FR2996138A1 - Composition dermocosmetique stimulant la production de peptides anti-microbiens - Google Patents

Abstract

L'invention concerne une composition dermocosmétique pour stimuler la production cutanée de peptides anti-microbiens. Elle comprend à titre de principe actif des oligosaccharides de type prébiotique constitués par les gluco saccharides ou les fructo saccharides avec de préférence 0,5 à 1,5% en masse de gluco saccharides et/ou de préférence 0,25 à 0,75% de fructo saccharides. Application à une utilisation topique.

Description

^ 2996138 1 Le secteur technique de la présente invention est celui des traitements de la flore cutanée et en particulier pour stimuler la production de peptides anti-microbiens. Les avancées scientifiques au cours des dernières années ont montré l'importance de la flore cutanée et son implication dans de nombreux problèmes de peau des individus lors d'un déséquilibre microbien. Il existe une variabilité de la population microbienne d'un individu à un autre. Toutefois, dans le cadre d'une peau 10 saine les différentes populations vivent en parfaite harmonie. Il est bien connu qu'un des moyens de défense de la peau contre des agressions importantes de microorganismes réside dans la production de peptides antimicrobiens. Parmi ceux-ci, /5 on peut par exemple citer les défensines de type 2 ou 3 ou les cathélicidines. Par exemple, dans la dermatite atopique, il a été démontré que le microorganisme de type Staphylococcus aureus colonisait fortement la peau et accentuait les problèmes 20 cutanés. Dans ce cadre, il a aussi été découvert qu'il existait une régression de la production de la beta défensine de type 2 qui augmentait le potentiel de colonisation de la peau par ce microorganisme nocif. A l'inverse, normalement, plus la colonisation de Staphylococcus aureus augmente plus 25 la production de beta-défensine de type 2 est élevée pour limiter cette prolifération. Ceci prouve bien que ces peptides antimicrobiens jouent un rôle pivot dans la protection cutanée contre les microorganismes pathogènes. (British Journal of Dermatology (1951) A, 2008, 159, 97-104). 30 Une autre publication complète ces données en indiquant même que ces peptides antimicrobiens en limitant les phénomènes d'inflammation cutanée via la réduction des microorganismes agressifs participent au maintien en général de l'intégrité de la peau (European Journal of Dermatology A. 35 2008, 18, 11-21.) Des beta-défensines de type 2 et de type 3 sont aussi produites par les cellules cutanées pour limiter la propagation et la prolifération des souches d'autres microorganismes pathogènes. Cette famille de peptides anti- microbiens est constituée de molécules avec en général de 29 à 44 aminoacides. La production de ces composés par les cellules de la peau comme par exemple les kératinocytes est largement augmentée lorsque l'accroissement des microorganismes pathogènes prend des proportions importantes. D'autres facteurs comme certains marqueurs de l'inflammation conduisent aussi à cette amplification (Journal of Investigative Dermatology, 2001, 117, 106-111). /0 Lors de problèmes cutanés liés aux streptocoques, des peptides antimicrobiens sont aussi produits à la surface des cellules cutanées pour limiter et réduire la prolifération de ces souches (Journal of Investigative Dermatology, 2001, 117, 91-97). 15 Un autre exemple est fourni avec l'eczéma. C'est une maladie chronique de la peau qui est augmentée par des phénomènes d'infection cutanée. Différentes études ont démontré que chez les patients atteints de ces problèmes de peau l'expression des peptides antimicrobiens était fortement 20 réprimée. Par conséquent, dans ce cadre, les infections cutanées sont encore accentuées (British Journal of Dermatology (1951) A, 2009, 161, 40-47). Dans l'article de la revue «Journal of Investigative Dermatology, 2005, 124, 394-400», on a montré que certains 25 peptides antimicrobiens se situaient dans les corps lamellaires au sein des kératinocytes et y étaient stockées. Lorsqu'il y a nécessité, comme par exemple lors d'une agression bactérienne, ces molécules peuvent alors migrer vers la surface cellulaire pour remplir leurs fonctions. 30 Dans la demande internationale W02009/091933, on a proposé l'utilisation de microorganismes de type lactobacille pour stimuler la production de ces défensines. On a montré que la production des peptides cutanés s'effectue en permanence pour protéger et réguler la peau des infections 35 liées à la prolifération de microorganismes pathogènes. Il est donc possible d'augmenter cette production en mettant la peau en contact avec des fragments de microorganismes ou des microorganismes qui ont été au préalable détruits.

Dans le brevet FR-2869543, on a proposé des sucres très particuliers issus d'avocat comprenant du D-mannoheptulose et/ou du perseitol. Après application, ces sucres conduisent au niveau kératinocytaires à une augmentation de la 5 production de beta-défensines. Le demandeur a entrepris une étude sur l'activation de la production cutanée de ces peptides antimicrobiens qui on le voit sont d'un grand intérêt. On a découvert que de manière surprenante des oligosaccharides de type prébiotiques (gluco- /0 oligosaccharides ou/et fructo-oligosaccharides) conduisaient à une activation de la production de peptides antimicrobiens. Ceci est d'autant plus surprenant qu'il était connu qu'un oligoglucosaccharide obtenu par biotechnologie et vendu commercialement sous la dénomination Bioecolia® favorisait la 15 production de la flore saprophyte au détriment de la flore pathogène. Ce prébiotique possède donc un double effet complémentaire particulièrement intéressant pour diverses applications cutanées, propriété qui était demeurée inconnue à ce jour. 20 Le but de la présente invention est donc de proposer une composition dermocosmétique ou dermatologique permettant de lutter contre les agressions de la peau d'un individu par les microorganismes. L'invention a donc pour objet une composition 25 dermocosmétique pour la production cutanée de peptides antimicrobiens, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif des oligosaccharides de type prébiotique. Selon une caractéristique de l'invention les oligosaccharides sont constitués par les gluco-saccharides ou 30 les fructo-saccharides. Avantageusement, la composition comprend 0,5 à 1,5% en masse de gluco-saccharides Avantageusement encore, la composition comprend 0,25 à 0,75% de fructo-saccharides. 35 L'invention concerne également l'application de la composition dermocosmétique à la préparation d'un gel moussant apaisant, d'une crème nutritive pour peau irritée, ou d'une mousse post dépilatoire.

L'invention concerne également une méthode de traitement des affections cutanées telles les dermatites, l'eczéma ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques, caractérisée en ce qu'on applique sur la peau d'un patient une crème, un gel ou une mousse obtenu précédemment pendant une durée de 10 à 20 jours environ. Un avantage de la présente invention réside dans le fait que les oligosaccharides assurent une stimulation importante 10 des peptides antimicrobiens lors d'une application topique sans traitement particulier. Un autre avantage de l'invention réside dans la très grande disponibilité de ces oligosaccharides sur le marché. Un autre avantage encore de l'invention réside dans 15 l'existence des effets combinés à la fois de la production de la flore saprophyte et la production de peptides antimicrobiens. On va maintenant décrire la préparation d'expiants de peau humaine, la caractérisation de la production des 20 peptides antimicrobiens et la préparation de préparations topiques pour le traitement de la peau, description donnée à titre d'illustration. PREPARATION DES EXPLANTS 25 18 expiants d'environ 11 mm ont été préparés à partir d'une plastie abdominale d'une femme âgée de 59 ans. Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIOEC expiants Medium) à 37°C en atmosphère humide enrichie de 5% de CO2. 2 oligosaccharides prébiotiques ont été testés : 30 *Un fructo oligosaccharide (Produit Pl) qui sera lors de cette étude un extrait liquide de Yacon. Les concentrations de l'extrait de Yacon utilisées dans le test sont à 0,5% et 1,5%. La plante Yacon est connue pour être riche en fructo oligosaccharide. 35 *Le gluco oligosaccharide (Produit P2) connu sous le nom commercial de Bioecolia® vendu par la société Solabia codé sous B3 dans l'étude. Les concentrations de Bioecolia® utilisées dans le test sont à 0,25% et 0,75%.

Il va sans dire que les deux oligosaccharides cités ci-dessus sont donnés à titre d'exemple et qu'ils sont représentatifs de chaque famille pour conduire aux mêmes résultats.

A JO les explants sont placés dans le milieu de culture contenant les matières premières à tester. Ces milieux sont renouvelés pour moitié (1 ml) aux jours J1, J3 et J5. Les explants du lot T (témoin) n'ont reçu aucun traitement.

Les explants sont répartis comme suit : Lots Traitement Nombre explants Arrêt(s) TO Aucun 3 TO T Aucun 3 J7 Pl à 0,5% Produit 1 dilué dans une 0,5% 3 J7 l'eau à concentration de Pl à 1,5% Produit 1 dilué dans une 1,5% 3 J7 l'eau à concentration de P2 à 0,25% Produit 2 dilué dans une 3 J7 l'eau à 0,25% concentration de P2 à 0,75% Produit 1 dilué dans une 3 J7 l'eau à 0,75% concentration de Le lot TO représente l'explant de départ n'ayant subit aucun traitement. Les lots T sont traités avec les produits P& et P2.

Les essais sont conduits suivant les normes en vigueur. A JO, les explants du lot TO ont été prélevés et coupés en 2. Une moitié a été fixée dans du Bouin ordinaire afin d'éviter toute réaction et l'autre moitié a été congelée à - 80°C.

A J7, les 3 explants de chaque lot ont été prélevés et traités de la même manière.

Les différents prélèvements sont congelés et coupés à 7 micromètres dans un cryostat Leica CM 3050. Les coupes sont collées sur des lames de verre histologique silanisées Superfrost® Plus, pour les immunomarquages. TESTS DE L'ACTIVITE BIOLOGIQUE On effectue des tests de validation de l'activité biologique sur la production de beta défensine de type 2 et beta défensine de type 3 sur les explants de peau. Immunomarquage de la beta défensine 2 : La beta défensine 2 a été marquée sur des coupes congelées avec un anti-corps polyclonal anti-beta défensine 2 au 1/1Q0ème pendant 1 h à température ambiante avec un système amplificateur 15 biotine/streptavidine, révélé en FITC et avec des noyaux contre colorés à l'iodure de propidium. Une analyse d'images est ensuite réalisée sur les images issues des immunomarquages de la béta défensine 2. 20 Immunomarquage de la béta defénsine 3 : Même protocole que pour la défensine 2. L'anticorps utilisé est ici un anticorps polyclonal anti-béta défensine-3. Les résultats obtenus pour la beta défensine 2 sont 25 présentés dans les tableaux ci-dessous par rapport au lot témoin T : Tableau I Produit Résultats P1 à 0,5% - 6% P1 à 1,5% + 5% P2 à 0,25% + 52% * P2 à 0,75% + 74% * * significativité : p < 0,05 On constate qu'il n'y a pas de production de beta 30 défensine 2 avec les glucosaccharides et donc pas de production cutanée de peptides antimicrobiens. 10 Par contre, on constate une forte augmentation des beta défensines 2 avec les fructosaccharides et donc une forte production cutanée de peptides antimicrobiens. Les résultats obtenus pour la béta défensine 3 sont 5 présentés dans les tableaux ci-dessous par rapport au lot témoin T : Tableau II Produit Résultats Pl à 0,5% + 72%(*) Pl à 1,5% + 80%* P2 à 0,25% + 117% * P2 à 0,75% + 153% * * significativité : p < 0,05 (*) p <0,1 /0 On constate la forte augmentation de la production de beta défensine et en conséquence de peptides antimicrobiens. A l'analyse de ces résultats et plus généralement, on s'aperçoit de manière totalement inattendue que des oligosaccharides prébiotiques sont capables de créer une 15 augmentation de la production des peptides antimicrobiens par les cellules cutanées. Dans le cadre des fructo oligosaccharides, ce résultat est observé de manière significative pour les beta défensines de type 3 alors que les gluco oligosaccharides favorisent à 20 la fois une augmentation de la production des deux principaux types 2 et 3 de défensine. On notera qu'il était bien connu que les prébiotiques étaient intéressants pour des applications cutanées en 25 régulant la flore cutanée mais il apparaît donc de manière tout à fait inattendue que ces molécules sont aussi capables de protéger la peau des attaques microbiennes pathogènes en actionnant également un mécanisme d'augmentation de production des peptides antimicrobiens. 30 On voit donc tout l'intérêt pour des applications dans le domaine de la dermocosmétique.

Exemple 1 : Gel moussant apaisant cutané contenant un gluco oligosaccharide. La composition suivante est ici mise en oeuvre pour un gel et il va de soi qu'elle peut être utilisée pour fabriquer une 5 crème ou toute autre application topique. On utilise les matières premières suivantes : MATIERES PREMIERES % INCI NAME PHASE A Eau déminéralisée Qsp 100 Aqua Glycérine 4,00 Glycerin Bioécolia® 1,00 Alpha glucan-oligosaccharide Zincidone® 0,30 Zinc PCA Cuivridone® 0,20 Copper PCA PHASE B Déhyton KC) 8,00 Cocamidopropyl betaine PHASE C Tensolive (Soliance) 6,00 Aqua/Olivamidopropyl betaine PHASE D Plantacare 2000® 15,0 0 Decyl glucoside Lamesoft PO 65® 4,00 Coco glucoside/glyceryl oleate PHASE E Glycérolat de romarin 2,00 Glycerin/Aqua/Rosmarinus officinalis extract Conservateurs 1,00 Parfum Fruits exotiques (MLW) 0,20 Parfum CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES 10 pH = 5.50 +/- 0.50 à 20°C Viscosité : liquide La préparation du gel moussant s'effectue de la manière suivante. On préparer la phase A à température ambiante en mélangeant les différents ingrédients puis on les phases b 15 puis C.

On prémélange par ailleurs les composés de la phase D, puis les incorporer à la préparation précédente. On ajoute enfin les composés de la phase E dans l'ordre l'un après l'autre.

Le gel ainsi préparé est appliqué sur la peau du patient. Cette application favorise la production de peptides antimicrobiens et diminue les problèmes cutanés comme par exemple les dermatites, l'exema ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques.

Exemple 2 : Crème pour peau irritée contenant un fructo oligosaccharide La composition ci-dessous donnée à titre indicatif peut également être utilisée pour fabriquer une mousse ou tout 15 autre composition pour application topique. On utilise les matières premières suivantes : MATIERES PREMIERES % INCI NAME PHASE A Axol C62 (Evonik) 2,00 Glyceryl stearate citrate Dub MCT (Stéarinerie 5,00 Caprylic/capric triglyceride Dubois) Eutanol G (BASF) 5,00 Octyldodecanol Dub 810C (Stéarinerie 2,25 Coco caprylate / caprate Dubois) Hydracire S (Gattefossé) 3,00 Acacia decurrens/Jojoba/ Sunflower seed wax/ Polyglycery1-3 esters Nacol 22/98 (Sasol) 2,00 Behenyl alcohol Vitaskin E (Solabia) 0,50 Raspberry seed oil/Tocopheryl succinate aminopropanediol esters PRASE B Eau déminéralisée Qsp 100 Aqua Conservateur 1,20 Keltrol CG-SFT (CP Kelco) 0,30 Xanthan gum Glycérine 6,00 Glycerin PHASE C Eau déminéralisée 6,00 Aqua Extrait de Yacon 1,00 Fructo-oligosaccharide PHASE D NaOH, sol à 10% 0,15 Sodium hydroxide Parafol 12-97 (Sasol) 2,00 Dodecane Parfum Mistral Natflor 0,20 Parfum RS31402 (Technicoflor) CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES pH = 5.50 à 20°C à 24h Viscosité : 12 000 cps +/- 3 000 cps à 20°C, LVT 4, 12 5 tr/min. La préparation de la crème s'effectue de la manière suivante. On prépare la phase A à 75°C, puis on ajoute le Vitaskin E quand la température est atteinte. On chauffe l'eau de la phase B à 75°C puis on mouille la 10 xanthane dans la glycérine et on incorpore ce prémélange à l'eau, sous agitation, quand la température est atteinte. On réalise l'émulsion en versant la phase A dans la phase B sous vive agitation. On prépare la phase C à température ambiante et on /5 l'incorpore à l'émulsion précédente à partir de 60 °C. A une température de 45°C environ, on ajoute la soude et à 35 °C dissous dans la parafol et on ajoute enfin le parfum. La crème ainsi préparée est appliquée sur la peau du patient. Cette application favorise la production de peptides 20 antimicrobiens et diminue les problèmes cutanés comme par exemple les dermatites, l'eczéma ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques. Exemple 3 : Crème nutritive pour peau irritée avec un 25 gluco oligosaccharide. La composition ci-dessous donnée à titre indicatif peut également être utilisée pour fabriquer une mousse ou tout autre composition pour application topique. On utilise les matières premières suivantes : 30 MATIERES PREMIERES PHASE A Eau déminéralisée Bioécolia (Solabia) Butylène glycol Keltrol CG-SFT (CP Kelco) PHASE B NOM INCI p 100 Aqua 0,50 lAlpha-glucan oligosaccharide 2,00 Butylene glycol ' ..'..' . 0,20 Xanthan gum Emulium 22 (Gattefossé) 5,00 Tribehenin PEG-20 esters Isodecyl neopentanoate Dub VCI 10 (Stéarinerie Dubois ) 2,00 ;Dub 810 C (Stéarinerie ;Dubois) 'Dub DONPG (Stéarinerie HDubois) -Silica bead SB 300 (Miyoshi Kasei) fïMyristidone (Solabia) PHASE C 3,00 Coco caprylate / caprate 2,00 Neopentyl glycol !diethylhexanoate 1,00 ! Silica Tetradecyl PCA 1Sépiplus 265 (Seppic) 1,00 lAmmonium acrylate and acrylamide . copolymer/Polyisobutene/Polysorbatel 5,00 Zincidone (Solabia) 0,20 Cuivridone 1 0,10 (Solabia) PHASE E Rhamnosoft 3,00 Biosaccharide gum-2 (Solabia) PHASE D Eau déminéralisée Aqua Zinc PCA Copper PCA -FDC Blue 1, sol à 0,2% (Sensient) Parfum Fleur de igingembre 0701553 0,05 CI 42090 Fragrance 1,50 MODE OPERATOIRE On chauffe l'eau de la phase A à 75°C puis on joute le Bioécolia et le prémélange BG / Keltrol à température, sous agitation.

On prépare la phase B à 75°C, en ajoutant Myristidone et Silica bead à température, sous agitation. On réalise l'émulsion en versant la phase B dans la phase A sous agitation. On incorpore ensuite les ingrédients de la phase C. /0 On prépare la phase D à température ambiante, puis on l'incorpore dans l'émulsion à 45°C. A la température de 35 °C environ, on ajoute les ingrédients de la phase E. CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES 15 pH - 5.50 +/- 0.50 à 20°C Viscosité : 6 000 à 8 000 cps La crème ainsi préparée est appliquée sur la peau du patient. Cette application favorise la production de peptides antimicrobiens et diminue les problèmes cutanés comme par 20 exemple les dermatites, l'eczéma ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques. Exemple 4 : Mousse post dépilatoire avec comprenant un gluco oligosaccharide. 25 INGREDIENTS % INCI NAME PHASE A Sisterna SP70-C (Sisterna) 2 Sucrose stearate ,00 Cetiol CC (BASF) 2 Dicaprylyl carbonate ,50 Tegosoft P (Evonik) 1 Isopropyl palmitate ,50 Sensoil Cumaru 3 Bertholletia excelsa seed oul / (Solabia) ,00 Dipteryx odorata PHASE B Eau déminéralisée Qsp Aqua 100 Conservateur Q sp Teflose (Solabia) 4 Propanediol/Aqua/Rhamnose/Glucose/Glucuronic acid ,00 Glycérolat de grenade 1 Glycerin / Aqua / Punica granatum seed extract ,00 Glycérolat de framboise 1 Glycerin / Aqua / Rubus idaeus fruit extract ,00 Bioécolia® 1 Alpha-glucan oligosaccharide ,00 PHASE C Glycérine 1 Glycerin ,50 Avicel PC 1 Microcrystalline cellulose / Cellulose gum 611 (FMC) ,00 PHASE D Submica E 1 CI 77019 (Sensient) ,00 Plantapon 2 Sodium cocoyl glutamate ACG HC (BASF) ,00 Acide 1 Citric acid citrique à 10% ,50 . CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES pH = 5,50 - 6,00 à 20°C Viscosité : 500 - 700 cps à 20°C, LVT 2, 12 tr/min MODE OPERATOIRE On prépare chacune des phases A et B à température ambiante. On réalise ensuite le prémélange des ingrédients de la phase C, puis l'incorporer dans la phase B sous agitation.

On fabrique l'émulsion en versant la phase A dans le mélange des phases B et C sous vive agitation. On ajoute enfin les ingrédients de la phase D l'un après l'autre sous agitation modérée.

L'utilisation des crèmes et gels préparés selon l'invention confère une très nette amélioration de la peau des patients traités traduisant une forte augmentation de la production de peptides antimicrobiens. La mousse ainsi préparée est appliquée sur la peau du /0 patient. Cette application favorise la production de peptides antimicrobiens et diminue les problèmes cutanés comme par exemple les dermatites, l'eczéma ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques.

Claims (10)

1. REVENDICATIONS1. Composition dermocosmétique pour la production cutanée de peptides anti-microbiens, caractérisé en ce qu'elle comprend à titre de principe actif des oligosaccharides de 5 type prébiotique.
2. 2. Composition dermocosmétique selon la revendication 1, caractérisée en ce que les oligosaccharide sont constitués par les gluco saccharides ou les fructo saccharides.
3. 3. Composition dermocosmétique selon la revendication 2, 10 caractérisée en ce qu'elle comprend 0,5 à 1,5% en masse de gluco saccharides
4. 4. Composition dermocosmétique selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle comprend 0,25 à 0,75% de fructo saccharides. 15
5. 5. Application de la composition dermocosmétique selon l'une des revendications précédentes à la préparation d'un gel moussant apaisant.
6. 6. Application de la composition dermocosmétique selon l'une des revendications 1 à 4 à la préparation d'une crème 20 pour peau irritée.
7. 7. Application de la composition dermocosmétique selon l'une des revendications 1 à 4 à la préparation de d'un gel moussant.
8. 8. Application de la composition dermocosmétique selon 25 l'une des revendications 1 à 4 à la préparation d'une crème nutritive.
9. 9. Application de la composition dermocosmétique selon l'une des revendications 1 à 4 à la préparation d'une mousse post dépilatoire. 30
10. 10. Utilisation de la composition selon l'une des revendications 1 à 4 pour la préparation d'un médicament pour le traitement des affections cutanées telles les dermatites, l'eczéma ou les inflammations liées à des microorganismes pathogènes comme les streptocoques.