FR2928547A1 - Extrait de l'orchidee brassocattle marcella koss et son utilisation en tant qu'actif de depigmentation cutanee - Google Patents

Abstract

La présente invention a pour objet un extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss, ainsi que son utilisation dans des compositions telles que des compositions cosmétiques, visant à dépigmenter la peau, notamment à éclaircir le teint ou à améliorer l'homogénéité de la coloration de la peau, ou encore à corriger ou atténuer les taches de peau ou les zones de peau hyperpigmentées.

Description

La présente invention a pour objet un extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss, ainsi que son utilisation dans des compositions, telles que des compositions cosmétiques, visant à dépigmenter la peau, notamment à éclaircir le teint ou à améliorer l'homogénéité de la coloration de la peau, ou encore à corriger ou atténuer les taches pigmentaires de peau ou les zones de peau hyperpigmentées.

Chez l'homme, la pigmentation résulte de la synthèse et de la distribution des pigments mélaniques dans la peau, les follicules ou les cheveux. Elle est régulée par de 10 nombreux facteurs internes ou externes.

L'hyperpigmentation de la peau est un trouble courant qui se manifeste par l'apparition de taches brunes ou colorées sur des fragments de peau de diverses parties du corps, en particulier sur le dos des mains, sur le visage, le décolleté, ou encore le crâne des 15 hommes. Des agressions externes, comme l'exposition aux ultra-violets, ou des situations naturelles, comme la vieillesse ou de brusques modifications hormonales, peuvent induire ces défauts cutanés de pigmentation. Pour pallier l'apparition de ces taches, le contrôle de la pigmentation par des moyens 20 susceptibles d'atténuer ces signes disgracieux, est donc un enjeu important en cosmétique, en particulier en dermocosmétique. Le traitement des taches pigmentées peut faire appel à des techniques telles que l'application d'azote liquide (cryothérapie) ou le laser, techniques qui ne sont pas toujours satisfaisantes, ou encore à des substances dépigmentantes. 25 On utilise ainsi notamment ces techniques et substances dépigmentantes : - dans un but esthétique ou cosmétique, dans des compositions visant à améliorer l'homogénéité de la couleur de la peau ou à en éclaircir le teint.

- pour corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées, en particulier celles consistant en diverses dyschromies cutanées, notamment les effets cutanés des photo-dermatoses, de la pigmentation induite par les dermatoses de contact ou les photo-dermatoses médicamenteuses, le mélasma, les kératoses, par exemple séniles ou actiniques, le lentigo sénile (taches de vieillesse), le lentigo solaire, les effets persistants de brûlures, telles que les brûlures solaires et autres blessures de la peau, ou de cicatrices, les taches dues à des réactions allergiques ou photo-toxiques, dermatites ou autres petites lésions pigmentées fixes analogues ; ou encore pour corriger ou atténuer le pourtour des zones dépigmentées induites par certaines leucodermies telles que le vitiligo. Les substances dépigmentantes connues sont notamment l'hydroquinone et ses dérivés, l'acide ascorbique et ses dérivés, des extraits placentaires, l'acide kojique, l'arbutine, les 15 iminophénols (WO 99/22707), l'association de carnitine et de quinone (DE 19806947), les dérivés amides d'amino-phénol (FR 2 772 607), et les dérivés de benzothiazole (WO 99/24035). Ces substances peuvent présenter certains inconvénients, être instables, nécessiter une utilisation à des concentrations élevées, manquer de spécificité quant à leur mode d'action, ou bien encore présenter un pouvoir cytotoxique 20 ou irritant. La recherche de nouvelles substances dépigmentantes efficaces et dépourvues de toxicité est donc une nécessité en cosmétique. Les orchidées, famille (Orchidaceae) comprenant 25 000 espèces réparties en 850 genres, sont parmi les plantes les plus étudiées pour les propriétés cosmétiques de leurs 25 extraits. Par exemple, JP 2004-067549 divulgue l'utilisation d'orchidées des genres Cattleya et Brassocattleya en tant qu'agent dépigmentant blanchissant dans des compositions cosmétiques. 10

Le croisement de deux genres naturels d'orchidées, le genre Brassavola et le genre Cattleya, donne naissance aux plantes de sous- genre Brassocattleya . Parmi elles, l'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss, encore appelée Pink marvel , était jusqu'alors connue pour la beauté et la couleur de ses fleurs, et cultivée pour ses qualités ornementales. Aucune étude n'avait précisément évalué les propriétés de ce genre dans un but cosmétique. Or les inventeurs ont mis en évidence au cours de leurs recherches qu'un extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss est capable d'inhiber l'expression de gènes importants pour la mélanogénèse, et ce à deux niveaux : - à un stade précoce, au niveau de gènes dont les produits sont impliqués dans la synthèse de la mélanine et la formation des mélanosomes, - à un stade plus tardif, sur des gènes dont les produits sont impliqués dans le transport des mélanosomes vers les kératinocytes. Ce double mécanisme permet une inhibition particulièrement efficace de la synthèse des pigments cutanés, inhibition induisant une activité particulièrement intéressante en tant qu'agent actif dans des compositions, telles que des compositions cosmétiques, pour réduire les défauts de pigmentation de la peau ou pour en éclaircir le teint. Le premier objet revendiqué par la présente invention est un extrait d'orchidée de la 20 variété Brassocattleya marcella Koss, obtenu par extraction d'au moins une partie de ladite plante au moyen d'un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Le matériel végétal à partir duquel on obtient l'extrait selon l'invention peut comprendre la plante entière ou une partie de plante, et peut, en particulier, être constitué de feuilles, de fleurs, de tiges, de racines, de fruits, ou de mélanges formés à 25 partir de ces différentes parties de la plante. De façon préférentielle, la partie d'orchidée de la présente invention est choisie parmi les tiges ou les feuilles de l'orchidée Brassocattleya marcella Koss. De manière

particulièrement préférentielle, la partie d'orchidée de la présente invention est un mélange de tiges et de feuilles de l'orchidée Brassocattleya marcella Koss. La plante ou les parties de la plante sélectionnées peuvent éventuellement être séchées et/ou broyées.

Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, le matériel végétal se trouve à l'état sec et broyé. L'extrait végétal peut être préparé par différents procédés d'extraction connus de l'Homme du Métier. Avantageusement, l'extraction est de préférence réalisée par mise en contact du matériel végétal sélectionné avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Selon la présente invention, l'expression solvant polaire signifie que le solvant a une valeur d'indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L'indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d'état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d'une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230, qui est inclus par référence à la présente demande. Le solvant polaire est avantageusement choisi parmi l'eau, les alcools en Cl-C4, tel que l'éthanol, les glycols, tels que l'éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol et leurs mélanges. Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, l'extraction est menée en utilisant un mélange hydro alcoolique, en particulier un mélange d'eau et d'éthanol, de préférence un mélange d'eau et d'éthanol, avantageusement dans un rapport 50/50 (v/v).

Selon une autre variante de l'invention, l'extraction peut également être réalisée par un procédé mettant en oeuvre un solvant polaire à l'état subcritique, ledit solvant étant avantageusement l'eau à l'état subcritique.

L'extraction peut aussi comprendre, de façon optionnelle, une étape supplémentaire consistant en un traitement de l'extrait visant à le décolorer partiellement ou complètement, ou à le purifier. L'extraction peut être complétée par une étape d'élimination partielle ou totale des solvants d'extraction. En cas d'élimination partielle des solvants d'extraction, on concentre généralement l'extrait jusqu'à obtenir un concentré aqueux dépourvu de quantités significatives de solvant organique. Dans le cas d'une élimination totale de ces solvants, on obtient un résidu sec.

De façon alternative, le produit de l'étape d'extraction peut être lyophilisé ou atomisé et se présenter sous la forme d'une poudre. La poudre peut être utilisée en l'état dans une composition, telle qu'une composition cosmétique, selon la présente invention ou être dispersée dans un solvant ou un mélange de solvants.

De façon générale, le produit de l'étape d'extraction peut être dissous ou dispersé dans un solvant ou un mélange de solvants, pour être utilisé à titre d'agent actif dans les compositions de l'invention. Le solvant ou le mélange de solvants dans lequel l'extrait est dissous ou dispersé peut être identique ou différent de celui ayant servi à l'extraction.

L'extrait de l'invention peut également être adsorbé sur un support avantageusement choisi parmi les poudres de nylon, poudres poreuses ou non poreuses et les micas ou toute substance minérale lamellaire. Dans ce cas, l'extrait utilisé est préférentiellement un extrait dans le butylène glycol ou un extrait aqueux.25

Le second objet revendiqué par la présente invention est une composition, avantageusement une composition cosmétique, comprenant à titre d'agent actif un extrait de la variété Brassocattleya marcella Koss, et au moins un excipient, tel qu'un excipient cosmétiquement acceptable.

Ladite composition comprend une quantité efficace d'extrait d'orchidée selon la présente invention pour obtenir l'effet recherché. L'extrait d'orchidée selon l'invention est avantageusement présent à titre d'agent actif dans la composition selon une teneur comprise entre 0,001 et 5% en poids de la composition, préférentiellement de 0,1 à 1% en poids de la composition.

La composition selon l'invention est avantageusement destinée à une application topique. La composition selon l'invention peut être par exemple un sérum, une lotion, un spray, une mousse, une solution, une poudre, une pommade, un lait, une émulsion, une crème teintée ou bien encore un hydrogel, de préférence un masque, ou se présenter sous la forme d'un stick, ou encore d'un patch. Les compositions comprenant l'extrait d'orchidée selon l'invention, comprennent avantageusement au moins un autre agent actif, qui est avantageusement cosmétiquement acceptable.

Ainsi, les compositions qui comprennent l'extrait d'orchidée selon l'invention peuvent en outre comprendre un ou plusieurs autres agents actifs pouvant être choisis parmi les substances ayant une activité dépigmentante ou une activité éclaircissante de la peau ; les substances ayant une activité amincissante ; les substances ayant une activité hydratante ; les substances ayant une activité calmante, apaisante ou relaxante ; les substances ayant une activité stimulant la microcirculation cutanée pour améliorer l'éclat du teint, en particulier du visage ; les substances ayant une activité séborégulatrice pour le soin des peaux grasses ; les substances destinées à nettoyer ou purifier la peau ; les substances ayant une activité anti-radicalaire ; les substances destinées à atténuer ou retarder les effets du vieillissement de la peau, en particulier la formation de rides, par une activité visant à favoriser le maintien de la structure de la

peau et/ou à limiter la dégradation de la matrice extracellulaire des couches superficielles du derme et de l'épiderme et/ou à obtenir un effet protecteur, correcteur ou restructurant de la peau ; les substances ayant une activité anti-inflammatoire. On associe de façon particulièrement préférée l'extrait d'orchidée de l'invention avec des agents actifs choisis parmi : - les molécules purifiées ou les extraits favorisant le renouvellement cellulaire, par exemple la vitamine A, le rétinol ou des esters de rétinol ; des alpha ou beta hydroxyacides (AHA) tels que les acides de fruits, acides malique, glycolique, citrique, lactique, acide salicylique ou ses esters, acide gentisique ou ses esters en particulier, le gentisate de tocopherol, - les molécules purifiées ou les extraits régulant la différentiation de l'épiderme de type ecdysteroides, ecdysterone, turkesterone, ou des dérivés de calcium, ou des précurseurs de vitamine D. - les molécules purifiées ou les extraits astringents resserrant les pores 15 tels que des extraits d'hamamélis ou des extraits de champignons classiquement utilisés en cosmétique, - les filtres protégeant des radiations UVA et UVB, tels que benzophenone-4 butyl méthoxydibenzoylmethane, éthylhexyl méthoxycinnamate, octocrylene, éthyl hexyl salicylate, acide sulfonique phénylbenzymidazole, 20 homosalate, seuls ou en association avec ou non des oxydes de titane, - les molécules purifiées ou les extraits agissant sur la pigmentation telles que l'acide kojique, le kushenol B, les extraits de racine de réglisse, l'arbutine, le pantothénosulfonate de calcium, la boldine, la diacétylboldine, les dérivés stables de vitamine C, des extraits de lys, notamment Lilium candidum, et en particulier des 25 extraits de bulbe, des extraits de soja, - les molécules purifiées ou les extraits anti radicalaires, extrait d'Artemisia Capillaris, extrait de Sanguisorba officinalis, resveratrol et ses dérivés, l'ergothionéine et ses dérivés, la thiotaurine, des polyphénols de pépins de raisin,

- les molécules purifiées ou les extraits favorisant la synthèse d'acide hyaluronique au niveau épidermique et dermique pour donner une peau superbement hydratée et plus lisse, en particulier un extrait d'Eriobotrya japonica, ou des petits fragments d'acide hyaluronique.

Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, la composition comprend, outre l'extrait d'orchidée selon l'invention, au moins un autre agent actif choisi préférentiellement dans le groupe comprenant la boldine ou un de ses dérivés cosmétiquement acceptable, en particulier la diacétylboldine, et/ou un extrait de bulbe de Lilium Candidum, et/ou l'adénosine.

De façon préférentielle, la composition comprend, outre l'extrait d'orchidée selon l'invention, la boldine. De façon préférentielle, la composition comprend, outre l'extrait d'orchidée selon l'invention, un dérivé de la boldine, tel que la diacétyl boldine. De façon préférentielle, la composition comprend, outre l'extrait d'orchidée selon l'invention, la boldine ou la diacétyl boldine, ainsi qu'un extrait de bulbe de Lilium Candidum. Le mélange des trois composés s'utilise avantageusement entre 0.5 % et 10 % en poids, encore plus avantageusement entre 2 et 5% en poids de la composition totale. De façon préférentielle, la composition comprend, outre les trois composés précédemment cités, l'adénosine. Le mélange des quatre composés s'utilise avantageusement entre 0.5 % et 10 % en poids, encore plus avantageusement entre 2 et 5 % en poids de la composition totale. Une composition particulièrement préférée est celle associant l'extrait d'orchidée selon l'invention, celui-ci étant présent dans une teneur comprise entre 0,3 et 4% en poids de la composition, et la boldine ou la diacétylboldine, dans une teneur comprise entre 0,2 et 6% en poids de la composition.

Avantageusement, le mélange d'orchidée et de boldine ou de diacétylboldine est utilisé à une teneur de 0.5 à 10% en poids de la composition finale, préférentiellement à une teneur de 2 à 5%. La composition selon l'invention comprend également avantageusement au moins un excipient cosmétiquement acceptable, lequel excipient pouvant être avantageusement choisi parmi des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des parfums, des électrolytes, des ajusteurs de pH, des agents anti-oxydants, des conservateurs, des colorants, des nacres, des pigments et leurs mélanges. Le troisième objet revendiqué par la présente invention est l'utilisation de l'extrait 10 d'orchidée précédemment décrit comme agent actif dépigmentant la peau, avantageusement dans une composition cosmétique.

L'invention concerne également l'utilisation de l'extrait d'orchidée précédemment décrit pour la préparation d'une composition cosmétique comme agent actif 15 dépigmentant la peau.

L'extrait est en particulier utilisé en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques telles que précédemment décrites. Les exemples ci-dessous, tels que les exemples 3 à 6, donnent des formulations 20 spécifiquement conçues pour être utilisées dans un but d'homogénéisation de la pigmentation de la peau.

Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne l'utilisation de l'extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss tel que précédemment décrit 25 dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition cosmétique, dans laquelle ladite composition est destinée à corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées ou la coloration de zones de peau hyperpigmentées ; à atténuer le pourtour des zones dépigmentées induites par des leucodermies ; à améliorer l'homogénéité de la coloration de la peau ; ou encore à en éclaircir le teint. 30

Selon une caractéristique de la présente invention, l'extrait peut être avantageusement utilisé dans une composition cosmétique pour corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées ou la coloration de zones de peau hyperpigmentées, en particulier celles consistant en diverses dyschromies cutanées, notamment : - les effets cutanés des photo-dermatoses, - les dermatoses de contact, les photo-dermatoses médicamenteuses, le mélasma, les kératoses, par exemple séniles ou actiniques, - le lentigo sénile (taches de vieillesse) ou le lentigo solaire, - les taches pigmentaires résultant de cicatrices ou brûlures, ou - les taches pigmentaires induites par des réactions allergiques ou photo-toxiques.

Selon une autre caractéristique de la présente invention, l'extrait peut être avantageusement utilisé dans une composition cosmétique pour corriger ou atténuer le pourtour ou la périphérie des zones dépigmentées induites par certaines leucodermies, telles que le vitiligo.

Le quatrième objet revendiqué par la présente invention est une méthode de soin cosmétique de la peau utilisant l'extrait selon l'invention et comprenant l'application sur au moins une zone hyperpigmentée de la peau du corps ou du visage, d'une quantité efficace d'au moins une composition cosmétique telle que définie ci-dessus comprenant un extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss en tant qu'agent actif cosmétique, pour corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées ou la coloration de ladite zone hyperpigmentée; pour atténuer le pourtour de zones dépigmentées induites par des leucodermies ; pour uniformiser la pigmentation de ladite zone de peau ou en éclaircir le teint. Les exemples ci-dessous illustrent l'invention sans en restreindre la portée. EXEMPLES Exemple 1 : préparation d'extraits de l'orchidée Brassocattleya marcella Koss Extrait 1 : Un extrait de tige et feuilles avec du butylène glycol à 50% en poids, est préparé par macération 24h puis filtré, mis au froid pendant 18h et filtré. Le filtrat est récolté et testé pour son activité dépigmentante. Extrait 2 : 50 g de tiges et feuilles fraiches sont mises à macérer 48 heures sous 5 agitation douce à température ambiante dans un mélange butylène glycol-eau selon un ratio 50/50. Le mélange est filtré, le filtrat récupérée et mis à 4°C pendant 24 heures. Le filtrat est récupéré pour être testé pour son activité dépigmentante.. Extrait 3 : On prépare un extrait des parties aériennes de tiges et fleurs de la plante par 10 un mélange hydroalcoolique constitué préférentiellement d'éthanol / eau (70/30, v/v) à température ambiante. La solution obtenue après filtration est concentrée au rotavapor à 20% du volume initial puis refiltré. La solution obtenue est utilisable dans des compositions selon l'invention, telles que la 15 composition cosmétique selon l'exemple 3. Extrait 4 : Le végétal constitué de feuilles et tiges de Brassocattleya marcella est extrait à chaud par un mélange eau/éthanol (95/5, v/v) pendant 20 minutes puis laissé à refroidir. La solution est filtrée puis lyophilisée. Le lyophilisat obtenu est repris dans du 20 butylène glycol et titré à 1% en poids sec. Cet extrait est utilisable dans des compositions selon l'invention, telles que les compositions cosmétiques selon les exemples 4 et 5. Exemple 2 : Détermination de l'activité d'un extrait de Brassocattleya marcella Koss sur des mélanocytes humains normaux en culture. 25 Culture cellulaire

Les mélanocytes humains normaux (MHN) sont obtenus à partir de peau saine issue de chirurgie plastique. Les mélanocytes sont ensemencés en flasque de 75 cm à raison de 106 cellules par flasque en milieu de prolifération chez Invitrogen, à savoir K-SFM 90% supplémenté en E199 contenant 50 g/mL de bovine pituitary extract, 5ng/mL d'EGF et 0.25 g/mL de PdBu (phorbol 12,13-dibutyrate, Sigma). Lorsque la confluence est atteinte, les MHN sont rincés 3 fois au tampon Phosphate Buffer Saline (PBS), trypsinés, ensemencés, puis incubés en boîte de pétri de 100 mm de diamètre jusqu'à confluence.

Traitement par l'extrait selon l'invention Les cellules sont traitées pendant 4 ou 24 heures, suivant différentes conditions : - Extrait de Brassocattleya marcella Koss à 1 % (v/v) (extrait 1 de l'exemple 1). -Solvant (Butylène Glycol) 1% (v/v) = contrôle Après 4 ou 24 heures de culture dans le milieu de prolifération sans PDBu (phorbol 12, 13 -dibutyrate), les ARN totaux sont extraits. Il a été vérifié préalablement que l'extrait testé est non cytotoxique aux doses utilisées, par un test MTT.

Extraction des ARN totaux Après incubation, les milieux de cultures sont éliminés, puis les cellules sont placées sur un lit de glace sans rinçage préalable. Sous hotte chimique, les cellules sont mécaniquement décollées et lysées dans lmL de RNAplus (QBiogene) puis l'ensemble est récupéré dans un tube Eppendorf Suite à cela les ARN totaux sont dosés à l'aide d'un bioanalyseur et du kit RNA 6000 Nanolabchip kit (Agilent).

Puis, une étape de transcription inverse est réalisée sur les ARN totaux à l'aide du kit Applied Biosystem High Capacity cDNA archive afin d'obtenir les ADN complémentaires. L'effet sur des gènes d'intérêt potentiels est déterminé en utilisant la technologie Taqman low density array (TLDA de chez Applied Biosystem) qui fait de la PCR multicible, permettant ainsi de mettre en évidence de façon quantitative des modifications d'expression génique sur plusieurs gènes (plus de détails dans : L.V.Abruzzo et al, Biotechniques, 2005, 38, 785-792). 50 L de chacun des ADNc sont mélangés avec 50 L de tampon Universal Master 10 Mixt , les 100 L obtenus sont déposés sur la puce à ADN de type carte microfluidique. Celle-ci est centrifugée 2 fois de suite à 1200g, puis la ligne de dépôt des ADNc est découpée, et introduite dans l'appareil TLDA HT 7900 (Applied biosystem) qui réalise une PCR. 15 On a ainsi accès au profil d'expression des gènes des MHN ainsi qu'à sa modification éventuelle sous l'effet du traitement. Résultats Analyse après 4 heures de traitement des cultures de MHN par un extrait à 1% (v/v) de Brassocattleya marcella Koss (extrait 1 de l'exemple 1) : 20 L'extrait de Brassocattleya marcella Koss présente les effets in vitro suivant : - Diminution de l'activité du gène AP3B2 (adaptator related protein complex 3 beta 2 subunit) impliqué dans le transfert des TRPs (Tyrosinase Related Proteins), du Trans Golgi Network (TGN) aux mélanosomes. Cette étape de transport est indispensable à l'activation et au relargage des TRPs dans les mélosomes (cf: 25 Pigment Cell Res 13 :222-29, 2000). - Diminution de l'activité du gène GPR143 (G Protein-coupled Receptor 143) qui code pour un récepteur couplé à une protéine G impliquée dans la formation et le transport des mélanosomes (cf : Pigment Cell Res 18 :227-233, 2005). - Diminution de l'activité du gène VAMP 2 (Vesicle Associated Membrane Protein 2) ou synaptobrevine 2 codant pour une protéine SNARE impliquée aussi dans le transport des mélanosomes (cf : Traffic 7 :769-78, 2006). - Diminution de l'activité du gène TYR codant pour la tyrosinase, 5 enzyme impliquée dans les premières phases de synthèse de la mélanine (cf: Physiol Rev 84 :1155-1228, 2004). -Diminution de l'activité du gène MC1R qui régule l'action de la MSH propigmentante (Melanocyte Stimulating Hormon) (cf: Physiol Rev 84 :1155-1228, 2004). 10 - Diminution de l'activité du gène SILV codant pour les protéines gpl00 et Pme1l7, marqueurs précoces du mélanosome, impliquées dans la maturation de ceux- ci (polymérisation de la DiHydroxyIndol Carboxylic Acid en mélanine) (cf: Physiol Rev 84 :1155-1228, 2004). Analyse après 24 heures de traitement des MHN par un extrait à 1% de Brassocattleya 15 marcella Koss (extrait 1 de l'exemple 1): L'extrait de Brassocattleya marcella Koss présente les effets in vitro suivant : - Diminution de l'activité du gène AP3M2, autre isoforme d'AP3 -Diminution de l'activité du gène MC1R - Diminution de l'activité du gène STOML2, autre gène codant pour une 20 protéine de la famille SNARE, impliqué dans la localisation périphérique membranaire des mélanosomes via la fusion membranaire en vue de leur exocytose. - Diminution de l'activité du gène SNAP 23, impliqué dans l'exocytose des mélanosomes. SNAP23, STOML2 et VAMP2 sont colocalisées à la membrane des mélanosomes et 25 participent à la fusion des membranes du mélanosome et plasmique (cf: Traffic 7 :769-78, 2006). Conclusion sur l'activité biologique

L'extrait de Brassocattleya marcella Koss présente une activité d'inhibition de la pigmentation de la peau, en agissant tant sur la synthèse de la mélanine que sur le transport et le transfert des mélanosomes. On observe en effet dans la présente expérimentation les effets suivants : - Action à 4 heures sur les mécanismes impliqués dans les étapes précoces de la mélanogénèse (synthèse de mélanine, formation et transport des mélanosomes dans les dendrites). - Action à 24 heures dans les étapes ultérieures de la pigmentation, en particulier sur le transfert des mélanosomes porteurs de mélanine aux kératinocytes voisins. Ces deux modes d'action sont complémentaires tout au long de la chaîne de synthèse et de transfert de mélanine et en font ainsi un ingrédient du plus haut intérêt pour une utilisation en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques destinées à éclaircir le teint et/ou combattre les défauts de pigmentation cutanée. Exemple 3 : Emulsion pour traiter les dyschromies de la face On prépare l'émulsion comprenant l'extrait de Brassocattleya marcella Koss, tel que préparé à l'exemple 1 (extrait 3), et les agents actifs suivant (% exprimés en poids) : 20 Extrait de Brassocattleya marcella Koss 3% Extrait de graines de tournesol 2% Acide hyaluronique 2% Glycols 3% Excipient qsp 100 % 25 La crème est appliquée localement 2 fois /jour Exemple 4 : Crème pour traiter les conséquences cutanées d'une photodermatose15

On prépare l'émulsion comprenant l'extrait de Brassocattleya marcella Koss, tel que préparé à l'exemple 1 (extrait 4), les agents actifs suivant (% exprimés en poids) :

Extrait de Brassocattleya marcella Koss 2% Diacétylboldine 1% Extrait de bulbe de Lilium candidum 2% Glabridine 0,5% Adenosine 0,1% Ecdysterone 0,2% Acide lactique 1% Polysaccharides d'avoine 2% Acide hyaluronique 2% Glyccyrhezinate d'ammonium 0,1% Ascorbylglycoside 2% Filtre UVA+UVB 5% Excipients qsp 100%

La crème est appliquée localement le matin et avant toute sortie à la lumière du jour. 20 Exemple 5 : Sérum traitant local des hyperpigmentations réactionnelles On prépare un sérum comprenant l'extrait de Brassocattleya marcella Koss, tel que préparé à l'exemple 1 (extrait 4), et les agents actifs suivant (% exprimés en poids) : Extrait de Brassocattleya marcella Koss 2,5% 25 Boldine 0,1 % Diacetylboldine 2% Ergothioneine 0,1% Kushenol 0,2% Gentisate de tocopherol 0,5% 30 Alcool 2% Acide lactique 1,5%

Excipient qsp 100%

On applique localement le sérum grâce à un applicateur, puis le matin après 5 minutes appliquer la crème selon l'exemple 4.

Le soir, le sérum est utilisé deux fois à 20 minutes d'intervalles. Exemple 6 : fond de teint traitant et couvrant On prépare l'émulsion comprenant les agents actifs suivant (% exprimés en poids) : Extrait de Brassocattleya marcella Koss 1% Diacétylboldine 1% Adenosine 1% Filtre UVB 2% Dioxyde de titane 2% Acétate de tocopherol 0,5% Excipient contenant des pigments colorés qsp 100%

Le fond de teint est appliqué comme maquillage du visage après utilisation du sérum selon l'exemple 5 ou de la crème selon l'exemple 4.

Claims (11)

REVENDICATIONS

1. Extrait d'orchidée de la variété Brassocattleya marcella Koss, obtenu par extraction d'au moins une partie de ladite plante au moyen d'un solvant polaire ou 5 un mélange de solvants polaires.

2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce que la partie extraite de ladite orchidée est choisie parmi les tiges, les feuilles, et un mélange de tiges et de feuilles de l'orchidée.

3. Extrait selon les revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le solvant 10 polaire est choisi parmi l'eau, les alcools en C1-C4, tels que l'éthanol, les glycols, tels que l'éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et leurs mélanges.

4. Extrait selon la revendication 3, caractérisé en ce que le solvant polaire est un mélange hydro alcoolique, de préférence un mélange d'eau et d'éthanol, de 15 préférence un mélange d'eau et d'éthanol dans un rapport 50/50 (v/v).

5. Composition cosmétique comprenant à titre d'agent actif un extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, et au moins un excipient cosmétiquement acceptable.

6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que ledit extrait 20 est présent selon une teneur comprise entre 0,001 et 5% en poids de la composition, préférentiellement de 0,1 à 1% en poids de la composition.

7. Composition selon la revendication 5 ou 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un autre agent actif, choisi parmi la boldine ou l'un de ses dérivés cosmétiquement acceptables, en particulier la diacétyl boldine. 25

8. Utilisation d'un extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition cosmétique, comme agent actif dépigmentant la peau.

9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que ledit extrait est incorporé dans une composition cosmétique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 5 à 7.

10. Utilisation selon l'une des revendications 8 ou 9, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique est destinée à corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées ou la coloration de zones de peau hyperpigmentées, en particulier celles consistant en des dyschromies cutanées ; à atténuer le pourtour des zones dépigmentées induites par des leucodermies ; à améliorer l'homogénéité de la coloration de la peau ; ou encore à en éclaircir le teint.

11. Méthode de soin cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur au moins une zone hyperpigmentée de la peau du corps ou du visage, d'une quantité efficace d'au moins une composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, pour corriger ou atténuer les taches pigmentaires cutanées ou la coloration de ladite zone hyperpigmentée; pour atténuer le pourtour de zones dépigmentées induites par des leucodermies; pour en uniformiser la pigmentation ou en éclaircir le teint.