FR2989276A1 - Principe actif obtenu a partir de lindera strychnifolia pour une action sur la peau similaire a l'effet de la luminotherapie - Google Patents
Principe actif obtenu a partir de lindera strychnifolia pour une action sur la peau similaire a l'effet de la luminotherapie Download PDFInfo
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Abstract
L'objet de l'invention est un hydrolysat de Lindera strychnifolia pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition présentant un effet similaire à l'action de la luminothérapie sur la peau. L'invention se rapporte également aux compositions cosmétiques incluant ce principe actif et à un procédé cosmétique de soin de la peau.
Description
PRINCIPE ACTIF OBTENU A PARTIR DE LIMERA STRYCHNIFOLIA POUR UNE ACTION SUR LA PEAU SIMILAIRE A L'EFFET DE LA LUMINOTHERAPIE La présente invention se rapporte à un principe actif particulier issu de Lindera strychnifolia et son utilisation sur la peau dans une composition à application topique pour procurer un effet similaire à celui de la luminothérapie en favorisant la synchronisation de l'horloge circadienne cutanée.
L'invention concerne également les compositions cosmétiques incluant un tel principe actif, et un procédé de traitement cosmétique destiné à stimuler les fonctions métaboliques dermiques et à limiter les signes du vieillissement cutané. L'horloge interne du corps humain génère des biorythmes qui permettent d'ajuster de nombreuses fonctions physiologiques et métaboliques selon un cycle circadien (période de 24 heures). Au niveau cutané, elle privilégie ainsi des fonctions protectrices vis-à-vis de l'environnement le jour, tandis que la nuit, elle passe en mode de réparation et de régénération. Cependant des facteurs de stress ou le vieillissement conduisent à une perturbation des biorythmes de la peau causant une désynchronisation des processus métaboliques et le vieillissement prématuré du tissu. Les cellules désynchronisées, ne peuvent plus adapter leur comportement aux variations de l'environnement. Leurs fonctions physiologiques sont ralenties, elles se protègent et se réparent moins bien et vieillissent plus vite. Au niveau de l'organisme, les troubles associés au dérèglement des rythmes biologiques sont la dépression saisonnière, les troubles du sommeil, les problèmes survenant lors du travail posté ou du décalage horaire. Ils se traduisent par une fatigue persistante et une baisse générale du moral et de la motivation. Pour limiter ces troubles, un traitement recommandé et reconnu existe : la luminothérapie. Elle consiste à s'exposer régulièrement à une lumière naturelle utilisant tout le spectre de la lumière diurne excepté les rayons ultraviolets. Cette lumière régule et recale, via les récepteurs de l'oeil, la synchronisation de notre horloge biologique sur les cycles naturels jour/nuit. La demanderesse a démontré et modélisé l'impact de la luminothérapie sur la peau, par des études in vitro et in vivo qui montrent qu'en resynchronisant l'horloge moléculaire, elle permet de relancer le métabolisme des cellules cutanées et d'améliorer l'état de la peau. Si la luminothérapie permet de stimuler les fonctions métaboliques de la peau et limiter les signes du vieillissement, il s'agit d'une méthode fastidieuse et qui nécessite des équipements particuliers non accessibles à tous.
C'est pourquoi l'objectif de la présente invention est de proposer un principe actif destiné à être appliqué sur la peau, présentant un effet similaire à l'action de la luminothérapie. A cet effet, l'invention vise l'utilisation de molécules particulières obtenues à partir de Lindera strychnifolia.
Lindera strychnifolia ou Lindera aggregata ou evergreen lindera, est un arbuste de la famille des Lauraceae, présentant un feuillage persistant et aromatique, constitué de feuilles alternes, vert brillant dessus et duveteuses sur le revers. Les petites fleurs jaunes, parfumées, apparaissent sur les rameaux nus à la fin de l'hiver ; les baies rouges deviennent noires à maturité. Les racines sont légèrement incurvées, fusiformes ou en forme de chapelet, jaune-brun à brun à la surface, avec des rides latérales et des cicatrices de radicelles. Originaire d'Asie du Sud-Est, Lindera strychnifolia est distribué dans plusieurs pays d'Asie tels que la Chine, le Japon, la Corée, le Vietnam et les Philippines.
Ses racines denses et difficiles à casser, à l'odeur camphrée, sont récoltées au mois d'août. Elles sont utilisées traditionnellement par voie orale, concernant essentiellement les douleurs et distensions épigastriques. Elles stimuleraient la production d'acide gastrique et calmeraient les contractions intestinales. Elles seraient également utilisées dans le cas de vomissements ou d'hémorragies. Elles stimuleraient le système nerveux et favoriseraient la transpiration. Elles seraient également antibactériennes. Des extraits de Lindera strychnifolia ont par ailleurs été utilisés dans des produits cosmétiques. Par exemple, la demande JP2002363028 décrit un soin 10 cutané dépigmentant, adoucissant, antirides extrait de feuilles de Lindera strychnifolia. La présente invention vise spécifiquement l'utilisation cosmétique d'un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes comme principe actif dans une composition à application cutanée, pour restaurer l'expression du gène 15 CLOCK dans les cellules de la peau et agir de façon similaire à la luminothérapie. En effet, de façon surprenante l'utilisation sur la peau d'oligo-a-glucanes obtenus par hydrolyse de Lindera strychnifolia permet stimuler l'expression du gène CLOCK et de synchroniser l'horloge circadienne de la peau, comme l'action de séances régulières de luminothérapie. Il permet ainsi de stimuler les fonctions 20 métaboliques de la peau, et d'améliorer l'hydratation, les propriétés biomécaniques et l'éclat de la peau, et de lisser son microrelief. be façon spécifique, l'invention vise également un principe actif cosmétique particulier, à savoir un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligoa-glucanes. 25 Par « hydrolysat » on entend tout extrait obtenu à partir de Lindera strychnifoba, comprenant au moins une étape d'hydrolyse, préférentiellement au moins une étape d'hydrolyse enzymatique.
Par « oligo-a-glucane » on entend toute fraction oligosaccharidique obtenue à partir d'a-glucanes de degré de polymérisation supérieur ou égal à 2 et préférentiellement inférieur à 50. Enfin, l'invention a également pour objet une composition cosmétique contenant ce principe actif, ainsi qu'un procédé de traitement cosmétique destiné à augmenter l'hydratation, la tonicité et l'élasticité de la peau, à lisser le microrelief cutané et/ou à améliorer l'éclat du teint et ainsi limiter les signes du vieillissement de la peau. La présente invention est maintenant décrite en détail, en regard de la figure 1 10 annexée qui représente le profil chromatographique HPLC des carbohydrates présents dans l'exemple 1 du principe actif selon l'invention ; le terme « bP » signifie « degré de polymérisation ». UTILISATION Selon un premier aspect, l'invention vise un hydrolysat de Lindera strychnifolia 15 comprenant des oligo-a-glucanes pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à synchroniser l'horloge circadienne de la peau et stimuler les fonctions métaboliques de la peau. Par composition on entend toute composition adaptée pour une application 20 topique, à savoir toute composition cosmétique ou dermopharmaceutique à application topique, préférentiellement une composition cosmétique. Appliqués sur la peau, le principe actif et/ou la composition permettent notamment d'augmenter l'expression du gène CLOCK dans les cellules cutanées, pour augmenter l'hydratation, la tonicité et l'élasticité de la peau, lisser le 25 microrelief et améliorer l'éclat du teint. Une grande partie des fonctions cutanées fluctuent selon le cycle circadien. Ces biorythmes sont dictés par des gènes horloges spécifiques exprimés dans la peau. Les gènes CLOCK, BMAL1, PERIODS et CRYPTOCHROMES constituent le coeur de la machinerie moléculaire de l'horloge. Le gène CLOCK en particulier est nécessaire à la régulation de la physiologie et de l'homéostasie tissulaire. Son activité entraine la machinerie de l'horloge circadienne en stimulant l'expression des gènes horloge, il intervient dans la régulation épigénétique et contrôle le cycle cellulaire ainsi que de nombreux aspects du métabolisme. Le vieillissement conduit à un dérèglement de l'horloge circadienne caractérisé par une altération de l'expression des gènes horloge. L'efficacité des fonctions métaboliques et physiologiques est réduite, ce qui entraine selon un cycle vicieux le vieillissement prématuré du tissu. Les cellules sénescentes présentent ainsi une expression altérée des gènes horloge. La demanderesse a démontré qu'un traitement avec la luminothérapie et/ou l'utilisation sur la peau d'un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes permettait de restaurer l'expression du gène CLOCK. L'utilisation d'un principe actif selon l'invention, comme la luminothérapie, favorise la synchronisation de l'horloge circadienne cutanée, et permet de stimuler le métabolisme dermique, en particulier d'augmenter l'expression des collagènes I et IV et de la laminine 5. L'utilisation selon l'invention permet, comme la luminothérapie, d'améliorer les paramètres cutanés et de limiter les signes du vieillissement. L'utilisation d'un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes ou la luminothérapie permet notamment d'améliorer l'hydratation, les propriétés biomécaniques et l'éclat de la peau et de lisser son microrelief. L'invention vise donc un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes pour son utilisation comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à - améliorer l'hydratation, les propriétés biomécaniques et/ou l'éclat de la peau, et/ou - à lisser son microrelief. Le principe actif selon l'invention peut en particulier être utilisé pour un effet anti-âge. En outre, de façon avantageuse, l'hydrolysat de Lindera strychnifolla comprenant des oligo-a-glucanes selon l'invention peut être utilisé en association avec la luminothérapie pour un effet synergique. L'efficacité sur la peau de la luminothérapie est en effet boostée lorsque le principe actif selon l'invention est également appliqué sur la peau. L'invention vise donc également l'utilisation d'un hydrolysat de Lindera 10 strychnifolla comprenant des oligo-a-glucanes en association avec la lumi nothérapie. Avantageusement, un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligoa-glucanes utilisé seul ou combiné à la luminothérapie, revitalise les peaux fatiguées et ravive leur éclat pour donner un aspect plus jeune. 15 Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l'invention vise l'utilisation d'un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes tel que décrit en suivant. PRINCIPE ACTIF 20 L'invention concerne également un principe actif cosmétique particulier, à savoir un hydrolysat de Lindera strychnifolla comprenant des carbohydrates. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté les carbohydrates représentent au moins 40% en poids de la matière sèche du principe actif, préférentiellement au moins 60%. 25 Préférentiellement, le principe actif selon l'invention comprend des oligo-a- glucanes notamment des oligo-a-glucanes de degré de polymérisation compris entre 2 et 10.
De façon préférée, les oligo-a-glucanes représentent au moins 14% en poids des sucres totaux du principe actif. Notamment les oligo-a-glucanes peuvent représenter entre 6 et 24% en poids de matière sèche du principe actif, préférentiellement entre 8 et 24%.
Le principe actif selon l'invention est préférentiellement un hydrolysat enzymatique. Le principe actif présente préférentiellement une couleur jaune clair. Il peut se présenter sous forme liquide et être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, préférentiellement toutes.
Matières sèches : Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant) peut être compris entre 10 et 60 g/I, préférentiellement entre 14 et 22 g/I.
Mesure du pH : Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 3 et 5, préférentiellement entre 3,5 et 4,5. Carbohydrates : Détermination de la teneur en sucres totaux Le dosage de la teneur en sucres totaux peut être réalisé par la méthode de DUBOIS (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical chemistry, 28, n°3 p. 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon. La teneur en sucres totaux peut être comprise entre 6,5 et 46 g/I, préférentiellement entre 9 et 17 g/I.
La teneur en sucres totaux est préférentiellement supérieure ou égale à 40% en poids de matière sèche, préférentiellement supérieure ou égale à 60% en poids de matière sèche. Caractérisation de la fraction carbohydrate : L'analyse de la composition en sucres simples du principe actif selon l'invention, montre qu'il est composé essentiellement de glucose et de fructose. La détermination de la taille des carbohydrates d'un principe actif selon l'invention peut être réalisée par chromatographie liquide haute performance. Préférentiellement les sucres du principe actif comprennent entre 76 et 86% de monosaccharides de masse moléculaire inférieure à 180ba et entre 14 et 24% d'oligosaccharides de masse molaire comprise entre 180 et 1780ba (degré de polymérisation maximum de 10).
La caractérisation des carbohydrates du principe actif par chromatographie HPLC, montre que les sucres du principe actif selon l'invention sont pour au moins 14% des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 10. (voir figure 1). Par ailleurs, l'analyse de la composition en sucres simples du principe actif selon l'invention, montre qu'il est composé essentiellement de glucose et de fructose. La fraction glucidique du principe actif selon l'invention est donc composée essentiellement de monosaccharides et d'oligosaccharides d'a-glucanes de degré de polymérisation compris entre 2 et 10.
C'est essentiellement la fraction glucidique et en particulier cette fraction qui confère son effet au principe actif selon l'invention.
Teneur en cendres brutes : La teneur en cendres brutes est déterminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCAN Te ).
Le poids du résidu est calculé en déduisant la tare. La teneur en minéraux est exprimée en pourcentage par rapport au poids total de la matière sèche du principe actif. La teneur en cendres brutes d'un principe actif selon l'invention est préférentiellement inférieure à 40%, en particulier inférieure à 25% en poids par rapport à la matière sèche. Protéines : La teneur en azote total est déterminée par la méthode de KJELDHAL, elle représente la teneur en protéines. La teneur en protéines d'un principe actif selon l'invention est préférentiellement inférieure à 20% en particulier inférieure à 15% en poids par rapport à la matière sèche. Identification fraction active Afin de démontrer que la fraction majoritairement active du principe actif selon l'invention est la fraction glucidique et en particulier la fraction constituée par les oligo-a-glucanes, une étude a été réalisée. Cette étude consiste à fractionner les principales espèces moléculaires du principe actif selon l'invention (principe actif de l'exemple 1) : - une fraction A constituée de cendres, obtenue par ressolubilisation des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique, reprise dans de l'eau distillée et filtrée, - une fraction B contenant 95% des carbohydrates du principe actif, et une très faible quantité de protéines.
Par ailleurs une fraction C a été obtenue en réalisant une hydrolyse enzymatique du principe actif de l'exemple 1 avec une a-amylase, enzyme spécifique des a-glucanes. La fraction C ne contient que des sucres libres sous forme de glucose et de fructose.
L'étude consiste à comparer l'effet de ces différentes fractions sur l'expression du gène CLOCK par PCR quantitative sur fibroblastes humains stressés, au résultat obtenu pour le principe actif selon l'invention à 1%. Le protocole de l'essai est celui décrit au point A.I. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau ci-après Expression de Efficacité / CLOCK (%) Témoin stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées Témoin 23 - Principe actif exemple 1 à 1% 29 +26% Fraction A 21 0 Fraction B 30 +30% Fraction C 20 0 Les fractions A et C ne sont pas efficaces. C'est la fraction B qui confère au principe actif son activité. L'analyse de la fraction B par HPLC (Chromatographie Liquide Haute Performance), montre qu'elle est constituée à au moins 19% d'oligo-a- glucanes de degré de polymérisation majoritairement compris entre 2 et 10. Les oligo-a-glucanes, en particulier les oligo-a-glucanes de degré de polymérisation compris entre 2 et 10, participent donc à conférer au principe actif son efficacité.20 PROCEDE D'OBTENTION Le principe actif selon l'invention tel que décrit précédemment est obtenu par un procédé comprenant une étape d'hydrolyse, préférentiellement une hydrolyse enzymatique.
Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes - solubilisation de poudre de racines de Lindera strychnifolha dans l'eau, - hydrolyse enzymatique, préférentiellement des carbohydrates, - séparation des phases soluble et insoluble par filtration, décantation ou 10 centrifugation, - inactivation thermique des activité enzymatiques - filtration et récupération du filtrat, - concentration de la fraction active, - filtration et filtration stérilisante. 15 Des étapes de désodorisation et de décoloration peuvent être ajoutées. Les paramètres des différentes étapes doivent être ajustés afin d'obtenir des principes actifs comprenant des oligo-a-glucanes, préférentiellement des oligo-aglucanes de degré de polymérisation compris entre 2 et 6, en particulier un principe actif dans lequel les oligo-a-glucanes représentent au moins 14% en 20 poids des sucres totaux du principe actif. COMPOSITIONS ET PROCEDE COSMETIQUE DE SOIN DE LA PEAU La présente invention couvre aussi les compositions, en particulier les compositions cosmétiques, incluant un hydrolysat de Lindera strychnifolha 25 comprenant des oligo-a-glucanes, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huiledans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Il peut s'agir de compositions comprenant entre 0,1 et 3% de principe(s) actif(s) issu(s) de la présente invention. Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ; - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ; - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ; - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ; - les filtres organiques, - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, -et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council). Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'ad jonction envisagée.
Ces compositions sont notamment destinées à agir de façon similaire à la luminothérapie sur la peau, en particulier à synchroniser l'horloge circadienne de la peau notamment en stimulant l'expression du gène CLOCK. Ces compositions sont donc essentiellement destinées à augmenter l'hydratation et/ou la tonicité et/ou l'élasticité de la peau et/ou lisser le microrelief et/ou améliorer l'éclat du teint. L'invention vise donc également à cet effet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à augmenter l'hydratation et/ou la tonicité et/ou l'élasticité de la peau et/ou lisser le microrelief et/ou améliorer l'éclat du teint, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des o I igo-a-glucanes. Enfin l'invention vise aussi un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre les manifestations du vieillissement cutané, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des o I i go-a-glucanes.25 EXEMPLES Un exemple non limitatif de procédé d'obtention et de principe actif selon l'invention est présenté en suivant, ainsi que des exemples de composition incluant un tel principe actif.
Exemple 1 : principe actif selon l'invention Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de racines de Lindera strychnifolia dans l'eau à raison de 50g/I, - hydrolyse enzymatique à l'aide d'une carbohydrase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation thermique des activités enzymatiques, - filtration et récupération du filtrat, - concentration de la fraction active, - filtration et filtration stérilisante. Le principe actif obtenu présente les caractéristiques suivantes : - aspect : liquide limpide - couleur : jaune clair - teneur en matières sèches : 23,4 g/I - pH : 4,1 - teneur en sucres totaux : 18,2 g/I, soit 78% en poids par rapport à la matière sèche, dont 19% sous forme d'oligo-a-glucanes - teneur en protéines totales : 8,2% en poids par rapport à la matière sèche - teneur en cendres : 13,8% en poids par rapport à la matière sèche. Exemple 2 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une crème de jour Phase A . Eau QSP 100% Glycérine 13,5% 15 Alginate de sodium 2% Phase B. Montanov 68 (Seppic) 2% Montanov 14 (Seppic) 1% Pelemol BB (Phoenix Chemical) 2,5% Pelemol 2014 (Phoenix Chemical) 5,5% Sophim MC30 (Sophim) 4,5% DUB MCT5545 (Stéarinerie Dubois) 6,5% DUB aprilose (Stéarinerie Dubois) 2,5% DUB OK18 (Stéarinerie Dubois) 3,5% Isopropyl palmitate 4% Phase C. Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Conservateur 0,7% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Ce gel émulsionné épais fondant et blanc a un pH de 6. En application topique, il 15 présente une pénétration rapide, un effet évanescent et un fini doux. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A, et chauffer au bain marie à 80°C sous agitation mécanique, en veillant à bien disperser le gel, - mélanger B, et chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, 20 - émulsionner B dans A sous rotor sator à 1800 trs/min, - à 30°C, ajouter C dans l'ordre, toujours sous rotor sator à 1500 trs/min, - laisser refroidir, sous rotor sator jusqu'à complète homgénéisation. Exemple 3 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une crème de nuit Phase A. Eau QSP 100 % 25 Carbopol ETI) 2020 (Novéon) 1,2% Glycérine 4,5% Phase B. Alcool Cetearyl 4% Isopropyl Palmitate 8% Montanox 80 (Seppic) 3,5% Huile de palme raffinée (Sictia) 3,5% Simulsol M59 (Seppic) 2% Phase C. Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Conservateur 0,7 % Phase D. Hydroxyde de sodium qsp pH 5,5 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Ce gel émulsionné compact et blanc présente un pH de 5,5. En application topique, il présente une application douce avec un fini sec et un effet frais. 10 Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A, chauffer au bain marie à 80°C sous agitation magnétique en veillant à bien disperser le gel, - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous émulseur rotor stator à 2200 tours/minute, 15 - à 40°C, additionner C dans l'ordre sous rotor sator à 2000 tours/minute, - Ajuster le pH avec b sous agitation mécanique à 1800 tours/minute - laisser refroidir sous agitation. Exemple 4 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans un fluide de jour Phase A. Eau QSP 100% 20 Phase B. Cire de Lanol CTO (Seppic) 4% Sophiderm (Sophim) 4,5% DUB MCT5545 (Stéarinerie Dubois) 2% DUB1632 (Stéarinerie Dubois) 4% Simulsol 78 (Seppic) 2% 25 Montanov 202 (Seppic) 2% Phase C. Conservateur 0,7 % Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Cette émulsion mousseuse et blanche présente un pH de 5. En application topique, elle présente un étalement confortable avec un fini sec et doux et un effet fi lmogène. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes - mélanger A, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous rotor-stator à 2200 tours/minute, - ajouter C aussitôt dans l'ordre indiqué sous rotor-sator à 2200 tours/min, - laisser refroidir sous agitation, jusqu'à complète homogénéisation. Exemple 5 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une émulsion de jour Phase A. Eau Q5P 100% Phase B. Montanov 68 (Seppic) 2% Montanov 14 (Seppic) 3% Lanol 99 (Seppic) 5% Conservateur 0,7% Phase C. Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Phase D. Sepigel 305 (Seppic) 0,3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion présente un pH de 6,3. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A au bain marie à 80°C, - mélanger B, dans une marmite et chauffer au bain-marie à 80°C, - émulsionner A dans B sous rotor-sator entre 2000 et 5000 tours/minute, - à 50°C, ajouter C, puis I), toujours sous rotor sator - laisser agiter jusqu'à complet refroidissement.
EVALUATION DE L'EFFICACITE COSMETIQUE D'UN PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION A. Tests in vitro A.I. Etude de l'effet du principe actif selon l'invention et de la luminothérapie sur l'horloge circadienne L'objectif de cette étude est d'évaluer la capacité d'un principe actif selon l'invention et/ou de l'effet de la luminothérapie à limiter la désynchronisation de l'horloge circadienne en étudiant l'expression du gène CLOCK. Cette étude a été réalisée, par PCR quantitative, sur des fibroblastes humains normaux ayant subi une désynchronisation du gène CLOCK induite par un stress UV, selon le protocole opératoire décrit en suivant. A JO, les fibroblastes humains normaux sont ensemencés dans du milieu de culture adapté puis ils sont incubés à 37°C. Ils sont ensuite traités avec le principe actif de l'exemple 1 à 0,5% et 1% (V/V) et/ou soumis au rayonnement d'une lampe de luminothérapie (Philips Energylight) 15 à une distance de 20 cm avec une intensité lumineuse de 10 000 lux pendant 30 min. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A J1 et à J2 les fibroblastes sont traités de la même façon qu'à JO. A J2, après le troisième traitement, les fibroblastes sont soumis à un stress désynchronisant : les cellules sont rincées avec du PBS puis soumises à un stress 20 UVB (20mJ/cm2). Les fibroblastes humains sont ensuite incubés à 37°C dans du milieu adapté pendant 8h ou 24h. Les cellules sont récupérées 8 heures (T8H) et 24 heures (T24H) après ce stress. Sur les cellules récupérées à T8H et T24H, les ARN totaux sont extraits. 25 Les ARN ont été reverse-transcripts et les ADN complémentaires obtenus analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm de la protéine ribosomale 527, témoin interne de référence, ont également été analysés en parallèle des ARNm de CLOCK.
La quantification de l'incorporation de fluorescence a été mesurée en continu à l'aide d'un thermocycleur. L'analyse des Ct (quantification relative) a été réalisée à l'aide d'un logiciel. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 1 pour T8H et dans le 5 tableau 2 pour T24H. Tableau 1 : T8H Expression de Efficacité / CLOCK (%) Témoin stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées Témoin 23 - Principe actif exemple 1 0,5% 25 +9% Principe actif exemple 1 1% 29 +26% Luminothérapie 30 +30% Luminothérapie + 32 +39% Principe actif exemple 1 1% Tableau 2 : T24H Expression de Efficacité / CLOCK (%) Témoin stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées Témoin 79 - Principe actif exemple 1 0,5% 92 +17% Principe actif exemple 1 1% 102 +29% Luminothérapie 100 +27% Luminothérapie + 108 +37% Principe actif exemple 1 1% Ces résultats montrent que l'application d'un stress UV sur des fibroblastes humains entraine une diminution de l'expression du gène clock de 77% à T8H et de 21% à T24H par rapport aux fibroblastes humains normaux. On constate également que l'utilisation d'un principe actif selon l'invention permet de limiter la désynchronisation de l'horloge circadienne des fibroblastes humains en stimulant l'expression du gène CLOCK. En particulier, testé à 1% le principe actif selon l'invention stimule l'expression du gène CLOCK : - de 26%, 8H après le stress désynchronisant, - de 29%, 24H après le stress désynchronisant.
Cet effet est comparable à celui obtenu avec le traitement en luminothérapie. On constate enfin que l'utilisation d'un principe actif selon l'invention en association à la luminothérapie permet de booster cet effet. A.II. Etude de l'effet du principe actif selon l'invention et de la luminothérapie sur le métabolisme L'objectif de cette étude est d'évaluer la capacité d'un principe actif selon l'invention et/ou l'effet de la luminothérapie à stimuler le métabolisme de fibroblastes humains ayant subi une désynchronisation du gène CLOCK par un stress UV. La désynchronisation de l'horloge circadienne conduit en effet à un ralentissement des fonctions métaboliques. Cette étude a été réalisée en évaluant l'expression du collagène I, du collagène IV et de la laminine 5, par PCR quantitative, sur des fibroblastes humains normaux, selon le protocole opératoire décrit en suivant. A JO, les fibroblastes humains normaux sont ensemencés dans du milieu MEM 25 supplémenté avec 10% de SVF puis ils sont incubés à 37°C. Ils sont ensuite traités avec le principe actif de l'exemple 1 à 0,5% et 1% (V/V) et/ou soumis au rayonnement d'une lampe de luminothérapie (Philips Energylight) à une distance de 20 cm avec une intensité lumineuse de 10 000 lux pendant 30 min. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A J1 et à J2 les fibroblastes sont traités de la même façon qu'à JO.
A J2, après le troisième traitement, les fibroblastes sont soumis à un stress désynchronisant : les cellules sont rincées avec du PBS puis soumises à un stress UVB (2OmJ/cm2). Les fibroblastes humains sont ensuite incubés à 37°C dans du milieu MEM complet pendant 24h. Les cellules sont récupérées et les ARN totaux sont extraits.
Les ARN ont été reverse-transcripts et les ADN complémentaires obtenus analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm de la protéine ribosomale 527, témoin interne de référence, ont également été analysés en parallèle des ARNm de collagène I, de collagène IV et de laminine 5. La quantification de l'incorporation de fluorescence a été mesurée en continu à l'aide d'un thermocycleur. L'analyse des Ct (quantification relative) a été réalisée à l'aide d'un logiciel. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 3 pour le collagène I, dans le tableau 4 pour le collagène IV et dans le tableau 5 pour la laminine 5. Tableau 3 Expression collagène I (%) Efficacité / Témoin stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées Témoin 38 - Principe actif exemple 1 0,5% 42 +11% Principe actif exemple 1 1% 48 +26% Luminothérapie 49 +29%20 Tableau 4 Expression collagène IV (%) Efficacité / Témoin stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées Témoin 33 - Principe actif exemple 1 0,5% 36 +9% Principe actif exemple 1 1% 45 +36% Luminothérapie 40 +21% Tableau 5 Taux AR Ilm de Efficacité / Témoin laminine 5 (%) stressé (%) Cellules non stressées Témoin 100 Cellules stressées UV Témoin 25 - Principe actif exemple 1 0,5% 32 +28% Principe actif exemple 1 1% 33 +32% Luminothérapie 33 +32% Ces résultats montrent que les expressions du collagène I, du collagène IV et de la laminine 5 par les fibroblastes humains ayant subi une désynchronisation du gène CLOCK sont fortement réduites par rapport aux fibroblastes humains normaux (dans les conditions de cette étude elles sont réduites respectivement de 62%, 67% et 75%).
On constate également que l'utilisation d'un principe actif selon l'invention permet de réduire l'altération de l'expression du collagène I, du collagène IV et de la laminine 5. En particulier, testé à 1% le principe actif selon l'invention permet de réduire l'altération de l'expression : - du collagène I de 26%, - du collagène IV de 36%, et - de la laminine 5 de 32%. Le principe actif selon l'invention est donc capable de limiter la diminution des capacités métaboliques de fibroblastes humains ayant subi une désynchronisation du gène CLOCK. Cet effet est comparable à celui obtenu avec le traitement en luminothérapie.
B. Tests in vivo B.I. Objectif et paramètres des tests in vivo L'objectif de l'étude in vivo est d'évaluer la capacité d'un principe actif selon l'invention (exemple 1) formulé à 3% en émulsion (exemple 5) à mimer ou à potentialiser les bénéfices apportés par la luminothérapie sur les paramètres cutanés de volontaires. L'étude s'est déroulée en deux étapes : - Evaluation de l'impact de la luminothérapie sur différents paramètres cutanés dans un premier temps, puis - Etude de la capacité d'un principe actif selon l'invention à améliorer ces mêmes paramètres cutanés. Description du panel de volontaires Les volontaires ont été sélectionnés selon un croisement de plusieurs critères : - Age moyen 60 ans - Teint à tendance terne (selon notation par experts) - Stade de rides au niveau de la patte d'oie entre 2 et 4 - Niveau de stress ; le niveau de stress des volontaires a été évalué en utilisant le questionnaire Perceived Stress Scale (P55) présentant 14 items (P55 14) (Cohen et al., Journal of Health and Social Behavior, 1983, 24, pp. 385-396). Ce degré de stress est classé en 3 niveaux différents selon le score obtenu * Stress léger (score de 14 à 25) * Stress irrégulier, dit modéré (score de 26 à 39) * Stress régulier (score de 40 à 70). Les volontaires sélectionnés ont ensuite été répartis en deux groupes : groupe A avec luminothérapie : groupe de 19 volontaires d'âge compris entre 55 et 67 ans ayant bénéficié de séances de luminothérapie et appliqué matin et soir le principe actif et/ou la formule placebo en hémi- visage ; 68% des volontaires de ce groupe présentaient un niveau de stress allant de modéré à régulier. groupe B sans luminothérapie : groupe de 21 volontaires d'âge compris entre 50 et 64 ans n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie et ayant appliqué matin et soir le principe actif et/ou la formule placebo en hémi-visage ; 76% des volontaires de ce groupe présentaient un niveau de stress allant de modéré à régulier. Description des séances de luminothérapie Pour les différents tests de l'étude in vivo, les séances de luminothérapie se sont déroulées à l'aide de lampes EnergyLight (Réf. HF3309, Philips) délivrant une lumière avec une intensité lumineuse de 10 000 Lux, utilisant tout le spectre de lumière diurne naturelle et possédant un filtre UV. Les volontaires étaient placés pendant 30 minutes à 20 cm de la lampe. Description des études Les paramètres cutanés étudiés sont : les propriétés biomécaniques, le relief cutané, le taux d'hydratation, l'évaluation visuelle de l'éclat du teint. - L'étude des propriétés biomécaniques de la peau est réalisée à l'aide d'un Cutomètre® au niveau des joues. Parmi tous les paramètres obtenus, les paramètres suivants sont retenus pour quantifier l'évolution des propriétés 5 biomécaniques au niveau des joues : o la tonicité de la peau qui est appréciée par le paramètre X (tonicité ou rétractation élastique) : si 1/X ou -X augmente, la tonicité augmente. o l'élasticité de la peau qui est appréciée par le paramètre 10 R5 (Elasticité nette) : si R5 augmente, l'élasticité de la peau augmente. - Les mesures du taux d'hydratation ont été effectuées à l'aide d'un Cornéomètre® au niveau des joues. Cette mesure est reliée directement à l'état d'hydratation de la peau. 15 -L'étude du relief cutané a été réalisée par des acquisitions du relief de la patte d'oie à l'aide d'un appareil de projection de franges dédié à la mesure 31) du relief cutané. Le paramètre retenu pour présenter les résultats est le paramètre Sa, représentatif de la rugosité en 31) (moyenne arithmétique de rugosité de surface). Une diminution de ce paramètre est caractéristique d'une 20 amélioration du relief de la surface étudiée et d'une diminution des rides. - L'évaluation de l'éclat du teint est réalisée en aveugle par deux experts préalablement entraînés à juger différents paramètres représentatifs de l'éclat du teint. L'évaluation se fait à partir d'échelles de scores (de 1 à 10) et les paramètres retenus pour l'étude sont : 25 ^ La transparence de la peau permettant d'apercevoir les veinules à travers la peau. Plus une peau est fine et transparente, plus elle laisse passer la lumière naturelle de la peau, ce qui donne un effet bonne mine. ^ Le rayonnement de la peau caractéristique d'un teint éclatant. Plus l'intensité des accroches de lumière sur les zones saillantes du visage est important, plus la peau est lumineuse. L'évaluation de ces différents paramètres se fait sur les zones suivantes - Pommettes - Front - Menton - Yeux B.II. Etude de l'impact de séances régulières de luminothérapie sur différents 10 paramètres cutanés L'objectif de l'étude est d'évaluer, in vivo sur volontaires, l'impact de séances régulières de luminothérapie sur différents paramètres cutanés : - les propriétés biomécaniques - le taux d'hydratation 15 - le relief cutané - l'éclat du teint Les méthodes utilisées sont celles décrites au point B.I. Cette étude a été réalisée sur le groupe A avec luminothérapie traité placebo et le groupe B sans luminothérapie traité placebo. 20 Les différentes évaluations ont été réalisées avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes du placebo et de séances de luminothérapie pour le groupe A et avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes sans luminothérapie du placebo pour le groupe B. Le protocole opératoire est le suivant. 25 Entre J-14 et Jo, les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo sur l'ensemble du visage.
A Jo, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. Entre Jo et J27 - applications biquotidiennes du placebo et séances de 30 min de luminothérapie 3 fois par semaine (tous les 2 jours) pour le groupe A, - applications biquotidiennes du placebo pour le groupe B. A J28, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une 10 salle contrôlée en température et hygrométrie. Les résultats obtenus sont présentés dans les tableaux 6 à 9 ci-dessous Tableau 6 : propriétés biomécaniques Variation / JO (%) Elasticité Tonicité (Paramètre R5) (Paramètre -X) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,4% +6,9% Groupe B - sans luminothérapie zone placebo +0,3% +2,7% Ces résultats montrent qu'après 1 mois de séances régulières de luminothérapie, une amélioration significative des propriétés biomécaniques des volontaires du 15 groupe A avec luminothérapie traités par placebo a été observée : - augmentation de 7,4% (p=0,0027) de l'élasticité de la peau, représentée par le paramètre R5. - augmentation de 6,9% (p=0,0017) de la tonicité de la peau, représentée par le paramètre -X. 20 Cet effet est supérieur à celui observé sur le groupe B traité par le placebo et n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie.
On constate ainsi qu'un traitement de luminothérapie présente un effet bénéfique sur des paramètres cutanés, notamment ceux liés à l'élasticité et à la tonicité de la peau. Tableau 7 : hydratation de la peau Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +12,2% Groupe B - sans luminothérapie zone placebo - 0,1% Ces résultats montrent qu'après 1 mois de séances régulières de luminothérapie, le taux d'hydratation cutané a augmenté de 12,2% sur le groupe A avec luminothérapie traité par le placebo. Cet effet est supérieur à celui observé sur le groupe B traité par le placebo et n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. On constate ainsi que des séances régulières de luminothérapie améliorent l'hydratation de la peau. Tableau 8 : relief cutané Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo - 4,3% Groupe B - sans luminothérapie zone placebo +1,9% Ces résultats montrent qu'après 1 mois de séances régulières de luminothérapie, le paramètre Sa a diminué sur le groupe A avec luminothérapie traité par le placebo (- 4,3%). Cet effet est significativement supérieur à celui observé sur le groupe B traité par le placebo et n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie.
On constate ainsi que les séances de luminothérapie ont un effet bénéfique sur le relief cutané au niveau de la patte d'oie.
Tableau 9 : éclat du teint Variation / JO (%) Transparence Rayonnement Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,7% +9,3% Groupe B - sans luminothérapie zone placebo +1,2% - 0,8% Ces résultats montrent qu'après 1 mois de séances régulières de luminothérapie, 5 une amélioration significative des paramètres importants entrant dans la perception de l'éclat du teint, a été observée : - augmentation du paramètre transparence de 7,7% - augmentation du paramètre rayonnement de 9,3% Cet effet est supérieur à celui observé sur le groupe B traité par le placebo et 10 n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. On constate ainsi qu'un traitement de luminothérapie a un impact positif sur les paramètres liés à l'éclat du teint. Cette étude a donc permis de montrer que des séances régulières de luminothérapie permettent d'améliorer les paramètres cutanés suivants : la 15 tonicité et l'élasticité, l'hydratation, le relief cutané et l'éclat du teint. B.III. Etude de l'effet similaire à celui de la luminothérapie d'un principe actif selon l'invention L'objectif de l'étude est d'évaluer, in vivo sur volontaires, l'effet similaire à la luminothérapie d'un principe actif selon l'invention (exemple 1) formulé à 3% en 20 émulsion (exemple 5) sur différents paramètres cutanés : - les propriétés biomécaniques - le taux d'hydratation - le relief cutané - l'éclat du teint Les méthodes utilisées sont celles décrites au point B.I. Cette étude a été réalisée sur le groupe A avec luminothérapie traité placebo et le groupe B sans luminothérapie traité avec le principe actif selon l'invention.
Les différentes évaluations ont été réalisées avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes du placebo et de séances de luminothérapie pour le groupe A et avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes du principe actif selon l'invention (exemple 1) formulé à 3% en émulsion (exemple 5) sans luminothérapie pour le groupe B. Le protocole opératoire est le suivant.
Entre J-14 et Jo, les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo sur l'ensemble du visage. A Jo, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie.
Entre Jo et J27 - applications biquotidiennes du placebo et séances de 30 min de luminothérapie 3 fois par semaine pour le groupe A, - applications biquotidiennes du principe actif selon l'invention pour le groupe B.
A J28, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. Les résultats obtenus sont présentés dans les tableaux 10 à 13 ci-dessous Tableau 10 : propriétés biomécaniques Variation / JO (%) Elasticité Tonicité (Paramètre R5) (Paramètre -X) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,4% +6,9% Groupe B - sans luminothérapie zone principe actif exemple 1 +8,9% +7,7% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore les paramètres caractéristiques de l'élasticité (+8,9%) et de la tonicité (+7,7%) de la peau des volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. Cet effet est comparable à l'impact de séances régulières de luminothérapie sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo (résultats obtenus pour le groupe A). Tableau 11 : hydratation de la peau Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +12,2% Groupe B - sans luminothérapie zone principe actif exemple 1 +12,5% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion augmente le taux d'hydratation de 12,5% de la peau des volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie.
Cet effet est comparable à l'impact de séances régulières de luminothérapie régulières sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo (résultats obtenus pour le groupe A).
Tableau 12 : relief cutané Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo - 4,3% Groupe B - sans luminothérapie zone principe actif exemple 1 -6,9% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore le relief cutané en permettant une diminution du paramètre Sa représentatif de la rugosité de la peau (-6,9%) chez les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. Cet effet est comparable à l'impact de séances régulières de luminothérapie régulières sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo (résultats obtenus pour le groupe A).
Tableau 13 : éclat du teint Variation / JO (%) Transparence Rayonnement Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,7% +9,3% Groupe B - sans luminothérapie zone principe actif exemple 1 +9,3% +10,0% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore la transparence (+9,3%) et le rayonnement (+10,0%) de la peau chez les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. Cet effet est comparable à l'impact de séances régulières de luminothérapie sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo (résultats obtenus pour le 5 groupe A). Cette étude a donc permis de montrer que l'application d'un principe actif sur la peau permet d'améliorer la tonicité, l'élasticité et l'hydratation de la peau, le relief cutané et l'éclat du teint, de façon comparable aux effets obtenus par des séances régulières de luminothérapie. Le principe actif selon l'invention a bien 10 effet similaire à celui de la luminothérapie. B.IV. Etude de la capacité d'un principe actif selon l'invention à potentialiser les effets bénéfiques de séances de luminothérapie L'objectif de l'étude est d'évaluer, in vivo sur volontaires, la capacité d'un 15 principe actif selon l'invention (exemple 1) formulé à 3% en émulsion (exemple 5) à potentialiser les effets bénéfiques de séances de luminothérapie en comparaison à un placebo, sur différents paramètres cutanés - les propriétés biomécaniques - le taux d'hydratation 20 - le relief cutané - l'éclat du teint Les méthodes utilisées sont celles décrites au point B.I. Cette étude a été réalisée sur le groupe A avec luminothérapie traité sur une zone avec le placebo et sur une autre zone avec le principe actif selon l'invention. 25 Le protocole opératoire est le suivant. Entre J-14 et Jo, les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo sur l'ensemble du visage.
A Jo, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. Entre Jo et J27, les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo et le 5 principe actif selon l'invention et réalisent des séances de 30 min de luminothérapie 3 fois par semaine. A J28, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. 10 Les résultats obtenus sont présentés dans les tableaux 14 à 17 ci-dessous Tableau 14 : propriétés biomécaniques Variation / JO (%) Elasticité Tonicité (Paramètre R5) (Paramètre -X) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,4% +6,9% Groupe A - avec luminothérapie zone principe actif exemple 1 +13,2% +13,1% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, 15 l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore les paramètres caractéristiques de l'élasticité (+13,2%) et de la tonicité (+13,1%) de la peau des volontaires ayant bénéficié de séances régulières de luminothérapie. Cet effet est supérieur à l'impact de séances régulières de luminothérapie 20 régulières sur des volontaires ayant appliqué la formule.
Tableau 15 : hydratation de la peau Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +12,2% Groupe A - avec luminothérapie zone principe actif exemple 1 +24,6% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en 5 émulsion augmente le taux d'hydratation de 24,6% de la peau des volontaires ayant bénéficié de séances régulières de luminothérapie. Cet effet est supérieur à l'impact de séances régulières de luminothérapie sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo. 10 Tableau 16 : relief cutané Variation / JO (%) Groupe A - avec luminothérapie zone placebo - 4,3% Groupe A - avec luminothérapie zone principe actif exemple 1 -8,9% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore le relief cutané en permettant une diminution du paramètre Sa représentatif de la rugosité de la peau (-8,9%) chez les volontaires ayant 15 bénéficié de séances régulières de luminothérapie. Cet effet est supérieur à l'impact de séances régulières de luminothérapie sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo.
Tableau 17 : éclat du teint Variation / JO (%) Transparence Rayonnement Groupe A - avec luminothérapie zone placebo +7,7% +9,3% Groupe A - avec luminothérapie zone principe actif exemple 1 +14,7% +18,5% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion améliore la transparence (+14,7%) et le rayonnement (+18,5%) de la peau chez les volontaires ayant bénéficié de séances régulières de luminothérapie. Cet effet est supérieur à l'impact de séances régulières de luminothérapie sur des volontaires ayant appliqué la formule placebo. Cette étude a donc permis de montrer que l'application d'un principe actif sur la peau permet d'améliorer la tonicité, l'élasticité et l'hydratation de la peau, le relief cutané et l'éclat du teint, sur des volontaires suivant régulièrement des séances de luminothérapie. Cet effet est supérieur à celui du placebo étudié sur le même groupe. Ainsi le principe actif selon l'invention potentialise les effets bénéfiques de la luminothérapie sur la peau.
B.V. Etude de la capacité d'un principe actif selon l'invention sur les propriétés biomécaniques, l'hydratation, le relief cutané et l'éclat du teint L'objectif de l'étude est d'évaluer, in vivo sur volontaires, la capacité d'un principe actif selon l'invention (exemple 1) formulé à 3% en émulsion (exemple 5) en comparaison à un placebo, sur différents paramètres cutanés : - les propriétés biomécaniques - le taux d'hydratation - le relief cutané - l'éclat du teint Les méthodes utilisées sont celles décrites au point B.I. Cette étude a été réalisée sur le groupe A avec luminothérapie, traité sur une zone avec le placebo et sur une autre zone avec le principe actif selon l'invention, et sur le groupe B sans luminothérapie, traité sur une zone avec le placebo et sur une autre zone avec le principe actif selon l'invention. Le protocole opératoire est le suivant. Entre J-14 et Jo, les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo sur l'ensemble du visage. A Jo, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux 20 mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. Entre Jo et J27 - les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo et le principe actif selon l'invention et réalisent des séances de 30 min de luminothérapie 3 25 fois par semaine, pour le groupe A, et - les volontaires appliquent deux fois par jour le placebo et le principe actif selon l'invention, pour le groupe B.
A J28, les volontaires n'appliquent pas de produit sur le visage et on procède aux mesures des différents paramètres après une phase d'acclimatation dans une salle contrôlée en température et hygrométrie. Les résultats obtenus avec le principe actif selon l'invention en pourcentage de 5 variation par rapport aux résultats obtenus avec le placébo, sont présentés dans les tableaux 18 à 21 ci-dessous Tableau 18 : propriétés biomécaniques Variation / placebo (%) Elasticité Tonicité (Paramètre R5) (Paramètre -X) Groupe A - avec luminothérapie +5,5% +6,7% Groupe B - sans luminothérapie +8,6% +10,2% 10 Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion et en comparaison au placebo, améliore les paramètres caractéristiques : - de l'élasticité, de 5,5% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de 15 luminothérapie et de 8,6% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie, - de la tonicité (+13,1%) de 6,7% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de luminothérapie et de 10,2% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. 20 Le principe actif selon l'invention améliore donc les propriétés biomécaniques de la peau tant sur un groupe ayant bénéficié de séances de luminothérapie que sur un groupe n'en n'ayant pas reçu.
Tableau 19 : hydratation de la peau Variation / placebo (%) Groupe A - avec luminothérapie +11,1% Groupe B - sans luminothérapie +12,7% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion et en comparaison au placebo, améliore l'hydratation de la peau de 11,1% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de luminothérapie et de 12,7% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. Le principe actif selon l'invention améliore donc l'hydratation cutanée tant sur un 10 groupe ayant bénéficié de séances de luminothérapie que sur un groupe n'en n'ayant pas reçu. Tableau 20 : relief cutané Variation / placebo (%) Groupe A - avec luminothérapie - 4,8% Groupe B - sans luminothérapie -8,5% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, 15 l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion et en comparaison au placebo, diminue le paramètre Sa caractéristique de la rugosité de la peau de 4,8% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de luminothérapie et de 8,5% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. 20 Le principe actif selon l'invention permet donc de lisser le microrelief cutané et présente un effet anti-rides, tant sur un groupe ayant bénéficié de séances de luminothérapie que sur un groupe n'en n'ayant pas reçu.
Tableau 21 : éclat du teint Variation / placebo (%) Transparence Rayonnement Groupe A - avec luminothérapie +6,5% +8,4% Groupe B - sans luminothérapie +8,0% +10,9% Ces résultats montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, l'application sur la peau d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion et en comparaison au placebo, améliore : - La transparence de la peau, de 6,5% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de luminothérapie et de 8,0% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie, - Le rayonnement de la peau, de 8,4%% pour les volontaires ayant bénéficié de séances de luminothérapie et de 10,9% pour les volontaires n'ayant pas bénéficié de séances de luminothérapie. Le principe actif selon l'invention permet ainsi à la peau de paraître naturellement plus lumineuse, tant sur un groupe ayant bénéficié de séances de luminothérapie que sur un groupe n'en n'ayant pas reçu. Cette étude a donc permis de montrer que l'application d'un principe actif sur la peau permet d'améliorer la tonicité, l'élasticité et l'hydratation de la peau, le relief cutané et l'éclat du teint, et ce aussi bien sur un groupe ayant bénéficié de séances de luminothérapie que sur un groupe n'en n'ayant pas reçu.
Claims (14)
- REVENDICATIONS1. Principe actif destiné à une utilisation dans une composition à application cutanée caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de Lindero strychnifolia comprenant au moins 40% de carbohydrates par rapport au poids total de matière sèche.
- 2. Principe actif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de Lindero strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes.
- 3. Principe actif selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de Lindera strychnifolia comprenant des oligo-a-glucanes de degré de polymérisation compris entre 2 et 10.
- 4. Principe actif selon l'une revendications 2 ou 3, caractérisé en que les oligo-a-glucanes représentent au moins 14% des sucres totaux présents dans le principe actif.
- 5. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat enzymatique de Lindero strychnifolia.
- 6. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé par au moins l'une des caractéristiques suivantes : - une teneur en matière sèche comprise entre 10 et 60g/I, - une teneur en sucres totaux comprise entre 6,5 et 46g/I.
- 7. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé par 20 au moins l'une des caractéristiques suivantes : - une teneur en matière sèche comprise entre 14 et 229/I, - une teneur en sucres totaux comprise entre 9 et 17g/l.
- 8. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit 25 principe actif et/ou ladite composition étant destinés à synchroniser l'horloge circadienne de la peau pour améliorer l'état de la peau.- 42
- 9. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à synchroniser l'horloge circadienne de la peau pour améliorer l'état de la peau en augmentant l'expression du gène CLOCK dans les cellules cutanées.
- 10. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à stimuler le métabolisme des cellules cutanées.
- 11. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour son application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à augmenter l'hydratation et/ou la tonicité et/ou l'élasticité de la peau et/ou à lisser le microrelief et/ou à améliorer l'éclat du teint.
- 12. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour sort application comme principe actif dans une composition à application cutanée, ledit principe actif et/ou ladite composition étant destinés à limiter les signes du vieillissement cutané.
- 13. Composition cosmétique pour application topique, caractérisée en ce 20 qu'elle comprend un principe actif selon l'une des revendications 1 à 12 présent entre 0,1 et 3% en poids total de la composition.
- 14. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à améliorer l'état de la peau et/ou limiter les signes du vieillissement cutané, comprenant l'application sur la peau d'une composition selon la revendication 13 seule ou en 25 association avec des séances de luminothérapie.
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