FR2812290A1

FR2812290A1 - Derives n-3,7 substitues de 1-methylxantine presentant des activites inhibitrices sur les phosphodiesterases de type cinq

Info

Publication number: FR2812290A1
Application number: FR0110204A
Authority: FR
Inventors: Ing Jun Chen
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2000-07-28
Filing date: 2001-07-30
Publication date: 2002-02-01
Anticipated expiration: 2021-07-30
Also published as: GB0118522D0; GB2367819A; US20020035117A1; DE10137038A1; GB2367819B; FR2812290B1; TWI268930B

Abstract

D eriv es N-3, 7 substitu es de la 1-m ethylxanthine de formule I et II, (CF DESSIN DANS BOPI) Utilisation de ces compos es pour induire une relaxation caverneuse.

Description

Dérivés N-3,7 substitués de 1-méthylxanthine présentant des activités inhibitrices sur les phosphodiestérases de type cinq.

Cette invention concerne les composés des dérivés N-3,7 substitués de 1-méthylxanthine ou N-7 substitués de 3-isobutyle-1-méthylxanthine (IBMX) et de théophylline, qui lors des essais en laboratoire sur des animaux, se sont avérés présenter pharmacologiquement une activité inhibitrice sur les phosphodiestérases de type 5, une activité de relaxation du muscle lisse du corps caverneux, et l'augmentation de la pression intracaverneuse (APIC).,.

L'endothélium joue un rôle majeur dans la régulation du tonus du muscle lisse vasculaire (VSM) grâce à la libération de divers facteurs vasoactifs.

Parmi les vasodilatateurs dérivés de l'endothélium, l'oxyde nitrique (NO) est probablement le médiateur principal de la relaxation dépendante de l'endothélium dans la plupart des vaisseaux sanguins. Non seulement l'oxyde nitrique a apporté de nouvelles possibilités thérapeutiques pour les composés apparentés à NO dans de nombreuses voies biorégulatrices, mais il a également conduit à une utilisation accrue de tels composés dans des études pharmacologiques.

Au cours des dernières années, l'oxyde nitrique s'est avéré être un régulateur intéressant des fonctions vasculaires en contrôlant le tonus des vaisseaux sanguins ainsi que les interactions des cellules sanguines avec la paroi vasculaire (S. Moncada et al., Pharmacol. Rev. vol. 43, n 2, pages 109-142, 1991) . L'action de NO comme vasodilatateur est médiée par l'activation de la guanylyl cyclase soluble (sGC) du muscle lisse vasculaire, une enzyme de transduction des signaux qui forme le second messager, la GMP cyclique moléculaire (William P. Arnold et al., Proc.

Natl. Acad. Sci. vol. 74, n 8, pages 3203-3207,1977, Charles J. Lowenstein et al., Ann. Intern. Med. vol.

102, n 3, pages 227-237,1994). L'activité de plusieurs GMP cyliques (guanosine-3',5'-monophosphate cyclique) qui conduit à la vasorelaxation a été déterminée. Les guanylyl cyclases liées à la membrane sont des enzymes de type récepteur qui sont activées par la liaison extracellulaire des peptides natriurétiques. Par contre, les guanylyl cyclases solubles agissent par l'intermédiaire de l'hémoglobine qui est un récepteur intracellulaire majeur de l'oxyde nitrique (Paulus Wohlfart et al, Br. J. Pharmcol. vol.

128, pages 1316-1322,1999). Par ailleurs, les augmentations en cGMP avec ces activateurs de guanylyl cyclases et les phosphodiestérases (PDE) ou l'inhibition de la dégradation de la cGMP ont été associées avec la relaxation des muscles lisses vasculaires et trachéaux.

Les interactions entre les NO endogènes ou les donneurs de NO et le facteur hyperpolarisant dérivé de l'endothélium (EDHF) ou les activateurs des canaux à K+ ont suscité une grande attention (Francisco PérezViscaino et al., Br. J. Pharmcol. vol. 123, pages 847- 854, 1998) . Les canaux à K+ jouent un rôle majeur dans la régulation du potentiel membranaire au repos et modulent le tonus du VSM (muscle lisse vasculaire) (Mark T. Nelson & John M. Quayle, Am. J. Physiol. vol.

268, C799-C822, 1995). Le facteur hyperpolarisant dérivé de l'endothélium active les canaux potassiques, et le flux potassique provoque une hyperpolarisation et relaxe ainsi la cellule du muscle lisse. Des résultats récents suggèrent que l'activation des canaux à KATP de l'endothélium (canaux potassiques sensibles à l'ATP) peut également libérer l'oxyde nitrique dérivé de l'endothélium (Ethel C. Feleder & Edda AdlerGraschinsky, Eur.J. Pharmacol. vol. 319, pages 229-238, 1997) ou le facteur hyperpolarisant dérivé de l'endothélium (Richard White & C. Robin Hiley, Eur. J.

Pharmacol. vol. 339, pages 157-160, 1997). Les donneurs d'oxyde nitrique se sont avérés activer les canaux à KATP par l'intermédiaire du mécanisme dépendant de la

GMP cyclique, impliquant vraisemblablement l'activation de la protéine kinase dépendante de la GMP cyclique, dans les cellules musculaires lisses aortiques de rat (Masahiro Kubo et al., Cire. Res. vol. 74, n 3, pages 471-476, 1993) et l'artère mésentérique de lapin (Michael E. Murphy & Joseph E. Brayden, J. Physiol. vol. 486, n 1 , pages 47-48, 1995) , et par un mécanisme indépendant de la GMP cyclique dans l'artère mésentérique de rat (Thomas Weidelt et al., J. Physiol, vol. 500, n 3, pages 617-630, 1997). Bien que la majorité de la relaxation dépendante de l'endothélium soit due à NO, l'hyperpolarisation associée à l'ouverture des canaux à K+ peut complémenter 60-80% de cette réponse si la synthèse de NO est bloquée (E.V.

Kilpatrick & T.M. Cocks, Br. J. Pharmacol. vol. 112, pages 557-565, 1994).

L'activité combinée de la stimulation de la guanylyl cyclase soluble (sGC) et l'ouverture des canaux à K+ dans une molécule, comme trouvée dans le Nicorandil, bien qu'elle soit montrée sans l'activité d'inhibition de la phosphodiestérase (PDE), est susceptible de relaxer plus complètement la vasoconstriction induite par un agoniste (F. PérezVizcaino et al, Br. J. Pharmcol. vol. 123, pages 847- 854, 1998). YC-1(3-(5'-hydroxyméthyl-2-furyl)-1-benzylindazol) est un représentant d'une classe d'activateur de sGC avec une activité d'inhibition de PDE (phosphodiestérase) et conduit à une inhibition durable médiée par la GMP cyclique, de la vasoconstriction (Jan Galle et al., Br. J. Pharmcol. vol. 127, pages 195-203, 1999) .

L'invention couvre les dérivés N-3,7 substitués de la 1-méthylxanthine et plus particulièrement des dérivés N-7 substitués de la théophylline et de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX), qui lors des essais en laboratoire sur des animaux, se sont avérés présenter pharmacologiquement des activités inhibitrices sur les phosphodiestérases de type 5.

Cette invention couvre également les méthodes de synthèse de certains nouveaux dérivés N-3,7 substitués de la 1-méthylxanthine, et plus particulièrement des dérivés N-7 substitués de la théophylline et de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine.

L'invention sera maintenant décrite au moyen d'exemples en se référant aux tableaux et aux figures annexés dans lesquels :
Tableau 1 Données physico-chimiques
Tableau 2 : CI50 Relaxation du'Corps Caverneux de
Lapin
Tableau 3 : CI50 Relaxation du Corps Caverneux de
Lapin sur bloqueur de canaux à K+
Tableau 4 : montre l'augmentation de la pression intracaverneuse (PIC) induite par les composés.

Tableau 5 : Dérivés de N-3,7 substitués de 1- méthylxanthine de formules I et II
La fig. 1 illustre la structure du Nicorandil et du glibenclamide
La fig. 2 illustre la synthèse des composés de formule II
La fig. 3 illustre la synthèse des composés de formule I
La fig. 4A-4B illustre les effets expérimentaux du composé 14 sur le corps caverneux de lapin précontracté par la phényléphrine en absence et en présence de L-NAME, de bleu de méthylène, d'ODQ et des bloqueurs des canaux potassiques.* Significativement différent du témoin, P<0,05 (mesures
ANOVA répétées deux fois suivies du test de Stydent-Newman-Keuls)
La fig. 4A illustre les effets expérimentaux du composé 14 sur le corps caverneux de lapin précontracté par la

phényléphrine en absence et en présence de L-NAME, de bleu de méthylène, d'ODQ.

1... groupe témoin
2... L-NAME (100 M)
3... bleu de méthylène (10juM)
4... ODQ (1 M)
La fig. 4B illustre les effets expérimentaux du composé 14 sur le corps caverneux de lapin précontracté par la phényléphrine en absence et en présence de bloqueurs des canaux potassiques.

5... groupe témoin
6... Glibenclamide (1 M)
7... TEA ( 1 0 mM)
8... 4-AP (100 M)
La fig. 5 illustre les effets additifs du composé
14 et d'IBMX (3-isobutyl-1- méthylxanthine) sur des bandelettes du corps caverneux de lapin précontracté par la phényléphrine. Chaque valeur représente la moyenne * E.S., n = 8.

*P<0,05 par rapport à la valeur témoin. (ANOVA suivie du test de
Dunnett).

1.... groupe témoin
2 .... IBMX
3 .... composé 14
4.... composé 14 et IBMX.

L'invention couvre les dérivés N-3,7 substitués de la 1-méthylxanthine de formules I et II.

dans lesquelles R, est un groupe alkyle en C1-C4, linéaire ou branché, en particulier méthyle, éthyle, propyle, butyle, iso-propyle et iso-butyle; R2 est un élément choisi dans le groupe constitué de

R4 est un élément choisi dans le groupe constitué de H,

- (CHz) CH3, X, -nez , -OH, -O(CHz)nCH3 et -NO2 ; R5 est un élément choisi dans le groupe constitué de H,CONH2

R3 est un élément choisi dans le groupe constitué d'halogène, de groupement hydroxy (OH), de chaîne linéaire saturée de 1-3 atomes de carbone, ou ayant un groupe substituant un H ; n est 0,1,2 ou 3. Lorsque

R4

R5 est choisi comme le groupement # R4 peut être en position ortho, méta ou para du cycle benzène. In vivo ou in vitro, les expériences démontrent la relaxation caverneuse induite par ces composés.

Cette invention couvre les composés impliquant une modification moléculaire sur la base de la théophylline et de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et en particulier les composés qui sont des dérivés substitués de la théophylline. Des tests in vivo ont démontré que les composés présentent une activité sur la stimulation de la sGC (guanylyl cyclase soluble), l'ouverture des canaux à K" et en tant que relaxant du VSM (muscle lisse vasculaire).

Récemment, il a été rapporté que la théophylline possède une fonction antagoniste de l'accepteur de l'adénosine et inhibitrice de la phosphodiestérase (PDE), qu'une modification positive en 1 ou 7 basée sur la méthylxanthine soit impliquée ou non (Ken-Ichi Miyamoto et al., J. Med. Chem. vol. 36, pages 1380-1386, 1993). Les dérivés de la méthylxanthine se sont avérés présenter des fonctions de relaxation trachéale et de réduction de la fréquence cardiaque. Certains dérivés synthétiques de la xanthine ont présenté une affinité et des effets sélectifs sur le récepteur de l'adénosine A, et A2.

Les composés de l'invention se sont avérés présenter une activité propice à la relaxation du muscle lisse par les propriétés pharmaceutiques suivantes : l'activation de l'accepteur de l'adénosine, la stimulation de la guanylyl cyclase des muscles lisses, l'inhibition de l'activité des PDE (phosphodiestérases), l'augmentation de la c-GMP dans la cellule, et l'ouverture des canaux à K+. Sur la base de la description précédente, il a été trouvé que les composés 4,9, 10,12, 17,18 pourraient relaxer le muscle lisse du corps caverneux de lapin et augmenter la pression intracaverneuse (PIC). Comme le montre le Tableau 4, le pic a montré une augmentation de la

pression intracaverneuse (PIC) et de la durée de la réponse de tumescence des composés à 2 mg/kg chez le lapin.

Le tableau 2 montre la relaxation du muscle lisse du corps caverneux de lapin induite par les composés de cette invention comme le montrent les expériences. La relaxation n'a pas été uniquement provoquée par NO, un moindre développement de tolérance, et sans affecter sérieusement le système de reflux compensatoire.

La méthode de synthèse des dérivés N-3,7substitués de 1-méthylxanthine est présentée sur les figures 2 et 3 qui montrent les formules I et II comme la structure principale. Pour les nouveaux composés cidessus, différentes substitutions sur les deux sites de substitution ont conduit au changement de leurs produits intermédiaires, de sorte que différents procédés ont été mis au point.

Un autre objet de la présente invention concerne les procédés pour préparer les composés de formule I et II.

Le procédé pour préparer les composés N-3,7 substitués de formule II comprend les différentes étapes suivantes : # la dissolution de dérivés N-3 de la 1- méthylxanthine dans une solution d'alkyle substituée par un halogène, par exemple une solution de 2-bromoéthyle; l'agitation sur une plaque chauffante jusqu'à fusion totale du solide ; puis# l'addition de NaOH pour réagir à 150 C pendant une nuit ; # la concentration sous pression réduite pour obtenir des cristaux blancs grossiers ; # la recristallisation du produit dans un alcool, par exemple le méthanol pour obtenir des cristaux blancs purs de composé D,

et d'autre part, # la mise en réaction de l'acide para- hydroxyl sulfonique avec un acide chloro- sulfonique, puis le versement du liquide dans de l'eau glacée ; # la récupération et le séchage du précipité de chlorure de parahydroxysulfonyle sous pression réduite, avec une quantité adéquate de méthanol pour dissoudre le précipité, puis # l'addition de Rz-alkyle, par exemple de Rz-méthyle, selon la formule II, pour réagir après dissolution du produit dans le formol, puis # après mélange de la solution méthanol- acide acétique, l'addition du composé D obtenu précédemment en quantité équimolaire.

Le procédé pour préparer les composés de formule I comprend les différentes étapes suivantes: # la dissolution de dérivés N-7 substitués de 1-méthylxanthine dans de l'alcool, par exemple le méthanol et l'agitation avec une solution d'alkyle halogéné, par exemple le 2-bromoéthyle, sur une plaque chauffante ; # la mise en réaction avec du NaOH, et # la recristallisation avec un alcool, par exemple le méthanol, pour obtenir un composé A cristallin, et # le chauffage au reflux du composé A avec de l'alcool, par exemple du méthanol, et l'addition de dérivés de pipérazine.

Le procédé pour les composés de formule II comprend plus particulièrement les étapes suivantes :
1) la dissolution de la 3-isobutyl-1méthylxanthine (IBMX) dans une solution d'éthyle

substitué par un halogène, par exemple une solution de 2-bromoéthyle ;
2) l'agitation sur une plaque chauffante jusqu'à fusion totale du solide ;
3) puis l'addition de NaOH pour réagir à 150 C pendant une nuit ;
4) la concentration sous pression réduite pour obtenir des cristaux blancs grossiers ;
5) la recristallisation du produit dans du méthanol pour obtenir les cristaux blancs purs du composé D, la N7-bromoéthyle-3-isobutyl-1méthylxanthine.

Un autre objet de la présente invention est une composition pharmaceutique comprenant un composé de formule I ou II conjointement avec différents diluants et excipients pharmaceutiquement acceptables.

Encore un autre objet de la présente invention est l'utilisation d'une composition pharmaceutique comprenant un composé de formule I ou II pour l'activité de relaxation du corps caverneux.

PREPARATION DES COMPOSES 39-43 et 44
Dans un tricol muni d'agitateur mécanique, d'un thermomètre et d'un réfrigérant à reflux, on a placé de l'acide chlorosulfonique et on a ajouté du sel sodique de l'acide parahydroxysulfonique. Le mélange a ensuite été chauffé à 65-67 C puis versé sur de la glace pilée. Le précipité a été séparé par filtration.

Après lavage à l'eau froide, le produit a été séché sous pression réduite. On a ajouté du méthanol pour dissoudre le précipité, puis on a ajouté de la méthylpipérazine pour obtenir un précipité qui a été dissous dans du méthanol et ensuite dans du formol, et on a ajouté le composé D (N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1méthylxanthine). Le mélange a été chauffé à 75 C pendant une nuit, purifié par chromatographie sur colonne et élué avec un système de solvant contenant de

l'acétate d'éthyle et du méthanol, puis recristallisé dans le méthanol pour obtenir le composé 39@ Le composé 39 a été dissous dans du méthanol, on a ajouté du NaOH et du bromure d'éthyle, chauffé à 75 C et concentré sous pression réduite, dissous et recristallisé dans du méthanol pour obtenir le composé 40.

En suivant la même méthode, on a obtenu le composé 41 en remplaçant le bromure d'éthyle par le bromure de propyle.

Les composés 42,43 ou 44 ont également été obtenus en remplaçant la théophylline par la IBMX, respectivement.

De l'ester éthylique d'acide parahydroxybenzoïque dissous dans du méthanol, du formol et de l'acide acétique a été ajouté pour réagir pendant une nuit. Ensuite, on a ajouté du NH3(aq) pour obtenir l'amide para-hydroxybenzoïque. On a ajouté du formol, de l'acide acétique et du N7-bromoéthyle pour obtenir la 3-isobutyl-1-méthylxanthine pour effectuer une réaction de Mannich pour obtenir le composé 33. Le produit a été purifié à partir du méthanol, puis on a ajouté du NaOH- pour réagir avec le bromure d'éthyle pour obtenir le composé 34.

Le composé 35 a été obtenu en remplaçant le bromure d'éthyle par le bromure de propyle.

Les composés 36,37 et 38 ont également été obtenus en remplaçant la théophylline par l'IBMX.

Le procédé de préparation des composés de formule I présenté sur la Fig. 3 comprend plus particulièrement les étapes suivantes 1) la dissolution de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) dans du méthanol et l'agitation avec du 2-bromoéthyle sur une plaque chauffante ; 2) la réaction avec du NaOH ; et 3) la recristallisation dans le méthanol pour obtenir des cristaux blancs du composé A (N7bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine).

PREPARATION DES COMPOSES 1-8,11-18 et 21-26

Le procédé de préparation des composés 1-8 ayant différents substituants.

Le procédé nécessite les étapes suivantes : 1) le chauffage au reflux du composé A avec du méthanol, 2) puis l'addition de la 1-phénylpipérazine, de la 1-(2-pyridyl)pipérazine, de la 1- (pyrimidyl)pipérazine, de la 1-(0méthyloxyphényl)pipérazine, de la 1-(2chlorophényl)pipérazine, de la 1-(mchlorophényl)pipérazine, de la N-benzylpipérazine ou de la 1-(4-chlorophényl)pipérazine.

Les composés 11-18 ont également été obtenus lorsque la théophylline a été remplacée par l'IBMX.

Comme le montre la Fig. 2, une solution de chlorure de benzènesulfonyle, de pipérazine et de méthanol a donné la benzènesulfonylpipérazine. Ce produit a été dissous dans du méthanol et mis en réaction avec le composé A (N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1méthylxanthine) pour obtenir le composé 21.

Lorsque le bromure d'éthyle a été remplacé par le bromure de propyle, les composés 22 et 23 ont été obtenus lorsque le chlorure de p-toluènesulfonyle ou le chlorure de o-toluènesulfonyle a été remplacé par le chlorure de benzènesulfonyle, respectivement.

Les composés 24,25 ou 26 ont également été obtenus lorsque la théophylline a été remplacée par l'IBMX, respectivement.

PREPARATION DES COMPOSES 9,10, 45 et 46
On a dissous de la théophylline dans du méthanol sous agitation avec du 1,2-dibromoéthane, puis on a ajouté du NaOH. La solution a été chauffée au reflux, concentrée sous pression réduite, purifiée sur une colonne de chromatographie sur gel de silice pour obtenir le composé A. Le composé A a été dissous dans du méthanol et on a ajouté de la pipérazine et chauffé au reflux pour obtenir le composé B. Le composé B a été

dissous dans du méthanol et on a ajouté du chlorure de 2-furoyle ou du 4-chloronitrobenzène et -.chauffé au reflux pour obtenir le composé 9 ou 10.

On a chauffé au reflux le chlorure de 4chlorobenzènesulfonyle et la méthylpipérazine dans du méthanol. On a ajouté la N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1méthylxanthine dans du méthanol, puis on l'a chauffée au reflux pour obtenir le composé 45.

Le composé 46 a été obtenu en remplaçant le bromure d'éthyle, et en remplaçant la théophylline par l'IBMX.

Après purification et cristallisation, les produits sont testés individuellement pour leurs propriétés physico-chimiques, ce qui comprend l'analyse élémentaire MS, IR, RMN 'H (CDC13), et U.V.

Les résultats sont présentés dans le Tableau 1. On utilise des modèles expérimentaux appropriés pour évaluer leurs activités pharmacologiques, déterminant ainsi l'activité des composés.

Les compositions de cette invention incluront différents excipients, molécules porteuses ou diluants et sels pharmaceutiques, conformément à la nécessité de former des compositions présentant une efficacité thérapeutique. Ces préparations pharmaceutiques peuvent être sous forme solide pour l'administration par voie orale et rectale, sous forme liquide ou sous forme injectable par voie parentérale, sous forme de pommade pour l'application directe sur la zone affectée.

De telles formes solides sont fabriquées selon des méthodes courantes de préparation pharmaceutique qui incluront un agent de désintégration comme l'amidon ; la carboxyméthylcellulose de sodium, un adhésif comme l'éthanol ; la glycérine, ou l'acide stéarique de magnésium ; le lactose pour obtenir une préparation pharmaceutique telle que des comprimés ou pour remplir des capsules de suppositoire.

La solution qui inclut un tel composé pourrait utiliser des tampons de nature phosphorique pour régler le pH à un niveau convenable, avant d'ajouter un adjuvant ; des émulsifiants pour produire une dose injectable ou une autre préparation liquide.

Dans la présente invention, un composé ou une composition pharmaceutique pourrait être fabriqué en mélangeant des sels d'acide synthétique avec différentes préparations de base pour former des pommades selon des méthodes connues de fabrication pharmaceutique.

Les compositions pharmaceutiques fabriquées selon cette invention pourraient être utilisées chez les mammifères pour produire l'effet de l'ingrédient principal. La posologie générale peut être ajoutée selon le degré des symptômes, et normalement une personne se verra administrer de 50 à 300 mg à chaque prise, trois fois par jour.

ACTIVITE PHARMACEUTIQUE
Les activités pharmaceutiques des composés de cette invention ont été mises en évidence par les expériences pharmaceutiques suivantes.

On a dissous 10 mM du composé 14 dans 10% d'alcool absolu, 10% de propylèneglycol et 2% d'HCl 1N.

Les dilutions ont été réalisées dans de l'eau distillée. On a dissous du glibenclamide dans 20% d'alcool absolu et 80% de diméthylsulfoxyde (DMSO). D'autres médicaments ont été dissous dans une solution physiologique.

Médicaments in vitro
On a dissous 10 mM-10-2 M du composé 14 dans 10% d'alcool absolu, 10% de propylèneglycol et 2% d'HCl 1N. Les dilutions ont été réalisées dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-3 M de glibenclamide dans 95% d'alcool absolu, et on a réalisé des dilutions à 10-4 M dans de l'eau distillée. On a dissous 10-2 M de 1H-[1, 2, 4]oxadiazolo[4, 3-a]quinoxalin-1 -one (ODQ) dans

100% de DMSO, on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'alcool absolu et on a réalisé des dilutions à 10-4 M dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-1 M d'IBMX dans 10% de DMSO, on a réalisé des dilutions à 10-2 M dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-2 M de Levcromakalim dans 50% de DMSO, on a réalisé des dilutions à 50% dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-1 M de 8-phénylthéophylline dans 80% d'alcool absolu, et on a réalisé des dilutions à 10-2 M dans 20% de NaOH 0,2 M, alors qu'on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-2 M XAC (congénère amine de xanthine) dans de l'eau redistillée et on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-2 M de 3,7-diméthyl-1propargylxanthine (DMPX) dans 100% d'alcool absolu, on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'eau redistillée et on a dissous 10-2 M de 8-(3chlorostyryl) caféine (CSC) dans du DMSO, on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'eau redistillée. On a dissous 10-2 M d'alloxazine dans 100% d'alcool absolu, on a réalisé des dilutions à 10-3 M dans de l'eau redistillée. D'autres médicaments ont été dissous dans de l'eau distillée.

La solution de Krebs (mM) comprend du NaCl 118, KC1 4,8, CaCl2 2,5, MgSO4 1,2, KH2PO4 1,2, NaHC03 24, et glucose 11.

Essai sur Bandelette de Corps Caverneux de Lapin.

Des lapins adultes, pesant 200-300 g, ont été anesthésiés par voie abdominale avec le pentobarbital de sodium. Le corps caverneux de lapin a été enlevé immédiatement et placé dans la solution de Krebs équilibrée avec un mélange de 95% d'O2 et 5% de CO2 à température ambiante (20-25 C). Après avoir soigneusement enlevé le tissu environnant, la trachée a été découpée en forme de spirale, chaque spire ayant des segments de 5 mm, les deux extrémités du corps caverneux ont été fixées avec des pinces en forme de

coeur de grenouille, une extrémité a été fixée au fond d'un bain de tissu de 20 ml constitué-de solution physiologique. La température a été maintenue à 37 C.

L'autre extrémité du corps caverneux a été reliée à un transducteur de force et on a enregistré les contractions isométriques et la fréquence de battement des oreillettes droites à l'aide de COULBOURN AT-HighSpeed Video Figure. Après que les échantillons aient reçu 200 mg de contractions et atteint l'équilibre, on a réalisé les expériences suivantes : (a) Courbes concentration cumulée/réponse
Après avoir atteint de nouveau l'équilibre pendant au moins 60 minutes, on a utilisé différentes concentrations du médicament. Pour l'évaluation de l'activité du corps caverneux de lapin, on a réalisé une administration cumulée du médicament 1 x 10-9#1 x 10-4 M, et on a obtenu la courbe dose cumulée/réponse. La courbe dose cumulée/réponse était le groupe témoin.

Les expériences suivantes ont été réalisées : (b) Pour examiner les éventuels mécanismes des effets de relaxation du corps caverneux, on a utilisé des préparations aortiques de rat et de lapin.

(i) On a également observé si les effets de relaxation du corps caverneux sont affectés par les canaux à K+.

Certains bloqueurs des canaux à K+, par ex. le chlorure de tétraéthylammonium (TEA) 10mM, le glibenclamide 1 M et la 4-aminopyridine (4-AP) 100 M ont été utilisés préalablement à l'addition du composé.

On a encore réalisé des administrations cumulées du médicament 1 x 10-8#1 x 10-4 M, et on a obtenu l'inhibition des bloqueurs des canaux à K+.

(ii) On a également observé si les effets de relaxation du corps caverneux sont affectés par les taux de GMP cyclique.

On a effectué un prétraitement avec 100 M d'ester méthylique de Nw-nitro-L-arginine (L-NAME), 10

M de bleu de méthylène et 1 M d'ODQ. On a ensuite effectué les administrations cumulées du: médicament 1 x1 0-9#1 x 1 0-4 M. On a obtenu des inhibitions par l'inhibiteur de NOS.

(iii) On a également observé si les effets de relaxation du corps caverneux sont affectés par l'inhibition de la PDE (phosphodiestérase).

On a ajouté 1 M de solution de phényléphrine pour induire une vasoconstriction et lorsque la vasoconstriction a atteint une stabilité, on a lavé le produit à plusieurs reprises avec la solution de Krebs et on a ajouté de nouveau 0,5 M de phényléphrine pour provoquer la contraction.

Lorsque la contraction a atteint son maximum, on a d'abord administré 1 M d'IBMX puis on a ajouté 0,01 M#0,1 M du composé 14, pour déterminer si la relaxation du corps caverneux par le composé 14 est affectée par IBMX.

Résultats Les mécanismes de relaxation du corps caverneux -
On a ajouté 10 M de solution de phényléphrine pour induire une vasoconstriction et lorsque la vasoconstriction a atteint une stabilité, on a réalisé l'administration cumulée de 1 x1 0-9#1 x 1 0-4 M de médicament. En maintenant la courbe dose cumulée de relaxation/réponse comme groupe témoin, on a réalisé les expériences suivantes : (i) La fig. 4 et le Tableau 3 montrent les courbes concentration cumulée/réponse du composé 14 contre celles de bloqueurs des canaux à K+, par exemple le TEA, le glibenclamide et la 4-AP, utilisés pour le prétraitement du corps caverneux de lapin. Cette étude montre que le composé 14 présente des activités d'activation de la relaxation du corps caverneux avec l'ouverture des canaux à K" et d'inhibition de la dégradation de cGMP.

(ii) L'activité d'inhibition de la PDE (phosphodiestérase) a affecté l'activité de relaxation du corps caverneux du composé 14.

On a ajouté une solution de phényléphrine 10 M pour induire une vasoconstriction du corps caverneux de l'endothélium intact. Lorsque la vasoconstriction, a atteint une stabilité, les vasorelaxations dépendantes de la concentration ont été produites par le composé 14 (0,1, 0,5 et 1 , 00 M). La courbe dose cumulée de relaxation-réponse était le groupe témoin. Le corps caverneux de l'endothélium intact a été lavé à plusieurs reprises avec une solution de Krebs pour déplacer la phényléphrine, jusqu'à ce qu'une stabilité soit atteinte après 60 minutes, puis on a réalisé les expériences suivantes : On a ajouté une solution de phényléphrine 10 M au bain de tissu pour induire la vasoconstriction du corps caverneux de l'endothélium intact. Lorsque la vasoconstriction a atteint une stabilité, on a lavé la phényléphrine à plusieurs reprises avec une solution de Krebs. Ensuite on a administré la phényléphrine 10 M.

Lorsque la vasoconstriction du corps caverneux a atteint une stabilité, on a d'abord administré l'IBMX (0,5 M), puis on a ajouté le composé 14 (0,1,0,5 et 1,0 M). La fig. 5 montre les courbes concentration cumulée de relaxation-réponse et que l'IBMX a un effet additif sur le composé 14.

Dosage de la phosphodiestérase-5
L'activité de la phosphodiestérase-5 (PDE5) a été déterminée comme décrit par Seiler S. et al. où [3H]cGMP est utilisée comme substrat des homogénats de plaquettes humaines pour déterminer l'activité de la PDE, en utilisant le kit de dosage par scintillation de proximité (SPA). Le Tableau 2 montre l'effet inhibiteur de la phosphodiestérase dans les plaquettes.

Mesure de la PIC

Des lapins blancs mâles néo-zélandais pesant 2-3 kg ont été utilisés pour la mesure. Après sédation par une injection intramusculaire de 10 mg de kétamine, les lapins ont été anesthésiés par voie intrapéritonéale. Les animaux respiraient spontanément.

Les lapins ont alors été placés sur le dos, et la température corporelle a été maintenue à 37 C en utilisant un chauffe-corps et une lampe. L'artère fémorale sur un côté a été canulée pour suivre en continu la tension artérielle systémique. On a déterminé la tension artérielle systémique moyenne et la fréquence cardiaque grâce à un capteur de pression Gould DI 23. Dans des conditions stériles, on a incisé la peau sous le pénis et le corps caverneux a été ouvert à la racine du pénis. Une aiguille de calibre 25 a été insérée dans le corps caverneux pour l'enregistrement de la pression (Gould, RS-3400).

L'aiguille a été reliée à un robinet à trois voies, permettant ainsi l'injection des médicaments par voie intracaverneuse. Le tube a été rempli de solution physiologique héparinée (50 UI/2-3h) pour empêcher la coagulation. Le Tableau 4 montre l'augmentation de la pression intracaverneuse induite par les composés de l'invention.

Exemple 1 Synthèse du Composé D
On a dissous 0,2 mole de 3-isobutyl-1méthylxanthine (IBMX) dans une solution de 0,4 mole de 2-bromoéthylamine, et on a agité la solution sur plaque chauffante à 100 C jusqu'à fusion totale du solide. Ensuite on a ajouté 125 ml de NaOH 1,6N et la réaction a été effectuée pendant 3-5 heures à 150 C pour terminer la réaction. Ensuite, le produit a été concentré sous pression réduite pour obtenir des cristaux blancs grossiers qui ont été recristallisés dans le méthanol pour obtenir les cristaux blancs purs du composé D (N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1méthylxanthine).

Exemple 2 : Synthèse des Composés 39-41
On a fait réagir une mole diacide parahydroxysulfonique avec 1 mole d'acide chlorosulfonique pendant 30 minutes, puis le liquide a été versé dans de l'eau glacée. Le précipité de chlorure de parahydroxysulfonyle a été récupéré et séché sous pression réduite.

Avec la. quantité appropriée de méthanol pour dissoudre le précipité, on a ajouté 1 mole de méthylpipérazine et on a laissé réagir pendant 2 heures. Le produit a été dissous dans 4 moles de formol à 30%, puis la même quantité molaire du composé D (N7bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine) a été ajoutée.

Ensuite une solution de 1% d'acide acétique-méthanol a été ajoutée pour obtenir le composé 39 après 24 heures de réaction. Le produit a été purifié sur une colonne de gel de silice et dissous dans du méthanol, on a ajouté 4% de NaOH et 1 mole de bromure d'éthyle pour obtenir le composé 40.

En remplaçant le bromure d'éthyle par le bromure de propyle, on a obtenu le composé 41.

Exemple 3 : Synthèse des Composés 42-44
En utilisant le procédé de l'Exemple 2, on a obtenu les composés 42,43 ou 44 lorsque la théophylline a été remplacée par l'IBMX, respectivement.

Exemple 4 : Synthèse des Composés 33-35
On a fait réagir l'acide parahydroxybenzoïque avec de l'éthanol pour obtenir l'ester éthylique d'acide para-hydroxybenzoïque par l'intermédiaire de SOC12. Le produit a été ajouté à 33% de NH3(aq) , chauffé au reflux pendant 1 heure et recristallisé dans le méthanol pour obtenir l'amide para-hydroxybenzoïque. On a ajouté du formol, à une concentration molaire 4 fois plus importante que celle de la solution de para-hydroxybenzoïque-amine, dans du méthanol, puis on a effectué la réaction de Mannich

avec la N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine et des traces d'acide acétique. Le produit du composé 33 a été obtenu lequel a été purifié par chromatographie sur gel de silice.

La colonne a été éluée avec de l'éthyle et du méthanol, on a concentré la solution sous pression réduite, recristallisé dans le méthanol pour obtenir le composé 33. Le composé 33 (1 mole) a été dissous dans 100 ml de méthanol, on l'a fait réagir avec 4% de NaOH et 1 mole de bromure d'éthyle, pour obtenir le composé 34.

De la même façon, le composé 35 a été obtenu en remplaçant le bromure d'éthyle par le bromure de propyle.

Exemple 5 : Synthèse des Composés 36-38
En suivant le procédé décrit dans l'Exemple 4 et en remplaçant la théophylline par l'IBMX, respectivement, on a obtenu les composés 36,37 et 38.

Exemple 6 : Synthèse du Composé A
On a dissous 0,2 mole de 3-isobutyl-1méthylxanthine (IBMX) dans du méthanol et on l'a mélangé avec une solution de 0,4 mole de 2bromoéthylamine. La solution a ensuite été agitée à 100 C sur une plaque chauffante jusqu'à fusion totale du solide. On a ensuite ajouté 125 ml de NaOH 1,6 N pour réagir pendant 3-5 heures à 150 C. Le mélange réactionnel a été concentré sous pression réduite pour obtenir des cristaux grossiers blancs qui ont été recristallisés dans le méthanol pour obtenir les cristaux blancs du composé A (N7-bromoéthyl-3-isobutyl- 1-méthylxanthine).

Exemple 7 : Synthèse du Composé 21
On a dissous dans le méthanol 2 moles de chlorure de benzènesulfonyle et 2 moles de pipérazine et on a chauffé au reflux pendant 1 heure. On a concentré la solution sous pression réduite,

recristallisé dans le méthanol pour obtenir la benzènesulfonylpipérazine. On a dissous @1 mole du produit dans du méthanol, on a ajouté 1 mole de composé A (N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine) et on a chauffé au reflux pendant 8 heures. On a concentré la solution sous pression réduite, purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice, élué par du méthanol et de l'acétate d'éthyle, concentré sous pression réduite, recristallisé dans le méthanol pour obtenir le composé 21.

Exemple 8 : Synthèse des Composés 22-23
En suivant le procédé de l'Exemple 7 et en remplaçant le chlorure de p-toluènesulfonyle ou le chlorure de o-toluènesulfonyle avec le chlorure de benzènesulfonyle, on a obtenu les composés 22 et 23.

Exemple 9 : Synthèse des Composés 24-26
En suivant le procédé des Exemples 6 et 7 et en remplaçant la théophylline par l'IBMX, on a obtenu les composés 24,25 et 26.

Exemple 10 : Synthèse des Composés 9 et 10 On a dissous dans du méthanol 1 mole de théophylline et on a ajouté 3 moles de 1,2-dibromoéthane avec 2 moles de NaOH pour neutraliser et on a chauffé le mélange au reflux pendant 5 heures. On a ensuite concentré sous pression réduite et purifié par chromatographie, élué avec du méthanol et de l'acétate d'éthyle, puis concentré sous pression réduite pour obtenir le composé A. On a dissous le composé A dans du méthanol, on a ajouté 0,8 mole de pipérazine et on a chauffé le mélange au reflux, puis concentré sous pression réduite Le produit B a été obtenu.

Le composé B a été dissous dans du méthanol, puis on a ajouté du chlorure de 2-Furoyle ou du 4-chloronitrobenzène, on a chauffé la réaction au reflux, puis concentré sous pression réduite, et

recristallisé dans le méthanol pour obtenir le composé 9 ou 10.

Exemple 11 : Synthèse des Composés 1-8
Le composé A a été dissous dans du méthanol. Puis on a ajouté la 1-phénylpipérazine, la 1- (2-pyrimidyl)pipérazine, la 1- (2-pyridyl) pipérazine, la N-benzylpipérazine, la 1-(2-chlorophényl)pipérazine, la 1-(o-méthoxyphényl)pipérazine, la 1-(mchlorophényl)pipérazine, ou la 1-(4- chlorophényl) pipé r a z ine, pour chauffer au reflux pour obtenir les composés 1-8.

Exemple 12 : Synthèse des Composés 11-18
En suivant le procédé de l'Exemple 11 et en remplaçant la théophylline par l'IBMX, on a obtenu les composés 11-18.

Exemple 13 : Synthèse du Composé 45
On a ajouté dans du méthanol une quantité molaire égale de chlorure de 4-chlorobenzènesulfonyle et de -méthylpipérazine et on a chauffé au reflux pendant 5 heures. Ce produit et la N7-bromoéthyl-3isobutyl-1-méthylxanthine ont été dissous dans du méthanol et on a chauffé au reflux pendant une heure pour obtenir le composé 45.

Exemple 14 : Synthèse du Composé 46
En suivant le procédé de l'Exemple 13, en remplaçant la théophylline par l'IBMX, on a obtenu le composé 46.

Tableau 1 : Les données physico-chimiques des xanthines
N7-substituées

<tb>
<tb> Composé
<tb> SM(Scan <SEP> RMN-'H <SEP> (CDC13)
<tb> FA3+)
<tb> Composé <SEP> 4
<tb>

#: 0,94-0, 98 (d,6H,2xCH3) , 2,24-2,38(m,1H,CH),

<tb>
<tb> 2, <SEP> 70 <SEP> (t,4H,2xCH2), <SEP> 2, <SEP> 85 <SEP> (t, <SEP> 2H, <SEP> NCH2),
<tb> 444,88 <SEP> 3,04(t,4H,2xCH), <SEP> 3,42 <SEP> (s,3H,NCH3),
<tb> 3,93-3,96(d,2H,CH), <SEP> 4,45 <SEP> (t,2H,NCH2),
<tb> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,27-7,36(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,69(s,1H,imidazole-H)
<tb> Composé <SEP> 14
<tb>

:2,70(t,4H,2xCH2), 2, 5 (t, 2H,NCH2) , 3, 04 (t, 4H, 2xCH) , 3, 42 (s, 3H,NCH3) , 402,88 3, 60 (s, 3H, NCH;) , 4, 45 (t, 2H, NCH2) ,

<tb>
<tb> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,27-7,36(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,69(s,1H,imidazole-H)
<tb> Composé <SEP> 17
<tb>

:2,75(t,4H,2xCHz) 2,89(t,2H,NCHZ), 3,09(t,4H,2xCH,), 3, 42 (s, 3H, NCH3) , 398,46 3, 61 (s, 3H, NCH3) 3, 86 (s, 3H,OCH3) ,

<tb>
<tb> 4,49(t,2H,NCH2), <SEP> 6,88-7,06(m,4H,4xAr-H),
<tb> 7,72(s,1H,imidazole-H)
<tb> Composé <SEP> 22
<tb>

:0,94-0,98(d,6H,2xCH3) 1,98(m,3H,Ar-CH3}, 2,24-2,38{m,1H,CH), 2,70(t,4H,2xCHZ), 488,38 2,85(t,2H,NCH2) , 3,04(t,4H,2xCHZ}, 3, 42 (s, 3H,NCH3) , 3, 93-3, 96 (d, 2H,CHz) ,

<tb>
<tb> 4,45(t,2H,NCH), <SEP> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,27-7,36(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,69(s,1H,imidazole-H),
<tb>
Tableau 1 (suite)

Les données physico-chimiques des xanthines N7- substituées

<tb>
<tb> Composé <SEP> 25
<tb>

:1,98(m,3H,Ar-CH;) 2,70(t,4H,2xCHz), 2,85 (t, 2H, NC!iz) , 3, 04 (t, 4i, 2xCHz) , 446,38 3,42(s,3H,NCH:), 3,60(s,3H,NCH3),

<tb>
<tb> 4,45(t,2H,NCH2), <SEP> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,27-7,36(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,69 <SEP> (s,1H,imidazole-H),
<tb> Composé <SEP> 34
<tb>

:0,94-0,98(d,6H,2xCH3), 1,4(t,3H,CH,), 2,24-2,38(m,1H,CH) , 2, 28 (2, 2H, CH) , 2, 8 5 (t, 2H, NCH2) 3,42(s,3H,NCH3), 392,14 3,93-3,96(d,2H,CH), 4,13(t,3H,CH,),

<tb>
<tb> 4,45 <SEP> (t,2H,NCH2), <SEP> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,27-7,36(m,1H,Ar-H), <SEP> 7,69(s,1H,imidazole-H),
<tb>

7, 98 (b, 1H,NH) , 8, 2 (b, 2H,NH) Composé 38 :1 , 4 (t, 2H,CHz) , 2, 2 (t, 2H,CHz) ,

4, 13 (t, 3H, CH3) 4,45(t,2H,NCHz),

<tb>
<tb> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,27-7,36(m,lH,Ar-H),
<tb> 7,69(s,lH,imidazole-H), <SEP> 7,98 <SEP> (b,1H,NH)
<tb> 8,2 <SEP> (b,2H,NH2)
<tb> Composé <SEP> 40
<tb>

#: 0,94-0, 98 (d,6H,2xCH3) , 1,4(t,2H,CHz), 1,98(m,3H,Ar-CH3), 2,24-2,38(m,1H,CH), 2, 2 8 (s, 2H, CH2) , 2,70(t,4H,2xCHz),

<tb>
<tb> 511,14 <SEP> 2,85(t,2H,NCH2) <SEP> , <SEP> 3,04 <SEP> (t,4H,2xCH2),
<tb> 3,42(s,3H,NCH3) <SEP> , <SEP> 3,93-3,96 <SEP> (d,2H,CH2)
<tb> 4,13(t,3H,CH3), <SEP> 4,45 <SEP> (t,2H,NCH2),
<tb> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H), <SEP> 7,27-7,36 <SEP> (m, <SEP> 1H,Ar-H),
<tb> 7,69(s,lH,imidazole-H), <SEP> 7,98(b,1H,NH)
<tb>

Tableau 1 (suite) Les données physico-chimiques des xanthines N7- substituées

<tb>
<tb> Composé
<tb> SM(Scan <SEP> RMN-'H <SEP> (CDC13)
<tb> FAB+)
<tb> Composé <SEP> 44
<tb>

#: 1 4 (t, 2H, CH2) 1,$(t,2H,CHz), 1 ,98(m,3H,Ar-CH3) , 2,28(s,2H,CHz),

3, 04 (t, 4H, 2xCHz) , 3, 42 (s, 3H, NCH3) ,

<tb>
<tb> 3, <SEP> 60 <SEP> (s, <SEP> 3H, <SEP> NCH3) <SEP> , <SEP> 4, <SEP> 1 <SEP> 3 <SEP> (t, <SEP> 3H, <SEP> CH3),
<tb> 4,45(t,2H,NCH2), <SEP> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,27-7,36(m,1H,Ar-H), <SEP> 7,69(s,1H,imidazole-H)
<tb> 7,98(b,1H,NH),
<tb> Composé <SEP> 45
<tb> #:0,94-0,98 <SEP> (d,6H,2xCH3), <SEP> 1,98(m,3H,Ar-CH3),
<tb> 2,24-2,38(m,1H,CH), <SEP> 2,28 <SEP> (s,2H,CH2),
<tb>

2,70(t,4H,2xCHz), 2,85(t,2H,NCHz),

<tb>
<tb> 436,14 <SEP> 3,04 <SEP> (t,4H,2xCH2), <SEP> 3, <SEP> 42 <SEP> (s, <SEP> 3H, <SEP> NCH3) <SEP> , <SEP>
<tb> 3,93-3,96(d,2H,CH,), <SEP> 4,13 <SEP> (t,3H,CH3),
<tb> 4,45 <SEP> (t,2H,NCH2), <SEP> 6,97-7,01(m,2H,2xAr-H),
<tb> 7,27-7,36(m,1H,Ar-H), <SEP> 7,69(s,lH,imidazole-H)
<tb> 7, <SEP> 98 <SEP> (b, <SEP> 1 <SEP> H, <SEP> NH) <SEP> , <SEP>
<tb>

Tableau 2 : CI50 Relaxation du Corps Caverneux de Lapin

<tb>
<tb> Composé <SEP> CI50 <SEP> (nM) <SEP> PDE5 <SEP> CI50 <SEP> Relaxation <SEP> du <SEP> Corps
<tb> ~~~~~~~ <SEP> (plaquettes <SEP> humaines) <SEP> Caverneux <SEP> de <SEP> Lapin
<tb> 4 <SEP> 3,90,1 <SEP> 7,160,09
<tb> 7 <SEP> 4,20,2 <SEP> 7,130,06
<tb> 14 <SEP> 3,80,2 <SEP> 7,840,08
<tb> 17 <SEP> 6,20,2 <SEP> 7,640,07
<tb> 23 <SEP> 5,20,1 <SEP> 7,380,04
<tb> 26 <SEP> 4,80,2 <SEP> 7,420,09
<tb> 34 <SEP> 0,40,2 <SEP> 8,130,05
<tb> 37 <SEP> 0,30,1 <SEP> 8,030,04
<tb> 35 <SEP> 0,40,1 <SEP> 8,250,06
<tb> 38 <SEP> 0,60,2 <SEP> 8,160,07
<tb> 39 <SEP> 0,60,2 <SEP> 8,160,07
<tb> 42 <SEP> 0,60,2 <SEP> 8,160,07
<tb> 40 <SEP> 0,60,1 <SEP> 8,270,04
<tb> 43 <SEP> 0,70,2 <SEP> 8,150,06
<tb> 41 <SEP> 0,80,2 <SEP> 8,300,07
<tb> 44 <SEP> 0,90,1 <SEP> 8,250,08
<tb> 45 <SEP> 0,60,2 <SEP> 7,920,07
<tb> 46 <SEP> 5,20,1 <SEP> 7,960,03
<tb>

Tableau 3 CI50 Relaxation du Corps Caverneux de Lapin sur les
Bloqueurs des Canaux à K'

<tb>
<tb> Prétraitement <SEP> par <SEP> Dose-Log <SEP> CE50
<tb> médicament
<tb> Témoin <SEP> 7,190,09
<tb> TEA <SEP> 10 <SEP> mM <SEP> 5,0370,05
<tb> Glibenclamide <SEP> 1 <SEP> #M <SEP> 6,570,15
<tb> 4-AP <SEP> 100 <SEP> CM <SEP> 5,830,17
<tb> L-NAME <SEP> 100 <SEP> CM <SEP> 6,510,08
<tb> Bleu <SEP> de <SEP> méthylène <SEP> 10 <SEP> #M <SEP> 6,510,06
<tb> ODQ <SEP> 1 <SEP> CM <SEP> 6,790,12
<tb>

Tableau 4
Pic d'augmentation de la pression intracaverneuse (PIC) et durée de réponse de tumescence vis-à-vis des composés à 2 mg/kg chez le lapin

<tb>
<tb> Composé <SEP> # <SEP> #PIC <SEP> (mmHg) <SEP> Durée <SEP> (min.)
<tb> Composé <SEP> 10 <SEP> 121,6 <SEP> 132,1
<tb> Composé <SEP> 4 <SEP> 142,1 <SEP> 141,1
<tb> Composé <SEP> 9 <SEP> 251,3 <SEP> 161,2
<tb> Composé <SEP> 12 <SEP> 231,5 <SEP> 151,3
<tb> Composé <SEP> 18 <SEP> 261,4 <SEP> 1 <SEP> 81 <SEP> , <SEP>
<tb>

Tableau 5. DERIVES N-3,7 SUBSTITUÉS DE LA 1-MÉTHYLXANTHINE DE
FORMULES I ET II.

Composé No R1 R2 R3 R4 Rs n 1 CH3 / H H o 2 -CH3 N 0 N- 3 -CH3 N 0 4 -CH3 / \ -C1 H o 9 en 2 5 -CH3 -ci H 0 === en 3 6 -CH3 - -CI H 0 ###\ \~/ Y### en 4 -CH3 --cH2\:J 8 -CH3 0 -cl3 11 0.

-C 1 /

Composé No. R R, R3 R4 Rs 9 -CH3 / \ -N02 en H -CH, -0- - 2 10 -CH3 - CH30- H \ / en 2 / 1 1 -CHZCH ( CH3 ) Z / H H 1 2 -CHZCH ( CH3 ) z N N- 13 -CHzCH ( CH3 ) Z N 14 -CH2CH(CH3)2 # a ZZ -CI H r en 2 15 -CH2CH(CH3)2 # a ZZ -CI H \ / en 5 1 6 -CH2CH ( CH3 ) i / \ -C1 H en 4

Composé No Ri R2 R3 R4 R5 n 17 -cxZcH ( cH3 ) z --CH2 / H -CH,CH ( CH3 ) -chez 18 -CH2CH(CH3)2 0 - - - 0 C 19 -cHzcH ( cH3 ) z - -NOZ H o en 4 2 -CHzCH ( CH3 ) z ~ ~ CH - H o 1 en 2 21 -CH3 O2 / \ o ci; -S 2kJ 22 -CH3 - CH30- 0 S02 en 4 23 =rCH3 /r~ \ IZ CH3O- #cr\#// -CH3 ""2\==/ en 2

Composé No. R, R, I R3 R4 R5 24 -CH2CH(CH3)2 - - 02 25 -CHZCH ( CH3 ) # ,\-1- -CH3 -S02 "==/ en 4 26 -CH2CH(CH3)2 2 -CH3 S02 en

Composé No R R2 R R4 R5 n 3 27 -CH3 / \ -OH H 0 #r'H## ---CH2 / en 2 28 -CH3 / # c2h5 - h -CH3 "2 \ / en 2 29 -CH3 / C3Ho~ H 2 -CH3 2 en 2 30 -CH3~ HO- -CONH2 0 en 6 en 3 -chj-Q en6 31 -CH3 - C2HsO- -CONH2 1 C H en 6 en 3 \#/ en6 3 2 -CH3 / C3H,o- -CONH2 2 -CH,) 79 en 6 en 3

Composé No R R R R R5 n 33 -CH3 -CH3 -0H n a ----CH 2 en 4 en 2 "J 34 -CH3 -CH3 C2H50- ---(-,H2 en 4 en 2 , 2 3 5 -CH3 -CH3 C3H70- 1\ 2 -CH2 en en SD2 --N 36 -CH2CH(CH)) -OH H -CH 2 en 6 3 7 -CHZCH ( CH3 ) z ~ C H 0- H -CH 2 en 6

Composé No R2 R R R n 38 -CHZCH ( CH3 ) C3H70- H --CH 2 en 6 39 -CHzCH ( CH3 ) -OH -CONH2 en 0 --CH 2 en 6 3 40 -CHZCH (CH3 ) Z C2H50- -CONHZ en 1 --CH 2 en 6 3 41 -cHZcH ( cH3 ) C3H70- -CONH2 en --CH 2 en 6 3 42 -CH2CH(CH)) 2 y -CH3 -OH n 0 / \ en en 2 2 --CH 2

Composé R R j R n No 43 -CH2CH (CH3) ; - ce3 CHsO-/'i 2-0 'DrN N- --cH2 en 4 en 2, 2 U ~44 -CH2CH(CH3)2 ~T -CH3 C3H7O- T 2 -H~/~\ en en -s:>-NJ

<tb>
<tb> Composé <SEP> ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ <SEP> IUPAC
<tb>

1 7-{2-[4-phënylpipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 2 7-{2-[4-(2-Pyrimidyl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 3 ï-{2-[4-(2-Pyridyl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 4 ï-{2-[4-(2-chlorophényl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 5 7-2-[4-(3-chlorophé--iyl)pipérazinyl]éthyll-1,3-diméthylxanthine 6 7-{2-[4-(4-chlorophényl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 7 7-{2-[4-benzylpipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 8 7-{2-[4-(2-furoyl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 9 î-{2-[4-(nitrobenzène)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 10 7-{2-[4-(o-Mêthoxyphenyl)pipérazinyl]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 11 7-{2-[4-phénylpipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 12 7-{2-[4-(2-Pyrimidyl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 13 ï-{2-[4-(2-Pyridyl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 14 7-{2-[4-(2-chlorophényl)pipérazinyl]ethyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 15 7-{2-[4-(3-chlorophényl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthir.e 16 7-{2-[4-(4-chlorophényl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 17 7-{2-[4-benzylpipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 18 7-{2-[4-(2-furoyl)pipérazinyl]ethyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 19 7-{2-[4-(nitrobenzène)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 20 7-{2-[4-(o-Mëthoxyphenyl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 21 7-{2-[4-(phénylsulfényl)pipérazinyl]ethyl}-1,3-diméthylxanthine 22 7-(2-{4-[(4-méthylphényl)sulfényl]pipérazinyl}éthyl)-1,3-diméthylxanthine 23 7-(2-{4-[(2-méthylphényl)sulfényl]pipêrazinyl}éthyl)-1,3-diméthylxanthine 24 7-{2-(4-(phénylsulfényl)pipérazinyl]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 25 7-(2-{4-[(4-méthylphënyl)sulfényl]pipêrazinyl}êthyl)-3-isobutyl-1-mêthylxanthine 26 7-(2-{4-[(2-méthylphenyl)sulfényl]pipérazinyl}éthyl)-3-isobutyl-l-méthylxanthine 27 7-{2-[(2-hydroxybenzyl)amino]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 28 ï-{2-[(2-éthoxybenzyl)amino]éthyl}-1,3-diméthylxanthine 29 7-{2-[(2-propoxybenzyl)amino]éthyl}-1,3-dimëthylxanthine 3- ( { [ 2- ( 1 , 3-diméthyl-2 , 6-dioxo-1 ,2,3 , 6-tétrahydro-7tf-purin-7-yl) éthyl] amino}méthyl)

<tb>
<tb> 30
<tb> hydroxybenzamide
<tb> 3-({[2-(1,3-diméthyl-2,6-dioxo-1,2,3,6-tétrahydro-7H-purin-7-yl)éthyl]amino}méthyl)
<tb> 31
<tb> ethoxybenzamide
<tb>

32 3-({[2-(1,3-diméthyl-2,6-dioxo-1,2,3,6-tétrahydro-7H-purm-7-yl)éthyl]amino}méthyl)

<tb>
<tb> propoxybenzamide
<tb>

7-[2-({2-hydroxy-5-[(4-méthylpiperazin-1-yl)sulfényl]benzyl}ammo)ethyl]

<tb>
<tb> 33
<tb> diméthylxanthine
<tb>

7-[2-({5-[(4-méthylpiperazin-1-yl)sulfényl]-2-éthoxybenzyi}amino)éthyl]

<tb>
<tb> 34
<tb> diméthylxanthine
<tb>

7- [2- ({5- [ {4-méthylpiperazin-1 -yl) sulfényl] -2-propoxybenzyl}amino) éthyl]

<tb>
<tb> 35
<tb> diméthylxanthine
<tb>

36 7-{2-[(2-hydroxybenzyl)amino]éthyl}-3-isobutyl-1-méthylxanthine 37 7-{2- [ (2-éthoxybenzyl) amino] éthyl} -3-isobutyl-1 -méthylxanthine 38 7-{2-[(2-propoxybenzyl)amino]êthyl}-3-isobutyl-l-méthylxanthine 39 4-hydroxy-3-({[2-(3-isobutyl-1-methyl-2,6-dioxo-1,2,3,6-tétrâhydro-7H-purin-7-yl) éthyl]amino}méthyl)benzamide 4-éthoxy-3-({[2-(3-isobutyl-1-méthyl-2,6-dioxo-1,2,3,6-tétrahydro-7H-purin-7-yl)

éthyl]amino}méthyl)benzamide 4-propoxy-3-({[2-(3-isobutyl-1-méthyl-2,6-dioxo-1,2,3,6-tétrahydro-7H-purin-7-yl)

éthylJamino}methyl)benzamide 7-[2-({2-hydroxy-5-[(4-méthylpiperazin-1-yl)sulfényl]benzyl}amino)éthyl]-3-isobutyl-1-

<tb>
<tb> 42
<tb> méthylxanthine
<tb>

7-[2-({5-[(4-méthylpiperazin-1-yl)sulfényl]-2-éthoxybenzyl}amino)éthyl]-3-isobutyl-1-

<tb>
<tb> 43
<tb> méthylxanthine
<tb>

7-[2-({5-[(4-méthylpipérazin-1-yl)sulfényl]-2-propoxybenzyl}amino)éthyl]-3-isobutyl-1-

<tb>
<tb> 44
<tb> méthylxanthine
<tb>

Claims

R4 est un élément choisi dans le groupe de H, -(CH2)nCH3, X, -NH2, -OH, -O (CH2)nCH3 et -NO2 ; R, est un élément choisi dans le groupe constitué de H, -CONH2,

dans laquelle R, est un groupe alkyle en C1-C4, linéaire ou branché, en particulier méthyle, éthyle, propyle, butyle, iso-propyle et iso-butyle; R2 est un élément choisi dans le groupe constitué de

REVENDICATIONS 1. Composés de formule I,

<Desc/Clms Page number 40>

R3 est un élément choisi dans le groupe constitué d'halogène, de groupement hydroxy, de chaîne linéaire saturée de 1 à 3 atomes de carbone, ou ayant un groupe de substitution d'un H ; et n est 0,1, 2 ou 3.
2. Composés de formule II,

dans laquelle R, est un groupe alkyle en C,-C4, linéaire ou branché, en particulier méthyle, éthyle, propyle, butyle, iso-propyle et iso-butyle; R2 est un élément choisi dans le groupe constitué de

<Desc/Clms Page number 41>

R3 est un élément choisi dans le groupe constitué d'halogène, de groupement hydroxy, de chaîne linéaire saturée de 1 à 3 atomes de carbone ou un groupe substituant un H ; n est 0, 1, 2 ou 3.

R4 est un élément choisi dans le groupe de H, - (CH2)nCH3, X, -NH2, -OH, -O (CH2)nCH3 et -N02 ; R5 est un élément choisi dans le groupe constitué de H,
3. Procédé de préparation des composés N-3,7 substitués de 1-méthylxanthine de formule II selon la revendication 2, comprenant les différentes étapes : # de la dissolution de dérivés N-3 de la 1- méthylxanthine dans une solution d'alkyle

<Desc/Clms Page number 42>

R2-méthyle selon la formule II, pour réagir après dissolution du produit dans le formol, puis, # après mélange de la solution méthanol- acide acétique addition du composé D.

substitué par un halogène, par exemple une solution de 2-bromoéthyle; d'agitation sur une plaque chauffante jusqu'à fusion totale du solide ; puis# d'addition de NaOH à 150 C pour laisser réagir pendant une nuit ; # de concentration sous pression réduite pour obtenir des cristaux blancs grossiers ; # de recristallisation du produit dans un alcool, par exemple le méthanol pour obtenir les cristaux blancs purs du composé D, et d'autre part, # de mise en réaction de l'acide para- hydroxyl sulfonique avec un acide chloro- sulfonique, puis de versement du liquide sur de l'eau glacée # de récupération et de séchage du précipité de chlorure de parahydrosulfonyle sous pression réduite, avec une quantité adéquate de méthanol, pour réduire le précipité, puis # d'addition de R2-alkyle, par exemple de
4. Procédé de préparation des composés N-3,7 substitués, à savoir les composés 39 et 40, de 1méthylxanthine de formule II selon la revendication 2, comprenant les différentes étapes de : # Dissolution de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) dans une solution d'éthyle d'halogène, par exemple une solution de 2-bromoéthyle, et agitation sur plaque chauffante jusqu'à fusion totale du solide,

<Desc/Clms Page number 43>

# Addition de NaOH pour réagir à 150 C et sous pression réduite pour concentrer et obtenir des cristaux grossiers blancs, puis # Recristallisation du produit dans du méthanol pour obtenir les cristaux blancs purs du composé D, (la N7-bromoéthyle-3-isobutyl-1-méthylxanthine), D'autre part, # Réaction de l'acide para-hydroxysulfonique avec de l'acide chlorosulfonique, puis versement du liquide dans de l'eau glacée, # Récupération et séchage du précipité de chlorure de para-hydroxysulfonyle sous pression réduite, avec une quantité adéquate de méthanol pour dissoudre le précipité, puis # Addition de méthylpipérazine pour réagir après dissolution du produit dans du formol, ensuite, # après mélange avec une solution d'acide acétique- méthanol, *Addition d'une même quantité molaire de composé D (N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine), pour obtenir le composé 39, après une réaction de 24 heures, # Dissolution dans du méthanol en vue d'une purification, puis # Addition de NaOH pour réagir avec du bromure d'éthyle pour obtenir le composé 40.
5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le bromure d'éthyle est remplacé par le bromure de propyle pour obtenir le composé 41.
6. Procédé selon la revendication 3, pour obtenir les composés 33 et 34, caractérisé par : # la Réaction d'acide para-hydroxybenzoïque avec l'éthanol sous SOClz pour obtenir l'ester éthylique de l'acide para-hydroxybenzoïque, # l'Addition de NH3(aq) pour réagir pour obtenir l'amide de para-hydroxybenzoïque, puis

<Desc/Clms Page number 44>

# l'Addition d'une quantité molaire égale de formol, de traces d'acide acétique et d'une quantité molaire égale de N7-bromoéthyl-3-isobutyl-1-méthylxanthine pour réaliser la réaction de Mannich pour obtenir le composé 33, # Dissolution dans du méthanol en vue d'une purification, # Addition de NaOH pour réagir avec le bromure d'éthyle pour arriver au composé 34.
7. Procédé pour préparer les composés de formule I selon la revendication 1 qui comprend les différentes étapes suivantes: # la dissolution de dérivés N-7 substitués de 1-méthylxanthine dans du méthanol et l'agitation avec une solution de 2- bromoéthyle, sur une plaque chauffante, jusqu'à ce que la réaction avec du NaOH, soit terminée; # la recristallisation avec du méthanol, pour obtenir un composé A de cristaux blancs, et # après chauffage au reflux du composé A avec du méthanol, l'addition de dérivés de pipérazidine.
8. Procédé de préparation des composés 1-8 de formule I selon la revendication 1, comprenant les différentes étapes de ; # Dissolution d'IBMX dans du méthanol et agitation avec une solution de 2-bromoéthyle sur plaque chauffante jusqu'à réaction totale avec du NaOH, # Recristallisation dans du méthanol pour obtenir les cristaux blancs du composé A (N7-bromoéthyl-3- isobutyl-1-méthylxanthine), # Chauffage au reflux du composé A avec du méthanol et addition de 1-phénylpipérazine, 1-(2-pyrimidyl)- pipérazine, 1-(2-pyridyl)pipérazine, 1-(m-chloro- phényl)pipérazine, 1-(2-chlorophényl)pipérazine, 1-

<Desc/Clms Page number 45>

(4-chlorophényl)pipérazine, 1-(o-méthoxyphényl)- pipérazine, N-benzylpipérazine pour obtenir les composés 1-8, respectivement.
9. Procédé selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que l'IBMX est remplacée par la théophylline, pour obtenir les composés 11-18, respectivement.
10. Composition pharmaceutique comprenant un composé de formule I selon la revendication 1 conjointement avec différents diluants et excipients pharmaceutiquement acceptables.
11. Utilisation d'une composition pharmaceutique selon la revendication 10 pour la préparation d'un médicament actif sur la relaxation du corps caverneux.
12. Composition pharmaceutique comprenant un composé de formule II selon la revendication 2 conjointement avec différents diluants et excipients pharmaceutiquement acceptables.
13. Utilisation d'une composition pharmaceutique selon la revendication 12pour la préparation d'un médicament actif sur la relaxation du corps caverneux.