FR2739858A1 - Derives de n-sulfonyl- et n-sulfamoylpeptidylprolinamide, leur preparation et leur application en therapeutique - Google Patents

Abstract

Composés de formule (I) (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle R représente un groupe (C1 -C4 ) alkyle, phényl (C1 -C4 ) alkyle, -NR1 R2 , (R1 atome d'hydrogène, groupe (C1 -C4 ) alkyle ou groupe phényl (C1 -C4 ) alkyle et R2 groupe (C1 -C4 ) alkyle ou groupe phényl (C1 -C4 ) alkyle), pyrrolidin-1-yle, pipéridin-1-yle, (CF DESSIN DANS BOPI) [avec Z atome d'oxygène, de soufre, groupe -NR6 (R6 atome d'hydrogène, groupe (C1 -C4 ) alkyle), groupe -SO ou groupe -SO2 ] et R5 atome d'hydrogène ou groupe (C1 -C4 ) alkyle, sous forme d'isomères optiques ou géométriques, purs ou sous forme de mélanges, et leurs sels d'addition aux acides et aux bases pharmaceutiquement acceptables Application thérapeutique.

Description

La présente invention a pour objet des dérivés de N-sulfonylet N-sulfamoylpeptidylprolinamide, leur préparation et leur application en thérapeutique.

Les composés de l'invention répondent à la formule (I)

dans laquelle
R représente soit un groupe (C1-C4)alkyle, soit un groupe phényl(C1-C4)alkyle, soit un groupe -NR1R2 (où R1 est un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle et R2 un groupe (C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle), soit un groupe pyrrolidin-l-yle, soit un groupe pipéridin-l-yle, soit un groupe

où Z est
un atome d'oxygène, un atome de soufre, un groupe -NR6 (où R6
est un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle), un
groupe -SO ou un groupe -SO2 et
R5 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alky
le.

Les composés de l'invention possèdent 3 centres asymétriques
et peuvent exister sous forme d'isomères optiques ou
géométriques, purs ou sous forme de mélanges qui font
également partie de l'invention.

Selon l'invention les composés préférés sont les dérivés de
D-phénylalanyl-L-prolinamide de configuration [2(R)].

Les composés de l'invention peuvent exister sous forme de bases libres ou de sels d'addition aux acides et aux bases pharmaceutiquement acceptables qui font également partie de l'invention.

Les schémas qui suivent illustrent la synthèse des composés selon l'invention. Dans ces schémas, "BOC" représente un groupe l,l-diméthyléthoxycarbonyle.

Selon le schéma 1 on traite le N-[(l,l-diméthyléthoxy)carbonyl]-D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle de formule
(II) en milieu acide dans un solvant tel que par exemple le dioxane pour obtenir un composé de formule (III) sur lequel on fait réagir un composé de formule RSO2Cl (dans laquelle R est tel que défini précédemment) dans un solvant aprotique comme le dichlorométhane en présence d'une base telle que par exemple la triéthylamine à une température comprise entre 0 OC et 20 "C. Ensuite on fait réagir le composé de formule
(IV) ainsi obtenu avec le dicarbonate de bis < l,l-diméthylé- thyle) dans un solvant aprotique comme le tétrahydrofurane en présence d'un catalyseur tel que par exemple la 4-diméthylaminopyridine et d'une base comme la triéthylamine et on obtient un composé de formule (V) que l'on hydrogénolyse en composé de formule (VI). Finalement on transforme le composé de formule (VI) en composé de formule (VII) (dans laquelle X représente soit le groupe pyrrolidin-l-yl-2,5-dione, soit le groupe 2-méthyl-propyloxycarbonyle), puis on fait réagir le dipeptide ainsi obtenu avec un composé de formule (VIII)
(dans laquelle R3 et R4 représentent ensemble le résidu d'un composé dihydroxylé tel que par exemple le butane-2,3-diol, le 2,3-diméthylbutane-2,3-diol ou le (ici, 3a, Sa)-2,6,6- triméthylbicyclo[3.1.1]heptane-2,3-diol [(+)-a-pinanediol] et
R5 est tel que défini précédemment) et on obtient un composé de formule (IX) que l'on traite en milieu acide par exemple avec de l'acide trifluroacétique puis de l'acide phénylboronique ou du tri chlorure de bore pour obtenir un
Schéma 1

Schéma 1 (suite)

composé de formule (I).

Dans une variante du procédé, illustrée dans le schéma 2, on peut hydrogénolyser directement le composé de formule (IV) en composé de formule (VIa) que l'on transforme en composé de formule (VIIa) (dans laquelle X représente soit le groupe pyrrolidin-1-yl-2,5-dione, soit le groupe 2-méthyl- propyloxycarbonyle), puis on fait réagir le dipeptide ainsi obtenu avec un composé de formule (VIII) et on obtient un composé de formule (IXa) que l'on traite en milieu acide par exemple avec de l'acide phénylboronique ou du trichlorure de bore pour obtenir un composé de formule (I).

Les composés selon l'invention pour lesquels R représente un groupe -NR1R2, (où R1 est un atome d'hydrogène, un groupe
(C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle et R2 un groupe
(C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle) répondent à la formule (Ib) et peuvent être préparés selon le procédé illustré par le schéma 3.

On fait réagir le trifluoroacétate de la D-phénylalanyl-Lproline de formule (X) avec un composé de formule R1R2NSO2Cl dans un solvant aprotique comme le dichlorométhane en présence d'une base telle que par exemple la triéthylamine et on obtient un composé de formule (XI) que l'on condense avec un composé de formule (VIII) en présence d'une base telle que par exemple la diisopropyléthylamine et d'un agent de couplage comme l'hexafluorophosphate de [(benzotriazol-1-yl) oxy]tris(diméthylamino)phosphonium pour obtenir un composé de formule (IXb) que l'on traite en milieu acide par exemple avec de l'acide phénylboronique ou du trichlorure de bore pour obtenir un composé de formule (Ib).

Les composés de départ sont disponibles dans le commerce ou décrits dans la littérature ou peuvent être préparés selon des méthodes qui y sont décrites ou qui sont connues de l'homme du métier.

Schéma 2

Schéma 3

Ainsi le N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-D-phénylalanyl-L- prolinate de phénylméthyle est décrit dans la demande de brevet européen EP 0293881.

Le chlorure de N, N-diéthylsulfamoyle est décrit par K.W.

Wheeler et coll. dans J. Am. Chem. Soc., (1944), 66, 1242 ; le chlorure de N-méthylsulfamoyle est décrit par Leschinsky et coll., J. Org. Chem., (1976), 41, 4028.

Le [3aS-(3aa, 4ss, 6ss, 7aa)]-2-(3-bromopropyl)-3a,5,5triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborole est décrit dans le brevet européen EP 0293881.

Le 2 - [( 1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]-N,N-diméthyl-1H- imidazole-1-sulfonamide est décrit par Ngochindo dans
J. Chem. Soc. Perkin Trans. (1990), 1, 1645.

Les exemples suivants illustrent la préparation de certains composés conformément à l'invention.

Les microanalyses élémentaires et les spectres IR et RMN confirment la structure des composés obtenus.

Les numéros des composés exemplifiés renvoient à ceux du tableau donné plus loin.

Le rapport entre parenthèse est le rapport molaire acide:base.

Exemple 1 (composé no la) chlorhydrate de (R) -N- (méthylsulfonyl) -D-phénylalanyl-N-[l- borono-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl]-L-prolinamide (2:1) 1.1. chlorhydrate de D-phénylalanyl-L-prolinate de
phénylméthyle (1:1)
On traite à o OC une solution de 6,7 g (15 mmoles) de
N- [(1, l-diméthyléthoxy) carbonyl] -D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 60 ml d'éther par 30 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 4 N dans le dioxane. On laisse la température du mélange revenir à 20 OC et on le laisse sous agitation à cette température pendant 16 heures. Ensuite on concentre le milieu réactionnel à sec et on triture le résidu dans l'éther.

On obtient 5,5 g d'un solide incolore.

Rendement = 94 %
Point de fusion = 80-82 "C 1.2. N-(méthylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-prolinate de
phénylméthyle
On refroidit à O OC une solution de 3,8 g (10 mmoles) de chlorhydrate de D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 20 ml de dichlorométhane puis on ajoute 1,37 g
(12 mmoles) de chlorure de méthanesulfonyle et 3,5 ml
(24 mmoles) de triéthylamine. On agite le mélange pendant 1 heure à cette température puis on le dilue avec 100 ml d'acétate d'éthyle. Ensuite on lave le milieu réactionnel successivement par 20 ml d'acide chlorhydrique 1 N puis 20 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium et on sèche sur sulfate de sodium. Finalement on filtre, on concentre à sec et on triture le résidu dans l'éther isopropylique.

On obtient 4 g de produit.

Rendement = 93 %
Point de fusion = 81 OC 1.3. N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-(méthylsulfonyl)-
f-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméhyle
A 3,8 g (8,8 mmoles) de N-(méthylsulfonyl)-D-phénylalanyl-L prolinate de phénylméthyle en solution dans 15 ml de dichlorométhane, on ajoute 1,93 g (9,2 mmoles) de dicarbonate de bis(l,1-diméthyléthyle), 1,29 ml de triéthylamine et 100 mg de 4-diméthylaminopyridine. On laisse le mélange sous agitation à la température ambiante pendant 2 heures puis on concentre le milieu réactionnel à sec. On reprend le résidu dans 50 ml d'acétate d'éthyle, on lave successivement par 10 ml d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 0,5 N puis 10 ml d'une solution saturée en chlorure de sodium et finalement on sèche sur sulfate de sodium.On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par un mélange acétate d'éthyle/cyclohexane (1:9).

On obtient 4,5 g de produit sous forme d'une huile.

Rendement = 90 %
[a]20 = + 26,1 (c = 1 ; chloroforme) 1.4. N-[ (1,1-diméthyléthoxy) carbonyl]-N-(méthylsulfonyl)- phénylalanyl-L-proline
Dans un appareil de Parr, on place 4 g (7 mmoles) de N-[ (1,1-diméthyléthoxy)carbonyl] -N-(méthylsulfonyl) -
D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméhyle dans 20 ml d'éthanol et 200 mg de palladium sur charbon à 10 % puis on hydrogène le mélange sous une pression de 50 psi (0,35 MPa) pendant 4 heures. On filtre le milieu réactionnel, on concentre à sec et on triture le résidu avec de l'hexane.

On obtient 3,2 g de produit.

Rendement = 95 %
Point de fusion = 60 "C
1.5. (R) -N-[ (1, 1-diméthyléthoxy) carbonyl]-N-(méthylsulfo-
nyl)-D-phénylalanyl-N-[4-(1H-imidazol-4-yl)-1-(4,4,5,5- tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-l-
prolinamide
1.5.1. (R)-a-(4,4,5,5-tétraméthyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)-
1H-imidazole-4-butanamine
a. [3aS-(3aa, 4ss, 6ss, 7au)]-2-(3-iodopropyl) -3a, 5, 5-tri- méthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborole
On porte à la température de reflux pendant 24 heures, une solution de 37 g (122 mmoles) de [3aS-(3au, 4ss, 6ss, 7aa)]-2
(3-bromopropyl)-3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2- benzodioxaborole et de 72,7 g (488 mmoles) d'iodure de sodium dans 500 ml d'acétone. On évapore le solvant et on reprend le résidu dans un mélange de 500 ml d'éther et de 100 ml d'eau contenant 1 g de sulfite de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de magnésium, on filtre et on évapore.

On obtient 40 g de produit que l'on utilise directement dans l'étape suivante.

Rendement = 95 %
b. 3aS-(3aa, 4ss, 6ss, 7a&alpha;)]1-2, 7a&alpha;)]-2-[(1,1-diméthyléthyl)dimé-
thylsilyl] -N, N-diméthyl-4 (5)-[3-(3a, 5, 5-triméthylhexahydro-
4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborol-2-yl)propyl]-lH-
imidazole-1-sulfonamide
On dissout 70,5 g (244 mmoles) de 2-[(1,1-diméthyléthyl)dimé- thylsilyl]-N,N-diméthyl-lH-imidazole-1-sulfonamide dans 250 ml de tétrahydrofurane. On refroidit le milieu réactionnel à -78 OC et on ajoute 152 ml (244 mmoles) d'une solution 1,6 M de n-butyllithium dans l'hexane.On laisse sous agitation pendant 1 heure à -78 C puis on ajoute 40 g (115 mmoles) de [3aS-(3aa, 4ss, 6ss, 7a&alpha;)]-2-(3-iodopropyl)-3a,5,5-tri- méthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborole en solution dans 100 ml de tétrahydrofurane. On agite le milieu réactionnel entre -78 C et +20 C pendant 1 heure puis à 20 C pendant 2 heures. On verse le milieu réactionnel sur 350 ml d'un mélange glace-eau contenant 14,5 g (121 mmoles) d'hydrogénosulfate de sodium. On extrait la phase aqueuse par 3 fois 100 ml d'éther, on réunit les phases éthérées, on les sèche sur sulfate de magnésium, on filtre et on évapore. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par une solution d'acétate d'éthyle à 20 % dans l'hexane.

On obtient 45 g de produit.

Rendement = 73 %
[a]20 = + 12,5 (c = 1,9; chloroforme)
c. [3aS-[2(S), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]]-4(5)-[4-chloro-4- (3a, 5,5-
triméthylhexahydro-4, 6-méthano-1, 3, 2-benzodioxaborol-2-
yl)butyl]-2-[ (1, 1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]-N,N-dimé-
thyl-lH-imidazole-1-sulfonamide
On refroidit une solution de 8,3 g (98 mmoles) de dichlorométhane dans 100 ml de tétrahydrofurane à -100 OC. On ajoute 39,1 ml (98 mmoles) d'une solution 2,5 M de n-butyllithium dans l'hexane.On laisse pendant 15 minutes à cette température puis on ajoute 45 g (89 mmoles) de [3aS-(3aa, 4ss, 6ss, 7aa) ]-2-[ (1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]-N,N-diméthyl-4(5)- [3-(3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzOdioxa- borol-2-yl)propyl]-lH-imidazole-1-sulfonamide, en solution dans 50 ml de tétrahydrofurane. On laisse le mélange réactionnel pendant 15 minutes à -100 "C et on ajoute 9,8 g (70 mmoles) d'une solution de chlorure de zinc dans 50 ml de tétrahydrofurane. On laisse revenir à +20 "C pendant 16 heures. On évapore sous vide et on reprend le résidu dans un mélange de 200 ml de dichlorométhane et de 50 ml d'eau. On sépare les phases et on extrait la phase aqueuse avec 100 ml de dichlorométhane.On rassemble les phases organiques, on les sèche sur du sulfate de magnésium, on les filtre et on évapore. On purifie le résidu coloré obtenu, par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par un mélange acétate d'éthyle:hexane (20:80).

On obtient 40 g de produit sous forme d'une huile incolore.

Rendement = 80 %
[a]20 = + 15,9 (c = 2,65; chloroforme)
d. chlorhydrate de [3aS-[2(R), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]l-4(5)-[4-
amino-4- (3a, 5, 5-triméthylhexahydro-4, 6-méthano-l, 3,2-
benzodioxaborol-2-yl) butyl] -N, N-diméthyl-îH-imidazole-1-
sulfonamide (1:1)
On met en solution 12,6 g (78 mmoles) de 1,1,1,3,3,3-hexaméthyldisilazane dans 80 ml de tétrahydrofurane et on ajoute 31 ml (78 mmoles) d'une solution 2,5 M de n-butyllithium dans l'hexane. On laisse pendant 1 heure à -78 "C et on ajoute 40 g (71 mmoles) de [3aS-[2(S), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]]-4(5)-[4 chloro-4-(3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-ben- zodioxaborol-2-yl)butyl]-2-[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsil yl]-N,N-diméthyl-lH-imidazole-1-sulfonamide, en solution dans 80 ml de tétrahydrofurane.On laisse sous agitation pendant 1 heure à -78 "C et pendant 16 heures à +20 "C. On refroidit le milieu réactionnel à -78 "C, on ajoute 78 ml (312 mmoles) d'une solution 4 N d'acide chlorhydrique dans le dioxane puis on laisse sous agitation, pendant 1 heure à -78 "C et pendant 2 heures à +20 OC. On évapore sous vide et on reprend le résidu dans 200 ml de chloroforme. On filtre et on évapore.

On obtient 32 g de produit sous forme d'une huile que l'on triture dans l'éther.

On obtient le produit sous forme d'un solide.

Rendement = 89 %
Point de fusion = 90-92 "C [a] 20 = + 11 (C = 1 ; méthanol)
e. chlorhydrate de (R)-a-(4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-
dioxaborolan-2-yl)-lH-imidazole-4-butanamine (2:1)
On porte au reflux pendant 3 heures, 32 g (70 mmoles) de chlorhydrate de [3aS-[2(R), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]l-4(5)-[4-amino- 4-(3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxabo- rol-2-yl)butyl]-N, N-diméthyl-lH-imidazole-1-sulfonamide, en solution dans 200 ml d'acide chlorhydrique 4 N. On extrait la solution par 4 fois 100 ml d'éther et on évapore à sec.On reprend le résidu par 100 ml de méthanol et on ajoute 8,2 g
(70 mmoles) de 2,3-diméthyl-2,3-butanedione. On laisse sous agitation pendant 16 heures à 20 OC et on évapore à sec.

On obtient 25 g de produit sous forme d'un semi-solide hygroscopique.

[a] 20 = - 2 (c = 1,5 méthanol) 1.5.2. (R) -N- [(1, 1-diméthyléthoxy) carbonyl]-N-(méthylsulfo-
nyl)- > phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1-
(4,4,5, 5-tétraméthyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-
L-prolinamide
On refroidit à 0 "C, une solution de 3,2 g (8,4 mmoles) de
N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-(méthylsulfonyl)-D-phényl- alanyl-L-proline dans 10 ml de tétrahydrofurane. On ajoute à cette solution 1,03 g (9 mmoles) de l-hydroxypyrrolidine-2,5dione et 1,87 g (9 mmoles) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide, on laisse le mélange sous agitation pendant 16 heures à 20 "C, on filtre et on concentre à sec.On ajoute ensuite au résidu obtenu 4,48 g (11 mmoles) de (R) -&alpha;-(4,4,5,5tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-lH-imidazole-4- butanamine et 15 ml de dichlorométhane. On refroidit le mélange à -15 OC et on ajoute 4,34 ml (31 mmoles) d'une solution de triéthylamine dans 10 ml de dichlorométhane. On laisse le mélange sous agitation pendant 1 heure à cette température, on laisse la température remonter à la température ambiante et on laisse encore pendant 2 heures sous agitation. On ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle puis on lave par 20 ml d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis par une solution saturée de chlorure de sodium.

On sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre à sec. On reprend le résidu obtenu dans 10 ml d'acétate d'éthyle et on le traite à 0 C par 100 ml d'une solution 0,1 N d'acide chlorhydrique dans l'isopropanol puis on concentre à sec. Enfin on triture le résidu final dans l'éther isopropylique.

On obtient 5,5 g de produit.

Rendement = 90 %
Point de fusion = 80-85 OC 1.6. chlorhydrate de (R) -N- (méthylsulfonyl) -D-phénylalanyl-
N- [1-borono-4- (îH-imidazol-4-yl) butyl] -L-prolinamide
(2:1)
On refroidit à 0 C une solution de 5,4 g (8 mmoles) de
(R)-N- [(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-(méthylsulfonyl)- D-phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1-(4,4,5,5- tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-L-prolinamide dans 10 ml de dichlorométhane et on ajoute 5 ml d'acide trifluoracétique. On agite à 20 C pendant 16 heures et on concentre à sec. On reprend le résidu dans 10 ml d'eau puis dans 10 ml d'éther et on ajoute 2,44 g (20 mmoles) d'acide phénylboronique.Après 20 heures d'agitation à la température ambiante, on sépare les phases, on recueille la phase aqueuse, on concentre à sec et on purifie le résidu sur colonne Lichroprep > RP 18 en éluant avec un gradient acide chlorhydrique 0,01 M/acétate d'éthyle en 3 heures.

On obtient 2,3 g de produit.

Rendement = 50 %
Point de fusion = 195-200 OC
[a]20 = - 71 (c = 0,25 ; méthanol)
Exemple 2 (composé no lb) (R) -N- (méthylsulfonyl)-D-phénylalanyl-N-[1-borono-4-
(1H-imidazol-4-yl)butyl]-L-prolinamide
On traite 500 mg (0,86 mmoles) de chlorhydrate de (R) -N- (méthylsulfonyl)-D-phénylalanyl-N-[1-borono-4-
(1H-imidazol-4-yl)butyl]-L-prolinamide par 1,12 g d'une résine échangeuse d'ions (Biorad > AGI, forme HCO3).

On obtient 350 mg de produit sous forme de base.

Point de fusion = 160-63 OC
[a]20 = - 57 (c = 0,4 ; méthanol)
Exemple 3 (composé no 3) chlorhydrate de (R)-N-[(phénylméthyl)sulfonyl]-Dphénylalanyl-N-[1-borono-4-(1H-imidazol-4-yl)butyl]-L- prolinamide (1:1) 3.1. N-[(phénylméthyl)sulfonyl]-D-phénylalanyl-L-prolinate
de phénylméthyle
On prépare ce composé selon la méthode décrite en 1.2.à partir de 1,5 g (3,9 mmoles) de chlorhydrate de -phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle et du chlorure de phénylméthanesulfonyle.

On obtient 1,7 g de produit.

Rendement = 75 %
Point de fusion = 67 OC 3.2. (R) -N- [ (1, l-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-[(phénylméthyl)
sulfonyl]- > phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1-
(4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-L-
prolinamide
On refroidit à 0 OC une solution de 1,7 g (3 mmoles) de N-[(phénylméthyl)sulfonyl]-D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 2 ml d'éthanol et 2 ml de tétrahydrofurane puis on ajoute 3 ml d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium. On agite le mélange pendant 3 heures à 20 OC, on concentre à sec, on reprend le résidu dans 10 ml d'eau et on extrait par 2 fois 20 ml d'éther.Ensuite on récupère la phase aqueuse, on l'acidifie par 3 ml d'une solution aqueuse 0,1 N d'acide chlorhydrique et on extrait par 3 fois 50 ml d'acétate d'éthyle. Finalement on rassemble les phases organiques, on les sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre à sec.

On obtient 600 mg de produit sous forme d'une huile.

Rendement = 40 %
On reprend le composé ainsi obtenu dans 5 ml de tétrahydrofurane, on refroidit le mélange à 0 OC et on ajoute 172 mg
(1,49 mmoles) de l-hydroxypyrrolidine-2,5-dione et 300 mg de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide. On laisse la température du mélange revenir à la température ambiante, on le laisse sous agitation pendant 16 heures à cette température, on filtre et on concentre. Ensuite on reprend le résidu dans 3 ml de dichlorométhane, on ajoute 622 mg (1,52 mmoles) de (R)-a-(4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-lH- imidazole-4-butanamine et on refroidit le mélange à -15 OC.

On ajoute 0,6 ml de triéthylamine en solution dans 2 ml de dichlorométhane et on laisse sous agitation pendant 1 heure à -15 OC et pendant 2 heures à 20 "C. Finalement on ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle puis on lave par 20 ml d''une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis par une solution saturée de chlorure de sodium. On sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre à sec. On reprend le résidu obtenu dans 10 ml d'acétate d'éthyle et on le traite à
O OC par 10 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 0,1 N dans l'isopropanol puis on concentre à sec. Enfin on triture le résidu final dans l'éther isopropylique.

On obtient 0,8 g de produit sous forme d'un solide.

Rendement = 83 %
Point de fusion = 110-115 OC 3.3. chlorhydrate de (R)-N-[(phénylméthyl)sulfonyl] phénylalanyl-N-[1-borono-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl]-
L-prolinamide (1:1)
On traite à 0 OC une solution de 800 mg (1 mmole) de (R) -N- [ (1, l-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-[(phénylméthyl)sulfo- nyl]- > phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1-(4,4,5,5- tétraméthyl-1, 3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-L-prolinamide par 2 ml d'acide trifluoroacétique. On laisse le milieu réactionnel pendant 24 heures à 20 OC, on concentre à sec, on reprend le résidu dans 10 ml d'eau puis 10 ml d'éther et on ajoute 250 ml d'acide phénylboronique.On laisse de nouveau le mélange pendant 24 heures à 20 "C, on récupère la phase aqueuse et on concentre sous vide. On purifie le résidu sur colonne Lichroprep E RP 18 en éluant avec un gradient acide chlorhydrique 0,01 M/acétonitrile en 3 heures.

On obtient 0,31 g de produit.

Rendement = 50 %
Point de fusion = 175-180 C
[ai20 = - 72 (c = 0,25 ; méthanol)
Exemple 4 (composé no 4) chlorhydrate de (R) -N- [ (diméthylamino)sulfonyl]-D- phénylalanyl-N-[l-borono-4- (îH-imidazol-4-yl)butyl]-L- prolinamide (1::1) 4.1. N-[ (diméthylamino) sulfonyl]-D-phénylalanyl-L-proline
A 10 ml de dichlorométhane on ajoute 376 mg (1 mmole) de trifluoroacétate de D-phénylalanyl-L-proline, 0,54 ml
(3 mmoles) de diisopropyléthylamine, on place le mélange dans un bain de glace et on ajoute alors 0,117 ml (1,1 mmoles) de chlorure de N,N-diméthylsulfamoyle. On laisse le milieu réactionnel pendant une nuit à la température ambiante, on le dilue par de l'acétate d'éthyle, on lave successivement par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 1 N et par une solution saturée en chlorure de sodium. On évapore le mélange à sec et on reprend le résidu dans l'éther.

On obtient 0,29 g de produit que l'on utilise tel quel dans l'étape suivante.

Rendement = 78 z
Point de fusion = 114-117 OC 4.2. chlorhydrate de (R) -N- [(diméthylamino)sulfonyl]-D- phénylalanyl-N-[1-borono-4- (lH-imidazol-4-yl)butyl]-L-
prolinamide (1:1)
4.2.1. chlorhydrate de [3aS-[2(R), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]]-a (3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzo-
dioxaborol-2-yl)-1H-imidazole-4-butanamine (2::1)
On porte au reflux pendant 3 heures, 32 g (70 moles) de chlorhydrate de [3aS-[2(R), 3aa, 4ss, 6ss, 7aa]]-4(5)-[4-amino4-(3a,5,5-triméthylhexahydro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxabo- rol-2-yl)butyl]-N,N-diméthyl-lH-imidazole-1-sulfonamide, en solution dans 200 ml d'acide chlorhydrique 4 N. On extrait la solution par 4 fois 100 ml d'éther et on évapore à sec. On reprend le résidu par 100 ml de méthanol et on ajoute 11,9 g
(70 mmoles) de [1R- (1a, 2a, 3a, 5a)]-2,6,6-triméthylbicyclo
[3.1.1]heptane-2,3-diol. On laisse sous agitation pendant 16 heures à 20 C et on évapore à sec.

On obtient 27 g de produit sous forme d'une huile que l'on triture dans l'éther.

Point de fusion = 75-80 OC
4.2.2. chlorhydrate de (R)-N-[(diméthylamino)sulfonyl]-D- phénylalanyl-N- [l-borono-4- (îH-imidazol-4-
yl)butyl]-L-prolinamide (1:1)
Dans un ballon sous azote, on place 0,57 g (1,5 mmoles) de
N- [ (diméthylamino) sulfonyl]-D-phénylalanyl-L-proline et on ajoute 5 ml de dichlorométhane puis 5 ml d'acétonitrile. On refroidit le mélange à -15 C et on ajoute 1,02 ml 6 mmoles) de diisopropyléthylamine et 0,625 g (1,65 mmoles) d'hexafluorophosphate de [(benzotriazol-l-yl) oxy] tris (diméthylamino) phosphonium.On laisse le mélange sous agitation à cette température, on ajoute 0,876 g (2,26 moles) de chlorhydrate de [3aS-[2(R), 3aa, 4ss, 6ss, 7 a&alpha; ]]-&alpha;-3a,5,5-triméthylhexahy- dro-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborol-2-yl)-lH-imidazole-4butanamine en solution dans 5 ml de dichlorométhane et on laisse le mélange pendant une nuit à la température ambiante.

On évapore à sec, on reprend le résidu dans l'acétate d'éthyle, on lave successivement par une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis par une solution saturée de chlorure de sodium et on sèche sur sulfate de magnésium.

On purifie le résidu sur colonne Lichroprep > RP 18 en éluant avec mélange acide chlorhydrique 0,01 M/acétonitrile. On rassemble les fractions adéquates, on les évapore, on reprend le résidu dans de l'acide chlorhydrique 0,01 N, on ajoute une solution 3 mM d'acide phénylboronique dans l'éther et on laisse le mélange sous agitation pendant 24 heures.

Finalement on récupère la phase aqueuse, on décante et on purifie le résidu sur colonne Lichroprep > RP 18 en éluant avec un mélange acide chlorhydrique/acétonitrile.

On obtient 0,13 g de produit.

Rendement = 15 %
Point de fusion = 165 C
[a] 20 = - 48 (c = 0,2 ; méthanol)
Exemple 5 (composé no 7) chlorhydrate de (R)-(N-(pyrrolidin-1-ylsulfonyl)-D- phénylalanyl-N-[l-borono-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl]-l- prolinamide (1:1) 5.1. N-(pyrrolidin-l-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-prolinate
de phénylméthyle
5.1.1. chlorure de pyrrolidine-1-sulfonyle
A une solution de 10,75 g (0,1 mole) de chlorhydrate de pyrrolidine dans 50 ml d'acétonitrile, on ajoute goutte à goutte 27 ml (0,33 mole) de chlorure de sulfuryle et on porte le mélange à la température de reflux pendant 24 heures.

Ensuite on évapore le solvant à sec, on extrait le résidu à l'éther, on recueille la phase éthérée, on l'évapore et on distille le résidu.

On obtient 4,5 g de produit sous forme d'une huile.

Point d'ébullition = 65-75 C/13,33 Pa (0,1 mmHg) 5.1.2. N-(pyrrolidin-1-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-L-
prolinate de phénylméthyle
On dissout 200 mg (0,51 mmole) de chlorhydrate de
Dphénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 10 ml de dichlorométhane, on ajoute 100 mg (0,59 mmole) de chlorure de pyrrolidine-l-sulfonyle en solution dans 10 ml de dichlorométhane et 0,18 ml (2,51 mmoles) de triéthylamine puis on laisse le mélange pendant 3 heures à la température ambiante. Ensuite on ajoute de nouveau 100 mg de chlorure de pyrrolidine-1-sulfonyle et 0,1 ml de triéthylamine et on laisse le mélange pendant une nuit à la température ambiante.

On lave le milieu réactionnel avec de l'eau, on sèche sur sulfate de magnésium et on évapore à sec. On purifie le résidu par chromatographie sur gel de silice en éluant par un mélange dichlorométhane/méthanol (98:2).

On obtient 190 mg de produit sous forme d'une huile orangée.

Rendement = 77 % 5.2. N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-(pyrrolidin-1-y7lsul-
fonyl)-D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle
Dans 5 ml de tétrahydrofurane on dissout 1,4 g (2,9 mmoles) de N-(pyrrolidin-1-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle, on ajoute 0,8 g (3,7 mmoles) de dicarbonate de bis(1,l-diméthyléthyle) en solution dans 2 ml de tétrahydrofurane et 5 mg de 4-diméthylaminopyridine. On laisse le mélange pendant une nuit à la température ambiante, on évapore le milieu réactionnel à sec et on purifie le résidu par chromatographie sur gel de silice dichlorométhane/méthanol (98:2).

On obtient 1,2 g de produit.

Rendement = 71 % 5.3. N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-(pyrrolidin-1-ylsul- fonyl)-D-phénylalanyl-L-proline
On hydrogène pendant 1 heure à 50 psi (0,35 MPa) à la température ambiante 1,2 g (2,05 mmoles) de
N- [(1, 1-diméthyléthoxy) carbonyl]-N-(pyrrolidin-1-ylsulfonyl)- phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 100 ml d'éthanol. On filtre le milieu réactionnel sur célite et on évapore à sec.

On obtient 1 g de produit sous forme d'une mousse blanche dont on recristallise une fraction aliquote dans l'hexane pour obtenir le produit sous forme d'une poudre blanche.

Rendement = 100 %
Point de fusion = 90-92 "C 5.4. chlorhydrate de (R) -N- (pyrrolidin-1-ylsulfonyl)- >
phénylalanyl-N-[1-borono-4-(1H-imidazol-4-yl)butyl]-L
prolinamide (1:1)
On obtient ce composé selon la méthode décrite dans l'exemple 1 à partir de la N-[(l,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N-
(pyrrolidin-1-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-proline et de la (R) -a- (4,4,5, 5-tétraméthyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl)- lH-imidazole-4-butanamine.

Rendement = 26 %
Point de fusion = 125 OC
[a]20 = - 59 (c =0,2 ;eau)
Exemple 6 (composé 8) chlorhydrate de (R) -N- (pipéridin-1-ylsulfonyl) -D- phénylalanyl-N-[1-borono-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl]-Lprolinamide (1:1) 6.1. N- (pipéridin-1-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-prolinate
de phénylméthyle
6.1.1. chlorure de pipéridine-l-sulfonyle
A 10 g (0,11 mole) de pipéridine on ajoute goutte à goutte 20 ml d'acide chlorhydrique 6 N en refroidssant. On laisse le mélange sous agitation et on évapore à sec. On reprend le résidu 3 fois avec du toluène et on obtient le chlorhydrate de pipéridine sous forme d'un précipité blanc.On ajoute le chlorhydrate par portions à 27 ml (0,33 mole) de chlorure de sulfuryle en solution dans l'acétonitrile et on porte le mélange à la température de reflux pendant 24 heures. Ensuite on évapore à sec, on reprend le résidu dans l'éther, on filtre et on distille.

On obtient 18,15 g de produit
Rendement = 84 %
Point d'ébullition = 60-70 OC/13,33 Pa (0,1 mmHg)
6.1.2. N-(pipéridin-1-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-L-
prolinate de phénylméthyle
On dissout 3 g (7,7 mmoles) de D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 7 ml de dichlorométhane. Sous argon et à température ambiante on ajoute 1,65 g (8,9 mmoles) de chlorure de pipéridine-1-sulfonyle en solution dans 7 ml de dichlorométhane, on place le mélange à 0 C/ et on ajoute alors goutte à goutte 5,3 ml de triéthylamine. On laisse la température du mélange revenir à la température ambiante et on le laisse sous agitation pendant une nuit à cette température. Finalement on lave le milieu réactionnel avec de l'eau, on sépare les phases et on récupère la phase organique.On la sèche sur sulfate de magnésium, on filtre et on évapore à sec. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par un mélange dichlorométhane/méthanol (99:1).

On obtient 963 mg de produit sous forme d'une mousse.

Rendement = 25 % 6.2. N- (pipéridin-1-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-proline
On dissout 750 mg (1,5 mmoles) de N-(pipéridin-1-ylsulfonyl)- f-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 50 ml d'éthanol, on ajoute sous argon 75 mg de palladium sur charbon à 10 % et on hydrogène pendant 1 heure à 50 psi
(0,35 MPa).

On obtient 520 mg de produit.

Rendement = 85 %
Point de fusion = 180 "C (décomposition) 6.3. chlorhydrate de (R) -N- (pipéridin-l-ylsulfonyl)-
phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1-(4,4,5,5-
tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-L-
prolinamide (1:1)
On refroidit à 0 OC, une solution de 0,520 g (1,26 mmoles) de N- (pipéridin-1-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-proline dans 10 ml de tétrahydrofurane. On ajoute à cette solution 0,146 g
(1,26 mmoles) de 1-hydroxypyrrolidine-2,5-dione et 0,262 g
(1 mmole) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide, on laisse le mélange sous agitation pendant 16 heures à 20 OC, on filtre et on concentre à sec.

On obtient 0,520 g de produit.

On ajoute ensuite au résidu obtenu 0,720 g (1,8 mmoles) de (R)-a-(4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-lH- imidazole-4-butanamine et 20 ml de dichlorométhane. On refroidit le mélange à -15 "C et on ajoute 0,57 ml (4 mmoles) de triéthylamine en solution dans 10 ml de dichlorométhane.

On laisse le mélange sous agitation pendant 1 heure à cette température, on laisse la température remonter à la température ambiante et on laisse encore pendant 2 heures sous agitation. On ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle puis on lave par 20 ml d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis par une solution saturée de chlorure de sodium.

On sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre à sec. On reprend le résidu obtenu dans 10 ml d'acétate d'éthyle et on le traite à 0 "C par 13 ml d'une solution 0,1 N d'acide chlorhydrique dans l'isopropanol puis on concentre à sec.

On obtient 600 mg de produit sous forme de chlorhydrate que l'on utilise tel quel dans l'étape suivante.

6.4. chlorhydrate de ( R) -N- (pipéridin-1-ylsulfonyl)-D- phénylalanyl-N- [l-borono-4- (lH-imidazol-4-yl)butyl1-L-
prolinamide (1:1)
On met en solution 0,548 g (0,79 mmole) de (R)-N-(pipéridin1-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-N-[4-(lH-imidazol-4-yl)-1 (4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)butyl]-L- prolinamide dans un mélange de 7,5 ml d'eau et 7,5 ml d'éther puis on ajoute 0,491 g (4 mmoles) d'acide phénylboronique et on laisse le mélange pendant 3 heures sous agitation à la température ambiante. On sépare les phases, on lave 3 fois avec de l'éther et on évapore la phase aqueuse. On purifie le résidu obtenu par chromatographie sur colonne Lichroprep 95 RP 18 en éluant avec un gradient acide chlorhydrique 0,01 M/acétonitrile en 3 heures.

On obtient après lyophilisation 90 mg de produit.

Rendement = 18 %
Point de fusion = 120-125 "C
[a]20 = - 52 (c = 0,1 ; eau)
Exemple 7 (composé no 9) chlorhydrate de (R) -N- (morpholin-4-ylsulfonyl) -D- phénylalanyl-N-[1-borono-4- (lH-imidazol-4-yl)butyl]-L- prolinamide (1:1) 7.1. N- (morpholin-4-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-prolinate
de phénylméthyle
7.1.1. chlorure de morpholine-4-sulfonyle
On ajoute 12,36 g (0,1 mole) de chlorhydrate de morpholine par portions à 44,5 g (0,33 mole) de chlorure de sulfuryle en solution dans 50 ml d'acétonitrile et on porte le mélange à la température de reflux pendant 24 heures.Ensuite on laisse refroidir, on évapore à sec et on reprend le résidu dans l'éther, on filtre, on évapore et on distille l'huile résiduelle.

On obtient 8,7 g de produit
Rendement = 56 %
Point d'ébullition = 80 "C/13,33 Pa (0,1 mmHg)
7.1.2. N- (morpholin-4-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-L-
prolinate de phénylméthyle
On dissout 2 g (5,1 mmoles) de D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle dans 10 ml de dichlorométhane. Sous argon et à température ambiante on ajoute 1,1 g (5,9 mmoles) de chlorure de morpholine-4-sulfonyle en solution dans 10 ml de dichlorométhane, on place le mélange à 0 "C et on ajoute alors goutte à goutte 1,5 ml de triéthylamine. On laisse la température du mélange revenir à la température ambiante et on le laisse sous agitation pendant une nuit à cette température. Finalement on lave le milieu réactionnel avec de l'eau, on sépare les phases et on récupère la phase organique.On la sèche sur sulfate de magnésium, on filtre et on évapore à sec. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par un mélange dichlorométhane/méthanol (99:1).

On obtient 1 g de produit.

Rendement = 39 % 7.2. N-[ (1, 1-diméthyléthoxy) carbonyl]-N- (morpholin-4-yl
sulfonyl)-D-phénylalanyl-L-prolinate de phénylméthyle
A 1 g (2 moles) de N-(morpholin-4-ylsulfonyl)-D-phénylalanyl-
L-prolinate de phénylméthyle en solution dans 10 ml de tétrahydrofurane, on ajoute 0,5 g (2,29 mmoles) de dicarbonate de bis(1,1-diméthyléthyle), 0,28 ml de triéthylamine et 20 mg de 4-diméthylaminopyridine et on procède selon la méthode décrite dans l'exemple 1.

On obtient 1 g de produit.

Rendement = 83 % 7.3. chlorhydrate de (R) -N- (morpholin-4-ylsulfonyl)-f-
phénylalanyl-N-[1-borono-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl]-L
prolinamide (1:1)
On obtient ce composé selon la méthode décrite dans l'exemple 1 à partir de la N-[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-N
(morpholin-4-ylsulfonyl) -D-phénylalanyl-L-proline et de la
(R)-a-(4,4,5,5-tétraméthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)- 1H-imidazole-4-butanamine.

Rendement = 24 %
Point de fusion = 185 "C (décomposition)
[a]20 = - 47 (c = 0,4 ;eau)
Tableau

<tb> No <SEP> R <SEP> Rg <SEP> Sel <SEP> [a20 <SEP> Point <SEP> de
<tb> <SEP> D <SEP> (") <SEP> fusion <SEP> ("C)
<tb> <SEP> (2:1) <SEP> (c=0,25 <SEP> ; <SEP> méthanol)
<tb> lb <SEP> -CH3 <SEP> -H <SEP> - <SEP> -57 <SEP> 160-163
<tb> <SEP> (c=0,4 <SEP> ; <SEP> méthanol)
<tb> <SEP> 2 <SEP> -CH2CH3 <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -89 <SEP> 145-150
<tb> <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,4 <SEP> ; <SEP> eau)
<tb> <SEP> 3 <SEP> -CH2C6H5 <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -72 <SEP> 175-180
<tb> <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,25 <SEP> ; <SEP> méthanol)
<tb> <SEP> 4 <SEP> -N(CH3)2 <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -48 <SEP> 165
<tb> <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,2 <SEP> ;<SEP> méthanol)
<tb> <SEP> 5 <SEP> -NHCH3 <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -94 <SEP> 158
<tb> <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,2 <SEP> ; <SEP> eau)
<tb> <SEP> 6 <SEP> -N(CH2CH3)2 <SEP> -H <SEP> (1:1) <SEP> -68 <SEP> 150 <SEP> (d)
<tb> <SEP> (c=0,4 <SEP> ; <SEP> eau)
<tb> <SEP> 7 <SEP> -\ <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -59 <SEP> 125
<tb> <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,2 <SEP> ; <SEP> eau)
<tb>

<tb> <SEP> Point <SEP> de
<tb> No <SEP> R <SEP> R5 <SEP> Sel <SEP> [a]D20 <SEP> (O) <SEP> fusion <SEP> (OC)
<tb> <SEP> 8 <SEP> C <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -52 <SEP> 120-125
<tb> <SEP> Su <SEP> (1:1) <SEP> (c=O,l <SEP> ; <SEP> eau)
<tb> <SEP> 9 <SEP> -H <SEP> HCl <SEP> -47 <SEP> 185 <SEP> (d)a
<tb> <SEP> o <SEP> N <SEP> (1:1) <SEP> (c=0,4 <SEP> ;<SEP> eau)
<tb> a (d) correspond à une fusion ave décomposition
Les composés de l'invention ont fait l'objet d'études pharmacologiques qui ont mis en évidence leurs propriétés antithrombotiques et leur intérêt comme substances à activité thérapeutique.

1. Détermination des constantes d'inhibition (Ki) vis à vis de la thrombine
Sur une microplaque de 96 puits, on dépose dans chaque puits 25 ul d'une solution de composé à tester (on étudie 7 concentrations), 50 ul d'une solution de substrat chromogène
(on étudie 2 concentrations ; S2238 Chromogénix > ) en solution dans du tampon Tris à pH 7,5 (Tris 50 mM, NaCl 100 mM et BSA 0,1 %) et finalement 25 ul d'une solution de thrombine à 300 U/ml. On suit la libération de 4-nitroaniline à 405 nm à l'aide d'un lecteur de plaques.

On détermine le Ki par la méthode de Dixon.

Les composés de l'invention sont des inhibiteurs de la thrombine et leur Ki est compris entre 0,001 et 1 } 2. Coagulation du plasma de rat par la thrombine humaine ex vu po
On traite des rats males CD pesant 150 à 200 g avec le composé à tester ou avec le véhicule, par voie i.v., orale ou sous-cutanée. Ensuite on anesthésie les animaux au NembutalE
(60 mg/kg ; 0,1 ml/kg), on prélève le sang sur du citrate trisodique à 3,8% (1 vol/9 vol de sang) au niveau du sinus rétro-orbital et on prépare le plasma par centrifugation à 3600 g pendant 15 minutes à la température ambiante. On incube alors à 37 "C, 200 ul de plasma avec 200 ul d'une solution de thrombine humaine, la concentration finale en thrombine humaine étant de 0,75 unités NIH/ml et on note le temps de coagulation. L'effet anticoagulant est exprimé par la dose qui augmente le temps de coagulation de 100 %.

Les composés de l'invention inhibent la coagulation du plasma de rat à des doses inférieures à 1 mg/kg i.v. Ils sont également actifs par les voies orale et sous-cutanée.

3. Agrégation des plaquettes de lapin induite par la thrombine humaine.

On prélève le sang par ponction cardiaque sur du citrate trisodique à 3,8 % (1 vol/9 vol de sang). On le centrifuge à 250 g pendant 10 minutes. On prélève le plasma riche en plaquettes (P3P) ainsi obtenu et on réalise la numération des plaquettes.

Au P3P, on ajoute 2 ng/ml de prostacycline en solution dans du tampon Tris à pH 9,0 glacé. On centrifuge à 110 g, pendant 10 minutes et on décante. On ajoute à nouveau de la prostacycline, en solution dans de l'hydroxyde de sodium 50 mM à pH 12, de manière à avoir une concentration finale de 200 ng/ml. On centrifuge à nouveau le P3P à 800 g pendant 10 minutes. On élimine le plasma pauvre en plaquettes et on met le culot en suspension dans un volume de tyrode contenant 200 ng/ml de prostacycline, volume égal au volume initial de
P3P. On centrifuge cette suspension à 800 g pendant 10 minutes. On recommence une seconde fois et dans les mêmes conditions, la mise en suspension du culot et la centrifugation. On remet le culot final en suspension dans une solution de tyrode sans prostacycline et on laisse au repos pendant 2 heures pour permettre l'élimination complète de la prostacycline.On induit l'agrégation de ces plaquettes avec de la thrombine humaine à la concentration finale de 0,3 unités NIH/ml. On enregistre les variations de densité optique au moyen d'un agrégomètre à 4 canaux. On ajoute le composé à tester ou son véhicule à la suspension de plaquettes (volume maximal ajouté de 3 ul), 2 minutes avant l'addition de thrombine. On détermine la concentration qui inhibe l'agrégation de 50 t (CI50).

Les composés de l'invention peuvent être utiles dans toutes les indications cliniques liées à la thrombose ou dans celles où des complications thrombotiques pourraient intervenir.

A cet effet ils peuvent être présentés sous toutes formes appropriées à l'administration orale, parentérale ou intraveineuse, telles que comprimés, dragées, gélules, capsules, suspensions ou solutions buvables ou injectables, etc. en association avec des excipients convenables. Toutes ces formes sont dosées pour permettre une administration de 1 à 1000 mg par jour et par patient, en une ou plusieurs doses.

Claims (7)

Revendications

1. Composés de formule (I)

dans laquelle

R représente soit un groupe (C1-C4)alkyle, soit un groupe phényl(C1-C4)alkyle, soit un groupe -NR1R2 (où R1 est un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle et R2 un groupe (C1-C4)alkyle ou un groupe phényl(C1-C4)alkyle), soit un groupe pyrrolidin-1-yle, soit un groupe pipéridin-1-yle, soit un groupe

où Z est un atome d'oxygène, un atome de soufre, un groupe -NR6 (où R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle), un groupe -SO ou un groupe -S02 et

R5 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle, sous forme d'isomères optiques ou géométriques, purs ou sous forme de mélanges, ainsi que leurs sels d'addition aux acides et aux bases pharmaceutiquement acceptables.

2. Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que ce sont des dérivés de D-phénylalanyl-L-prolinamide de configuration [2 (R)].

3. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (VII)

dans laquelle R est tel que défini dans la revendication 1 et

X représente soit le groupe pyrrolidin-1-yl-2,5-dione, soit le groupe 2-méthyl-propyloxycarbonyle avec un composé de formule (VIII)

dans laquelle R3 et R4 représentent ensemble le résidu d'un composé dihydroxylé et R5 est tel que défini dans la revendication 1 et on obtient un composé de formule (IX)

que l'on traite en milieu acide pour obtenir un composé de formule (I).

4. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (VIIa)

dans laquelle R est tel que défini dans la revendication 1 et

X représente soit le groupe pyrrolidin-1-yl-2,5-dione, soit le groupe 2-méthyl-propyloxycarbonyle avec un composé de formule (VIII)

dans laquelle R3 et R4 représentent ensemble le résidu d'un composé dihydroxylé et R5 est tel que défini dans la revendication 1 et on obtient un composé de formule (IXa)

que l'on traite en milieu acide pour obtenir un composé de formule (I).

5. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1 de formule (Ib)

dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (XI)

avec un composé de formule (VIII)

dans laquelle R3 et R4 représentent ensemble le résidu d'un composé dihydroxylé et R5 est tel que défini dans la revendication 1 pour obtenir un composé de formule (IXb)

que l'on traite en milieu acide pour obtenir un composé de formule (Ib).

6. Médicament caractérisé en ce qu'il contient un composé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2.

7. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient un composé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2 en association avec tout excipient approprié.