FR2825278A1

FR2825278A1 - Produit comprenant du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci en association avec un autre agent anti-cancereux pour une utilisation therapeutique dans le traitement du cancer

Info

Publication number: FR2825278A1
Application number: FR0107104A
Authority: FR
Inventors: Gregoire Prevost; Helene Coulomb; Olivier Lavergne; Christophe Lanco; Beng Poon Teng
Original assignee: Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 2001-05-30
Filing date: 2001-05-30
Publication date: 2002-12-06
Also published as: RU2003137833A; HUP0400153A2; JP2004533456A; AR034059A1; CN1691941A; PL369148A1; KR20040025922A; WO2002096348A3; US20040138245A1; EP1438039A2; CA2448528A1; CZ20033549A3; WO2002096348A2

Abstract

La présente invention concerne un produit comprenant au moins du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci en association avec au moins un autre agent anti-cancéreux pour une utilisation thérapeutique simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement du cancer. Selon une variante préférée de l'invention, le dihydromikanolide est associé à un inhibiteur de protéine G hétérotrimérique comme la 7-(2-amino-1-oxo-3-thiopropyl) -8-(cyclohexylméthyl)-2-phényl-5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [1, 2a] pyrazine ou à un agent alkylant comme le cis-platine.

Description

Produit comprenant du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci en association avec un autre agent anti-cancéreux pour une utilisation thérapeutique dans le traitement du cancer La présente invention concerne un produit comprenant au moins du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci en association avec au moins un autre agent anti-cancéreux pour une utilisation thérapeutique simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement du cancer.

Actuellement, le développement de nouveaux traitements anti-cancéreux passe en grande partie par la découverte d'associations efficaces entre différentes classes thérapeutiques afin d'accentuer l'effet antitumoral de chaque classe et/ou de diminuer la toxicité et l'importance des effets secondaires.

Le mikanolide et le dihydromikanolide (voir leurs structures en figure ci-dessous), peuvent être obtenus à partir d'extraits de plantes Mikania, par exemple à partir de la plante Mikania micrantha. Le mikanolide et le dihydromikanolide sont des sesquiterpènes de la famille des germacranes, c'est-à-dire ayant le 4-isopropyl- 1,7-diméthylcyclodécane pour squelette hydrocarboné (Herz et coll., Tetrahedron Lett.

(1967) 3111-3115 ; Kiang et coll., Phytochemistry (1968) 7 : 1035-1037 ; Cuenca et coll., J Nat. Prod. (1988), 51,625-626).

mikanolide dihydromikanolide La demanderesse avait elle-même déjà décrit dans deux demandes de brevet non publiées à ce jour l'utilisation du mikanolide, du dihydromikanolide ou de certains

analogues du dihydromikanolide comme agents anticancéreux. Lesdits analogues répondent à la formule générale (1)

correspondant aux sous-formules générales (1) 1 et (1) 2

dans lesquelles RI représente un atome d'hydrogène ou un radical SR4 ou NRR, R2 représente SR6 ou NR6R7 ; R3 représente OH, O (CO) RI4, O (CO) OR, 4, ou OSiR15R16R17 ; R4, R5, R6 et R7 représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, cycloalkylalkyle, hydroxyalkyle ou encore l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy, R4 et R5 pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux -CR8R9-,

-NRIO-,-0- et-S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -O- ou -S- dans ledit hétérocycle, et R6 et R7 pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux - CR] R2-,-NR-,-0-et-S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -O- ou -S- dans ledit hétérocycle, Rg, RIO, R], et R représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un

atome d'hydrogène ou un radical alkyle, alkoxycarbonyl ou aralkyle, R9 et R12 représentant, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou chacun de R9 et R12 pouvant former avec respectivement Rs et R,, un radical -0- (CH2kO- attaché de part et d'autre à l'atome de carbone qui le porte, un tel radical n'étant présent toutefois qu'une fois au maximum par radical NR, R, ou NR6R7' représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ; Rl4, R, s, R, 6 et R, représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy ; ou sont des sels de composés répondant à ladite formule générale (1).

La demanderesse avait aussi montré que le dihydromikanolide et le mikanolide inhibent la réplication de l'ADN en inhibant les enzymes ADN polymérases nécessaire pour la multiplication des cellules eucaryotes et procaryotes ainsi que des virus.

A ce jour, aucune association de composés anti-cancéreux comprenant du mikanolide, du dihydromikanolide ou des analogues du dihydromikanolide n'a encore été décrite.

La demanderesse a maintenant découvert que ces composés utilisés en association avec d'autres agents anti-cancéreux offraient une activité anti-cancéreuse intéressante et même souvent synergique.

L'invention a donc pour objet un produit comprenant au moins du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci, éventuellement sous la forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable, en association avec au moins un autre agent anticancéreux pour une utilisation thérapeutique simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement du cancer.

De préférence, l'analogue du mikanolide répondra à la formule générale (1)

correspondant aux sous-formules générales (I), et (1) 2

dans lesquelles R, représente un atome d'hydrogène ou un radical SR4 ou NR4R5 ; R2 représente SR6 ou NR6R7 ;

R-O (CO) OR ou OSIR R R R3 représente OH, 0 (CO) R14' 0 (CO) ORI4, ou OSiR1sRI6R17 ; R4, R5, R6 et R7 représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, cycloalkylalkyle, hydroxyalkyle ou encore l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy, R4 et R ; pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux-CR, Rg-, - NRlO-'-0- et -S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -O- ou -S- dans ledit hétérocycle,

et R ; ; et R7 pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux

- CRI R-,-NRIg-,-0-et-S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -0- ou -S- dans ledit hétérocycle, Rg, RIO, RI, et R, ;) représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, alkoxycarbonyl ou aralkyle, R9 et Rl2 représentant, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou chacun de R9 et R, pouvant former avec respectivement R et Run radical-0- (CH2-0- attaché de part et d'autre à l'atome de carbone qui le porte, un tel radical n'étant présent toutefois qu'une fois au maximum par radical NR4R5 ou NR6R7, représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ; R, , R, s, R, ( ; et R, 7 représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy ; ou sera un sel pharmaceutiquement acceptable d'un composé de formule générale (1).

Par alkyle ou alkyle inférieur, lorsqu'il n'est pas donné plus de précision dans la présente demande, on entend un radical alkyle linéaire ou ramifié comptant de 1 à 12 atomes de carbone, et de préférence de 1 à 6 atomes de carbone. Par cycloalkyle, lorsqu'il n'est pas donné plus de précision, on entend un système monocyclique carboné comptant de 3 à 7 atomes de carbone. Par aryle carbocyclique ou hétérocyclique, on entend un système carbocyclique (en particulier, le radical phényle qui peut être noté de façon abrégée Ph) ou hétérocyclique comprenant au moins un cycle aromatique, un système étant dit hétérocyclique lorsque l'un au moins des cycles qui le composent comporte un hétéroatome (0, N ou S). Lorsque le terme aryle est utilisé sans plus de précision, il faut entendre exclusivement un radical aryle carbocyclique.

Par radicaux alkoxy, hydroxyalkyle, cycloalkylalkyle et aralkyle, on entend respectivement les radicaux alkoxy, hydroxyalkyle, cycloalkylalkyle et aralkyle dont le radical alkyle a la signification indiquée précédemment.

Par alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, on entend en particulier les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle et tert-butyle, pentyle, néopentyle, isopentyle, hexyle, isohexyle.

Par sel pharmaceutiquement acceptable, on entend notamment dans la présente demande des sels d'addition d'acides inorganiques tels que chlorhydrate, bromhydrate,

iodhydrate, sulfate, phosphate, diphosphate et nitrate ou d'acides organiques tels que acétate, maléate, fumarate, tartrate, succinate, citrate, lactate, méthanesulfonate, ptoluènesulfonate, pamoate et stéarate. Entrent également dans le champ de la présente invention, lorsqu'ils sont utilisables, les sels formés à partir de bases telles que l'hydroxyde de sodium ou de potassium. Pour d'autres exemples de sels pharmaceutiquement acceptables, on peut se référer à"Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33,201-217.

Parmi les agents anti-cancéreux utilisables en association avec du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci, on peut notamment citer : des inhibiteurs enzymatiques parmi lesquels : les inhibiteurs de topoisomérases comme la camptothécine et les analogues de la camptothécine (sous forme d'analogues comportant un cycle lactonique
E à six chaînons tels par exemple les composés décrits dans la demande de brevet PCT WO 94/11376, sous forme d'analogues comportant un cycle lactonique E à sept chaînons tels par exemple les composés décrits dans la demande de brevet PCT WO 97/00876 ou encore sous forme d'analogues tétracycliques ouverts tels par exemple les composés décrits dans la demande de brevet PCT WO 99/33829) ; les inhibiteurs de prényltransférases (et notamment décrits dans les demandes de brevet suivantes : demandes PCT WO 97/21701, WO 97/16443,
WO 98/00409, WO 96/21456, WO 97/24378, WO 97/17321, WO 97/18813,
WO 95/00497, WO 00/39130 ; brevets US 5,532, 359, US 5, 523, 430, US
5,510, 510 et US 5,627, 202) ;

les inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique (notamment ceux décrits dans les demandes PCT WO 00/02558 et WO 00/02881) ; les inhibiteurs de phosphatases Cdc25 ; les inhibiteurs de MAP kinases ; les inhibiteurs de MAP kinases kinases comme la 2- (2-amino-3-

méthoxypheny1) -4H-chromèn-4-one (composé PD 98059 de la société Parke Davis, décrit dans la demande de brevet PCT WO 96/22985) ; les inhibiteurs de protéine kinase C ; les inhibiteurs de tyrosine kinases ; les inhibiteurs de télomérases ; des inhibiteurs de la synthèse des bases puriques comme le méthotrexate ;

+ des inducteurs d'apoptose ; + des agents alkylants comme le cis-platine, le busulfant, le chlorambucil, l'isofosfamide ou la procarbazine ; . des agents intercalants comme la doxorubicine, la daunorubicine, la bléomycine, l'épirubicine, l'elliptinium, ou la mitoxantrone ; . des agents anti-métaboliques comme le 5-fluorouracyle, la gemcitabine ou les dérivés de purines comme la mercaptopurine ; . des agents de différentiation ; . des poisons du fuseau cellulaire comme le taxol et ses analogues ; . des inhibiteurs d'angiogénèse ; + des anti-hormones ou des antagonistes des récepteurs stéroïdiens ; + des anti-oxydants ; + des agents anti-sens ; + des agents anti-p53 (thérapie génique) ; + des agents de chémoprévention ; . des antibiotiques ou des agents anti-viraux ; . des agents immunothérapeutiques ; . des anti-corps comme l'héréguline.

D'une façon générale, on préférera associer au mikanolide, au dihydromikanolide ou à un de ses analogues un agent anti-cancéreux possédant un autre mécanisme d'action que ledit mikanolide, dihydromikanolide ou analogue.

De préférence, l'agent anti-cancéreux utilisé en association avec le mikanolide, le dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci sera choisi parmi des inhibiteurs enzymatiques, des agents alkylants, des agents intercalants, des agents anti-métaboliques, des poisons du fuseau cellulaire, des antibiotiques et des anti-corps.).

Parmi les inhibiteurs enzymatiques, les inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique, les inhibiteurs de prényltransférases et les inhibiteurs de MAP kinases kinases seront préférés. Plus préférentiellement, les inhibiteurs enzymatiques seront choisis parmi les inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique et les inhibiteurs de prényltransférases. Encore plus préférentiellement, les inhibiteurs enzymatiques seront des inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique.

Parmi les inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique, on préférera ceux qui sont actifs au bout d'une heure, par exemple ceux décrits dans la demande de brevet PCT WO 00/02881 (par opposition à ceux qui sont actifs au bout de 24 heures comme ceux décrits dans la demande de brevet PCT WO 00/02558). Parmi les inhibiteurs de prényltransférases, les inhibiteurs de farnésyltransférases seront préférés, et notamment ceux décrits dans la demande de brevet PCT WO 00/39130 comme la 4- (2-bromophényl)-l- {2- [1- ( (4-cyano-3-méthoxy) phénylméthyl) imidazo-5-yl]- 1-oxoéthyl} -1, 2-dihydrofluoroimidazol[1, 2a][1, 4]-benzodiazépine.

Plus préférentiellement, l'agent anti-cancéreux utilisé en association avec le mikanolide, le dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci sera choisi parmi des inhibiteurs enzymatiques et des agents alkylants.

De façon encore plus préférentielle, l'agent anti-cancéreux utilisé en association avec le mikanolide, le dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci sera choisi parmi des inhibiteurs de transduction de protéine G hétérotrimérique et des agents alkylants.

Selon un aspect particulièrement préféré de l'invention, lorsque l'agent anti-cancéreux utilisé en association avec le mikanolide, le dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci sera un inhibiteur de transduction de protéine G hétérotrimérique, celui-ci sera un composé de formule générale (II)

correspondant aux sous-formules (11) 1 ou (11) 2 :

dans lesquelles : X représente Ri2 et Y représente Rg, ou X et Y complètent un cycle à 6 chaînons, l'ensemble X-Y représentant le radical -CH(R8)-CH(R9)- ; Ri représente H, un radical alkyle ou alkylthio inférieur ; R2 et R3 représentent indépendamment H ou un radical alkyle inférieur ; R4 représente H2 ou 0 ; R5 représente H, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, cycloalkylalkyle inférieur, alkényle inférieur, alkynyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé d'un radical alkyle inférieur,-O-Rjo, - S (O) mRIo (m représentant 0,1, ou 2), -N(R10)(R11), -N-C(O)-R10, -NH-(SO2)-R10, - C02-Rio, C (O)-N(R10)(R11), et -(SO2)-N(R10)(R11) ; R6 et R7 représentent indépendamment H, un radical-C (O)-NH-CHR13-C02Ri4, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé des radicaux OH, alkyle ou alkoxy inférieur, N (Rio) (Rll), COOH, CON (Rio) (Rn), et halo, ou R6 et R7 forment ensemble un radical aryle ou un hétérocycle ; Rg et R9 représentent indépendamment, H, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé des radicaux OH, alkyle ou alkoxy inférieur, N (Rio) (Ri]), COOH, CON (Rio) (Rn) et halo, ou Rg et R9 forment ensemble un radical aryle ou un hétérocycle ; RIo et R]], représentent indépendamment H, un radical aryle ou hétérocycle, ou un radical alkyle, arylalkyle ou hétérocycle alkyle inférieur ; Ruz représente NR9, S, ou 0 ; R13 représente un radical alkyle inférieur éventuellement substitué par un radical choisi parmi les radicaux alkyle inférieur, -OR10, -S(O)mR10 (m représentant 0,1, ou 2) et - N (Rio) (Rn) ; Ruz représente H ou un radical alkyle inférieur ; ou un sel pharmaceutiquement acceptable dudit composé de formule générale (II).

De préférence, le composé de formule générale (II) répondra à la sous-formule générale (II)1. De préférence également, R, représentera H, R2 et R3 représenteront

indépendamment H ou un radical méthyle, R4 représentera 0, R ; représentera un radical cycloalkylalkyle inférieur, aryloxyalkyle inférieur, aralkoxyalkyle inférieur, arylsulfonylalkyle inférieur, R6 représentera un radical aryle éventuellement substitué par un radical alkyle ou alkoxy inférieur (de préférence méthyle ou méthoxy) et chacun de R7, R et R9 représentera H.

Parmi les composés de formule générale (II) ;, on préférera en particulier les composés suivants :

- la 7- (2-amino-l-oxo-3-thiopropyl)-8- (cyclohexylméthyl)-2- (2-méthylphényl)- 5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazine ; - la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-8- (cyclohexylméthyl)-2-phényl- 5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazine ; - la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-2- (2-méthoxyphényl)-8- (phénylméthoxy) méthyl- 5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [1, 2a] pyrazine ; - la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-2- (2-méthoxyphényl)-8- (1-phénylméthoxy) éthyl- 5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazine ; - la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-2- (2-méthoxyphényl)-8- (phénoxyéthyl)- 5, 6, 7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazine ; - la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-2- (2-méthoxyphényl)-8- (phénoxyéthyl)- 5, 6, 7, 8-tétrahydro-imidazo 2a]pyrazine, ou sa forme dimérique ; - et la 7- (2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-2- (2-méthoxyphényl)-8- (phénylsulfonyléthyl)-
5,6, 7, 8-tétrahydro-imidazo [1, 2a] pyrazine.

En particulier, l'agent anti-cancéreux utilisé en association avec le mikanolide, le dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci sera choisi parmi la 7- (2-amino-l-oxo- 3-thiopropyl)-8- (cyclohexylméthyl)-2-phényl-5, 6,7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazin et le cis-platine.

De préférence également, le cancer traité par le produit selon l'invention sera choisi parmi les cancers de l'oesophage, de l'estomac, des intestins, du rectum, de la cavité orale, du pharynx, du larynx, du poumon, du colon, du sein, du cervix uteri, du corpus endometrium, des ovaires, de la prostate, des testicules, de la vessie, des reins, du foie, du pancréas, des os, des tissus conjonctifs, de la peau, par exemple les mélanomes, des yeux, du cerveau et du système nerveux central, ainsi que le cancer de la thyroïde, la

leucémie, la maladie de Hodgkin, les lymphomes autres que ceux de Hodgkin et les myélomes multiples.

D'une façon générale, les cancers traités par le produit selon l'invention seront les cancers du système digestif, et en particulier les cancers de la cavité orale, de l'oesophage, de l'estomac, des intestins, du colon ou du rectum. Plus particulièrement, les cancers traités par le produit selon l'invention seront les cancers du système digestif, et en particulier les cancers de la cavité orale, de l'oesophage, de l'estomac, des intestins, du colon ou du rectum.

L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant au moins un des produits selon l'invention.

Les compositions pharmaceutiques comprenant un produit selon l'invention peuvent être sous forme de solides, par exemple des poudres, des granules, des comprimés, des gélules, des liposomes ou des suppositoires. Les supports solides appropriés peuvent être, par exemple, le phosphate de calcium, le stéarate de magnésium, le talc, les sucres, le lactose, la dextrine, l'amidon, la gélatine, la cellulose, la cellulose de méthyle, la cellulose carboxyméthyle de sodium, la polyvinylpyrrolidine et la cire.

Les compositions pharmaceutiques comprenant un produit selon l'invention peuvent aussi se présenter sous forme liquide, par exemple, des solutions, des émulsions, des suspensions ou des sirops. Les supports liquides appropriés peuvent être, par exemple, l'eau, les solvants organiques tels que le glycérol ou les glycols, de même que leurs mélanges, dans des proportions variées, dans l'eau.

L'administration d'un médicament selon l'invention pourra se faire par voie topique, orale, parentérale, par injection (intramusculaire, sous-cutanée, intraveineuse, intrapéritonéale, etc. ), etc. La voie d'administration dépendra bien entendu du type de maladie à traiter.

La dose d'un produit selon la présente invention, à prévoir pour le traitement des maladies ou troubles mentionnés ci-dessus, varie suivant le mode d'administration, l'âge et le poids corporel du sujet à traiter ainsi que l'état de ce dernier, et il en sera décidé en définitive par le médecin ou le vétérinaire traitant. Une telle quantité déterminée par le médecin ou le vétérinaire traitant est appelée ici"quantité thérapeutiquement efficace".

A titre indicatif, les doses d'administration suivantes (journalières, sauf indication contraire) pourront être envisagées pour les différents composés entrant dans la composition d'un produit selon l'invention : - mikanolide, dihydromikanolide ou analogue de ceux-ci répondant à la formule générale (1) : de 1 à 100 mg/kg par voie intrapéritonéale ; - composé de formule générale (II) : de 50 à 200 mg/m2 par voie intrapéritonéale ; - cis-platine : de 50 à 80 mg/m2 ; - taxol : de 1 à 20 mg/kg (voie intrapéritonéale) ou 1 à 3 mg/kg (voie intraveineuse).

Les composés entrant dans la composition du produit de l'invention peuvent être préparés par les procédés décrits ci-après.

PRÉPARATION DES PRODUITS DE L'INVENTION :

Préparation des composés de formule générale (I) -----------------La préparation des composés de formule générale (I) est décrite ci-après (il s'agit de l'extrait pertinent de la demande de brevet français non publiée FR 01/00397).

Préparation des composés de sous-formule générale (I), : CAS 1 : R = H : La préparation de ce type de composés est résumée dans le schéma 1 ci-après. Le dihydromikanolide par addition d'un nucléophile tel qu'une amine primaire ou secondaire HNRGR7, ou encore d'un thiol R ; ; SH en présence d'une base, dans un solvant inerte tel que le tétrahydrofuranne ou l'acétone, à une température de préférence comprise entre 0 C et 50 C, et plus préférentiellement à température ambiante.

Dans le cas où R3 n'est pas OH, on traite l'intermédiaire obtenu avec l'un des réactifs de formule générale R, (CO)-Hal (ou un réactif équivalent comme par exemple l'anhydride (R1iCO)) 20), R'40 (CO) -Hal ou Hal-Si RRR (Haï représentant un atome halogène) pour obtenir le composé final souhaité. D'une façon générale, cette réaction s'effectue dans un solvant aprotique tel que le dichlorométhane, le trichloroéthane, l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne ou le toluène, à une température de préférence comprise entre 0 C et 110 C et éventuellement en présence d'une base telle que la triéthylamine ou la

4-diméthylaminopyridine. Ces types de réaction sont bien connus de l'homme du métier (qui pourra notamment consulter utilement l'ouvrage de référence suivant : Greene et coll.,"Protective groups in Organic Synthesis", 2nd edition, Wiley, New-York, 1991) en raison de leur usage fréquent pour protéger une fonction alcool. Par exemple, en ce qui concerne la réaction de silylation, celle-ci est généralement effectuée par traitement du composé alcoolique avec un chlorure de silyle en présence d'une base, dans un solvant aprotique à une température comprise entre 0 C et 50 C.

HNR6R7 Me HNR6R7 ou 0 Me HNR. R, ? 3 jy) e . > \ : \. ouRSH, base p. \ > ' . éventuellemert suvi par \ .. 2'. a so < O Rs, COO-Hal ou &commat;. < O nk'-'"" < /t coo-/ j . - < -) 0 Rf. lCOO-Halou 0 0 0

Schéma 1 CAS 2 : R1=R2#H : Les composés de formule (I), dans laquelle RI = R2 H et R3 représente un groupe hydroxyle peuvent être préparés à partir du mikanolide par addition d'un nucléophile tel qu'une amine primaire ou secondaire HNRJR. s, ou encore d'un thiol R4SH en présence d'une base, dans un solvant inerte tel que le tétrahydrofuranne ou l'acétone, à une température de préférence comprise entre 0 C et 50 C, et plus préférentiellement à température ambiante.

Dans le cas où R3 n'est pas OH, une deuxième réaction est effectuée à l'aide d'un composé de formule générale R, (CO)-Hal (ou un réactif équivalent comme par exemple l'anhydride (RCO)) ), RO (CO)-Hal ou Hal-SiRRR, ? (Hal représentant un atome halogène) pour obtenir le composé final souhaité. Cette réaction peut être effectuée de façon analogue à celle exposée dans le CAS 1.

HNR4Rs} V1e SH, base Il ou R4 :. Jéventuellement suivi par / X""o/o-/, \/=\ .. o\ ./t coo-.. t , o o SiR,, R,,, R,--Hal 0./"0 0 0

Schéma 2 CAS 3 : R) H et R, : Dans ce cas, le composé de formule générale (1) 2 sera soumis aux mêmes réactions que dans le CAS 1 pour donner le composé final souhaité dans lequel R, : P,- R,.

HNR4Rs ou 0/ouRSH, base t 0/ R". éventuellement suivi par \./"- Fco-, /\/""n 03 0 Il 0 \\ y, , ,-/ -"o \. fi ouzo 1 R, 0 Ri 2 (Ih Ri Ri

Schéma 3 Préparation des composés de sous-formule générale (1) 2 : Les composés de sous-formule (1) 2 peuvent être préparés, schéma 4, à partir du mikanolide par addition d'un nucléophile tel qu'une amine primaire ou secondaire HNRGR7, ou encore d'un thiol R (, SH en présence d'une base, dans un solvant inerte tel que le tétrahydrofuranne ou l'acétone, à une température comprise de préférence entre 0 C et 50 C, et plus préférentiellement à température ambiante.

0, 0 HNR, R, 0., 0 ou RSH, base (1) 2
Schéma 4 Sels de composés de formule générale (1) : Certains composés de l'invention peuvent être préparés sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables selon les méthodes usuelles. En ce qui concerne ces sels, l'homme du métier pourra utilement consulter l'article de Gould et coll.,"Salt

selection for basic drugs", Int../Pharm. (1986), 33, 201-217.

Préparation des composés deformulegénérale (II) Pour la préparation des composés de formule générale (II), l'homme du métier pourra s'appuyer sur l'exposé détaillé présent dans les demandes de brevet PCT WO 97/30053 et WO 00/02881.

~~ (O~oUdeformuleg érale I -------------------------e-------La préparation de ces composés, quand ils ne sont pas commerciaux, est amplement décrite dans les brevets et/ou la littérature et est donc bien connue de l'homme du métier.

A moins qu'ils ne soient définis d'une autre manière, tous les termes techniques et scientifiques utilisés ici ont la même signification que celle couramment comprise par un spécialiste ordinaire du domaine auquel appartient cette invention.

Les exemples suivants sont présentés pour illustrer les procédures ci-dessus et ne doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de l'invention.

EXEMPLES Afin d'illustrer l'utilité de l'invention, on étudiera l'effet d'un traitement sur une lignée tumorale de cellules humaines coliques HT29 par le dihydromikanolide (DHM) en association avec les agents anti-cancéreux suivants : - le cis-platine (composé B,) ; et la 7- (2-amino-l-oxo-3-thiopropyl)-8- (cyclohexylméthyl)-2-phényl-
5,6, 7, 8-tétrahydroimidazo 2a]pyrazine (composé B2) ; 1) Procédures Lignée cellulaire La lignée cellulaire HT-29 (cellules humaines de cancer du colon) a été acquise auprès de American Tissue Culture Collection (Rockville, Maryland, USA).

Mesure de la prolifération cellulaire in vitro Les cellules HT-29 (4000 cellules/puits) sont cultivées en plaques 96.

Au jour 0, ces cellules sont ensemencées dans 90 III de milieu de Eagle modifié par Dulbecco (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) complété avec 10% de sérum foetal de veau inactivé par chauffage (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), 50000 unités/1 de pénicilline et 50 mg/l de streptomycine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), et 2 mM de glutamine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France).

Les cellules ont été traitées simultanément avec des concentrations des composés à tester seuls ou en association pendant 120 heures.

A la fin de cette période, la quantification de la prolifération cellulaire est évaluée par test colorimétrique en se basant sur le clivage du sel de tétrazolium WST1 par les déhydrogénases mitochondriales dans les cellules vivantes conduisant à la formation de formazan (Boehringer Mannheim, Meylan, France). Ces tests sont effectués quatre fois avec 6 déterminations pour chaque produit seul et pour chaque association testée. Ceci permet de déterminer le nombre de cellules vivantes à la fin de chaque traitement.

2) Résultats : Les résultats obtenus sont reportés dans les tableaux 1 et Il figurant ci-après.

Les résultats reportés dans les tableaux, montrent que les produits comprenant le dihydromikanolide en association avec le composé BI ou le composé B2 sont capables d'inhiber la prolifération in vitro des cellules tumorales humaines HT29 de manière plus importante que les produits séparés.

DHM <SEP> (5 <SEP> g/ml) <SEP> B1 <SEP> (6, <SEP> 25/li) <SEP> DHM <SEP> (5 <SEP> g/ml) <SEP> + <SEP> B1 <SEP> (6, <SEP> 25/li)
<tb> % <SEP> de <SEP> cellules <SEP> 61 <SEP> 48 <SEP> 22
<tb> vivantes
<tb>
Tableau 1

<tb>
<tb> DHM <SEP> (5 <SEP> g/ml) <SEP> B2 <SEP> (25 <SEP> M) <SEP> DHM <SEP> (5 <SEP> g/ml) <SEP> +B2 <SEP> (25 <SEP> M)
<tb> % <SEP> de <SEP> cellules <SEP> 64 <SEP> 37 <SEP> 13
<tb> vivantes
<tb>
Tableau Il

Claims

Revendications 1. Produit comprenant au moins du mikanolide, du dihydromikanolide ou un analogue de ceux-ci, éventuellement sous la forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable, en association avec au moins un autre agent anti-cancéreux pour une utilisation thérapeutique simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement du cancer.
2. Produit selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent anti-cancéreux associé au mikanolide, au dihydromikanolide ou à un analogue de ceux-ci possède un autre mécanisme d'action que ledit mikanolide, dihydromikanolide ou analogue.
3. Produit selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'autre agent anti-cancéreux est choisi parmi des inhibiteurs enzymatiques, des inducteurs d'apoptose, des agents alkylants, des agents anti-métaboliques, des agents de différentiation, des poisons du fuseau cellulaire, des inhibiteurs d'angiogénèse, des anti-hormones ou des antagonistes des récepteurs stéroïdiens, des anti-oxydants, des agents anti-sens, des agents anti-p53, des agents de chémoprévention, des antibiotiques ou des agents anti-viraux, des agents immunothérapeutiques et des anti-corps.
4. Produit selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'autre agent anti-cancéreux est choisi parmi des inhibiteurs enzymatiques et des agents alkylants.
5. Produit selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'inhibiteur enzymatique est un inhibiteur de transduction de protéine G hétérotrimérique répondant à la formue générale (II)

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dans lesquelles : X représente Ri 2 et Y représente Rg, ou X et Y complètent un cycle à 6 chaînons, l'ensemble X-Y représentant le radical-CH (Rs)-CH (R9)- ; Ri représente H, un radical alkyle ou alkylthio inférieur ; R2 et R3 représentent indépendamment H ou un radical alkyle inférieur ; R4 représente H2 ou 0 ; R5 représente H, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, cycloalkylalkyle inférieur, alkényle inférieur, alkynyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé d'un radical alkyle inférieur,-O-RIo, - S (O) mRIo (m représentant 0,1, ou 2),-N (R] o) (R] i),-N-C (O)-RIo,-NH- (S02)-RIo, -CO2-R10, C(O)-N(R10)(R11), et -(SO2)-N(R10)(R11) ; R6 et R7 représentent indépendamment H, un radical-C (O)-NH-CHR] 3-C02Ri4, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé des radicaux OH, alkyle ou alkoxy inférieur, N (Rio) (roll) COOH, CON (Rio) (R ! t), et halo, ou R6 et R7 forment ensemble un radical aryle ou un hétérocycle ; Rg et R9 représentent indépendamment, H, ou l'un des radicaux alkyle inférieur, aryle, arylalkyle inférieur, hétérocycle ou hétérocycle alkyle inférieur, ces radicaux pouvant éventuellement être substitués par des radicaux choisis parmi le groupe composé des radicaux OH, alkyle ou alkoxy inférieur, N (RI 0) (RI 1), COOH, CON (R] o) (Rl l) et halo, ou Rg et R9 forment ensemble un radical aryle ou un hétérocycle ; RIO et Ru, représentent indépendamment H, un radical aryle ou hétérocycle, ou un radical alkyle, arylalkyle ou hétérocycle alkyle inférieur ;

correspondant aux sous-formules (II)1 ou (II)2 :

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Ri 2 représente NR9, S, ou 0 ; RI 3 représente un radical alkyle inférieur éventuellement substitué par un radical choisi parmi les radicaux alkyle inférieur, -OR10, -S(O)mR10 (m représentant 0, 1, ou 2) etN (Rto) (Rn) ; Rl4 représente H ou un radical alkyle inférieur ; ou est un sel pharmaceutiquement acceptable dudit composé de formule générale (II).
6. Produit selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'autre agent anti-cancéreux est choisi parmi la 7-(2-amino-1-oxo-3-thiopropyl)-8-(cyclohexylméthyl)-2-phényl- 5,6, 7, 8-tétrahydroimidazo [l, 2a] pyrazine et le cis-platine.
7. Produit selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l'analogue du mikanolide ou du dihydromikanolide est choisi parmi les composés répondant à la formule générale (1).

correspondant aux sous-formules générales (1) \ et (1) 2

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radical-OCH-O-attaché de part et d'autre à l'atome de carbone qui le porte, un tel radical n'étant présent toutefois qu'une fois au maximum par radical NR4Rs ou NR6R7, représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ; R, 4, R, R, ( ; et R, 7 représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy ; ou est un sel pharmaceutiquement acceptable d'un composé de formule générale (1).

Rs, R, o, R, j et R représentent, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, alkoxycarbonyl ou aralkyle, Rg et R12 représentant, indépendamment à chaque fois qu'ils interviennent, un atome d'hydrogène ou chacun de R9 et R12 pouvant former avec respectivement Rg et Run

dans lesquelles R] représente un atome d'hydrogène ou un radical SR4 ou NR4Rs ; R2 représente SR6 ou NR6R7 ; R3 représente OH, O (CO) R, 4, 0 (CO) OR,4, ou OSiR15R16R17 ; R4, R, R6 et R7 représentent, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, cycloalkylalkyle, hydroxyalkyle ou encore l'un des radicaux aryle ou aralkyle éventuellement substitués sur leur groupe aryle par un ou des radicaux choisis parmi les radicaux alkyle, hydroxy ou alkoxy, R4 et R5 pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux -CR8R9-, - NRlO-'-0- et -S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -O- ou -S- dans ledit hétérocycle, et R6 et R7 pouvant former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de 5 à 7 chaînons, les chaînons complémentaires étant choisis parmi les radicaux - CRj] R,2-,-NR, 3-,-0-et-S-, étant entendu toutefois qu'il ne peut se trouver qu'un seul chaînon choisi parmi -O- ou -S- dans ledit hétérocycle,
8. Produit selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il comprend du dihydromikanolide.

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9. Produit selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que le traitement vise un cancer choisi parmi les cancers de l'oesophage, de l'estomac, des intestins, du rectum, de la cavité orale, du pharynx, du larynx, du poumon, du colon, du sein, du cervix uteri, du corpus endometrium, des ovaires, de la prostate, des testicules, de la vessie, des reins, du foie, du pancréas, des os, des tissus conjonctifs, de la peau, par exemple les mélanomes, des yeux, du cerveau et du système nerveux central, ainsi que le cancer de la thyroïde, la leucémie, la maladie de Hodgkin, les lymphomes autres que ceux de Hodgkin et les myélomes multiples
10. Composition pharmaceutique comprenant un produit selon l'une des revendications 1 à 9.