FR285F

FR285F - Médicament renfermant des colibacilles antibiorésistants.

Info

Publication number: FR285F
Application number: FR148142A
Authority: FR
Inventors: Lucien Nouvel
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1963-03-01
Filing date: 1968-04-16
Publication date: 1969-12-22
Also published as: BE644455A; US3369969A; FR2828M

Description

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IRE ADDITION

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Clarification internationale : A 61 k

McrftVamr'lt rc»f<>rr>i,Ttî? <!<■:-; co'iLacHIcs antiîmM'ésistnnts.

M. Lucien NOUVEL résiliant en Fiance (Paris).

[Brevet principal pris le i" mars 1963.)

Deistamiée ie 16 avril 1968, à 31 heures, à Paris.

Délivrée par anêlé du 12 novembre 1969.

(Bulletin officiel de la Propriété industrielle [/J.S..1/.], n° 51 du 22 décembre 1969.)

Pans ic brevet piincipal on a décrit un médica-ment destiné au traitement des affections liccs à un clésé.'pjil'bre de la flore intestinale, le médicament étant à ba>c de colibacilles non pathogènes, vivants, antibiorésistants; plus particulièrement, le médicament en question contient un acide aminé, et il est tamponné de façon ii présenter un pH de 4 à 9.

La p'.r-cilc invention apporte un perfeetion-neinent à ce médicament qui, lui-même, constituait un progrès sensible sur les ui\erses compositions médicalisent*-uses connues à base de colibacilles non pathogènes, vivants. Elle vise l'emploi d'un type de souches bactériennes qui se sont révélées, de façon inattendue, beaucoup plus actives que les souches habituellement employées. Les souches suivant la présente invention sont d'une efficacité telle que, non seulement elles rendent plus actif le médicament du brevet ptincipal, mais encore permettent l'obtention de compositions très efficaces, même si les mesures particulières selon le brevet principal ne sont pas appliquées; cependant, la piésence d'acide aminé et d'un tampon de pH, dans le médicament, est préférée, parce que sans substances Wunpon les colibacilles meurent, très vite en suspension aqueuse. Elle permet d'améliorer les anciennes compositions, tant de colibacilles seuls que de ces bacilles accompagnés d'aunes bactéries non pathogènes, (Je ferments lacliqucs, de lait on/et d'autres substances.

Lorsqu'on examine les compositions mcdica-menteu.-es à base de colibacilles vivants, utilisées jusqu'à présent, on constate que leurs bactéries sont, au moins en grande majorité, sous la forme " R », c'est-à-dire du type qui forme des colonn-s a contours irréguliers, à surface rugueuse, sèche, de teinte mate. 11 .'"--t connu, en entérobactériologie (» Le Diagnostic de Laboratoire des Eutérobac-ténes », Léon Le Minor; 3e édition), que la forme

0 210030 7

| 't S » de colibacilles, donnant sur gélose des colonies I rondes, bombées, lisses, brillantes et humides, subit — chez les souches en collection — une transformation progressive en la forme « R ». Une caractéristique distinct!ve particulière, entre les deux sortes de souches, est l'absence de l'antigène « 0 » chez la forme « R », tandis que la forme « 3 » seule, exemple de « R », le possède au maximum.

La présente invention est basée sur la constatation tout à fait imprévue que les bactéries de forme « S », non pathogènes, vivantes, exercent dans l'intestin des effets bénéfiques beaucoup plus prononcés que ne le font les bactéries de la forme « R ». L'efficacité d'une souche de colibacilles est surtout fonction de son équipement enzymatique qui induit l'antigène « 0 ».

Le nouveau médicament suivant l'invention est donc constitué par des colibacilles non pathogènes, vivants, de préférence antibiorésistants, comprenant une forte proportion de bactéries de la forme <• S », et une ou plusieurs des matières généralement présentes dans ce genre de compositions.

Le médicament suivant l'invention peut se présenter sous une quelconque des formes habituelles. notamment sous celle d'une suspension aqueuse île germes de colibacilles « S » ou riche en cette forme, en pâte, en poudre, et tout particulièrement en poudre lyophilisée.

De préférence la souche de colibacilles est constituée entièrement pur les bactéries de la forme « S »; pratiquement l'absence complète de la forme '< R » étant assez difficile à obtenir, des médicaments fort efficaces sont néanmoins obtenus avec îles souches contenant environ 10 à 95 % ou mieux de 50 à 98 % de forme « S », le reste étant sous la forme « II >>. Autrement dit la richesse eu antigène « 0 'i des souches utili-ées peut être de l'ordre de 10 à 95 % du maximum qui correspond à la forme « S a exempte de « R ».

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Comme im.iivji:<*■ plus haut 1i: médicament peut nn.'fiiii" une on plu.di i;rs des mai ière - lia b 1111 ■ ■ 1 -i' ni -iil présentes dan- ce ;;eiit'e <l<• compositions, et !.. s 11 ]: ar t i et ; ! i -m suri t de ci.Hf- dont la deserip-li.'ii Ii'iikiv d:iii- ii' bn-vet j. ri i: < ■ i ; . Notamment, en ce qui concerne l'adjonction 1res utile d'acide aminé, "il peut avoir recours à i;n ou plusieurs acide- pris à l'état, libre, ou tic préférence soi:-; la fomu: d'u:i sel alcalin, tel i[ue par exemple : glvco-colle, alanine. U'ueine. isoleuciile, aiT.inine. a-pa-ragine, giulamine, acide glutamique, iiistidine, Ivsine, omithine, phénvlalanine, proline, serine, tluvcime, thvroxine, iryntophane, tvro.-ine. valinr, cysiéine, cystine, mcihioninr, etc.

Lorsque le nouveau médicament contient, à côté du colibacille, d'autres entérobactéries non pathogènes, il est préférable que ce- derniers .-oient également, entièrement ou en partie, sous la forme

« S ».

11 est également recommandable d'incorporer au médicament une mucine; le rôle de ee genre de mueopolysaccharides, déjà signalé dans le BF n° 1.482.817, se confirme lorsqu'il s'agit de la préparation de culture lyophilisée riche en forme « S », suivant la présente invention.

Lorsque dans le médicament du brevet principal, la majeure partie des colibacilles est remplacée par des germes de la forme « S », les résultats cliniques, relatés dans les exemples 2, 3 et 5 dndil brevet sont bien améliorés : dans tous les cas semblables, les malades sont soulagés et subissent une amélioration sensible plus rapidement; leur guérison est avancée de plusieurs heures à deux jours suivant les cas.

L'invention comprend également un procédé pour la préparation du nouveau médicament riche en forme « S » d'entérobactéries. Ce procédé est particulièrement utile lorsqu'il s'agit de la préparation de culture antibiorésistante; la raison en est que c'est précisément dans les milieux chargés d'antibiotiques que l'évolution vers la forme « R » est particulièrement exaltée; il eu résulte la difficulté d'obtention de souches « S » antibiorésistantes en milieu contenant des antibiotiques.

Le procédé suivant l'invention consiste à effectuer la culture de colibacille non pathogène dans un milieu nutritif contenant des antibiotiques à dose croissante. Après isolement de la souche, celle-ci est cultivée dans un milieu nutritif contenant du sérum frais de cobaye qui lysc les formes « R ». On obtient ainsi une forme antibiorésistante de forme •< S ».

Suivant un trait particulier de l'invention on utilise pour l'élimination tics formes « R », les propriétés du ,-érum frais de cobaye; pour cela le bouillon de culture est additionné d'un tel sérum.

A titre d'exemple non limitatif, donné uniquement à titre d'illustration de la pré-mite invention,

\oiei les opérations appliquées dans une préparation du médicament suivant l'invention.

In milieu de culture piésentait la composition suivante :

Arginiiic 1000 g

Extrait aminé de levure 2000 g

Gélose 500 g

Phosphate di-odique 4000 g

Phosphate monopotassique- 400 g

Eau distillée -térile q.s.q. 500 1.

Ce bouillon, dont le pli est réglé à environ 7.3, est passé à l'autoclave pour être ensuite centrifugé et stérilisé. Après refroidissement, il est ensemencé avec 2 litres d'une suspension aqueuse de culture de colibacilles vivants non pathogènes, antibio-résistants, contenant une majorité de forme « S »; cette suspension avait été obtenue par culture dans un milieu nutritif solide ou liquide contenant 10 à 25 % de sérum frais de cobaye.

Dans une forme d'exécution particulièrement avantageuse de l'invention, ld poudre, obtenue par lyophilisation d'une culture de colibacilles non pathogènes, antibiorésistants, en majeure partie sous la forme « S », est enrobée stérilement avec des silicones. Convient bien à cet effet le silicone connu dans le commerce sous la dénomination SI 200, utilisé de préférence à raison de 5 à 25 % du poids de la poudre à traiter. Les silicones préférés présentent des viscosités de l'ordre de 100 à 1 000 cSt., celte indication n'étant cependant pas limitative.

L'enrobage de la poudre avec du silicone apporte, plusieurs avantages; il isole, pour ainsi dire, les particules de la poudre, les protégeant du contact direct avec l'air, ce qui les rend moins altérables par l'oxygène atmosphérique; il rend possible l'adjonction à la poudre d'une substance non compatible avec les colibacilles, substance susceptible de détruire ces derniers, comme par exemple un antibiotique. Grâce à ses propriétés hydrophobes, le silicone permet de conserver, dans la poudre lyophilisée, l'humidité résiduelle de celle-ci, nécessaire à une bonne conservation. De plus, les silicones étant stables en milieu acide, ils ne se délitent pas dans l'estomac, mais seulement dans l'intestin où le milieu est basique; ainsi, l'utilisation de colibacilles devient beaucoup plus rationnelle et cfEcace, puisqu'ils ne sont libérés qu'au niveau de l'intestin, c'est-à-dire précisément là où ils doivent agir.

A titre d'exemple non limitatif, une poudre suivant l'invention est préparée comme suit, 100 g île silicone SI 200, de viscosité 350 cSt., sont mélangés à 1 000 g de poudre lyophilisée d'une culture de colibacilles non pathogènes, antibiorésistants, à majorité de forme « S ». La poudre ainsi siliconée est mélangée avec du chlorhydrate de tétracyoline à raison de 250 mg de chlorhydrate

^BAD ORIGINAL J

piMir (<0 m;.' ilt- 11111 : • ! r • : chaque <1 île 60 tn{* «1*»

! i<-11 : > I : i • uiiiiri' < « 11 ; < • - ; 11 >n < I au i m j i î 11 - n ■ de germe*, vivant* compris et»îr«* j et 150 millions.

nÉscMi-:

1. Médicament. pour ■ traitement d'affections «lues à un dé-équilibie <.!<• ia flore inte>tiiïa!<\ caractérisé en ce qu'il contient des colibacilles non pathogènes vivant, comprenant une forte proportion il ' ■ colibai i i i e - de la tonne «S».

2. Médicament, suivant 1, dans lequel la proportion de colibacilles de lonne • S » est .le 10 à 98 %, le veste étant soin la tonne « Il ».

3. Médicament suivant 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il contient une ou plusieurs matières telles que acide aminé ou salifié, tampon de pH, extrait de levure, épaississant ou autres substances habituellement présentes dans des médicaments à base de cultures entérubactéricnnes.

4. Médicament suivant 1, 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il contient d'autres entérobactéries non pathogènes, dont au moins une partie est de préférence sous ia forme « S ».

5. Médicament suivant 1, 2, 3 ou 4, caractérisé en ce (pie ie colibacille de la forme « S » est anti-biorési-tant.

C. MédicainenL suivant un ou plusieurs des

— 1285 CAM/2.828 ,\i]

points 1 à 5, caractérisé en ce que les colibacilles s'y trouveni sous la forme d'une, culture en poudre lyophilisée, enrobée avec du silicone.

7. Poudre suivant 6, caractérisée eu ce qu'elle contient. 5 à 25 parties en poids de silicone pour 100 parties de culture, le silicone ayant mie viscosité préfet ée de 100 à t 000 cSt.

8. Médicament suivant 6 ou/et 7, caractérisé en ce qu'il contient une substance médicamenteuse non compatible avec les colibacilles, en particulier uu antibiotique.

9. Procédé pour la préparation du médicament suivant un quelconque des points 1 à 8, qui consiste à cultiver la ou les bactéries utiles dans un milieu contenant un lysant de la forme « R » de ces bactéries.

10. Procédé suivant 6, caractérisé en ce que le Ivsant est celui d'un sérum frais, notamment celui du cobaye.

11. Procédé pour la préparation du médicament suivant 8, caractérisé en ce que la culture en poudre est enrobée avec du silicone avant l'addition de. La substance incompatible avec elle.

Lucien NOUVEL

Par procuration :

Armand Kohn

AVIS DOCUMENTAIRE SUR LA NOUVEAUTÉ

Documents susceptibles de porter atteinte à la nouveauté du médicament : néant.

Documents illustrant l'état de la technique en la matière :

— Brevet français (B.S.M.) n° 2.828 M.

BAD ORIGINAL

.'oui la vcnlo des fascicules, s'adresser à lT:wrk(.ME;î'.e Nationale, 27, iuc do la Convention, Paria (15*).