FR3050641A1 - Composition utile pour la preparation d’un ovule - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne une composition comprenant un mélange de cellules de levure Saccharomyces boulardii et d'une cire.
Description
COMPOSITION UTILE POUR LA PREPARATION D’UN OVULE
Domaine de l'invention
La présente invention concerne une composition utile pour la préparation d’un ovule, ainsi qu'un dispositif médical, un médicament, ou un produit cosmétique la comprenant.
Arrière-plan technique
Les infections vulvo-vaginales sont des infections génitales basses touchant la vulve et/ou le vagin. Elles se manifestent par une irritation, des démangeaisons, des douleurs et des pertes vaginales anormales. Ces infections sont très courantes. Il s’agit en effet de la cause de consultation médicale la plus fréquente chez les femmes.
Les infections vulvo-vaginales sont principalement d’origine bactérienne ou mycosique, les infections parasitaires, principalement à Trichomonas, ne représentant qu'environ 10% de ces infections.
Les infections vulvo-vaginales bactériennes représentent environ 50 à 60 % de toutes les infections de la vulve et du vagin. Les germes les plus souvent rencontrés dans ces infections sont Gardnerella vaginalis, Gardnerella mobiluncus. Chlamydia frachomafis, Mycoplasma hominis, Pepfosirepfococcus species et Ureaplasma urealyficum.
Environ 70 % des femmes présenfenf une infecfion vulvo-vaginale mycosique durant leur vie. Par ailleurs, l'infection mycosique se retrouve chez 40% des femmes porteuses d'infection vulvo-vaginale bactérienne. Les infections vulvo-vaginales mycosiques sont essentiellement des candidoses.
Les infections bactériennes et parasitaires sont principalement traitées à l’aide d'antibiotiques/antiparasitaires de la famille des nifroimidazoles, fel que le métronidazole, tandis que les infections mycosiques sont habituellement traitées à l'aide d'antifongiques de la famille desimidazolés, feisque l’éconazole, le miconazole ou le fluconazole.
Cependant malgré la prise en charge fhérapeufique, environ 5% des femmes présenfenf une infecfion vulvo-vaginale récurrenfe, définie par plus de 4 infectons par an. En oufre, la moifié des femmes fraifées pour une infecfion vulvo-vaginale bacférienne présenfe une récidive dans les 12 mois.
Les traitements des infections vulvo-voginales proposés ne sont donc pas pleinement satisfaisants et il reste nécessaire des trouver des traitements alternatifs, permettant notamment de limiter les récidives. Résumé de l'invention
La présente invention découle de la mise en évidence inattendue, par les inventeurs, qu'il était possible de formuler des ovules à partir d’un mélange de cellules de levure Saccharomyces boulardii lyophilisée et de cire et que ces ovules étaient capables de libérer des cellules de levure S. boulardii vivantes au niveau de la muqueuse vaginale, ce qui permet de lutter contre les infections vulvo-vaginales, notamment par la sécrétion d'acide caprique. De plus, les traitements antibiotiques des infections vulvo-vaginales entraînent généralement un appauvrissement de la flore vaginale protectrice, ce qui favorise les récidives et les réinfections. L'utilisation d'ovules selon l'invention dans le cadre d'une antibiothérapie permet donc de limiter les risques de récidive ou de réinfection qui serait lié à un déséquilibre de la flore saprophyte.
Ainsi, la présente invention concerne une composition comprenant, ou consistant en, un mélange de cellules de levure Saccharomyces boulardii et d’une cire.
La présente invention concerne également un dispositif médical, un médicament ou un produit cosmétique comprenant, ou consistant en, une composition telle que définie ci-dessus.
Dans un mode de réalisation particulier, l’invention concerne le dispositif médical ou le médicament tel que défini ci-dessus, pour son utilisation à titre d’ovule, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des infections vulvo-vaginales ou pour son utilisation dans le rééquilibrage de la flore vaginale, notamment après traitement par un anti-infectieux local ou systémique, et/ou pour contribuer à consolider la guérison après la prise d’un traitement anti-infectieux local vaginal, et/ou pour prévenir les récidives d’infections vaginales.
La présente invention concerne également l’utilisation d’une composition telle que définie ci-dessus pour la préparation d’un ovule, d’un médicament ou d’un dispositif médical destiné à la prévention ou au traitement des infections vulvo-vaginales, ou destiné au rééquilibrage de la flore vaginale, notamment après traitement par un anti-infectieux local ou systémique, et/ou à contribuer à consolider Ια guérison après Ια prise d’un traitement anti-infectieux local vaginal, et/ou à prévenir les récidives d’infections vaginales.
La présente invention concerne également l’utilisation cosmétique d’une composition telle que définie ci-dessus ou d’un produit cosmétique tel que défini ci-dessus pour l’hygiène infime ou la toilette intime d’un individu.
La présente invention concerne également une méthode de prévention ou de traitement d’une infection vulvo-vaginale chez un individu, ainsi qu’une méthode de rééquilibrage de la flore vaginale, notamment après traitement par un anti-infectieux local ou systémique, et/ou pour contribuer à consolider la guérison après la prise d’un traitement anti-infectieux local vaginal, et/ou pour prévenir les récidives d’infections vaginales chez un individu, dans laquelle on administre à l’individu une composition telle que définie ci-dessus, notamment en une quantité prophylactiquement ou thérapeutiquement efficace.
La présente invention concerne également une méthode d’hygiène intime ou de toilette intime d’un individu, dans laquelle on administre à l’individu une composition telle que définie ci-dessus ou un produit cosmétique tel que défini ci-dessus, nofamment en une quantité cosmétiquement efficace.
La présenfe invention concerne également un procédé d’obtention d’une composition telle que définie ci-dessus, comprenant les étapes suivantes : - si nécessaire on chauffe la cire jusqu’à la rendre liquide ; - on maintient la cire à l’état liquide à une température inférieure à 42 C et on ajoute des cellules de levure Saccharomyces boulardii sous agitation ; - on laisse refroidir le mélange sous agitation en le maintenant liquide jusqu’à une température inférieure à 36°C : - on coule le mélange dans un moule ; - on démoule le mélange après solidification.
Description détaillée de l’invention A titre préliminaire, on rappellera que le terme «comprenant» signifie «incluant», «contenant» ou «englobant», c’est-à-dire que lorsqu’un objet «comprend» un élément ou plusieurs éléments, d’autres éléments que ceux mentionnés peuvent également être compris dans l’objet. A confrario, l’expression «consistant en» signifie «constitué de», c’est-à-dire que lorsqu’un objet «consiste en» un élément ou plusieurs éléments, l’objet ne peut pas comprendre d’autres éléments que ceux mentionnés.
Saccharomyces boulardii
Saccharomyces boulardii, abréviée S. boulardii, est une levure bien connue de l’homme du métier. Elle est notamment décrite dans Hennequin étal. (2001) J. Clin. Microbiol. 39:551-559. Comme on l’entend ici, les nomenclatures “Saccharomyces boulardii" et “Saccharomyces cerevisiae var. boulardii" (abréviée S. cerevisiae var. boulardii) sont considérées équivalentes.
De préférence, les cellules de levure Saccharamyces boulardii selon l’invention sont obtenues à partir des praduits pharmaceutiques de marque Bioflor®, Bioflora®, Cadex®, Ecanarm®, Entier®, Enterol®, Florastor®, Floratil®, Florestoi®, Inteflora®, Perenterol®, Perenteryl®, Precosa®, Reflor®, Ultra-Levura® ou Ultra-Levure®. Les cellules de levure Saccharamyces boulardii selon l’invention peuvent également être identiques au dépôt réalisé auprès de ΓAmerican Type Culture Collection (ATCC, USA) saus la référence 74012, auprès de la Collection Nationale de Culture et de Micraarganismes (CNCM, Institut Pasteur, France) sous la référence 1-745 ou auprès du Centraalbureau voor Schimmelcultures (CBS, The Netherlands) sous la référence Flansen CBS 5926.
De préférence les cellules de levure Saccharomyces boulardii selon l’invention sont mélangées avec la cire sous forme de poudre, notamment lyophilisées.
Avantageusement, la viabilité ou la vitalité de cellules de levure Saccharamyces boulardii issues de lyophilisats est supérieure à celle pouvant être abtenue avec d’autres méthodes de conservation des cellules de levure, telles que le séchage par exemple.
Camme an l’entend ici, la “lyophilisation” est un procédé de conservation dans lequel des cellules de levure Saccharomyces boulardii vivantes sont congelées puis sont soumises à une sublimation de l’eau congelée qu’elles contiennent pour donner un lyophilisât sous forme d’une poudre de levure sèche contenant de préférence moins de 2% d’eau ef plus préférablement moins de 1% d’eau. De préférence, les cellules de levure Saccharamyces boulardii lyophilisées sont obtenues à partir de cellules concentrées. De nombreuses méthodes de lyophilisation bien connues de l’homme du métier peuvent être utilisées pour produire des cellules de levure Saccharomyces boulardii lyophilisées selon l’invention. Toutefois, on préfère que les cellules de levure Saccharomyces boulardii selon l'invention soient lyophilisées à l’aide du procédé de lyophilisation suivant : on cultive les cellules de levure Saccharomyces boulardii dans un milieu de culture liquide jusqu'à ce que les cellules atteignent une phase stationnaire ; on concentre les cellules de levure Saccharamyces boulardii et on congèle le concentré, éventuellement en présence d'un cryoprotectant, tel que le lactose ; on lyophilise le concentré.
Les cellules de levure Saccharamyces baulardii lyophilisées sont sous forme d'une poudre.
De préférence, Saccharamyces boulardii est le seul probiotique compris dans le mélange, la composition, le médicament, le dispositif médical ou le produit cosmétique selon l'invention. En d'autres termes, aucun autre probiotique, tel que des bactéries du genre Lacfabacillus, notamment L rhamnasus, L fermenfum, L chspafus, L jensinii ou L. gasseri, du genre Enferacoccus, notamment Enferacaccus faecium, ou des levures du genre Saccharamyces, notamment S. cerevisiae, n'est présent dans le mélange, la composition, le médicament, le dispositif médical ou le produit cosmétique. Comme cela a été défini par l’Organisation des Nations Unies pour l'alimentation et l’agriculture (FAO), un « probiotique» désigne un micro-organisme vivant (ou revivifiable), tel qu’une bactérie ou une levure, qui, lorsqu’il est administré en une quantité adéquate, procure un effet bénéfique sur la santé de l’individu auquel il est administré.
De préférence, le mélange selon l'invention comprend de 1,5 x 10^ à 2,5 x 10'°, notamment de 2 x 10^ à 2 x 10'°, Unités Formant Colonies (UFC) de cellules de levure Saccharamyces boulardii.
De préférence, le mélange selon l'invention comprend, ou est constitué de, 15 à 35% (m/m) de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre, notamment lyophilisée.
Cire
Comme on l'entend ici, le terme « cire » désigne une composition à base d’un ou plusieurs esters d'un alcool, notamment le glycérol, et d’acides gras, qui est solide à température ambiante (18-23°C).
De préférence, Ια cire selon l’invention est à base de « hard fat», au sens de la Pharmacopée Européenne (Ph. Eur.], à savoir un mélange de triglycérides, de diglycérides et de monoglycérides, qui peuvent notamment être obtenus soit par l'estérification du glycérol par des acides gras d’origine naturelle, soit par transestérification de graisses naturelles.
Les acides gras selon l’invention sont saturés ou insaturés, de préférence saturés. Par ailleurs, les acides gras selon l’invention comprennent de préférence au moins 8 atomes de carbone (C8) ou au moins 12 atomes de carbone (Cl2). De préférence également, les acides gras selon l’invention comprennent au plus 18 atomes de carbone (Cl8).
De préférence, la cire selon l’invention comprend des, ou est à base de, triglycérides, notamment saturés. En particulier, l’invention comprend des, ou est à base de, triglycérides en C8-C18 ou en C12-C18 saturés.
Par ailleurs, la cire selon l’invention peut comprendre des additifs, tels qu’au moins un lubrifiant ou au moins un émulsifiant, notamment sélectionnés dans le groupe constitué du monoricinoléate de glycérol, d’un éther monocétylique de polyéthylène glycol, en particulier le Ceteth-20, d’un éther monostéarique de polyéthylène glycol, en particulier le Steareth-20, et de la lécithine.
De préférence, la cire selon l’invention a un point de fusion supérieur à 32°C. De préférence également, la cire selon l’invention a un point de fusion inférieurà 37°C. Plus préférablement, la cire selon l’invention a un point de fusion supérieur à 32°C et inférieur à 37°C.
Comme cela apparaîtra clairement à l’homme du métier, le point de fusion est de préférence mesuré sous une pression normale. Comme on l’entend ici, une pression normale est une pression de 1 bar.
De préférence, la cire selon l’invention est sélectionnée dans le groupe constitué de SUPPOCIRE® NA PASTILLES (Gattefossé), OVUCIRE® 3460 PASTILLES (Gattefossé) et SUPPOCIRE® AML PASTILLES (Gattefossé).
De préférence, la cire selon l’invention a une humidité relative de 20% à 35% avant mélange. Mélange
De préférence, le mélange selon l’invention a un point de fusion supérieur à 32°C. De préférence également, le mélange selon l’invention a un point de fusion inférieur à 37°C. Plus préférablement, le mélange selon l’invention a un point de fusion supérieur à 32°C et inférieur à 37°C.
Comme cela apparaîtra clairement à l’homme du métier, le point de fusion est de préférence mesuré sous une pression normale. Comme on l’entend ici, une pression normale est une pression de 1 bar.
De préférence, le mélange selon l’invention a un temps de liquéfaction inférieur à 10 min. dans une eau à 37°C.
De préférence, le mélange selon l’invention a une résistance à la rupture supérieure à 5,4 kg à une température de 23°C.
De préférence, le mélange selon l’invention comprend, ou est constitué de, 15 à 35% (m/m) de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre, notamment lyophilisée, et de 65 à 85% (m/m) de cire selon l’invention. Plus préférablement le mélange selon l’invention comprend, ou est constitué de, 30% (m/m) de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre, notamment lyophilisée, et de 70% (m/m) de cire selon l’invention.
De préférence, la composition, notamment pharmaceutique, selon l’invention, le dispositif médical selon l’invention, le médicament selon l’invention ou le produit cosmétique selon l’invention comprend, ou consiste en, le mélange en une masse unitaire de 1 g à 5 g, notamment d’environ ou exactement 2 g.
De préférence également, la composition, notamment pharmaceutique, selon l'invention, le dispositif médical selon l’invention, le médicament selon l’invention ou le produit cosmétique selon l’invention, comprend une masse unitaire de 0,15 g à 1,75 g, notamment de 0,3 à 0,7 g, de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre, notamment lyophilisée. Plus préférablement, la composition, notamment pharmaceutique, selon l’invention, le dispositif médical selon l’invention, le médicament selon l’invention ou le produit cosmétique selon l’invention, comprend une masse unitaire de 0,6 g, de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre, notamment lyophilisée.
Applications
La composition selon l’invention peut être une composition pharmaceutique. Dans ce cas, la composition pharmaceutique peut comprendre un ou plusieurs excipients ou véhicules pharmaceutiquement acceptables en plus du mélange.
Les infections vulvo-vaginales selon l’invention sont des infections de la vulve et/ou du vagin. Les infections vulvo-vaginales selon l'invention peuvent être des infections : bactériennes, notamment à Gardnerella vaginalis, Gardnerella mobiluncus.
Chlamydia frachamafis, Mycoplasma haminis, Pepfosfrepfacoccus species et
Ureaplasma urealyficum, mycosiques, notamment à Candida, ou parasitaires, notamment à Trichomonas.
Les anti-infectieux selon l’invention peuvent notamment être : - des antiseptiques ; - des antibiotiques, notamment de la famille des nitroimidazoles, tel que le métrodinazole ; - des antifongiques, notamment de la famille des imidazolés, tels que l’éconazole, le miconazole ou le fluconazole : ou - des antiparasitaires, notamment de la famille des nitroimidazoles, tel que le métrodinazole ;
Comme on l’entend ici, le «rééquilibrage de la flore vaginale» désigne le rétablissement d’une flore vaginale normale ou saine, notamment en termes de diversité et de quantité de micro-organismes vaginaux.
La composition selon l’invention peut être une composition cosmétique. Dans ce cas, la composition cosmétique peut comprendre un ou plusieurs excipients ou véhicules cosmétiquement acceptables en plus du mélange. De même, le produit cosmétique selon l’invention peut comprendre un ou plusieurs excipients ou véhicules cosmétiquement acceptables en plus de la composition selon l’invention.
Comme on l’entend ici, l’hygiène intime ou la toilette intime désigne la toilette de la vulve et/ou du vagin.
De préférence, la composition, notamment pharmaceutique, selon l’invention, le dispositif médical selon l’invention, le médicament selon l’invention ou le produit cosmétique selon l’invention, est administré par la voie vaginale, notamment sous la forme d’un ovule.
Comme on l’entend ici, le terme «ovule» est considéré équivalent à «ovule vaginal » ou « ovule gynécologique ».
De préférence, l’individu selon l’invention est un mammifère, plus préférablement un humain, notamment de sexe féminin.
Exemple
Matériels et méthodes 1.1. Cires
Les différentes cires utilisées pour la formulation des ovules incorporant Saccharomyces boulardii sont décrites dans le Tableau suivant :
1.2. Levure
La levure utilisée est Saccharomyces boulardii sous forme de poudre lyophilisée (Ultra-Levure®, Biocodex, Lot 7316). 1.3. Fabrication des ovules 1. La masse à suppositoire est chauffée à 55°C jusqu'à sa complète fusion. 2. Sous agitation magnétique, le mélange est refroidi jusqu’à 40 - 41°C, puis les levures sont ajoutées. 3. Une homogénéisation à haute vitesse (9000 tr/min) est faite pendant une minute afin d'assurer une bonne dispersion des levures dans la masse à suppositoire. 4. L’agitation est alors diminuée et maintenue à 500 tr/min pendant le reste du refroidissement. 5. A 30 - 36 °C, le mélange est versé dans un moule à réglette de 2 g (la température de coulée idéale des ovules a été déterminée à partir d’un thermo-rhéogramme du mélange réalisé à l’aide d’un appareil Rhéomat 115 (LabMakelaar Benelux BV)). 6. Les ovules sont refroidis à température ambiante pendant 4 minutes. 7. Les ovules sont démoulés après 6 minutes à température ambiante. 1.4. Test physique de caractérisation des ovules Point de fusion :
Cette méthode détermine la température à laquelle l’ovule devient suffisamment liquide pour glisser dans un tube capillaire en forme de U (1,5 mm de diamètre intérieur). Cette méthode est un moyen simple et fiable pour comparer les points de fusion des ovules. Ce point de fusion doit être inférieur à 37°C. Trois ovules sont testés par lot. Résistance mécanique :
Cette méthode détermine la résistance à la rupture des ovules. La valeur définie correspond à la masse nécessaire pour générer leur écrasement. L’ovule est positionné sur une mâchoire et relié à une tige sur laquelle sont ajoutés successivement des poids. La force exercée sur l’ovule est augmentée jusqu’à l’écrasement de l'ovule. Les ovules doivent être capables de résister à un poids au moins égal à 1800-2000 g. Cinq ovules sont testés par lot.
Temps de liquéfaction :
Cette méthode (référence Ph. Eur. 2.9.22 édition en vigueur) détermine le temps nécessaire pour qu'un ovule maintenu dans une eau à 37°C ramollisse suffisamment pour se faire déformer et traverser par une tige rigide. Ce temps doit être inférieur à 20 minutes. Trois ovules sont testés par lot.
Exemple 1
* Spécifications de la Pharmacopée Européenne, édition en vigueur
Exemple 2
* Spécifications de a Pharmacopée Européenne
Exemple 3
* Spécifications de o Pharmacopée Européenne
Claims (19)
- REVENDICATIONS1. Composition comprenant un mélange de cellules de levure Saccharomyces boulardii et d’une cire.
- 2. Composition selon la revendication 1, dans laquelle la cire a une humidité relative de 20% à 35% avant mélange.
- 3. Composition selon la revendication 1 ou 2. dans laquelle la cire est à base de triglycérides en C&-C18 ou en C12-C18 saturés.
- 4. Composition selon l’une des revendications 1 à 3, dans laquelle la cire est sélectionnée dans le groupe constitué de SUPPOCIRE® NA PASTILLES (Gattefossé), OVUCIRE® 3460 PASTILLES (Gattefossé) et SUPPOCIRE® AML PASTILLES (Gattefossé).
- 5. Composition selon l’une des revendications 1 à 4, dans laquelle les cellules de levure Saccharomyces boulardii sont mélangées sous forme de poudre, notamment lyophilisée.
- 6. Composition selon l'une des revendications 1 à 5, dans laquelle le mélange est formé de 15 à 35% (m/m) de cellules de levure Saccharomyces boulardii sous forme de poudre et de 65 à 85% (m/m) de cire.
- 7. Composition selon l’une des revendications 1 à 6, dans laquelle le mélange comprend de 1,5 x 10^ à 2,5 x 1Unités Formant Colonies (UFC) de cellules de levures Saccharomyces boulardii.
- 8. Dispositif médical ou médicament comprenant une composition telle que définie dans l’une des revendications 1 à 7.
- 9. Dispositif médical ou médicament selon la revendication 8, comprenant le mélange en une masse unitaire de 1 g à 5 g.
- 10. Médicament selon la revendication 8 ou 9, pour son utilisation à titre d’ovule.
- 11. Médicament selon la revendication 8 ou 9, pour son utilisation dons la prévention ou le traitement des infections vulvo-voginoles.
- 12. Médicament selon la revendication 8 ou 9, pour son utilisation dans le rééquilibrage de la flore vaginale, notamment après traitement par un anti-infectieux local ou systémique, et/ou pour contribuer à consolider la guérison après la prise d’un traitement anti-infectieux local vaginal, et/ou pour prévenir les récidives d’infections vaginales.
- 13. Dispositif médical constitué d’une composition telle que définie dans l’une des revendications 1 à 7, pour son utilisation à titre d’ovule.
- 14. Dispositif médical constitué d’une composition telle que définie dans l’une des revendicafions 1 à 7, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des infections vulvo-vaginales.
- 15. Dispositif médical constitué d’une composition telle que définie dans l’une des revendications 1 à 7, pour son utilisation dans le rééquilibrage de la flore vaginale, notamment après traitement par un anti-infectieux local ou systémique, et/ou pour contribuer à consolider la guérison après la prise d'un traitement anti-infectieux local vaginal, et/ou pour prévenir les récidives d'infections vaginales
- 16. Dispositif médical pour son utilisation selon l’une des revendications 13 à 15, comprenant le mélange en une masse unitaire de 1 g à 5 g
- 17. Produit cosmétique comprenant une composition telle que définie dans l'une des revendications 1 à 7.
- 18. Produit cosmétique selon la revendication 17, comprenant le mélange en une masse unitaire de 1 g à 5 g.
- 19. Procédé d’obtention d'une composition telle que définie dans l’une des revendications 1 à 7, comprenant les étapes suivantes ; - si nécessaire on chauffe la cire jusqu’à la rendre liquide : - on maintient la cire à l'état liquide à une température inférieure à 42 C et on ajoute des cellules de levure Saccharomyces boulardii sous agitation ; - on laisse refroidir le mélange sous agitation en le maintenant liquide jusqu’à une température inférieure à 36°C ; - on coule le mélange dans un moule ; - on démoule le mélange après solidification.
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