FR3011465A1 - ANTI-AGE COSMETIC COMPOSITION. - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne une composition cosmétique, notamment pour une application topique. La composition selon l'invention comprend un mélange de géranylgéranyl isopropanol, d'un tri-peptide biomimétique dérivé de l'élafine, et de composés augmentant l'expression des protéines SiRT1 et SiRT3. Cette composition a pour effet de réduire très significativement les rides et diminue et/ou prévient les signes du vieillissement cutané.The present invention relates to a cosmetic composition, especially for topical application. The composition according to the invention comprises a mixture of geranylgeranyl isopropanol, a biomimetic tri-peptide derived from elafine, and compounds increasing the expression of SiRT1 and SiRT3 proteins. This composition has the effect of very significantly reducing wrinkles and decreases and / or prevents the signs of skin aging.
Description
- 1 - La présente invention concerne une composition cosmétique anti-âge, et son utilisation. Le derme est considéré et reconnu comme la cible principale des actifs cosmétiques pour lutter contre le vieillissement cutané. Le derme comprend une diversité de molécules matricielles organisées en une structure très dynamique qui détermine les propriétés biomécaniques du tissu et qui joue un rôle primordial au cours des événements liés à la vie cellulaire. Cet alliage macromoléculaire compose deux compartiments dermiques séparés par un plexus vasculaire : le derme papillaire ou papilles dermiques et le derme réticulaire. Le derme papillaire est une zone critique du tissu cutané de par son rôle clé dans la cohésion et dans les propriétés biomécaniques de la peau, mais également parce qu'il est la première cible du vieillissement dermique intrinsèque. Pour permettre de retarder ou contrer le vieillissement, le produit cosmétique idéal doit être capable de rajeunir les cellules de la peau, et les rendre capable de bio synthétiser les composants indispensables à la souplesse de la peau. On connait de l'état de la technique de nombreuses compositions cosmétiques anti-âge. Toutefois, ces compositions n'agissent que sur les conséquences du vieillissement (dégradation de la matrice extracellulaire), et/ou ne font que limiter les effets du vieillissement. On connait de l'état de la technique des compositions visant à « rajeunir » la peau. Par exemple, la demande W02011/125039 enseigne l'utilisation du géranylgéranyl isopropanol pour réduire les effets du vieillissement. Toutefois, des résultats bien qu'encourageant nécessiteraient d'être améliorés.The present invention relates to an anti-aging cosmetic composition and its use. The dermis is considered and recognized as the main target of cosmetic active to fight against skin aging. The dermis comprises a variety of matrix molecules organized into a highly dynamic structure that determines the biomechanical properties of the tissue and plays a key role in events related to cell life. This macromolecular alloy consists of two dermal compartments separated by a vascular plexus: the papillary dermis or papilla dermis and the reticular dermis. The papillary dermis is a critical area of the cutaneous tissue because of its key role in the cohesion and in the biomechanical properties of the skin, but also because it is the first target of intrinsic dermal aging. To help delay or counteract aging, the ideal cosmetic product must be able to rejuvenate the cells of the skin, and make them able to bio synthesize the essential components for the suppleness of the skin. Many prior art cosmetic compositions are known from the state of the art. However, these compositions only act on the consequences of aging (degradation of the extracellular matrix), and / or only limit the effects of aging. State-of-the-art compositions for "rejuvenating" the skin are known. For example, the application W02011 / 125039 teaches the use of geranylgeranyl isopropanol to reduce the effects of aging. However, encouraging results would need to be improved.
Il existe donc un besoin de disposer de compositions cosmétiques qui permettent un véritable rajeunissement de la peau afin de lutter contre les conséquences du vieillissement, de le limiter, et même reverser le processus de vieillissement en « rajeunissant la peau ». Les effets idéaux sont espérés à long terme. Un des buts de l'invention est de proposer une composition cosmétique et dermatologique qui soit facile d'application, agréable pour l'utilisateur et qui exerce un véritable effet rajeunissant à long terme. Un autre but de l'invention est de fournir une composition réduisant ou corrigeant significativement les signes cutanés de vieillissement. Encore un autre but de l'invention vise à proposer une méthode permettant de réduire les signes de vieillissement cutanée. L'invention concerne une composition cosmétique, notamment pour une application - 2 - topique, comprenant en tant qu'ingrédient actif un mélange de géranylgéranyl isopropanol, de peptide biomimétique dérivé de l'élafine, d'un premier composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT1 et d'un second composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT3.There is therefore a need for cosmetic compositions that allow a real rejuvenation of the skin in order to combat the consequences of aging, to limit it, and even to reverse the aging process by "rejuvenating the skin". The ideal effects are hoped for in the long run. One of the aims of the invention is to provide a cosmetic and dermatological composition that is easy to apply, pleasant for the user and has a real rejuvenating effect in the long term. Another object of the invention is to provide a composition that significantly reduces or corrects the signs of cutaneous aging. Yet another object of the invention is to provide a method for reducing the signs of skin aging. The invention relates to a cosmetic composition, especially for a topical application, comprising as active ingredient a mixture of geranylgeranyl isopropanol, biomimetic peptide derived from elafine, a first natural compound derived from plants which increase l expression of the SiRT1 protein and a second natural compound derived from plants increasing the expression of the SiRT3 protein.
L'invention repose sur la constatation surprenante faite par les inventeurs qu'une composition comprenant un mélange de géranylgéranyl isopropanol, de peptide biomimétique dérivé de l'élafine, d'un premier composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT1 et d'un second composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT3, présentait un effet anti vieillissement significatif en réduisant les rides et ridules, en rehaussant l'éclat de la paeu, en augmentant le volume de la peau et en agissant sur le collagène et les glycosaminoglycanes. Le géranylgéranyl isopropanol, ou géranylgerany1-2- propanol est un lipide complexe dérivé d'isoprène qui joue un rôle dans le métabolisme de la mitochondrie. Le géranylgéranyl isopropanol a une action protectrice contre le stress oxydatif et les radicaux libres ainsi que sur les télomères. Le géranylgéranyl isopropanol peut s'utiliser en particulier pour le traitement des rides, ridules et discontinuités visibles de la peau ainsi que pour le traitement des troubles de la pigmentation.The invention is based on the surprising finding made by the inventors that a composition comprising a mixture of geranylgeranyl isopropanol, biomimetic peptide derived from elafine, a first natural compound derived from plants increasing the expression of the protein SiRT1 and of a second natural compound derived from plants increasing the expression of the protein SiRT3, exhibited a significant anti-aging effect by reducing lines and wrinkles, enhancing the brightness of the skin, increasing the volume of the skin and by acting on collagen and glycosaminoglycans. Geranylgeranyl isopropanol, or geranylgeranyl-2-propanol, is a complex lipid derived from isoprene that plays a role in the metabolism of mitochondria. Geranylgeranyl isopropanol has a protective action against oxidative stress and free radicals as well as on telomeres. Geranylgeranyl isopropanol can be used in particular for the treatment of wrinkles, fine lines and visible discontinuities of the skin as well as for the treatment of pigmentation disorders.
Le géranylgéranyl isopropanol est notamment commercialisé par la société Sederma sous le nom commercial JuvenityTM. Dans l'invention, on désigne par « peptide biomimétique dérivé de l'élafine » un peptide d'au moins deux acides aminés, notamment trois acides aminés, dérivé de cette protéine, et qui mime les effets de l'élafine, un inhibiteur de protéines spécifiques de l'élastase. Les protéines de la famille des sirtuines, dont font partie SiRT1 et SiRT 3 sont des protéines « anti-âge ». Les sirtuines ont été associées au vieillissement et à la longévité de la levure, des nématodes et des mouches à fruits, organismes utilisés comme modèles animaux pour l'étude de la biologie du vieillissement humain.Geranylgeranyl isopropanol is marketed by Sederma under the trade name JuvenityTM. In the invention, the term "biomimetic peptide derived from elafine" means a peptide of at least two amino acids, including three amino acids, derived from this protein, and which mimics the effects of elafine, an inhibitor of specific proteins of elastase. The proteins of the sirtuin family, of which SiRT1 and SiRT 3 are part, are "anti-aging" proteins. Sirtuins have been associated with the aging and longevity of yeast, nematodes and fruit flies, organisms used as animal models for studying the biology of human aging.
Lorsque les gènes d'un organisme surproduisent de la sirtuine, sa durée de vie est considérablement prolongée. Chez les nématodes, un prolongement de près de 50% est même observé. En combinant ces quatre composés dans la composition selon l'invention, les inventeurs ont observé des effets très surprenants sur la réduction des rides et des ridules, et plus généralement sur les signes de vieillissement de la peau et des phanères. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne une composition - 3 - cosmétique susmentionnée, dans laquelle lesdits premier et second composés augmentant respectivement l'expression des protéines SiRT1 et SiRT3 sont des protéines ou polypeptides végétaux, extraits notamment du soja. Des activateurs des sirtuines selon l'invention peuvent être le resvératrol et ses dérivés du raisin, des extraits peptidiques de riz, des hydrolysats de feuilles de myrte, ou encore des extraits de soja. Cette liste n'est pas limitative et l'homme de métier est capable de retrouver facilement des activateurs de sirtuines à partir de ses connaissances générales. Dans un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne une composition telle que définie précédemment, dans laquelle, lesdites protéines ou lesdits polypeptides végétaux sont issus d'hydrolysats de protéines d'extraits de soja ou de germe de soja. Un composé avantageux activant la sirtuine 3 (SiRT3) est l'hydrolysat de protéine de soja, en particulier commercialisé par Ashland-Vincience sous le nom commercial DynachondrineTM ISR. Le numéro CAS de cet activateur est le 68607-55-5. Un composé avantageux activant la sirtuine 1 est un autre hydrolysat de protéine de soja en particulier commercialisé par Silab sous le nom commercial Raffermine® 2. Le numéro CAS de ce composé est le 9010-10-0. Dans encore un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne une composition cosmétique telle que définie précédemment, dans laquelle ledit peptide biomimétique est le tripeptide-2. Dans l'invention, le peptide biomimétique dérivé de l'élafine a pour effet d'inhiber la progérine, protéine qui s'accumule dans les cellules de la peau et participe à son vieillissement, notamment en induisant le phénomène de sénescence.When an organism's genes overproduce sirtuin, its lifespan is considerably prolonged. In nematodes, an extension of nearly 50% is even observed. By combining these four compounds in the composition according to the invention, the inventors have observed very surprising effects on the reduction of wrinkles and fine lines, and more generally on the signs of aging of the skin and superficial body growths. In one advantageous embodiment, the invention relates to a cosmetic composition mentioned above, wherein said first and second compounds respectively increasing the expression of SiRT1 and SiRT3 proteins are plant proteins or polypeptides, extracted especially from soybeans. Sirtuin activators according to the invention may be resveratrol and its grape derivatives, peptide extracts of rice, hydrolysates of myrtle leaves, or even extracts of soya. This list is not limiting and the skilled person is able to easily find sirtuin activators from his general knowledge. In another advantageous embodiment, the invention relates to a composition as defined above, wherein said plant proteins or polypeptides are derived from protein hydrolysates of soy extracts or soybean. An advantageous compound activating sirtuin 3 (SiRT3) is the soy protein hydrolyzate, in particular marketed by Ashland-Vincience under the trade name Dynachondrine TM ISR. The CAS number of this activator is 68607-55-5. An advantageous compound activating sirtuin 1 is another soy protein hydrolyzate in particular marketed by Silab under the trade name Raffermine® 2. The CAS number of this compound is 9010-10-0. In yet another advantageous embodiment, the invention relates to a cosmetic composition as defined above, wherein said biomimetic peptide is tripeptide-2. In the invention, the biomimetic peptide derived from elafine has the effect of inhibiting progerin, a protein that accumulates in the cells of the skin and contributes to its aging, in particular by inducing the phenomenon of senescence.
La progérine est une mutation de la lamine A (LMNA) que l'on retrouve exprimée chez les sujets atteints du syndrome de Hutchinson-Giford Progeria (HGPS) et qui peut être détectée en test ELISA dans les peaux jeunes et âgées. La progérine, protéine de type filament intermédiaire, est majoritairement exprimée au niveau du cytoplasme des fibroblastes du derme, surtout au niveau du derme supérieur et moyen, près de la membrane basale. A partir de 60 ans, les fibroblastes sont marqués de plus en plus en profondeur dans le derme et après 80 ans ce marquage dans le derme profond est très net. La progérine est également exprimée dans quelques rares kératinocytes de la couche granuleuse mais avec un marquage moins fort que pour les fibroblastes.Progerin is a laminamine A (LMNA) mutation that is found in subjects with Hutchinson-Giford Progeria syndrome (HGPS) and can be detected by ELISA in young and older skin. Progerin, an intermediate filament protein, is predominantly expressed in the cytoplasm of dermal fibroblasts, especially in the upper and middle dermis near the basement membrane. From 60 years, the fibroblasts are marked more and more deep in the dermis and after 80 years this marking in the deep dermis is very clear. Progerin is also expressed in a few rare keratinocytes of the granular layer but with a weaker labeling than for fibroblasts.
Avantageusement, l'invention concerne une composition cosmétique mentionnée ci- dessus, dans laquelle ledit tripeptide-2 sous une forme trifluoroacétylée. Un tel produit est notamment disponible dans le commerce auprès de la société - 4 - LucasMeyer Cosmetics sous le nom commercial ProgelineTM. Dans encore un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne une composition cosmétique telle que définie ci-dessus, dans laquelle les composés actifs représentent en poids de la composition totale : - géranylgéranyl isopropanol de 0,0001% à 5%, - peptide biomimétique de 0,0001% à 5%, - d'activateur de la SiRT1 de 0,05% à 15%, et - d'activateur de la SiRT3 de 0,01% à 10%. Une composition plus avantageuse de l'invention comprend en poids de la composition totale les proportions suivantes : - géranylgéranyl isopropanol de 0,0001% à 0,001%, - peptide biomimétique de 0,001% à 0,01%, - d'activateur de la SiRT1 de 0,05% à 1%, et - d'activateur de la SiRT3 de 0,01% à 1%.Advantageously, the invention relates to a cosmetic composition mentioned above, wherein said tripeptide-2 in a trifluoroacetylated form. Such a product is in particular commercially available from the company LucasMeyer Cosmetics under the trade name ProgelineTM. In yet another advantageous embodiment, the invention relates to a cosmetic composition as defined above, in which the active compounds represent by weight of the total composition: - geranylgeranyl isopropanol of 0.0001% to 5%, - peptide biomimetic material from 0.0001% to 5%, SiRT1 activator from 0.05% to 15%, and SiRT3 activator from 0.01% to 10%. A more advantageous composition of the invention comprises, by weight of the total composition, the following proportions: geranylgeranyl isopropanol of 0.0001% to 0.001%, biomimetic peptide of 0.001% to 0.01%, of SiRT1 activator from 0.05% to 1%, and from SiRT3 activator from 0.01% to 1%.
Une composition encore plus avantageuse selon l'invention est décrite plus en détail à l'exemple 1. Un autre mode de réalisation avantageux de l'invention porte sur la composition susmentionnée, ladite composition comprenant en outre de l'extrait d'iris pâle, notamment dans une proportion en poids de la composition totale de 0,05% à 5%.An even more advantageous composition according to the invention is described in more detail in Example 1. Another advantageous embodiment of the invention relates to the aforementioned composition, said composition further comprising pale iris extract, especially in a proportion by weight of the total composition of 0.05% to 5%.
De manière plus avantageuse, ladite composition comprenant en outre de l'extrait d'iris pâle, notamment dans une proportion en poids de la composition totale de 0,1% à 1%. L'extrait d'iris pâle peut être obtenu dans le commerce notamment auprès de la société Naolys sous le nom commercial All Event iris pâle.More advantageously, said composition further comprising pale iris extract, especially in a proportion by weight of the total composition of 0.1% to 1%. The pale iris extract can be obtained commercially from Naolys under the trade name All Event pale iris.
La composition selon l'invention peut se présenter sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions ou encore poudres. Préférentiellement, elle se présente sous forme de gel, de solution ou d'émulsion et comprend : - un mélange de géranylgéranyl isopropanol, de peptide biomimétique de l'élafine, d'un premier composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT1 et d'un second composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT3, comme agent anti-vieillissement, tel que défini précédemment, et éventuellement un extrait d'iris pâle, - au moins un ingrédient additionnel, choisi parmi les matières premières additionnelles utilisées en cosmétique, de préférence la glycérine, et - un véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable. - 5 - Un véhicule cosmétique acceptable est compris dans la composition selon l'invention et comporte de préférence au moins un composé à titre d'additif et au moins un composé à titre d'excipient, un même composé pouvant être utilisé à plusieurs titres. La présente invention a pour objet une composition cosmétique telle que définie ci-dessus, comprenant au moins un additif choisi parmi les conservateurs, chélateurs, colorants, filtres UV, régulateurs de pH, texturants, liants, émollients, parfums ou antioxydants, et au moins un excipient choisi parmi des composés hydrophiles, composés hydrophobes ou tensioactifs. Par « additif », on désigne un agent ayant dans la composition cosmétique ou thérapeutique un rôle de conservateur, chélateur, colorant, filtre UV (permettant de protéger les matières premières), régulateur de pH (acide ou base), texturant, parfum et / ou antioxydant. Par « matières premières à protéger », on désigne tout composant de la composition cosmétique ou thérapeutique susceptible d'être dégradé par la lumière. Par « excipient », on désigne des composés hydrophiles constituant une phase aqueuse, des composés hydrophobes ou lipophiles constituant une phase grasse ou des tensioactifs. Les tensioactifs sont des molécules amphiphiles capables de maintenir ensemble deux milieux normalement non miscibles entre eux en diminuant les tensions interfaciales. Les tensioactifs sont ioniques (anioniques, cationiques ou amphotères) ou non-ioniques. La liste suivante de composés pouvant être utilisés dans le véhicule cosmétique ou thérapeutique selon l'invention est donnée à titre d'exemple et ne doit pas être considérée comme exhaustive. Les conservateurs utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi le dibutylhydroxytoluène (BHT), butylhydroxyanisole (BHA), gallates de propyle, octyle, dodécyle, a-tocophérol, acétate d'a-tocophérol, acide ascorbique, palmitate d'ascorbyle, extraits de romarin, extraits de gingko biloba, orizanol.The composition according to the invention may be in the form of creams, oil-in-water emulsions, water-in-oil or multiple emulsions, solutions, suspensions or powders. Preferably, it is in the form of a gel, solution or emulsion and comprises: a mixture of geranylgeranyl isopropanol, biomimetic peptide of elafine, a first natural compound derived from plants increasing the expression of the protein SiRT1 and a second natural compound derived from plants increasing the expression of the SiRT3 protein, as an anti-aging agent, as defined above, and optionally a pale iris extract, - at least one additional ingredient chosen from the additional raw materials used in cosmetics, preferably glycerin, and a cosmetically or dermatologically acceptable vehicle. An acceptable cosmetic vehicle is included in the composition according to the invention and preferably comprises at least one compound as an additive and at least one compound as an excipient, the same compound being able to be used for several purposes. The subject of the present invention is a cosmetic composition as defined above, comprising at least one additive chosen from preservatives, chelants, dyes, UV filters, pH regulators, texturizers, binders, emollients, perfumes or antioxidants, and at least one an excipient selected from hydrophilic compounds, hydrophobic compounds or surfactants. By "additive" is meant an agent having in the cosmetic or therapeutic composition a role of preservative, chelant, dye, UV filter (for protecting the raw materials), pH regulator (acid or base), texturizer, perfume and / or antioxidant. The term "raw materials to be protected" denotes any component of the cosmetic or therapeutic composition that may be degraded by light. By "excipient" is meant hydrophilic compounds constituting an aqueous phase, hydrophobic or lipophilic compounds constituting a fatty phase or surfactants. Surfactants are amphiphilic molecules capable of holding two normally immiscible media together by reducing interfacial tensions. The surfactants are ionic (anionic, cationic or amphoteric) or nonionic. The following list of compounds that can be used in the cosmetic or therapeutic vehicle according to the invention is given by way of example and should not be considered exhaustive. The preservatives used in the compositions according to the invention are in particular chosen from dibutylhydroxytoluene (BHT), butylhydroxyanisole (BHA), propyl gallates, octyl, dodecyl, α-tocopherol, α-tocopherol acetate, ascorbic acid, palmitate and ascorbyl, rosemary extracts, gingko biloba extracts, orizanol.
Les chélateurs utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi l'acide citrique, cyclodextrine, EDTA disodique, pentétate de pentasodium, acide phytique, citrate de sodium, phytate de sodium, EDTA ou pyrophosphate de tétrasodium Les colorants utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi les colorants de dénomination Cl (Color Index). Les filtres UV utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi la benzophénone-3 (oxybenzone), benzophénone-4 (sulisobenzone), - 6 - drométrizole, trisiloxane, salicylate de benzyle, avobenzone, octyl méthoxycinnamate (octinoxate), éthylhexyl salicylate (octisalate) ou dioxyde de titane. Les régulateurs de pH (acide ou base) utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi l'aminomethyl propanol, acide citrique, acide fumarique, acide orthophosphorique, acide sébacique (acide décanedioïque), acétate de sodium, bicarbonate de sodium, citrate de sodium, hydroxyde de sodium, acide tartrique, pyrophosphate de tétrasodium ou triéthylamine (TEA). Par « texturant », on désigne un agent capable d'augmenter la viscosité des phases aqueuses dans lesquelles il est dispersé, l'augmentation étant avantageusement élevée. Un texturant peut, selon les cas, être un épaississant et/ou un gélifiant. Par « épaississant », on désigne une substance qui permet d'obtenir une solution visqueuse sans formation d'un réseau tridimensionnel, par opposition notamment aux gélifiants.The chelators used in the compositions according to the invention are chosen in particular from citric acid, cyclodextrin, disodium EDTA, pentasodium pentetate, phytic acid, sodium citrate, sodium phytate, EDTA or tetrasodium pyrophosphate. The dyes used in the compositions according to the invention are in particular chosen from the dyes of denomination Cl (Color Index). The UV filters used in the compositions according to the invention are chosen especially from benzophenone-3 (oxybenzone), benzophenone-4 (sulisobenzone), 6-drometriol, trisiloxane, benzyl salicylate, avobenzone, octyl methoxycinnamate (octinoxate), ethylhexyl salicylate (octisalate) or titanium dioxide. The pH regulators (acid or base) used in the compositions according to the invention are especially chosen from aminomethylpropanol, citric acid, fumaric acid, orthophosphoric acid, sebacic acid (decanedioic acid), sodium acetate, sodium bicarbonate, sodium citrate, sodium hydroxide, tartaric acid, tetrasodium pyrophosphate or triethylamine (TEA). By "texturizer" is meant an agent capable of increasing the viscosity of the aqueous phases in which it is dispersed, the increase being advantageously high. A texturizer may, depending on the case, be a thickener and / or a gelling agent. The term "thickener" denotes a substance that makes it possible to obtain a viscous solution without formation of a three-dimensional network, as opposed in particular to gelling agents.
Les texturants sont notamment choisis parmi l'agar-agar ou gélose, alginates, carraghénates, gomme de guar, gomme de tara, gomme de caroube, gomme adragante, gomme karaya, gomme de xanthane, gel d'aloès, glycérol d'amidon, chitosane, silice, silicates, - en particulier bentonite, hectorite, montmorillonite, silicate d'aluminium, silicate de magnésium -, dérivés de cellulose, notamment hydroxyéthylcellulose, hydroxypropylcellulose, méthylhydroxypropylcellulose ou hypromellose, polymères acryliques et vinyliques, - en particulier carbomères, polymères cyanoacryliques, polyvinylpyrrolidone (PVP), alcools polyvinylliques polyéthylène glycols, polyquatermiums. Les parfums utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi les huiles essentielles, compositions d'origine synthétique, parfums solubilisés. Les antioxydants utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi le palmitate d'ascorbyle, BHT, Tocophérol (Vitamine E), acétate de tocophéryl. Les composés hydrophiles de la phase aqueuse sont notamment choisis parmi l'eau, alcools et polyols. Les alcools pouvant être utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment l'éthanol, le propanol, Pisopropanol, l'alcool benzylique, l'hexyl alcool. Les polyols pouvant être utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment le glycérol, le propylène glycol, le butylène glycol, l'hexylèneglycol, le sorbitol. Les composés hydrophobes de la phase grasse sont notamment choisis parmi les hydrocarbures, acides gras, alcools gras, esters, glycérides, cérides, phosphatides. - 7 - Les hydrocarbures sont notamment choisis parmi les chaînes carbonées et hydrogénées, saturées ou insaturées, linéaires, ramifiées ou cycliques, notamment les chaînes carbonées de 22 à 35 carbones et notamment parmi les hydrocarbures suivants : paraffines, huiles de paraffine, vaselines, squalane, silicones, perhydrosqualène. Les silicones utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment des huiles de silicones volatiles, des huiles de silicones non volatiles, des huiles de silicone modifiées, des cires de silicone, des gommes de silicone, des émulsions de silicone, des microémulsions de silicone. Les silicones sont notamment choisis parmi les silicones polyloxanes, poly diméthyl siloxanes ou diméthicones, phényl triméthyl siloxanes ou phényl méthicones, polydiméthyl siloxanes cycliques ou cyclométhicones, diméthicone copolyols, amodiméthicones, diméthicone propyl PGBétaïne. Les acides gras utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment des acides gras saturés ou des acides gras insaturés, notamment des acides gras mono-insaturés, di-insaturés ou tri-insaturés. Les acides gras sont notamment choisis parmi l'acide stéarique, acide palmitique, acide laurique, acide myristique, acide oléique, acide linoléique, acide linolénique. Les alcools gras sont notamment choisis parmi les alccols gras à chaîne longue saturée, - alcool cétylique ou hexadécanol, alcool stéarylique, alcool cétostéarylique - , alcools gras à chaîne courte ou insaturée, - alcool oléique, octyldodécanol, alcool tétrahydrofurfurylique. Les esters sont notamment choisis parmi les esters gras linéaires liquides, - en particulier isopropyle palmitate, myristiyl stéarate, octyl palmitate, isostéaryl isostéarate, butyl arachidonate, isopropyl lanolate, isopropyle myristate, glycéryle monostéarate - , esters de polyols, - en particulier glycérol, éthylène glycol, propylène glycol, diéthylène glycol -, les esters oxyéthylénés. Les glycérides sont notamment des monoglycérides, diglycérides, triglycérides. Les glycérides sont notamment choisis parmi les huiles végétales, - en particulier huile d'olive, huile d'arachide, huile d'amande, huile de noisette, huile de tournesol, huile de sésame, huile de soja, huile de maïs, huile de noix, huile de pépins de raisin, huile de bourrache, huile d'onagre, huile de rosier muscat, huile de kiwi, huile d'avocat, huile germe de céréales, huile de macadamia, huile de ricin, huile oeillette, huile de coton, huile de noyau abricot, huile de coco, huile de coprah, huile de monoï, huile de palmiste, huile de carthame, huile d'andiroba, huile de pépins de courge, huile de squales, huile de vison -, les beurres, - en particulier beurre de cacao, beurre de karité, beurre de coprah, huile de babassu, huile de palme, huile - 8 - de tamanu-, les huiles végétales modifiées, les huiles synthétiques, les graisses, les suifs. Les cérides utilisés dans les compositions selon l'invention sont notamment choisis parmi les stérides, les caroténocérides, le lipochrome, les cires, - en particulier le blanc de baleine ou spermacéti, lanoline, dérivés de lanoline, - lanoline cireuse, lanoline liquide, lanoline hydrogénée, lanoline éthoxylée, alcools de lanoline, alcools de lanoline acétyles, alcools de lanoline éthoxylés, acides de lanoline, lanolate d'isopropyle -, huile de jojoba, ozokérite cérésine, cire de carnauba, cire d'abeille. Les tensioactifs selon l'invention sont notamment des émulsionnants, mouillants, détergents et/ou moussants. Les tensioactifs cationiques sont notamment choisis parmi les sels d'ammonium quaternaire, sels d'aminés primaires grasses, amides d'ammonium quaternaire, chlorures d'alkylpyridinium, saccharinates d'alkyl ammonium, aminoxyde, amides de diéthylènetriamine ou résines cationiques. Les tensioactifs non ioniques sont notamment choisis parmi les esters de glycérol, esters de glycols, esters de sorbitan, éthers d'alcools gras, sucroesters lipophiles, esters de polyglycérol, copolymères de l'oxyde d'éthylène-oxyde de propylène, saponines, alcools gras éthoxylés, éthers de glucose, ester de glycol ou polyéthylène glycol, ester de glycol ou polyglycérol, esters de sorbitan oxyéthylénés, alkylphénols oxyéthylénés, aminoxydes, bases autoémulsionnables (esters de PEG), dérivés du méthylglucoside, monoéthanolamides, dérivées de monoéthanolamides, diéthanolamides, ou dérivés de diéthanolamides. Les tensioactifs anioniques sont notamment choisis parmi les savons alcalins, savons d'aminés, alkylsarcosinates, alkylsulfoacétates, alkyltaurates, alkyl sulfates de sodium ou potassium, alkyl éther sulfates de sodium ou potassium, paraffine, oléfine sulfonates, iséthionates, alkyl phosphates de sodium, alkyléther phosphates de sodium. Les tensioactifs amphotères ou zwittérioniques sont notamment choisis parmi les alkylbétaines, alkylamidobétaïnes, alkylamino mono ou di-propionates, dérivés imidazolés tels que cocoamphodiacétate, sodium lauroamphodiacétate.The texturants are chosen in particular from agar-agar or agar, alginates, carrageenates, guar gum, tara gum, locust bean gum, gum tragacanth, karaya gum, xanthan gum, aloe gel, starch glycerol, chitosan, silica, silicates, in particular bentonite, hectorite, montmorillonite, aluminum silicate, magnesium silicate, cellulose derivatives, in particular hydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylhydroxypropylcellulose or hypromellose, acrylic and vinyl polymers, in particular carbomers, cyanoacrylic polymers polyvinylpyrrolidone (PVP), polyvinyl alcohols polyethylene glycols, polyquatermiums. The perfumes used in the compositions according to the invention are chosen in particular from essential oils, compositions of synthetic origin, and solubilized perfumes. The antioxidants used in the compositions according to the invention are in particular chosen from ascorbyl palmitate, BHT, tocopherol (Vitamin E), tocopheryl acetate. The hydrophilic compounds of the aqueous phase are chosen especially from water, alcohols and polyols. The alcohols that can be used in the compositions according to the invention are in particular ethanol, propanol, isopropanol, benzyl alcohol or hexyl alcohol. The polyols that can be used in the compositions according to the invention are especially glycerol, propylene glycol, butylene glycol, hexylene glycol, sorbitol. The hydrophobic compounds of the fatty phase are chosen in particular from hydrocarbons, fatty acids, fatty alcohols, esters, glycerides, cerides and phosphatides. The hydrocarbons are in particular chosen from carbon and hydrogenated, saturated or unsaturated, linear, branched or cyclic chains, especially carbon chains of 22 to 35 carbons and in particular from the following hydrocarbons: paraffins, paraffin oils, petroleum jelly, squalane , silicones, perhydrosqualene. The silicones used in the compositions according to the invention are, in particular, volatile silicone oils, non-volatile silicone oils, modified silicone oils, silicone waxes, silicone gums, silicone emulsions, silicone microemulsions . The silicones are chosen in particular from silicones polyloxanes, poly dimethyl siloxanes or dimethicones, phenyl trimethyl siloxanes or phenyl meticones, cyclic polydimethyl siloxanes or cyclomethicones, dimethicone copolyols, amodimethicones and dimethicone propyl PGBetaine. The fatty acids used in the compositions according to the invention are in particular saturated fatty acids or unsaturated fatty acids, especially monounsaturated, diunsaturated or tri-unsaturated fatty acids. The fatty acids are chosen in particular from stearic acid, palmitic acid, lauric acid, myristic acid, oleic acid, linoleic acid and linolenic acid. The fatty alcohols are chosen in particular from saturated long-chain fatty alcohols, cetyl alcohol or hexadecanol, stearyl alcohol, cetostearyl alcohol, short-chain or unsaturated fatty alcohols, oleic alcohol, octyldodecanol or tetrahydrofurfuryl alcohol. The esters are chosen in particular from liquid linear fatty esters, in particular isopropyl palmitate, myristiyl stearate, octyl palmitate, isostearyl isostearate, butyl arachidonate, isopropyl lanolate, isopropyl myristate, glyceryl monostearate, polyol esters, in particular glycerol, ethylene. glycol, propylene glycol, diethylene glycol -, oxyethylenated esters. The glycerides are especially monoglycerides, diglycerides, triglycerides. The glycerides are chosen in particular from vegetable oils, in particular olive oil, peanut oil, almond oil, hazelnut oil, sunflower oil, sesame oil, soya oil, corn oil, walnut, grapeseed oil, borage oil, evening primrose oil, musk rose oil, kiwi oil, avocado oil, cereal germ oil, macadamia oil, castor oil, flaxseed oil, cottonseed oil , apricot kernel oil, coconut oil, coconut oil, monoi oil, palm kernel oil, safflower oil, andiroba oil, pumpkin seed oil, shark oil, mink oil -, butters, - especially cocoa butter, shea butter, coconut butter, babassu oil, palm oil, tamanu oil, modified vegetable oils, synthetic oils, fats, tallow. The cerides used in the compositions according to the invention are chosen especially from steres, carotenocerides, lipochrome, waxes, in particular white whale or spermaceti, lanolin, lanolin derivatives, waxy lanolin, liquid lanolin, lanolin hydrogenated, ethoxylated lanolin, lanolin alcohols, lanolin alcohols acetyls, ethoxylated lanolin alcohols, lanolin acids, isopropyl lanolate -, jojoba oil, ozokerite ceresin, carnauba wax, beeswax. The surfactants according to the invention are in particular emulsifiers, wetting agents, detergents and / or foaming agents. The cationic surfactants are chosen in particular from quaternary ammonium salts, fatty primary amine salts, quaternary ammonium amides, alkylpyridinium chlorides, alkyl ammonium saccharinates, aminoxide, diethylenetriamine amides or cationic resins. The nonionic surfactants are especially chosen from glycerol esters, glycols esters, sorbitan esters, fatty alcohol ethers, lipophilic sucroesters, polyglycerol esters, copolymers of ethylene oxide-propylene oxide, saponins, alcohols ethoxylated fatty acids, glucose ethers, glycol or polyethylene glycol esters, glycol or polyglycerol esters, oxyethylenated sorbitan esters, oxyethylenated alkylphenols, aminoxides, self-emulsifiable bases (PEG esters), methylglucoside derivatives, monoethanolamides, monoethanolamides derivatives, diethanolamides, or derivatives of diethanolamides. The anionic surfactants are chosen in particular from alkaline soaps, amine soaps, alkylsarcosinates, alkylsulfoacetates, alkyltaurates, sodium or potassium alkyl sulfates, sodium or potassium alkyl ether sulfates, paraffin, olefin sulfonates, isethionates, sodium alkyl phosphates and alkyl ether. sodium phosphates. The amphoteric or zwitterionic surfactants are especially chosen from alkyl betaines, alkylamidobetaines, alkylamino mono or di-propionates, imidazole derivatives such as cocoamphodiacetate, sodium lauroamphodiacetate.
L'ensemble des additifs susmentionnés n'est bien entendu pas limitatif et ne devrait pas restreindre la portée de l'invention. L'invention concerne également l'utilisation d'une composition définie précédemment pour la réparation ou la prévention des signes de vieillissement cutané. Du fait de son action sur différents aspects cellulaires du vieillissement, la composition selon l'invention peut être utilisée comme composition cosmétique et non thérapeutique visant à réparer ou prévenir les signes du vieillissement. L'invention concerne par ailleurs l'utilisation d'une composition selon la définition ci- - 9 - dessus et d'un extrait d'iris pâle tel que défini précédemment, pour une application topique simultanée séparée ou étalée dans la temps. La composition selon l'invention peut donc comprendre les quatre composés susmentionnés en association avec l'extrait d'iris pâle, le tout formant une seule et même composition. La composition selon l'invention peut en outre être composée de deux compositions : une composition comprenant les 4 composés actifs, et une composition comprenant de l'extrait d'iris pâle. Ces deux compositions peuvent alors être appliquées de manière simultanée ou l'une après l'autre. Un autre aspect de l'invention concerne un kit comprenant une première composition comprenant composition cosmétique, notamment pour une application topique, comprenant en tant qu'ingrédient actif un mélange de géranylgéranyl isopropanol, de peptide biomimétique dérivé de l'élafine, d'un premier composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT1 et d'un second composé naturel issu de plantes augmentant l'expression de la protéine SiRT3, tel que définie ci- dessus et une seconde composition comprenant un extrait d'iris pâle. L'invention concerne par ailleurs un procédé cosmétique pour combattre les effets du vieillissement cutané comprenant une étape consistant à appliquer sur les zones concernées une composition contenant une quantité efficace d'une composition selon la définition ci-dessus. L'homme du métier connait de ses connaissances générales les différentes précautions d'usages à appliquer dans le cadre d'un tel procédé.All the aforementioned additives are of course not limiting and should not restrict the scope of the invention. The invention also relates to the use of a previously defined composition for repairing or preventing the signs of skin aging. Because of its action on different cellular aspects of aging, the composition according to the invention can be used as a cosmetic and non-therapeutic composition intended to repair or prevent the signs of aging. The invention also relates to the use of a composition according to the above definition and a pale iris extract as defined above, for a simultaneous topical application separated or spread over time. The composition according to the invention may therefore comprise the four abovementioned compounds in combination with the pale iris extract, all forming one and the same composition. The composition according to the invention may also be composed of two compositions: a composition comprising the 4 active compounds, and a composition comprising pale iris extract. These two compositions can then be applied simultaneously or one after the other. Another aspect of the invention relates to a kit comprising a first composition comprising a cosmetic composition, in particular for a topical application, comprising as active ingredient a mixture of geranylgeranyl isopropanol, biomimetic peptide derived from elafine, a first a natural compound derived from plants increasing the expression of the SiRT1 protein and a second natural compound derived from plants increasing the expression of the SiRT3 protein, as defined above, and a second composition comprising a pale iris extract. The invention further relates to a cosmetic method for combating the effects of skin aging comprising a step of applying to the areas of interest a composition containing an effective amount of a composition as defined above. The person skilled in the art knows from his general knowledge the various precautions of use to be applied in the context of such a process.
L'invention sera mieux comprise à la lecture des exemples et des figures suivantes, qui sont fournis à titre illustratif et ne présentent aucun caractère limitatif Description des figures Les figures 1A et 1B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur les rides du front. La figure 1A est une photographie du front d'un sujet avant application de la composition selon l'invention. La figure 1B est une photographie du front d'un sujet après application de la composition selon l'invention pendant deux mois.The invention will be better understood on reading the following examples and figures, which are provided for illustrative purposes and are not limiting in any way. DESCRIPTION OF THE FIGURES FIGS. 1A and 1B show the effect of the composition according to the invention on wrinkles from the front. FIG. 1A is a photograph of the forehead of a subject before application of the composition according to the invention. Figure 1B is a photograph of the forehead of a subject after application of the composition according to the invention for two months.
Les figures 2A et 2B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur la profondeur des rides du front. - 10 - La figure 2A est un graphique représentant en trois dimensions les rides du front d'un sujet avant application de la composition selon l'invention. La figure 2B est un graphique représentant en trois dimensions les rides front d'un sujet après application de la composition selon l'invention pendant deux mois.Figures 2A and 2B show the effect of the composition according to the invention on the depth of the forehead wrinkles. FIG. 2A is a graph showing in three dimensions the wrinkles of the forehead of a subject before application of the composition according to the invention. Figure 2B is a graph showing three-dimensional forehead wrinkles of a subject after application of the composition according to the invention for two months.
Les figures 3A et 3B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur les rides du lion. La figure 3A est une photographie de la zone de la ride du lion d'un sujet avant application de la composition selon l'invention.Figures 3A and 3B show the effect of the composition according to the invention on the wrinkles of the lion. FIG. 3A is a photograph of the zone of the lion's wrinkle of a subject before application of the composition according to the invention.
La figure 3B est une photographie de la zone de la ride du lion d'un sujet après application de la composition selon l'invention pendant deux mois. Les figures 4A et 4B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur la profondeur des rides du lion chez le sujet 4.FIG. 3B is a photograph of the zone of the lion's wrinkle of a subject after application of the composition according to the invention for two months. FIGS. 4A and 4B show the effect of the composition according to the invention on the depth of the lion's wrinkles in the subject 4.
La figure 4A est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion du sujet 4 avant application de la composition selon l'invention. La figure 4B est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion du sujet 4 après application de la composition selon l'invention pendant deux mois.FIG. 4A is a graph showing in three dimensions the ripples of the lion of subject 4 before application of the composition according to the invention. Figure 4B is a graph showing three-dimensional ripples of the subject 4 lion after application of the composition according to the invention for two months.
Les figures 5A et 5B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur la profondeur des rides du lion chez le sujet 9. La figure 2A est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion du sujet 9 avant application de la composition selon l'invention. La figure 2B est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion du sujet 9 après application de la composition selon l'invention pendant deux mois. Les figures 6A et 6B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur les rides de la patte d'oie. La figure 6A est une photographie de la zone de la ride de la patte d'oie d'un sujet avant application de la composition selon l'invention. La figure 6B est une photographie de la zone de la ride de la patte d'oie d'un sujet après application de la composition selon l'invention pendant deux mois. Les figures 7A et 7B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur la profondeur des rides de la patte d'oie chez un sujet. La figure 7A est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion d'un sujet avant application de la composition selon l'invention.FIGS. 5A and 5B show the effect of the composition according to the invention on the depth of the lion's wrinkles in the subject 9. FIG. 2A is a graph showing in three dimensions the wrinkles of the subject's lion 9 before application of the composition according to the invention. Figure 2B is a graph showing three-dimensional ripples of the subject 9 lion after application of the composition according to the invention for two months. FIGS. 6A and 6B show the effect of the composition according to the invention on the wrinkles of the crow's feet. Figure 6A is a photograph of the area of the wrinkle of the crow's feet of a subject before application of the composition according to the invention. Figure 6B is a photograph of the area of the wrinkle of the crow's feet of a subject after application of the composition according to the invention for two months. FIGS. 7A and 7B show the effect of the composition according to the invention on the depth of crow's feet wrinkles in a subject. FIG. 7A is a graph showing in three dimensions the ripples of the lion of a subject before application of the composition according to the invention.
La figure 7B est un graphique représentant en trois dimensions les rides du lion d'un sujet après application de la composition selon l'invention pendant deux mois. Les figures 8A et 8B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur l'augmentation de densité et d'épaisseur du derme chez le sujet 3.Figure 7B is a graph showing three-dimensional ripples of a lion subject after application of the composition according to the invention for two months. FIGS. 8A and 8B show the effect of the composition according to the invention on the increase in density and thickness of the dermis in the subject 3.
La figure 8A est une photographie d'une échographie de la joue du patient 3 avant application de la composition selon l'invention. La figure 8B est une photographie d'une échographie de la joue du patient 3 après application de la composition selon l'invention pendant 2 mois.FIG. 8A is a photograph of an ultrasound of the cheek of patient 3 before application of the composition according to the invention. Figure 8B is a photograph of an ultrasound of the cheek of patient 3 after application of the composition according to the invention for 2 months.
Les figures 9A et 9B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur l'augmentation de densité et d'épaisseur du derme chez le sujet 4. La figure 9A est une photographie d'une échographie de la joue du patient 4 avant application de la composition selon l'invention. La figure 9B est une photographie d'une échographie de la joue du patient 4 après application de la composition selon l'invention pendant 2 mois. Les figures 10A et 10B montrent l'effet de la composition selon l'invention sur l'augmentation de densité et d'épaisseur du derme chez le sujet 7. La figure 10A est une photographie d'une échographie de la joue du patient 7 avant application de la composition selon l'invention. La figure 10B est une photographie d'une échographie de la joue du patient 7 après application de la composition selon l'invention pendant 2 mois. La figure 11 représente une image d'immunohistochimie montrant la progérine au niveau des cellules du derme superficiel et moyen, sur une peau témoin (grossissement 400 fois). La figure 12 représente une image d'immunohistochimie montrant la progérine au niveau des cellules du derme superficiel et moyen, sur une peau vieillie par UV (grossissement 400 fois).FIGS. 9A and 9B show the effect of the composition according to the invention on the increase in density and thickness of the dermis in the subject 4. FIG. 9A is a photograph of an ultrasound of the cheek of the patient 4 before application of the composition according to the invention. Figure 9B is a photograph of an ultrasound of the cheek of patient 4 after application of the composition according to the invention for 2 months. FIGS. 10A and 10B show the effect of the composition according to the invention on the increase of density and thickness of the dermis in the subject 7. FIG. 10A is a photograph of an ultrasound of the cheek of the patient 7 before application of the composition according to the invention. Figure 10B is a photograph of an ultrasound of the cheek of the patient 7 after application of the composition according to the invention for 2 months. FIG. 11 represents an immunohistochemistry image showing progerin at the level of the cells of the superficial and average dermis, on a control skin (magnification 400 times). FIG. 12 represents an immunohistochemistry image showing progerin at the level of the cells of the superficial and average dermis, on a skin aged by UV (magnification 400 times).
La figure 13 représente une image d'immunohistochimie montrant la progérine au niveau des cellules du derme superficiel et moyen, sur une peau vieillie par UV et traitée avec la composition selon l'invention (grossissement 400 fois). La figure 14 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau témoin (peau témoin n3; grossissement 200 fois). La figure 15 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau vieillie par UV (peau témoin n3; grossissement -12- 200 fois). La figure 16 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau vieillie par UV et traitée avec la composition selon l'invention (peau témoin nc3 ; grossissement 200 fois).FIG. 13 represents an immunohistochemistry image showing progerin at the level of the cells of the superficial and average dermis, on a skin aged by UV and treated with the composition according to the invention (magnification 400 times). Figure 14 shows an immunohistochemistry image showing red sinus colored collagen, on a control skin (control skin n3, 200-fold magnification). Figure 15 shows an immunohistochemistry image showing sinus red stained collagen on UV aged skin (control skin n3, magnification -200x). FIG. 16 represents an immunohistochemical image showing the collagen stained with red sinus on a skin aged by UV and treated with the composition according to the invention (control skin nc3, magnification 200 times).
La figure 17 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau témoin (peau témoin n°4 ; grossissement 200 fois). La figure 18 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau vieillie par UV (peau témoin n°4 ; grossissement 200 fois). La figure 19 représente une image d'immunohistochimie montrant le collagène coloré au rouge sinus, sur une peau vieillie par UV et traitée avec la composition selon l'invention (peau témoin n°4 ; grossissement 200 fois). La figure 20 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau témoin (peau témoin nc5 ; grossissement 200 fois). La figure 21 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau vieillie par UV (peau témoin nc5 ; grossissement 200 fois).Figure 17 shows an immunohistochemistry image showing red sinus colored collagen, on a control skin (control skin No. 4, 200-fold magnification). Figure 18 shows an immunohistochemical image showing red sinus colored collagen on UV aged skin (control skin # 4, 200x magnification). FIG. 19 represents an immunohistochemistry image showing the collagen stained with red sinus, on a skin aged by UV and treated with the composition according to the invention (control skin No. 4, magnification 200 times). Figure 20 shows an immunohistochemistry image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on a control skin (control skin nc5, 200-fold magnification). Figure 21 shows an immunohistochemistry image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on UV aged skin (control skin nc5, 200-fold magnification).
La figure 22 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau vieillie par UV et traitée avec la composition selon l'invention (peau témoin n5; grossissement 200 fois). La figure 23 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau témoin (peau témoin nc9 ; grossissement 200 fois). La figure 24 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau vieillie par UV (peau témoin nc9 ; grossissement 200 fois). La figure 25 représente une image d'immunohistochimie montrant des Glycosaminoglycannes colorés au bleu Alcian, sur une peau vieillie par UV et traitée avec la composition selon l'invention (peau témoin n9; grossissement 200 fois). Exemples Exemple 1 : Composition avantageuse selon l'invention Une composition avantageuse de l'invention comprend les composés suivants, exprimés en poids de la composition totale : - 13 - Composés qsp Eau 57,5% Glycérine 21,7% Extrait d'Iris pâle 0,1% Protéines de soja hydrolysées (CAS: 9010-10-0 et 68607-55-5) 0,065% Trifluoroacétyl tripeptide-2 0,002% Géranylgéranyl isopropanol 0,0003% Autres composés (liants, 100% émollients, hydratants...) Exemple 2: Mesure de l'efficacité de la composition selon l'invention - mesures dermatologiques L'objectif de cette étude est d'évaluer cliniquement l'effet anti-âge de la composition selon l'invention, telle que définie à l'exemple 1 chez 10 sujets présentant une diminution de la fermeté du visage et des signes de vieillissement avec présence de rides et ridules de la patte d'oie et du front sujets (femmes) d'âge moyen de 49,8 ans ± 7,5 ont été inclus dans l'étude et présentaient les signes suivants : 10 - Signes cliniques de vieillissement, et - Présence de rides et de ridules du front et/ou de la patte d'oie. Chaque sujet a appliqué la composition selon l'invention deux fois par jour pendant 8 semaines, les observations ont été faites avant la première application (MO), après quatre semaines (M1) et après huit semaines (M2). a - Analyse dermatologique de l'éclat du teint Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Une augmentation statistiquement significative de l'éclat du teint est observée après 1 mois de traitement avec un score de 2,6 versus 2,1 à MO (p=0,001).Figure 22 shows an immunohistochemical image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on UV aged skin treated with the composition of the invention (control skin n5, 200x magnification). Figure 23 shows an immunohistochemistry image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on control skin (control skin nc9, 200-fold magnification). Figure 24 shows an immunohistochemistry image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on UV aged skin (control skin nc9, 200-fold magnification). Fig. 25 shows an immunohistochemistry image showing Alcian-blue stained Glycosaminoglycans on UV aged skin and treated with the composition according to the invention (control skin n9, 200-fold magnification). EXAMPLES Example 1 Advantageous Composition According to the Invention An advantageous composition of the invention comprises the following compounds, expressed by weight of the total composition: - Compounds qsp Water 57.5% Glycerin 21.7% Pale Iris extract 0.1% Hydrolyzed Soy Protein (CAS: 9010-10-0 and 68607-55-5) 0.065% Trifluoroacetyl tripeptide-2 0.002% Geranylgeranyl isopropanol 0.0003% Other compounds (binders, 100% emollients, moisturizers ... EXAMPLE 2 Measurement of the Efficacy of the Composition According to the Invention - Dermatological Measures The objective of this study is to evaluate clinically the anti-aging effect of the composition according to the invention, as defined in US Pat. Example 1 in 10 subjects with a decrease in facial firmness and signs of aging with the presence of wrinkles and fine lines in the crow's feet and forehead (middle-aged) women aged 49.8 ± 7.5 were included in the study and presented with the following signs: aging, and - Presence of wrinkles and fine lines on the forehead and / or crow's feet. Each subject applied the composition according to the invention twice daily for 8 weeks, observations were made before the first application (MO), after four weeks (M1) and after eight weeks (M2). a - Dermatological analysis of the radiance of the complexion The measurements carried out are indicated in semi-quantitative scores. A statistically significant increase in radiance was observed after 1 month of treatment with a score of 2.6 versus 2.1 at MO (p = 0.001).
Cette augmentation de l'éclat du teint se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un score de 3,2 versus 2,6 à M1 (correspondant à 34,4 % d'augmentation par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 2 2,5 3 2 1 2 SE 3 2 3 3,5 4 2,5 3 3,5 5 2,8 3 3 - 14 - Sujet MO M1 M2 6 2 2,5 3,5 7 2,8 3 3 8 2 2,2 3,5 9 2,5 2,5 3,5 10 1 2 2,5 Aussi, la composition selon l'invention améliore l'éclat du teint chez les sujets. b -Evaluation de la profondeur des rides du front i- Analyse dermatologique (scores semi quantitatifs de 0 à 8) Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Après 1 mois de traitement, une diminution significative de la profondeur des rides du front est observée avec un score de 4,3 versus 5,0 à MO (p=0,001). Cette diminution de la profondeur des rides du front se poursuit entre 1 et 2 mois de traitement avec un score de 3,9 versus 4,3 à M1 mois (correspondant à 22,0 % de diminution par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 6 4,5 4,5 2 7 6,5 SE 4 6,5 6 6 5 5,5 5 4,5 6 5 4,5 4 7 2 2 1,8 8 5,5 4 4 9 3,75 2,5 2,5 10 3,75 3,5 3,5 ii- Mesure du volume de la ride du front (V/mm2) Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs.This increase in the radiance of the complexion continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a score of 3.2 versus 2.6 to M1 (corresponding to 34.4% increase compared to MO). The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 2 2,5 3 2 1 2 SE 3 2 3 3,5 4 2,5 3 3,5 5 2,8 3 3 - 14 - Subject MO M1 M2 6 2 2.5 3.5 7 2.8 3 3 8 2 2.2 3.5 9 2.5 2.5 3.5 10 1 2 2.5 Also, the composition according to the invention improves the radiance of the complexion in the subjects. b -Evaluation of forehead wrinkle depth i- Dermatological analysis (semi-quantitative scores from 0 to 8) The measurements performed are indicated in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant decrease in forehead wrinkle depth was observed with a score of 4.3 versus 5.0 at MO (p = 0.001). This reduction in the depth of forehead wrinkles continues between 1 and 2 months of treatment with a score of 3.9 versus 4.3 at M1 months (corresponding to a 22.0% decrease compared with MO). The data obtained for each subject is indicated in the following table: Subject MO M1 M2 1 6 4,5 4,5 2 7 6,5 SE 4 6,5 6 6 5 5,5 5 4,5 6 5 4,5 4 7 2 2 1,8 8,5,5 4 4 9 3,75 2,5 2,5 10 3,75 3,5 3,5 ii- Measuring forehead wrinkle volume (V / mm2) Measurements performed are indicated in semi-quantitative scores.
Après 1 mois de traitement, une diminution significative du volume des rides du front est observée avec 38,62 V/mm2 versus 45,63 à MO (p=0,00003). Cette diminution se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un volume de 37,46 versus 38,62 V/mm2 à M2 mois (correspondant à 17,9 % de diminution par rapport à MO).After 1 month of treatment, a significant reduction in the volume of forehead wrinkles was observed with 38.62 V / mm 2 versus 45.63 at MO (p = 0.00003). This decrease continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a volume of 37.46 versus 38.62 V / mm2 at M2 months (corresponding to 17.9% decrease compared to MO).
Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 61 51,47 49,79 2 33,03 26,31 SE 4 33,65 27 27,53 5 36,17 25,56 23,17 6 55,66 50 42,25 7 45,05 36,88 34,6 - 15 - Sujet MO M1 M2 8 58,27 48,76 45,67 9 49,33 44,77 40 10 38,54 36,8 36,7 Collectivement, ces résultats montrent un effet significatif sur les rides du front après deux mois d'application de la composition selon l'invention.The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 61 51,47 49,79 2 33,03 26,31 SE 4 33,65 27 27,53 5 36,17 25,56 23, 17 6 55.66 50 42.25 5 45.05 36.88 34.6 - 15 - Subject MO M1 M2 8 58.27 48.76 45.67 9 49.33 44.77 40 10 38.54 36 Collectively, these results show a significant effect on forehead wrinkles after two months of application of the composition according to the invention.
Les figures 1A et 1B montrent un exemple (sujet 6) de rides du front avant application (Figure lA ; MO) et après deux mois d'applications de la composition selon l'invention (Figure 1B ; M2) Par ailleurs, des analyses quantitatives de la profondeur des rides du lion sont représentées en trois dimensions aux figures 2A (MO) et 2B (M2) c- Analyse de la profondeur de la ride du lion i- Analyse dermatologique Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Après 1 mois de traitement, une diminution significative de la profondeur de ride du lion est observée avec un score de 5,2 versus 6,3 à MO (p=0,001). Cette diminution se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un score de 4,4 versus 5,2 à M1 (correspondant à 30,1 % de diminution par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 7 6 6 2 5 4,5 SE 3 5 4 4 4 7 6 4 5 7 6,5 6 6 4 3 1,5 7 8 7 6,5 8 7,5 7 6 9 5,75 3 1,5 ii- Mesure du volume de la ride du lion (V/mm2) Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Après 1 mois de traitement, une diminution significative du volume des rides du lion est observée avec un volume de 39,66 versus 48,77 V/mm2 à MO (p=0,00005).FIGS. 1A and 1B show an example (subject 6) of forehead wrinkles before application (FIG. 1A; MO) and after two months of applications of the composition according to the invention (FIG. 1B, M2). Moreover, quantitative analyzes The depths of the lion's wrinkles are shown in three dimensions in FIGS. 2A (MO) and 2B (M2). Analysis of the depth of the lion's wrinkle. Dermatological analysis The measurements made are indicated in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant decrease in the lion's ride depth was observed with a score of 5.2 versus 6.3 at MO (p = 0.001). This decrease continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a score of 4.4 versus 5.2 to M1 (corresponding to a 30.1% decrease compared to MO). The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 7 6 6 2 5 4,5 SE 3 5 4 4 4 7 6 4 5 7 6,5 6 6 4 3 1,5 7 8 7 6,5 8 7,5 7 6 9 5,75 3 1,5 ii- Measuring lion wrinkle volume (V / mm2) Measurements are given in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant decrease in the volume of the lion's wrinkles was observed with a volume of 39.66 versus 48.77 V / mm2 at MO (p = 0.00005).
Cette diminution se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un volume de 33,39 versus 39,66 V/mm2 à M1 (correspondant à 31,5 % de - 16 - diminution par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 52,95 49,12 45,2 2 42,04 30,3 SE 3 56,57 42,36 38,47 4 41,08 29,23 18,89 40,03 27,47 24,9 6 51,86 44,58 25,65 7 32,53 29,31 23,54 8 66,28 58,37 53,74 9 55,6 46,2 36,7 Collectivement, ces résultats montrent un effet significatif sur les rides du lion après deux mois d'application de la composition selon l'invention. 5 Les figures 3A et 3B montrent un exemple (sujet 6) de rides du front avant application (Figure 3 A; MO) et après deux mois d'applications de la composition selon l'invention (Figure 3B; M2) Par ailleurs, des analyses quantitatives de la profondeur des rides du lion sont représentées en trois dimensions aux figures 4A (MO) et 4B (M2) pour le sujet 4 et aux figures 5A (MO) et 5B (M2) pour le sujet 9. d- Analyse dermatologique de la profondeur des rides de la patte d'oie i- Analyse dermatologique Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs.This decrease continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a volume of 33.39 versus 39.66 V / mm 2 at M1 (corresponding to 31.5% decrease compared with MO). The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 52,95 49,12 45,2 2 42,04 30,3 SE 3 56,57 42,36 38,47 4 41,08 29 , 23 18.89 40.03 27.47 24.9 6 51.86 44.58 25.65 7 32.53 29.31 23.54 8 66.28 58.37 53.74 9 55.6 46, Collectively, these results show a significant effect on lion's wrinkles after two months of application of the composition according to the invention. FIGS. 3A and 3B show an example (subject 6) of forehead wrinkles before application (FIG. 3A; MO) and after two months of application of the composition according to the invention (FIG. 3B; M2). Quantitative analyzes of the depth of the lion's wrinkles are shown in three dimensions in Figures 4A (MO) and 4B (M2) for subject 4 and in Figures 5A (MO) and 5B (M2) for subject 9. d- Dermatological analysis the depth of crow's feet wrinkles i- Dermatological analysis The measurements taken are given in semi-quantitative scores.
Après 1 mois de traitement, une diminution significative de la profondeur des rides de la patte d'oie est observée avec un score de 3,3 versus 4,0 à MO (p=0,002). Cette diminution se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un score de 2,5 versus 3,3 à M1 (correspondant à 37,5 % de diminution par rapport à MO).After 1 month of treatment, a significant decrease in the depth of crow's feet wrinkles was observed with a score of 3.3 versus 4.0 at MO (p = 0.002). This decrease continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a score of 2.5 versus 3.3 to M1 (corresponding to 37.5% decrease compared to MO).
Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 5 4,5 4,5 2 7 6 SE 3 3,5 2 1,5 4 5,5 4,5 4 5 3 2,5 1,5 6 1,5 1 0,5 7 5,5 5,5 5 8 2,75 1,5 1 10 2 2 2 ii- Mesure du volume de la ride de la patte d'oie (V/mm2) - 17 - Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Après 1 mois de traitement, une diminution significative du volume des rides de la patte d'oie est observée avec 27,92 V/mm2 versus 33,81 à MO (p=0,00005). Cette diminution se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un volume de 23,50 versus 27,92 V/mm2 à M1 (correspondant à 30,5 % de diminution par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 39,8 33,16 32,73 2 27,42 22,11 SE 3 28,37 20,92 20,23 4 38,06 32,85 25,78 5 20,01 18,49 12,24 6 44,67 38,79 23,2 7 33,96 30,8 27,27 8 28,28 19,43 13,47 43,71 34,7 33,1 Collectivement, ces résultats montrent un effet significatif sur les rides de la patte 10 d'oie après deux mois d'application de la composition selon l'invention. Les figures 6A et 6B montrent un exemple (sujet 6) de rides du front avant application (Figure 6 A; MO) et après deux mois d'applications de la composition selon l'invention (Figure 6B ; M2) Par ailleurs, des analyses quantitatives de la profondeur des rides du lion sont représentées en trois dimensions aux figures 7A (MO) et 7B (M2). e- Evaluation de la densité de la peau par mesure échographique haute fréquence au niveau de la joue Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. Après 1 mois de traitement, une augmentation significative de la densité de la peau au niveau de la joue est observée avec un pourcentage de 58,80 versus 52,68% à MO (p= 0,002). Cette augmentation se poursuit significativement entre 1 et 2 mois de traitement avec un pourcentage de 66,30 versus 58,80 à M1 (correspondant à 25,8 % d'augmentation par rapport à MO). Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 57,73 59,46 61,92 -18- 2 58,2 62,13 SE 3 33,16 51,54 66,28 4 56,42 61,02 67,86 67,53 71,09 84,19 6 55,22 63,83 64,16 7 44,72 48,31 62,55 8 53,26 61,6 66,41 9 67,59 69,33 77,7 33,01 39,7 45,64 f- Evaluation de l'épaisseur du derme par mesure échographique haute fréquence au niveau de la joue Les mesures réalisées sont indiquées en scores semi-quantitatifs. 5 Après 1 mois de traitement, une augmentation significative de l'épaisseur de la peau au niveau de la joue est observée avec une mesure de 1,72 versus 1,58 mm à MO (p= 0,02). Cette augmentation se poursuit entre 1 et 2 mois de traitement avec 1,83 mm versus 1,72 à Ml. Les données obtenues pour chaque sujet sont indiquées dans le tableau suivant : Sujet MO M1 M2 1 1,57 1,68 1,83 2 1,38 1,51 SE 3 1,78 1,76 1,8 4 1,74 1,74 1,64 5 1,76 1,76 1,76 6 1,61 1,63 2,08 7 1,52 1,77 1,98 8 1,66 1,8 1,82 9 1,32 1,5 1,46 10 1,43 2,07 2,08 10 Les photographies des échographies permettent de visualiser cette augmentation de densité et d'épaisseur du derme sont représentées aux figures 8A-B (sujet 3), 9A-B (sujet 4) et 10A-B (sujet 7).The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 5 4,5 4,5 2 7 6 SE 3 3,5 2 1,5 4 5,5 4,5 4 5 3 2,5 1,5 6 1,5 1 0,5 7,5,5 5,5 5 8 2,75 1,5 1 10 2 2 2 ii- Measuring the volume of crow's foot wrinkle (V / mm2) The measurements taken are indicated in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant decrease in the volume of crow's feet wrinkles was observed with 27.92 V / mm2 versus 33.81 at MO (p = 0.00005). This decrease continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a volume of 23.50 versus 27.92 V / mm2 at M1 (corresponding to a 30.5% decrease compared to MO). The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 39.8 33.16 32.73 2 27.42 22.11 SE 3 28.37 20.92 20.23 4 38.06 32 , 85 25.78 5 20.01 18.49 12.24 6 44.67 38.79 23.2 7 33.96 30.8 27.27 8 28.28 19.43 13.47 43.71 34, 33.1 Collectively, these results show a significant effect on the wrinkles of the goose paw after two months of application of the composition according to the invention. FIGS. 6A and 6B show an example (subject 6) of forehead wrinkles before application (FIG. 6A; MO) and after two months of applications of the composition according to the invention (FIG. 6B; M2). The quantitative depths of the lion's wrinkles are shown in three dimensions in FIGS. 7A (MO) and 7B (M2). e- Evaluation of the density of the skin by high frequency ultrasound measurement at the cheek The measurements performed are indicated in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant increase in the density of the skin at the level of the cheek is observed with a percentage of 58.80 versus 52.68% at MO (p = 0.002). This increase continues significantly between 1 and 2 months of treatment with a percentage of 66.30 versus 58.80 to M1 (corresponding to 25.8% increase compared to MO). The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 57.73 59.46 61.92 -18- 2 58.2 62.13 SE 3 33.16 51.54 66.28 4 56 , 42 61.02 67.86 67.53 71.09 84.19 6 55.22 63.83 64.16 7 44.72 48.31 62.55 5 53.26 61.6 66.41 9 67, 59 69,33 77,7 33,01 39,7 45,64 f- Evaluation of dermal thickness by high frequency ultrasound measurement at the cheek Measurements are given in semi-quantitative scores. After 1 month of treatment, a significant increase in the thickness of the skin at the cheek is observed with a measurement of 1.72 versus 1.58 mm at MO (p = 0.02). This increase continues between 1 and 2 months of treatment with 1.83 mm versus 1.72 with Ml. The data obtained for each subject are given in the following table: Subject MO M1 M2 1 1.57 1.68 1.83 2 1.38 1.51 SE 3 1.78 1.76 1.8 4 1.74 1 , 74 1.64 5 1.76 1.76 1.76 6 1.61 1.63 2.08 7 1.52 1.77 1.98 8 1.66 1.8 1.82 9 1.32 1 1.46 10 1.43 2.07 2.08 10 The photographs of the ultrasounds allow to visualize this increase in density and thickness of the dermis are shown in Figures 8A-B (subject 3), 9A-B (subject 4) and 10A-B (subject 7).
Exemple 3: Mesure de l'efficacité de la composition selon l'invention - mesures in vitro Pour permettre de retarder ou contrer le vieillissement, le produit cosmétique idéal doit être capable de rajeunir la cellule. L'objectif de cette étude a été de mettre en évidence la modulation de l'expression de la progérine, protéine exprimée essentiellement par les fibroblastes au cours du vieillissement, après application de la composition selon l'exemple 1. La conséquence d'un rajeunissement cellulaire se traduit par une augmentation - 19 - du métabolisme des fibroblastes de la peau avec, notamment, stimulation de la synthèse de collagène. Par ailleurs, l'analyse de la quantité de glycosaminoglycannes permet de restaurer la perte de contact entre les fibroblastes et le tissu conjonctif.EXAMPLE 3 Measurement of the Efficacy of the Composition According to the Invention - In Vitro Measurements In order to make it possible to delay or counteract aging, the ideal cosmetic product must be capable of rejuvenating the cell. The aim of this study was to demonstrate the modulation of the expression of progerin, a protein essentially expressed by fibroblasts during aging, after application of the composition according to Example 1. The consequence of rejuvenation The cellular system results in an increase in the metabolism of the fibroblasts of the skin with, in particular, stimulation of collagen synthesis. Moreover, the analysis of the amount of glycosaminoglycans makes it possible to restore the loss of contact between the fibroblasts and the connective tissue.
MATERIEL ET METHODES I. Evaluation du rajeunissement cellulaire 1) Maintien de peaux humaines en survie par culture d'organe Des fragments de peau humaine normale ont été obtenus en chirurgie plastique (lifting) chez des femmes âgées de 55 ans et plus.MATERIALS AND METHODS I. Evaluation of cell rejuvenation 1) Maintenance of human skin survival by organ culture Normal human skin fragments were obtained in plastic surgery (facelift) in women aged 55 and over.
Les peaux ont été déposées dans des inserts eux-mêmes positionnés sur des puits de culture. Du milieu de culture (antibiotiques, SVF) a été ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par l'intermédiaire d'une membrane poreuse (8 pm). 2) Modèle de vieillissement chronologique sur peau humaine maintenue en survie Afin d'obtenir un vieillissement de la peau proche de celui observé au cours du vieillissement chronologique, nous avons réalisé un stress oxydatif avec des petites doses de rayonnement UV A (4 J/cm2) et UV B (2 J/cm2) à JO. Composition de l'exemple 1 a été appliquée à la surface de la peau une fois par jour pendant 3 jours. 3 conditions ont été analysées : -Peau témoin -Peau + vieillissement par UV -Peau + vieillissement par UV + composition selon l'invention.The skins were deposited in inserts themselves positioned on culture wells. Culture medium (antibiotics, FCS) was added to the bottom of the wells, a passage being carried out by slow diffusion between the two compartments through a porous membrane (8 μm). 2) Chronological aging model on human skin maintained in survival In order to obtain aging of the skin close to that observed during chronological aging, we achieved oxidative stress with small doses of UV-A radiation (4 J / cm2 ) and UV B (2 J / cm2) at OJ. Composition of Example 1 was applied to the surface of the skin once a day for 3 days. 3 conditions were analyzed: -Skin control -Peau + aging by UV -Peau + aging by UV + composition according to the invention.
Les cultures ont été stoppées à J4 et les fragments de peau sont congelés (à - 20(C) 3) Analyse immunohistochimique de la progérine La sénescence cellulaire est caractérisée par des changements physiologiques, structuraux, biochimiques et moléculaires. Parmi les caractéristiques biochimiques et moléculaires, on peut citer : - modifications de l'activité enzymatique comme l'augmentation de l'activité SA-P-Gal ; Augmentation de l'expression de la progérine sur-expression d'inhibiteurs du cycle cellulaire baisse du potentiel métabolique et régénérateur ; résistance à la mort par apoptose -20 - L'immunodétection de la progérine a été réalisée à l'aide d'un anticorps monoclonal (provenance : Alexis Biohemicals ; dilution 1/10). La révélation a nécessité l'utilisation du kit OSA (DAKO) et de l'AEC.The cultures were stopped on D4 and the skin fragments were frozen (at - 20 (C) 3) Immunohistochemical analysis of progerin Cellular senescence is characterized by physiological, structural, biochemical and molecular changes. Among the biochemical and molecular characteristics, mention may be made of: modifications of the enzymatic activity such as the increase of the SA-β-Gal activity; Increased expression of progerin over-expression of cell cycle inhibitors decreased metabolic and regenerative potential; resistance to death by apoptosis The immunodetection of progerin was carried out using a monoclonal antibody (provenance: Alexis Biohemicals, dilution 1/10). The revelation required the use of the OSA kit (DAKO) and the AEC.
Les cellules détectées positives à la progérine dans le derme ont été de façon prédominante des fibroblastes mais également des cellules dendritiques (histiocytes) et des mastocytes. Le nombre de cellules exprimant la progérine par champ analysé (taille du champ au grossissement x400 = 65 712 pm2) a été déterminé d'une part dans le derme superficiel et moyen (partie haute) et d'autre part dans le derme moyen (partie inférieure) et profond. Une moyenne est calculée sur l'ensemble des champs analysés par condition. Il. Evaluation des conséquences du rajeunissement de la peau 1) Maintien de peaux humaines en survie par culture d'organe Des fragments de peau humaine normale ont été obtenus en chirurgie plastique (lifting) chez des femmes âgées de 55 ans et plus. Les peaux ont été déposées dans des inserts eux-mêmes positionnés sur des puits de culture. Du milieu de culture (antibiotiques, SVF) a été ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par l'intermédiaire d'une membrane poreuse (8 pm). 2) Modèle de vieillissement actinique sur peau humaine maintenue en survie Afin d'obtenir un vieillissement de la peau proche de celui observé au cours du vieillissement actinique, nous avons réalisé un stress oxydatif avec des doses élevées de rayonnement UV A (8 J/cm2) et UV B (4 J/cm2) à JO et à J1. La composition selon l'invention a été appliquée en préventif et en curatif à la surface de la peau une fois par jour pendant 7 et 14 jours. 3 conditions ont été analysées : -Peau témoin -Peau + vieillissement par UV -Peau + vieillissement par UV + composition selon l'invention. Les cultures ont été stoppées à J7 et J14, les fragments de peau ont été congelés (à -20(C) et fixés dans le formol pour permettre de réaliser les analyses immunohistochimiques. 3) Analyses -21- a) Evaluation de la stimulation de la synthèse de néo-collagène Après les 14 jours de mise en survie, les fragments de peaux ont été digérés enzymatiquement pendant une nuit à +4`C dans une so lution d'acide acétique à 0,5M contenant de la pepsine. Cette méthode permet de récupérer le collagène nouvellement synthétisé. Après broyage à l'aide d'un potter, la quantité de collagène (pg/ml) a été évaluée par une méthode de dosage spectrocolorimétrique à 540 nm: le collagène acido-soluble est détecté après fixation spécifique du colorant rouge sinus (Sircol Collagen Assay, lnterchim). Le résultat final est exprimé en pg de collagène / mg de poids frais. b) Quantification du collagène par analyse morphométrique Les fragments de peau ont été fixés à J14 dans le formol et inclus en paraffine. A partir de coupes histologiques de 4 pm d'épaisseur, les faisceaux de collagène ont été révélées par une coloration au rouge sinus et quantifiées morphométriquement par analyse d'image assistée par ordinateur. Le pourcentage de surface de derme superficiel et moyen occupé par le collagène a été mesuré. c) Analyse histologique des glycosaminoglycannes par le bleu alcian Les glycosaminoglycannes totaux (dont l'acide hyaluronique) ont été mis en évidence par la coloration de Hale à J7. Une évaluation semi-quantitative à l'aide de scores semi-quantitatifs a permis de mettre en évidence les éventuelles modifications de la quantité de glycosaminoglycannes au niveau de l'épiderme et du derme : - score 0: absence de coloration - score 1: intensité légère - score 2: intensité modérée - score 3: intensité importante - score 4: intensité très importante.Progerin-positive cells in the dermis were predominantly fibroblasts but also dendritic cells (histiocytes) and mast cells. The number of cells expressing progerin per analyzed field (size of the field at magnification x400 = 65,712 pm2) was determined on the one hand in the superficial and middle dermis (upper part) and on the other hand in the middle dermis (part lower) and deep. An average is calculated on all the fields analyzed by condition. He. Evaluation of the consequences of skin rejuvenation 1) Maintenance of human skins in survival by organ culture Normal human skin fragments have been obtained in plastic surgery (face lift) in women aged 55 and over. The skins were deposited in inserts themselves positioned on culture wells. Culture medium (antibiotics, FCS) was added to the bottom of the wells, a passage being carried out by slow diffusion between the two compartments through a porous membrane (8 μm). 2) Actinic aging model on human skin maintained in survival In order to obtain a skin aging approaching that observed during actinic aging, we achieved oxidative stress with high doses of UV-A radiation (8 J / cm 2 ) and UV B (4 J / cm2) at OJ and D1. The composition according to the invention has been applied as a preventive and curative to the surface of the skin once a day for 7 and 14 days. 3 conditions were analyzed: -Skin control -Peau + aging by UV -Peau + aging by UV + composition according to the invention. The cultures were stopped on days 7 and 14, the skin fragments were frozen (at -20 ° C.) and fixed in formalin to allow immunohistochemical analyzes to be carried out 3) Analyzes a) Evaluation of the stimulation of neo-collagen synthesis After 14 days of survival, the skin fragments were enzymatically digested overnight at +4 ° C. in a solution of 0.5M acetic acid containing pepsin. This method makes it possible to recover the newly synthesized collagen. After grinding with a potter, the amount of collagen (pg / ml) was evaluated by a spectrocolorimetric assay method at 540 nm: the acid-soluble collagen is detected after specific fixation of the red sinus dye (Sircol Collagen Assay, Interchim). The final result is expressed as pg collagen / mg fresh weight. b) Quantification of collagen by morphometric analysis The skin fragments were fixed on day 14 in formalin and included in paraffin. From histological sections of 4 μm thickness, the collagen bundles were revealed by sinus red staining and morphometrically quantified by computer-assisted image analysis. The percentage of superficial and average dermal surface occupied by collagen was measured. c) Histological analysis of the glycosaminoglycans by the alcian blue The total glycosaminoglycans (including hyaluronic acid) were highlighted by the staining of Hale at J7. A semi-quantitative evaluation using semi-quantitative scores made it possible to highlight any changes in the amount of glycosaminoglycans in the epidermis and dermis: - score 0: absence of coloring - score 1: intensity light - score 2: moderate intensity - score 3: high intensity - score 4: very important intensity.
III. Expression des résultats et analyse statistique Une étude comparative des résultats a été effectuée entre les peaux témoins, les peaux vieillies et les peaux vieillies et traitées par la composition selon l'invention. L'analyse statistique a été effectuée par le test de Student apparié avec un risque alpha de 5%.III. Expression of the results and statistical analysis A comparative study of the results was carried out between the control skins, the aged skins and the skins aged and treated by the composition according to the invention. Statistical analysis was performed by the paired Student test with an alpha risk of 5%.
RESULTATS I. Evaluation du rajeunissement cellulaire -22 - Analyse immunohistochimique de la progérine Les résultats de l'expression de la progérine sont représentés dans le tableau suivant (moyenne obtenue sur les 6 donneurs) et illustrés par les figures 11 à 13. nombre de cellules positives par champ Peau témoin 0,19 ± 0,1 Peau + vieillissement par UV 1,41 ± 0,6 # p= 0,006 Peau + vieillissement par UV + 0,35 ± 0,2 composition selon l'invention * p= 0,003 Dans le modèle de peau vieillie expérimentalement par UV, une augmentation significative de cellules progérine positives a été notée avec un nombre moyen de cellules marquées par champ de 1,41 versus 0,19 au niveau de la peau témoin non traitée (p = 0,006). Une diminution significative de l'intensité du marquage de la progérine a été observée après traitement par la composition selon l'invention avec un score de 0,35 en comparaison avec la peau contrôle (vieillissement expérimental par UV) où le score obtenu est de 1,41 (p=0,003), soit une diminution de 75,2%. Il. Evaluation des conséquences du rajeunissement de la peau a) Evaluation de la stimulation de la synthèse de néo-collagène Les résultats du dosage de collagène sont représentés dans le tableau suivant (moyenne obtenue pour 6 donneurs). pg de collagène / mg de poids frais Peau témoin 21,32 ± 8,0 Peau + vieillissement par UV 12,78 ± 5,6 # p= 0,006 Peau + vieillissement par UV + 16,62 ± 5,7 composition selon l'invention * p= 0,004 25 Le modèle de vieillissement par UV entraine un ralentissement du métabolisme des fibroblastes entrainant une diminution de la synthèse de collagène (12,78 pg/mg) versus la peau témoin où le taux est de 21,32 pg/mg (p = 0,006). Une augmentation significative de la synthèse de collagène a été observée après 30 traitement par la composition selonl'invention avec un taux de 16,62 pg/mg en comparaison avec la peau contrôle (vieillissement expérimental par UV) où le taux20 -23 - obtenu est de 12,78 pg/mg (p=0,004), soit une augmentation de 30%. b) Quantification du collagène par analyse morphométrique Les résultats de la morphométrie du collagène sont représentés dans le tableau suivant (moyenne obtenue pour 6 donneurs) et illustrés par les Figures 14 à 19. % Peau témoin 66,34 ± 8,0 Peau + vieillissement par UV 56 ± 5,3 # p= 0,002 Peau + vieillissement par UV + 66,35 ± 9,9 composition selon l'invention * p= 0,013 Le modèle de vieillissement par UV entraine une diminution de la densité du collagène dermique avec un % de 56 versus la peau témoin où le % est de 66,34 (p = 0,002), soit une baisse de 15,5%.RESULTS I. Evaluation of Cell Rejuvenation-Immunohistochemical Analysis of Progerin The results of the expression of progerin are shown in the following table (average obtained on the 6 donors) and illustrated in FIGS. 11 to 13. positive per field Control skin 0.19 ± 0.1 Skin + UV aging 1.41 ± 0.6 # p = 0.006 Skin + aging by UV + 0.35 ± 0.2 composition according to the invention * p = 0.003 In the model of skin experimentally aged by UV, a significant increase in progerin positive cells was noted with a mean number of cells labeled per field of 1.41 versus 0.19 in the untreated control skin (p = 0.006). . A significant decrease in the intensity of progerin labeling was observed after treatment with the composition according to the invention with a score of 0.35 in comparison with the skin control (experimental aging by UV) where the score obtained is 1 , 41 (p = 0.003), a decrease of 75.2%. He. Evaluation of the consequences of skin rejuvenation a) Evaluation of the stimulation of neo-collagen synthesis The results of the collagen assay are represented in the following table (average obtained for 6 donors). pg collagen / mg fresh weight Skin control 21.32 ± 8.0 Skin + aging by UV 12.78 ± 5.6 # p = 0.006 Skin + aging by UV + 16.62 ± 5.7 composition according to the invention * p = 0.004 The UV aging model leads to a slowing of fibroblast metabolism leading to a decrease in collagen synthesis (12.78 pg / mg) versus control skin where the level is 21.32 pg / mg (p = 0.006). A significant increase in collagen synthesis was observed after treatment with the composition according to the invention with a level of 16.62 μg / mg compared with control skin (experimental UV aging) where the level obtained was 12.78 pg / mg (p = 0.004), an increase of 30%. b) Quantification of Collagen by Morphometric Analysis The results of collagen morphometry are shown in the following table (average obtained for 6 donors) and illustrated in FIGS. 14 to 19.% Control skin 66.34 ± 8.0 Skin + aging by UV 56 ± 5.3 # p = 0.002 Skin + aging by UV + 66.35 ± 9.9 composition according to the invention * p = 0.013 The UV aging model leads to a decrease in the density of dermal collagen with a % of 56 versus control skin where% is 66.34 (p = 0.002), a decrease of 15.5%.
Une augmentation significative du collagène dermique a été observée après traitement par la composition selon l'invention avec un % de 66,35% en comparaison avec la peau contrôle (vieillissement expérimental par UV) où le % de collagène dermique mesuré est de 56 (p=0,013), soit une augmentation de 18,5%. c) Analyse histologique des glycosaminoglycannes par le bleu alcian Les résultats de l'analyse des glycosaminoglycannes sont représentés dans les Tableaux suivants (moyenne obtenue pour 6 donneurs) et illustrés par les Figures 20 à 25.A significant increase in dermal collagen was observed after treatment with the composition according to the invention with a 66.35%% in comparison with the control skin (experimental aging by UV) where the% of dermal collagen measured is 56 (p = 0.013), an increase of 18.5%. c) Histological analysis of the glycosaminoglycans by the alcian blue The results of the analysis of the glycosaminoglycans are represented in the following tables (mean obtained for 6 donors) and illustrated in FIGS. 20 to 25.
Analyse histologique des glycosaminoglycannes par le bleu alcian dans l'épiderme : score Intensité Peau témoin 1,95 ± 1,0 Peau + vieillissement par UV 0,54 ± 0,5 # p= 0,02 Peau + vieillissement par UV + composition de l'invention 0,82 ± 0,4 Analyse histologique des glycosaminoglycannes par le bleu alcian dans le derme superficiel : -24 - score Intensité Peau témoin 0,51 ± 0,4 Peau + vieillissement par UV 1,72 ± 0,9 Peau + vieillissement part UV+ 2,63 ± 0,6 composition de l'invention * p= 0,02 Analyse histologique des glycosaminoglycannes par le bleu alcian dans le derme Moyen profond : score Intensité Peau témoin 1,58 ± 1,2 Peau + vieillissement par UV 1,86 ± 0,9 Peau + vieillissement par UV + composition de l'invention 2,58 ± 0,6 * p= 0,015 Une augmentation de la quantité de glycosaminoglycannes a été obtenue au niveau des différents compartiments de la peau après traitement par la composition selon l'invention avec : - au niveau de l'épiderme, un score de 0,82 versus 0,54 pour la peau contrôle, - au niveau du derme superficiel, un score de 2,63 versus 1,72 (p=0,02) pour la peau contrôle soit une augmentation significative de 52,9%), - au niveau du derme moyen-profond, un score de 2,58 versus 1,86 (p=0,015) pour la peau contrôle (soit une augmentation significative de 38,7%) CONCLUSION Dans ce modèle de peau humaine maintenue en survie, une diminution significative de l'expression de la progérine, marqueur cellulaire de vieillissement, a été observée au niveau des cellules du derme (fibroblastes, histiocytes et mastocytes) après application de la composition selon l'invention. La stimulation de l'expression des glycosaminoglycannes au niveau du derme après application de la composition selon l'invention a permis de limiter la perte de contact entre les fibroblastes et le tissu conjonctif. Le fibroblaste ayant retrouvé un positionnement favorable au sein du derme, son métabolisme se trouve en conséquence réactivé. Le rajeunissement cellulaire associé à une augmentation des glycosaminoglycannes a permis de relancer le métabolisme du fibroblaste de la peau induisant une stimulation de la synthèse de collagène. -25- L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation présentés et d'autres modes de réalisation apparaîtront clairement à l'homme du métier.Histological analysis of glycosaminoglycans by alcian blue in the epidermis: score Intensity Control skin 1.95 ± 1.0 Skin + UV aging 0.54 ± 0.5 # p = 0.02 Skin + aging by UV + composition the invention 0.82 ± 0.4 Histological analysis of glycosaminoglycans by alcian blue in the superficial dermis: -24 - score Intensity control skin 0.51 ± 0.4 Skin + aging by UV 1.72 ± 0.9 Skin + aging UV part + 2,63 ± 0,6 composition of the invention * p = 0,02 Histological analysis of glycosaminoglycans by alcian blue in the dermis Medium deep: score Intensity Skin control 1,58 ± 1,2 Skin + aging by UV 1.86 ± 0.9 Skin + aging by UV + composition of the invention 2.58 ± 0.6 * p = 0.015 An increase in the amount of glycosaminoglycans was obtained at the level of the different compartments of the skin after treatment with the composition according to the invention with: - at the level of the epidermis, a score of 0.82 v ersus 0.54 for skin control, - in the superficial dermis, a score of 2.63 versus 1.72 (p = 0.02) for the skin controls a significant increase of 52.9%), - mid-deep dermal level, a score of 2.58 versus 1.86 (p = 0.015) for the control skin (a significant increase of 38.7%) CONCLUSION In this model of human skin maintained in survival, a decrease Significant expression of progerin, cellular aging marker, was observed at the level of dermal cells (fibroblasts, histiocytes and mast cells) after application of the composition according to the invention. Stimulation of the expression of glycosaminoglycans in the dermis after application of the composition according to the invention has made it possible to limit the loss of contact between the fibroblasts and the connective tissue. The fibroblast having found a favorable position within the dermis, its metabolism is consequently reactivated. Cellular rejuvenation associated with an increase in glycosaminoglycans has revived skin fibroblast metabolism inducing stimulation of collagen synthesis. The invention is not limited to the embodiments shown and other embodiments will become apparent to those skilled in the art.
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