FR2492385A1 - Nouveaux composes cytostatiques derives de la vinblastine, leur procede de preparation et composition pharmaceutique les contenant - Google Patents

Abstract

NOUVEAUX COMPOSES CYTOSTATIQUES AYANT LA FORMULE GENERALE: (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE R EST B-HYDROXYLE ET R EST A-ETHYLE; OU BIEN R EST HYDROGENE ET R EST B-ETHYLE; R EST UN RADICAL ALKYLE A CHAINE DROITE AYANT 1 A 10 ATOMES DE CARBONE OU UN RADICAL ALKYLE A CHAINE RAMIFIEE AYANT 3 A 10 ATOMES DE CARBONE RADICAUX DANS LESQUELS L'ATOME DE CARBONE RATTACHE

Description

Nouveaux composés cytostatiques, leur procédé de préparation et

composition pharmaceutique les contenant.

L'invention a pour objet de nouveaux composés cytos-

tatiques, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques les contenant. Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux composés ayant la formule générale (I): R4

3

R3 CH3o 'CO-RI CH,,

OR

dans laquelle: R4 est P-hydroxyle R3 est cL-éthyle; ou bien R4 est hydrogène et R3 est M-éthyle; R" est un radical alkyle en chaîne droite contenant 1 à 10 atomes de çarbone, ou un radical alkyle ramifié contenant a l atomes de carbone, groupe aans lesquelsl'atome de carbone relié au groupe N -CH -0- est un atome de carbone primaire ou secondaire, ou un radical alcényle ou alcinyle ayant 3 à 6 atomes de carbone, ou un radical aralkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone dans sa partie alkyle; R1 est méthoxy et R est acétyle; sous la réserve que si R3 estcC-éthyle, R est P-hydroxyle,

R" n'est pas éthyle.

Les nouveaux composés de formule générale (I), dans laquelle R, R, R, R et R" ont la définition mentionnée ci-dessus, ont une activité cytostatique. Un composé ayant une structure voisine, c'est-à-dire la N- desméthyl-N(éthoxyméthyl)-vinblastine (composé de formule i 2 générale (I) dans laquelle R1 = méthoxy, R = acétyle,

3- 4 -

R =&--éthyle, R =)-hydroxyle et R" = ethyle)ainsi que sa préparation, a été décrit dans la demande de brevet européen n 80301290.5 (publiée sous le n 18231). Selon le procédé

décrit dans la demande précitée, la N-desméthyl-N-(éthoxy-

méthyl)-vinblastine est préparée en faisant réagir la

vinblastine avec le trioxyde de chrome dans un solvant appro-

prié, en présence d'un large excès d'éthanol. La réaction comprend la transformation du groupement Na-CH3 de la

vinblastine en un groupement INa-CH2-O-C2H5.

Lorsqu'on essaie de préparer d'autres composés de formule générale (I), on a trouvé qu'une partie seulement des composés de formule générale (I) peut être préparée selon le

procédé de préparation de la N-desméthyl-N-(éthoxyméthyl)-

vinblastine, c'est-à-dire que seulement certains alcools sont capables de transformer le groupement >Na-CH du composé de el a 3 départ en un groupement N -CH2-OR" correspondant. Plus

particulièrement, la demanderesse a découvert que la trans-

formation nécessaire précitée peut être obtenue avec des alcools dans lesquels R" est un radical alkyle à chaîne droite contenant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical alkyle à chaîne ramifiée contenant 3 à 10 atomes de carbone/dans lesquels l'atome de carbone attaché au groupement -OH est un atome de carbone primaire ou secondaire, ou bien dans lesquels R" est un groupe arylalkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone dans sa partie alkyle. Il en résulte que seuls les composés de formule générale (I) dans laquelle R" a la définition restreinte mentionnée ci-dessus, peuvent être préparés par le procédé d'oxydation précité. Ces composés seront désignés dans la suite

de la description "composés de formule générale (I) préparés

par oxydation".

La demanderesse a découvert que tous les composés de

formule générale (I) ci-dessus ainsi que la N-desméthyl-N-

(éthoxyméthyl)-vinblastine peuvent être préparés par "transéthérification" de n'importe quel composé de formule générale (I) préparé par oxydation. Le terme "transéthérifi- cation" est utilisé pour désigner une réaction selon laquelle le groupement Na-CH2-OR; est transformé en un groupement Na-CH2-O-R", en présence d'un large excès d'un alcool ayant

la formule générale (III) à un pH compris entre 3 et 5.

Cette transéthérification présente les avantages suivants: 1. On peut ainsi obtenir de cette façon des composés de formule générale (I) qu'il n'est pas possible de préparer

par oxydation.

2. Des composés pouvant être préparés par oxydation directe avec un faible rendement peuvent être obtenus, à partir d'autres composés préparés par oxydation avec un excellent rendement, par un procédé de transéthérification

de sorte que le rendement peut être considérablement améliorée.

Par exemple le rendement en N-desméthyl-N-(benzyloxyméthyl)-

vinblastine est doublé lorsque ce composé est préparé selon la réaction: ox.

vinblastine MeOH > N-desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-

transéthérification vinblastine - t alcool benzylique au lieu d'effectuer l'oxydation directe de la vinblastine en

présence d'alcool benzylique.

Un autre objet de l'invention est un procédé de pré-

paration des composés de formule générale: (I) dans laquelle: R4 est frhydroxyle et R3 est M-éthyle; ou bien R4 est hydrogène et R3 est béthyle; R" est un radical alkyle à chaîne droite contenant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical alkyle ramifié contenant 3 à 10 atomes de carbone, groupes dans lesquels l'atome de carbone attaché au groupement N -CH2-0- est un carbone primaire 0ea 2 ou secondaireou un radical alcényle ou alcinyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, ou un radical cyclo-alkyle contenant à 7 atomes de carbone ou un groupement aralkyle, la partie alkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone; R1 est méthoxy et R est acétyle, le procédé précité comprenant la réaction d'un composé de formule générale: t (-II)

OR OR

CH30 %CoaR ciú 0 a

J. 2 3 4

dans laquelle R, R, R et R ont la définition précitée, et R' est un radical alkyle à chaîne droite contenant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical alkyle ramifié contenant 3 à 10 atomes de carbone, dans lesquels l'atome de carbone attaché au groupement Na-CH2-0- estun atome de carbone primaire ou secondaire, ou un radical alcényle contenant 3 à 6 atomes de carbone, alcinyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, cyclo-alkyle contenant 5 à 7 atomes de carbone, ou arylalkyle, la partie alkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone, sous la réserve que dans un composé de départ de formule générale (II), le radical R' est différent du radical R" dans le composé de formule générale (I) préparé à partir de ce composé de départ, et cela avec un large excès d'un alcool de formule générale:

R" - OH (III)

dans laquelle R" a la même signification que celle déjà indi-

quée ci-dessus, a un pH de 3 à 5, et qu'on ajuste le pH du mélange réactionnel de 7 à 8, on isole le composé de formule générale (I) ainsi qu'éventuellement ses épimères, et si on le souhaite, on le soumet à un traitement de purification. Comme déjà mentionné, les nouveaux composés de

formule générale (I) cnt d'intéressantes propriétés pharmaco-

logiques,en particulier une activité cytostatique. Ils sont

moins toxiques que les bis-indole alcaloides de l'art anté-

rieur disponibles dans le commerce.

La toxicité aigUe des composés de l'invention a été

déterminée sur les souris mâle du type connu sous la désigna-

tion "Swiss" pesant 27 à 31 g. On a effectué les essais sur des

groupes de six souris. Les composés a essayer ont été adminis-

trés par voie intrapéritonéale (i.p.)sous la forme de solutions

injectables préparées à partir d'une solution saline physio-

logique pouvant contenir un goutte de l'agent de surface connu

sous la désignation "Tween 80". On a augmenté les doses suc-

cessivement à partir d'une dose ne causant aucune mortalité jusqu'à la dose léthale. Les résultats ont été évalués par la méthode dite de"Lichfield et Wilcoxon" et sont indiqués dans le

tableau 1 suivant.

Tableau 1

DL 50 Composé L5 Composée L(mg /kg,de Effet secondaire poids des souris) paralsant (par injection N-desmethyl-N-(methoxymethyl,, 0 vinblastine Ndesmethyl-N-(ethoxymethyl)- / 110 ' vinblastine 1I-desmethyl-N(propoxyméthyl)- 80 vinblastine r 0

N-desmth yl-N-(isohutox/yg-

t hy Ut " 60 methyl)-vinblastine N-desmethyl1-N-(heptoxyw eth:yl)-60 0 vinblastine

l'-d e sm o t hy l-N-( tal lly.oxmethJ h 1 45 0)-

vinblanstine 4 N-de smet hy l-1-(benz loxy- 70 methyl)-vinblastine

I

N-desmethyl-N- ( cy clohexyl-, methyl)-vinblastine vincristïne 4r2 + Tableau 1 (suite) vinblaetine 7.6 0 vindesine 40 + Les caposés essayés sont 15 à 25 fois respectivement moins toxiques que la vincristine et la vindésine et 8 à 13 fois moins toxiques que la vinblastine. Contrairement à la vindésine, les composés essayés n'ont présenté aucun effet secondaire paralysant pendant les essais. L'effet cytostatique des nouveaux composés a été également essayé dans des cultures de tissus et dans des

souches variées de tumeurs transplantées.

Les composés essayés ont été dissous dans la culture de tissus connue sous la désignation "culture HeLa" à des concentrations

depuis la ganroe xlO -3pg./ml jusqu'à lOOpg./mnl.

Dans des cultures de 24 heures, une évaluation mi-

croscopique in vivo de l'effet de suppression de la métaphase,

a donné les résultants suivants.

Tableau 2 Composé Dose provoquant un fort blocage en ig g./m.7 N-desmne thyl-N-(methoxymethyl)- 0 001 vinblaetine

N-desmé thyl-N-( propoxyme thyl)-

vinblastine tpxiehl -001 N-desme"thyl-N-( isobutoxymethyl) - O 001 vinblastine 1(f 0 N-desme/thyl-N-(heptoxymethyl)- O 001 vinblastine t N=desmethyl-N-(allyloxymethyl)- V 001 vinblastine 7 N-desmethyl-N(benzyloxymethyl)- - 01 vinblastine ; f N-desmnethyl-N(cyclohoxyloxyinethyl)- 0001 vinblastine Dans des conditions similaires mais en utilisant les

cultures de tissus colorés, on a également observé de légères dif-

férences pouvant être classées de la façon suivante: Le premier stade (dose efficace minimale) est caractérisé par un accroissement de la proportion des mitoses bloquées.Une partie de ces mitoses, sont des mitoses anormales, par exemple des mitoses à trois groupes ou encore des chromosomes polaires. Généralement, les anaphases ont déjà disparu Dans le second stade, on observe un fort blocage des

métaphases et il n'y a pratiquement plus de mitoses régulières.

Les chromosomes se présentent sous la forme de glomérules sans

consistance. La proportion de cellules d'interphase est faible.

Dans le troisième stade, les chromosomes sont agglo-

mérés sous la forme d'une masse dans le milieu de la cellule.

Cet état est appelé picnomitoses de "Metaphase en boule". Dans le quatrième stade, les cellules d'interphases sont déjà modifiées. Plus particulièrement, le nombre des cellules bloquées diminue car elles ne sont plus capables de participer à la formation de mitoses. Le cytoplasme des cellules (dans l'interphase) s'étend, son contour est irrégulier,

"frangé", les cellules ont fréquemment une forme allongée com-

me celle d'un fibroplast.

Finalement, dans le cinquième stade, le cytoplasme est rempli par une fine structure réticulaire et la cellule

d'interphases a été tuée sans aucune ambiguité par le traitement.

Les stades ci-dessus peuvent être très bien distingués

lorsqu'on effectue les essais des composés de l'invention.

La demanderesse a fait également les observations suivantes: le composé le plus efficace est le dérivé heptoxy qui provoque un fort blocage de la métaphase déjà avec des doses deO,oOlpg/iml. On a observé la Pycnomitose à une dose de O,l pg./ml, tandis que les cellules d'interphases ont été modifiées à des doses de 1 à 10 ug./ml. Le dérivé isobutoxy donne un résultat d'un ordre de grandeur plus faible, notamment pour une dose de 0, 001pg./ml, bien qu'on puisse encore observer des mitoses régulières. Le dérivé benzyloxy a donné le moins bon résultat. Pour la dose la plus faible utilisée, ce compose a provoqué un blocage minimum pour plusieurs mitoses déformées mais sans observation d'anaphases. A la dose de 0,01 pg. /ml, on a observé un blocage modéré, tandis qu'un fort blocage ainsi qu'une pycnomitose n'ont été observés que pour la dose de l1pg./ml.

L'effet des nouveaux composés sur les tumeurs intra-

péritonéalement transplantables telles que celles connues sous la désignation "leucémie de la souris P 388 et lymphomes ascites dits "NK/Ly" est décrit ci-après. L'essai "leucémie P 388" a été effectué sur des souris hybridesconnues sous la désignation "BDF". Les essais ont été effectués sur des groupes

de six souries sur lesquelles on a transplanté intrapéritoné-

alement 106 cellules de tumeurs par animal.

L'administration des composés essayés a été effectuée 24 heures après la transplantation. Le traitement a été effectue intrapéritonéalement at on a déterminé journellement le poids de corps et l'état de chaque animal. Le résultat obtenu sur les animaux traités a été exprimé en pourcent par rapport à la durée moyenne de vie exprimee en jours pour un groupe d'animaux témoins. Les résultats indiqués dans le tableau ci-après montrent que la durée de vie des souris ayant reçu des cellules de "P 388 leukaemia"' est considérablement augmentée par le

traitement avec les composés essayés.

Tableau 3

C rmpsdé DoYse Par-priet 'Ibxicitp de ie(jcuasi) souris n-/kg. de vie (jours) traitées/ (oie intra- Fouris souris périJtonéale) traitées têmoins soi t&mis en% N-denme/thyl- - Sx0, 4 1,. 3 10 139

(heptoxyme;'.w-Sx4.0 la7 i0; 3 3 I].

vinblastine 8x8.0 2i.3 9r9 247 N1-desmethyl-N- 8xO04 13.0 1073 126 (benzyoxy- 8x4,'O 183 10. 178 ame'thnyle)-vn-5x8. 0 19,2 9.9 195 blastine ' Y-desmethyl-IL- 8xO 4 13f 7 10 3 133 iisobutoxy- Sx, 0 20ro 10,3 194 methyl)-vin- 8x8stO 20r 5 9,9 208 blastine (Tableau 3 (suite) 3-demethylN- 8xl,012 7 10.3 122 methoxy- 8x2rO 18,7; 105 178;155 me'thyl)-vin- 16,8 blastine 8x4tO 19.0; 111l 171;163

17,7

8x6.0 19.2 10.5 182 8x8 0 18,7 10.8 172; 205 r2 2 / N-desmethyl-N- 8xl.0 1570 10,3 145 (propoy- 8x2r0 20 8 10.5 198 methyl)-vin- 8x410 1970 i.1 171 blastine 8x8r0 20.2 9,9 205 x 8xlO 0 14',7 103 142 toxique V- desmethyl-N8x0.4 1550 10.3 145 tallylQxy- 8x4 0 21.0 10' 3 200 mEthyl)- vin- 8x8rO 20.5 9o 9 207 N-desmethyl-N- 8x0.4 1391 103 127 (cylooexgly- 8x4;0 18.8 10.3 181 me thyl)-vin- 8x. 8,0 19.'3 9 9 197 IJ-desm9thyl-1- 18x2e0 20 3 10.5 193 (ethoxynmdtllhyi)- 8x4.0 1805 1l 1 167 vinblastine 8x8,.0 20,5 9,- 208

Animal uort sans tumeur.

On transplante par voie intraPéritonéale 5x106 cellules atteintes de tumeurs ascites dans des groupes de souris de la souche 'Swiss-I/Riop" prélevées dans notre propre élevage de souriso Dans les 24 heures ayant suivi la transplantation, on effectue un trait-ement par administration f journalière en cinq fois des composés de l'invention. La durée de vie moyenne du groupe d'animLaux témoins s'élevait à

,7 jours.

Des essais analogues ont été effectués avec la N-desméthyl-N(méthoxymêthyl)-20 -désoxy-leurosidine, en

faisant varier les doses et le nombre d'injections journalières.

Les résultats suivants ont été obtenus -

2492385 -

Tableau 4

Composé -

Dose (mg./kg.) (i.p.) Durée moyenne de vie (jours) Rapport animaux traités traités témoins animaux témoins en % N-d.esmethyl-N- 4x8 21,8 12. 1 180 (methoiVmethyl)- 8x4 20.8 11'6 180 '-desoXy- 4x7 17.1 12r1 142 leurosidine 8xl 21,7 12,2 178 8xOt5 15.3 12 2 126

L'utilisation des composés de l'invention permet d'ob-

tenir une augmentation considérable de la durée de vie, comme

indiqué dans le tableau suivant.

Tableau 5

Dose Animaux au 25ème Animaux au YXme Composé (mg./kg.) jour jour (i. p.) vivants exempts de exempts de tumeur tumeur

N-desmethyl-N-

(heptoxymethyl)- 5x6 0 10/10 7/10 3/10 VLB disobutoxymèthyl)- 5x4 O 10/10 10/10 7/10 x4.0]0/10 10/10 7 /].0 VLB

-desmethy-N-

Zallyloxyméthyl)- 5x4.0]0/10 10/1.0 6/10 VLB

N-desmethyl-N-

(c yclo4exyloxy- 5x4.0 10/10 5/10 3/10 methyl)-VLB L'effet d' inhibition des tumeurs obtenues par les nouveaux composés sur les souches de souris "P 388" et "NK/Ly" est significative pour une dose de 4 à 8 mg./kg/jour, cet effet étant le meioe que celui obtenu avec les diindole alcaloides. _En outre, les composés de l'invention sont nettement moins toxiques que

les composés connus et ayant une structure analogue.

Pour le traitement humain, il est préférable d'utiliser les composés de l'invention par voie intraveineuse ou sous la

forme de perfusion ou d'infusion.

On prépare les composés de l'invention de formule générale (I) par transéthérification. Comme produits de départ,

on utilise des composés de formule générale (II). Il est pré-

férable d'utiliser comme composés de départ des composés de formule générale (II) pouvant être préparés par oxydation avec

un excellent rendement.

On peut préparer par oxydation les composés de formule générale (II) dans lesquels R4 est b-hydroxyle et R3 est oC -éthyle; ou bien R est hydrogène et R3 est pA-éthyle; R" est un radical alkyle à chaîne droite ayant 1 à 10 atomes de carbone, un radical alkyle à chaîne ramifiée ayant 3 à atomes de carbonegroupes dans lesquels l'atome de carbone attaché au groupement)NN-CF2-0- est un atome de carbone primaire ou secondaire, ou bien un groupement arylalkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone dans la partie alkyle; R est méthoxy et

2 est acétyle.

On peut préparer les composés de formule générale (II) par le procédé d'oxydation suivant: On fait réagir un composé de formule générale R4

< (IV)

H e

C) OR2

ch'Il0 HO C-RI CH

R' 2 3 4

dans laquelle R R, R et R ont la signification précitée, ou bien son sel d'addition avec des acides, sur un excès d'un alcool ayrant la formule générale (III), dans laqueile: R" est un radical alkyle à chazîne droite ayant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical a àkyle à chaîne ramifiée ayant 3 à 10 atomes de carbone, l'atome de carbone des groupes r-cités attachê au groupementL OH étant un ateome de

carnoner.ta...e ou sec.ondaire, ou bien R" est un grou-

pemernL aryalkyle conheninr à 3 aLomes de carbone dans la partie alkyle, et ca-'e. prç e--nce de iode de chrome, d'un solvant orgarique apprcp':rié et d'utn melarge d'any!dride ec.tique et d'un acide, a u- ie:enrpeat.;re;*iuprse ent:re -V--:e,' et -30. c., C.e préférence entre -5<0C et -600C, le pH d, T.1 aige re.actionnel étant ajusté de 8; 10, le produit ohtene. etan- ensuit spar éventuellement après un traitement de purificati nr Ce proc-dé d'oxydation est illustré par les exemples 1 à 9. Ce procédé permet d'obtenir avec un excel1enL rendement, des dérivés Ndesméthyl-N-(méthoxyméthyl), et c'est la raison pour laquelle ils sont utilisés de préférernce comme composés

de départ dans le procédé de transéthérification. La trans-

éthérification est entièrement reéversible, c'est-à-dire qu'on peut préparer à p-artir de n'importe quel composé de formule gïenerale (II) n'importe quel composé de formule générale (I),

et vis-versa. Les essais ci-après ont été effectués pour met-

tre ce fait en évidence, c'est-à-dire: methoxy _ _ a11yloxy - 1îeptoxy i, ethoxy methoxy h 1eptoxy I methoxy - ethioy methoxy benzyloxy -- heptoxy methoxy -, cycohexyloxy --heptoxy methoxy ' b_ isopropoxy --iheptoxy I methoxy -'- iobutoxy On fait réagir un composé de formule générale (II) avec

un large excès d'un alcool ayant la formnnule générale (III).

Dans les composés ayant les formules générales (II) et (III), les définitions de R' et de R' sont respectivement identiques, sous réserve que pour une même paire de composes réagissant, les radicalux RI et R" sont toujours différents. On utilise les alcools de formule générale (III) de preéférence en une quantité de 30 à 50 équivalents molaires par rapoot auxcomposésde

formule générale (II).

La rêaction des composés de forimule générale (II) avec.es composês de formule générale (IIIT s'effectue dans un solvant organique, Coïmme solvant, on utilise par exemple des

solvants du type éther tels que le diéthyl!ther, le tétrahydro-

furane, le dioxane, les hydrocarbures chlorés tels que le C dichlorométhane, le chloroformeD le tétrachlorure de carbone, ou le benzene ou les homologues du benzène (toluène, xylène), ou d'autres solvants, tels que l'acétate d'éthyle, l'acétone ou le diméthyl formaiide, ou bien un excès du réactif de formule générale (III). Parmi les solvants mentionnés ci-dessus, on utilise de préférence les hydrocarbures chlorés en l'absence d'eau. On effectue la réaction en présence d'un acide, à un pH de 3 à 5. On ajuste le pH avec des acides minéraux tels que l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique ou un acide de Lewis

tel que le chlorotrifluorure diéthyléthérate.

La température de la réaction est choisie entre le point de congélation et le point d'ébullition du solvant utilisé. On effectue généralement la réaction à une température comprise entre -60 C et +25 C. Lorsque la réaction est terminée, le pH du mélange

réactionnel est ajusté de 8 à 10, par exemple avec une solu-

tion d'hydroxyde d'ammonium ou de préférence avec du carbonate

de potassium solide.

On sépare le produit du mélange réactionnel par ex-

traction et/ou évaporation, et si on le souhaite, on le purifie par chromatographie et/ou par cristallisation. On effectue la séparation chromatographique avec de l'alumine partiellement

désactivée ou un gel de silice ayant une fine granulométrie.

L'invention est illustrée par les exemples non limi-

tatifs suivants.

Exemple 1

N-Desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-vinblastine On dissout 1,0 g (1,1 mole) de sulfate de vinblastine dans un mélange de 240 ml de dichlorométhane asolu exempt

d'alcool, 8,0 ml de méthanol et 25 ml d'acide acétique glacial.

On refroidit la solution jusqu'a -55 C. On refroidit jusqu'à -55 C une solution contenant 0,5 g (5,0 mmoles) de trioxyde de chrome dans 40 ml d'anhydride acétique et ensuite on l'introduit goutte à goutte dans la solution de vinblastine sous une atmosphère d'azote sec, tout en agitant vigoureusement

pendant 5 minutes. Pendant l'introduction précitée, la tempé-

rature du milieu réactionnel ne doit pas dépasser -50 C. La progression de la réaction d'oxydation est contrôlée par

chromatographie en couche mince (produit connu sous la dési-

gnation "gel de silice 60 F254" sur feuille d'aluminium-DC; mélange de diéthyléther, éthanol, benzène et diéthylamine :0,5:0,5:0,5). En général, l'oxydation est terminée après à 30 minutes. On ajoute ensuite au mélange réactionnel tout en refroidissant, un mélange constitué par 190 ml d'une solution aqueuse concentrée d'hydroxyde d'ammonium et de 200 g de glace. La température s'élève de -55 C jusqu'à une

température comprise entre 0 C et +10 C. Lorsque cette tempé-

rature est atteinte on supprime le refroidissement extérieur et l'on soumet à une agitation vigoureuse pendant 10 minutes la solution obtenue ayant un pH de 8,5 à 9. On effectue la

séparation des phases obtenues, la phase aqueuse étant ex-

traite en trois fois avec chaque fois 30 ml de dichlorométhane. Les extraits sont lavés quatre fois avec 25 ml d'un mélange d'eau et d'hydroxyde d'ammonium 1:1, et ensuite deux fois avec ml d'eau. On sèche la phase organique avec du sulfate de magnésium anhydre, on la filtre et on évapore le filtrat sous vide pour obtenir 0,35 g de produit brut. Ce produit est purifié par chromatographie sur une colonne remplie avec 0,3 g d'alumine ayant un degré d'activité II-III dans une solution de dichlorométhane. On recueille des fractions de 6 ml de dichlorométhane que l'on analyse par chromatographie en couche mince (produit connu sous la désignation ftel se silice 60 F254" sur feuille d'aluminium-DC, article 5554; solvant mélange de dichlorométhane et de méthanol 5:0,4; détection: vapeur

d'iode ou lumiêre ultraviolette 254 nm).

Des fractions contenant le même alcaloïde sont combinées et évaporées séparément. Le produit souhaité est

contenu depuis la 6ème jusqu'à la 25ème fraction.

Rendement: 64 % du produit que l'on désire préparer, se présentant d'une façon chromatographiquement uniforme,

c'est-à-dire:Pt. Eb: 205 à 210'C (éthanol).

úC] D 0 +23 o (c 1, chloroforme).

1H-M (CODC13, 100 l.iz): &9;05/s, 1H, C16-OH/, 8,05/s, 1H, NI/, 7j35/s, 1H, C12,-H/, 713-7226/m, 3H, C9,-Cll,-H/, 668/s, 1H, C9-H/, 6>33/s, 1H, C12-H/, 84/d, H, 014-H/, 5;37/s, 1H, C17-H/, 5;28/d, 1H, -H/, 4>42/2H, NaCH2-0-/, 4;18/s, 1H,C2-H/, 3,97/s, 3H, 016-0020H3/, 3>77/s9 3H, Cll-00H3/, 3%62/s, 3H C16,-C02CH3/, 3726/s, 3H, -OCH3/, 2 73/s, 1H, C21-H/, 2 00/s, 3H, OCOCH3/, 0.8-0,96/2t, 6H, C18-H3, C18,-H3/ MS m/es 840 (MJ 100 %), 810, 809, 781, 751, 681, 651,

650, 601, 499, 355, 282, 243, 241, 154, 149.

Exemple 2

N-Desméthyl-N-(isobutoxyméthyl)-vinblastine On dissout 0,5 g (0,55 mole) de vinblastine dans un mélange contenant 120 ml de dichlorométhane de qualité dite absolue, 3,7 ml d'isobutanol et 12,5 ml d'acide acétique glacial et l'on refroidit la solution jusqu'à -55 C. On ajoute ensuite 0, 25 g (2,5 imoles) de trioxyde de chrome dans 40 ml d'acide acétique glacial refroidi jusqu'à -55 C et on contrôle la progression de la réaction par chromatographie en couche mince

comme indiqué dans l'exemple 1 (produit connu sous la désigna-

tion (gel de silice 60 F254, sur feuille de matière plastique-DC; Article 5735),mélange d'éther, d'éthanol, de benzène et de diéthylamine en des proportions de 10:0,5:0,5:0,9. La réaction est terminée en 140 minutes. Ensuite, on traite le mémange réactionnel comme indiqué dans l'exemple 1 et l'on obtient 0,65 g de produit brut. On purifie le produit brut sur une colonne chromatographique contenant du gel de silice 60 (Art. 9385) comme adsorbant, et du dichlorométhane comme solvant. On lave la colonne avec de l'eau et on effectue l'élution avec du dichlorométhane. On recueille ainsi des fractions de 10 ml. Les premier 330 ml d'éluat ne contiennent aucun alcaloide. On continue l'élution avec une solution de dichlorométhane

contenant 3% de méthanol. Les premier 80 ml d'éluat contien-

nent le produit recherché que l'on sépare par évaporation.

Rendement: 169 mg (35%) du composé recherché.

Point de fusion: 215 à 218 C (acétone et éther).

Spectre IR (tBr): 3400 (NHOH), 1730 (0020CH3), 1605, 1220(cm/OAc). 1HIR/CDC13, 100 I.IHZ/: d8 1/8 M, NaH/, 775/m, 1H, 012,-H/, 7 05-72/m, 31H, C09,-011,-H/, 6370/s, 1H, C9H/, 6736/n, 11it C12-l1/, ?187/d, 1H, 014-H/ , 37/,, C17 H/ 5.30/d, 1H, C15-ll/ 4775, 4315/2H, JAB10 HZ, > Na-CH2-0-/, 4 0/1, 1H, C2-H/, 3778, 3775/2s, 6H, 002CH3/, 3,63/s, 3H, Oll OCH3/, 2;75/s, 1H, 021H/,

2 1/s, 3H, OCOCH3/, 0 95-0,70/12H, 5roupes-CH3,.

LMIS m/e: 882 (14+, 100 %), 864, 851, 823, 810, 779, 751,

723, 651, 650, 514, 355, 346, 329, 154.

Exemple 3

N-Desméthyl-N-(heptoxyméthyl)-vinblastine Uon opere comme dans le procede décrit dans l'exemple 2, sauf qu'on remplace 3,7 ml d'isobutano! par 3,7 ml de 1-heptanol. Durée de réaction: environ 90 minutes. On obtient 4 g de produit brut à partir du mélange réactionnel. On effectue la purification dans 30 ml de dichlorométhane sur une colonne

chromatographique contenant du gel de silice 60 (Art. 9385).

On lave la colonne et on l'élue avec du dichlorométhane. On

recueille des fractions de 10 ml. Les premier 300 ml ne contien-

nent aucun alcaloïde. On continue l'élution avec du dichloro-

méthane contenant 3% de méthanol. Les premier 120 ml d'éluat

contiennent le composé devant être préparé. Rendement: 21% du composé précité.

Point de fusion: 200 à 205 C (Acétone/éther).

Spectre IR-- -KBr): 3450 /OH,NH/, 1740 /C02CH3/, 1610, 1220/cm /OAo/. 1H1IUR (CDC13, 100 MHz): s 83,07/s, 1H, aZ,II/, 752/m, 111, C12,-H/, 7127702/m, 3H, Cg0,-ll,-H/, 6,70/s, 1H1, C09H/, 635/m, 1H, 012-H/, 5)85/dd, 1H, C14-]l/, 5/39/9, 1H, C17-H/, 5 30/d, 1H, C15-H/, 475, 415/21. JAB 10Hz, > N8-02-0-/, 4,0 /s, 1H, C2_H/, 380 3775 /2g, 6lI, C02ClI3/, 365/, 3II, jCll-OCH3/, 2,75/n, 1}, 02-1/, 2 10/s, 1l, OCOC1I3/, 0;7-1;0/3t, 9H,

groupes -CH3.

JlS m/es 924 (M+, 100%), 906, 893, 865, 822, 810, 765,

751, 737, 651, 650, 649, 469, 455, 355, 282, 154, 135, 122.

Exemple 4

N-Desméthyl-4-(benzyloxyméthyl)-vinblastine On opère comme dans l'exemple 2, mais on remplace 3,7 ml d'isobutanol par 4,3 ml d'alcool benzylique. Après 45 minutes, on obtient 4 ml d'un produit huileux que l'on sépare à l'aide d'une préparation chromatographique en couche mince

(gel de silice PF254+366; mélange contenant 100 ml de dichloro-

méthane et 8 ml de méthanol).

Rendement: 75 mg (15%) du composé devant être préparé.

Point de fusion: 215 à 218 C (chlorure de méthylène/ éther). Spectre IR (KBr) 3400 /OH, Mi/, 1740 /0020CH3/, 1610, 1230/cm /OAc/. 1H-IiR /CDC13, 100 LIz/2 >8,07/, eH, NaH/, 7.52/m, 1H, C12,-HI/, 722-7,08/m, 3H, 09,-0l1, -H, 3H, aromatic/, 6,75/s, IH, C9-H/, 6e20/s, 1H, 012-H/, , 85/dda, 1H, C14-H/, 5 41/s, 1H, C17-H1/, 5,30/d, 1H, -I'H/, 4)80, 4.20/2H,' JAB 1OHz,, >Na-CH2-0-/, 4 40/s, 2H, benzyl-CH2/, 4,00/s, 1H, C2-H/, 3;70, 3768/2s, 6H, C02CH3/, 3363/s, 311, 011-OCH3/, 2/75/s, 1H, a21-H/,

-0e70/2t, 6H, groupes -CH3.

MS m/et 916 (M+, 100%), 885, 857, 822, 810, 796, 779, 757,

751, 737, 651, 650, 649, 514, 355, 346, 329, 282, 154, 135.

Exemple 5

N-Dexméthyl-N-(méthoxyméthyl)-vinblastine On dissout 5 g (5,5 mmoles) de sulfate de vinblastine dans 150 ml d'eau. On libère la vinblastine base en ajoutant une solution aqueuse concentrée d'hydroxyde d'ammonium (pH = 8)

et on la traite avec quatre fractions de 50 ml de dichloro-

méthane. La solution de dichlorométhane est séchée sur fultate de sodium, filtrée, et l'on évapore ensuite le filtrat jusqu'à siccité sous vide. On obtient 4 g de vinblastine base, que l'on

dissout ensuite dans un mélange contenant 1000 ml de dichloro-

méthane exempt d'alcool, 120 ml d'acide acétique et 6 ml de méthanol. On refroidit la solution jusqu'à -55 C. On ajoute ensuite à la solution obtenue une solution contenant 2,5 g (25 mmoles) de trioxyde de chrome dans 470 ml d'anhydride

acétique refroidi jusqu'à -55 C, en un laps de temps de 5 minutes.

On agite le mélange réactionnel à la température de -55 C pendant 45 minutes, et l'on ajoute ensuite un mélange contenant 940 ml d'une solution aqueuse concentrée d'hydroxyde d'ammonium et 940 ml d'eau à 0 C. La température ne doit pas dépasser C. On sépare les phases formées et l'on ajoute à la phase contenant le dichlorométhane une quantité de 100 ml d'une solution aqueuse contenant 1% d'hydroxyde d'ammonium. On

2492385 '

sépare la phase organique, on la sèche sur du sulfate de sodium anhydre, on la filtre et l'on évapore le filtrat

jusqu'à siccité sous vide pour obtenir 3,8 g de produit brut.

On effectue la purification sur une colonne chromatographique préparée à partir de 230 g d'alumine ayant un degré d'activité de II-III (Brockmann), et de benzène. On dissout le produit brut obtenu dans 20 ml d'un mélange 8:2 de benzène et de chloroforme que l'on fait passer sur la colonne. L'élution est effectuée avec environ 8 litres d'un mélange contenant du

benzène et du chloroforme dans la proportion indiquée ci-

dessus. On recueille des fractions de 100 ml que l'on analyse par chromatographie sur couche mince (gel de silice; mélange

de benzène, éthanol, diéthylamine et diéthyléther 5:5:5:100).

Les fractions contenant la même substance sont réunies et évaporées pour obtenir 2,1 g du composé devant être préparé

dans cet exemple.

Rendement (après recristallisation à partir de 6 ml

d'éthanol): 1,5 g.

Les caractéristiques physiques du produit obtenu sont

les mêmes que celles indiquées dans l'exemple 1.

Exemple 6

N-Desméthyl-N-(propoxyméthyl)-vinblastine On opère comme dans l'exemple 5 mais en utilisant comme réactif 4,5 ml de propanol au lieu de méthanol, pour

obtenir 0,6 g du composé à préparer.

Point de fusion: 200 à 210 C (éthanol).

[i20 = +31.2 (c = 1, chloroforme) 1H-NNR /CDC13, 100 MHz/: 9.05/s, 1H, C16-OH/, 8,06/s, 1H, NaH/, 7.34/m, 'H, 012,-H/, 7,34-7,12/m, 3H, Cg9,-Cll, -H/, 6y68/s, 1H, C9-H/, 6,35/s, 1H, C12-H/, 84/dd, 1 C14-H/, 5 36/s, iH, Ci -H/, 5 28/ad, 1H, 0C15-H/, 475, 4;15/2H, JAB 10 Hz, >Na-CH2-0-/, 418/s, 1H, C2-H/, 3178/B, 3H, CO2CH3/, 3>75/s, 3H, Cll-OCH3/, 3,62/s, 3H, C02CH3/, 2;73/9, 1H, 021-H/, 2,09/s, 3H,

OCOCH3/, 0O65-0.94/m, 911, gtoupes-CH3/.

Exemple 7

* N-Desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-vinblastine On opère comme dans- l'exemple 1 mais en utilisant comme produit de départ le dihydrochlorure de vinblastine au lieu du sulfate de vinblastine, pour obtenir le produit

à préparer selon cet exemple.

Rendement: 28%.

Les caractéristiques physiques du produit obtenu sont

les mêmes que celles indiquées dans l'exemple 1.

Exemple 8 N-Desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-vinblastine On opère comme dans l'exemple 1, mais en utilisant comme solvant du chloroforme exempt d'alcool, du dichloroéthane ou de l'acétone au lieu de dichlorométhane, pour obtenir le

composé selon cet exemple.

Rendement: 40 à 50% selon le solvant utilisé.

Les caractéristiques physiques sont les mêmes que

celles indiquées dans l'exemple 1.

Exemple 9

N-Desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-20'-désoxyleurosidine

On prépare 60 mg (0,067 mmole) de sulfate de 20'-

désoxyleurosidine par hydrogénation catalytique (Pd/C, méthanol) de 3', 4'-anhydrovinblastine suivi de la transformation en

sulfate correspondant, que l'on dissout dans un mélange con-

tenant 20 ml de dichlorométhane absolu, 1,5 ml d'acide acétique glacial et 0,5 ml de méthanol. On refroidit la solution jusqu'à -55 C et on lui ajoute une solution contenant 30 mg (0,3 mmole) de trioxyde de chrome dans 3,5 ml d'anhydride acétique refrodi à -55 C. La réaction est terminée en un laps de temps de 60 minutes. On ajoute au mélange réactionnel un mélange contenant 12 ml d'une solution aqueuse concentrée d'hydroxyde d'ammonium et 12 g de glace, et l'on abandonne le tout jusqu'à ce que les phases se séparent. On soumet la phase

aqueuse à une agitation en trois fois avec 10 ml de dichloro-

méthane. On rassemble la phase organique et on la lave deux fois avec 10 ml d'un mélange 1:1 d'hydroxyde d'ammonium et d'eau, et ensuite deux fois avec 5 ml d'eau. Apres séchage et évaporation de la phase organique, on obtient 48 mg de produit brut. On effectue la purification sur une colonne chromatographique (gel de silice 0,040 à 0,063 mm. Merck, Art. 9385; solvant: CH2Cl2 et ensuite avec un mélange contenant 3 % de méthanol dans CH2C12). On obtient 18 mg. (32%) du composé préparé selon

cet exemple.

Point de fusion: 185 à 190 C (avec décomp.) [(]oD = +50 o (c = 1, chloroforme) Spectre IR (KBr), 3400 /NHI/, 1720/00C20H3/, 1610, 1230/cm /OAc/. 1H-NUR/CD013/, -7,95/s, 1H, Na,-H/, 7)54/m, 1HI, 012,-H/, 7>2-7, 1/m, 3H, g09,-C011,-H/, 656/s, 1H, C9-H/, 6)11/s, 1H, C12-H/, 5e87/dd, 1H, 014-H/, 5;46/s, 1H, 017- H/ %37/d, MH Cs-H/, 4 72, 9015/2H, 3N 3800, 375 3,61 /9H, C020H3/, 2 11/e, 1H, OCOCH3/, 1,0-0.6/6H, gtroupeç -CH3 2O Dans le stade de purification chromatographique indiqué ci-dessus, on sépare comme produit secondaire 46 mg

(22%) de N-desméthyl-N-formyl-20'-désoxyleurosidine.

Point de fusion: 205 à 210 C (avec décomp.)

>:D =+54 O (c = 1, chloroforme).

Exemple 10

N-Desméthyl-N-(isobutoxyméthyl)-vinblastine

On dissout 0,80 g de produit brut préparé selon l'exem-

ple 1, contenant 65% de N-desméthyl-N-(méthoxyméthyl)-vinblas-

tine, dans un mélange contenant 50 ml de dichlorométhane sec et 2,4 ml (25 moles) d'isobutanol. On refroidit la solution jusqu'à 0 C et on ajoute de l'acide chlorhydrique dans l'éther

absolu sous courant d'azote, tout en agitant, jusqu'à pH 3.

On contrôle la progression de la réaction par chromatographie en couche mince (feuille d'aluminium-DC avec gel de silice F254, Art. 5554; solvant: mélange d'éther, éthanol, benzène et diéthylamine 10:0,5:0,5:0,S) . On ajoute le mélange réactionnel dans 2 ml d'une solution aqueuse concentrée d'hydroxyde d'ammonium, on sépare les phases et l'on extrait

la phase aqueuse en trois fois avec 5 ml de dichlorométhane.

On lave les extraits réunis en trois fois avec 3 ml d'eau, on sèche ensuite la phase organique avec du sulfate de magnésium, on la filtre et l'on évapore le filtrat pour obtenir 1,7 g

de produit brut. On dissout ce produit dans 25 ml de dichloro-

méthane et on le soumet à une chromatographie sur colonne avec une colonne contenant du gel de silice 60 (Art. 9385). On commence l'élution avec 120 ml de dichlorométhane et on la

continue avec des solutions de dichlorométhane contenant res-

pectivement 1%, 2% et 4% de méthanol. La première fraction de 290 ml ne contient aucun alealoide. La fraction suivante de

300 ml contient le composé préparé dans cet exemple.

Rendement: 416 mg du produit précité, qui a les mêmes

caractéristiques et physiques que le produit de l'exemple 2.

Exemple 11

N-Desméthyl-N-(heptoxyméthyl)-vinblastine On opère comme dans l'exemple 10, mais en utilisant 2,5 ml (17 mmoles) de 1-heptanol au lieu d'isobutanol, on

effectue les mesures de chromatographie en couche mince (DC-

feuille de plastique avec gel de silice 60 F254, Art. 5735),

pour obtenir le composé de cet exemple comme indiqué ci-dessus.

On purifie le produit brut par chromatographie sur colonne comme indiqué dans l'exemple 11. La première fraction de 310 ml ne contient aucun alcaloide. La fraction suivante de 200 ml contient le composé de cet exemple. Rendement: 350 mg. Les caractéristiques physiques du produit sont identiques à celles

du produit de l'exemple 3.

Exemple 12

N-Desméthyl-N-(benzyloxyméthyl)-vinblastine On opère comme indiqué dans l'exemple 10, sauf qu'on utilise 3,0 ml (27 mmoles) d'alcool benzylique comme réactant au lieu du 1-heptanol. On purifie le produit brut obtenu comme indiqué dans l'exemple 10. La première fraction de 350 ml ne contient aucun alcaloïde, la fraction suivante de 300 ml

d'éluat contenant le composé de cet exemple comme indiqué ci-

dessus. Rendement: 320 mg. Les caractéristiques physiques du composé obtenu sont identiques à celles mentionnées dans

l'exemple 4.

Exemple 13

N-Desméthyl-N-(isobutoxyméthyl)-vinblastine On dissout 0,1 g du produit brut préparé comme indiqué

dans l'exemple 1 et qui contient 65% de N-desméthyl-N-(méthoxy-

méthyl)-vinblastine, dans un mélange contenant 15 ml de dichlorométhane et 30 à 50 équivalents molaires d'isobutanol, et l'on ajoute ensuite à la température de 0 C, tout en agitant, de l'acide chlorhydrique dans l'éther absolu jusqu'à l'obtention de pH 3. Lorsque la réaction est terminée, on ajoute du carbonate de potasse au mélange réactionnel jusqu'à ce que le pH soit ajusté à 7. On sépare par filtration le sel précipité et l'on purifie le filtrat par chromatographie sur colonne comme indiqué dans l'exemple 10, après l'avoir soumis à une

évaporation directe ou à une évaporation partielle sous vide.

Rendement: 53% du composé préparé dans cet exemple, comme indiqué cidessus, dont les caractéristiques physiques sont les

mêmes que celles du produit de l'exemple 2.

En partant des composés de départ appropriés, on peut préparer d'une façon analogue les composés suivants: N-Desméthyl-N-(isopropoxyméthyl)vinblastine

(rendement: 34 %).

Point de fusion: 178 à 182 C (décomp.) Spectre IR - (KBr): 3400 /OH, NH/, 1730 /C02CH3/, 1610,

1220/cm /OAc/.

H-IEMR /CDC13, 100 MHz/: (8,1/, 1H, Na,-H/, 7a51/m, 1H, C12,-H/, 772-7, 03/m, 3H, C9,-Cll,-H/, 6.70/s, 1H, C9-H/, 6J35/s, 1H, 012-H/, 5585/dd, 1H, C14-H/, 538/s, 1Ht C17-1/, 5t30/d, 1H, C15-H/,!4;759 4 15/2H, JABlOHz, > Na-CH2a-0-/ 4,0/s, 1H, C2-H/, 378, 3.75, 3765/9H, C02CH3, Cll-OCH3/, 2 75/s, 1H, C21-H/,

21l/s, 3H, OCOCH3/, 0,95-060/12H, groupes -CH3/.

N-Desméthyl-N-(allyloxyméthyl)-vinblastine

(rendement: 55 %).

Point de fusion: 205 à 210 C (avec décomp.) Spectre]1 (KBr): 3300 /OH, NlH/, 1730 /C02CH3/, 1610,

1220/cm /OAc/.

1H-NmIR /CDC13, 100 MHz/:. 1805/s, 1H, Na,-H/, 7>50/m, 1H, C12,-H/, 712-7) 08/m, 3H, C9,-Cll,-H/, 6373/s, 1H, C9-H/, 6,25/s, 1H, C12-H/, 6 1-5.85/m, 2H, C14H, CH2=CH-CH2-/, 5;40/s, 1H,. C17-H/, 5 25-5,10/m, 3H, C15-H,. CH2OH-CH2-/, 4 74, 4 15/2B, Na-CH2-O-/, 415/d, 2H, CH2=-C-CH2-/ 3370, 3568, 3363/9H, C02CH3, Cll-OCH3/, 3 73/s,'1H, C21-H/, 21/s, 3H, OCOCH3/,

1,0-O07/2t, 6H, g=apes /.

N-Desméthyl-N-(cyclohexaloxyméthyl)-vinblastine

(rendement: 36 %).

Point de fusion: 175-180 C (avec décomp.) Spectre IR (KBr): 3400 /OH, NH/, 1730 /C02CH3/, 1610,

1230/cm /OAc/.

1H-_NHR /CDC13, 100 MHz/:;8O05/s, 1H, NaH/ 7a5/m, 1H, C12,-H/, 772-770/m, 3H, C9,-Cll,-H/, 6,72/s, 1H, C9H/, 6732/s, H, C12-H/, 5;85/dd, 1H, C14-H/, 5;37/s, 1H, C17-H/, 5730/d, 1H, C15-H/, 4,72, 4Y15/2H, Na-CH2-O-/, 4105/si 1H, I-H/, 3 8, 3;75, 3;t68/9H, C02CH3, C1l-OCH3/, 221/s, 3H, OCOCH3/, O,95-O065/2t, grofupes -CH3/, Exemple 14 N-Desméthyl-N(méthoxyméthyl)-vinblastine

On dissout 0,15 g (0,17 mmole) de N-desméthyl-N-

(isobutoxymnéthyl)-vinblastine dans un mélange contenant 30 ml de dichlorométhane et 1,5 ml de méthanol. On refroidit la

Z492385

solution jusqu'à 0 C et l'on ajoute goutte à goutte une solu-

tion d'acide chlorhydrique dans l'éther absolu jusqu'à pH 3.

On suit la progression de la réaction par chromatographie en couche mince (gel de silice 60 F254, Art. 5735; solvant: mélange d'éther, éthanol, diéthylamine et benzène 20:1:1:1). Lorsque la réaction est terminée, on neutralise le mélange réactionnel avec du carbonate de potassium solide, on filtre la solution et l'on évapore sous vide le filtrat. Rendement:

1,14 g du composé préparé dans cet exemple comme indiqué ci-

dessus, et qui présente les mêmes caractéristiques physiques

que le produit de l'exemple 1.

Exemple 15

N-Desméthyl-N-(éthoxyméthyl)-vinblastine

On acidifie une solution contenant 50 mg de N-desméthyl-

N-(allyloxyméthyl)-vinblastine dans 10 ml de dichlorométhane absolu et 0, 3 ml d'éthanol, à la température de 0 C avec de l'acide chlorhydrique dans l'éther absolu jusqu'à pH 3. Après minutes, on neutralise la solution avec du carbonate de potassium solide, on sépare par filtration le sel formé. Par

évaporation du filtrat, on obtient 46 mg de N-desméthyl-N-

(éthoxyméthyl)-vinblastine.

Point de fusion: 235 à 238 C.

[ôL 25 = +30,5 (c = 1, chloroforme).

D

Exemple 16

N-Desméthyl-N-(propoxyméthyl)-vinblastine On ajoute 1 ml d'alcool npropylique a une solution

contenant 100 ma de N-desméthyl-N-(heptoxyméthyl)-

vinblastine dans 20 ml de benzene absolu et l'on ajuste ensuite le pH à 3 avec de '1 acide chlorhydrique dans de l'éther absolu. Après un laps de temps de 5 à 10 minutes,

on neutralise l'acide chlorhydrique avec du carbonate de potas-

sium solide. Apres filtration et évaporation du filtrat, on obtient 90 mg de N-Desméthyl-N-(propoxyméthyl)-vinblastine. Les caractéristiques physiques du produit obtenu sont identiques

à celles du produit de l'exemple 6.

La réaction s'effectue d'une façon entièrement analogue lorsqu'on utilise comme solvant le diéthyléther, le dioxane,

l'acétone ou l'acétate de diéthyle.

Exemple 17

N-Desméthyl-N-(allyloxyméthyl)-vinblastine On acidifie à la températurede 0 C une solution contenant 50 mg de N-desméthyl-N-(méthoxyméthyl)vinblastine dans 10 ml de dichlorométhane absolu et 0,5 ml d'alcool allylique, jusqu'à pH 3 avec une solution contenant 50% de borotrifluorure éthérate dans l'éther absolu.Après un laps de temps de 5 minutes, on neutralise la solution avec du carbonate

de potassium et l'on sépare par filtration le sel précipité.

Apres évaporation du filtrat, on obtient 40 mg de N-desméthyl-

N-(allyloxyméthyl)-vinblastine. Les caractéristiques physiques du composé précité sont

identiques à celles du produit de l'exemple 13.

Claims (9)

REVENDICATIONS

1. Procédé de préparation des composés de formule générale: (I) dans laquelle: R4 est M -hydroxyle et R3 est oL-éthyle; ou bien R4 est hydrogène et R3 est P-éthyle; R" est un radical alkyle à chaine droite ayant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical alkyle à chaine ramifiée ayant 3à 10 atomes de carbone, groupes dans lesquels l'atome de carbone rattaché au groupement..Na-CH20- est un atome de carbone -t'a 2 primaire ou secondaire, ou bien un radical aleényle ayant 3 à 6 atomes de carbone, un radical alcinyle ayant 3 à 6 atomes de carbone, un radical cycloalkyle ayant 5 à 7 atomes de carbone ou un radical arylalkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone dans sa partie alkyle, ainsi qu'éventuellement ses épimères, le procédé précité comprenant la réaction d'un composé de formule générale: R4 3O R ITS (iI)

CH3O I O COR

R

1 2 3 4

dans laquelle R, R, R et R ont la définition précitée, R' est un radical alkyle à chalne droite ayant 1 à 10 atomes de carbone ou un radical alkyle à chaîne ramifiée ayant 3 à 10 atomes de carbone radicaux dans lesquels l'atcme de carbone rattaché au groupement ' Na-CH2-0 est un atome de carbone #a 2 primaire ou secondaire, ou un radical alcényle ayant 3 à 6 atomes de carbone, un radical alcinyle ayant 3 à 6 atomes de carbone, un radical cycloalkyle ayant 5 à 7 atomes de carbone ou un radical arylalkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone dans sa partie alkyle, sous réserve que pour un composé de départ déterminé ayant la formule générale (II),R' est différent de R" dans un composé de formule générale (I), préparé à partir du composé précité, avec un large excès d'un alcool de formule générale:

R" - OH (III)

dans laquelle R" a la signification mentionnée ci-dessus, a

un pH compris entre 3 et 5, on ajuste le pH du milieu réaction-

nel de 7 à 8, on isole le composé obtenu de formule générale (I) ainsi qu'éventuellement ses épimères, et si on le souhaite,

on purifie le produit obtenu.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'on utilise 30 à 50 équivalents molaires d'un alcool ayant la formule générale (III) utilisé comme réactif avec le

composé de formule générale (II).

3. Procédé selon la revendication 1 pour la prépa-

ration de la N-desméthyl-N-(éthoxymnéthyl)-vinblastine, carac-

térisé par le fait au'on fait réagir un composé de formule générale (II) dans laquelle R' a la définition indiquée dans la revendication 1 à l'exception de la valeur éthyle, R est

méthoxy, R2 est acétyle, R3 est - -éthyle et R4 est k-hydro-

xyle, avec l'éthanol à pH 3 à 5.

4. Procédé selon la revendication 1 pour la prépa-

ration de la N-desméthyl-N-(benzyloxyméthyl)-vinblastine, caractérisé par le fait qu'on fait réagir un composé de formule générale (II) dans laquelle R' a la valeur indiquée dans la revendication 1 sauf la valeur benzyle, R1 est méthoxy, R2 est acétyle, R3 est C-éthyle, et R4 est k hydroxyle, avec

l'alcool benzylique à un pH de 3 à 5.

5. Procédé selon la revendication 1 pour la prépa-

ration de la N-desméthyl-N-(allyloxyméthyl)-vinblastine, carac-

térisé par le fait qu'on fait réagir un composé de formule générale (II) dans laquelle R' a la même valeur que celle indiquée dans la revendication 1, sauf la valeur allyle, R1

est méthoxy, R2 est acétyle, R3 est C-éthyle, R est i-hydroxy-

le, avec l'alcool allylique à un pH de 3 à 5.

6. Procédé selon la revendication 1 pour la prépa-

ration de la N-desméthyl-N-(cyclohexyloxyméthyl)-vinblastine, caractérisé par le fait qu'on fait réagir un composé de formule générale (II) dans laquelle R' a la même valeur que celle indiquée dans la revendication 1, sauf la valeur

1 2 3

cyclohexyle, R est méthoxy, R est acétyle, R est C-éthyle,

R4 est -hydroxyle, a un pH de 3 à 5.

7. Composés de formule générale: R4 i dans laquelle: R4 est t -hydroxyle et R est C,-éthyle; ou bien R4 est hydrogène et R est P -éthyle, R" est un radical alkyle à chaîne droite ayant 1 àlO atomes de carbone ou un radical alkvle à chaîne ramifiée ayant 3 à 10 atomes de carbone,groupes dans lesquels l'atome de carbone rattaché au groupement /Na-CH2-0- est un atome de carbone primaire ou secondaire, ou un radical alc.ênyle ou alcinyle ayant 3 à 6 atomes de carbone, un radical

cyclo-alkyle ayant 5 à 7 atomes de carbone ou un radicalaryl-

alkyle, alkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone dans sa partie alkyle; R est méthoxy et R230 est acétyle, sous la réserve que si R3 estOC-éthyle et R est "-hydroxyle,

R" n'a pas la valeur éthyle.

8. Les composés choisis parmi les suivants: N-desmdthyl-N-(methoxyme'thy1) -vinblastine, N-demethyl-N-( propoxymiethyl)-vinblastine, N-desmethyl-N(isopropoxymethyl)-vinblastine, f f N-desmethyl-N-(isobutoxymethyl)vinblastine, N-desmethyl-N-(heptoxymethyl)-vinblastine, I N-desmethyl-N(allyloxymethyl)-vinblastine, J N-desmithyl-N- (benz7lox7methyl7)vinblastine, N-desmethyl-N-(cyclohexyloxymethyl)-vinblastine, N-desmethylN-(methoxymethyl)20'-déeoxy-leurosodlne.

9. Composition pharmaceutique contenant un composé de formule générale (I) dans un véhicule et/ou des additifs

pharmaceutiquement acceptables.