FR2961402A1 - Compositions contenant des arabinoxylo-oligosaccharides et leurs utilisations - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne des compositions contenant des arabinoxylo-oligosaccharides en tant qu'agents blanchissant ou éclaircissant la peau et l'utilisation de ces compositions.

Description

COMPOSITIONS CONTENANT DES ARABINOXYLO-OLIGOSACCHARIDES ET LEURS UTILISATIONS

La présente invention concerne des compositions contenant des arabinoxylo-oligosaccharides et l'utilisation de ces compositions en cosmétique et en dermatologie. Chez les mammifères en général, particulièrement chez l'Homme, la peau est constituée de deux parties principales, à savoir une couche externe, l'épiderme et une couche interne, le derme. L'épiderme assure l'imperméabilité de la peau et sa résistance. Elle se renouvelle toutes les quatre semaines environ par l'élimination des cellules mortes superficielles. L'épiderme est composé principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes, très majoritaires, les mélanocytes et les cellules de Langerhans. Chacun de ces types cellulaires contribue par ses fonctions propres au rôle essentiel joué dans l'organisme par la peau.

Les mélanocytes peuvent être trouvés dans le derme et l'épiderme, mais sont majoritairement situés au niveau de la couche basale. Ils sont spécialisés dans la production des mélanosomes, au sein desquels a lieu le processus de la mélanogénèse. Ces mélanosomes peuvent être déplacés au sein du mélanocyte ou transportés vers les kératinocytes environnant. Ils peuvent également être ingérés par endocytose dans des macrophages, ces derniers devenant alors des mélanophages. La mélanogénèse permet la synthèse de différents types de macromolécules pigmentaires appelées mélanines, à partir d'un acide aminé, la L-tyrosine. Ces mélanines convertissent en chaleur l'énergie des radiations ultraviolettes émanant du soleil, et limitent ainsi la formation de radicaux libres toxiques pour l'ADN. Il est à noter qu'outre ce rôle photoprotecteur chez l'Humain, les différentes mélanines fournissent d'autres fonctions au sein du monde vivant, comme par exemple l'encapsulation d'agents pathogènes chez certains invertébrés, ou encore une protection par camouflage chez certains animaux. La mélanogénèse est un processus métabolique régulé de façon hormonale, principalement par les hormones mélanotrope (MSH, « Melanocyte-Stimulating Hormone ») et corticotrope (ACTH, « Anti-Adrenocorticotropic Hormone »), mais aussi par les oestrogènes. Elle est en outre fortement influencée par des facteurs extérieurs tels que l'exposition au soleil, ou encore la prise d'agents photosensibilisants.

L'hyperpigmentation (le brunissement d'une zone de peau ou d'ongle) due à l'augmentation du taux de mélanine intradermique peut par exemple résulter d'un dérèglement hormonal, ou encore de la mauvaise élimination de la mélanine par les macrophages. Les taches d'hyperpigmentation qui se forment provoquent une gêne esthétique que le patient cherche à enrayer.

L'attrait culturel pour les peaux claires est par ailleurs significatif chez certains individus, en particulier chez les femmes d'origine asiatique ou africaine, lesquelles ne sont pas toujours atteintes d'hyperpigmentation mais cherchent à éclaircir la couleur naturelle de leur peau. Ces considérations esthétiques exigent dans tout les cas que les populations à traiter disposent de produits éclaircissants non dangereux pour leur santé. Or, si les préparations à base d'hydroquinone sont à cet effet, parmi les plus utilisées, celles-ci n'en restent pas moins nocives pour la peau et l'environnent. L'agressivité de ce dérivé du benzène est ainsi généralement modérée par l'administration de doses fortement diluées, ce qui ne peut être considéré comme une solution idéale. Aussi existe-t-il un fort besoin en nouveaux composés éclaircissants ou blanchissants la peau et présentant une moindre toxicité. Les pistes de la recherche industrielle s'orientent aujourd'hui vers des composés naturels, tenant compte de l'attrait croissant des consommateurs pour les produits les plus écologiques. A titre d'illustration, il convient de citer la publication de Smit, N. et al. qui fournit une liste des sources et des composés naturels qu'elles contiennent les plus prometteurs (Smit, N., Vicanova, J., Pavel, S. The hunt for natural skin whitening agents. Int. J. Mol. Sci. (2009), 10(12): 5326-49).

De nombreuses demandes de brevet font par ailleurs référence à de tels composés naturels, pour leur utilisation blanchissante ou éclaircissante. On peut citer à titre d'exemple, les publications suivantes relatives à des formulations contenant du blé ou l'un de ses dérivés : JP2003246724, qui décrit une composition cosmétique blanchissante comprenant un extrait de Dioscorea composita et au moins un extrait de plante qui peut être issu de germe de blé ; US2005/0100517, qui décrit des compositions à base de vitamine B6 extraite de son de blé ; KR100841072, qui décrit une composition blanchissante et hydratante à base de céréales possédant une excellente activité inhibitrice de tyrosinase, comprenant du riz brun, du germe de blé, de la larme de job, du shiitake et de l'algue verte dans les proportions respectives de 18-20 : 5-8 : 2-4 : 2-4 : 1-3 ; W02007/107913, qui décrit des compositions cosmétiques à base d'argousier, lesquelles peuvent en outre contenir du son de blé ; et W02007/097430, qui décrit des compositions comprenant un extrait de jeune feuille de blé. Il existe par ailleurs des compositions cosmétiques à base de galactooligosaccharides extraits de plantes de la famille des Lamiaceae, décrites dans W02008/148694. Cependant, aucune de ces demandes ne mentionne la possibilité d'utiliser les arabinoxylo-oligosaccharides extraits de substrats végétaux par hydrolyse partielle, et en particulier de son de blé, pour leur utilisation blanchissante et/ou éclaircissante. Si la demande W02009/040445 divulgue l'utilisation de tels composés pour lutter contre les infections intestinales, celle-ci reste en revanche muette sur un potentiel effet cutané. Ainsi, la présente invention découle de la découverte faite par les inventeurs que les arabinoxylo-oligosaccharides répriment le processus de la mélanogénèse, et permettent d'abaisser la quantité de mélanine intradermique.

Le mode d'action présumé serait une inhibition de la tyrosinase. L'invention a donc pour premier objet des arabinoxylo-oligosaccharides, lesquels ont un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, pour leur utilisation en tant qu'inhibiteurs de la synthèse de mélanine chez l'être humain. Par arabinoxylo-oligosaccharides (AXOS), on entend des oligosaccharides qui se composent d'une chaîne linéaire ramifiée, laquelle est un polymère de résidus D-xylopyranosyl (D-xylp) reliés en 13(1-4) et optionnellement substitués en O-2 et/ou O-3 par un résidu a-L-arabino-furanosyl, chaque résidu a-L-arabino-furanosyl étant pour sa part optionnellement monosubstitué en O-5 par un résidu d'acide phénolique tel qu'un groupement p-coumaryle ou feruloyle. Le terme AXOS tel qu'employé dans le cadre de la présente invention fait plus particulièrement référence à un mélange d'AXOS (de « chaînes d'AXOS ») tels que définis ci-dessus, et dans lequel lesdits oligosaccharides diffèrent de part leurs degrés de polymérisation et de substitution individuels. Par « degré moyen de polymérisation » (Dpn ), on entend le « degré moyen de polymérisation en nombre» dudit mélange, c'est-à-dire le nombre de résidus D-xylp présents en moyenne dans les chaînes d'AXOS dudit mélange. Il a pour formule : DP =Mn avec M LniXMi nM n - - 0 L, ni dans lesquelles : Mn est la « masse molaire moyenne en nombre » dudit mélange d'AXOS, soit le rapport de la masse molaire totale des chaînes d'AXOS présentes dans ledit mélange sur le nombre totale de chaînes d'AXOS contribuant à ladite masse molaire totale ; ni est la fraction molaire des chaînes d'AXOS de masse molaire mi présentes dans ledit mélange ; M0 est la masse molaire d'un résidu D-xylp. Par « degré moyen de substitution » (DS), on entend le degré moyen de substitution des chaînes d'AXOS dudit mélange, représenté par le rapport du nombre total de résidus a-L-arabino-furanosyle sur le nombre total de résidus D- xylp présents dans ledit mélange, sous réserve que lesdits résidus a-L-arabino-furanosyle et D-xylp appartiennent aux chaînes d'AXOS. Les chaînes d'AXOS utilisées dans le cadre de la présente invention peuvent être de taille variable et présenter des substitutions différentes, sous réserve que le Dpn dudit mélange d'AXOS soit compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5, et sous réserve que le DS dudit mélange d'AXOS soit compris entre 0,15 et 0,40, et de préférence compris entre 0,20 et 0,30. Ces composés peuvent notamment être obtenus par hydrolyse acide ménagée des arabinoxylanes extraits de substrats végétaux, incluant mais de façon non limitative, des substrats céréaliers tels que le blé, le seigle et le riz, et leurs dérivés tels que la farine et le son. L'hydrolyse peut aussi être faite par chauffage des arabinoxylanes en milieu aqueux ou de façon enzymatique. Les endo-1,4-13-D-xylanases fongiques intervenant dans le mode de préparation enzymatique sont principalement choisies selon le substrat végétal utilisé et selon le Dpn et le DS visés. A titre d'exemple, on peut citer la publication de Pastel, H., qui détaille ce mode de préparation (Pastel, H. Préparation, structural analysis and prebiotic potential of arabinoxylo-oligosaccharides. Helsinki University Print, Helsinki, 2010, ISBN 978-952-10-6054-0). Par « mélanine », on entend les pigments formés à partir de la tyrosine et responsables de la coloration des téguments chez l'Homme, incluant notamment les différentes formes d'eumélanine (noire, brune) et de phéomélanine/phaéomélanine (j aune, rouge). Par l'expression « en tant qu'inhibiteurs de la synthèse de mélanine chez l'humain », on entend que lesdits AXOS sont utilisés pour réprimer le processus de mélanogénèse. Cette répression peut être visualisée in vitro sur des cultures de mélanocytes humains normaux cultivés en monocouches (exemple 1). La présente invention a également pour objet, des arabinoxylooligosaccharides selon la définition précédente, pour leur utilisation dans le traitement d'une zone de peau ou d'ongle hyperpigmentée. Par l'expression « zone de peau ou d'ongle hyperpigmentée », on entend une zone de peau ou d'ongle ayant une couleur plus foncée que la couleur naturelle de peau ou d'ongle (respectivement) de l'individu concerné, ladite zone hyperpigmentée contenant un taux de mélanine intradermique supérieur à celui rencontré dans une zone comparable de couleur naturelle. Un tel taux de mélanine peut être la conséquence d'un dérèglement du processus de la mélanogénèse, d'une augmentation du nombre de mélanocytes ou d'une accumulation importante de mélanine dans zone de peau ou d'ongle. Il peut de plus être dû à une maladie, un syndrome, une lésion dermatologique ou résulter d'une cause bénigne. L'hyperpigmentation peut être focale ou diffuse. Par « intradermique », on entend dans la peau (comprenant le derme et l'épiderme).

Par « dérèglement du processus de la mélanogénèse », on entend par exemple : - un dérèglement causé par un médicament, comprenant les antinéoplasiques tel que le 5-Fluorouracil, la bléomycine, le busulfan, la doxorubicine, les antipaludéens, l'amiodarone, les antibiotiques, tels que les tétracyclines et en particulier la minocycline, la clofazimine, les métaux lourds, les psychotropes, et autres médicaments photosensibilisants ; - un dérèglement hormonal, en particulier un dérèglement impliquant une mélanocortine telle que l'hormone mélanotrope (MSH, « Melanocyte-Stimulating Hormone ») ou l'hormone corticotrope (ACTH, « Anti- Adrenocorticotropic Hormone »), mais aussi les oestrogènes ; et - un dérèglement lié à l'âge. Par « maladie ou syndrome », on entend par exemple, mais de façon non limitative, l'Acanthosis nigricans, la maladie d'Addison, la cirrhose biliaire primitive, la maladie coeliaque, l'haemochromatose, une mélanose, telle que la mélanose du fumeur, la mélanose de Dubreuilh, la mélanose de Riehl, un mélanome malin, une hyperpigmentation progressive familiale, les neurofibromatoses (NF), une infection par une teigne, le syndrome de Cronkhite-Canada, le syndrome de Cushing, le syndrome de McCune-Albright (SMA), le syndrome de Pallister-Killian, le syndrome de Peutz-Jeghers et le syndrome de Revesz. Par « lésion dermatologique », on entend mais de façon non limitative, des lésions mécaniques, telles que des cicatrices, plaies, marques laissées par la chirurgie (incluant la chirurgie laser), mais aussi des macules tel qu'un mélasma, les taches café-au-lait (TCL), les inflammations causées par le soleil et les ultraviolets (UV).

La présente invention a aussi pour objet des arabinoxylo-oligosaccharides selon la définition mentionnée plus haut, pour leur utilisation cosmétique et/ou dermatologique éclaircissant ou blanchissant la peau. Par l'expression «pour leur utilisation cosmétique et/ou dermatologique éclaircissant ou blanchissant la peau », on entend que lesdits AXOS sont utilisés pour leur capacité à abaisser la quantité de mélanine intradermique dans le cadre d'un traitement à visée esthétique ou thérapeutique, sur une zone de peau ou d'ongle saine et de couleur naturelle (non hyperpigmentée). Les AXOS peuvent se présenter sous forme d'un extrait non purifié directement obtenu par hydrolyse partielle des arabinoxylanes extraits d'au moins un substrat végétal tel que défini précédemment. La présente invention a donc également pour objet un extrait comprenant des arabinoxylo-oligosaccharides tels que définis précédemment, et des sucres libres, en particulier des résidus arabinose, xylose et/ou glucose non oligomérisés. Les arabinoxylo-oligosaccharides précédemment mentionnées peuvent aussi être associés à des véhicules, afin par exemple de faciliter l'application du produit ou de réduire l'effet barrière de la peau. Aussi un autre objet de la présente invention est une composition pour application topique comprenant des arabinoxylo-oligosaccharides ayant un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, en association avec au moins un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, et optionnellement des sucres libres, lesdits arabinoxylo-oligosaccharides étant présents en une quantité telle qu'ils inhibent la synthèse de mélanine chez l'humain. L'usage d'une telle composition est particulièrement destiné à l'amélioration de l'aspect esthétique de la peau, et notamment une zone de peau ou d'ongle saine et de couleur naturelle (non hyperpigmentée).

La présente invention concerne aussi une composition pour application topique comprenant des arabinoxylo-oligosaccharides ayant un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, en association avec au moins un véhicule pharmacologiquement acceptable, et optionnellement des sucres libres, lesdits arabinoxylo-oligosaccharides étant présents en une quantité telle qu'ils inhibent la synthèse de mélanine chez l'humain. La quantité d'AXOS permettant d'inhiber la synthèse de mélanine chez l'humain est aisément déterminée par l'homme du métier, de même que le type et la concentration de l'au moins un véhicule cosmétiquement, dermatologiquement ou pharmaceutiquement acceptable à inclure dans la composition. Le protocole fourni dans l'exemple 2 peut être utilisé pour évaluer l'effet inhibiteur de telles compositions. Dans les compositions selon l'invention, les arabinoxylo-oligosaccharides représentent avantageusement de 0,0001 % à 10 % du poids total de chaque composition, de préférence de 1 à 5 % et encore plus préférablement d'environ 3 % dudit poids total. Les compositions selon l'invention peuvent en outre avantageusement contenir des additifs hydrophiles ou lipophiles, lesquels sont choisis par l'homme du métier parmi les émollients, les épaississants, les agents dispersants, les agents de surface, les gélifiants, les conservateurs, les parfums, les charges, les matières colorantes et les actifs autres que les arabinoxylo-oligosaccharides. Dans un mode de réalisation préféré, le rapport arabinose total / xylose total de l'extrait ou des compositions tels que précédemment définis, est compris entre 0,15 et 0,40, et est de préférence compris entre 0,20 et 0,30.

Par « rapport arabinose total / xylose total », on entend le rapport de la quantité totale d'arabinose (libre et lié au chaînes d'AXOS) sur la quantité totale de xylose (libre et lié au chaînes d'AXOS). Encore un autre objet de l'invention est l'utilisation d'une composition selon l'une quelconque des définitions, pour éclaircir ou blanchir la peau.

Par l'expression «pour éclaircir ou blanchir la peau », on entend que lesdites compositions sont utilisées pour leur capacité à abaisser la quantité de mélanine intradermique dans le cadre d'un traitement à visée esthétique ou thérapeutique, sur une zone de peau ou d'ongle saine et de couleur naturelle (non hyperpigmentée). Les compositions précédemment décrites peuvent aussi être employées dans un procédé de traitement cosmétique de la peau, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau l'une desdites compositions, à raison d'au moins une application journalière pendant 3 jours ou plus, et de préférence 28 jours ou plus. Conformément à l'invention, les arabinoxylo-o ligosaccharides tels que précédemment définis, peuvent être utilisés en combinaison avec au moins un composé choisi dans le groupe comprenant les alpha hydroxy acides, l'arbutine, les acides aminés protéinogènes (en particulier la cystéine), l'acide ascorbique, l'acide azélaique, l'acide carnosique, l'acide ellagique, le glutathion, l'hydroquinone et ses dérivés (incluant l'éther monométhylique d'hydroquinone et l'éther monobenzylique d'hydroquinone), les vitamines A, B5, C, E et les dérivés de ces vitamines (incluant la trétinoïne), l'acide kojique et ses dérivés, la glabridine et les extraits de plantes (en particulier la réglisse). De telles compositions permettent d'inhiber la synthèse de mélanine chez l'humain. Les Exemples 1 et 2 suivants servent à l'illustrer l'invention.

EXEMPLE 1 : ETUDE IN VITRO DE L'EFFET « MÉLANOMODULATEUR» DES ARABINOXYLO-OLIGOSACCHARIDES SUR DES MELANOCYTES DERMIQUES HUMAINS NORMAUX I. MATERIELS ET METHODES I.1. Obtention des mélanocytes Les mélanocytes humains normaux ont été obtenus à partir du prépuce d'un sujet âgé de 4 ans. Pour la réalisation des essais, ces cellules ont été cultivées jusqu'à l'obtention de monocouches confluentes. I.2. Témoin inhibiteur de la synthèse de mélanine L'inhibiteur de la mélanogénèse utilisé comme référence dans cette étude était l'acide kojique à 250 µM. I.3. Incubation des mélanocytes avec les composés inhibiteurs Les mélanocytes ont été incubés pendant 72 heures à 37°C, sous atmosphère humide et enrichie à 5 % en CO2, en absence (contrôle) ou en présence d'acide kojique ou de concentrations croissantes d'arabinoxylo-o ligosaccharides. I.4. Evaluation des effets « mélano-modulateurs » I.4.1. Dosage de la mélanine intracellulaire A la fin de la période d'incubation, le contenu intracellulaire en mélanine a été quantifié dans les lysats cellulaires par une mesure spectrophotométrique à 405 nm. I.4.2. Dosage des protéines A la fin de la période d'incubation, les protéines contenues dans les lysats cellulaires ont été quantifiées par une méthode spectrocolorimétrique faisant appel au bleu de Coomassie (Méthode de Bradford).

I.4.3. Analyse des résultats Les résultats sont exprimés en µg de mélanine intracellulaire par mg de protéines totales du tapis cellulaire (moyennes +/- la déviation standard). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « Témoin » (quantité initiale de mélanine intracellulaire rapportée à la quantité de protéines totales du tapis cellulaire) et « Produit de référence » (acide kojique) a été évaluée par un test de Student (« Student t test » ; * * * : p<0,001). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » d'une part (absence de composé inhibiteur de la mélanogénèse) et « actifs à l'essai » d'autre part (acide kojique ou arabinoxylo-oligosaccharides), a été évaluée produit par produit par une analyse de la variance à un facteur (« One Way ANOVA » ou « One Way Anova on Ranks+ ») et suivie lorsque cela était nécessaire d'un test de Holm-Sidak ou de Dunn's (* : p<0,05). II. RESULTATS II.1. Résultats obtenus avec les arabinoxylo-oligosaccharides Les résultats sont donnés dans le Tableau 1 ci-dessous. Tableau 1 : Effet d'AXOS à différentes concentrations sur l'inhibition de la mélanine dans un modèle de mélanocytes dermiques humains normaux adultes après 72 heures d'incubation AXOS (%, v/v) TO Contrôle 0,001 0,01 Moyenne 16,7*** 31,5 23,3* 20,6* Déviation 1,2 3,1 2,6 1,1 standard % contrôle 53,0 100 74,0 65,3 % inhibition / 0,0 55,3* 73,8*20 * moyenne significativement différente de celle du groupe contrôle (p<0,05) *** moyenne significativement différente de celle du groupe contrôle (p<0,001) Ces résultats montrent que dans les conditions expérimentales retenues AXOS à 0,001, 0,01 v/v) diminuait significativement le contenu intracellulaire en mélanine des cellules en culture de 55,3 et 74 %, respectivement (p<0,05). II.2. Résultats obtenus avec l'acide kojique Les résultats sont donnés dans le Tableau 2 ci-dessous.

Tableau 2 : Effet de l'acide Kojique à 250µM sur l'inhibition de la mélanine dans un modèle de mélanocytes dermiques humains normaux adultes après 72 heures d'incubation TO Contrôle Acide Kojique 250µM Moyenne 16,7*** 31,5 26,2* Déviation 1,2 3,1 2,9 standard % contrôle 53,0 100 83,2 % inhibition / 0,0 35,6* * moyenne significativement différente de celle du groupe contrôle 15 (p<0,05) *** moyenne significativement différente de celle du groupe contrôle (p<0,001) Ces résultats indiquent que l'inhibition de la mélanogénèse en présence d'arabinoxylo-oligosaccharides à 0,01 % v/v après 72h d'incubation est deux 20 fois plus importante que celle constatée en présence d'acide kojique à 250 µm dans les mêmes conditions expérimentales (73,8 % contre 35,6 %).

EXEMPLE 2 : ETUDE IN VIVO DE L'EFFET ECLAIRCISSANT DE LA PEAU D'UNE CREME CONTENANT 3 % D'ARABINOXYLOOLIGOSACCHARIDES ET COMPARAISON AVEC L'EFFET ECLAIRCISSANT D'UNE CREME CONTENANT 2 % D'ARBUTINE I. MATERIELS ET METHODES I.1. Plan expérimental Etude randomisée ouverte I.2. Mesure de la pigmentation cellulaire L'étude des variations de coloration est effectuée à l'aide d'un Mexameter® MX18 (COURAGE & KHAZAKA). I.3. Critères d'inclusion des sujets 20 sujets féminins d'âge supérieur à 18 ans et de type asiatique font partie de l'étude. Les sujets sont en bonne santé mais présentent un relâchement de la peau au niveau du visage.

I.4. Critères de non-inclusion - Femme enceinte ou allaitante ou envisageant une grossesse pendant l'étude ; - Pathologie cutanée sur la zone étudiée (eczéma, etc.) ; - Sujet ayant changé, ayant commencé ou ayant cessé son contraceptif oral ou commencé ou modifié tout autre traitement hormonal depuis moins de 3 mois ; - Sujet ayant eu une exposition excessive au soleil ou aux rayons UV dans le mois précédent ; - Sujet étant rentré dans un institut pour un soin au cours du mois précédent; - Utilisation d'un traitement topique ou systémique au cours des semaines précédentes susceptibles d'interférer avec l'évaluation de l'efficacité cutanée du produit étudié ; - Sujets inscrits dans un autre essai clinique au cours de la période d'étude. I.S. Traitements associés durant l'étude Aucune utilisation de produit dermo-pharmaceutique ou cosmétique autre que le(s) produit(s) étudié(s) n'est autorisée sur les avants bras pendant l'étude. Aucune exposition excessive au soleil ou aux rayons UV pendant l'étude n'a été autorisée. I.6. Planning de l'étude I.6.1. A TO - Les sujets viennent au laboratoire sans avoir appliqué un produit sur les avants bras depuis la veille au soir ; - Le technicien en charge de l'étude vérifie les critères d'inclusion et de non inclusion ; - Le technicien définit deux zones sur les avants bras : une zone sur un avant bras traitée par la crème à 3 % d'AXOS et une zone sur l'autre avant bras traitée par crème référence positive à 2 % d'Arbutine. Les zones sont randomisées ; - La couleur de la peau est alors mesurée sur les deux zones à l'aide du Mexameter® MX18 ; - Chaque produit sera à appliquer deux fois par jour (matin et soir) sur les avants bras pendant 56 jours.

I.6.2. A J14 - La dernière application des produits a été faite la veille au soir ; - Le technicien mesure les propriétés mécaniques de la peau avec le cutomètre® sur les deux zones définies lors du TO.

I.6.3. A J28 - La dernière application du produit a été faite la veille au soir ; - Le technicien mesure la couleur de la peau avec le Mexameter® MX18 sur les deux zones définies lors du T0.

I.7. Produits à l'étude et attribution des produits aux sujets I.7.1. Produits à l'étude 2 produits stockés à température ambiante sont testés : - Crème à3 %d'AXOS; - Crème à 2 % d'Arbutine.

Ils ont l'apparence d'émulsions blanches. Leurs formules respectives sont données dans le Tableau 3. Tableau 3 : Formules des produits à l'étude Crème à 3 % Crème à 2 % d'AXOS d'Arbutine Xyliance 5 % 5 % Caprilic/capric triglyceride 12 % 12 % Preservative Qs Qs Aqua QSP 100 % QSP 100 % AXOS 3 % Arbutine 2 % Parfum Orientale Qs Qs I.7.2. Méthode d'application Les crèmes sont appliquées sur une peau propre et sèche par légers 15 massages circulaires jusqu'à complète pénétration.

Analyse des résultats I.7.3. Formules de calcul Les variations (A) en unités arbitraires et en pourcentage de la moyenne (A %) des différents paramètres étudiés ont été calculées selon les formules 5 suivantes : Comparaison avant - après : A = (ZPdttt -ZPdtto ) (ZPdtt - ZPdtto) x 100 Comparaison Produit testé / Référence : 10 A= (ZPdtto - ZPdtto) - (Z Rets - Z Ret0 0%- (ZPdttt - ZPdtto) - (ZReti - ZReto)x100 ZPdtto + (Z Re ti - Z Re to ) Avec : ZPdt : Valeur obtenue sur la zone traitée par la crème à 3 % d'AXOS ; Zre : Valeur obtenue sur la zone traitée par la crème référence ; 15 tO : avant traitement ; ti : à chaque mesure pendant le traitement. I.7.4. Analyse statistique Comparaison Avant-Après : l'analyse statistique détermine l'importance des variations de mesures obtenues sous l'effet des produits étudiés. La 20 comparaison est effectuée entre les valeurs obtenues avant et pendant le traitement. Les données ont été analysées avec un test t apparié. Un test de Shapiro-Wilk est utilisé pour vérifier que les résultats suivent une distribution Gaussienne. Dans le cas d'une forte déviation on utilise le test de Wilcoxon. Comparaison inter-produits : L'analyse statistique détermine l'importance 25 des variations de mesures obtenues sous l'effet des produits étudiés. La comparaison est effectuée entre les valeurs obtenues sur les zones traitées aux A% = ZPdtto différents temps du traitement. Les données ont été analysées avec un test de Student non appareillé. Pour toutes ces analyses, l'erreur standard est fixée à 5 %. II. RESULTATS II.1. Analyse Avant-Après II.1.1. Résultats obtenus avec la crème à 3 % d'AXOS Ceux-ci sont donnés dans le Tableau 4 et le Tableau 5. Tableau 4 : Résultats Avant-Après obtenus lors de l'étude in vivo avec la crème à 3 % d'AXOS TO J28 J56 J28-TO J56-TO 226,56 221,95 216,48 -4,61 -10,08 228,84 222,83 225 -4 -11,17 158,67 136,33 134 -24 -29,67 289 285,33 282 10,99 12,66 Tableau 5 : Variations obtenues in vivo avec la crème à 3 % d'AXOS % p J28/T0 - 2,03 0,021 J56/T0 - 4,45 <0,001 Ces résultats montrent que dans les conditions expérimentales retenues, la crème à 3 % d'AXOS diminue significativement (p<0,05) l'index mexamètrique de -2,03 et -4,45 % à respectivement 28 et 56 jours. II.1.2. Résultats obtenus avec la crème à 2 % d'Arbutine Ceux-ci sont donnés dans le Moyenne Médiane Minimum Maximum Tableau 6 et le Tableau 7.

Tableau 6 : Résultats Avant-Après obtenus lors de l'étude in vivo avec la crème à 2 % d'Arbutine TO J28 J56 J28-TO J56-TO 230,56 233,15 221,26 2,59 -9,30 242 239,33 226 0 -11,33 141,33 134,33 132 -9,67 -31,67 323,67 316,33 304 19,33 11,33 Tableau 7 : Variations obtenues in vivo avec la crème à 2 % d'Arbutine 0 % p J28/T0 1,12 0,177 J56/T0 - 4,04 <0,001 Ces résultats montrent que dans les conditions expérimentales retenues, la crème à 2 % d'Arburtine ne diminue pas significativement l'index mexamètrique à 28 jours mais diminue significativement p<0,05) cet indice à 56 jours de -4,04 %. II.2. Analyse inter-produits Ces résultats sont donnés dans le Tableau 8. Tableau 8 : Variations in vivo inter-produits 0 % p J28 AXOS / Arbutine -3,1 0,001 J56 AXOS / Arbutine - 0,4 0,0743 Ces résultats montrent que dans les conditions expérimentales retenues, la crème a 3 % d'AXOS à 28 jours est plus efficace que la crème référence à 2 % d'Arbutine et qu'à 56 jours les deux produits présentent des résultats comparables. Moyenne Médiane Minimum Maximum

Claims (11)

1. REVENDICATIONS1. Arabinoxylo-oligosaccharides ayant un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, pour leur utilisation en tant qu'inhibiteurs de la synthèse de mélanine chez l'humain.
2. 2. Arabinoxylo-oligosaccharides selon la revendication 1, pour leur utilisation dans le traitement d'une hyperpigmentation de la peau ou des ongles.
3. 3. Arabinoxylo-oligosaccharides selon la revendication 1, pour leur utilisation cosmétique et/ou dermatologique éclaircissant ou blanchissant la peau.
4. 4. Extrait d'au moins un substrat végétal comprenant des arabinoxylooligosaccharides selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, et des sucres libres.
5. 5. Composition pour application topique comprenant des arabinoxylooligosaccharides ayant un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, en association avec au moins un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, et optionnellement des sucres libres, lesdits arabinoxylo-oligosaccharides étant présents en une quantité telle qu'ils inhibent la synthèse de mélanine chez l'humain.
6. 6. Composition pour application topique comprenant des arabinoxylo- oligosaccharides ayant un degré moyen de polymérisation compris entre 2 et 15, de préférence compris entre 2 et 5 et un degré moyen de substitution compris entre 0,15 et 0,40, de préférence compris entre 0,20 et 0,30, en association avec au moins un véhicule pharmacologiquement acceptable, et optionnellement des sucres libres,lesdits arabinoxylo-oligosaccharides étant présents en une quantité telle qu'ils inhibent la synthèse de mélanine chez l'humain.
7. 7. Composition selon l'une quelconque des revendications 5 ou 6, dans laquelle les arabinoxylo-oligosaccharides représentent de 0,0001 % à 10 % du poids total de la composition, et de préférence entre 1 et 5 % dudit poids total.
8. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, caractérisée en ce qu'elle contient aussi des additifs hydrophiles ou lipophiles, lesdits additifs étant choisis parmi les émollients, les épaississants, les agents dispersants, les agents de surface, les gélifiants, les conservateurs, les parfums, les charges, les matières colorantes et les actifs autres que les arabinoxylo-o ligosaccharides.
9. 9. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, pour éclaircir ou blanchir la peau.
10. 10. Procédé de traitement cosmétique de la peau, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau une composition selon la revendication 5, à raison d'au moins une application journalière pendant 3 jours ou plus, et de préférence 28 jours ou plus.
11. 11. Combinaison pour inhiber la synthèse de mélanine chez l'humain qui comprend les arabinoxylo-oligosaccharides selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, et au moins un composé choisi dans le groupe comprenant les alpha hydroxy acides, l'arbutine, les acides aminés protéinogènes, l'acide ascorbique, l'acide azélaique, l'acide carnosique, l'acide ellagique, le glutathion, l'hydroquinone et ses dérivés, les vitamines A, B5, C, E et les dérivés de ces vitamines, l'acide kojique et ses dérivés, la glabridine et les extraits de plantes.