1% de N2 (Life technologies), 1% de PS, lOng/mL de NGL (Nerve Growth Lactor ; Sigma Aldrich), lOng/mL de BDNL (Brain-Derived Neurotrophic Lactor ; PanBiotech), lOng/mL de NT3 (NeuroTrophin-3 ;PanBiotech) et lOng/mL de GDNL (Glial Derived Neurotrophic Lactor ; PanBiotech).

[0207] Les kératinocytes issus d’un donneur adulte (Lonza) ont été préalablement amplifiés, en milieu de croissance pour kératinocytes (Lonza), sur un cycle avant d’être dissociés par trypsination et congelés.

[0208] Ces kératinocytes ont été décongelés et amplifiés à nouveau sur un cycle en milieu de croissance pour kératinocytes.

[0209] Après 13 jours de culture des neurones sensitifs humains, les kératinocytes ont été dissociés par trypsination. La viabilité cellulaire a été établie par comptage cellulaire et les kératinocytes ont été ensemencés au-dessus des neurones à raison de 30 000 cellules par puits dans un milieu de culture constitué de 2/3 de milieu de maturation pour les neurones sensitifs sans facteurs de croissance et 1/3 de milieu de croissance pour kératinocytes.

[0210] 3.2 Effet de l’extrait de fruits de rose sur un coculture de neurones sensitifs et kératinocytes humains en condition basale (sans stress à la capsaicine)

[0211] Une coculture de neurones sensitifs humains et de kératinocytes humains a été réalisée selon le protocole décrit à l’exemple 3.1.

[0212] Après 18 jours de culture, le milieu de culture a été changé par un milieu contrôle contenant une molécule de référence connue pour son effet neuro-protecteur, la βendorphine (Bachem) ou l’extrait de fruits de rose selon l’invention.

[0213] Les conditions suivantes ont été réalisées :

[0214] · Milieu contrôle,

[0215] · Milieu contrôle + β -endorphine à 1 μΜ (référence)

[0216] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.005%.

[0217] Après 48 heures, les surnageants de culture ont été prélevés et stockés à -80°C. Les cellules ont été fixées à l’aide d’une solution de PFA 4% (Sigma Aldrich), pendant 20 minutes à température ambiante. Les cellules ont ensuite été lavées 2 fois en PBS (PanBiotech) puis perméabilisées et les sites non spécifiques ont été bloqués par une solution de PBS contenant 0,1% de saponine (Sigma Aldrich), 0,1% de BSA (Bovin Serum Albumin ; PanBiotech) et 1% de sérum de chèvre (PanBiotech) pendant 15 minutes à température ambiante. Les cellules ont été incubées en présence d’un anticorps monoclonal de souris anti β-tubuline (Sigma Aldrich) au l/800ième et d’un anticorps polyclonal de lapin anti-MOR (Merck) dans du PBS contenant 1% de sérum de chèvre (SC) et 0,1% de saponine sur la nuit à 4°C. L’anticorps anti β-tubuline marque les corps cellulaires et les prolongements des neurones sensitifs. Ces anticorps ont été révélés par un Alexa Fluor 488 chèvre anti-souris (Molecular Probe) IgG au l/800ième et un Alexa Fluor 568 chèvre anti-lapin (Molecular Probe) IgG au l/800ième dans une solution de PBS contenant 1% de SC et 0,1% de saponine pendant 1 heure à température ambiante et à l’abri de la lumière. Les noyaux ont été marqués par une solution de Hoechst (Sigma), un marqueur fluorescent nucléaire, à Ipg/mL dans la même solution que l’anticorps secondaire.

[0218] Pour chaque condition, la culture a été reproduite 6 fois.

[0219] Par puits de culture, 20 photographies ont été prises avec le microscope automatique au grossissement x20 et une numération des corps cellulaires des neurones sensitifs a été effectuée, une mesure de la longueur des prolongements de ces neurones ainsi que l’aire d’expression des récepteurs μ aux opiacés (MOR). L’ensemble des paramètres ont été comparés à la condition contrôle.

[0220] Les résultats présentés à la Figure IA (effet en l’absence de stress à la capsaicine) montrent que le traitement de la coculture par la β-endorphine seule à ΙμΜ entraîne une augmentation significative de la survie des neurones sensitifs humains (+34% et p<0.05). L’extrait de fruits de rose à 0.005% entraîne également une augmentation de la survie des neurones sensitifs humains avec un effet similaire à celui obtenu en présence de β-endorphine (+39% et p<0.05).

[0221] Par ailleurs, les résultats présentés à la Figure IB montrent que le traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ permet d’augmenter significativement la longueur des prolongements des neurones sensitifs humains (+40% et p<0.05). Le traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose à 0.005% entraîne également une augmentation significative de la longueur des prolongements des neurones sensitifs humains (+52% et p<0.01). Cet effet est plus important que celui observé en présence de β-endorphine.

[0222] Enfin, les résultats présentés à la Ligure IC montrent que le traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ augmente le taux d’expression des récepteurs μ aux opiacés (MOR) par les neurones sensitifs humains (+39%). Cette augmentation n’est cependant pas significative. Le traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose à 0.005% entraîne également une augmentation du taux d’expression des MOR par les neurones sensitifs humains (+67% et p<0.05). Cet effet est plus important que celui observé en présence de β-endorphine et il est significatif.

[0223] En conditions basales, l’extrait de fruits de rose produit des effets bénéfiques sur les neurones sensitifs humains, notamment en favorisant leur survie, en stimulant la longueur des prolongements neuronaux et l’expression des récepteurs à la beta endorphine (MOR).

[0224] 3.3 Effet de l’extrait de fruits de rose sur une coculture de neurones sensitifs et kératinocytes humains en condition de stress à la capsaïcine

[0225] Une coculture de neurones sensitifs humains et de kératinocytes humains a été réalisée selon le protocole décrit à l’exemple 3.1.

[0226] Après 18 jours de culture, le milieu de culture a été changé par un milieu contrôle contenant une molécule de référence la β-endorphine (Bachem) ou l’extrait de fruits de rose selon l’invention.

[0227] Les conditions suivantes ont été réalisées :

[0228] · Milieu contrôle,

[0229] · Milieu contrôle + β-endorphine à 1 μΜ (référence)

[0230] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.005%.

[0231] Après 24 heures d’incubation, la molécule responsable du stress irritant, la capsaïcine (Sigma Aldrich), a été ajoutée.

[0232] Les conditions suivantes ont été réalisées :

[0233] · Milieu contrôle,

[0234] · Milieu contrôle + β-endorphine à 1 μΜ (référence),

[0235] · Milieu contrôle + capsaïcine ΙμΜ (stress irritant),

[0236] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.005%

[0237] · Milieu contrôle + β-endorphine à 1 μΜ + capsaïcine ΙμΜ,

[0238] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.005% + capsaïcine ΙμΜ.

[0239] Après 24 heures de stimulation par la capsaïcine (stress irritant), les surnageants de culture ont été prélevés et stockés à -80°C. Les cellules ont été fixées à l’aide d’une solution de PFA 4%, pendant 20 minutes à température ambiante. Les cellules ont ensuite été lavées 2 fois en PB S puis perméabilisées et les sites non spécifiques ont été bloqués par une solution de PBS contenant 0,1% de saponine, 0,1% de BSA et 1% de sérum de chèvre pendant 15 minutes à température ambiante. Les cellules ont été incubées en présence d’un anticorps monoclonal de souris anti β-tubuline (Sigma Aldrich) au l/800ième et d’un anticorps polyclonal de lapin anti-MOR (Merck) dans du PBS contenant 1% de SC et 0,1% de saponine sur la nuit à 4°C. L’anticorps anti βtubuline marque les corps cellulaires et les prolongements des neurones sensitifs. Ces anticorps ont été révélés par un Alexa Fluor 488 chèvre anti-souris (Molecular Probe) IgG au l/800ième et un Alexa Fluor 568 chèvre anti-lapin (Molecular Probe) IgG au l/800ième dans une solution de PBS contenant 1% de SC et 0,1% de saponine pendant 1 heure à température ambiante et à l’abri de la lumière. Les noyaux ont été marqués par une solution de Hoechst (Sigma), un marqueur fluorescent nucléaire, à Ipg/mL dans la même solution que l’anticorps secondaire.

[0240] Pour chaque condition, la culture a été reproduite 6 fois.

[0241] Par puits de culture, 20 photographies ont été prises avec le microscope automatique au grossissement x20 et une numération des corps cellulaires des neurones sensitifs a été effectuée, une mesure de la longueur des prolongements de ces neurones ainsi que l’aire d’expression des MOR. L’ensemble des paramètres ont été comparés à la condition contrôle.

[0242] Comme le montrent les résultats présentés à la Figure 2A (effet en condition de stress à la capsaïsine), le traitement de la coculture par la capsaïcine, ou par l’extrait de fruits de rose à 0.005% et la capsaïcine, n’a pas d’effet cytotoxique sur les neurones sensitifs humains. Le traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ en condition de stress à la capsaïcine à ΙμΜ entraîne une légère augmentation de la survie des neurones sensitifs humains (+23% par rapport au témoin capsaïcine).

[0243] Les résultats présentés à la Figure 2B montrent que le traitement de la coculture par la capsaïcine à ΙμΜ entraîne une diminution de la longueur des prolongements (-31% par rapport au témoin négatif). Le traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ avant et pendant le stress capsaïcine permet de restaurer une longueur des prolongements similaire à celle de la condition contrôle non traité. Enfin, un traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose à 0.005% avant et pendant le stress capsaïcine permet non seulement de protéger les prolongements de l’action de la capsaïcine mais entraîne même une augmentation significative de la longueur des prolongements (+157% par rapport à la condition capsaïcine ; p<0.01 et +107% par rapport au témoin non traité).

[0244] Enfin, les résultats présentés à la Figure 2C indiquent que le traitement de la coculture par la capsaïcine à ΙμΜ entraîne une diminution de l’expression des ré cepteurs μ aux opiacés MOR (-76% par rapport au témoin négatif). Le traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ avant et pendant le stress capsaïcine permet de restaurer une longueur des prolongements similaire à celle de la condition contrôle non traité. Enfin, un traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose à 0.005% avant et pendant le stress capsaïcine permet non seulement de restaurer le niveau d’expression des MOR mais entraîne même une augmentation de cette expression (+139% par rapport à la condition capsaïcine et +63% par rapport au témoin non traité).

[0245] Ainsi, l’extrait de fruits de rose selon l’invention protège des effet délétères du stress à la capsaïsine (diminution des prolongements neuronaux et expression des récepteurs à la beta endorphine (MOR)).

[0246] 3.4 Effet de l’extrait de fruits de rose sur l’activité électrique d’une coculture de neurones sensitifs et kératinocytes humains en condition de stress à la capsaïcine

[0247] Une coculture de neurones sensitifs humains et de kératinocytes humains a été réalisée selon le protocole décrit à l’exemple 3.1.

[0248] Après 18 jours de culture, le milieu de culture a été changé par un milieu contrôle contenant une molécule de référence la β-endorphine (Bachem) ou l’extrait de fruits de rose selon l’invention.

[0249] Les conditions suivantes ont été réalisées :

[0250] · Milieu contrôle,

[0251] · Milieu contrôle + β-endorphine à 1 μΜ (référence)

[0252] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.01 % ou 0.005% ou 0.0025%.

[0253] Après 24 heures d’incubation en présence de β-endorphine ou de l’extrait de fruits de rose, les cellules ont été incubées avec du milieu de culture contenant une sonde fluorescente Eluo-4 (Molecular Probes) capable de révéler la présence de calcium. Les cellules ont ensuite été incubées pendant 30 min à 37°C. A la fin de cette incubation, les cellules ont été lavées 3 fois en PBS, puis les cellules ont été incubées avec du milieu DMEM sans rouge de phénol (PanBiotech) en présence ou non de la β endorphine. Immédiatement après, les cellules ont été placées sous un microscope inversé et les cellules ont été observées en épi-fluorescence. Les cellules ont été observées durant 300 secondes, une photographie a été prise environ toutes les 333ms. Cinq secondes après le démarrage de l’enregistrement, les neurones ont été stimulés par de la capsaïcine à 10 μΜ.

[0254] Les résultats présentés à la Ligure 3 montrent que l’activation des cellules par la capsaïcine à ΙΟμΜ entraîne bien une large et significative augmentation de la mobilisation du calcium cytoplasmique. En revanche, le traitement de la coculture par la βendorphine à 5μΜ avant et pendant l’activation par la capsaïcine permet de diminuer la mobilisation de calcium cytoplasmique par rapport au témoin capsaïcine.

[0255] Le traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose aux trois concentrations évaluées (0.01%, 0.005% et 0.0025%) avant et pendant l’activation par la capsaïcine entraîne une diminution significative de la mobilisation du calcium cytoplasmique (inhibition respectivement de 33% ; pcO.001 ; 32% ; pcO.001 et 36% ; pcO.001).

[0256] Ainsi, l’extrait de fruits de rose selon l’invention limite la réactivité des neurones sensitifs à la capsaïcine.

[0257] 3.5 Effet de l’extrait de fruits de rose la libération de neuromédiateurs par une coculture de neurones sensitifs et de kératinocytes humains

[0258] Une coculture de neurones sensitifs humains et de kératinocytes humains a été réalisée selon le protocole décrit à l’exemple 3.1.

[0259] Après 18 jours de culture, le milieu de culture a été changé par un milieu contrôle contenant une molécule de référence la 3-endorphine (Bachem) ou l’extrait de fruits de rose selon l’invention.

[0260] Les conditions suivantes ont été réalisées :

[0261] · Milieu contrôle

[0262] · Milieu contrôle + β-endorphine à 1 μΜ (référence)

[0263] · Milieu contrôle + Extrait de fruits de rose à 0.01% ou 0.005% ou 0.0025%

[0264] Après 24 heures d’incubation, la molécule responsable du stress irritant, la capsaïcine (Sigma Aldrich), a été ajoutée.

[0265] Comme le montre la Figure 4A, le traitement de la coculture par la β-endorphine seule à ΙμΜ (soit 0.00035%) n’entraîne pas de modulation significative de la libération de neuropeptide CGRP par les neurones sensitifs humains. Un traitement de la coculture par l’extrait de fruits de rose seul aux trois concentrations évaluées (0.01%, 0.005% et 0.0025%) n’entraîne pas non plus de modulation de la libération de neuropeptide CGRP.

[0266] Par ailleurs, les résultats présentés à la Figure 4B montrent que l’activation de la coculture par la capsaïcine augmente significativement la libération de neuropeptide CGRP (plus 39% ; pcO.001). Le pré-traitement de la coculture par la β-endorphine à ΙμΜ avant et pendant l’activation par la capsaïcine entraîne une diminution significative de la libération de neuropeptide CGRP par les neurones sensitifs humains ( 34% ; pcO.001 par rapport au témoin capsaïcine).

[0267] Un traitement par l’extrait de fruits de rose selon l’invention aux trois concentrations évaluées (0.01%, 0.005% et 0.0025%) avant et pendant l’activation par la capsaïcine entraîne une diminution significative de la quantité de neuropeptide CGRP libérée (inhibition respectivement de 37% ; pcO.001 ; 36% ; pcO.001 et 41% ; pcO.001).

[0268] L’extrait de fruits de rose selon l’invention limite donc la production du neuropeptide pro-inflammatoire CGRP stimulée par le stress à la capsaïsine.

[0269] En conclusion, ces expérimentations montrent que l’extrait de fruits de rose selon l’invention a un effet protecteur sur les neurones sensitifs humains au niveau de la peau vis-à-vis des effets d’un stress irritant provoqué par la capsaïcine. Notamment il permet de conserver et même d’améliorer la pousse neuritique des neurones sensitifs humains au niveau de la peau, il permet également d’augmenter le taux d’expression des récepteurs μ aux opiacés (MOR) et de diminuer la libération de neuropeptides CGRP induite par un stress irritant. Ainsi, l’extrait de fruits de rose selon l’invention possède un effet neuro-protecteur cutané et/ou neuro-apaisant et peut prévenir et ou diminuer les signes du vieillissement cutané lié à l’inflammaging et/ou au neuroinflammaging.

Exemple 4 : Formulations cosmétiques

[0270] 4,1 Composition protectrice sous la forme d’une émulsion

[0271] Phase aqueuse :

[0272] Eau déminéralisée qsp 100,0%

[0273] Glycols 20,0%

[0274] Conservateurs 0,6%

[0275] Chélatant 0,04%

[0276] Carbomer (Carbopol® 981) 0,3%

[0277] Sodium polyacrylate (Covacryl® MV60) 0,2%

[0278] Sodium Hydroxide 0,15%

[0279] Extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention* 3,0%

[0280] Phase grasse :

[0281] Huile végétale, esters, silicones 16%

[0282] Anti-oxydant 0,2%

[0283] Concentré de parfum 0,4%

[0284] Steareth-2 0,8%

[0285] Steareth-21 1,5%

[0286] * tel que décrit dans le paragraphe matériel et méthodes

[0287] La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :

[0288] - les gélifiants sont dispersés dans la phase aqueuse (hors extrait aqueux de fruits de rose et hydroxyde de sodium) qui est portée à 70°C ;

[0289] - la phase grasse (hors concentré de parfum, antioxydant) est chauffée à 70°C ;

[0290] - l’émulsion est réalisée par introduction de la phase grasse dans la phase aqueuse sous forte agitation ;

[0291] - les gélifiants sont neutralisés par ajout d’hydroxyde de sodium et l’émulsion est refroidie sous agitation modérée avec introduction du concentré de parfum, de l’antioxydant et de l’extrait aqueux de fruits de rose à basse température.

[0292] Appliquée sur la peau, en particulier du visage, cette composition confère un effet apaisant et rafraîchissant, elle permet en outre de réduire les signes visibles d’irritation cutanée.

[0293] 4,2 Composition sous la forme d’une dispersion solide de corps gras, de forme sphérique ousphéroïde

[0294] Phase aqueuse

[0295] Eau déminéralisée qsp 100%

[0296] Cryoextrait de rose* 3.00%

[0297] Extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention* 3.00%

[0298] Phenoxyethanol 0.42%

[0299] Gomme de xanthane 0.36%

[0300] Phase grasse

[0301] Cl0-18 triglycerides 38.84%

[0302] Satin Oil* 1%

[0303] Anti Oxydants 0.1%

[0304] *tels que décrits dans le paragraphe Matériel et méthodes ci-dessus.

[0305] La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :

[0306] - on chauffe la cire (C10-18 triglycérides = Lipocire de Gatefossé) au-dessus de son point de fusion (quelques degrés) avec l’antioxydant et l’extrait huileux de rose Satin oil ;

[0307] - la phase grasse fondue est versée sous agitation dans de l’eau préalablement chauffée à la même température que la phase grasse ;

[0308] - .l’ensemble est maintenu sous agitation par un système rotatif pendant quelques minutes jusqu’à obtenir la taille de goutelettes souhaitée ;

[0309] - la dispersion obtenue est rapidement refroidie par addition d’eau glycolée préalablement refroidie (environ -4°C) pour solidifier les sphéroïdes lipidiques ;

[0310] - .l’agitation est arrêtée lorsque les sphéroïdes sont solidifiés puis sont récupérés à la surface ou filtrés ;

[0311] - on prépare la phase aqueuse en mélangeant l’eau, la gomme de xanthane, le conservateur et le cryoextrait de rose, et l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention ;

[0312] - on récupère les sphéroïdes à la surface et on les incorpore dans le gel de xanthane contenant le cryoextrait de rose et l’extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention.

[0313] Appliquée sur la peau, cette composition confère un effet apaisant, elle donne notamment l’impression d’une peau apaisée,moins irritée..

[0314] 4,3 : Composition sous la forme d’un gel aqueux pour le visage

[0315] Extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention * 95.00%

[0316] Conservateurs 0,50%

[0317] Sucre 0,20%

[0318] Carbomer 0,70%

[0319] Eau purifiée Qsp 100%

[0320] EDTA tetrasodique poudre 0,20%

[0321] Sodium hydroxide 0,17%

[0322] * tel que décrit dans le paragraphe Matériel et méthodes

[0323] L’extrait de fruits de rose selon l’invention et les conservateurs sont mélangés et homogénéisés à température ambiante sous agitation. Les sucres sont ajoutés sous agitation, puis le carbomer, puis l’eau et l’EDTA sous agitation. Le gel aqueux est ensuite neutralisé avec l’ajout d’hydroxyde de sodium sous agitation jusqu’à l’obtention d’un gel homogène.

[0324] Appliqué sur la peau du visage jour après jour, ce gel aqueux permet de diminuer et/ ou prévenir les signes du vieillissement cutané liés à la micro-inflammation chronique. La peau est visiblement moins ridée.

[0325] 4,4 Composition sous la forme d’un baume à lèvres

[0326] Silice 10%

[0327] Poudre de nylon 7%

[0328] Cire de polyéthylène 17%

[0329] Glycérine 14%

[0330] Extrait aqueux de fruits de rose selon l’invention 5%

[0331] Myristate d’isopropyleqs qsl00%

[0332] Appliqué sur les lèvres, ce baume confère un effet apaisant immédiat et protège les lèvres contre les agressions extérieures notamment contre les variations climatiques et contre les UV.

Claims (1)

1. Revendications [Revendication 1] Utilisation cosmétique d’au moins un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu'agent neuro-protecteur des matières kératiniques, en particulier de la peau et/ou des lèvres. [Revendication 2] Utilisation cosmétique selon la revendication 1, pour prévenir et/ou diminuer les réactions d'origine non pathologiques inesthétiques et/ou d'inconfort de la peau induites par au moins une condition choisie parmi la pollution atmosphérique, le stress, les chocs thermiques, et/ou les frottements. [Revendication 3] Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, est présent dans la composition en une teneur allant de 0,1% à 95%, en particulier de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10% et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition. [Revendication 4] Procédé cosmétique non thérapeutique pour prévenir et/ou diminuer les réactions d'origine non pathologiques inesthétiques et/ou d'inconfort de la peau et/ou des lèvres induites par au moins une condition choisie parmi la pollution atmosphérique, le stress, les chocs thermiques, et/ou les frottements., caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau du visage et/ou du corps et/ou sur les lèvres, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®. [Revendication 5] Procédé cosmétique selon la revendication 4, caractérisé en ce que l’extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, est présent dans la composition en une teneur allant de 0,1% à 95%, en particulier de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10% et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition. [Revendication 6] Procédé cosmétique selon l’une quelconque des revendications 4 ou 5, caractérisé en ce que la composition est appliquée sur une peau et/ou des lèvres fragile(s), sensible(s), et/ou stressée(s). [Revendication 7] Procédé cosmétique selon l’une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que la composition comprend en outre au moins un actif cosmétique choisi parmi un agent antioxydant, un agent apaisant

   distinct de l’extrait aqueux de fruits de rose, un agent émollient, un agent hydratant, une vitamine, un agent éclaircissant, un agent liftant, un agent tenseur, un agent repulpant, un agent anti-âge, un agent antipollution, un agent anti-UV, un agent revitalisant, un agent régénérant, un agent relipidant, et leurs mélanges [Revendication 8] Procédé cosmétique selon l’une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisé en ce que la composition cosmétique est sous la forme d’une solution, d’une émulsion, d’un sérum, d’un gel notamment pour la peau, d’un baume, d’un gloss ou d’un stick notamment pour les lèvres. [Revendication 9] Extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, pour une utilisation pour apaiser la peau et/ ou les lèvres et/ou prévenir et/ou diminuer le phénomène de microinflammation chronique de la peau et/ou des lèvres, notamment induit par au moins une condition choisie parmi les rayonnements UV et les molécules allergènes irritantes. [Revendication 10] Extrait aqueux de fruits de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, pour une utilisation selon la revendication 9 chez des sujets présentant une peau et/ou des lèvres imtée(s).

   1/5