FR3007980A1

FR3007980A1 - COSMETIC USE OF AN EXTRACT FROM SANICULA EUROPAEA

Info

Publication number: FR3007980A1
Application number: FR1301604A
Authority: FR
Inventors: Olivier Courtin
Original assignee: Laboratoires Clarins SAS
Current assignee: Laboratoires Clarins SAS
Priority date: 2013-07-05
Filing date: 2013-07-05
Publication date: 2015-01-09
Anticipated expiration: 2033-07-05
Also published as: FR3007980B1

Abstract

L'invention concerne l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des small proline rich proteins SPR-1B et SPR-2A. L'invention concerne aussi l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum, renforcer la barrière cutanée et pour traiter les peaux sèches et / ou déshydratées.The invention relates to the use of an extract of Sanicula europaea to increase the expression of small proline rich proteins SPR-1B and SPR-2A. The invention also relates to the use of an extract of Sanicula europaea to reinforce the cohesion of the structure of the stratum corneum, to reinforce the skin barrier and to treat dry and / or dehydrated skin.

Description

Utilisation cosmétique d'un extrait Sanicula europaea. La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des small proline rich proteins SPR-1B et SPR-2A. La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum, et donc renforcer la barrière cutanée. La présente invention concerne enfin l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour traiter les peaux sèches et / ou déshydratées. La fonction principale de l'épiderme est d'assurer une barrière protectrice entre l'organisme et l'environnement extérieur. Plusieurs types de barrière sont mis en jeu. Une première barrière chimique et biochimique permet de lutter contre les allergènes et les irritants. Elle possède un rôle antibactérien grâce au pH acide de la couche cornée et à la présence d'enzymes hydrolytiques et de peptides antimicrobiens. Une seconde barrière immunologique grâce aux constituants du système immunitaire inné et acquis. Une troisième barrière hydrique grâce à la présence de jonctions serrées dans la couche granuleuse, des lipides intercornéocytaires et du facteur naturel d'hydratation (FNH) présent dans le stratum disjunctum. Enfin une barrière physique assurée grâce à la forte cohésion intercellulaire dont sont responsables les nombreux desmosomes. Elle permet à l'épiderme de résister aux agressions extérieures.Cosmetic use of an extract Sanicula europaea. The present invention relates to the use of an extract of Sanicula europaea to increase the expression of small proline rich proteins SPR-1B and SPR-2A. The present invention also relates to the use of an extract of Sanicula europaea to reinforce the cohesion of the structure of the stratum corneum, and thus to reinforce the cutaneous barrier. The present invention finally relates to the use of an extract of Sanicula europaea for treating dry and / or dehydrated skin. The main function of the epidermis is to provide a protective barrier between the body and the external environment. Several types of barrier are involved. A first chemical and biochemical barrier helps to fight against allergens and irritants. It has an antibacterial role thanks to the acidic pH of the stratum corneum and the presence of hydrolytic enzymes and antimicrobial peptides. A second immunological barrier thanks to the constituents of the innate and acquired immune system. A third water barrier thanks to the presence of tight junctions in the granular layer, intercorneocyte lipids and the natural hydration factor (FNH) present in the stratum disjunctum. Finally a physical barrier ensured thanks to the strong intercellular cohesion which is responsible for the many desmosomes. It allows the skin to resist external aggression.

La couche cornée absorbe une partie du rayonnement ultraviolet grâce d'une part à la mélanine et d'autre part à la présence en quantité importante d'acide urocanique, un dérivé de l'histidine.The stratum corneum absorbs part of the ultraviolet radiation thanks firstly to melanin and secondly to the presence in large quantity of urocanic acid, a derivative of histidine.

En ce sens, le stratum corneum peut être considéré comme une première ligne de défense vis-à-vis des agressions extérieures. Ainsi, le stratum corneum, en raison de sa situation à l'interface entre le corps et l'environnement, est exposé en permanence aux oxydants, notamment aux ultraviolets (UV), aux oxydants chimiques, aux polluants atmosphériques et aux microorganismes. L'a-tocophérol est l'antioxydant hydrophobe majeur du stratum corneum, par la protection de la peroxydation lipidique et la stabilisation des bicouches lipidiques. Le stratum corneum contient un certain nombre d'enzymes antioxydants endogènes comme la catalase, la superoxyde dismutase, et la glutathion peroxydase, les deux premiers étant les principaux antioxydants du stratum corneum.In this sense, the stratum corneum can be considered as a first line of defense vis-à-vis external aggression. Thus, the stratum corneum, because of its location at the interface between the body and the environment, is permanently exposed to oxidants, including ultraviolet (UV), chemical oxidants, atmospheric pollutants and microorganisms. Α-Tocopherol is the major hydrophobic antioxidant of the stratum corneum, through the protection of lipid peroxidation and the stabilization of lipid bilayers. The stratum corneum contains a number of endogenous antioxidant enzymes such as catalase, superoxide dismutase, and glutathione peroxidase, the first two being the main antioxidants of the stratum corneum.

Le stratum corneum est constitué de cornéocytes. Les cornéocytes contiennent essentiellement une matrice dense enserrant des filaments au sein d'une enveloppe protéique caractéristique, l'enveloppe cornée. Cette paroi, apposée à la face interne de la membrane plasmique, présente une structure hautement résistante, qui résulte de l'établissement de ponts disulfures et de liaisons covalentes ou ponts isopeptidiques e-(c-glutamyl) lysine entre différents précurseurs protéiques, sous l'action d'enzymes, les transglutaminases. Les molécules de l'enveloppe cornée des cornéocytes sont très nombreuses. Parmi elles, les plus connues et les plus étudiées sont la loricrine et l'involucrine. Ces molécules forment l'enveloppe cornée en s'associant par des ponts di-sulfures et surtout des liaisons NE (y glutamine) lysine grâce à des transglutaminases TG k/e dont l'activité catalytique ne se manifeste que dans la couche granuleuse. La loricrine et l'involucrine sont présentes et détectables en immunohistochimie dans le cytoplasme des kératinocytes de la couche granuleuse de l'épiderme interfolliculaire, mais elles ne sont associées à aucune structure morphologiquement individualisable. La proportion relative de ces molécules est maintenant chiffrée : la loricine représente à elle seule 70% des molécules de l'enveloppe cornée et est donc très largement la plus abondante, alors que l'involucrine ne représente que 2%.The stratum corneum consists of corneocytes. The corneocytes essentially contain a dense matrix enclosing filaments within a characteristic protein envelope, the horny envelope. This wall, affixed to the inner face of the plasma membrane, has a highly resistant structure, which results from the establishment of disulfide bridges and covalent bonds or isopeptide bridges e- (c-glutamyl) lysine between different protein precursors, under action of enzymes, transglutaminases. The molecules of the horny envelope of corneocytes are very numerous. Among them, the best known and most studied are loricrine and involucrine. These molecules form the horny envelope by associating with di-sulphide bridges and especially NE (γ-glutamine) lysine bonds by means of TG / α transglutaminases whose catalytic activity only manifests itself in the granular layer. Loricrin and involucrine are present and detectable in immunohistochemistry in the cytoplasm of keratinocytes in the granular layer of the interfollicular epidermis, but they are not associated with any morphologically individualizable structure. The relative proportion of these molecules is now quantified: loricin alone accounts for 70% of the molecules of the horny envelope and is therefore largely the most abundant, whereas involucrine only accounts for 2%.

Les autres molécules de l'enveloppe cornée sont l'élafine (anciennement dénommée cysteine richprotein) 6%, les SPRs (smali proline richproteins, SPR1, SPR2, SPR3 anciennement cornifins ou pancornulins) 5%, la cystatine a 5%. À ces molécules, il faut rajouter 8% de filaggrine, 2% de filaments intermédaires de kératine, les desmoplakines et l'envoplakine. L'involucrine sert d'amorce à la fixation des autres molécules de l'enveloppe cornée. Elle est aussi liée de même que l'envoplakine aux lipides du cément intercellulaire par des liaisons covalentes. Les Small Proline Rich Proteins (SPRs) humaines forment une famille multigénique composée de 4 sous-classes (SPR1, SPR2, SPR3 et SPR4), le tout organisé en cluster sur une région de 170 kb du complexe de différenciation épidermique. Ce cluster compte au total 11 gènes : SPR1A, SPR1B, 7 gènes SPR2, SPR3 et enfin SPR4. Les SPRs sont également divisés en 2 groupes en fonction de leur orientation transcriptionelle : SPR1A, SPR1B, SPR3 et SPR4 sont orientés du centromère vers le télomère et les 7 gènes SPR2, orientés du télomère vers le centromère. Ces gènes ont été mis en évidence suite à l' irradiation UV de kératinocytes en culture. D'autres expérimentations ont ensuite permis de constater que leur expression était stimulée lors de la différenciation kératinocytaire. Les Small Proline Rich Proteins (SPRs) sont des précurseurs de l'enveloppe cornée et présentent une importante homologie au niveau de leurs séquences N et C-terminales avec l'involucrine et la loricrine. Mais la caractéristique principale des SPRs repose sur la structure polypeptidique de leur segment central, avec la répétition en tandem d'une séquence de huit (SPR1 et SPR3) ou neuf (SPR2) acides aminés dont le motif très conservé est lysine -proline - glutamate- proline. Les SPRs ont une taille variant de 72 à 169 acides aminés. L'induction de leur synthèse protéique s'effectue durant le processus de différenciation épidermique, hormis pour SPR4 ou seulement une exposition aux UV induit sa synthèse. De même, la synthèse de SPR1B ainsi que de SPR2B est induite, notamment par une exposition aux UV. Les SPRs contribuent donc de manière 'significative à la constitution de l'enveloppe cornée, donc à la barrière cutanée. La demanderesse a mis en évidence de manière surprenante l'effet d'un extrait de Sanicula europaea sur l'augmentation de l'expression de deux Small Proline Rich Proteins : SPR-1B et des SPR-2A. On peut donc avantageusement utiliser un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des SPR-1B et des SPR-2A, pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum, pour renforcer la barrière cutanée et donc pour traiter les peaux sèches et/ou déshydratées.The other molecules of the horny envelope are elafine (formerly called cysteine richprotein) 6%, SPRs (smali proline richproteins, SPR1, SPR2, SPR3 formerly cornifins or pancornulins) 5%, cystatin has 5%. To these molecules, 8% filaggrin, 2% keratin intermediate filaments, desmoplakins and envoplakin should be added. The involucrine serves as a primer for the attachment of the other molecules of the horny envelope. It is also bound as envoplakin to the lipids of the intercellular cementum by covalent bonds. The human Small Proline Rich Proteins (SPRs) form a multigenic family composed of 4 subclasses (SPR1, SPR2, SPR3 and SPR4), all clustered in a 170 kb region of the epidermal differentiation complex. This cluster has a total of 11 genes: SPR1A, SPR1B, 7 genes SPR2, SPR3 and finally SPR4. The SPRs are also divided into 2 groups according to their transcriptional orientation: SPR1A, SPR1B, SPR3 and SPR4 are oriented from the centromere to the telomer and 7 genes SPR2, oriented from the telomer to the centromere. These genes have been demonstrated following the UV irradiation of keratinocytes in culture. Other experiments have then found that their expression was stimulated during keratinocyte differentiation. Small Proline Rich Proteins (SPRs) are precursors of the horny envelope and show significant homology in their N and C-terminal sequences with involucrine and loricrin. But the main feature of the SPRs is based on the polypeptide structure of their central segment, with the tandem repetition of a sequence of eight (SPR1 and SPR3) or nine (SPR2) amino acids whose highly conserved motif is lysine -proline - glutamate - proline. SPRs range in size from 72 to 169 amino acids. The induction of their protein synthesis takes place during the process of epidermal differentiation, except for SPR4 or only UV exposure induces its synthesis. Similarly, the synthesis of SPR1B as well as SPR2B is induced, in particular by UV exposure. The SPRs thus contribute significantly to the constitution of the horny envelope, thus to the cutaneous barrier. The Applicant has surprisingly demonstrated the effect of an extract of Sanicula europaea on increasing the expression of two small Proline Rich Proteins: SPR-1B and SPR-2A. It is therefore advantageous to use an extract of Sanicula europaea to increase the expression of SPR-1B and SPR-2A, to reinforce the cohesion of the structure of the stratum corneum, to reinforce the cutaneous barrier and thus to treat dry skin and / or or dehydrated.

Sanicula europaea (aussi appelée sanicle) est une plante herbacée vivace de 20 à 50 cm, de la famille des Apicaceae. Elle affectionne les sous-bois ombragés des montagnes de basse altitude. Sainte Hildegarde de Bingen au XIIème siècle a fait de cette plante une panacée qui n'est tombée dans l'oubli qu'au début du XXème siècle. Sa grande réputation provenait essentiellement de sa vertu vulnéraire pour soigner les coups et les blessures. C'est ainsi qu'elle a pris son nom sanicle déformation de sanare qui veut dire soigner. La feuille de sanicle était utilisée en cataplasme pour apaiser les brûlures, les contusions et les piqûres d'insecte ou d'animal venimeux, en infusion pour ce même usage ou pour guérir angine ou infection broncho-pulmonaire. Elle permettait de réduire la rougeur, dissoudre localement le venin, empêcher l'oedème de se développer ou favoriser l'expectoration. La composition cosmétique, objet de la présente invention, contient un extrait de Sanicula europaea. Il s'agit préférentiellement d'un extrait hydrosoluble des parties aériennes (feuilles, fleurs et tiges) de Sanicula europaea. De façon avantageuse, cet extrait est un extrait hydro alcoolique des parties aériennes de Sanicula europaea et de préférence il est stabilisé par du glycérol. De préférence il s'agit d'un extrait hydro alcoolique obtenu selon un procédé comprenant au moins les étapes suivantes : - séchage des parties aériennes ; - broyage ; - extraction ethanol/eau (80 :20) ; - filtration ; - concentration sous vide par évaporation des solvants d'extraction ; - ajustement de la concentration (ajout de glycérol). L'extrait de Sanicula europaea utilisé dans la composition selon l'invention, est un liquide légèrement visqueux jaune - marron et d'odeur caractéristique. Il présente les caractéristiques analytiques suivantes : pH = 3.5 - 5.0 Densité relative : 1.050 - 1.200 Indice de réfraction : 1.370 - 1.400 Rapport plante sèche/extrait = 1/10 De préférence la composition cosmétique selon l'invention comprend de 0,01 à 10 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Avantageusement, la composition comprend de 0,01 à 5 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Les compositions selon l'invention peuvent encore comprendre un ou plusieurs agents de formulation ou additifs d'usage connu et classique dans les compositions cosmétiques et dermatologiques tels que, à titre d'exemples et de façon non limitative, des adoucissants, des colorants, des actifs filmogènes, des tensioactifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, des vitamines comme la vitamine E, des filtres UV, etc... Grâce à ses connaissances en matière de cosmétique, l'homme du métier saura quels agents de formulation ajouter aux compositions de l'invention et en quelles quantités en fonction des propriétés recherchées. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier dans le domaine de la cosmétologie et de la dermatologie sans autre restriction galénique que l'application sur le visage, les cheveux et sur le corps. De façon avantageuse, les compositions selon l'invention se présentent sous la forme d'un gel, d'une crème, d'une lotion, d'une huile, d'un lait, d'un spray, etc...Sanicula europaea (also called sanicle) is a perennial herb of 20 to 50 cm, of the family Apicaceae. She likes the shady undergrowth of low altitude mountains. Saint Hildegard of Bingen in the 12th century made this plant a panacea that only fell into oblivion at the beginning of the 20th century. His great reputation came mainly from his vulnerable virtue to heal blows and wounds. This is how she took her name sanicle deformation of sanare which means to cure. The sanicle leaf was used as a poultice to soothe burns, bruises and stings of insect or poisonous animal, infused for the same purpose or to cure angina or bronchopulmonary infection. It reduces redness, locally dissolves venom, prevents edema from developing or promotes sputum. The cosmetic composition, object of the present invention, contains an extract of Sanicula europaea. It is preferentially a water-soluble extract of the aerial parts (leaves, flowers and stems) of Sanicula europaea. Advantageously, this extract is a hydroalcoholic extract of the aerial parts of Sanicula europaea and preferably it is stabilized with glycerol. Preferably it is a hydro alcoholic extract obtained by a process comprising at least the following steps: - drying of the aerial parts; - grinding ; - ethanol / water extraction (80:20); - filtration; concentration under vacuum by evaporation of the extraction solvents; - adjustment of the concentration (addition of glycerol). The extract of Sanicula europaea used in the composition according to the invention is a slightly viscous yellow-brown liquid with a characteristic odor. It has the following analytical characteristics: pH = 3.5 - 5.0 Relative density: 1.050 - 1.200 Refractive index: 1.370 - 1.400 Ratio dry plant / extract = 1/10 Preferably the cosmetic composition according to the invention comprises from 0.01 to 10 % of extract of Sanicula europaea by weight of dry matter relative to the total weight of the composition. Advantageously, the composition comprises from 0.01 to 5% of extract of Sanicula europaea by weight of dry matter relative to the total weight of the composition. The compositions according to the invention may also comprise one or more formulating agents or additives of known and conventional use in cosmetic and dermatological compositions such as, by way of examples and in a nonlimiting manner, softeners, colorants, film-forming active agents, surfactants, perfumes, preservatives, emulsifiers, oils, glycols, vitamins such as vitamin E, UV filters, etc. Thanks to its knowledge of cosmetics, the person skilled in the art will know which formulating agents to add to the compositions of the invention and in what quantities according to the desired properties. The compositions according to the invention may be in any form known to those skilled in the field of cosmetology and dermatology with no other pharmaceutical restriction than the application on the face, hair and body. Advantageously, the compositions according to the invention are in the form of a gel, a cream, a lotion, an oil, a milk, a spray, etc.

La présente invention concerne l' utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des SPR-1B et des SPR-2A.The present invention relates to the use of an extract of Sanicula europaea to increase the expression of SPR-1B and SPR-2A.

La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum. De même, la présente invention concerne 10 l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la barrière cutanée. La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour traiter 15 les peaux sèches et/ou déshydratées. Enfin, la présente invention concerne un procédé de traitement cosmétique des peaux sèches et/ou déshydratées, comprenant l'application d'une composition 20 cosmétique comprenant un extrait de Sanicula europaea. Les exemples ci-après concernent, d'une part l'évaluation de l'effet d'un extrait de Sanicula europaea sur l'expression des SPR-1B et des SPR-2A et d'autre part des 25 compositions objets de la présente invention. Les exemples font référence aux figures suivantes dans lesquelles : la figure 1-A représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR1B pour le 30 témoin excipient. la figure 1-B représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR1B pour l'excipient avec 0,4% d'extrait de sanicula europaea, observation au microscope NIKON 50i (objectif x20). - la figure 2 représente l'expression de la protéine SPR1B exprimée en intensité de fluorescence par surface de stratum corneum. la figure 3-A représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR2A pour le témoin excipient. la figure 3-B représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR2A pour l'excipient avec 0,4% d'extrait de sanicula europaea, observation au microscope NIKON 50i (objectif x20). - la figure 4 représente l'expression de la protéine SPR2A exprimée en intensité de fluorescence par surface de stratum corneum.The present invention also relates to the use of an extract of Sanicula europaea to enhance the cohesion of the structure of the stratum corneum. Also, the present invention relates to the use of an extract of Sanicula europaea to enhance the skin barrier. The present invention also relates to the use of an extract of Sanicula europaea for treating dry and / or dehydrated skin. Finally, the present invention relates to a cosmetic treatment method for dry and / or dehydrated skin, comprising the application of a cosmetic composition comprising an extract of Sanicula europaea. The following examples relate, on the one hand, to the evaluation of the effect of an extract of Sanicula europaea on the expression of SPR-1B and SPR-2A and, on the other hand, of the compositions which are the subject of the present invention. invention. The examples refer to the following figures in which: Figure 1-A shows the immunofluorescence (TRITC) of the SPR1B protein for the excipient control. FIG. 1-B shows the immunofluorescence (TRITC) of the protein SPR1B for the excipient with 0.4% of extract of sanicula europaea, observation under the microscope NIKON 50i (objective x20). FIG. 2 represents the expression of the SPR1B protein expressed in fluorescence intensity per stratum corneum surface. Figure 3-A shows the immunofluorescence (TRITC) of the protein SPR2A for the excipient control. FIG. 3-B shows the immunofluorescence (TRITC) of the protein SPR2A for the excipient with 0.4% of extract of sanicula europaea, observation under the microscope NIKON 50i (objective x20). FIG. 4 represents the expression of the SPR2A protein expressed in fluorescence intensity per stratum corneum surface.

I.EVALUATION DE L'ACTIVITE D'UN EXTRAIT DE SANICULA EUROPAEA SUR L'EXPRESSION DES SPRS A.MATERIEL ET METHODE 1)MATERIEL Des épidermes reconstruits (0,63 cm2) de 17 jours ont été pré-cultivés en plaque 24 puits contenant 300p1 de milieu de maintenance, pendant 24 heures. Puis 2mg/cm2 de produit à tester ont été déposés sur la face cornée de chaque épiderme. L' essai a été conduit en triplicate après 72 heures de contact des produits avec les épidermes reconstitués Skinethic®. On utilise 3 lots d'épiderme reconstitués : - Lot 1 : 3 épidermes témoins ne recevant aucun produit. - Lot 2 : 3 épidermes traités recevant le produit excipient. - Lot 3 : 3 épidermes traités recevant le produit excipient plus l'extrait de Sanicula europaea à hauteur de 0,4% du mélange.I. EVALUATION OF THE ACTIVITY OF A SANICULA EUROPAEA EXTRACT ON SPRS EXPRESSION A.MATERIAL AND METHOD 1) MATERIAL Reconstructed epidermis (0.63 cm2) of 17 days was pre-cultured in a 24-well plate containing 300p1 of maintenance medium, for 24 hours. Then 2 mg / cm 2 of product to be tested were deposited on the horny side of each epidermis. The test was conducted in triplicate after 72 hours of contact of the products with Skinethic ® reconstituted epidermis. We use 3 batches of reconstituted epidermis: - Lot 1: 3 control epidermals not receiving any product. - Lot 2: 3 treated epidermis receiving the excipient product. - Lot 3: 3 treated epidermis receiving the excipient product plus the extract of Sanicula europaea at 0.4% of the mixture.

Formulation de l'excipient : Dimethicone & PEG/PPG-18/18 Dimethicone 2,00 Dimethicone 7,00 Phenyl Trimethicone 6,00 Butyloctyl Salicylate 5,00 Aqua 75,90 Disodium EDTA - 0,1 Sodium Chloride 1 Phenoxyethanol 0,6 Parfum 0,4 Alcool 2,00 2)METHODE Evaluation du marquage SPRR1B et SPRR2A après traitement immunohistochimique des épidermes reconstitués. Les épidermes témoins ne recevant aucun produit et les épidermes recevant les produits à l'étude pendant 72 heures de contact, ont été congelés à -180°C. Après inclusion en blocs de paraffine, ces épidermes ont été coupés au microtome (épaisseur 5gm, 2 coupes par lame) puis maintenues à température ambiante jusqu'à la réalisation des immunomarquages.Excipient formulation: Dimethicone & PEG / PPG-18/18 Dimethicone 2.00 Dimethicone 7.00 Phenyl Trimethicone 6.00 Butyloctyl Salicylate 5.00 Aqua 75.90 Disodium EDTA - 0.1 Sodium Chloride 1 Phenoxyethanol 0.6 Fragrance 0.4 Alcohol 2,00 2) METHOD Evaluation of SPRR1B and SPRR2A labeling after immunohistochemical treatment of reconstituted epidermis. The control epidermals receiving no product and the epidermals receiving the products under study for 72 hours of contact were frozen at -180 ° C. After inclusion in paraffin blocks, these epidermis were cut with a microtome (thickness 5 gm, 2 sections per slide) and then kept at room temperature until the immunomarks are made.

Les lames déparaffinées ont été rincées puis incubées pendant 1 heure à température ambiante dans la solution d'anticorps primaire, anti- SPPR1B ou SPRR2A. Après lavage, les coupes sont incubées pendant 1 heure à température ambiante avec la solution d'anticorps secondaires couplé au TRITC. Les lames sont rincées puis sont incubées avec une solution DAPI pour marquer les noyaux cellulaires. Les coupes ont été observées à l'aide d'un microscope NIKON 50i (objectif x20). Les saisies d'images (n=12) ont été réalisées à l'aide d'une caméra pilotée par un logiciel NIS-elements. Les images de fluorescence TRITC indiquent les régions de localisation de SPRR1B ou SPRR2A. Elles sont analysées par le logiciel d'analyse d'image NIS-elements. L'analyse est réalisée au niveau du stratum corneum. B.RESULTATS Les résultats sont présentés dans les 10 tableaux qui suivent ; ils sont exprimés en unité arbitraire de fluorescence. L'intensité est rapportée .à la surface du stratum corneum. 1) EXPRESSION DE SPR1B 15 Erreur standard de la moyenne (sem) Moyenne 1129,56 Excipient + Sanicle 0,4% 16719,55 Expression SPRR1B (intensité de fluorescence/surface stratum corneum) Excipient 10962,73 661,37 2) EXPRESSION DE SPR2A C.CONCLUSION Dans nos conditions expérimentales, l'extrait de Sanicula europaea formulé dans l'excipient appliqué en topique à la surface d'un épiderme reconstruit module l'expression des protéines constitutives de l'enveloppe cornée SPRR1B et SPRR2A. La surexpression de ces 2 protéines de la famille des Small Proline Rich Proteins permet de renforcer l'enveloppe cornée en assurant sa résistance. II.EXEMPLES LOTION TONIQUE DISODIUM EDTA 0,20 SODIUM CITRATE 0,20 SODIUM CHLORIDE 0,75 GLYCOLS 3,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 PARFUM Q.S.The deparaffinized slides were rinsed and then incubated for 1 hour at room temperature in the solution of primary antibody, anti-SPPR1B or SPRR2A. After washing, the sections are incubated for 1 hour at room temperature with the secondary antibody solution coupled to TRITC. The slides are rinsed and then incubated with a DAPI solution to mark the cell nuclei. The sections were observed using a NIKON 50i microscope (x20 objective). The image captures (n = 12) were made using a camera controlled by NIS-elements software. The TRITC fluorescence images indicate the location regions of SPRR1B or SPRR2A. They are analyzed by the NIS-elements image analysis software. The analysis is performed at the level of the stratum corneum. B.RESULTS The results are presented in the following 10 tables; they are expressed in arbitrary fluorescence unit. Intensity is reported on the surface of the stratum corneum. 1) EXPRESSION OF SPR1B 15 Standard error of mean (wk) Mean 1129.56 Excipient + Sanicle 0.4% 16719.55 Expression SPRR1B (fluorescence intensity / stratum corneum surface) Excipient 10962.73 661.37 2) EXPRESSION OF SPR2A C.CONCLUSION In our experimental conditions, the extract of Sanicula europaea formulated in the excipient applied topically to the surface of a reconstructed epidermis modulates the expression of the proteins constituting the horny envelope SPRR1B and SPRR2A. The overexpression of these 2 proteins of the family of Small Proline Rich Proteins makes it possible to reinforce the horny envelope by assuring its resistance. II.EXAMPLES TONIC LOTION DISODIUM EDTA 0,20 SODIUM CITRATE 0,20 SODIUM CHLORIDE 0,75 GLYCOLS 3,00 EXTRACT SANICULA EUROPAEA 1,00 PERFUME Q.S.

CONSERVATEURS Q.S. Erreur standard de la moyenne (sem) Moyenne Excipient 952,75 1786,74 207747,76 Excipient + Sanicle 0,4% 15227,92 Expression SPRR2A (intensité de fluorescence/surface stratum corneum) COLORANTS Q.S. EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 GEL -CREME ACRYLATES/C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0,35 SODIUM 0,10 HYDROXYETHYL ACRYLATE/SODIUM ACRYLOYLDIMETHYL TAURATE COPOLYMER 1,00 CETEARYL ETHYLHEXANOATE 2,00 DIMETHICONE 1,00 GLYCOLS 7,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 CONSERVATEURS Q.S. PARFUM Q.S. EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 EMULSION H/E CETEARYL ALCOHOL & CETEARYL GLUCOSIDE 4,30 GLYCERYL STEARATE & PEG-100 STEARATE 2,70 PENTAERYTHRITYL DISTEARATE 2,00 STEARETH-21 0,50 BEURRE DE KARITE 2,00 PARAFFINUM LIQUIDUM 8,00 CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE 10,00 DIMETHICONE 5,00 ACRYLATES/C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0,25 XANTHAN GUM 0,20 GLYCOLS 5,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 CONSERVATEURS Q.S. TROMETHAMINE Q.s.pH EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 EMULSION E/H (PROTECTEUR SOLAIRE) DIMETHICONE 13,00 DIMETHICONE & PEG/PPG-18/18 DIMETHICONE 2,00 DIMETHICONE & TITANIUM DIOXIDE & POLYGLYCERYL-3 & POLYDIMETHYLSILOXLYETHYL & 15 DIMETHICONE & ALUMINIUM HYDROXIDE & STEARIC ACID 30,00 ETHYLHEXYL METHOXYCINNAMATE 6,50 TINOSORB M 6,00 ISODODECANE 5,00 20 ALCOHOL 3,00 SODIUM CHLORIDE 1,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 0,50 CONSERVATEURS Q.S. PARFUM Q.S.CONSERVATIVES Q.S. Standard error of mean (wk) Average Excipient 952.75 1786.74 207747.76 Excipient + Sanicle 0.4% 15227.92 Expression SPRR2A (fluorescence intensity / stratum corneum surface) COLORANTS Q.S. DEMINERALIZED WATER QSP 100 GEL -CREME ACRYLATE / C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0.35 SODIUM 0.10 HYDROXYETHYL ACRYLATE / SODIUM ACRYLOYLDIMETHYL TAURATE COPOLYMER 1.00 CETEARYL ETHYLHEXANOATE 2.00 DIMETHICONE 1.00 GLYCOLS 7.00 EXTRACT SANICULA EUROPAEA 1, 00 PRESERVERS QS PERFUME Q.S. DEMINERALIZED WATER QSP 100 EMULSION O / W CETEARYL ALCOHOL & CETEARYL GLUCOSIDE 4.30 GLYCERYL STEARATE & PEG-100 STEARATE 2.70 PENTAERYTHRITYL DISTEARATE 2.00 STEARETH-21 0.50 SHEA BUTTER 2.00 PARAFFINUM LIQUIDUM 8.00 CAPRYLIC / CAPRIC TRIGLYCERIDE 10,00 DIMETHICONE 5,00 ACRYLATES / C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0,25 XANTHAN GUM 0,20 GLYCOLS 5,00 EXTRACT SANICULA EUROPAEA 1,00 PRESERVATIVES QS TROMETHAMINE QSPH DEMINERALIZED WATER QSP 100 EMULSION W / O (SOLAR PROTECTOR) DIMETHICONE 13.00 DIMETHICONE & PEG / PPG-18/18 DIMETHICONE 2.00 DIMETHICONE & TITANIUM DIOXIDE & POLYGLYCERYL-3 & POLYDIMETHYLSILOXLYETHYL & 15 DIMETHICONE & ALUMINUM HYDROXIDE & STEARIC ACID 30.00 ETHYLHEXYL METHOXYCINNAMATE 6.50 TINOSORB M 6.00 ISODODECANE 5.00 20 ALCOHOL 3.00 SODIUM CHLORIDE 1.00 EXTRACT SANICULA EUROPAEA 0.50 PRESERVATIVES QS PERFUME Q.S.

25 EAU DEMINERALISEE Q.S.P 10025 DEMINERALIZED WATER Q.S.P 100

Claims

CLAIMS1) Use of an extract of Sanicula europaea to strengthen the cohesion of the structure of the stratum corneum.

2) Use according to claim 1 for reinforcing the skin barrier.

3) Use according to claims 1 or 2 for treating dry and / or dehydrated skin.

4) Use according to any one of the preceding claims, wherein the extract of Sanicula europaea is an extract of the aerial parts of the plant.

5) Use according to any one of the preceding claims, wherein the extract of Sanicula europaea is a water-soluble extract.

6) Use according to any one of the preceding claims, wherein the extract of Sanicula europaea is a hydro-alcoholic extract.

7) Use according to any one of the preceding claims, comprising from 0.01 to 10% of extract of Sanicula europaea by weight of dry matter relative to the total weight of the composition, preferably from 0.01 to 5% by weight. extract of Sanicula europaea by weight of dry matter relative to the total weight of the composition.

8) cosmetic use according to any one of the preceding claims further comprising one or more formulating agents or additives such as softeners, dyes, film-forming agents, surfactants, perfumes, preservatives, emulsifiers, oils, glycols, UV filters, and vitamins.

9) Process for the cosmetic treatment of dry and / or dehydrated skin, comprising the application of a cosmetic composition comprising an extract of Sanicula europaea.