FR2501677A1 - Nouveau procede d'esterification d'amino-acides - Google Patents

Abstract

L'INVENTION SE RAPPORTE AU DOMAINE DE LA CHIMIE DES PEPTIDES. ELLE A POUR OBJET UN PROCEDE D'ESTERIFICATION QUI CONSISTE A SOUMETTRE UN AMINO-ACIDE A L'ACTION D'UN ALCANOL EN PRESENCE D'UNE QUANTITE EQUIMOLECULAIRE D'UN SULFATE D'ALCOYLE ET A ISOLER L'ESTER SOUS FORME D'ALCOYLSULFATE. LES ESTERS OBTENUS SONT DES INTERMEDIAIRES DE SYNTHESE TRES UTILES.

Description

La présente invention concerne un nouveau procédé d'obtention d'amino acides et les esters ainsi obtenus.

L'esterification de la fonction carboxylique en 1 de la fonction amine est un mode de blocage efficace pour permettre des rdactions de condensation, soit sur la fonction amine adjacente, soit sur une fonction présente sur la channe carbonée de l'amino-acide. C'est ainsi que la chaîne carbonée peut porter un hydroxyle comme dans le cas de la sérine ou de l'acide p - amino hydroxy bu- tyrique r une fonction amine co!nme la lysine, une autre fonction carboxylique comme l'acide glutamique ou l'acide aspartique ou une fonction guanidine comme l'arginine.

I1 est donc nécessaire dans beaucoup de cas, pour entamer une synthèse de peptide de bloquer une des fonctions réactives pour permettre des condensations sur une autre fonction réactive de la molécule.

L'esterification des amino-acides qui constitue un des modes de blocage, pose souvent des problèmes difficiles en raison de la proximité d'une fonction amine. I1 faut éviter d'utiliser un agent alcoylant ou aralcoylant qui pourrait réagir également avec la fonction amine. I1 faut également éviter des agents très acides ou des conditions très acides car la protonation de la fonction amine désactive la fonction carboxylique. En outre, l'esterifica- tion en milieu acide donne naissance à la formation d'eau et la réaction tend vers un équilibre.

Le procédé selon l'invention vise à résoudre un grand nombre de ces problèmes.

I1 permet d'obtenir un ester d'amino-acide avec un rendement presque quantitatif et de l'isoler sous forme pure d'une manière très aisée. Il permet de pouvoir éventuellement récupérer l'amino-acide qui n'a pas réagi, sous forme insoluble dans le milieu réactionnel. I1 comporte également l'avantage de ne pas donner naissance à la formation d'eau ce qui permet une réaction complète.

Selon l'invention le procédé consiste à soumettre un amino-acide à l'action d'un alcanol en présence d'une quantité équimoléculaire d'un sulfate d'alcoyle et à isoler l'ester ainsi formé sous forme d'alcoyl sulfate acide que l'on convertit en base puis reconvertit en sel, si désiré.

Le procédé selon l'invention peut encore être défini par les modalités suivantes actuellement préférées 1/ l'alcanol est de préférence un alcool aliphatique de bas poids moléculaire.

2/ Le sulfate d'alcoyle est de préférence un sulfate d'alcoyle inférieur dont le radical alcoyle est le même que celui de l'alcanol.

3/ La réaction est effectuée en utilisant des proportions équimoléculaires d'acide aimé et de sulfate d'alcoyle.

1/ La réaction est effectuée au reflux de l'alcanol.

5/ L'alcoylsulfate d'amino ester est transformé en base pr addition d'un agent alcalin.

6/ L'amino ester peut entre converti en sel par addition d'un acide minéral ou organique en solution dans un solvant organique anhydre.

Les esters selon l'invention sont des intermédiaires connus, utilisés en vue de la synthèse peptldique comme par exemple la synthèse de l'ocytocine, du IRH ou de l'aspartame.

Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois la limiter.

EXEMPLE I
Dans un ballon équipé pour un chauffage au reflux, on charge 165g de l - phénylalanine (1 mole) et 191ml de sulfate de méthyle et on le dilue dans 600ml de méthanol. On chauffe le mélange au reflux sous agitation pendant 6 heures. La transformation de la phénylalanine est complote, ainsi qu'il ressort de la chromatographie en couche mince . (CCM sur plaque de silice G 60 Merck - solvant CHC1364 > methanol 3Q, eau 4 et acide formique 2)
Révélation par la ninhydrino.

On concentre sous vide et on obtient 499 g de méthylsulfate de phénylalaninate de méthyle , on neutralise à O9C ce sel par de la soude 5N (213 ml) et on extrait la base au trichloréthane, en trois fois. Les extraits dans le trichloréthane sont séchés sur sulfate de sodium anhydre, puis concentrés sous vide.On obtient une huile (192 g) de 1 - phénylalaninate de méthyle cui peut être conservée une semaine à OOC, Cette huile peut être cristallisée sous forme de sulfate en la dissolvant dans l'acétone, puis en ajoutant lentement, en refroidissant, une solution à 15; d'acide sulfurique dans l'acétone, préparée extemporanément.On obtient une solution limpide légèrement rose, qui se trouble rapidement et cristallise abondamment,
On sépare par filtration les cristaux, on laY à l'acétone et on sèche sous vide ou en étuve ventilée à 45 - 191,92 g de sulfate de phénylalaninate de méthyle
sont (produit cristallin blanc)jainsi obtenus.

EXEMPLE II
Preparation du Valinate d'éthyle.

Dans un ballon a trois tubulures , on introduit successivement 112 g de L
Valine et 154 g de sulfate d'éthyle. On dilue le mélange avec 450 1 d'éthanol.

On porte le mélange au reflux sous agitation pendant 6 heures. On laisse ensuite refroidir. On concentre à emi volume et on amorce la cristallisation par grattage à température ordinaire. On laisse reposer le mélange cristallin une nuit en glacière. On sépare les cristaux cu'on lave avec de l'éthanol froid puis sèche.

Cn obtient ainsi 276 g de L- Valinate d'éthyle sous forme d'éthylsulfate.

EXEN;PLE III
Préparation du L - Lysinate de méthyle.

On met en suspension 147 g de L - Lysine dans 750 ml de méthanol et on y ajoute progressivement 191 ml de sulfate de méthyle. On porte la suspension au reflux pendant 4 heures puis on la laisse refroidir à température ambiante.

On évapore à sec le solvant sous pression réduite. Il reste un résidu pesant 404g qui cristallise lentement. Après une nuit en glacière, on sépare les cristaux par filtration, les rince au méthanol et les sèche en étuve ventilée. On recueille ainsi 389g5 de méthylsulfate de L - Lysinate de méthyle.

EXBPLE IV
Tryptophanate de terbutyle.

On mélange 204 g de Tryptophane et 210 g de sulfate de terbutle et on dilue ce mélange avec 450 ml de terbutanol préalablement chauffé à 50 '.

Après homogénéisation du mélange, on chauffe à 800 pendant 6 heures puis on laisse refroidir et on chasse l'excès de réactif par distillation sous vide. Le mélange résiduel est repris par la quantité minimale de dioxane à chaud d'où il recristallise par refroidissement. Après quelques heures de repos, on sépare le terbutyl sulfate de tryptophanate de terbutyle par filtration. Les cristaux sont séparés, essorés à fond, puis séchés à poids constant sous vide. Ils sont redissouts dans 300 ml de chlorure de méthylène et agités à contre courant avec de la soude aqueuse. La phase organiçue est séparée, lavée à l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage, séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu cristallin est repris par l'ether isopropylique. On dilue la solution avec un volume égal de cyclohexane. Le tryptophanate de terbutyle précipite progressivement. On le sépare par filtration, l'essore, le rince au cyclohexane et le sèche.

Le résidu pesant 291 g est constitué par le tryptophanate de terbutyle pur.

Claims (3)

REVENDICATIONS

1/ Un procédé d'esterification des amino-acides caractérisé en ce qu'on soumet un amino acide à l'action d1un alcanol en présence d'une quantité équimoléculaire de sulfate d'alcoyle et isole l'ester d'amino acide sous forme d'alcoylsulfate.

2/ Un procédé selon la revendication 10 qui comporte l'étape supplé dentaire de conversion de l'alcoylsulfate d'ester d'ana no-acide en base par traitement alcalin.

3/ Un procédé selon l'une des revendications 10 et 24 dans lequel lester dtamino-acide sous forme de base est transformé en un sel d'addition avec un acide minéral ou organique en milieu anhydre.