FR2599639A1 - Procede et appareil pour la fabrication de perles de polymere - Google Patents
Procede et appareil pour la fabrication de perles de polymere Download PDFInfo
- Publication number
- FR2599639A1 FR2599639A1 FR8707874A FR8707874A FR2599639A1 FR 2599639 A1 FR2599639 A1 FR 2599639A1 FR 8707874 A FR8707874 A FR 8707874A FR 8707874 A FR8707874 A FR 8707874A FR 2599639 A1 FR2599639 A1 FR 2599639A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- alginate
- solution
- substance
- biologically active
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5005—Wall or coating material
- A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
- A61K9/5036—Polysaccharides, e.g. gums, alginate; Cyclodextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
- A01N25/26—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests in coated particulate form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1635—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5089—Processes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
- B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/02—Dehydrogenating; Dehydroxylating
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
PROCEDE ET APPAREIL POUR LA PRODUCTION DE PERLES COMPRENANT UNE ENVELOPPE EXTERIEURE EN ALGINATE D'UNE DIMENSION DE L'ORDRE DU MILLIMETRE, QUI CONTIENT UNE SUBSTANCE BIOLOGIQUEMENT ACTIVE DANS UN LIQUIDE OU DANS UN GEL, OU BIEN UNE HUILE OU UNE SUBSTANCE HUILEUSE. LA SUBSTANCE BIOLOGIQUEMENT ACTIVE PEUT ETRE UNE SUSPENSION DE CELLULES DANS UN GEL DE POLYMERE, OU BIEN UNE SUSPENSION DE PARTICULES ACTIVES IMMOBILISEES DANS UN TEL GEL. LE DISPOSITIF COMPREND TROIS CONDUITS DE FLUIDE A DEBIT INDIVIDUELLEMENT REGLABLE. UN CONDUIT 12 15 AMENE LA MATIERE POUR CONSTITUER L'ENVELOPPE, UN AUTRE 11, 14 AMENE LA MATIERE POUR LE NOYAU ET LE TROISIEME 13, 16 AMENE UN GAZ. LE NOYAU PEUT EGALEMENT ETRE UNE PHASE HUILEUSE CONTINUE CONTENANT TOUTE MATIERE DESIREE EN SUSPENSION, EN EMULSION D'EAU DANS L'HUILE OU ANALOGUE. POUR CERTAINES APPLICATIONS, LE NOYAU PEUT ETRE STABILISE ET ON PEUT ENLEVER L'ENVELOPPE D'ALGINATE.
Description
La présente invention se rapporte à un dispositif pour la fabrication de
perles d'alginate qui peuvent être produites à une dimension sensiblement constante. Les perles comprennent une enveloppe extérieure en alginate et une partie centrale qui peut être un liquide ou un gel ou une émulsion d'eau dans l'huile, ce gel ou ce liquide contenant des cellules captives en suspension ou des particules biologiquement actives en suspension. Le noyau peut également
être composé d'une huile ou d'une substance huileuse pouvant 10 également contenir une substance biologiquement active.
Si on le désire, on peut ensuite enlever l'enveloppe d'alginate. Les perles peuvent être fabriquées à des
dimensions de l'ordre de grandeur du millimètre et on peut fabriquer des perles dans une plage de dimension sensible15 ment constante désirée.
Le dispositif suivant l'invention comprend trois conduits par lesquels on amène une solution d'alginate, une solution ou suspension qui constitue ensuite le noyau de la perle, et un courant de gaz. Les perles résultantes tom20 bent dans une solution prévue pour solidifier l'enveloppe d'alginate des perles, qui sont ensuite lavées. La matière active peut être présente dans un prépolymère et, dans ce cas, on peut mettre la perle, après durcissement de l'enveloppe d'alginate, en contact avec un milieu apte à poly25 mériser le prépolymère. Bien qu'elle soit principalement destinée à la fixation de cellules et autres substances biologiquement actives dans des perles de dimension millimétrique, la même enveloppe d'alginate peut également être fabriquée pour contenir une huile, telle qu'une huile végé30 tale ou de paraffine, ou des suspensions ou émulsions à
base d'un milieu hydrophobe insoluble dans l'eau.
On s'intéresse beaucoup, depuis quelques années, à l'immobilisation de cellules entières. On connaît plusieurs procédés d'immobilisation de cellules entières (pour 35 récapitulation, voir J. Klein et F. Wagner, App. Biochem. Bioeng. 4, 12-51, 1983). Les avantages inhérents aux systèmes de cellules immobilisées, par exemple la réutilisation de biocatalyseur, la souplesse de conception du réacteur et la stabilité de fonctionnement sensiblement meil5 leure, ont conduit au développement et à l'utilisation de systèmes de cellules immobilisées, au laboratoire, sur
installation pilote et à l'échelle industrielle (pour récapitulation, voir P. Linko & Y. Linko, CRC Critical Reviews in Biotechnology, 1, 289- 338, 1984).
La méthode la plus courante d'immobilisation de cellules est par capture sur gel. On met en suspension les cellules dans une solution aqueuse d'un monomère ou d'un prépolymère puis, par changement physique ou chimique tel que refroidissement, modification de pH, introduction d'un 15 déclencheur de polymérisation, on transforme la solution
en un gel pour emprisonner physiquement les cellules.
Depuis quelques années, on s'intéresse beaucoup à l'immobilisation de cellules dans un gel par réticulation
de prépolymères synthétiques (S. Fukui & A. Tanaka, Ad.
Biochem. Eng. 29, 2-33, 1984). La demanderesse a développé dans ses laboratoires une nouvelle technique d'immobilisation sur gel, basée sur une réticulation chimique d'un polyacrylamide linéaire, soluble dans l'eau, partiellement
substitué avec des groupes acylhydrazide.
Le procédé est basé sur la mise en suspension de
cellules, organelles ou enzymes,dans une solution de poly.acrylamidehydrazide (PAAH) et réticulation par addition de quantités réglées de dialdéhyde (par exemple glyoxal).
Après durcissement, on fragmente mécaniquement le bloc de 30 gel résultant. On a trouvé que cette technique est utile pour l'immobilisation de bactéries, levures, cellules végétales, microsomes du foie et enzymes (pour récapitulation,
voir A. Freeman, Annal, N.Y. Acad.: Sci. 434, 418-426 1984).
Les avantages de cette technique comprennent une rétention 35 d'activité (90% et plus de l'activité d'entrée), une forte porosité, une bonne stabilité chimique, biologique et mécanique, et une stabilisation des cellules immobilisées à
l'égard des solvants organiques.
La présente invention a pour objet un dispositif pour la fabrication de perles de dimension sensiblement constante, d'un diamètre de l'ordre du millimètre, comprenant une enveloppe extérieure d'alginate et contenant une suspension de cellules ou des cellules emprisonnées dans un gel, ou une matière biologiquement active, telle qu'enzymes 10 ou anticorps, immobilisée sur un élément porteur approprié,
à l'intérieur de ladite enveloppe.
L'invention vise également un dispositif pour la préparation de macrocapsules comprenant une enveloppe extérieure d'alginate contenant des gouttelettes d'un com15 posant hydrophobe, tel qu'huile végétale ou de paraffine,
ou des solutions, émulsions ou suspensions à base d'un milieu hydrophobe non miscible à l'eau.
Conformément à l'invention, les objectifs cidessus sont atteints par un dispositif comprenant trois 20 conduits qui se terminent à un orifice de sortie commun, l'un de ces conduits amenant une suspension de cellules,ou une suspension de petites particules auxquelles est fixée une matière biologiquement active, dans un milieu liquide quipeut être un prépolymère polymérisable, le deuxième 25 conduit amenant une solution aqueuse d'alginate, et le troisième conduit amenant un flux d'un gaz, le débit de chacun de ces conduits étant réglable à volonté. De préférence, le conduit intérieur amène la suspension de cellules ou de particules. Conformément à un mode préféré de réalisation de l'invention, les trois conduits sont sous la forme de trois
pièces tubulaires concentriques, la pièce intérieure -amenant lasuspension, la deuxième l'alginate, et la troisième le gaz.
On peut régler la distance exacte des sorties 35 les unes par rapport aux autres, ce qui permet d'obtenir,
en combinaison avec le réglage du débit de chacun des trois composants, des perles de dimension, d'épaisseur d'enveloppe et de cadence de production prédéterminées.
L'invention vise en outre un procédé pour la fabrication de telles perles d'alginate.
D'autres objets et avantages de l'invention apparaîtront à la lumière de la description de ses modes
préférés de réalisation, non limitatifs, illustrés sur les dessins annexés dans lesquels: Fig. 1 est une coupe schématique longitudinale, non à l'échelle, d'un dispositif conforme à l'invention; Fig. 2 illustre la comparaison des granulométries de préparations de levure immobilisées sur PAAH; en haut à droite: procédé antérieur, une fragmentation; en haut 15 à gauche: procédé antérieur, deux fragmentations; en bas: préparation de perle; Fig. 3 est un graphique illustrant la conversion de glucose en éthanol par Saccharomyces cerevisiae en suspension libre et dans le cas d'immobilisation dans des per20 les de PAAH; Fig. 4 est un graphique illustrant la Xl-déshydrogénation d'hydrocortisones par Arthobacter simplex libre et immobilisé dans des perles de PAAH; et Fig. 5 illustre la courbe de libération de Cyolane à partir de perles d'alginate de Ca en fonction d'un
nombre de jours,et la vitesse de libération.
Comme représenté sur la figure 1, le dispositif injecteur conforme à l'invention comprend trois pièces tubulaires coaxiales 11, 12 et 13, appelées "aiguilles" dans 30 ce qui suit, le repère 14 désignant l'entrée de la suspension de cellules,le repère 15 l'entrée de la solution d'alginate et le repère 16 l'entrée du flux de gaz. Chacun de ces composants peut être réglé à volonté, en ce qui concerne la vitesse d'écoulement et le volume. On peut régler la dis35 tance des extrémités des aiguilles, définissant les sorties, par modification à volonté des distances h1 et h2. Le dispositif expérimental illustré a une longueur totale de 5 à cm environ et les dimensions exactes des composants sont indiquées ci-après. Il est clair que ces valeurs sont don5) nées à titre d'illustration seulement et on peut apporter diverses modifications à la disposition et à la dimension
des composants.
Les cellules emprisonnées dans des perles de PAAH peuvent être facilement préparées en grande quantité, dans 10des conditions stériles et anaérobies, par un procédé continu. Les cellules emprisonnées dans des perles présentent
les avantages inhérents à la technique au PAAH: rétention d'une activité élevée, forte porosité et bonne stabilité.
Les perles sont très uniformes et on peut régler leur di15 mension dans la plage de 1 à 5 mm en diamètre. La couche d'alginate occupe 5 à 10% environ du volume total. L'aiguille intérieure reçoit une alimentation réglée d'une suspension de cellules dans du PAAH (ou une autre solution) par l'orifice d'entrée 14. Cette aiguille est placée dans une aiguille de plus grand diamètre qui reçoit une solution d'alginate de sodium par l'orifice d'entrée 15. Les deux aiguilles sont tenues au centre d'une troisième aiguille coaxiale qui reçoit un flux réglable d'air ou d'un autre gaz, par l'orifice d'entrée 16. On peut régler les distances exac25 tes entre les aiguilles, par modification des distances h1 et h2. L'appareil décrit a une longueur de-5 à 10 cm environ et il est maintenu mécaniquement dans une position verticale. Par réglage du débit de la suspension de cellules, 30 de la solution d'alginate et du gaz, on forme des gouttelettes comprenant un noyau intérieur, constitué par l'alimentation 14, encapsulé dans une enveloppe extérieure provenant de l'alimentation 15. Ces gouttelettes sont détachées et étirées vers le bas par le flux de gaz venant de
l'alimentation 16 et elles sont de dimension très constante.
Lorsqu'on introduit une solution d'alginate par l'entrée 15, l'enveloppe est gélifiée par contact avec une solution de CaCl2. Les perles tombent de l'injecteur dans une solution de CaCl2 et on les laisse durcir, puis on remplace le milieu par un tampon contenant du glyoxal.Le glyoxal traverse la couche d'alginate et, par suite, la solution intérieure de PAAH est réticulée. Après lavage, les perles sont prêtes à l'emploi. Le procédé permet l'immobilisation d'une grande
variété de cellules, en perles de polymère de dimension 10 constante, réticulées et chimiquement stables.
D'une manière analogue, par introduction en 14
d'huiles, de solutions à base d'huile, d'émulsions ou de suspensions dansdes huiles, on obtient des macrocapsules constituées d'une enveloppe extérieure d'alginate de cal15 cium et remplies de gouttelettes intérieures à base d'huile.
L'invention est mieux illustrée par les exemples ci-après.
EXEMPLE 1
Conversion de glucose en alcool par Saccaromyses cerevisiae 20 immobilisé dans des perles de PAAH.
a) Préparation des solutions: 1. Suspension de cellules Dans une solution aqueuse à 5% (p/v) de polyacrylamide-hydrazide (poids moléculaire moyen de 100 000 contenant 0,8 25 meq de groupes acryl-hydrazide), on ajoute une quantité prépesée de levures, fournies par "Paka" Industries Ltd., Bat-Yam, Israel, dans un rapport de 0,5 g (p/v) de levures pour 20 ml de mélange réactionnel formant un gel, et on
homogénéise la suspension par agitation magnétique pendant 30 15 minutes à température ambiante.
2. Solution d'alginate de sodium On prépare une solution à 3% (p/v) par dissolution d'alginate de sodium (BDH) dans l'eau sous agitation magnétique
pendant 24 heures à température ambiante. Cette solution 35 est dégazée sous vide avant utilisation.
b) Spécifications du dispositif d'injection (voir la fig.1) Dimensions et débits: 1. Tube intérieur: diamètre intérieur A 0,35 mm - 2,0 mm débit 0, 7 - 0,9 ml/mn 2. Tube intermédiaire: diamètre intérieur B 2,2 mm - 3,0 mm débit 0,5 - 0,7 ml/mn 3. Tube extérieur: diamètre intérieur C 2,0 mm - 5, 0 mm débit 2,5 - 4,0 ml/mn Distances entre les sorties des tubes: h1 (voir schéma 1) 2,0 - 2,2 cm h2 2,2 - 2,5 cm c) Alimentations par les tubes A, B et C 1. Par le tube A: cellules en suspension dans une solution aqueuse de polyacrylamide-hydrazide (3 à 5% en poids par
volume) ou dans une solution tampon appropriée.
2. Par le tube B: solution d'alginate de sodium (BDH à 20 2-4% en poids par volume).
3. Par le tube C: azote ou air.
d) Immobilisation de levures dans des perles de PAAH On introduit la suspension de levure homogénéisée par le tube intérieur A du dispositif, au débit indiqué ci-dessus. 25 La solution d'alginate et l'air sont fournis aux débits indiqués. On collecte les gouttes formées, dans une solution aqueuse de CaCl2 à 1% (p/v) et, après une heure d'incubation, on remplace cette solution par 50 ml de tampon phosphate (50 mM, pH = 7) contenant 2 ml de solution de glyoxal 30 à 5% (dans un tampon phosphate à 50 mM, pH = 7). On laisse le noyau de PAAH se prendre en gel, par incubation pendant 24 heures à 4 C. On lave ensuite les perles avec un tampon
citrate froid à 0,3% (p/v), à pH 5.
e) Essai Des perles de gel,de 1,5 à 2,0 mm de diamètre, contenant 0,5 gramme de levures immobilisées,sont lavées trois fois avec ml d'un milieu froid contenant 10% (p/v) de glucose, 0,15%(p/v) d'extrait de levure, 0, 25% (p/v) de NH4Cl, 0,55%
(p/v) de KH2PO4, 0,025% (p/v) de MgSO4.7H20, 0,01% (p/v) 5 de NaCl, 0, 001% (p/v) de CaCl2 et 0,3% (p/v) d'acide citrique, pH = 5.
Finalement, on ajoute le même milieu,à un volume final de 50 ml. On transfère ensuite ce dernier mélange réactionnel dans un vase erlenmeyer à chicane de 125 ml 10 qu'on secoue dans un secoueur alternatif à 100 coups/mn à 30 C, en permettant au CO2 dégagé de s'échapper par un
petit orifice.
On prélève des échantillons de 1 ml pour effectuer
des déterminations d'éthanol et de glucose, pendant 20 heu15 res. Dans ces conditions, on observe une conversion complète du glucose en éthanol, en 20 heures d'incubation.
Détermination de l'éthanol:
La concentration en éthanol dans les échantillons est déterminée par G.C.
Détermination du glucose La concentration en glucose est déterminée à l'aide de la
trousse "Glucostat" de Sigma.
Dans les conditions employées, la conversion du glucose par la levure immobilisée en perles de PAAH est la même que cel25 le du témoin de levure en suspension libre (voir la figure 2).
EXEMPLE 2
1-déshydroqénation d'hydrocortisone par des cellules d'Arthrobacter simplex immobilisées en perles de PAAH 30 a) Culture et récolte des cellules 1. Une colonie d'Arthrobacter simplex (ATCC 6946) est raclée à partir d'agar couché, dans 30 ml d'une solution stérilisée de bouillon nutriant (oxoide CM 15) à 8g/l, dans une bouteille universelle fermée de 250 ml, et on
laisse incuber pendant 48 heures à 30 C sur un secoueur ro-
tatif à 150 t/mn. Dans un erlenmeyer à chicane de 2,5 1, on ajoute 2,5 g d'extrait de levure, 0,75 g de (NH4)2SO4, 0,66 g de K2HPO4.3H20, on dissout dans 225 ml d'eau, avec 0,25 ml d'une solution d'oligo-éléments comprenant: ZnSO4.7H20 1,44 g/l
MMSO4.4H20 1,12
H3BO3 0,31
CuSO4.5H20 0,63 Na2Mo4.2H20 0,25
2 4' 2 02
COCl2.6H20 0,24 Kl 0,42 " FeSO4.7H20 2,78 H2SO4 1-2 ml
et on stérilise la solution finale à 121 C.
En parallèle, 3,75 g de glucose et 25 mg de MgCl2 sont
dissous dans 25 ml de H20, stérilisés et ajoutés à la solution ci-dessus.
On transfère 1 ml de la suspension de cellules dans le flacon et on laisse incuber le flacon pendant 24 heures à 20 30 C sur un secoueur rotatif à 210 t/mn. On utilise 5 ml de cette suspension pour une inoculation dans un erlenmeyer à chicane de 2,5 1,dans le même milieu, puis incubation pendant 16,5 h à 30'C sur un secoueur rotatif. Après cette incubation, on ajoute 0,25 g d'hydrocortisone en suspension 25 fine (sous agitation magnétique pendant une nuit) dans 5 ml d'une solution à 2, 5% (p/v) de Tween 80 dans l'eau. On laisse l'induction se développer pendant 6,5 h.On collecte les cellules par centrifugation, on les congèle dans l'azote
liquide et on les stocke à -20 C.
2. Suspension de cellules Avant l'utilisation, une quantité pesée de cellules congelées est transférée dans du tris à 0,05 M refroidi à la
glace, à pH 7,8 (0,1 g WW (20 mg dcw) cellules par ml),et agitée magnétiquement sur de la glace pendant 30 minutes.
La suspension est ensuite homogénéisée par un homogénéiseur verre-téflon, pour assurer la formation d'une suspension uniforme.
b) Immobilisation des cellules en perles de PAAH.
Dans 10 ml de solution de prépolymère (poids moléculaire 100 000) à 5%, sous agitation magnétique et avec refroidissement sur de la glace, on ajoute 0,4 ml de suspension de cellules, puis on homogénéise la suspension de cellules par agitation magnétique. La suspension fine de cellules dans le prépolymère est ensuite traitée pour fabriquer des 10 perles de PAAH comme dans l'exemple 1. Après prise en gel pendant une minute, dans un tampon phosphate 0,05 M (pH 7,8, contenant 2 ml de solution de glyoxal à 5%), on lave les cellules immobilisées en perles de PAAH trois fois avec un tampon tris 0,05 M (pH 7,8) et on porte à un volume fi15 nal de 40 ml avec le même tampon.c) Essai On dissout 40 g d'hydrocortisone dans 4 ml d'éthylène glycol, puis on ajoute progressivement 4 ml d'eau et 2 ml de tampon tris 0,25 M, pH 7,8. On transfère ensuite le substrat dans un erlenmeyer à chicane de 250 ml contenant les cellules immobilisées en perles de PAAH susmentionnées. On ajoute du tampon tris 0,05 M, pH 7,8, pour amener le volume final à 50 ml. On fait ensuite incuber le flacon dans un secoueur rotatif à 30 C et 150 t/mn. On extrait le substrat et le produit avec CH2C12 et on procède à l'analyse par HPLC. Dans
ces conditions, on observe une conversion de 50% d'hydrocortisone en prednisolone, en trois jours (voir la figure 4).
EXEMPLE 3
Perles contenant des gouttelettes d'huile 1. Par application d'huile de paraffine liquide (Cat. N 29437, BDH, Poole, England) à un débit de 4,5 ml/mn par le tube A et d'une solution d'alginate de sodium (BDH) à 3% (p/v) à un débit de 12 ml/mn par le tube B et d'azote-à un débit de 6 1/mn par le tube C, ainsi que d'une solution 35 de CaCl2 à 2% (p/v) dans l'eau ordinaire, on obtient des
gouttelettes d'huile de paraffine encapsulées dans une enveloppe d'alginate de calcium.
2. D'une manière analogue, par utilisation d'huile de mals à 0,4 ml/mn par le tube A, d'une solution d'al5 ginate de sodium à 3% à 2,0 ml/mn par- le tube B et d'azote à 10 1/mn par le tube C, on obtient des gouttelettes d'huile de mais encapsulées dans une enveloppe d'alginate de calcium. D'une manière analogue, on encapsule une solution
de (0-carotène dans l'huile de mais, à l'intérieur d'une 10 enveloppe d'alginate de calcium.
EXEMPLE 4
Préparation d'une composition à libération réglée pour insecticides systémiques Par utilisation de "Cyolan" ou 2-(diéthoxyphosphinylimino)15 1,3 dithiolane (American Cyanamid Co., USA), en solution à 10 mg/ml dans une solution d'huile de mais-alcool 1-dodécylique (Cat. N 29276, BDH) dans le rapport 40:60 (v/v), à 40 C et à un débit de 0,4 ml/mn par le tube A, d'une solution d'alginate de sodium à 3% à 2,0 ml/mn par le tube 20 B, et d'azote à 10 1/mn par le tube C, on peut obtenir une solution de cyolan solide dans de l'huile de mais-dodécanol, encapsulée dans une enveloppe d'alginate (dans une
solution à 3% de CaCl2 dans l'eau ordinaire).
Après une heure d'incubation pour le durcissement 25 dans la solution de CaCl2, on transfère les perles dans du méthanol pendant 5 minutes puis dans l'hexane pendant 1 minute. On sépare les perles par filtration et on place 8 g de perles (WW) dans 50 ml d'eau distillée, dans un
bécher. On prélève journellement des échantillons puis on 30 lave les perles avec 20 ml d'eau et on procède à une nouvelle incubation dans 50 ml d'eau distillée neuve. On détermine la concentration en Cyolan dans l'eau, par HPLC.
Les échantillons (5 gl) sont contrôlés sur une colonne Lichrochart RP-8 (4 g) de 12,5 x 0,4 cm (Merck, Darmstadt, 35 FRG) en utilisant du méthanol-eau, (60:40) comme phase mobile à un débit de 0,6 ml/mn (temps de séjour 4 mn). Les
témoins et les échantillons sont détectés à 245 nm. La courbe de libération du Cyolan dans ces conditions est représentée sur la figure 5.
Il est entendu que des modifications de détail peuvent être apportées dans la forme et la mise en oeuvre
du procédé et de l'appareil suivant l'invention, sans sortir du cadre de celle-ci.
Claims (9)
1. Dispositif pour la fabrication de perles, d'une dimension de l'ordre du millimètre, comprenant une enveloppe d'alginate et un noyau sous forme liquide ou de gel de substance biologiquement active ou d'une substance 5 huileuse, caractérisé en ce qu'il comprend trois conduits de fluide (11, 12,13) réglables individuellement,et des moyens pour régler la distance entre les extrémités respectives de ces conduits à un orifice de sortie coaxiale commun, le conduit intérieur servant à l'amenée de la substance constituant le noyau, le deuxième conduit servant à l'amenée de la solution d'alginate et le troisième
conduit étant un conduit de gaz.
2. Dispositif suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les conduits sont sous la forme de trois 15 pièces tubulaires coaxiales comportant une sortie commune
dirigée vers le bas.
3. Procédé pour la fabrication de perles d'alginate d'une dimension de l'ordre du millimètre, comprenant une enveloppe d'alginate et un noyau d'une substance biolo20 giquement active ou d'une substance huileuse, caractérisé en ce qu'il consiste à fournir simultanément des flux séparés de la substance de noyau par l'intermédiaire d'un conduit du dispositif suivant la revendication 1, de la solution d'alginate par l'intermédiaire du deuxième conduit, 25 et d'un gaz par l'intermédiaire du troisième conduit, et
à laisser tomber les gouttes ainsi obtenues dans une solution capable de coaguler l'alginate et à laisser les perles dans cette solution de façon à ce que l'enveloppe durcisse.
4. Procédé suivant la revendication 3, caracté30 risé en ce que la substance du noyau est une suspension de cellules, d'organelles ou de particules d'une substance biologiquement active, dans une solution d'un prépolymère
qui est ensuite polymérisé.
5. Procédé suivant la revendication 4, caracté-
risé en ce que le prépolymère est le polyacrylamide-hydrazide (PAAH) qui est ensuite réticulé au moyen de glyoxal.
6. Procédé suivant l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisé en ce que la substance biologi5 quement active est choisie parmi des bactéries, champignons,
cellules de levure, cellules végétales, enzymes et anticorps.
7. Procédé suivant l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisé en ce que la substance active
est emprisonnée dans une matrice de polymère et en ce que 10 l'enveloppe d'alginate est ensuite enlevée.
8. Perles de dimension sensiblement constante de l'ordre du millimètre, caractérisées en ce qu'elles
contiennent un noyau de substance biologiquement active et une enveloppe extérieure d'alginate, obtenues par un procé15 dé suivant l'une quelconque des revendications 3 à 7.
9. Perles à enveloppe d'alginate d'une dimension de l'ordre du millimètre, caractérisées en ce qu'elles contiennent un noyau d'une suspension de protéines biologiquement actives ou de cellules ou d'une telle substance 20 emprisonnée dans une matrice de polymère qui ne nuit pas
à l'activité biologique de ces matières.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IL79052A IL79052A0 (en) | 1986-06-06 | 1986-06-06 | Device and process for production of alginate-shell beads containing biologically active material |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FR2599639A1 true FR2599639A1 (fr) | 1987-12-11 |
FR2599639B1 FR2599639B1 (fr) | 1989-12-01 |
Family
ID=11056842
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FR878707874A Expired FR2599639B1 (fr) | 1986-06-06 | 1987-06-05 | Procede et appareil pour la fabrication de perles de polymere |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS63146792A (fr) |
DE (1) | DE3718934A1 (fr) |
FR (1) | FR2599639B1 (fr) |
GB (1) | GB2192171B (fr) |
IL (1) | IL79052A0 (fr) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1989010786A2 (fr) * | 1988-04-22 | 1989-11-16 | Microdrop, Inc. | Procede de formation et d'utilisation de microgouttelettes |
WO1991010425A1 (fr) * | 1990-01-08 | 1991-07-25 | Brown University Research Foundation | Systemes d'extrusion de capsules de cellules |
EP0478097A1 (fr) * | 1990-08-24 | 1992-04-01 | Vorlop, Klaus-Dieter | Procédé de préparation de biocatalyseurs |
US5232712A (en) * | 1991-06-28 | 1993-08-03 | Brown University Research Foundation | Extrusion apparatus and systems |
US5283187A (en) * | 1987-11-17 | 1994-02-01 | Brown University Research Foundation | Cell culture-containing tubular capsule produced by co-extrusion |
EP0651996A1 (fr) * | 1993-11-08 | 1995-05-10 | Giovanni Brotzu | Equipement et méthode pour la préparation de microcapsules polymériques contenant des cellules productrices d'hormones |
US5418154A (en) * | 1987-11-17 | 1995-05-23 | Brown University Research Foundation | Method of preparing elongated seamless capsules containing biological material |
WO2004064971A2 (fr) * | 2003-01-23 | 2004-08-05 | Inotech Ag | Fabrication de microcapsules dotees d'une resistance mecanique amelioree |
WO2012089820A1 (fr) * | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Capsum | Serie de capsules comprenant au moins une goutte de phase interne dans une goutte de phase intermediaire et procede de fabrication associe |
Families Citing this family (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2668081B1 (fr) * | 1990-10-19 | 1994-11-18 | Lvmh Rech | Procede et appareil de fabrication de particules solides a partir d'un materiau solidifiable en presence d'un agent de solidification en de bons rendements. |
FR2673122B1 (fr) * | 1991-02-25 | 1994-09-09 | Moet & Chandon | Gel ionotrope deficient en entite ionique de gelification, procede de preparation d'un tel gel et utilisation de celui-ci notamment dans un procede d'elaboration de vin effervescent. |
US5800829A (en) * | 1991-04-25 | 1998-09-01 | Brown University Research Foundation | Methods for coextruding immunoisolatory implantable vehicles with a biocompatible jacket and a biocompatible matrix core |
DE69221484T2 (de) * | 1991-04-25 | 1998-02-19 | Univ Brown Res Found | Implantierbare, biokompatible immunisolator-trägersubstanz zum abgeben ausgesuchter, therapeutischer produkte |
GB9310557D0 (en) * | 1993-05-21 | 1993-07-07 | Smithkline Beecham Plc | Novel process and apparatus |
DE4338585A1 (de) * | 1993-11-11 | 1995-05-18 | Graef Jordt Steffen | Injektordüse |
US6099876A (en) * | 1994-10-11 | 2000-08-08 | Yissum Research Development Co. Of The Hebrew University Of Jerusalem | Temperature-stable liquid cells |
JPH1147581A (ja) * | 1997-07-30 | 1999-02-23 | Takasago Internatl Corp | 徐放性カプセル及びその製造方法 |
WO2000073485A1 (fr) * | 1999-05-28 | 2000-12-07 | Inotech Ag | Procede et dispositif d'extration in-situ et d'alimentation |
US7097868B2 (en) | 2001-08-23 | 2006-08-29 | Bio-Dar Ltd. | Stable coated microcapsules |
NO20021592D0 (no) | 2002-04-04 | 2002-04-04 | Fmc Biopolymer As | Polysakkaridkapsler og fremgangsmåte ved fremstilling derav |
CA2413611C (fr) * | 2002-12-05 | 2012-11-13 | Bayer Inc. | Methode de production de caoutchouc butyle a haute teneur en isoprene |
US7258428B2 (en) | 2004-09-30 | 2007-08-21 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Multiple head concentric encapsulation system |
US7914891B2 (en) | 2005-12-28 | 2011-03-29 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wipes including microencapsulated delivery vehicles and phase change materials |
JP5372525B2 (ja) | 2006-03-03 | 2013-12-18 | エフ エム シー コーポレーション | カプセルの製造方法および該製造方法により製造されるカプセル |
US7497351B2 (en) | 2006-05-30 | 2009-03-03 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wet wipe dispensing system |
US7654412B2 (en) | 2006-05-30 | 2010-02-02 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wet wipe dispensing system for dispensing warm wet wipes |
US8192841B2 (en) | 2006-12-14 | 2012-06-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Microencapsulated delivery vehicle having an aqueous core |
US7924142B2 (en) | 2008-06-30 | 2011-04-12 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Patterned self-warming wipe substrates |
FR2939012B1 (fr) * | 2008-12-01 | 2015-03-27 | Capsum | Procede de fabrication d'une serie de capsules, et serie de capsules associee |
FR2955257B1 (fr) * | 2010-01-15 | 2012-06-01 | Capsum | Procede de fabrication de capsules avec une hauteur de chute controlee. |
DE102012108621B4 (de) | 2012-09-14 | 2017-01-12 | BIOCARE Gesellschaft für biologische Schutzmittel mbH | Locksysteme für Schädlinge und deren Verwendung |
BR112016028350B1 (pt) * | 2014-06-04 | 2021-02-02 | Likarda, LLC | método para encapsular material biológico |
KR101785300B1 (ko) * | 2015-12-23 | 2017-11-15 | 대상 주식회사 | 미생물 균체 고정화 장치 및 이를 이용한 미생물 균체 고정화 방법 |
CN106040115B (zh) * | 2016-07-05 | 2018-10-09 | 中国工程物理研究院激光聚变研究中心 | 一种三孔同轴式双重乳粒发生装置 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3933679A (en) * | 1972-01-14 | 1976-01-20 | Gulf Oil Corporation | Uniform microspheroidal particle generating method |
GB1595054A (en) * | 1977-11-14 | 1981-08-05 | Metal Box Co Ltd | Capsules containing micro-organisms |
US4379682A (en) * | 1981-04-29 | 1983-04-12 | Ortho Diagnostics, Inc. | Reaction apparatus for the formation of microspheres or microcapsules |
US4422985A (en) * | 1982-09-24 | 1983-12-27 | Morishita Jintan Co., Ltd. | Method and apparatus for encapsulation of a liquid or meltable solid material |
US4481157A (en) * | 1982-04-27 | 1984-11-06 | Morishita Jintan Co., Ltd. | Method and apparatus for production of microcapsules |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1564452A (en) * | 1976-09-23 | 1980-04-10 | Unilever Ltd | Process for preparing encapsulated drops of fruit material |
DE2746489C2 (de) * | 1977-10-15 | 1982-12-30 | Hans Dr. 3300 Braunschweig Junginger | Verfahren zum Herstellen von Mikrokapseln mit Flüssigkeits- und/oder mit Feststoff-Füllungen durch Sprühtrocknung unter Verwendung einer Dreifachdüse |
GB2119737B (en) * | 1979-03-28 | 1984-05-10 | Damon Corp | Encapsulation of viable tissue |
US4352883A (en) * | 1979-03-28 | 1982-10-05 | Damon Corporation | Encapsulation of biological material |
US4334027A (en) * | 1980-02-25 | 1982-06-08 | Joachim Klein | Preparation of immobilized enzymatically-active substance |
US4389419A (en) * | 1980-11-10 | 1983-06-21 | Damon Corporation | Vitamin encapsulation |
NO161446C (no) * | 1981-03-13 | 1989-08-16 | Damon Biotech Inc | Fremgangsmaate for dyrking av celler som er avhengige av forankring. |
NO163060C (no) * | 1981-03-13 | 1990-03-28 | Damon Biotech Inc | Fremgangsmaate for fremstilling av substanser som dannes av levende celler som produserer interferoner eller antistoffer. |
US4663286A (en) * | 1984-02-13 | 1987-05-05 | Damon Biotech, Inc. | Encapsulation of materials |
SE8405105L (sv) * | 1984-05-24 | 1985-11-25 | Damon Biotech Inc | Sett for screening av celler |
-
1986
- 1986-06-06 IL IL79052A patent/IL79052A0/xx not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-06-04 JP JP62140715A patent/JPS63146792A/ja active Pending
- 1987-06-05 FR FR878707874A patent/FR2599639B1/fr not_active Expired
- 1987-06-05 GB GB8713259A patent/GB2192171B/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-06-05 DE DE19873718934 patent/DE3718934A1/de not_active Ceased
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3933679A (en) * | 1972-01-14 | 1976-01-20 | Gulf Oil Corporation | Uniform microspheroidal particle generating method |
GB1595054A (en) * | 1977-11-14 | 1981-08-05 | Metal Box Co Ltd | Capsules containing micro-organisms |
US4379682A (en) * | 1981-04-29 | 1983-04-12 | Ortho Diagnostics, Inc. | Reaction apparatus for the formation of microspheres or microcapsules |
US4481157A (en) * | 1982-04-27 | 1984-11-06 | Morishita Jintan Co., Ltd. | Method and apparatus for production of microcapsules |
US4422985A (en) * | 1982-09-24 | 1983-12-27 | Morishita Jintan Co., Ltd. | Method and apparatus for encapsulation of a liquid or meltable solid material |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5643773A (en) * | 1987-11-17 | 1997-07-01 | Brown University Research Foundation | Preparation of elongated seamless capsules containing a coaxial rod and biological material |
US5284761A (en) * | 1987-11-17 | 1994-02-08 | Brown University Research Foundation | Method of encapsulating cells in a tubular extrudate |
US5283187A (en) * | 1987-11-17 | 1994-02-01 | Brown University Research Foundation | Cell culture-containing tubular capsule produced by co-extrusion |
US5418154A (en) * | 1987-11-17 | 1995-05-23 | Brown University Research Foundation | Method of preparing elongated seamless capsules containing biological material |
WO1989010786A2 (fr) * | 1988-04-22 | 1989-11-16 | Microdrop, Inc. | Procede de formation et d'utilisation de microgouttelettes |
WO1989010786A3 (fr) * | 1988-04-22 | 1990-03-08 | Microdrop Inc | Procede de formation et d'utilisation de microgouttelettes |
WO1991010425A1 (fr) * | 1990-01-08 | 1991-07-25 | Brown University Research Foundation | Systemes d'extrusion de capsules de cellules |
EP0478097A1 (fr) * | 1990-08-24 | 1992-04-01 | Vorlop, Klaus-Dieter | Procédé de préparation de biocatalyseurs |
US5232712A (en) * | 1991-06-28 | 1993-08-03 | Brown University Research Foundation | Extrusion apparatus and systems |
EP0651996A1 (fr) * | 1993-11-08 | 1995-05-10 | Giovanni Brotzu | Equipement et méthode pour la préparation de microcapsules polymériques contenant des cellules productrices d'hormones |
WO2004064971A2 (fr) * | 2003-01-23 | 2004-08-05 | Inotech Ag | Fabrication de microcapsules dotees d'une resistance mecanique amelioree |
WO2004064971A3 (fr) * | 2003-01-23 | 2004-10-14 | Inotech Ag | Fabrication de microcapsules dotees d'une resistance mecanique amelioree |
WO2012089820A1 (fr) * | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Capsum | Serie de capsules comprenant au moins une goutte de phase interne dans une goutte de phase intermediaire et procede de fabrication associe |
FR2969907A1 (fr) * | 2010-12-31 | 2012-07-06 | Capsum | Serie de capsules comprenant au moins une goutte de phase interne dans une goutte de phase intermediaire et procede de fabrication associe |
CN103491808A (zh) * | 2010-12-31 | 2014-01-01 | 凯普萨姆公司 | 在中间相的液滴中包括内相的至少一个液滴的胶囊系列及相关制造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL79052A0 (en) | 1986-11-30 |
GB2192171B (en) | 1990-07-11 |
DE3718934A1 (de) | 1987-12-17 |
GB8713259D0 (en) | 1987-07-08 |
GB2192171A (en) | 1988-01-06 |
FR2599639B1 (fr) | 1989-12-01 |
JPS63146792A (ja) | 1988-06-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FR2599639A1 (fr) | Procede et appareil pour la fabrication de perles de polymere | |
CN105641743B (zh) | 一种微流控装置及利用该装置制备微凝胶的方法 | |
Lim et al. | Microencapsulation of living cells and tissues | |
Li et al. | Transport characterization of hydrogel matrices for cell encapsulation | |
CA2683642C (fr) | Preparation de perles de polysaccharide | |
US4778749A (en) | Tissue culture and production in permeable gels | |
FR2564856A1 (fr) | Procede pour produire des anticorps par induction d'une reponse immunitaire a l'action de cellules encapsulees secretant des antigenes. | |
FR2650758A1 (fr) | Granules a multicouches contenant des substances actives enrobees, leur procede de fabrication, dispositif pour la mise en oeuvre de ce procede et utilisation des granules obtenus | |
JPH08508933A (ja) | 水性媒体において膜をゲル化粒子の少なくとも表面に形成するためのエステル化多糖とポリアミンとの間のアシル交換反応の使用、それにより生成した粒子、それらの製造方法及び前記粒子を含有する組成物 | |
FR2501715A1 (fr) | Procede de culture de cellules necessitant une fixation pour la fabrication de substances therapeutiques | |
US20120258047A1 (en) | Epsilon-poly-lysine capsules | |
FR3073751A1 (fr) | Procede de fabrication de capsules formees d'une enveloppe externe d'hydrogel reticule entourant un noyau central | |
CN205549077U (zh) | 一种用于制备微凝胶的微流控装置 | |
CN1640539A (zh) | 一种尺寸均一的琼脂糖凝胶微球及其制备方法 | |
Hoeniger et al. | BASAL BODIES OF BACTERIAL FLAGELLA IN PROTEUS MIRABILIS: II. Electron Microscopy of Negatively Stained Material | |
CN105999290A (zh) | 一种磷脂酰丝氨酸修饰的姜黄素纳米粒 | |
FR2696755A1 (fr) | Capsule implantable. | |
US6248321B1 (en) | Encapsulation of microparticles in teardrop shaped polymer capsules of cellular size | |
DE19756499C2 (de) | Mikrokapseln | |
FR2634121A1 (fr) | Procede de preparation de microparticules de collagene et produits obtenus | |
US20020068356A1 (en) | Method of removing gas from a site using gas vesicles of cells | |
JP2005514064A (ja) | バイオリアクター | |
CN1048062A (zh) | 生产生物化学产品的方法 | |
JP2022027274A (ja) | リキッドマーブル用液体、リキッドマーブル、リキッドマーブルの製造方法及び製造装置、並びにバイオリアクター | |
Vasilieva et al. | New Polyethylenimine-Based Polycationic Polymers with Plant Additives for Immobilizing Phototrophic Microorganisms |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
ST | Notification of lapse |